JP7358701B2 - アレルギー性疾患の検出方法 - Google Patents
アレルギー性疾患の検出方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7358701B2 JP7358701B2 JP2020504077A JP2020504077A JP7358701B2 JP 7358701 B2 JP7358701 B2 JP 7358701B2 JP 2020504077 A JP2020504077 A JP 2020504077A JP 2020504077 A JP2020504077 A JP 2020504077A JP 7358701 B2 JP7358701 B2 JP 7358701B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lipid
- subject
- concentration
- allergic
- biological sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 title claims description 61
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 279
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims description 217
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 144
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 138
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 136
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims description 127
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 claims description 78
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 claims description 72
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 claims description 58
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 56
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 54
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 46
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 44
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 34
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 31
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 29
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 22
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 17
- ZNHVWPKMFKADKW-UHFFFAOYSA-N 12-HETE Chemical compound CCCCCC=CCC(O)C=CC=CCC=CCCCC(O)=O ZNHVWPKMFKADKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- ZNHVWPKMFKADKW-ZYBDYUKJSA-N 12-HETE Natural products CCCCC\C=C/C[C@@H](O)\C=C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O ZNHVWPKMFKADKW-ZYBDYUKJSA-N 0.000 claims description 16
- MCRJLMXYVFDXLS-QGQBRVLBSA-N 12-HEPE Chemical compound CC\C=C/C\C=C/CC(O)\C=C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O MCRJLMXYVFDXLS-QGQBRVLBSA-N 0.000 claims description 15
- NNDIXBJHNLFJJP-UHFFFAOYSA-N 20-Hydroxyeicosatetraenoic acid Chemical compound OCCCCCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O NNDIXBJHNLFJJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- ZHBVYDMSPDDAKE-VTIZNUJUSA-N 8-HDoHE Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CC(O)\C=C\C=C/CCC(O)=O ZHBVYDMSPDDAKE-VTIZNUJUSA-N 0.000 claims description 14
- JSFATNQSLKRBCI-VAEKSGALSA-N 15-HETE Natural products CCCCC[C@H](O)\C=C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JSFATNQSLKRBCI-VAEKSGALSA-N 0.000 claims description 13
- JSFATNQSLKRBCI-UHFFFAOYSA-N 15-Hydroxyeicosatetraenoic acid Chemical compound CCCCCC(O)C=CC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JSFATNQSLKRBCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- CSXQXWHAGLIFIH-VUARBJEWSA-N 16-HDoHE Chemical compound CC\C=C/C=C/C(O)C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O CSXQXWHAGLIFIH-VUARBJEWSA-N 0.000 claims description 13
- -1 8-isoPGE2 Chemical compound 0.000 claims description 13
- ZTRWPEHMGCHTIT-QWAPPMFBSA-N 15-HEDE Chemical compound CCCCCC(O)\C=C\C=C/CCCCCCCCCC(O)=O ZTRWPEHMGCHTIT-QWAPPMFBSA-N 0.000 claims description 11
- HNICUWMFWZBIFP-BSZOFBHHSA-N 13-HODE Chemical compound CCCCCC(O)\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O HNICUWMFWZBIFP-BSZOFBHHSA-N 0.000 claims description 10
- JBSCUHKPLGKXKH-ILYOTBPNSA-N 14,15-EET Chemical compound CCCCCC1OC1C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JBSCUHKPLGKXKH-ILYOTBPNSA-N 0.000 claims description 10
- ZNEBXONKCYFJAF-BGKMTWLOSA-N 14-HDoHE Chemical compound CC\C=C/C\C=C/CC(O)\C=C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O ZNEBXONKCYFJAF-BGKMTWLOSA-N 0.000 claims description 10
- WLKCSMCLEKGITB-XWJJKCKWSA-N 15-HEPE Chemical compound CC\C=C/CC(O)\C=C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O WLKCSMCLEKGITB-XWJJKCKWSA-N 0.000 claims description 10
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 claims description 10
- 208000036284 Rhinitis seasonal Diseases 0.000 claims description 9
- 208000017022 seasonal allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 9
- DDCYKEYDTGCKAS-SKSHMZPZSA-N 10-HDoHE Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C=C/C(O)C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O DDCYKEYDTGCKAS-SKSHMZPZSA-N 0.000 claims description 8
- CQSLTKIXAJTQGA-FLIBITNWSA-N 12,13-DiHOME Chemical compound CCCCCC(O)C(O)C\C=C/CCCCCCCC(O)=O CQSLTKIXAJTQGA-FLIBITNWSA-N 0.000 claims description 8
- JDSRHVWSAMTSSN-IRQZEAMPSA-N 13(S)-HPODE Chemical compound CCCCC[C@H](OO)\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O JDSRHVWSAMTSSN-IRQZEAMPSA-N 0.000 claims description 8
- VSRXYLYXIXYEST-KZTWKYQFSA-N 13,14-dihydro-15-ketoprostaglandin D2 Chemical compound CCCCCC(=O)CC[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)[C@@H](O)CC1=O VSRXYLYXIXYEST-KZTWKYQFSA-N 0.000 claims description 8
- KLLGGGQNRTVBSU-JDTPQGGVSA-N 13-HOTrE Chemical compound CC\C=C/CC(O)\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O KLLGGGQNRTVBSU-JDTPQGGVSA-N 0.000 claims description 8
- LRWYBGFSVUBWMO-UAAZXLHOSA-N 18(R)-HEPE Chemical compound CC[C@@H](O)\C=C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O LRWYBGFSVUBWMO-UAAZXLHOSA-N 0.000 claims description 8
- YUZXOJOCNGKDNI-LFVREGEGSA-N 20-HDoHE Chemical compound CCC(O)\C=C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O YUZXOJOCNGKDNI-LFVREGEGSA-N 0.000 claims description 8
- RIGGEAZDTKMXSI-CUHSZNQNSA-N 9-HOTrE Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C=C/C(O)CCCCCCCC(O)=O RIGGEAZDTKMXSI-CUHSZNQNSA-N 0.000 claims description 8
- 206010039094 Rhinitis perennial Diseases 0.000 claims description 8
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 8
- 208000022719 perennial allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 8
- XEBKSQSGNGRGDW-CJWPDFJNSA-N (z,9s,10s)-9,10-dihydroxyoctadec-12-enoic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C[C@H](O)[C@@H](O)CCCCCCCC(O)=O XEBKSQSGNGRGDW-CJWPDFJNSA-N 0.000 claims description 7
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 claims description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 7
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 claims description 5
- ZSOXFJURLPCSOO-UHFFFAOYSA-N 2-(ethoxymethyl)-4-(4-fluorophenyl)-3-[2-(2-hydroxyphenoxy)pyrimidin-4-yl]isoxazol-5(2h)-one Chemical compound CCOCN1OC(=O)C(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1C(N=1)=CC=NC=1OC1=CC=CC=C1O ZSOXFJURLPCSOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 208000015891 sexual disease Diseases 0.000 claims 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 claims 1
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 93
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 93
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 93
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 43
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 28
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 26
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 26
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 24
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 24
- 101710164073 Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX15 Proteins 0.000 description 23
- 102100031950 Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX15 Human genes 0.000 description 23
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 23
- 206010049590 Upper respiratory tract inflammation Diseases 0.000 description 19
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical class CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 18
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 18
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical class CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 15
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 13
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 13
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- 210000001944 turbinate Anatomy 0.000 description 12
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 11
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 11
- 102000002004 Cytochrome P-450 Enzyme System Human genes 0.000 description 10
- 108010015742 Cytochrome P-450 Enzyme System Proteins 0.000 description 10
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical class CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 10
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 10
- 210000000350 mc(t) Anatomy 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 10
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010004215 chloroacetate esterase Proteins 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QZCMHXPXGACWLJ-QWAPPMFBSA-N 15-oxoEDE Chemical compound CCCCCC(=O)\C=C\C=C/CCCCCCCCCC(O)=O QZCMHXPXGACWLJ-QWAPPMFBSA-N 0.000 description 8
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 description 8
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical class CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 8
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 8
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- XSXIVVZCUAHUJO-AVQMFFATSA-N (11e,14e)-icosa-11,14-dienoic acid Chemical class CCCCC\C=C\C\C=C\CCCCCCCCCC(O)=O XSXIVVZCUAHUJO-AVQMFFATSA-N 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 7
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 7
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 7
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 7
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 6
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 6
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 6
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 6
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 6
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 6
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 6
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 102100022364 Polyunsaturated fatty acid 5-lipoxygenase Human genes 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 5
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 5
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 4
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 241000218691 Cupressaceae Species 0.000 description 4
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000620009 Homo sapiens Polyunsaturated fatty acid 5-lipoxygenase Proteins 0.000 description 4
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 4
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 4
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 4
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 4
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- GURBRQGDZZKITB-VXBMJZGYSA-N 12-oxo-ETE Chemical compound CCCCC\C=C/CC(=O)\C=C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O GURBRQGDZZKITB-VXBMJZGYSA-N 0.000 description 3
- 238000002738 Giemsa staining Methods 0.000 description 3
- 206010028735 Nasal congestion Diseases 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 3
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 3
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 2
- 235000003129 Ambrosia artemisiifolia var elatior Nutrition 0.000 description 2
- 240000006891 Artemisia vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000003261 Artemisia vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 235000018185 Betula X alpestris Nutrition 0.000 description 2
- 235000018212 Betula X uliginosa Nutrition 0.000 description 2
- 244000281762 Chenopodium ambrosioides Species 0.000 description 2
- 206010010726 Conjunctival oedema Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 235000021297 Eicosadienoic acid Nutrition 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710159002 L-lactate oxidase Proteins 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 102100026858 Protein-lysine 6-oxidase Human genes 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 2
- 235000003484 annual ragweed Nutrition 0.000 description 2
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 235000006263 bur ragweed Nutrition 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 235000003488 common ragweed Nutrition 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 2
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 2
- HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N formic acid;hydrate Chemical compound O.OC=O HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 2
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940065725 leukotriene receptor antagonists for obstructive airway diseases Drugs 0.000 description 2
- 239000003199 leukotriene receptor blocking agent Substances 0.000 description 2
- 210000004742 mc(tc) Anatomy 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 235000009736 ragweed Nutrition 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N thromboxane A2 Chemical compound OC(=O)CCC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)O[C@@H]2O[C@H]1C2 DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N 0.000 description 2
- KJCVRFUGPWSIIH-UHFFFAOYSA-N 1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=CC2=C1 KJCVRFUGPWSIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLLGGGQNRTVBSU-FQSPHKRJSA-N 13(S)-HOTrE Chemical group CC\C=C/C[C@H](O)\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O KLLGGGQNRTVBSU-FQSPHKRJSA-N 0.000 description 1
- JDSRHVWSAMTSSN-BSZOFBHHSA-N 13-HPODE Chemical compound CCCCCC(OO)\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O JDSRHVWSAMTSSN-BSZOFBHHSA-N 0.000 description 1
- LTVWWDHMALLZQR-UHFFFAOYSA-N 15-hydroxyicosa-2,4-dienoic acid Chemical compound CCCCCC(O)CCCCCCCCCC=CC=CC(O)=O LTVWWDHMALLZQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCGDSJOSXSPWMF-UHFFFAOYSA-N 15-oxoicosa-2,4-dienoic acid Chemical compound O=C(CCCCCCCCCC=CC=CC(=O)O)CCCCC RCGDSJOSXSPWMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XTNOEYFQXCQKLC-UHFFFAOYSA-N 18-(oxiren-2-yl)octadeca-15,17-dienoic acid Chemical compound C1=C(C=CC=CCCCCCCCCCCCCCC(=O)O)O1 XTNOEYFQXCQKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBYNJKLOYWCXEP-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(dimethylamino)-6-dimethylazaniumylidenexanthen-9-yl]-4-isothiocyanatobenzoate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](C)C)C=C2OC2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC(N=C=S)=CC=C1C([O-])=O OBYNJKLOYWCXEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMKIIOSMODSXGM-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxydocosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=CC=C(O)C(O)=O LMKIIOSMODSXGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGDOCGARYFJEEV-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyicosa-2,4,6,8,10-pentaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=C(O)C(O)=O WGDOCGARYFJEEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNXRUKXKHUVNJC-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyicosa-2,4-dienoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC=CC=C(O)C(O)=O XNXRUKXKHUVNJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RIGGEAZDTKMXSI-MEBVTJQTSA-N 9(S)-HOTrE Chemical group CC\C=C/C\C=C/C=C/[C@@H](O)CCCCCCCC(O)=O RIGGEAZDTKMXSI-MEBVTJQTSA-N 0.000 description 1
- XEBKSQSGNGRGDW-YFHOEESVSA-N 9,10-DiHOME Chemical compound CCCCC\C=C/CC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O XEBKSQSGNGRGDW-YFHOEESVSA-N 0.000 description 1
- 108010000239 Aequorin Proteins 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N Dansyl Chloride Chemical compound C1=CC=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1S(Cl)(=O)=O XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001064855 Mus musculus Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX15 Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 101710156627 Polyunsaturated fatty acid 5-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- FMVKYSCWHDVMGO-UHFFFAOYSA-N [3-[(2-methylphenyl)carbamoyl]naphthalen-2-yl] 2-chloroacetate Chemical compound CC1=CC=CC=C1NC(=O)C1=CC2=CC=CC=C2C=C1OC(=O)CCl FMVKYSCWHDVMGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;formic acid Chemical compound CC#N.OC=O XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L disodium;(4-nitrophenyl) phosphate;hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000002327 eosinophilic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002875 fluorescence polarization Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- VNYSSYRCGWBHLG-AMOLWHMGSA-N leukotriene B4 Chemical compound CCCCC\C=C/C[C@@H](O)\C=C\C=C\C=C/[C@@H](O)CCCC(O)=O VNYSSYRCGWBHLG-AMOLWHMGSA-N 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 210000004373 mandible Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- IPSIPYMEZZPCPY-UHFFFAOYSA-N new fuchsin Chemical compound [Cl-].C1=CC(=[NH2+])C(C)=CC1=C(C=1C=C(C)C(N)=CC=1)C1=CC=C(N)C(C)=C1 IPSIPYMEZZPCPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037916 non-allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- BHMBVRSPMRCCGG-OUTUXVNYSA-N prostaglandin D2 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)[C@@H](O)CC1=O BHMBVRSPMRCCGG-OUTUXVNYSA-N 0.000 description 1
- BHMBVRSPMRCCGG-UHFFFAOYSA-N prostaglandine D2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(CC=CCCCC(O)=O)C(O)CC1=O BHMBVRSPMRCCGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 1
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001044 reversed-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 208000019116 sleep disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022925 sleep disturbance Diseases 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
- G01N33/5038—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects involving detection of metabolites per se
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
- G01N33/5088—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of vertebrates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/24—Immunology or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Description
[1]対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程を含んでなる、アレルギー性疾患、または鼻腔もしくは目における肥満細胞および/または好酸球の活性化状態の検出方法。
[2]前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、健常な対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を上回る場合に、対象がアレルギー性疾患に罹患していること、あるいは対象の鼻腔または目において肥満細胞および/または好酸球が活性化していることが示される、上記[1]に記載の検出方法。
[3]対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程を含んでなる、アレルギー性疾患に対する治療効果の判定方法。
[4]前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、治療前の対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度またはアレルギー性疾患に罹った対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を下回る場合に、治療効果があることが示される、上記[3]に記載の判定方法。
[5]前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎またはアレルギー性結膜炎である、上記[1]または[2]に記載の検出方法または上記[3]または[4]に記載の判定方法。
[6]前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎であり、アレルギー性鼻炎に対する治療が、薬物療法、免疫療法または外科手術療法である、上記[3]~[5]のいずれかに記載の判定方法。
[7]前記アレルギー性鼻炎が、季節性アレルギー性鼻炎または通年性アレルギー性鼻炎である、上記[5]に記載の検出方法または上記[5]または[6]に記載の判定方法。
[8]前記生体試料が、前記対象から非侵襲的に採取された体液である、上記[1]、[2]、[5]または[7]に記載の検出方法または上記[3]~[7]のいずれかに記載の判定方法。
[9]前記脂質代謝物が、アラキドン酸代謝物、エイコサペンタエン酸代謝物、ドコサヘキサエン酸代謝物、リノレン酸代謝物およびエイコサジエン酸代謝物からなる群から選択される1種または2種以上である、上記[1]、[2]、[5]、[7]または[8]のいずれかに記載の検出方法または上記[3]~[8]のいずれかに記載の判定方法。
[10]前記脂質代謝物が、PGD2、PGE2、12-HETE、15-HETE、12-HEPE、15-HEPE、14-HDoHE、8-HDoHE、13-HODE、8-isoPGE2、16-HDoHE、15-HEDE、15-OxoEDE、20-HETE、14,15-EET、13,14-dihydro-15-keto-PGD2、PGJ2、LTB4、9-HOTrE、13-HOTrE、9,10-DiHOME、12,13-DiHOME、13-HpODE、18-HEPE、10-HDoHEおよび20-HDoHEからなる群から選択される1種または2種以上である、上記[1]、[2]、[5]および[7]~[9]のいずれかに記載の検出方法または上記[3]~[9]のいずれかに記載の判定方法。
[11]前記脂質代謝物の濃度を質量分析法により測定する、上記[1]、[2]、[5]および[7]~[10]のいずれかに記載の検出方法または上記[3]~[10]のいずれかに記載の判定方法。
[12]アレルギー性疾患マーカー、または鼻腔もしくは目における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーとしての脂質代謝物の使用。
[13]前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎またはアレルギー性結膜炎である、上記[12]に記載の使用。
[14]前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎であり、前記アレルギー性鼻炎が、季節性アレルギー性鼻炎または通年性アレルギー性鼻炎である、上記[12]または[13]に記載の使用。
[15]前記脂質代謝物が、アラキドン酸代謝物、エイコサペンタエン酸代謝物、ドコサヘキサエン酸代謝物、リノレン酸代謝物およびエイコサジエン酸代謝物からなる群から選択される1種または2種以上である、上記[12]~[14]のいずれかに記載の使用。
[16]前記脂質代謝物が、PGD2、PGE2、12-HETE、15-HETE、12-HEPE、15-HEPE、14-HDoHE、8-HDoHE、13-HODE、8-isoPGE2、16-HDoHE、15-HEDE、15-OxoEDE、20-HETE、14,15-EET、13,14-dihydro-15-keto-PGD2、PGJ2、LTB4、9-HOTrE、13-HOTrE、9,10-DiHOME、12,13-DiHOME、13-HpODE、18-HEPE、10-HDoHEおよび20-HDoHEからなる群から選択される1種または2種以上である、上記[12]~[15]のいずれかに記載の使用。
[17]アレルギー性疾患の治療薬の候補薬を対象に投与する工程と、前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程とを含んでなる、アレルギー性疾患の治療薬のスクリーニング方法。
[18]候補薬投与後の対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、候補薬投与前の対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度またはアレルギー性疾患に罹った対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を下回る場合に、前記治療薬に治療効果があることが示される、上記[17]に記載のスクリーニング方法。
[19]生体試料中の脂質代謝物においてアレルギー性疾患マーカー、または鼻腔もしくは目における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーを同定する方法であって、アレルギー性疾患に罹患した対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度と、健常な対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程と、前記の測定した2つの濃度を比較する工程を含む方法。
[20]アレルギー性疾患に罹患した対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、健常な対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を上回る場合に、当該脂質代謝物がアレルギー性疾患マーカー、または鼻腔もしくは目における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーであることが示される、上記[19]に記載の同定方法。
[21]前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎またはアレルギー性結膜炎である、上記[17]または[18]に記載のスクリーニング方法または上記[19]または[20]に記載のマーカーの同定方法。
[101]対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程を含んでなる、アレルギー性鼻炎、または鼻腔における肥満細胞および/または好酸球の活性化状態の検出方法。
[102]前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、健常な対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を上回る場合に、対象がアレルギー性鼻炎に罹患していること、あるいは対象の鼻腔において肥満細胞および/または好酸球が活性化していることが示される、上記[101]に記載の検出方法。
[103]対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程を含んでなる、アレルギー性鼻炎に対する治療効果の判定方法。
[104]前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、治療前の対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度またはアレルギー性鼻炎に罹った対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を下回る場合に、治療効果があることが示される、上記[103]に記載の判定方法。
[105]アレルギー性鼻炎に対する治療が、薬物療法、免疫療法または外科手術療法である、上記[103]または[104]に記載の判定方法。
[106]前記生体試料が、前記対象から非侵襲的に採取された体液である、上記[101]または[102]に記載の検出方法または上記[103]~[105]のいずれかに記載の判定方法。
[107]前記アレルギー性鼻炎が、季節性アレルギー性鼻炎または通年性アレルギー性鼻炎である、上記[101]、[102]および[106]のいずれかに記載の検出方法または上記[103]~[106]のいずれかに記載の判定方法。
[108]前記脂質代謝物が、アラキドン酸代謝物、エイコサペンタエン酸代謝物、ドコサヘキサエン酸代謝物、リノレン酸代謝物およびエイコサジエン酸代謝物からなる群から選択される1種または2種以上である、上記[101]、[102]、[106]および[107]のいずれかに記載の検出方法または上記[103]~[107]のいずれかに記載の判定方法。
[109]前記脂質代謝物が、PGD2、PGE2、12-HETE、15-HETE、12-HEPE、15-HEPE、14-HDoHE、8-HDoHE、13-HODE、8-isoPGE2、16-HDoHE、15-HEDE、15-OxoEDE、20-HETEおよび14,15-EETからなる群から選択される1種または2種以上である、上記[101]、[102]および[106]~[108]のいずれかに記載の検出方法または上記[103]~[108]のいずれかに記載の判定方法。
[110]前記脂質代謝物の濃度を質量分析法により測定する、上記[101]、[102]および[106]~[109]のいずれかに記載の検出方法または上記[103]~[109]のいずれかに記載の判定方法。
[111]アレルギー性鼻炎マーカー、または鼻腔における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーとしての脂質代謝物の使用。
[112]前記アレルギー性鼻炎が、季節性アレルギー性鼻炎または通年性アレルギー性鼻炎である、上記[111]に記載の使用。
[113]前記脂質代謝物が、アラキドン酸代謝物、エイコサペンタエン酸代謝物、ドコサヘキサエン酸代謝物、リノレン酸代謝物およびエイコサジエン酸代謝物からなる群から選択される1種または2種以上である、上記[111]または[112]に記載の使用。
[114]前記脂質代謝物が、PGD2、PGE2、12-HETE、15-HETE、12-HEPE、15-HEPE、14-HDoHE、8-HDoHE、13-HODE、8-isoPGE2、16-HDoHE、15-HEDE、15-OxoEDE、20-HETEおよび14,15-EETからなる群から選択される1種または2種以上である、上記[111]~[113]のいずれかに記載の使用。
[115]アレルギー性鼻炎の治療薬の候補薬を対象に投与する工程と、前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程とを含んでなる、アレルギー性鼻炎の治療薬のスクリーニング方法。
[116]候補薬投与後の対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、候補薬投与前の対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度またはアレルギー性鼻炎に罹った対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を下回る場合に、前記治療薬に治療効果があることが示される、上記[115]に記載のスクリーニング方法。
[117]生体試料中の脂質代謝物においてアレルギー性鼻炎マーカー、または鼻腔における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーを同定する方法であって、アレルギー性鼻炎に罹患した対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度と、健常な対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程と、前記の測定した2つの濃度を比較する工程を含む方法。
[118]アレルギー性鼻炎に罹患した対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、健常な対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を上回る場合に、当該脂質代謝物がアレルギー性鼻炎マーカー、または鼻腔における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーであることが示される、上記[117]に記載の同定方法。
(1)アレルギー性鼻炎モデルマウスの作製
BALB/C系統のマウス(雌、5週齢)23匹(日本クレア社、以下同様)に生理食塩水(大塚製薬社製)で溶解希釈したオボアルブミン(ovalbumin、Sigma社製、本明細書中「OVA」ということがある。)50μgおよび硫酸カリウムアルミニウム(Sigma-Aldrich社製)1mgを同時に腹腔内投与し、2週間後に再度、OVA50μgを腹腔内投与して感作を行った。2回目の感作から2週間後に、OVA(400μg/10μL)を1日に1回、5日間(計5回)または10日間(計10回)経鼻投与して刺激し、アレルギー性鼻炎(本明細書中「AR」ということがある。)モデルマウスを作製した。なお、OVAを5回投与した群を「OVA5回投与群」(11匹)とし、OVAを10回投与した群を「OVA10回投与群」(12匹)とした。
BALB/C系統のマウス(雌、5週齢)9匹にリポ多糖(Lipopolysaccharide、Sigma社製、本明細書中「LPS」ということがある。)(15μg/10μL)を1回、経鼻投与して、上気道炎モデルマウスを作製した。
対照群として、BALB/C系統のマウス(雌、5週齢)10匹に、上記(1)で用いた生理食塩水(10μL)を1日に1回、1日間(計1回)、5日間(計5回)または10日間(計10回)経鼻投与した(溶媒投与群)。なお、溶媒を1回投与した群を「溶媒1回投与群」とし、溶媒を5回投与した群を「溶媒5回投与群」とし、溶媒を10回投与した群を「溶媒10回投与群」とした。
(1)血清中の抗原特異的IgE量の測定
抗原の感作により、血清中の抗原特異的IgE値が上昇することが知られている。例1(1)で作製したアレルギー性鼻炎モデルマウスのオボアルブミンによる感作を確認するため、血清中のオボアルブミン特異的IgE量を測定した。具体的には、OVA感作マウス(OVA2回感作後、OVA刺激をしていない群)(5匹)および対照群として未感作のマウス(BALB/C系統のマウス(雌、5週齢)、5匹、本明細書中「未感作群」ということがある。)から眼窩採血により50μL採血した。採取した血液を常温で1時間放置した。次いで、9500rpm、4℃で10分間遠心し、血清と血餅を分離した。血清を回収した後、-80℃で保存した。IgE量の測定は、凍結保存した血清を25倍希釈し、次いで、Anti-Ovalbumin IgE(マウス)ELISA Kit(Cayman Chemical社製)を用いて、キット添付の説明書に従って実施した。
例1で作製したARモデルマウス(22匹)および溶媒投与群(10匹)は、1~10回の各回目のOVA投与または溶媒投与後1分から11分までの10分間のくしゃみ回数を計測した。例1で作製した上気道炎モデルマウス(9匹)および溶媒1回投与群(6匹)は、LPS投与後または溶媒投与後1時間おきに(10時間後まで)くしゃみ回数を計測した。
例1で作製したARモデルマウスの鼻腔体積は、OVA投与前(6匹)、OVA5回目投与から24時間後(6匹)、およびOVA10回目投与から24時間後(6匹)にコンピューター断層撮影法(Computed Tomography)により測定した。対照として、例1で作製した溶媒投与群の鼻腔体積は、溶媒投与前(6匹)、溶媒5回目投与から24時間後(6匹)、および溶媒10回目投与から24時間後(6匹)に上記と同様にして測定した。具体的には、麻酔したマウスを48mmΦ視野固定具に固定した後、micro CT(LCT-200、日立アロカメディカル社製)を用いて撮影した。撮影条件はピクセルサイズ:48μm、スライス厚・スライス間隔:96μm、スライス数:35枚、回転速度:標準、回転角度:360°、X管電圧:低、投影方向数:1592とした。撮影した画像から-900から-300HU(Housefield unit)のCT値を持つ領域を鼻腔と判断し、その体積を測定した。
例2~例5において、測定値は平均値±標準偏差で表した。また、有意差検定はone-way analysis of variance(ANOVA)を用いた後、Tukey’s testを行った。2要因の群間での有意差検定はtwo-way ANOVAを用いた後、Bonferroni post-testを行った。危険率(P)が5%未満の場合に有意差ありと判定した。
例1で作製したモデルマウスについて行った上記(1)~(3)の評価結果は図1~4に示される通りであった。
(1)手順
例1で作製したARモデルマウス(OVA5回投与群、OVA10回投与群)、上気道炎モデルマウス(LPS投与群)および対照群(溶媒1回投与群、溶媒5回投与群、溶媒10回投与群)(各群6匹)を用いて病理組織学的解析を行った。具体的には、マウスから上顎を切除し、即座に4%パラホルムアルデヒドに4℃で5日間浸漬した。次いで、EDTAに毎日浸漬して4℃で10日間脱灰処理を行った。次いで、眼窩を覆う骨を剃刀で切除し、脱水、透徹処理後、パラフィンに包埋し幅4μmの連続切片標本を作製した。ヘマトキシリン・エオジン染色(HE染色)、クロロアセテート・エステラーゼ染色(CAE染色)、トルイジンブルー染色(TB染色)またはメイグリュンワルド・ギムザ染色(MG染色)を常法に従って行い封入した。具体的な染色手順は、後記の通りである。染色した鼻腔組織を光学顕微鏡(ACT-10、ニコン社製)下で観察し、顕微鏡用デジタルカメラ(OPTIPHOT-2、ニコン社製)を用いて撮影した。鼻甲介(鼻炎が起こったときに炎症細胞が浸潤してくる、毛細血管が多く集まる部位)における免疫細胞(結合織型肥満細胞、粘膜型肥満細胞、好酸球、好中球)数を、1セクションあたり16~24個の無作為に選択された区画内(倍率×400)で計測した。
CAE染色は、ナフトールAS-Dクロロアセテートを基質にして肥満細胞特異的なエステラーゼを赤色に染める染色法である。上記(1)で作製した連続切片標本を脱パラフィン処理後、染色に用いた。4%の亜硝酸ナトリウム溶液とニューフクシン液を1:1で混合した後、この溶液とナフトール液を1:9の割合で混合した。この溶液とリン酸バッファー(0.2M NaH2PO4 0.2M Na2HPO4 pH7.6)を1:20の割合で混合し、切片を10分間浸漬した。切片を蒸留水で洗浄後、ヘマトキシリン溶液を用いて対比染色を行った。1mm2内の結合組織および粘膜組織に存在する全ての肥満細胞(結合織型肥満細胞および粘膜型肥満細胞)数を計測し、平均値および標準偏差を算出した。
TB染色は、酸性粘液多糖類を染色する。酸性粘液多糖類は、結合織型肥満細胞に存在し、粘膜型肥満細胞には存在しない。上記(1)で作製した連続切片標本を脱パラフィン処理後、0.05%トルイジンブルー溶液(pH4.1)に10分間浸漬した。次いで、90%アルコール溶液で脱色させた後、封入した。ここで、CAE染色は結合織型および粘膜型のいずれの肥満細胞も染色するが、TB染色は結合織型肥満細胞のみを染色する。CAE染色とTB染色をそれぞれ別の切片で行い、CAE染色陽性、かつ、TB染色陽性な細胞を結合織型肥満細胞と判断した。また、CAE染色陽性、かつ、TB染色陰性な細胞を粘膜型肥満細胞と判断し、1mm2内の結合組織および粘膜組織に存在する全ての結合織型肥満細胞数または粘膜型肥満細胞数を計測し、平均値および標準偏差を算出した。
メイグリュンワルド・ギムザ染色は、好酸球に特異的な好酸性顆粒を赤色に染色する。上記(1)で作製した連続切片標本を脱パラフィン処理後、メイグリュンワルド染色液に切片を6分間浸漬した。次いで、1/15M-リン酸緩衝液(×10)(0.2M NaH2PO4 0.2M Na2HPO4 pH6.4~6.8)で切片を洗浄後、ギムザ染色液と蒸留水を1:20の割合で混合した溶液に切片を3分間浸漬した。HE染色とMG染色をそれぞれ別の切片で行い、HE染色により分葉核が確認され、かつ、MG染色陽性な細胞を好酸球と判断した。また、HE染色により分葉核が確認され、かつ、MG染色陰性な細胞を好中球と判断し、1mm2内の結合組織および粘膜組織に存在する全ての好酸球数または好中球数を計測し、平均値および標準偏差を算出した。
例1で作製したモデルマウスについて行った上記(2)~(4)の病理組織学的評価の結果は図6~9に示される通りであった。
(1)脂質メディエーターの測定
ア 鼻腔洗浄液の調製
例1(1)で作製したアレルギー性鼻炎モデルマウス(OVA5回投与群:11匹、OVA10回投与群:12匹)、上気道炎モデルマウス(LPS投与群:9匹)および溶媒投与群(溶媒1回投与群、溶媒5回投与群、溶媒10回投与群、各群10匹)を用いて脂肪酸代謝酵素(COX、LOX、CYP)下流およびOX下の脂質メディエーター産生量を調べた。各群におけるOVA投与、LPS投与または溶媒投与から20分後にマウスを安楽死処置した。下顎を切除し、冷却した生理食塩水550μLを気管支から鼻先まで流し、採取し、-80℃で凍結することにより、鼻腔洗浄液を調製した。
上記アで調製した鼻腔洗浄液を1000rpm、4℃で10分間遠心分離した。上清400μLに0.05%ギ酸水50μL、表2に示す内部標準溶液50μLおよび蒸留水550μLを加え試料溶液を調製した。試料溶液を予めメタノールおよび蒸留水で平衡化した固相抽出カートリッジ(HLB 1cc Vac Cartridge、Oasis、Waters社製)に負荷した。カートリッジをMilliQ水1mL、ヘキサン1mLで洗浄した後、カートリッジに付着させた脂質をメタノール1mLで溶出した。次いで、溶出液を室温で4時間、減圧乾固してペレットにした後、80%メタノールに再溶解することによって脂質サンプル溶液を調製した。
上記イで調製したサンプル溶液を質量分析器で解析した。液体クロマトグラフィー質量分析に用いた条件は以下の通りである。
分析カラム:Phenomenex,KinetexC8(2.1mmI.D.×150mm、2.6μm、KINETEX社製)
移動相A:0.05%ギ酸
移動相B:0.05%ギ酸アセトニトリル
流速:0.4mL/分
注入量:5μL
カラム温度:45℃
グラジエントプログラム:表1に示される通りであった。
質量分析器:LCMS-8030(島津製作所社製)
測定プログラム;LC/MS/MSメソッドパッケージ 脂質メディエーターver.1
(島津製作所社製)
ネブライザーガス流量:3L/分
ドライイングガス流量:15L/分
DL温度:250℃
ヒートブロック温度:400℃
イオン化モード:ESI+/-
内部標準溶液:組成は表2に示される通りであった。
上記測定プログラムに従って、検出された脂質メディエーター(133種)を物性に基づいて13種類のグループに分割し、各グループに対して内部標準物質を設定した(表2参照)。LabSolutions(Version5.80、島津製作所社製)を用いて、各脂質メディエーターのクロマトグラムから算出したピーク面積値を、上記の対応する内部標準物質のピーク面積値で除することによって脂質抽出時に生じる定量誤差等を補正した。脂質メディエーターの濃度(図10~21の縦軸)は、脂質メディエーターのピーク面積値を内部標準物質のピーク面積値で除した値として示した。
下記に記載の通り、検出された脂質メディエーター(133種)のうち15種について、OVA投与群(すなわち、鼻腔において肥満細胞および好酸球が活性化されたARモデルマウス)での産生量が有意に高いこと、あるいは、高い傾向が観察された
図10に示される通り、OVA投与群の鼻腔洗浄液において、アラキドン酸(arachidonic acid、本明細書中「AA」ということがある。)由来、シクロオキシゲナーゼ(COX)下流の脂質メディエーターであるプロスタグランジンD2(prostaglandin D2、本明細書中「PGD2」ということがある。)およびプロスタグランジンE2(prostaglandin E2、本明細書中「PGE2」ということがある。)が検出された。PGD2の産生量は、OVA10回投与群では、溶媒10回投与群およびLPS投与群と比較して有意に高かった(図10A)。また、PGE2の産生量は、OVA10回投与群では、溶媒10回投与群、OVA5回投与群およびLPS投与群と比較して有意に高かった(図10B)。
図11に示される通り、OVA投与群の鼻腔洗浄液において、AA由来、12/15-リポキシゲナーゼ(LOX)下流の脂質メディエーターである12-ヒドロキシエイコサテトラエン酸(hydroxy eicosatetraenoic acid、本明細書中「HETE」ということがある。)および15-HETEが検出された。12-HETEの産生量は、OVA10回投与群では、溶媒10回投与群と比較して有意に高かった(図11A)。また、15-HETEの産生量は、OVA5回投与群およびOVA10回投与群では、それぞれ溶媒5回および10回投与群と比較して有意に高かった(図11B)。
図15に示される通り、OVA投与群の鼻腔洗浄液において、AA由来、酵素非依存的酸化(OX)下流の脂質メディエーターである8-イソプロスタグランジンE2(iso prostaglandin E2、本明細書中「isoPGE2」ということがある。)が検出された。8-isoPGE2の産生量は、OVA10回投与群では、溶媒10回投与群と比較して有意に高かった。
図18に示される通り、OVA投与群の鼻腔洗浄液において、AA由来、シトクロムp450(CYP)下流の脂質メディエーターである20-HETEおよび14,15-エポキシエイコサトリエン酸(epoxy eicosatrienoic acid、本明細書中「EET」ということがある。)が検出された。20-HETEの産生量は、OVA10回投与群では、溶媒10回投与群と比較して有意に高かった(図18A)。また、14,15-EETの産生量は、OVA10回投与群では、溶媒10回投与群と比較して有意に高かった(図18B)。
(1)脂質メディエーターの測定
ア 尿の調製
例1で作製したARモデルマウス(OVA5回投与群、OVA10回投与群)および対照群(溶媒5回投与群、溶媒10回投与群)(各群10匹)を用いて脂肪酸代謝酵素(COX、LOX、CYP)下流およびOX下の脂質メディエーター産生量を調べた。各群のマウスから尿を採取した。具体的には、OVA5回投与群および溶媒5回投与群の採尿は、OVAまたは溶媒の4回目投与の後に代謝ケージにマウスを入れ、投与5回目までの24時間の尿を採取した。また、OVA10回投与群および溶媒10回投与群の採尿は、OVAまたは溶媒の10回目投与の後に代謝ケージにマウスを入れ、24時間後までの尿を採取した。
上記アで調製した尿を1000rpm、4℃で10分間遠心分離した。上清100μLに0.05%ギ酸水10μL、内部標準溶液50μLおよび脱イオン水850μLを加え試料溶液を調製した以外は、例4(1)イの記載と同様にして、脂質サンプル溶液を調製した。
例4(1)ウの記載と同様にして、脂質濃度を測定した。
例4(2)の記載と同様にして、データ処理を実施した。
ア COX下流の脂質メディエーターの産生量
図19に示される通り、OVA投与群の尿において、AA由来、COX下流の脂質メディエーターであるPGD2が検出された。PGD2の産生量は、OVA5回投与群およびOVA10回投与群では、溶媒投与群と比較して高い傾向が認められた。
図20に示される通り、OVA投与群の尿において、AA由来、12/15-LOX下流の脂質メディエーターである12-HETEが検出された。12-HETEの産生量は、OVA5回投与群およびOVA10回投与群では、溶媒投与群と比較して高い傾向が認められた。
(1)アレルギー性結膜炎モデルモルモットの作製
Kwl:Hartley系統のモルモット(雄、7~11週齢)(3匹)に生理食塩水(大塚製薬社製)10μLで溶解希釈したオボアルブミン(ovalbumin、Sigma社製、本明細書中「OVA」ということがある。)100μgおよび硫酸カリウムアルミニウム(Sigma-Aldrich社製)1mgを同時に腹腔内投与し、2週間後に再度、生理食塩水10μLで溶解希釈したOVA100μgおよび硫酸カリウムアルミニウム1mgを腹腔内投与して感作を行った。2回目の感作から2週間後に、OVA(250μg/10μL)を1日おきに1回、11日間(計6回)点眼投与して刺激し、アレルギー性結膜炎モデルモルモットを作製した。
Kwl:Hartley系統のモルモット(雄、7~11週齢)3匹にリポ多糖(Lipopolysaccharide、Sigma社製、本明細書中「LPS」ということがある。)(5μg/5μL)を2回、結膜内投与して、感染性結膜炎モデルモルモットを作製した。以下、特に断りのない限り、LPS投与から12時間後に試験に用いた。
アレルギー性結膜炎の対照群として、Kwl:Hartley系統のモルモット(雄、7~11週齢)3匹に、上記(1)で用いた量と回数の生理食塩水(5μL)を点眼投与した(溶媒投与群1)。感染性結膜炎の対照群として、Kwl:Hartley系統のモルモット(雄、7~11週齢)3匹に、上記(2)で用いた量と回数の生理食塩水(5μL)を点眼投与した(溶媒投与群2)。
対照群として、Kwl:Hartley系統のモルモット(雄、7~11週齢)を用いた(未感作群)。
(1)結膜の腫れの観察
ア 方法
例6で作製したアレルギー性結膜炎モデルモルモット(OVA2回感作後、OVA刺激回数が1、2または3回の各モルモット)、感染性結膜炎モデルモルモットおよび未感作群の結膜の腫れを観察した。各アレルギー性結膜炎モデルは、最終のOVA刺激から30分後の結膜について、また、感染性結膜炎モデルモルモットは、LPS投与から10時間後の結膜について観察した。
結果は、図22に示される通りであった。アレルギー性結膜炎および感染性結膜炎の両モデルモルモットにおいて、未感作群と比較して、結膜の腫れが確認された。
ア 方法
例6で作製したアレルギー性結膜炎モデルモルモット(3匹)、感染性結膜炎モデルモルモット(3匹)および対照群として溶媒投与群1(3匹)および溶媒投与群2(3匹)の結膜の血管透過性、水分量および結膜の厚みを観察した。血管透過性は、エバンスブルー(Sigma社製)を用いてマイルズアッセイ法に従って測定した。水分量は、シルマル試験紙(あゆみ製薬社製)を用いて測定した。結膜の厚みは、ノギスを用いて測定した。
結果は、図23と図24に示される通りであった。アレルギー性結膜炎モデルでは、感染性結膜炎モデルまたは溶媒投与群1と比較して、水分量の増加および血管透過性の亢進が確認された。
ア 方法
例6で作製したアレルギー性結膜炎モデルモルモットおよび感染性結膜炎モデルモルモットの結膜における病理組織学的評価を行った。具体的には、例3に記載の方法を用いた。
結果は、図25に示される通りであった。アレルギー性結膜炎モデルおよび感染性結膜炎モデルの各病態に即した免疫細胞の浸潤が認められた。
(1)脂質メディエーターの測定
ア 涙および結膜嚢洗浄液の調製
例6で作製したアレルギー性結膜炎モデルモルモット(3匹)、感染性結膜炎モデルモルモット(3匹)および未感作群(3匹)の結膜を用いて脂肪酸代謝酵素(COX、5-LO、12/15-LO、CYP)下流の脂質メディエーター産生量を調べた。涙および結膜嚢洗浄液の調製は、逆相固相抽出で行った。
上記アで調製した涙および結膜嚢洗浄液からの脂質抽出は、例4(1)イの記載に従って行った。
上記イで調製したサンプル溶液の脂質濃度の測定は、例4(1)ウの記載に従って行った。
上記(1)で検出された脂質メディエーターの脂質メディエーターの濃度(図26~31の縦軸)は、例4(2)の記載に従って行った。
結果は、図26~31に示される通りであった。検出された脂質メディエーターのうちPGD2、13,14-dihydro-15-keto-PGD2、PGJ2、LTB4、20-HETE、15-HETE、12-HETE、9-HOTrE、13-HOTrE、9,10-DiHOME、12,13-DiHOME、13-HpODE、18-HEPE、12-HEPE、8-HDoHE、10-HDoHE、16-HDoHEおよび20-HDoHEについて、アレルギー性結膜炎モデルにおいて有意に産生量が高いこと、あるいは、生産量が高い傾向が観察された。
Claims (14)
- 対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程を含んでなる、アレルギー性疾患、または鼻腔もしくは目における肥満細胞および/または好酸球の活性化状態の検出方法であって、前記脂質代謝物がPGD2であり、かつ、前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎である、検出方法。
- 前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、健常な対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を上回る場合に、対象がアレルギー性疾患に罹患していること、あるいは対象の鼻腔または目において肥満細胞および/または好酸球が活性化していることが示される、請求項1に記載の検出方法。
- 対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程を含んでなる、アレルギー性疾患に対する治療効果を判定するための方法であって、前記脂質代謝物がPGD2であり、かつ、前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎である、方法。
- 前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、治療前の対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度またはアレルギー性疾患に罹った対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を下回る場合に、治療効果があることが示される、請求項3に記載の方法。
- 前記アレルギー性鼻炎に対する治療が、薬物療法、免疫療法または外科手術療法である、請求項3または4に記載の方法。
- 前記アレルギー性鼻炎が、季節性アレルギー性鼻炎または通年性アレルギー性鼻炎である、請求項1または2に記載の検出方法または請求項3~5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生体試料が、前記対象から非侵襲的に採取された体液である、請求項1、2または6に記載の検出方法または請求項3~6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質代謝物が、PGE2、12-HETE、15-HETE、12-HEPE、15-HEPE、14-HDoHE、8-HDoHE、13-HODE、8-isoPGE2、16-HDoHE、15-HEDE、15-OxoEDE、20-HETE、14,15-EET、13,14-dihydro-15-keto-PGD2、PGJ2、LTB4、9-HOTrE、13-HOTrE、9,10-DiHOME、12,13-DiHOME、13-HpODE、18-HEPE、10-HDoHEおよび20-HDoHEからなる群から選択される1種または2種以上をさらに含む、請求項1、2、6および7のいずれか一項に記載の検出方法または請求項3~7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記脂質代謝物の濃度を質量分析法により測定する、請求項1、2および6~8のいずれか一項に記載の検出方法または請求項3~8のいずれか一項に記載の方法。
- アレルギー性疾患マーカー、または鼻腔もしくは目における肥満細胞および/または好酸球の活性化マーカーとしての脂質代謝物の使用であって、前記脂質代謝物がPGD2であり、かつ、前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎である、使用。
- 前記アレルギー性鼻炎が、季節性アレルギー性鼻炎または通年性アレルギー性鼻炎である、請求項10に記載の使用。
- 前記脂質代謝物が、PGE2、12-HETE、15-HETE、12-HEPE、15-HEPE、14-HDoHE、8-HDoHE、13-HODE、8-isoPGE2、16-HDoHE、15-HEDE、15-OxoEDE、20-HETE、14,15-EET、13,14-dihydro-15-keto-PGD2、PGJ2、LTB4、9-HOTrE、13-HOTrE、9,10-DiHOME、12,13-DiHOME、13-HpODE、18-HEPE、10-HDoHEおよび20-HDoHEからなる群から選択される1種または2種以上をさらに含む、請求項10または11のいずれかに記載の使用。
- アレルギー性疾患の治療薬の候補薬を対象に投与する工程と、前記対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度を測定する工程とを含んでなる、アレルギー性疾患の治療薬のスクリーニング方法であって、前記脂質代謝物がPGD2であり、前記アレルギー性疾患がアレルギー性鼻炎であり、かつ、前記対象がヒトを除く哺乳動物である、スクリーニング方法。
- 候補薬投与後の対象の生体試料中の脂質代謝物の濃度が、候補薬投与前の対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度またはアレルギー性疾患に罹った対象の生体試料中の当該脂質代謝物の濃度を下回る場合に、前記治療薬に治療効果があることが示される、請求項13に記載のスクリーニング方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018043404 | 2018-03-09 | ||
JP2018043404 | 2018-03-09 | ||
PCT/JP2019/009835 WO2019172457A1 (ja) | 2018-03-09 | 2019-03-11 | アレルギー性疾患の検出方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2019172457A1 JPWO2019172457A1 (ja) | 2021-03-11 |
JP7358701B2 true JP7358701B2 (ja) | 2023-10-11 |
Family
ID=67847286
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020504077A Active JP7358701B2 (ja) | 2018-03-09 | 2019-03-11 | アレルギー性疾患の検出方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20220057415A1 (ja) |
JP (1) | JP7358701B2 (ja) |
WO (1) | WO2019172457A1 (ja) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009210554A (ja) | 2008-02-04 | 2009-09-17 | Ttc:Kk | 各種疾患の検査方法及び診断用キット |
JP2010002416A (ja) | 2008-05-22 | 2010-01-07 | Ono Pharmaceut Co Ltd | プロスタグランジンd2関連疾患治療のためのバイオマーカー及びその測定方法 |
-
2019
- 2019-03-11 US US16/978,291 patent/US20220057415A1/en not_active Abandoned
- 2019-03-11 WO PCT/JP2019/009835 patent/WO2019172457A1/ja active Application Filing
- 2019-03-11 JP JP2020504077A patent/JP7358701B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009210554A (ja) | 2008-02-04 | 2009-09-17 | Ttc:Kk | 各種疾患の検査方法及び診断用キット |
JP2010002416A (ja) | 2008-05-22 | 2010-01-07 | Ono Pharmaceut Co Ltd | プロスタグランジンd2関連疾患治療のためのバイオマーカー及びその測定方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
椎大介、小田知子,アレルギー性結膜炎におけるPGD2の役割,アレルギーの臨床,2014年08月20日,Vol.461,PP.780-788 |
稲垣真一郎ほか,小児アトピー性皮膚炎患者におけるプロスタグランジンD2(PGD2)尿中代謝産物測定の検討,日本小児アレルギー学会誌,2017年10月20日 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20220057415A1 (en) | 2022-02-24 |
JPWO2019172457A1 (ja) | 2021-03-11 |
WO2019172457A1 (ja) | 2019-09-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Vogl et al. | Alarmin S100A8/S100A9 as a biomarker for molecular imaging of local inflammatory activity | |
EP3190418B1 (en) | Use of sm_sphingomyelin (d18:1, c16:0) as a marker for heart failure | |
Mansour et al. | Risk factors for non-alcoholic fatty liver disease-associated hepatic fibrosis in type 2 diabetes patients | |
Kim et al. | Metabolic fingerprinting uncovers the distinction between the phenotypes of tuberculosis associated COPD and smoking-induced COPD | |
JP6783445B2 (ja) | 食物アレルギーの検査方法及び検査用キット | |
JP7358701B2 (ja) | アレルギー性疾患の検出方法 | |
US8053202B2 (en) | Method for determining the stage of ulcerative colitis or interstitial pneumonitis and reagent kit thereof | |
JP6956429B2 (ja) | 食物アレルギーのバイオマーカー、食物アレルギーの検査方法、尿検体検査用キット、及び尿検体検査用スティック | |
Yavuzer et al. | Procalcitonin and Pentraxin-3: Current biomarkers in inflammation in white coat hypertension | |
JP6592628B1 (ja) | 脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キット及びバイオマーカー、対象の肝線維化の進行度の判定方法、並びに対象の肝線維化の進行度を判定するためのバイオマーカー | |
TW202141038A (zh) | 一種通過檢測或調節一組體內脂質種類以診斷和治療哮喘的方法 | |
JP2022548905A (ja) | Dmardに対する患者の応答を予測する方法 | |
JP2022551057A (ja) | 気分障害の改善のためのバイオマーカーとしての2-メチルブチレート | |
JP2020064055A (ja) | 脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キット及びバイオマーカー、対象の肝線維化の進行度の判定方法、並びに対象の肝線維化の進行度を判定するためのバイオマーカー | |
WO2013080917A1 (ja) | 統合失調症の客観的評価法 | |
JP3706913B2 (ja) | 精神分裂病の診断薬キット | |
JP7294709B2 (ja) | 難治性夜間頻尿・夜間多尿症バイオマーカーの測定方法及び難治性夜間頻尿・夜間多尿症の予防剤又は改善剤のスクリーニング方法 | |
JP5069804B2 (ja) | 筋萎縮性側索硬化症(als)の患者の進行度を判定し進行のモニターを行う方法 | |
WO2022186652A1 (ko) | 눈물을 이용한 당뇨병의 진단 방법 및 키트 | |
WO2021162030A1 (ja) | 薬剤性間質性肺炎の代謝物診断バイオマーカー | |
RU2388413C1 (ru) | Способ оценки степени тяжести трофологической недостаточности у больных хронической обструктивной болезнью легких | |
TW202415951A (zh) | 紅血球外泌體濃度於帕金森氏症之輔助診斷用途及其檢測方法 | |
JPWO2020044500A1 (ja) | 脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キット及びバイオマーカー、対象の肝線維化の進行度の判定方法、並びに対象の肝線維化の進行度を判定するためのバイオマーカー | |
JP2022551568A (ja) | 気分障害の改善のためのバイオマーカーとしてのフェノール | |
JP5020239B6 (ja) | インスリン抵抗性病態を示す疾患の検出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200924 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220221 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20221213 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230210 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230327 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230606 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230720 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230803 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230822 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230904 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7358701 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |