JP7337773B2 - 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 - Google Patents
組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7337773B2 JP7337773B2 JP2020504326A JP2020504326A JP7337773B2 JP 7337773 B2 JP7337773 B2 JP 7337773B2 JP 2020504326 A JP2020504326 A JP 2020504326A JP 2020504326 A JP2020504326 A JP 2020504326A JP 7337773 B2 JP7337773 B2 JP 7337773B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antigen
- cells
- binding
- antibody
- receptor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title description 21
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 442
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 426
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 425
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 425
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 381
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 316
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 295
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 209
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 194
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 193
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims description 161
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims description 161
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 129
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 122
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 94
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 93
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 93
- -1 amino, carboxyl Chemical group 0.000 claims description 85
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 79
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 62
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 60
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 60
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 claims description 43
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 41
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 34
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims description 31
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims description 31
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 30
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 25
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 20
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 20
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 19
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 19
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 claims description 18
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 18
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 17
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 16
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 14
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 14
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 14
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 14
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 13
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 claims description 11
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 claims description 11
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 11
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 claims description 10
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 claims description 10
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims description 10
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 claims description 9
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 claims description 9
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 claims description 9
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 claims description 9
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 claims description 9
- 101000831007 Homo sapiens T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Proteins 0.000 claims description 9
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 claims description 9
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 claims description 9
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 claims description 9
- 102100024834 T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Human genes 0.000 claims description 9
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 claims description 8
- 101150030213 Lag3 gene Proteins 0.000 claims description 8
- 238000010361 transduction Methods 0.000 claims description 8
- 230000026683 transduction Effects 0.000 claims description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 7
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 claims description 6
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 6
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 102100029360 Hematopoietic cell signal transducer Human genes 0.000 claims description 5
- 101000990188 Homo sapiens Hematopoietic cell signal transducer Proteins 0.000 claims description 5
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N hydrazine group Chemical group NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 claims description 4
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 claims description 2
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 claims 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 claims 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 60
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 60
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 50
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 48
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 47
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 description 44
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 41
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 36
- 102100024964 Neural cell adhesion molecule L1 Human genes 0.000 description 35
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 34
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 34
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 34
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 33
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 33
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 32
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 32
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 32
- 102100031507 Fc receptor-like protein 5 Human genes 0.000 description 31
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 description 30
- 102100026497 Zinc finger protein 654 Human genes 0.000 description 30
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 29
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 27
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 25
- 108010012255 Neural Cell Adhesion Molecule L1 Proteins 0.000 description 25
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 25
- 108700012439 CA9 Proteins 0.000 description 24
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 23
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 22
- 101000846908 Homo sapiens Fc receptor-like protein 5 Proteins 0.000 description 21
- 102100033579 Trophoblast glycoprotein Human genes 0.000 description 21
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 21
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 20
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 20
- 102100027268 Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Human genes 0.000 description 20
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 20
- 102000007298 Mucin-1 Human genes 0.000 description 20
- 101710120463 Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 20
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 description 20
- 101001039269 Rattus norvegicus Glycine N-methyltransferase Proteins 0.000 description 20
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 20
- 208000026448 Wilms tumor 1 Diseases 0.000 description 20
- 102100022748 Wilms tumor protein Human genes 0.000 description 20
- 101710127857 Wilms tumor protein Proteins 0.000 description 20
- 102000003735 Mesothelin Human genes 0.000 description 19
- 108090000015 Mesothelin Proteins 0.000 description 19
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 19
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 18
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 description 18
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 17
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 16
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 16
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 16
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 16
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 16
- 101000801433 Homo sapiens Trophoblast glycoprotein Proteins 0.000 description 16
- 102000001068 Neural Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 16
- 108010069196 Neural Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 16
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 16
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 16
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 16
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 16
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 16
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 16
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 description 15
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 15
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 15
- 102000007482 Interleukin-13 Receptor alpha2 Subunit Human genes 0.000 description 15
- 108010085418 Interleukin-13 Receptor alpha2 Subunit Proteins 0.000 description 15
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 15
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 15
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 15
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 15
- 108010058905 CD44v6 antigen Proteins 0.000 description 14
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 14
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 14
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 14
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 14
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 14
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 13
- 102100031940 Epithelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 13
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 13
- 101000920667 Homo sapiens Epithelial cell adhesion molecule Proteins 0.000 description 13
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 13
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 13
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 13
- 102100028757 Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Human genes 0.000 description 12
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 12
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 12
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 12
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 12
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 12
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 12
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 description 12
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 12
- 108010039524 chondroitin sulfate proteoglycan 4 Proteins 0.000 description 12
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 12
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 12
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 12
- 229940124676 vascular endothelial growth factor receptor Drugs 0.000 description 12
- 101710171981 Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A Proteins 0.000 description 11
- 102100040985 Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A Human genes 0.000 description 11
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 11
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 11
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 10
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 description 10
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 description 10
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 10
- 108010009685 Cholinergic Receptors Proteins 0.000 description 10
- 108010060273 Cyclin A2 Proteins 0.000 description 10
- 102100025191 Cyclin-A2 Human genes 0.000 description 10
- 102100023721 Ephrin-B2 Human genes 0.000 description 10
- 108010044090 Ephrin-B2 Proteins 0.000 description 10
- 101150032879 Fcrl5 gene Proteins 0.000 description 10
- 102000010956 Glypican Human genes 0.000 description 10
- 108050001154 Glypican Proteins 0.000 description 10
- 108050007237 Glypican-3 Proteins 0.000 description 10
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 10
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 10
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 10
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 10
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 10
- 101000623901 Homo sapiens Mucin-16 Proteins 0.000 description 10
- 101000884271 Homo sapiens Signal transducer CD24 Proteins 0.000 description 10
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 10
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 10
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 10
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 10
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 10
- 102100022430 Melanocyte protein PMEL Human genes 0.000 description 10
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 10
- 102100023123 Mucin-16 Human genes 0.000 description 10
- 102100029527 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 ligand 1 Human genes 0.000 description 10
- 101710201161 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 ligand 1 Proteins 0.000 description 10
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 10
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 10
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 description 10
- 102100038081 Signal transducer CD24 Human genes 0.000 description 10
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 10
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 description 10
- 102000034337 acetylcholine receptors Human genes 0.000 description 10
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 10
- 108010051081 dopachrome isomerase Proteins 0.000 description 10
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 10
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 10
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 10
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 10
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 10
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 10
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 10
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 10
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 10
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 10
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 10
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 10
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 10
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 9
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 9
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 9
- 102100020793 Interleukin-13 receptor subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 9
- 101710112634 Interleukin-13 receptor subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 9
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 9
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical class OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- 108010027445 interleukin-22 receptor Proteins 0.000 description 9
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 9
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 8
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N Iron oxide Chemical compound [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 8
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 8
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 8
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 8
- SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N iron(II,III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]O[Fe]=O SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 8
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 8
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 7
- 101000801255 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 7
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 7
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 7
- 102000046935 human TNFRSF17 Human genes 0.000 description 7
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 7
- 102100036841 C-C motif chemokine 1 Human genes 0.000 description 6
- 102100038078 CD276 antigen Human genes 0.000 description 6
- 101710185679 CD276 antigen Proteins 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000050554 Eph Family Receptors Human genes 0.000 description 6
- 108091008815 Eph receptors Proteins 0.000 description 6
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 6
- 102000010451 Folate receptor alpha Human genes 0.000 description 6
- 108050001931 Folate receptor alpha Proteins 0.000 description 6
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 6
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 6
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 6
- 101000713104 Homo sapiens C-C motif chemokine 1 Proteins 0.000 description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 6
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 6
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 6
- 102000005435 Receptor Tyrosine Kinase-like Orphan Receptors Human genes 0.000 description 6
- 108010006700 Receptor Tyrosine Kinase-like Orphan Receptors Proteins 0.000 description 6
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- CXQCLLQQYTUUKJ-ALWAHNIESA-N beta-D-GalpNAc-(1->4)-[alpha-Neup5Ac-(2->8)-alpha-Neup5Ac-(2->3)]-beta-D-Galp-(1->4)-beta-D-Glcp-(1<->1')-Cer(d18:1/18:0) Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)C(O)=O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](CO)O1 CXQCLLQQYTUUKJ-ALWAHNIESA-N 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 6
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 6
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 6
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 6
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 6
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101710163881 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 5
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 5
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 5
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 5
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 5
- 101000773083 Homo sapiens 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 5
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 5
- 101000796203 Homo sapiens L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 5
- 101000835093 Homo sapiens Transferrin receptor protein 1 Proteins 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 102100040120 Prominin-1 Human genes 0.000 description 5
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 5
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 5
- 101710190034 Trophoblast glycoprotein Proteins 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 5
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 108010014402 tyrosinase-related protein-1 Proteins 0.000 description 5
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 4
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 4
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101800000385 Transmembrane protein Proteins 0.000 description 4
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000003432 anti-folate effect Effects 0.000 description 4
- 229940127074 antifolate Drugs 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 4
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 4
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 4
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 4
- 239000004052 folic acid antagonist Substances 0.000 description 4
- 230000005661 hydrophobic surface Effects 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 4
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 description 4
- FPKVOQKZMBDBKP-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 FPKVOQKZMBDBKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 3
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 3
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 description 3
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 3
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 3
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Natural products OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 description 3
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 3
- 101000904196 Homo sapiens Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2 Proteins 0.000 description 3
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 3
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 description 3
- 102100024019 Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2 Human genes 0.000 description 3
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 3
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 3
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 description 3
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 3
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 3
- 125000004001 thioalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 108010082808 4-1BB Ligand Proteins 0.000 description 2
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 2
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100027581 Forkhead box protein P3 Human genes 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 description 2
- 101000868215 Homo sapiens CD40 ligand Proteins 0.000 description 2
- 101000908391 Homo sapiens Dipeptidyl peptidase 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000861452 Homo sapiens Forkhead box protein P3 Proteins 0.000 description 2
- 101001019455 Homo sapiens ICOS ligand Proteins 0.000 description 2
- 101001043809 Homo sapiens Interleukin-7 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 2
- 101000971533 Homo sapiens Killer cell lectin-like receptor subfamily G member 1 Proteins 0.000 description 2
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 description 2
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 description 2
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000596234 Homo sapiens T-cell surface protein tactile Proteins 0.000 description 2
- 101000764263 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 description 2
- 101000666896 Homo sapiens V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation Proteins 0.000 description 2
- 102100034980 ICOS ligand Human genes 0.000 description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 2
- 102100021593 Interleukin-7 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010043610 KIR Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000002698 KIR Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102100021457 Killer cell lectin-like receptor subfamily G member 1 Human genes 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 2
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 2
- 102100035488 Nectin-2 Human genes 0.000 description 2
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 102100029740 Poliovirus receptor Human genes 0.000 description 2
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 2
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 229940126547 T-cell immunoglobulin mucin-3 Drugs 0.000 description 2
- 102100035268 T-cell surface protein tactile Human genes 0.000 description 2
- 102100026890 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100032101 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Human genes 0.000 description 2
- 102100040403 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Human genes 0.000 description 2
- 102100038282 V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation Human genes 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010087914 epidermal growth factor receptor VIII Proteins 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJJVMEJXYNJXOJ-UHFFFAOYSA-N fluquinconazole Chemical compound C=1C=C(Cl)C=C(Cl)C=1N1C(=O)C2=CC(F)=CC=C2N=C1N1C=NC=N1 IJJVMEJXYNJXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 102000009548 interleukin-22 receptor activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 2
- PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N ionomycin Natural products O1C(CC(O)C(C)C(O)C(C)C=CCC(C)CC(C)C(O)=CC(=O)C(C)CC(C)CC(CCC(O)=O)C)CCC1(C)C1OC(C)(C(C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N ionomycin Chemical compound O1[C@H](C[C@H](O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)/C=C/C[C@@H](C)C[C@@H](C)C(/O)=C/C(=O)[C@@H](C)C[C@@H](C)C[C@@H](CCC(O)=O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1O[C@](C)([C@@H](C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N 0.000 description 2
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910001092 metal group alloy Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 108010048507 poliovirus receptor Proteins 0.000 description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- CXMXRPHRNRROMY-UHFFFAOYSA-N sebacic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCC(O)=O CXMXRPHRNRROMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001651 Cyanoacrylate Polymers 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 102100030751 Eomesodermin homolog Human genes 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101150046249 Havcr2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 1
- 101001064167 Homo sapiens Eomesodermin homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 1
- 101001027081 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL1 Proteins 0.000 description 1
- 101000945371 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL2 Proteins 0.000 description 1
- 101000945333 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL3 Proteins 0.000 description 1
- 101000945331 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL4 Proteins 0.000 description 1
- 101000945337 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL5A Proteins 0.000 description 1
- 101000945335 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL5B Proteins 0.000 description 1
- 101000945340 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS1 Proteins 0.000 description 1
- 101000945339 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS2 Proteins 0.000 description 1
- 101000945343 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS3 Proteins 0.000 description 1
- 101000945342 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS4 Proteins 0.000 description 1
- 101000945346 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS5 Proteins 0.000 description 1
- 101000945351 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL1 Proteins 0.000 description 1
- 101000945490 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL2 Proteins 0.000 description 1
- 101000945493 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL3 Proteins 0.000 description 1
- 101000945492 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DS1 Proteins 0.000 description 1
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 1
- 101000819111 Homo sapiens Trans-acting T-cell-specific transcription factor GATA-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000599037 Homo sapiens Zinc finger protein Helios Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010013958 Ikaros Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000017182 Ikaros Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100037363 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033599 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL2 Human genes 0.000 description 1
- 102100033634 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL3 Human genes 0.000 description 1
- 102100033633 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL4 Human genes 0.000 description 1
- 102100033629 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL5A Human genes 0.000 description 1
- 102100033628 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL5B Human genes 0.000 description 1
- 102100033631 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033630 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS2 Human genes 0.000 description 1
- 102100033625 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS3 Human genes 0.000 description 1
- 102100033624 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS4 Human genes 0.000 description 1
- 102100033626 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS5 Human genes 0.000 description 1
- 102100033627 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL1 Human genes 0.000 description 1
- 102100034840 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL2 Human genes 0.000 description 1
- 102100034834 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL3 Human genes 0.000 description 1
- 102100034833 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DS1 Human genes 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000016200 MART-1 Antigen Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 101000687343 Mus musculus PR domain zinc finger protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100260032 Mus musculus Tbx21 gene Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102220492414 Ribulose-phosphate 3-epimerase_H35A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102000001712 STAT5 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010029477 STAT5 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010029157 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 2 Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102100021386 Trans-acting T-cell-specific transcription factor GATA-3 Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108010020764 Transposases Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037796 Zinc finger protein Helios Human genes 0.000 description 1
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYRDHEJRPVSJFM-VSWVFQEASA-N [(1s,3r)-3-hydroxy-4-[(3e,5e,7e,9e,11z)-11-[4-[(e)-2-[(1r,3s,6s)-3-hydroxy-1,5,5-trimethyl-7-oxabicyclo[4.1.0]heptan-6-yl]ethenyl]-5-oxofuran-2-ylidene]-3,10-dimethylundeca-1,3,5,7,9-pentaenylidene]-3,5,5-trimethylcyclohexyl] acetate Chemical compound C[C@@]1(O)C[C@@H](OC(=O)C)CC(C)(C)C1=C=C\C(C)=C\C=C\C=C\C=C(/C)\C=C/1C=C(\C=C\[C@]23[C@@](O2)(C)C[C@@H](O)CC3(C)C)C(=O)O\1 UYRDHEJRPVSJFM-VSWVFQEASA-N 0.000 description 1
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001745 anti-biotin effect Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 230000003190 augmentative effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 229940090961 chromium dioxide Drugs 0.000 description 1
- IAQWMWUKBQPOIY-UHFFFAOYSA-N chromium(4+);oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[Cr+4] IAQWMWUKBQPOIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYTAKQFHWFYBMA-UHFFFAOYSA-N chromium(IV) oxide Inorganic materials O=[Cr]=O AYTAKQFHWFYBMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000011246 composite particle Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- NLCKLZIHJQEMCU-UHFFFAOYSA-N cyano prop-2-enoate Chemical class C=CC(=O)OC#N NLCKLZIHJQEMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000012645 endogenous antigen Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 230000008508 epithelial proliferation Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 1
- UHUWQCGPGPPDDT-UHFFFAOYSA-N greigite Chemical compound [S-2].[S-2].[S-2].[S-2].[Fe+2].[Fe+3].[Fe+3] UHUWQCGPGPPDDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 1
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 210000004901 leucine-rich repeat Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- NQNBVCBUOCNRFZ-UHFFFAOYSA-N nickel ferrite Chemical compound [Ni]=O.O=[Fe]O[Fe]=O NQNBVCBUOCNRFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009635 nitrosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002905 orthoesters Chemical class 0.000 description 1
- 230000026792 palmitoylation Effects 0.000 description 1
- UTIQDNPUHSAVDN-UHFFFAOYSA-N peridinin Natural products CC(=O)OC1CC(C)(C)C(=C=CC(=CC=CC=CC=C2/OC(=O)C(=C2)C=CC34OC3(C)CC(O)CC4(C)C)C)C(C)(O)C1 UTIQDNPUHSAVDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 1
- 239000013636 protein dimer Substances 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 229910052715 tantalum Inorganic materials 0.000 description 1
- GUVRBAGPIYLISA-UHFFFAOYSA-N tantalum atom Chemical compound [Ta] GUVRBAGPIYLISA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-ylideneazanium;chloride Chemical compound Cl.N=C1CCCS1 ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008521 threonine Nutrition 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 1
- 235000002374 tyrosine Nutrition 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 150000003673 urethanes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464412—CD19 or B4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464413—CD22, BL-CAM, siglec-2 or sialic acid binding Ig-related lectin 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464416—Receptors for cytokines
- A61K39/464417—Receptors for tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin receptor [LTR], CD30
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2806—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
- C07K16/4208—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
本出願は、2017年7月29日に出願された「REAGENTS FOR EXPANDING CELLS EXPRESSING RECOMBINANT RECEPTORS」という名称の米国仮特許出願第62/538,671号、2017年12月8日に出願された「REAGENTS FOR EXPANDING CELLS EXPRESSING RECOMBINANT RECEPTORS」という名称の米国仮特許出願第62/596,742号、2018年2月9日に出願された「REAGENTS FOR EXPANDING CELLS EXPRESSING RECOMBINANT RECEPTORS」という名称の米国仮特許出願第62/628,889号、および2018年5月1日に出願された「REAGENTS FOR EXPANDING CELLS EXPRESSING RECOMBINANT RECEPTORS」という名称の米国仮特許出願第62/665,468号の優先権の恩典を主張し、それらの内容は、その全体がすべての目的のために参照により本明細書に組み入れられる。
本出願は、電子的フォーマットでの配列表と一緒に提出されている。配列表は、735042007340SeqList.TXT(2018年7月27日作成、サイズ:123,336バイト)と題されるファイルとして提供される。配列表の電子的フォーマットでの情報はその全体が参照により組み入れられる。
本開示は、組換え受容体、例えば、キメラ抗原受容体を発現する操作細胞を刺激、富化、増大、および/または活性化するための組成物および方法を提供する。いくつかの態様において、提供される方法は、組換え受容体を認識するかまたはそれと結合する結合分子と結びついた粒子、例えば、ビーズ粒子とのインキュベーションによる細胞のエクスビボまたはインビトロ刺激、富化、増大、および/または活性化を含む。いくつかの態様において、結びついた結合分子は、組換え受容体と結合するポリペプチド、例えば、ポリペプチド抗原または抗イディオタイプ抗体である。いくつかの態様において、提供される組成物は、養子免疫療法のための細胞、例えば、遺伝子操作T細胞を調製するための方法に使用することができる。
養子細胞免疫療法または癌療法に使用するために抗原特異的T細胞をインビトロで増大させるためを含む、細胞集団をインビトロまたはエクスビボで刺激または増大させるために、様々な戦略が利用可能である。研究目的、診断目的および治療目的を含む、細胞集団を刺激または増大させるために改善された戦略が必要である。このような必要性に見合う試薬、方法、ならびに製品およびキットが、提供される。
本明細書において、特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含有する組換え抗原受容体を発現している細胞を含有するインプット組成物を、複数の粒子と共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させる方法であって、複数の粒子のそれぞれが、特異的に抗原結合ドメインと結合する結合分子を含有する方法が提供され、その際、抗原結合ドメインへの結合分子の結合が、組換え抗原受容体を含有する細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含有するアウトプット組成物を産生する。いくつかの態様において、組換え抗原受容体は、キメラ抗原受容体(CAR)である。いくつかの態様において、抗原結合ドメインは、抗体またはその抗原結合性フラグメントを含有する。一部の例において、抗原結合性フラグメントは、単鎖抗体フラグメントであるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、その抗原結合性フラグメントは、柔軟なリンカーによりつながった抗体可変領域を含有する。任意のこのような態様のいくつかにおいて、その抗原結合性フラグメントは、scFvであるかまたはそれを含有する。
[本発明1001]
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を含むインプット組成物を、ビーズであるかまたはそれを含む複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
複数の粒子が、2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の平均直径を含み、かつ特異的に抗原結合ドメインと結合するかまたはそれを認識する結合分子と結びついており、
抗原結合ドメインへの結合分子の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1002]
結合分子が、キメラ抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、本発明1001の方法。
[本発明1003]
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、本発明1001または本発明1002の方法。
[本発明1004]
抗原がCD19である、本発明1001~1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、本発明1001または本発明1002の方法。
[本発明1006]
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1005の方法。
[本発明1007]
特異的にB細胞成熟抗原(BCMA)と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現している細胞を含むインプット組成物を、抗原結合ドメインにより認識されるBCMAの細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部を含む結合分子が結びついた複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
抗原結合ドメインへのBCMAの細胞外ドメインまたはその一部の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1008]
結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、任意で、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、本発明1005~1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、本発明1008の方法。
[本発明1010]
部分構造が、Fcドメインであるかまたはそれを含む、本発明1008または本発明1009の方法。
[本発明1011]
特異的にCD19と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現している細胞を含むインプット組成物を、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである結合分子が結びついた複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
抗原結合ドメインへの抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントの結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1012]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1003、1004または本発明1011の方法。
[本発明1013]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1003、1004または本発明1011の方法。
[本発明1014]
粒子が、合成粒子、不溶性粒子、固体粒子または非細胞性粒子である、本発明1007~1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
複数の粒子が、ビーズを含む、本発明1007~1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
複数の粒子が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間(両端の値を含む)の結合分子濃度を有する組成物からのものである、本発明1001~1015のいずれかの方法。
[本発明1017]
インキュベートする間に、インプット組成物中に存在する総細胞と複数の粒子との比が、5:1~1:5または約5:1~1:5(両端の値を含む)である、本発明1001~1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を含むインプット組成物を、特異的に抗原結合ドメインと結合するかまたはそれを認識する結合分子が結びついたビーズであるかまたはそれを含む複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
複数の粒子が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間(両端の値を含む)の結合分子濃度を有する組成物からのものであり、インキュベートする間に、インプット組成物中に存在する総細胞と、複数の粒子との比が、5:1~1:5または約5:1~1:5(両端の値を含む)であり、
抗原結合ドメインへの結合分子の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1019]
結合分子が、キメラ抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、本発明1018の方法。
[本発明1020]
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、本発明1018または1019の方法。
[本発明1021]
抗原がCD19である、本発明1020の方法。
[本発明1022]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、本発明1018または本発明1019の方法。
[本発明1023]
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1022の方法。
[本発明1024]
複数の粒子が、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間または約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間(それぞれ両端の値を含む)の結合分子濃度を有する組成物からのものである、あるいは
複数の粒子が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mL、または少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLの結合分子濃度を含む組成物からのものである、
本発明1001~1023のいずれかの方法。
[本発明1025]
複数の粒子が、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mLもしくは200μg/mL、または約5μg/mL、約10μg/mL、約25μg/mL、約50μg/mL、約100μg/mLもしくは約200μg/mLの結合分子濃度を有する組成物からのものである、本発明1001~1024のいずれかの方法。
[本発明1026]
インキュベーションの間に、インプット組成物中に存在する総細胞と複数の粒子との比が、3:1~1:3もしくは2:1~1:2、または約3:1~1:3もしくは約2:1~1:2である(それぞれ両端の値を含む)、本発明1001~1025のいずれかの方法。
[本発明1027]
インキュベーションの間に、インプット組成物中に存在する総細胞と複数の粒子との比が、1:1または約1:1である、本発明1001~1026のいずれかの方法。
[本発明1028]
複数のビーズが、2μmと5μmとの間もしくは約2μmと5μmとの間の平均直径または1g/cm 3 と2g/cm 3 との間もしくは約1g/cm 3 と約2g/cm 3 との間の平均密度を含む、本発明1015~1027のいずれかの方法。
[本発明1029]
平均直径が、2.8μmもしくは4.5μm、または約2.8μmもしくは約4.5μmである、本発明1001~1006および1028のいずれかの方法。
[本発明1030]
抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはscFvを含む、本発明1003、1004、1011~1017、1020、1021および1024~1029のいずれかの方法。
[本発明1031]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部、任意で、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、本発明1003、1004および1011~1030のいずれかの方法。
[本発明1032]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体または完全長抗体である、本発明1003、1004、1011~1017、1020、1021、および1024~1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
結合分子が、複数の粒子のそれぞれと、結合分子のC末端アミノ酸残基でまたはその近くで結びついている、本発明1001~1032のいずれかの方法。
[本発明1034]
複数の粒子が、単分散性である、本発明1001~1033のいずれかの方法。
[本発明1035]
結合分子が、表面に露出した官能基を介して粒子と共有結合的に結びついている、本発明1001~1034のいずれかの方法。
[本発明1036]
表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基またはヒドラジン基である、本発明1035の方法。
[本発明1037]
表面に露出した官能基が、トシル基である、本発明1035または本発明1036の方法。
[本発明1038]
複数の粒子が、ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ無水物、ヒドロキシカルボン酸のコポリマー、ジカルボン酸のコポリマー、または金属を含む粒子を含む、本発明1001~1037のいずれかの方法。
[本発明1039]
粒子が、ポリマー、多糖、シリカ、脂肪酸、炭素またはそれらの組み合わせを含む表面を含む、本発明1001~1038のいずれかの方法。
[本発明1040]
ポリマーが、ポリエチレングリコール、乳酸グリコール酸共重合体、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコールまたはそれらの組み合わせである、本発明1039の方法。
[本発明1041]
複数の粒子が、疎水性表面を含む粒子を含む、本発明1001~1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
複数の粒子が、ポリスチレン表面を含む粒子を含む、本発明1001~1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
複数の粒子が、
磁性である、および/または磁性コア、常磁性コア、もしくは超常磁性コアを含む、粒子
を含む、本発明1001~1042のいずれかの方法。
[本発明1044]
細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する作用物質の存在下で、インキュベーションの少なくとも一部が行われる、本発明1001~1043のいずれかの方法。
[本発明1045]
作用物質が、粒子と一緒に提供され、任意で、作用物質が、複数の粒子またはそのサブセットのそれぞれと結びついている、本発明1044の方法。
[本発明1046]
作用物質が、粒子と結びついており、作用物質が、細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する、本発明1044または本発明1045の方法。
[本発明1047]
作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、本発明1044~1046のいずれかの方法。
[本発明1048]
追加的な分子が、
共刺激分子であるか、または活性化共受容体、任意で、OX-40、ICOS、DAP10、B7-1、B7-2、CD28もしくは4-1BBである、あるいは
抑制性受容体、任意で、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLAまたはTIGITである、あるいは
T細胞表面タンパク質、任意で、CD2またはCD3である、
本発明1044~1047のいずれかの方法。
[本発明1049]
追加的な分子が、CD2またはCD28である、本発明1044~1048のいずれかの方法。
[本発明1050]
粒子が、抗CD2抗体および抗CD28抗体のうち一方または両方を含む、本発明1044~1049のいずれかの方法。
[本発明1051]
結合分子が、抗CD19抗イディオタイプ抗体である、本発明1050の方法。
[本発明1052]
結合分子が、キメラ抗原受容体により認識される組換え抗原であり、任意で、組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1050の方法。
[本発明1053]
作用物質が、粒子と共有結合的に結びついている、本発明1045~1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
結合分子と、粒子と結びついている作用物質との比、任意で、モル比または重量比が、1:1または約1:1である、本発明1045~1053のいずれかの方法。
[本発明1055]
インキュベーションが、2時間超、4時間超、8時間超、12時間超、24時間超、2日超、3日超、4日超、5日超、6日超、7日超、8日超、9日超、10日超、11日超もしくは12日超、または約2時間超、約4時間超、約8時間超、約12時間超、約24時間超、約2日超、約3日超、約4日超、約5日超、約6日超、約7日超、約8日超、約9日超、約10日超、約11日超もしくは約12日超にわたって実施される、本発明1001~1054のいずれかの方法。
[本発明1056]
インキュベーションが、24時間超、2日超、3日超、4日超、5日超、6日超、7日超、8日超、9日超、10日超、11日超もしくは12日超、または約24時間超、約2日超、約3日超、約4日超、約5日超、約6日超、約7日超、約8日超、約9日超、約10日超、約11日超もしくは約12日超にわたって実施される、本発明1001~1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
インキュベーションが、10日超、11日超、12日超、13日超、14日超、15日超、もしくは16日超、または10日超、11日超、12日超、13日超、14日超、15日超、もしくは16日超にわたって実施される、本発明1001~1056のいずれかの方法。.
[本発明1058]
細胞が、免疫細胞または人工多能性幹細胞(iPSC)を含む、本発明1001~1057のいずれかの方法。
[本発明1059]
免疫細胞が、T細胞またはNK細胞である、本発明1001~1058のいずれかの方法。
[本発明1060]
細胞が、CD4+ T細胞およびCD8+ T細胞のうち一方または両方を含む、本発明1001~1059のいずれかの方法。
[本発明1061]
CD4+細胞とCD8+細胞との比が、1:2と2:1との間もしくは1:3と3:1との間、または約1:2と2:1との間もしくは約1:3と3:1との間であるか、または1:1もしくは約1:1である、本発明1001~1060のいずれかの方法。
[本発明1062]
細胞が、対象、任意でヒト対象から得られた初代細胞である、本発明1001~1061のいずれかの方法。
[本発明1063]
細胞の組成物を、キメラ抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件下で接触させる工程を含む方法により、インプット組成物が産生される、本発明1001~1062のいずれかの方法。
[本発明1064]
(a)細胞の組成物を、キメラ抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件下で接触させる工程であって、それにより、インプット組成物を産生する、工程、および
(b)インプット組成物の細胞を、本発明1001~1063のいずれかの方法によりインキュベートする工程
を含む、細胞を遺伝子操作する方法。
[本発明1065]
接触させる工程およびインキュベートする工程の少なくとも一部が、同時に実施される、本発明1063または本発明1064の方法。
[本発明1066]
接触させる工程が、ウイルスベクターによる形質導入により実施され、任意で、ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、ガンマレトロウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターである、本発明1063~1065のいずれかの方法。
[本発明1067]
細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、前記方法が、接触させる工程の前にT細胞を刺激する工程も活性化する工程も含まない、本発明1062~1066のいずれかの方法。
[本発明1068]
細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、
前記方法が、接触させる工程の前に、TCR複合体を経由するシグナルを誘導することが可能な1種もしくは複数種の作用物質の存在下で組成物をインキュベートする工程、ならびに/またはT細胞、CD4+ T細胞、および/もしくはCD8+ T細胞の増殖を誘導することが可能な1種もしくは複数種の作用物質、ならびに/またはCD3結合分子、CD28結合分子、組換えIL-2、組換えIL-15、および組換えIL-7もしくはそれらの組み合わせの存在下でのインキュベーションを含まず、
任意で、前記方法が、抗CD3抗体および/または抗CD28抗体の存在下でT細胞を刺激する工程を含まない、本発明1063~1067のいずれかの方法。
[本発明1069]
アウトプット組成物中に存在する細胞の活性化マーカーまたは疲弊マーカーの表面発現が、類似のインキュベーション後であるが、TCR複合体の1つまたは複数の成分の1つまたは複数の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化することが可能なポリクローナル刺激分子の存在下で産生される細胞の組成物中のマーカーの表面発現よりも少なく、
任意で、ポリクローナル刺激分子が、抗CD3抗体もしくはフラグメントおよび/または抗CD28抗体もしくはフラグメントを含む、
本発明1001~1068のいずれかの方法。
[本発明1070]
疲弊マーカーが、抑制性受容体、任意で、PD-1、CTLA-4、TIM-3、LAG-3、BTLAまたはTIGITである、本発明1069の方法。
[本発明1071]
活性化マーカーが、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40Lまたは4-1BBである、本発明1069の方法。
[本発明1072]
キメラ抗原受容体を含むアウトプット組成物中の細胞の数が、インプット組成物中の抗原受容体を含む細胞の数と比較して、1.2倍、2.0倍、3.0倍、4.0倍、5.0倍、6.0倍、7.0倍、8.0倍、9.0倍、10倍またはそれよりも大きく増加または富化される、本発明1001~1071のいずれかの方法。
[本発明1073]
インビトロまたはエクスビボで行われる、本発明1001~1072のいずれかの方法。
[本発明1074]
CARが、特異的に抗原と結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通領域、およびITAMを含む細胞内シグナル伝達領域を含む、本発明1001~1073のいずれかの方法。
[本発明1075]
細胞内シグナル伝達ドメインが、CD3-ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内ドメインを含む、本発明1074の方法。
[本発明1076]
CARが、CD28または4-1BBのシグナル伝達ドメインを含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、本発明1074または本発明1075の方法。
[本発明1077]
アウトプット組成物から複数のビーズを除去する工程をさらに含む、本発明1001~1076のいずれかの方法。
[本発明1078]
本発明1001~1077のいずれかの方法により産生される細胞の組成物。
[本発明1079]
(i)2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の直径を含むビーズである粒子、および
(ii)ビーズの表面と結びついた結合分子
を含む表面修飾粒子であって、
結合分子が、特異的にキメラ抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと結合する、
表面修飾粒子。
[本発明1080]
結合分子が、組換え抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、該リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、本発明1079の表面修飾粒子。
[本発明1081]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、本発明1079または本発明1080の表面修飾粒子。
[本発明1082]
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1081の表面修飾粒子。
[本発明1083]
粒子と、粒子の表面と結びついた結合分子とを含む、表面修飾粒子であって、
結合分子が、B細胞成熟抗原(BCMA)である組換え抗原の細胞外ドメインまたはその一部を含む、
表面修飾粒子。
[本発明1084]
結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、任意で、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、本発明1081~1083のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1085]
部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、本発明1084の表面修飾粒子。
[本発明1086]
部分構造が、Fcドメインであるかまたはそれを含む、本発明1084または本発明1085の表面修飾粒子。
[本発明1087]
結合分子が、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、本発明1079または本発明1080の表面修飾粒子。
[本発明1088]
抗原結合ドメインにより認識される抗原が、CD19である、本発明1079、1080および1087のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1089]
キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1087または本発明1088の表面修飾粒子。
[本発明1090]
キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1087または本発明1088の表面修飾粒子。
[本発明1091]
抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、本発明1089または本発明1090の表面修飾粒子。
[本発明1092]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部、任意で、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、本発明1087~1091のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1093]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体または完全長抗体である、本発明1087~1092のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1094]
結合分子が、結合分子のC末端アミノ酸残基でまたはその近くで、粒子に結びついている、本発明1079~1093のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1095]
合成粒子、不溶性粒子、固体粒子または非細胞性粒子である、本発明1083~1094のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1096]
ビーズである、本発明1083~1095のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1097]
2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の直径を有する、本発明1079~1096のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1098]
2.8μmもしくは4.5μmまたは約2.8μmもしくは約4.5μmの直径を有する、本発明1079~1097のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1099]
結合分子が、前記粒子に共有結合的に結びついている、本発明1079~1098のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1100]
結合分子が、表面に露出した官能基を介して前記粒子に共有結合的に結びついている、本発明1079~1099のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1101]
表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基またはヒドラジン基である、本発明1100の表面修飾粒子。
[本発明1102]
表面に露出した官能基が、トシル基である、本発明1101の表面修飾粒子。
[本発明1103]
ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ無水物、ヒドロキシカルボン酸のコポリマー、ジカルボン酸のコポリマー、または金属であるかまたはそれを含む、本発明1079~1102のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1104]
ポリマー、多糖、シリカ、脂肪酸、炭素またはそれらの組み合わせを含む表面を含む、本発明1079~1103のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1105]
ポリマーが、ポリエチレングリコール、乳酸グリコール酸共重合体、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコールまたはそれらの組み合わせである、本発明1104の表面修飾粒子。
[本発明1106]
疎水性表面を含む、本発明1079~1105のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1107]
ポリスチレン表面を含む、本発明1079~1106のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1108]
磁性である、および/または磁性コア、常磁性コア、もしくは超常磁性コアを含む、本発明1079~1107のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1109]
結合分子の少なくとも10コピー、少なくとも10 2 コピー、少なくとも10 3 、少なくとも10 4 コピー、少なくとも10 5 コピーもしくは少なくとも10 6 コピー、または少なくとも約10コピー、少なくとも約10 2 コピー、少なくとも約10 3 コピー、少なくとも約10 4 コピー、少なくとも約10 5 コピーもしくは少なくとも約10 6 コピーを含む、本発明1079~1108のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1110]
前記粒子が、粒子の表面と結びついた少なくとも1種の作用物質をさらに含み、少なくとも1種の作用物質が、細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する、本発明1079~1109のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1111]
少なくとも1種の作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、本発明1110の表面修飾粒子。
[本発明1112]
追加的な分子が、共刺激分子または活性化共受容体、任意で、OX-40、ICOS、DAP10、B7-1、B7-2、CD28または4-1BBである、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1113]
追加的な分子が、抑制性受容体、任意で、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLAまたはTIGITである、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1114]
追加的な分子が、T細胞表面タンパク質、任意で、CD2またはCD3である、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1115]
追加的な分子が、CD2またはCD28である、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1116]
抗CD2抗体および抗CD28抗体のうち一方または両方を含む、本発明1115の表面修飾粒子。
[本発明1117]
少なくとも1つの作用物質が、粒子に共有結合的に結びついている、本発明1110~1116のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1118]
結合分子と、粒子により含まれる少なくとも1種の作用物質との比、任意で、モル比または重量比が、1:1または約1:1である、本発明1110~1117のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1119]
本発明1079~1118のいずれかの複数の表面修飾粒子を含む、組成物。
[本発明1120]
組成物中の結合分子の濃度が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間、または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間、約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間である、あるいは
組成物中の結合分子の濃度が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mL、または少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLである、
本発明1119の組成物。
[本発明1121]
複数の表面修飾粒子が、単分散性である、本発明1119または本発明1120の組成物。
[本発明1122]
本発明1079~1118のいずれかの表面修飾粒子または本発明1119~1121のいずれかの組成物と、使用説明書とを含む、キット。
[本発明1123]
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から選択または富化するためのものである、本発明1122のキット。
[本発明1124]
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から刺激または増大させるためのものである、本発明1122のキット。
[本発明1125]
本発明1079~1118のいずれかの表面修飾粒子または本発明1119~1121のいずれかの組成物と共に、細胞集団をインキュベートする工程を含む、細胞を増大させるための方法。
[本発明1126]
本発明1079~1118のいずれかの表面修飾粒子または本発明1119~1121のいずれかの組成物と、細胞集団を接触させる工程を含む、細胞を選択または富化する方法。
[本発明1127]
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現しているT細胞を含むインプット組成物を、インプット組成物中の細胞におけるCAR依存性活性を刺激するための条件下で、少なくとも10日間インキュベートし、それにより、アウトプット組成物を産生する工程、および
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の表現型または活性を評価する工程
を含む、細胞組成物を評価するための長期刺激方法。
[本発明1128]
CAR依存性活性を刺激するための条件が、特異的にCARの抗原結合ドメインと結合する結合分子の存在を含む、本発明1127の方法。
[本発明1129]
結合分子が、支持体と結びついている、本発明1128の方法。
[本発明1130]
支持体が、固体支持体である、本発明1129の方法。
[本発明1131]
固体支持体が、マイクロプレートのウェルまたはビーズの表面である、本発明1130の方法。
[本発明1132]
固体支持体が、マイクロプレートと結びついた結合分子を有するマイクロプレートであり、インキュベーションが、マイクロプレート中で実施される、本発明1130または本発明1131の方法。
[本発明1133]
固体支持体が、結合分子が結びついたビーズであり、インキュベーションが、複数のビーズの存在下で実施される、本発明1130または本発明1131の方法。
[本発明1134]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部であるかまたはそれを含む、本発明1128~1133のいずれかの方法。
[本発明1135]
組換え抗原またはその一部が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1134の方法。
[本発明1136]
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1128~1133のいずれかの方法。
[本発明1137]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1136の方法。
[本発明1138]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1136の方法。
[本発明1139]
インビトロまたはエクスビボで実施される、本発明1127~1138のいずれかの方法。
[本発明1140]
インプット組成物が、組換えサイトカインを含まない培地の存在下でインキュベートされる、本発明1127~1139のいずれかの方法。
[本発明1141]
インキュベーションが、連続的に実施される、またはある期間にわたり中断されない、本発明1127~1140のいずれかの方法。
[本発明1142]
インキュベーションの間に、細胞が再播種されず、培地が交換されず、かつ結合分子が添加されない、本発明1127~1140のいずれかの方法。
[本発明1143]
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の活性化、疲弊または分化状態の1つまたは複数の表現型を評価する工程を含む、本発明1127~1142のいずれかの方法。
[本発明1144]
表現型が疲弊であり、評価する工程が、CTLA-4、FOXP3、PD-1、TIGIT、LAB-3、2B4、BTLA、TIM3、VISTA、またはCD96より選択される1つまたは複数のマーカーの発現、任意で表面発現を測定することを含む、本発明1143の方法。
[本発明1145]
表現型が活性化であり、評価する工程が、CD25、CD26、CD27、CD28、CD30、CD71、CD154、CD40L、CD127、LAG3、またはKi67より選択される1つまたは複数のマーカーの発現、任意で表面発現を測定することを含む、本発明1143の方法。
[本発明1146]
表現型が分化状態であり、
評価する工程が、
(i)CD25、CD45RO、CD56、KLRG1、CD95の1つもしくは複数、ならびに/または
(ii)CD45RA、CD27、CD28、CD62L、およびCCR7の1つもしくは複数
より選択される1つまたは複数のマーカーを測定することを含み、
任意で、1つまたは複数のマーカーが、ナイーブ様T細胞と正または逆に関連するマーカーである、
本発明1143の方法。
[本発明1147]
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の活性を評価する工程を含む、本発明1127~1146のいずれかの方法。
[本発明1148]
1つまたは複数の活性が、CAR依存性活性、任意で、抗原に刺激される活性を含む、本発明1127~1147のいずれかの方法。
[本発明1149]
1つまたは複数の活性が、細胞溶解活性またはサイトカイン産生を含む、本発明1147または1148の方法。
[本発明1150]
期間が、少なくとも11日、少なくとも12日、少なくとも13日、少なくとも14日、もしくは少なくとも15日、または少なくとも約11日、少なくとも約12日、少なくとも約13日、少なくとも約14日、もしくは少なくとも約15日である、本発明1127~1149のいずれかの方法。
[本発明1151]
期間が、11日、12日、13日、14日もしくは15日であるか、または約11日、約12日、約13日、約14日もしくは約15日である、本発明1127~1149のいずれかの方法。
[本発明1152]
インプット組成物が、インキュベーションの前に試験作用物質または化合物に曝露または接触されていた細胞を含み、任意で、曝露または接触させることが、CARを発現しているT細胞を含むインプット組成物を産生するためのプロセスの1つまたは複数の段階の間に実施される、本発明1127~1151のいずれかの方法。
[本発明1153]
前記方法が、複数のインプット組成物に対して実施され、複数の該インプット組成物のそれぞれが、異なるプロセスにより産生される、本発明1127~1152のいずれかの方法。
[本発明1154]
前記方法が、アウトプット組成物の表現型または活性と、対照組成物の表現型または活性とを比較する工程をさらに含み、
任意で、対照組成物が、CAR依存性活性を刺激するための同じ条件下で少なくとも10日間インキュベートされていたT細胞の該組成物であり、
T細胞の該組成物が、試験作用物質もしくは化合物の存在下で産生されたものではないか、またはインプット組成物と比較して代替的なプロセスにより産生されたものである、本発明1127~1153のいずれかの方法。
[本発明1155]
前記方法が、低下した疲弊、低下した活性化または減少した分化を示すアウトプット組成物を同定する工程をさらに含み、任意で、減少した分化が、1つまたは複数のナイーブ様T細胞マーカーの増加した発現を含む、本発明1127~1154のいずれかの方法。
組換え受容体、例えば、キメラ抗原受容体(CAR)を発現する遺伝子操作細胞を富化、増大、および/または活性化するための組成物および方法が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、提供される方法は、組換え受容体を認識するかまたはそれと結合する結合分子と結びついた粒子、例えばビーズ粒子とのインキュベーションによる細胞のエクスビボまたはインビトロの富化、増大、および/または活性化を含む。いくつかの態様において、結びついた結合分子は、ポリペプチド、例えば、組換え受容体と結合するポリペプチド抗原または抗イディオタイプ抗体である。
キメラ抗原受容体(CAR)などの組換え受容体の抗原結合ドメインと結合するかまたはそれにより認識される結合分子とコンジュゲートしているかまたは他の方法で結びついている、ビーズなどの粒子およびその使用方法が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、粒子、例えば、ビーズは、非細胞性粒子である。
いくつかの態様において、キメラ抗原受容体(CAR)などの組換え受容体の抗原結合ドメインと結合するかまたはそれにより認識される結合分子は、粒子(例えば、ビーズ粒子)、例えば粒子の表面と結合している、または他の方法で結びついている。ある態様において、粒子は、非細胞性粒子である。特定の態様において、粒子は、コロイド粒子、ミクロスフェア、ナノ粒子、磁性ビーズなどのビーズ等を含む場合がある。いくつかの態様において、粒子またはビーズは、生体適合性である、すなわち無毒である。ある態様において、粒子またはビーズは、培養細胞、例えば、培養T細胞に無毒である。特定の態様において、粒子は、単分散性である。ある態様において、「単分散性」は、5%未満の標準偏差を有し、例えば、直径が5%未満の標準偏差を有するサイズ分散の粒子(例えば、ビーズ粒子)を包含する。
いくつかの態様において、粒子(例えば、ビーズ粒子)は、磁場中で反応する。いくつかの態様において、粒子は、磁性粒子(例えば、磁性ビーズ粒子)である。いくつかの態様において、磁性粒子は、常磁性である。特定の態様において、磁性粒子は、超常磁性である。ある態様において、粒子、例えば、ビーズは、それらが磁場に曝露されないかぎり、いかなる磁性性質も示さない。
いくつかの態様において、粒子は、オリゴマーまたはポリマーである。いくつかの態様において、粒子は、タンパク質、例えば、ストレプトアビジンから構成されるオリゴマーまたはポリマーである。いくつかの態様において、粒子は、天然に存在するタンパク質、例えば、ストレプトアビジンもしくはその異種の個別の分子を直接的もしくは間接的に連結することにより、または個別分子を作り上げる単量体もしくはサブユニットの複合体の個別分子を直接的もしくは間接的に連結すること(例えば、天然に存在するタンパク質の二量体、三量体、四量体などを直接的または間接的に連結すること)により生成することができるオリゴマーまたはポリマーである。例えば、ストレプトアビジンまたはアビジンの四量体性ホモ二量体またはヘテロ二量体は、それぞれのオリゴマーまたはポリマーの個別分子または最小の構成要素と称される場合がある。いくつかの態様において、オリゴマーまたはポリマーは、タンパク質の少なくとも2つの個別分子の連結を含有することができる(例えば、二量体である)、またはタンパク質(例えば、単量体、四量体)の個別分子の少なくとも三量体、少なくとも四量体、少なくとも五量体、少なくとも六量体、少なくとも七量体、少なくとも八量体、少なくとも九量体、少なくとも十量体、少なくとも十一量体、少なくとも十二量体、少なくとも十三量体、少なくとも十四量体、少なくとも十五量体、少なくとも十六量体、少なくとも十七量体、少なくとも十八量体、少なくとも十九量体、少なくとも二十量体、少なくとも二十五量体、少なくとも三十量体、少なくとも三十五量体、少なくとも四十量体、少なくとも四十五量体または少なくとも五十量体であってよい。いくつかの態様において、試薬は、多量体であるか、またはオリゴマー性試薬は、多量体性試薬である。特定の態様において、粒子は、ストレプトアビジンまたはストレプトアビジンのムテイン(例えば、STREP-TACTIN(登録商標)またはSTREP-TACTIN(登録商標)XTストレプトアビジンムテイン)を含むオリゴマーまたはポリマーである。
粒子、例えば、ビーズ粒子とコンジュゲートしたまたはそれと結びついたCARなどの組換え受容体の抗原結合ドメインと結合するかまたはそれにより認識される結合分子、例えば、ポリペプチド抗原または抗体が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、結合分子は、ポリペプチドである。ある態様において、結合分子は、抗原受容体、例えばCARなどの組換え受容体が結合または認識するように設計することができる、任意のポリペプチドを含む。特定の態様において、結合分子は、抗原受容体、例えばCARなどの組換え受容体の抗原結合ドメインと結合するかまたはそれを認識する抗イディオタイプ抗体である。特定の態様において、結合分子は、抗原受容体、例えばCARなどの組換え受容体の抗原結合ドメインにより結合または認識されるポリペプチドである。ある態様において、結合分子は、CARの抗原結合ドメインにより結合または認識されるポリペプチドである。
いくつかの態様において、結合分子は、抗原、例えば、組換え抗原またはそのフラグメントである。ある態様において、抗原は、疾患、例えば、癌に関連するポリペプチド、またはポリペプチドの一部である。いくつかの態様において、抗原は、疾患に関連する細胞、例えば、癌細胞および/または腫瘍細胞の表面に発現されるポリペプチド、またはポリペプチドの異種もしくはフラグメントである。
いくつかの態様において、本明細書において提供される粒子、例えば、ビーズとコンジュゲートした結合分子は、標的抗原受容体、例えばCARと結合する抗イディオタイプ抗体、またはその抗原結合性フラグメント(「抗ID」)、またはその活性フラグメントである。ある態様において、結合分子は、CARの抗原結合ドメインと結合する抗IDである。特定の態様において、CARの抗原結合ドメインは、scFvドメインを含む。いくつかの態様において、結合分子は、抗原結合ドメインでCARと結合する抗IDであって、抗原結合ドメイン、例えば、scFvをCARの膜貫通ドメインと接続しているCARのリンカーまたはスペーサー領域と結合しない抗IDである。
1 - Kabat et al. (1991), 「Sequences of Proteins of Immunological Interest”」 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD
2 - Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948
いくつかの態様において、抗イディオタイプ抗体は、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれに由来する標的抗CD19抗体に特異的である。
に示される配列を有するかまたはそれからなるリンカーを含む。例示的なリンカーは、
に示される配列を有するかまたはそれからなるリンカーをさらに含む。
いくつかの態様において、抗イディオタイプ抗体は、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれに由来する標的抗CD19抗体に特異的である。
のアミノ酸配列[配列中、X3は、TもしくはSであり、X5は、TもしくはSであり、X6は、DもしくはRであり、X8は、YもしくはWであり、X10は、KもしくはNである]を含有する重鎖相補性決定領域1(CDR-H1)、および/または
のアミノ酸配列[配列中、X4は、DもしくはMであり、X6は、NもしくはHであり、X8は、NもしくはSであり、X9は、NもしくはDであり、X10は、GもしくはSであり、X11は、GもしくはEであり、X13は、DもしくはRであり、X14は、YもしくはLであり、X17は、NもしくはKであり、X20は、GもしくはDである]を含有する重鎖相補性決定領域2(CDR-H2)、および/または
のアミノ酸配列[配列中、X2は、RもしくはSであり、X3は、EもしくはIであり、X4は、GもしくはYであり、X5は、NもしくはYであり、X6は、NもしくはEであり、X7は、Yもしくはヌルであり、X8は、Gもしくはヌルであり、X9は、Sもしくはヌルであり、X10は、Rもしくはヌルであり、X11は、Dもしくはヌルであり、X12は、Aもしくはヌルであり、X13は、Mもしくはヌルであり、X14は、DもしくはEであり、X15は、YもしくはAである]を含有する重鎖相補性決定領域3(CDR-H3)
を有するVH領域を含む。
のアミノ酸配列[配列中、X1は、SもしくはRであり、X3は、SもしくはRであり、X4は、SもしくはGであり、X5は、GもしくはNであり、X6は、VもしくはIであり、X7は、IもしくはHであり、X8は、Nもしくはヌルであり、X10は、MもしくはLであり、X11は、YもしくはAである]を含有する軽鎖相補性決定領域1(CDR-L1)、および/または
のアミノ酸配列[配列中、X1は、PもしくはLであり、X2は、WもしくはLであり、X3は、IもしくはVであり、X5は、LもしくはNであり、X6は、TもしくはAであり、X7は、SもしくはKであり、X8は、NもしくはTであり、X11は、SもしくはDである]を含有する軽鎖相補性決定領域2(CDR-L2)、および/または
QX2X3X4X5X6PX8T(SEQ ID NO:114)のアミノ酸配列[配列中、X2は、QもしくはHであり、X3は、WもしくはFであり、X4は、SもしくはWであり、X5は、SもしくはWであり、X6は、NもしくはTであり、X8は、LもしくはYである]を含有する軽鎖相補性決定領域3(CDR-L3)
を有するVH領域を含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントが、提供される。
に示される配列を有するかまたはそれからなるリンカーを含む。例示的なリンカーは、
に示される配列を有するかまたはそれからなるリンカーをさらに含む。
ある態様において、粒子、例えば、ビーズ粒子は、組換え受容体、例えば、CARの抗原結合ドメインと結合するかまたはそれにより認識される、表面コンジュゲート型結合分子、またはその他の方法で結びついた結合分子、および細胞上の追加的な分子と結合および/またはそれを認識することが可能な1種または複数種の追加的な作用物質を含む。いくつかの態様において、1種または複数種の追加的な作用物質は、追加的な結合分子である。いくつかの態様において、1種または複数種の追加的な結合分子は、組換え受容体を発現する細胞の表面に存在するポリペプチド(例えば、糖タンパク質)と結合する抗体(またはそのフラグメントもしくは異種)である。特定の態様において、1種または複数種の追加的な結合分子は、組換え受容体を発現する細胞などの細胞の表面に発現される、受容体、例えば活性化受容体、共刺激受容体または共受容体などの細胞表面分子と結合するポリペプチドまたはその一部である。特定の態様において、1種または複数種の追加的な結合分子は、組換え受容体を発現する細胞などの細胞の表面に存在するポリペプチドと結合するリガンドまたはその一部である。ある態様において、1つまたは複数の追加的な作用物質は、粒子表面に露出している。
組換え受容体(例えば、CAR)と結合するかまたはそれを認識する結合分子(例えば、ポリペプチド抗原または抗体)とコンジュゲートしたおよび/または結びついた粒子(例えば、ビーズ粒子)が、本明細書において提供される。粒子(例えば、ビーズ粒子)に結合分子、例えば、ポリペプチド抗原および抗イディオタイプ抗体をコンジュゲートするために当技術分野において周知の多様な手段が使用される場合がある。これらの方法は、結合分子の生物活性または構造を破壊または著しく制限しない任意の標準的な化学反応であって、結合分子、例えば、抗原ペプチドまたはタンパク質と、組換え受容体との相互作用が可能になるように、十分な数の結合分子を粒子とコンジュゲート可能にする、任意の標準的な化学反応を含む。いくつかの態様において、結合分子、例えば、ポリペプチド結合分子のC末端領域を粒子とコンジュゲートするコンジュゲーション方法が、選択される。当業者は、コンジュゲーションのための正確な化学反応が、粒子の材料の性質、粒子の表面に露出した官能基、結合分子とのC末端融合物の存在または非存在、およびコンジュゲート部分構造の存在または非存在に依存する場合があることを理解しているであろう。どの化学反応が選択されようと、コンジュゲーション方法が、結合分子の機能および/または構造確認を変更しないことが重要である。例えば、結合分子が抗原の場合、粒子に抗原をコンジュゲートするために選択される方法は、抗原が、そのコンジュゲート受容体により認識されることを阻止してはならない。ある態様において、結合分子が抗体、例えば抗IDの場合、コンジュゲーション方法は、抗体がその標的抗原と結合することを阻止してはならない。
ある態様において、結合分子は、共有結合的化学結合を介して担体と結合している。特定の態様において、結合分子は、ポリペプチドであり、アミノ酸の反応基または部分構造は、粒子の表面の反応基または部分構造と直接化学反応により直接的にコンジュゲートされている。ある態様において、結合分子のアミノ酸カルボキシル基(例えば、C末端カルボキシル基)、ヒドロキシル、チオール、またはアミン基(アミノ酸側鎖基など)は、PLAまたはPGAポリマーのヒドロキシルもしくはカルボキシル基、デンドリマーの末端アミン基もしくはカルボキシル基、またはリン脂質のヒドロキシル基、カルボキシル基もしくはリン酸基と直接的にコンジュゲートされている。いくつかの態様において、コンジュゲート部分構造は、例えば、結合分子と粒子との両方とコンジュゲートし、例えば共有結合し、それにより、それらを一緒に連結する。
いくつかの態様において、結合分子は、粒子、例えば、ビーズ粒子と可逆的に結びついている、またはその他の方法で関連している。ある態様では、結合分子は、粒子と結びついている試薬と可逆的に結びついている、またはその他の方法で関連している。特定の態様において、試薬は、粒子表面に露出している。ある態様において、試薬は、結合分子と可逆的に結合することが可能な複数の結合部位を含有する。いくつかの態様において、試薬は、多量体化試薬である。いくつかの態様において、結合分子と試薬との結合相互作用は、非共有結合的相互作用である。いくつかの態様において、結合分子と試薬との結合相互作用、例えば、非共有結合的結合相互作用は、可逆的である。いくつかの態様において、結合分子は、タンパク質、例えば、ストレプトアビジンから構成されるオリゴマーまたはポリマーである粒子と可逆的に結びついている。
いくつかの態様において、結合分子は、結合分子と、結合分子により結合または認識される組換え受容体、例えば、CARを発現する細胞との間の相互作用を可能にするように最適化された配向で、粒子、例えば、ビーズ粒子と結合しているか、または結びついている。いくつかの態様において、最適化された配向は、結合分子が結合している粒子による干渉が最小でまたは無干渉で、結合分子と組換え受容体との間の結合を可能にする。いくつかの態様において、CARと結合するかまたはそれを認識する結合分子、例えば、抗原または抗IDの領域に関する粒子の相対位置は、この領域が、組換え受容体、例えば、CARを発現する細胞と接触するためのアクセスを阻止しない。いくつかの態様において、結合分子、例えば抗原または抗IDは、標的細胞の組換え受容体と結合するかまたはそれを認識する領域と異なる領域、例えば、融合ドメインで、粒子と結びついている。ある態様において、結合分子は、組換え受容体と結合するかまたはそれを認識する領域で粒子と結びついていない。ある態様において、結合分子は、結合分子の別の領域と比較して、組換え受容体と結合するかまたはそれを認識する領域で粒子と結びついている可能性が低い。
いくつかの態様において、結合分子(例えば、ポリペプチド抗原または抗体)は、粒子、例えば、ビーズ粒子と結びついている。ある態様において、ポリペプチドは、粒子と共有結合的に結びついている。いくつかの態様において、ポリペプチドは、粒子と非共有結合的に結びついている。いくつかの態様において、少なくとも1つの結合分子、少なくとも10個の結合分子、少なくとも102個の結合分子、少なくとも103個の結合分子、少なくとも104個の結合分子、少なくとも105個の結合分子、少なくとも106個の結合分子、少なくとも107個の結合分子、少なくとも108個の結合分子、または少なくとも109個の結合分子が、各粒子と結びついている。特定の態様において、102個の結合分子と109個の結合分子との間もしくは約102個の結合分子と109個の結合分子との間、102個の結合分子と107個の結合分子との間もしくは約102個の結合分子と107個の結合分子との間、103個の結合分子と109個の結合分子との間もしくは約103個の結合分子と109個の結合分子との間、103個の結合分子と108個の結合分子との間もしくは約103個の結合分子と108個の結合分子との間、または103個の結合分子と106個の結合分子との間もしくは約103個の結合分子と106個の結合分子との間が、各粒子と共有結合的に結びついている(それぞれ両端の値を含む)。特定の態様において、103個の結合分子と106個の結合分子との間または約103個の結合分子と106個の結合分子との間(それぞれ両端の値を含む)が、各粒子と共有結合的に結びついている。特定の態様において、104個の結合分子と106個の結合分子との間または約104個の結合分子と106個の結合分子との間(それぞれ両端の値を含む)が、各粒子と共有結合的に結びついている。ある態様において、104個の結合分子と105個の結合分子との間または約104個の結合分子と105個の結合分子との間が、各粒子と共有結合的に結びついている。いくつかの態様において、約105個の結合分子と106個の結合分子との間(それぞれ両端の値を含む)が、各粒子と共有結合的に結びついている。
組換え受容体、例えば、CARを発現する細胞を刺激または増大させる方法であって、CARを発現している細胞を含むインプット組成物を、特異的に組換え受容体と結合するかまたはそれを認識する結合分子を含む粒子、例えば、ビーズ、例えば、抗IDコンジュゲート型ビーズまたはBCMAコンジュゲート型ビーズなどの提供されるビーズコンジュゲート型試薬と共にインキュベートすることを含む方法が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、結合分子と組換え受容体、例えば、CARとの間の結合は、CARを発現している細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する。特定の態様において、組換え受容体は、CARである。ある態様において、結合分子は、組換え受容体の抗原結合性フラグメントと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである。ある態様において、結合分子は、CARと結合するかまたはそれにより認識される抗原である。
特定の態様において、インプット組成物の細胞を、結合分子(例えば、提供される通りのビーズコンジュゲート試薬、例えば、抗IDコンジュゲートビーズまたはBCMAコンジュゲートビーズ)を含む粒子、例えば、ビーズ、と接触させることは、インプット組成物の対応する細胞と異なる少なくとも1つの性質、例えば、総細胞数、組換え受容体を発現する細胞の部分もしくはサブセット、細胞増殖率および/または活性化マーカーもしくは疲弊マーカーなどの遺伝子の発現を含むアウトプット組成物をもたらす。いくつかの態様において、該方法は、結合分子によって認識されるCARなどのキメラ受容体を発現する細胞の、増殖、活性化、刺激、サイトカイン放出または他の機能的結果、例えば、活性化マーカーのアップレギュレーションまたはサイトカイン放出もしくは産生をもたらす。いくつかの局面において、そのような増殖または他の機能的応答もしくはリードアウトは、そのような細胞において、細胞とT細胞の増殖を刺激する作用物質および/または条件、抗CD3/CD28ビーズおよび/または架橋された抗CD3などとのインキュベーションによって誘導されるものと類似したまたはそれより大きい程度まで、誘導される。
本明細書において、とりわけ、細胞組成物、例えば、細胞組成物の表現型、特性または活性を評価するために有用である、長期刺激法(本明細書において、長期刺激のための方法とも称される)が提供される。いくつかの態様において、長期刺激法は、CARなどの組換え受容体を発現する細胞を含有する細胞組成物、例えば、インプット組成物を、細胞において組換え受容体依存性活性(例えば、CAR依存性活性)を刺激する条件下でインキュベートすることであるかまたはそれを含む。いくつかの局面において、細胞組成物、例えば、インプット組成物は、抗原に特異的に結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含む組換え受容体(例えば、CAR)を発現するT細胞を含有する。いくつかの局面において、インキュベーションは、慢性的に刺激された細胞のまたは抗原に長期曝露された細胞の特徴を示す細胞を含有する、T細胞組成物、例えば、アウトプット組成物をもたらす。
いくつかの態様において、提供される方法、例えば、組換え受容体発現細胞を刺激または増大するための方法は、組換え受容体を発現する細胞を含むインプット組成物に対して、および/または、細胞を組換え受容体で遺伝子操作するための方法と併せて行われる。いくつかの局面において、細胞を組換え受容体で遺伝子操作することは、細胞の組成物と、組換え受容体(例えば、CAR)をコードする遺伝子を含有する核酸分子、例えば、ウイルスまたは非ウイルスプラスミドとを、核酸分子を組成物の1つまたは複数の細胞に送達するための条件下で接触させることを伴う。
本明細書において、組換え受容体を含有する操作された細胞を含めた細胞が提供される。また、そのような細胞の集団およびそのような細胞を含有する組成物も提供される。中でも、組成物は、細胞を含有するインプット組成物であって、1つまたは複数の細胞が、細胞とインキュベートまたは接触される1つまたは複数の粒子上に存在する結合分子が認識または結合ことができる組換え受容体を発現することが公知であるか、または発現する可能性がある、または発現するであろう、インプット組成物である。また、中でも、組成物は、提供される方法によって生産される組成物であって、粒子の結合分子により結合または認識される組換え受容体を含有する細胞が富化された組成物、例えば、組換え受容体、例えばキメラ受容体を発現する細胞が、組成物中の総細胞のあるいはT細胞またはCD8+もしくはCD4+細胞などの特定のタイプの細胞の少なくとも50、60、70、80、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99パーセントまたはより多くを構成する組成物を含め、刺激または増大された細胞が含有されるアウトプット組成物を含めた、組成物でもある。したがって、組換え受容体(例えば、CAR)を発現する遺伝子操作された細胞が提供される。
また、組換え受容体をコードする1つまたは複数のポリヌクレオチド(例えば、核酸分子)、そのような受容体を発現するように細胞を遺伝子操作するためのベクター、および操作された細胞を生産するための方法が提供される。いくつかの態様において、ベクターは、組換え受容体をコードする核酸を含有する。特定の態様において、ベクターは、ウイルスベクターまたは非ウイルスベクターである。いくつかの場合に、ベクターは、ウイルスベクター、例えば、レトロウイルスベクター、例えば、レンチウイルスベクターまたはガンマレトロウイルスベクターである。
いくつかの態様において、特定の抗原(またはマーカーまたはリガンド)、例えば、特定の細胞型の表面上に発現される抗原に対して特異性を有するCARを発現する操作された細胞、例えばT細胞が提供される。いくつかの態様において、抗原はポリペプチドである。いくつかの態様において、抗原は、糖質または他の分子である。いくつかの態様において、抗原は、正常のまたは非標的の細胞または組織と比較して、疾患または状態の細胞、例えば、腫瘍または病原性細胞上に選択的に発現されるか、または過剰発現される。他の態様において、抗原は、正常細胞上に発現され、かつ/または操作された細胞上に発現される。
いくつかの態様において、腫瘍の抗原、ウイルスまたは自己免疫タンパク質などの標的ポリペプチドのペプチドエピトープまたはT細胞エピトープを認識するT細胞受容体(TCR)またはその抗原結合部分を発現する操作された細胞、例えばT細胞が提供される。
を有する。
遺伝子操作された構成要素、例えば、組換え受容体、例えば、CARまたはTCRの導入のための様々な方法が、周知であり、提供される方法および組成物と共に用いられてもよい。例示的な方法には、ウイルスベクター、例えば、レトロウイルスもしくはレンチウイルス、非ウイルスベクター、またはトランスポゾン、例えばSleeping Beautyトランスポゾンシステムを介してのものを含む、ポリペプチドまたは受容体をコードする核酸の移入のためのものが含まれる。遺伝子移入の方法には、形質導入、エレクトロポレーション、または細胞中への遺伝子移入を結果としてもたらす他の方法が含まれ得る。
いくつかの態様において、組換え核酸は、例えば、シミアンウイルス40(SV40)、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス(AAV)に由来するベクターなどの組換え感染性ウイルス粒子を用いて、細胞中に移入される。いくつかの態様において、組換え核酸は、組換えレンチウイルスベクターまたはレトロウイルスベクター、例えばガンマレトロウイルスベクターを用いて、T細胞中に移入される(例えば、Koste et al. (2014) Gene Therapy 2014 Apr 3. doi: 10.1038/gt.2014.25;Carlens et al. (2000) Exp Hematol 28(10): 1137-46;Alonso-Camino et al. (2013) Mol Ther Nucl Acids 2, e93;Park et al., Trends Biotechnol. 2011 November 29(11): 550-557を参照されたい)。
いくつかの態様において、組換え核酸は、エレクトロポレーションを介してT細胞に移入される(例えば、Chicaybam et al, (2013) PLoS ONE 8(3): e60298 および Van Tedeloo et al. (2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437を参照のこと)。いくつかの態様において、組換え核酸は、転移を介してT細胞に移入される(例えば、Manuri et al. (2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437; Sharma et al. (2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74; および Huang et al. (2009) Methods Mol Biol 506: 115-126を参照のこと)。免疫細胞において遺伝物質を導入および発現させる他の方法は、リン酸カルシウムトランスフェクション(例えば、Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York. N.Y.に記載されているような)、プロトプラスト融合、カチオン性リポソーム媒介性トランスフェクション;タングステン粒子促進性マイクロパーティクルボンバードメント(Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990));およびリン酸ストロンチウムDNA共沈殿(Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987))を含む。
本明細書において、抗BCMA抗体である細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を検出するための方法であって、CARを発現する細胞(CAR発現細胞)を含有する組成物または生物学的試料とBCMA-Fc融合タンパク質とを接触させることによる方法が提供される。いくつかの態様において、該方法はさらに、BCMA-Fc融合タンパク質と組成物または生物学的試料中の細胞によって発現されるまたは細胞上のCARとの間に複合体が形成されるかどうかを検出すること、例えば、そのような結合の存在または非存在またはレベルを検出することを含む。いくつかの態様において、検出することは、BCMA-Fc融合物と結合している細胞を検出することを含む。いくつかの態様において、BCMA-Fc融合物は、検出のために直接的または間接的に標識される。
いくつかの態様において、また、提供される方法を実施する際に有用なシステム、装置およびキットが提供される。いくつかの態様において、本明細書に記載の粒子、例えば、ビーズ、すなわち、結合分子が付着した粒子、例えば、ビーズを含有する、製造物品、例えばキットまたはデバイスが提供される。いくつかの態様において、結合分子は、組換え受容体またはCARに結合するかまたはそれを認識する抗原または抗体を含む。いくつかの態様において、キットを、細胞を増大、選択および/または富化させるための方法において、例えば養子細胞治療のための遺伝子操作された細胞の調製に従って、使用することができる。特定の態様において、遺伝子操作された細胞は、付着した結合分子により結合または認識される組換え受容体、例えばCARを発現する。
別途定義される場合を除き、本明細書において使用するすべての専門用語、表記法、ならびに他の技術用語および科学用語または用語法は、特許請求の範囲に記載された対象が関係する技術分野の当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有することが意図される。いくつかの場合において、通常理解されている意味を有する用語が、明確化のために、かつ/または即座の参照のために本明細書において定義されており、そのような定義が本明細書に含まれることは、当技術分野において一般に理解されていることを超える実質的な違いを表すように必ずしも解釈されるべきではない。
(1)疎水性:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、Ile;
(2)中性の親水性:Cys、Ser、Thr、Asn、Gln;
(3)酸性:Asp、Glu;
(4)塩基性:His、Lys、Arg;
(5)鎖配向に影響を及ぼす残基:Gly、Pro;
(6)芳香族性:Trp、Tyr、Phe。
提供される態様には、以下がある。
1. 特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含む組換え抗原受容体を発現している細胞を含むインプット組成物を、複数の粒子、例えばビーズと共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させる方法であって、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれが、特異的に抗原結合ドメインと結合する結合分子を含み、抗原結合ドメインへの結合分子の結合が、組換え抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、方法。
2. 組換え抗原受容体が、キメラ抗原受容体(CAR)である、態様1記載の方法。
3. 抗原結合ドメインが、抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、態様1または態様2記載の方法。
4. 抗原結合性フラグメントが、単鎖抗体フラグメントであるかまたはそれを含む、態様3記載の方法。
5. その抗原結合性フラグメントが、柔軟なリンカーによりつながった抗体可変領域を含む、態様3または態様4記載の方法。
6. その抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、態様3~5のいずれか1つに記載の方法。
7. 抗原が、ROR1、B細胞成熟抗原(BCMA)、炭酸脱水酵素9(CAIX)、Her2/neu(受容体型チロシンキナーゼerbB2)、Ll-CAM、CD19、CD20、CD22、メソセリン、CEA、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、EGFR、上皮糖タンパク質2(EPG-2)、上皮糖タンパク質40(EPG-40)、EPHa2、erb-B2、erb-B3、erb-B4、erbB二量体、EGFR vIII、葉酸結合タンパク質(FBP)、FCRL5、FCRH5、胎児型アセチルコリン受容体、GD2、GD3、HMW-MAA、IL-22R-アルファ、IL-13R-アルファ2、キナーゼ挿入ドメイン受容体(kdr)、カッパ軽鎖、ルイスY、L1-細胞接着分子、(L1-CAM)、メラノーマ関連抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、メラノーマ優先発現抗原(PRAME)、サバイビン、TAG72、B7-H6、IL-13受容体アルファ2(IL-13Ra2)、CA9、GD3、HMW-MAA、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受容体-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6インテグリン、8H9、NCAM、VEGF受容体、5T4、胎児型AchR、NKG2Dリガンド、CD44v6、二重抗原、癌-精巣抗原、メソセリン、マウスCMV、ムチン1(MUC1)、MUC16、PSCA、NKG2D、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胎児性抗原、ROR1、TAG72、VEGF-R2、癌胎児抗原(CEA)、前立腺特異抗原、PSMA、Her2/neu、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、エフリンB2、CD123、c-Met、GD-2、O-アセチル化GD2(OGD2)、CE7、ウィルムス腫瘍1(WT-1)、サイクリン、サイクリンA2、CCL-1、CD138、病原体特異抗原およびユニバーサルタグ関連抗原より選択され、かつ/あるいは抗原が、αvβ6インテグリン(avb6インテグリン)、B細胞成熟抗原(BCMA)、B7-H3、B7-H6、炭酸脱水酵素9(CA9、CAIXもしくはG250としても公知)、癌-精巣抗原、癌/精巣抗原1B(CTAG、NY-ESO-1およびLAGE-2としても公知)、癌胎児抗原(CEA)、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1(CCL-1)、CD19、CD20、CD22、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、CD44v6、CD44v7/8、CD123、CD138、CD171、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4(CSPG4)、上皮増殖因子タンパク質(EGFR)、III型上皮増殖因子受容体変異(EGFR vIII)、上皮糖タンパク質2(EPG-2)、上皮糖タンパク質40(EPG-40)、エフリンB2、エフリン受容体A2(EPHa2)、エストロゲン受容体、Fc受容体様5(FCRL5;Fc受容体ホモログ5もしくはFCRH5としても公知)、胎児型アセチルコリン受容体(胎児型AchR)、葉酸結合タンパク質(FBP)、葉酸受容体アルファ、ガングリオシドGD2、O-アセチル化GD2(OGD2)、ガングリオシドGD3、糖タンパク質100(gp100)、Gタンパク質共役受容体5D(GPRC5D)、Her2/neu(受容体型チロシンキナーゼerb-B2)、Her3(erb-B3)、Her4(erb-B4)、erbB二量体、ヒト高分子量メラノーマ関連抗原(HMW-MAA)、B型肝炎表面抗原、ヒト白血球抗原A1(HLA-A1)、ヒト白血球抗原A2(HLA-A2)、IL-22受容体アルファ(IL-22Ra)、IL-13受容体アルファ2(IL-13Ra2)、キナーゼ挿入ドメイン受容体(kdr)、カッパ軽鎖、L1細胞接着分子(L1-CAM)、L1-CAMのCE7エピトープ、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA(LRRC8A)、ルイスY、メラノーマ関連抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、メソセリン、c-Met、マウスサイトメガロウイルス(CMV)、ムチン1(MUC1)、MUC16、ナチュラルキラーグループ2メンバーD(NKG2D)リガンド、メランA(MART-1)、神経細胞接着分子(NCAM)、癌胎児性抗原、メラノーマ優先発現抗原(PRAME)、プロゲステロン受容体、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原(PSCA)、前立腺特異膜抗原(PSMA)、受容体型チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)、サバイビン、栄養膜糖タンパク質(5T4としても公知のTPBG)、腫瘍関連糖タンパク質72(TAG72)、血管内皮増殖因子受容体(VEGFR)、血管内皮増殖因子受容体2(VEGFR2)、ウィルムス腫瘍1(WT-1)、病原体特異的もしくは病原体発現抗原、またはユニバーサルタグ関連抗原、および/またはビオチン化分子、および/またはHIV、HCV、HBVもしくは他の病原体により発現される分子より選択される、態様1~6のいずれか記載の方法。
8. 結合分子が、組換え抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、態様1~7のいずれか記載の方法。
9. 結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、態様1~8のいずれか記載の方法。
10. 特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現している細胞を含むインプット組成物を、複数の粒子、例えば、ビーズと共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させる方法であって、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれが、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである結合分子を含み、抗原結合ドメインへの抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントの結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、方法。
11. 結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、態様1~8のいずれか記載の方法。
12. 特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現している細胞を含むインプット組成物を、複数の粒子、例えば、ビーズと共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させる方法であって、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれが、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む結合分子を含み、抗原結合ドメインへの組換え抗原、またはその一部の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、方法。
13. 組換え抗原が、ROR1、B細胞成熟抗原(BCMA)、炭酸脱水酵素9(CAIX)、Her2/neu(受容体型チロシンキナーゼerbB2)、Ll-CAM、CD19、CD20、CD22、メソセリン、CEA、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、EGFR、上皮糖タンパク質2(EPG-2)、上皮糖タンパク質40(EPG-40)、EPHa2、erb-B2、erb-B3、erb-B4、erbB二量体、EGFR vIII、葉酸結合タンパク質(FBP)、FCRL5、FCRH5、胎児型アセチルコリン受容体、GD2、GD3、HMW-MAA、IL-22R-アルファ、IL-13R-アルファ2、キナーゼ挿入ドメイン受容体(kdr)、カッパ軽鎖、ルイスY、L1-細胞接着分子、(L1-CAM)、メラノーマ関連抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、メラノーマ優先発現抗原(PRAME)、サバイビン、TAG72、B7-H6、IL-13受容体アルファ2(IL-13Ra2)、CA9、GD3、HMW-MAA、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受容体-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6インテグリン、8H9、NCAM、VEGF受容体、5T4、胎児型AchR、NKG2Dリガンド、CD44v6、二重抗原、癌-精巣抗原、メソセリン、マウスCMV、ムチン1(MUC1)、MUC16、PSCA、NKG2D、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胎児性抗原、ROR1、TAG72、VEGF-R2、癌胎児抗原(CEA)、前立腺特異抗原、PSMA、Her2/neu、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、エフリンB2、CD123、c-Met、GD-2、O-アセチル化GD2(OGD2)、CE7、ウィルムス腫瘍1(WT-1)、サイクリン、サイクリンA2、CCL-1、CD138および病原体特異抗原、もしくは抗原結合ドメインにより認識される前記のいずれかの一部より選択され、かつ/あるいは抗原が、αvβ6インテグリン(avb6インテグリン)、B細胞成熟抗原(BCMA)、B7-H3、B7-H6、炭酸脱水酵素9(CA9、CAIXもしくはG250としても公知)、癌-精巣抗原、癌/精巣抗原1B(CTAG、NY-ESO-1およびLAGE-2としても公知)、癌胎児抗原(CEA)、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1(CCL-1)、CD19、CD20、CD22、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、CD44v6、CD44v7/8、CD123、CD138、CD171、上皮増殖因子タンパク質(EGFR)、III型上皮増殖因子受容体変異(EGFR vIII)、上皮糖タンパク質2(EPG-2)、上皮糖タンパク質40(EPG-40)、エフリンB2、エフリン受容体A2(EPHa2)、エストロゲン受容体、Fc受容体様5(FCRL5;Fc受容体ホモログ5もしくはFCRH5としても公知)、胎児型アセチルコリン受容体(胎児型AchR)、葉酸結合タンパク質(FBP)、葉酸受容体アルファ、ガングリオシドGD2、O-アセチル化GD2(OGD2)、ガングリオシドGD3、糖タンパク質100(gp100)、Gタンパク質共役受容体5D(GPRC5D)、Her2/neu(受容体型チロシンキナーゼerb-B2)、Her3(erb-B3)、Her4(erb-B4)、erbB二量体、ヒト高分子量メラノーマ関連抗原(HMW-MAA)、B型肝炎表面抗原、ヒト白血球抗原A1(HLA-A1)、ヒト白血球抗原A2(HLA-A2)、IL-22受容体アルファ(IL-22Ra)、IL-13受容体アルファ2(IL-13Ra2)、キナーゼ挿入ドメイン受容体(kdr)、カッパ軽鎖、L1細胞接着分子(L1-CAM)、L1-CAMのCE7エピトープ、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA(LRRC8A)、ルイスY、メラノーマ関連抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、メソセリン、c-Met、マウスサイトメガロウイルス(CMV)、ムチン1(MUC1)、MUC16、ナチュラルキラーグループ2メンバーD(NKG2D)リガンド、メランA(MART-1)、神経細胞接着分子(NCAM)、癌胎児性抗原、メラノーマ優先発現抗原(PRAME)、プロゲステロン受容体、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原(PSCA)、前立腺特異膜抗原(PSMA)、受容体型チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)、サバイビン、栄養膜糖タンパク質(5T4としても公知のTPBG)、腫瘍関連糖タンパク質72(TAG72)、血管内皮増殖因子受容体(VEGFR)、血管内皮増殖因子受容体2(VEGFR2)、ウィルムス腫瘍1(WT-1)、病原体特異的または病原体発現抗原、またはユニバーサルタグ関連抗原、および/またはビオチン化分子、および/またはHIV、HCV、HBVもしくは他の病原体により発現される分子より選択される、態様11または態様12記載の方法。
14. 組換え抗原が、BCMA、CD22もしくはROR1であるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、態様11~13のいずれか記載の方法。
15. 抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原の一部が、抗原の細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部を含む、態様11~14のいずれか記載の方法。
16. 抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原の一部が、本質的に、抗原の細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部からなる、態様11~14のいずれか記載の方法。
17. 特異的にB細胞成熟抗原(BCMA)と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現している細胞を含むインプット組成物を、複数の粒子、例えば、ビーズと共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させる方法であって、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれが、BCMAの細胞外ドメインまたは抗原結合ドメインにより認識される細胞外ドメインの一部を含む結合分子を含み、抗原結合ドメインへのBCMAの細胞外ドメインまたはその一部の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、方法。
18. BCMAの一部が、本質的に、細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部からなる、態様17記載の方法。
19. 結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、任意で、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、態様11~18のいずれか記載の方法。
20. 部分構造が、組換え抗原のC末端に連結されている、態様19記載の方法。
21. 部分構造が、疎水性であるか、または疎水性アミノ酸に富む、態様19または態様20記載の方法。
22. 部分構造が、Fcドメインであるかまたはそれを含む、態様19~21のいずれか記載の方法。
23. Fc領域が、ヒトIgGに由来する、態様22記載の方法。
24. 抗原が、CD19である、態様1~12のいずれか記載の方法。
25. 特異的にCD19と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現している細胞を含むインプット組成物を、複数の粒子、例えば、ビーズと共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させる方法であって、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれが、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである結合分子を含み、抗原結合ドメインへの抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントの結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、方法。
26. 抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様9、態様24または態様25記載の方法。
27. 抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様9、態様24または態様25記載の方法。
28. 抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、態様26または態様27記載の方法。
29. 抗原または組換え抗原が、ヒト由来である、態様1~28のいずれか記載の方法。
30. 抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部を含む、態様9、10および25~29のいずれか記載の方法。
31. 免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部が、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、態様30記載の方法。
32. 定常領域またはFc領域が、ヒトIgG由来である、態様30または態様31記載の方法。
33. 抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体または完全長抗体である、態様9、10および25~32のいずれか1つに記載の方法。
34. 結合分子が、粒子、例えば、ビーズと共有結合的または非共有結合的に結びついている、態様1~33のいずれか記載の方法。
35. 結合分子が、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれと、結合分子のC末端アミノ酸残基もしくはその近くで結びついており、かつ/または抗原受容体の抗原結合ドメインにより認識される結合分子の領域もしくはエピトープが、抗原受容体により認識可能なように配向されるように、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれへの結合分子の結びつきが実施される、態様1~34のいずれか記載の方法。
36. 粒子、例えば、ビーズが、合成粒子、不溶性粒子、固体粒子または非細胞性粒子である、態様1~35のいずれか記載の方法。
37. 複数の粒子が、ビーズを含む、態様1~35のいずれか記載の方法。
38. 複数の粒子、例えば、ビーズが、1μmと10μmとの間もしくは約1μmと10μmとの間または2μmと5μmとの間もしくは約2μmと5μmとの間の平均直径を含む、態様1~37のいずれか記載の方法。
39. 複数の粒子、例えば、ビーズが、約2.8μmの平均直径を含む、態様1~38のいずれか記載の方法。
40. 複数の粒子、例えば、ビーズが、約4.5μmの平均直径を含む、態様1~38のいずれか記載の方法。
41. 複数の粒子、例えば、ビーズが、約0.5g/cm3と5.0g/cm3との間または1g/cm3と2g/cm3との間もしくは約1g/cm3と約2g/cm3との間の平均密度を含む、態様1~40のいずれか記載の方法。
42. 複数の粒子、例えば、ビーズが約1.3g/cm3の平均密度を含む、態様1~41のいずれか記載の方法。
43. 複数の粒子、例えば、ビーズが、約1.5g/cm3の平均密度を含む、態様1~42記載の方法。
44. 複数の粒子、例えば、ビーズが、単分散性である、態様1~43のいずれか記載の方法。
45. 結合分子が、粒子、例えば、ビーズと共有結合的に結びついている、態様1~44のいずれか記載の方法。
46. 粒子が、結合分子の結びつきのための表面に露出した官能基を含み、かつ/または結合分子が、表面に露出した官能基を介して粒子と共有結合的に結びついている、態様1~45のいずれか記載の方法。
47. 表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基またはヒドラジン基である、態様46記載の方法。
48. 表面に露出した官能基が、トシル基である、態様46または態様47記載の方法。
49. 複数の粒子、例えば、ビーズが、生体適合性であるか、または細胞に無毒である、態様1~48のいずれか記載の方法。
50. 複数の粒子、例えば、ビーズが、ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ無水物、ヒドロキシカルボン酸のコポリマー、ジカルボン酸のコポリマー、または金属を含む粒子を含む、態様1~49のいずれか記載の方法。
51. 粒子、例えば、ビーズが、ポリマー、多糖、シリカ、脂肪酸、炭素またはそれらの組み合わせを含む表面を含む、態様1~50のいずれか記載の方法。
52. ポリマーが、ポリエチレングリコール、乳酸グリコール酸共重合体、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコールまたはそれらの組み合わせである、態様51記載の方法。
53. 複数の粒子、例えば、ビーズが、疎水性表面を含む粒子を含む、態様1~52のいずれか記載の方法、
54. 複数の粒子、例えば、ビーズが、ポリスチレン表面を含む粒子を含む、態様1~53のいずれか記載の方法。
55. 複数の粒子、例えば、ビーズが、磁性である、および/または磁性コア、常磁性コアもしく超常磁性コアを含む、粒子を含む、態様1~54のいずれか記載の方法。
56. 結合分子の濃度が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間、または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間、約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間である、態様1~55のいずれか記載の方法。
57. 結合分子の濃度が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mLまたは少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLである、態様1~56のいずれか記載の方法。
58. 複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれが、結合分子の少なくとも10コピー、少なくとも102コピー、少なくとも103コピー、少なくとも104コピー、少なくとも105コピーもしくは少なくとも106コピーまたは少なくとも約10コピー、少なくとも約102コピー、少なくとも約103コピー、少なくとも約104コピー、少なくとも約105コピーもしくは少なくとも約106コピーを含む、態様1~57のいずれか記載の方法。
59. インキュベーションの少なくとも一部が、特異的に細胞上の追加的な分子と結合する作用物質の存在下で行われて、補助シグナルを提供し、かつ/または抑制シグナルを遮断する、態様1~58のいずれか記載の方法。
60. 作用物質が、粒子、例えば、ビーズと一緒に提供され、任意で、作用物質が、複数の粒子、例えば、ビーズ、またはそのサブセットのそれぞれにより含まれる、態様1~59のいずれか記載の方法。
61. 作用物質が、複数の粒子、例えば、ビーズとは別に提供される、態様1~59のいずれか記載の方法。
62. 細胞上の追加的な分子と特異的に結合し、補助シグナルを提供し、かつ/または抑制シグナルを遮断する作用物質を、粒子、例えば、ビーズがさらに含む、態様1~60のいずれか記載の方法。
63. 作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、態様59~62のいずれか記載の方法。
64. 分子が、共刺激分子であるか、または活性化共受容体もしくはそのリガンドである、態様58~63のいずれか記載の方法。
65. 共刺激分子または活性化共受容体が、OX-40、ICOS、DAP10、CD28もしくは4-1BBであるか、またはそのリガンド、任意で、OX-40L、ICOSL、B7-1、B7-2もしくは4-1BBLである、態様64記載の方法。
66. 分子が、抑制性受容体またはそのリガンドである、態様58~63のいずれか記載の方法。
67. 抑制性受容体が、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLAもしくはTIGITであるか、またはそれらのリガンド、任意で、PD-L1、PD-L2、CD155、CD112もしくはLIGHTである、態様66記載の方法。
68. 作用物質が、粒子、例えば、ビーズと共有結合的に結びついている、態様62~67のいずれか記載の方法。
69. 結合分子と、粒子、例えば、ビーズにより含まれる作用物質との比、任意で、モル比または重量比が、1:1または約1:1である、態様62~68のいずれか記載の方法。
70. インプット組成物中に存在する総細胞と、粒子、例えば、ビーズとの比が、5:1~1:5もしくは約5:1~1:5、3:1~1:3もしくは約3:1~1:3または2:1~1:2もしくは約2:1~1:2である、態様1~69のいずれか記載の方法。
71. インプット組成物中に存在する総細胞と、粒子、例えば、ビーズとの比が、1:0.1~1:5または約1:0.1~1:5である、態様1~70のいずれか記載の方法。
72. インプット組成物中に存在する総細胞と、粒子、例えば、ビーズとの比が、1:1または約1:1である、態様1~71のいずれか記載の方法。
73. インキュベーションが、2時間、4時間、8時間、12時間、24時間、2日間、3日間、4日間、5日間、6日間、7日間、8日間、9日間、10日間、11日間もしくは12日間または約2時間、約4時間、約8時間、約12時間、約24時間、約2日間、約3日間、約4日間、約5日間、約6日間、約7日間、約8日間、約9日間、約10日間、約11日間もしくは約12日間よりも長く実施される、態様1~72のいずれか記載の方法。
74. インキュベーションが、30℃と39℃との間または約30℃と39℃との間の温度で実施される、態様1~73のいずれか記載の方法。
75. インキュベーションが、37°±2.0℃の温度で実施される、態様1~74のいずれか記載の方法。
76. 細胞が、免疫細胞または人工多能性幹細胞(iPSC)を含む、態様1~75のいずれか記載の方法。
77. 免疫細胞が、T細胞またはNK細胞である、態様1~76のいずれか記載の方法。
78. 細胞が、CD4+ T細胞および/またはCD8+ T細胞を含む、態様1~77のいずれか記載の方法。
79. CD4+細胞とCD8+細胞との比が、1:1、1:2、2:1、1:3もしくは3:1、または約1:1、約1:2、約2:1、約1:3もしくは約3:1である、請求項1~78のいずれか記載の方法。
80. 細胞が、対象、任意で、ヒト対象から得られた初代細胞である、態様1~79のいずれか記載の方法。
81. 細胞が、ヒト由来である、態様1~80のいずれか記載の方法。
82. インプット組成物が、細胞の組成物を、組換え抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件で接触させることを含む方法により産生される、態様1~81のいずれか記載の方法。
83. (a)細胞の組成物を、組換え抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件で接触させ、それにより、インプット組成物を産生すること、および
(b)インプット組成物の細胞を、態様1~74のいずれか記載の方法によりインキュベートすること
を含む、細胞を遺伝子操作する方法。
84. 接触させることおよびインキュベートすることの少なくとも一部が、同時に実施される、態様82または態様83記載の方法。
85. 核酸分子が、ウイルスベクター、エピソームベクターまたはトランスポゾン中に含まれる、態様82~84のいずれか記載の方法。
86. 接触させることが、トランスポゾン/トランスポサーゼ遺伝子導入により実施される、態様82~85のいずれか記載の方法。
87. 接触させることが、ウイルスベクターによる形質導入により実施される、態様82~85のいずれか記載の方法。
88. ウイルスベクターが、任意で、ガンマレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターであるレトロウイルスである、態様85または態様87記載の方法。
89. 接触させることが、ウイルスベクターを細胞の組成物と共にスピン接種する段階を含む、態様87または態様88記載の方法。
90. スピン接種することが、遠心分離チャンバーの内部空洞中でウイルスベクター粒子および細胞の組成物を回転させることを含み、回転が、空洞の側壁内面で、
500gと2500gとの間、500gと2000gとの間、500gと1600gとの間、500gと1000gとの間、600gと1600gとの間、600gと1000gとの間、1000gと2000gとの間もしくは1000gと1600gとの間、または約500gと2500gとの間、約500gと2000gとの間、約500gと1600gとの間、約500gと1000gとの間、約600gと1600gとの間、約600gと1000gとの間、約1000gと2000gとの間もしくは約1000gと1600gとの間(それぞれ両端の値を含む)、あるいは
少なくとも600g、少なくとも800g、少なくとも1000g、少なくとも1200g、少なくとも1600g、もしくは少なくとも2000g、または少なくとも約600g、少なくとも約800g、少なくとも約1000g、少なくとも約1200g、少なくとも約1600g、もしくは少なくとも約2000gである相対遠心力である、
態様89記載の方法。
91. スピン接種することが、
5分超もしくは約5分超、10分超もしくは約10分超、15分超もしくは約15分超、20分超もしくは約20分超、30分超もしくは約30分超、45分超もしくは約45分超、60分超もしくは約60分超、90分超もしくは約90分超または120分超もしくは約120分超、あるいは
5分と60分との間、10分と60分との間、15分と60分との間、15分と45分との間、30分と60分との間もしくは45分と60分との間、または約5分と60分との間、約10分と60分との間、約15分と60分との間、約15分と45分との間、約30分と60分との間もしくは約45分と60分との間(それぞれ両端の値を含む)
である時間である、態様89または態様90記載の方法。
92. 接触させることが、形質導入補助剤の存在下で実施される、態様87~91のいずれか記載の方法。
93. 細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、接触させることの前に、方法が、T細胞を刺激する工程も活性化する工程も含まない、態様82~92のいずれか記載の方法。
94. 細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、接触させることの前に、方法が、TCR複合体を経由するシグナルを誘導することが可能な1種もしくは複数種の作用物質の存在下で組成物をインキュベートすること、ならびに/またはT細胞、CD4+ T細胞、および/もしくはCD8+ T細胞の増殖を誘導することが可能な1種もしくは複数種の作用物質、ならびに/またはCD3結合分子、CD28結合分子、組換えIL-2、組換えIL-15、および組換えIL-7もしくはそれらの組み合わせの存在下でのインキュベーションを含まない、態様82~93のいずれか記載の方法。
95. 接触させることの前に、抗CD3抗体および/または抗CD28抗体の存在下でT細胞を刺激する工程を含まない、請求項93または態様94記載の方法。
96. 細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、複数の細胞が、対象からの試料から得られたものであり、
接触させることが、対象から試料を得た後、24時間以内に開始され、かつ/あるいは
接触させることの前に、T細胞が、対象から試料を得た後、15℃超、18℃超、22℃超もしくは25℃超、または約15℃超、約18℃超、約22℃超もしくは約25℃長の温度に、1時間超、2時間超、4時間超、6時間超、8時間超、12時間超、または24時間超の時間供されたことがなく、かつ/あるいは
接触させることの前に、T細胞が、対象から試料を得た後、37°±2.0℃、約37°±2.0℃、37°±2.0℃超、または約37°±2.0℃超の温度に、15分超、30分超、1時間超または2時間超の時間供されたことがない、
態様82~95のいずれか記載の方法。
97. 接触させることの前に、T細胞の5%以下、10%以下、20%以下、30%以下、もしくは40%以下が、活性化細胞であり、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40Lおよび4-1BBからなる群より選択される表面マーカーを発現し、IL-2、IFN-ガンマ、TNF-アルファからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を含み、細胞周期のG1期もしくはより後期であり、かつ/または増殖することが可能である、態様82~96のいずれか記載の方法。
98. インキュベーションまたは接触させることの前に、細胞を含む対象から生物学的試料を得ること、および任意で、試料から、細胞、任意で、T細胞を選択または富化することをさらに含む、態様1~97のいずれか記載の方法。
99. インプット組成物中の組換え抗原受容体を発現している細胞のパーセントが、75%未満、70%未満、60%未満、50%未満、40%未満、30%未満、20%未満、15%未満、10%未満もしくはそれ未満または約75%未満、約70%未満、約60%未満、約50%未満、約40%未満、約30%未満、約20%未満、約15%未満、約10%未満もしくはそれ未満である、態様1~98のいずれか記載の方法。
100. 細胞の組成物またはインプット組成物が、少なくとも1×102個の細胞、少なくとも1×103個の細胞、少なくとも1×104個の細胞、少なくとも1×105個の細胞、少なくとも1×106個の細胞もしくは少なくとも1×107個の細胞、または少なくとも約1×102個の細胞、少なくとも約1×103個の細胞、少なくとも約1×104個の細胞、少なくとも約1×105個の細胞、少なくとも約1×106個の細胞もしくは少なくとも約1×107個の細胞を含む、態様1~99のいずれか記載の方法。
101. アウトプット組成物中に存在する細胞の活性化マーカーまたは疲弊マーカーの表面発現が、類似のインキュベーション後であるが、TCR複合体の1つまたは複数の成分の1つまたは複数の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化することが可能なポリクローナル刺激分子の存在下で産生された細胞の組成物中のマーカーの表面発現よりも少ない、態様1~100のいずれか記載の方法。
102. 疲弊マーカーが、抑制性受容体である、態様101記載の方法。
103. 疲弊マーカーが、PD-1、CTLA-4、TIM-3、LAG-3、BTLAまたはTIGITである、態様101または態様102記載の方法。
104. 活性化マーカーが、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40Lまたは4-1BBである、態様103記載の方法。
105. 表面発現が、少なくとも1.2倍、少なくとも1.5倍、少なくとも2.0倍、少なくとも3.0倍、少なくとも4.0倍、少なくとも5.0倍、少なくとも10.0倍もしくはこれを超える、または少なくとも約1.2倍、少なくとも約1.5倍、少なくとも約2.0倍、少なくとも約3.0倍、少なくとも約4.0倍、少なくとも約5.0倍、少なくとも約10.0倍もしくはこれ超少ない、態様93~96のいずれか記載の方法。
106. アウトプット組成物中の細胞数が、類似のインキュベーションによるが、TCR複合体の1つまたは複数の成分の1つまたは複数の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化することが可能なポリクローナル刺激分子の存在下で産生された細胞の組成物中の細胞数と実質的に同じであるか、またはそれよりも大きい、態様1~105のいずれか記載の方法。
107. ポリクローナル刺激分子が、抗CD3抗体もしくはフラグメントおよび/または抗CD28抗体もしくはフラグメントを含む、態様101~106のいずれか記載の方法。
108. アウトプット組成物中の細胞数が、インプット組成物中の細胞数よりも1.2倍超、1.5倍超、2.0倍超、3.0倍超、4.0倍超、5.0倍超、10.0倍超、25倍超、50倍超、100倍超もしくはこれを超える、または約1.2倍超、1.5倍超、2.0倍超、3.0倍超、4.0倍超、5.0倍超、10.0倍超、25倍超、50倍超、100倍超もしくはこれを超えて大きい、態様1~107のいずれか記載の方法。
109. アウトプット組成物中の組換え抗原受容体を含む細胞のパーセントが、50%超、60%超、70%超、80%超、90%超、95%超もしくはこれを超える、または約50%超、60%超、70%超、80%超、90%超、95%超もしくはこれを超えて大きい、態様1~108のいずれか記載の方法。
110. 組換え抗原受容体を含むアウトプット組成物中の細胞数が、インプット組成物中の抗原受容体を含む細胞の数と比較して、1.2倍、2.0倍、3.0倍、4.0倍、5.0倍、6.0倍、7.0倍、8.0倍、9.0倍、10倍またはこれを超えて増加または富化されている、態様1~109のいずれか記載の方法。
111. インキュベーションの少なくとも一部が、細胞の増大または活性をモジュレートする1種または複数種の追加的な作用物質の存在下で実施される、態様1~110のいずれか記載の方法。
112. 1種または複数種の追加的な作用物質が、1種または複数種のサイトカインである、態様111記載の方法。
113. インビトロまたはエクスビボで行われる、態様1~112のいずれか記載の方法。
114. 抗原受容体が、CARであり、CARが、ITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインをさらに含む、態様1~113のいずれか記載の方法。
115. 細胞内シグナル伝達ドメインが、CD3-ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内ドメインを含む、態様114記載の方法。
116. CARが、共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、態様114または態様115記載の方法。
117. 共刺激シグナル伝達領域が、CD28または4-1BBのシグナル伝達ドメインを含む、態様116記載の方法。
118. 共刺激ドメインが、CD28である、態様117記載の方法。
119. アウトプット組成物から複数の粒子、例えば、ビーズを除去することをさらに含む、態様1~118のいずれか記載の方法。
120. 態様1~119のいずれか記載の方法により産生される細胞の組成物。
121. 粒子および粒子の表面と結合した結合分子を含む表面修飾粒子であって、結合分子が、特異的に抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと結合する、表面修飾粒子。
122. 抗原受容体が、キメラ抗原受容体(CAR)である、態様121記載の表面修飾粒子。
123. 結合分子が、組換え抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、態様121または態様122記載の表面修飾粒子。
124. 結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、態様121~123のいずれか記載の表面修飾粒子。
125. 組換え抗原が、ROR1、B細胞成熟抗原(BCMA)、炭酸脱水酵素9(CAIX)、Her2/neu(受容体型チロシンキナーゼerbB2)、Ll-CAM、CD19、CD20、CD22、メソセリン、CEA、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、EGFR、上皮糖タンパク質2(EPG-2)、上皮糖タンパク質40(EPG-40)、EPHa2、erb-B2、erb-B3、erb-B4、erbB二量体、EGFR vIII、葉酸結合タンパク質(FBP)、FCRL5、FCRH5、胎児型アセチルコリン受容体、GD2、GD3、HMW-MAA、IL-22R-アルファ、IL-13R-アルファ2、キナーゼ挿入ドメイン受容体(kdr)、カッパ軽鎖、ルイスY、L1-細胞接着分子、(L1-CAM)、メラノーマ関連抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、メラノーマ優先発現抗原(PRAME)、サバイビン、TAG72、B7-H6、IL-13受容体アルファ2(IL-13Ra2)、CA9、GD3、HMW-MAA、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受容体-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6インテグリン、8H9、NCAM、VEGF受容体、5T4、胎児型AchR、NKG2Dリガンド、CD44v6、二重抗原、癌-精巣抗原、メソセリン、マウスCMV、ムチン1(MUC1)、MUC16、PSCA、NKG2D、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胎児性抗原、ROR1、TAG72、VEGF-R2、癌胎児抗原(CEA)、前立腺特異抗原、PSMA、Her2/neu、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、エフリンB2、CD123、c-Met、GD-2、O-アセチル化GD2(OGD2)、CE7、ウィルムス腫瘍1(WT-1)、サイクリン、サイクリンA2、CCL-1、CD138および病原体特異抗原もしくは抗原結合ドメインにより認識される前記のいずれかの一部より選択され、かつ/あるいは抗原が、αvβ6インテグリン(avb6インテグリン)、B細胞成熟抗原(BCMA)、B7-H3、B7-H6、炭酸脱水酵素9(CA9、CAIXもしくはG250としても公知)、癌-精巣抗原、癌/精巣抗原1B(CTAG、NY-ESO-1およびLAGE-2としても公知)、癌胎児抗原(CEA)、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1(CCL-1)、CD19、CD20、CD22、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、CD44v6、CD44v7/8、CD123、CD138、CD171、上皮増殖因子タンパク質(EGFR)、III型上皮増殖因子受容体変異(EGFR vIII)、上皮糖タンパク質2(EPG-2)、上皮糖タンパク質40(EPG-40)、エフリンB2、エフリン受容体A2(EPHa2)、エストロゲン受容体、Fc受容体様5(FCRL5;Fc受容体ホモログ5もしくはFCRH5としても公知)、胎児型アセチルコリン受容体(胎児型AchR)、葉酸結合タンパク質(FBP)、葉酸受容体アルファ、ガングリオシドGD2、O-アセチル化GD2(OGD2)、ガングリオシドGD3、糖タンパク質100(gp100)、Gタンパク質共役受容体5D(GPRC5D)、Her2/neu(受容体型チロシンキナーゼerb-B2)、Her3(erb-B3)、Her4(erb-B4)、erbB二量体、ヒト高分子量メラノーマ関連抗原(HMW-MAA)、B型肝炎表面抗原、ヒト白血球抗原A1(HLA-A1)、ヒト白血球抗原A2(HLA-A2)、IL-22受容体アルファ(IL-22Ra)、IL-13受容体アルファ2(IL-13Ra2)、キナーゼ挿入ドメイン受容体(kdr)、カッパ軽鎖、L1細胞接着分子(L1-CAM)、L1-CAMのCE7エピトープ、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA(LRRC8A)、ルイスY、メラノーマ関連抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、メソセリン、c-Met、マウスサイトメガロウイルス(CMV)、ムチン1(MUC1)、MUC16、ナチュラルキラーグループ2メンバーD(NKG2D)リガンド、メランA(MART-1)、神経細胞接着分子(NCAM)、癌胎児性抗原、メラノーマ優先発現抗原(PRAME)、プロゲステロン受容体、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原(PSCA)、前立腺特異膜抗原(PSMA)、受容体型チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)、サバイビン、栄養膜糖タンパク質(5T4としても公知のTPBG)、腫瘍関連糖タンパク質72(TAG72)、血管内皮増殖因子受容体(VEGFR)、血管内皮増殖因子受容体2(VEGFR2)、ウィルムス腫瘍1(WT-1)、病原体特異的または病原体発現抗原、またはユニバーサルタグ関連抗原、および/またはビオチン化分子、および/またはHIV、HCV、HBVもしくは他の病原体により発現される分子より選択される、態様124記載の表面修飾粒子。
126. 組換え抗原が、BCMA、CD22もしくはROR1であるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、態様124または態様125記載の表面修飾粒子。
127. 抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原の一部が、抗原の細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部を含む、態様124~126のいずれか記載の方法。
128. 抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原の一部が、本質的に、抗原の細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部からなる、態様124~126のいずれか記載の方法。
129. 粒子および粒子の表面と結合した結合分子を含む表面修飾粒子であって、結合分子が、B細胞成熟抗原(BCMA)の細胞外ドメインまたはその一部を含む、表面修飾粒子。
130. 結合分子が、部分構造と連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、任意で、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、態様124~129のいずれか記載の表面修飾粒子。
131. 部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、態様130記載の表面修飾粒子。
132. 部分構造が、疎水性であるか、または疎水性アミノ酸に富む、態様130または態様131記載の表面修飾粒子。
133. 部分構造が、Fcドメインであるかまたはそれを含む、態様130~132のいずれか記載の表面修飾粒子。
134. Fc領域が、IgGに由来する、態様133記載の表面修飾粒子。
135. 組換え抗原が、ヒト由来である、態様130~134のいずれか記載の表面修飾粒子。
136. 結合分子が、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、態様121~123のいずれか記載の表面修飾粒子。
137. 抗原結合ドメインにより認識される抗原が、CD19である、態様121~123および136のいずれか記載の表面修飾粒子。
138. 抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様136または態様137記載の表面修飾粒子。
139. 抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様136または態様137記載の表面修飾粒子。
140. 抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、態様138または態様139記載の表面修飾粒子。
141. 抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部を含む、態様136~140のいずれか記載の表面修飾粒子。
142. 免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部が、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、態様141記載の表面修飾粒子。
143. 定常領域またはFc領域が、ヒトIgGに由来する、態様141または態様142記載の表面修飾粒子。
144. 抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体または完全長抗体である、態様136~143のいずれか記載の表面修飾粒子。
145. 結合分子が、粒子、例えば、ビーズと共有結合的または非共有結合的に結びついている、態様121~144のいずれか記載の表面修飾粒子。
146. 結合分子が、複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれと、結合分子のC末端アミノ酸残基もしくはその近くで結びついており、かつ/または複数の粒子、例えば、ビーズのそれぞれへの結合分子の結びつきが、実施されることにより、抗原受容体の抗原結合ドメインにより認識される結合分子の領域もしくはエピトープが、抗原受容体により認識可能なように配向される、態様121~145のいずれか記載の表面修飾粒子。
147. 粒子、例えば、ビーズが、合成粒子、不溶性粒子、固体粒子、または非細胞性粒子である、態様121~146のいずれか記載の表面修飾粒子。
148. 複数の粒子が、ビーズを含む、態様121~147のいずれか記載の表面修飾粒子。
149. 1μmと10μmとの間もしくは約1μmと10μmとの間または2μmと5μmとの間もしくは約2μmと5μmとの間の直径を有する、態様121~148のいずれか記載の表面修飾粒子。
150. 約2.8μmの直径を有する、態様121~149のいずれか記載の表面修飾粒子。
151. 約4.5μmの直径を有する、態様121~149のいずれか記載の表面修飾粒子。
152. 結合分子が、粒子、例えば、ビーズと共有結合的に結びついている、態様121~151のいずれか記載の表面修飾粒子。
153. 粒子が、結合分子の結びつきのための表面に露出した官能基を含み、かつ/または結合分子が、表面に露出した官能基を介して粒子と共有結合的に結びついている、態様121~152のいずれか記載の表面修飾粒子。
154. 表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基またはヒドラジン基である、態様153記載の表面修飾粒子。
155. 表面に露出した官能基が、トシル基である、態様154記載の表面修飾粒子。
156. 生体適合性であるか、または細胞に無毒である、態様121~155のいずれか記載の表面修飾粒子。
157. 複数の粒子、例えば、ビーズが、ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ無水物、ヒドロキシカルボン酸のコポリマー、ジカルボン酸のコポリマー、または金属を含む粒子を含む、態様121~156のいずれか記載の表面修飾粒子。
158. 粒子、例えば、ビーズが、ポリマー、多糖、シリカ、脂肪酸、炭素またはそれらの組み合わせを含む表面を含む、態様121~157のいずれか記載の表面修飾粒子。
159. ポリマーが、ポリエチレングリコール、乳酸グリコール酸共重合体、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコール、またはそれらの組み合わせである、態様158記載の表面修飾粒子。
160. 疎水性表面を含む、態様121~149のいずれか記載の表面修飾粒子。
161. 粒子、例えば、ビーズが、ポリスチレン表面を含む、態様121~160のいずれか記載の表面修飾粒子。
162. 磁性である、および/または磁性コア、常磁性コアもしくは超常磁性コアを含む、態様121~161のいずれか記載の表面修飾粒子。
163. 結合分子の少なくとも10コピー、少なくとも102コピー、少なくとも103コピー、少なくとも104コピー、少なくとも105コピーもしくは少なくとも106コピー、または少なくとも約10コピー、少なくとも約102コピー、少なくとも約103コピー、少なくとも約104コピー、少なくとも約105コピーもしくは少なくとも約106コピーを含む、態様121~162のいずれか記載の表面修飾粒子。
164. 補助シグナルを提供し、かつ/または抑制シグナルを遮断する細胞上の追加的な分子と特異的に結合する作用物質をさらに含み、それにより細胞の増大をモジュレートする、態様121~163のいずれか記載の表面修飾粒子。
165. 作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、態様165記載の表面修飾粒子。
166. 分子が、共刺激分子であるか、または活性化共受容体もしくはそのリガンドである、態様164または態様165記載の表面修飾粒子。
167. 共刺激分子または活性化共受容体が、OX-40、ICOS、DAP10、CD28もしくは4-1BBであるか、またはそのリガンド、任意で、OX-40L、ICOSL、B7-1、B7-2もしくは4-1BBLである、態様166記載の表面修飾粒子。
168. 分子が、抑制性受容体またはそのリガンドである、態様164または態様165記載の表面修飾粒子。
169. 抑制性受容体が、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLAもしくはTIGITであるか、またはそのリガンド、任意で、PD-L1、PD-L2、CD155、CD112もしくはLIGHTである、態様168記載の表面修飾粒子。
170. 作用物質が、粒子、例えば、ビーズと共有結合的に結びついている、態様164~169のいずれか記載の表面修飾粒子。
171. 結合分子と、粒子により含まれる作用物質との比、任意で、モル比または重量比が、1:1または約1:1である、態様164~170のいずれか記載の表面修飾粒子。
172. 態様113~153のいずれか記載の複数の表面修飾粒子、例えば、ビーズを含む組成物。
173. 結合分子の濃度が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間、または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間、約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間である、態様172記載の組成物。
174. 結合分子濃度が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mL、または少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLである、態様172または態様173記載の組成物。
175. 単分散性である、態様172~174のいずれか記載の組成物。
176. 態様121~171のいずれか記載の粒子または態様154~158のいずれか記載の組成物と、使用説明書とを含むキット。
177. 説明書が、細胞集団から、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含む抗原受容体を発現している細胞を選択または富化するためのものである、態様176記載のキット。
178. 説明書が、細胞集団から、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含む抗原受容体を発現している細胞を増大させるためのものである、態様176記載のキット。
179. 細胞集団中の組換え抗原受容体を発現している細胞のパーセントが、75%未満、70%未満、60%未満、50%未満、40%未満、30%未満、20%未満、15%未満、10%未満もしくはそれ未満、または約75%未満、約70%未満、約60%未満、約50%未満、約40%未満、約30%未満、約20%未満、約15%未満、約10%未満もしくはそれ未満である、態様177または態様178記載のキット。
180. 細胞集団を、態様121~171のいずれか記載の粒子または態様172~175のいずれか記載の組成物と共にインキュベートすることを含む、細胞を増大させるための方法。
181. 細胞集団を、態様121~171のいずれか記載の粒子または態様172~175のいずれか記載の組成物と接触させることを含む、細胞を選択または富化する方法。
182. 特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)を発現しているT細胞を含むインプット組成物を、インプット組成物中の細胞におけるCAR依存性活性を刺激するための条件下で、少なくとも10日間インキュベートし、それにより、アウトプット組成物を産生する工程、および
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の表現型または活性を評価する工程
を含む、細胞組成物を評価するための長期刺激方法。
183. CAR依存性活性を刺激するための条件が、特異的にCARの抗原結合ドメインと結合する結合分子の存在を含む、態様182記載の方法。
184. 結合分子が、支持体と結びついている、態様183記載の方法。
185. 支持体が、固体支持体である、態様184記載の方法。
186. 固体支持体が、マイクロプレートのウェルまたはビーズの表面である、態様185記載の方法。
187. 固体支持体が、マイクロプレートと結びついた結合分子を有するマイクロプレートであり、インキュベーションが、マイクロプレート中で実施される、態様183~186のいずれか記載の方法。
188. 固体支持体が、結合分子が結びついたビーズであり、インキュベーションが、複数のビーズの存在下で実施される、態様183~187のいずれか記載の方法。
189. 結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部であるかまたはそれを含む、態様183~187のいずれか記載の方法。
190. 組換え抗原またはその一部が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、態様189記載の方法。
191. 結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様183~190のいずれか記載の方法。
192. 抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様191記載の方法。
193. 抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、態様192記載の方法。
194. インビトロまたはエクスビボで実施される、態様183~193のいずれか記載の方法。
195. インプット組成物が、組換えサイトカインを含まない培地の存在下でインキュベートされる、態様182~194のいずれか記載の方法。
196. インキュベーションが、連続的に実施される、またはある期間にわたり中断されない、態様182~195のいずれか記載の方法。
197. インキュベーションの間に、細胞が再播種されず、培地が交換されず、かつ結合分子が添加されない、態様182~196のいずれか記載の方法。
198. アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の活性化、疲弊または分化状態の1つまたは複数の表現型を評価する工程を含む、態様182~197のいずれか記載の方法。
199. 表現型が疲弊であり、評価する工程が、CTLA-4、FOXP3、PD-1、TIGIT、LAB-3、2B4、BTLA、TIM3、VISTA、またはCD96より選択される1つまたは複数のマーカーの発現、任意で表面発現を測定することを含む、態様198記載の方法。
200. 表現型が活性化であり、評価する工程が、CD25、CD26、CD27、CD28、CD30、CD71、CD154、CD40L、CD127、LAG3、またはKi67より選択される1つまたは複数のマーカーの発現、任意で表面発現を測定することを含む、態様198記載の方法。
201. 表現型が分化状態であり、
評価する工程が、
(i)CD25、CD45RO、CD56、KLRG1、CD95の1つもしくは複数、ならびに/または
(ii)CD45RA、CD27、CD28、CD62L、およびCCR7の1つもしくは複数
より選択される1つまたは複数のマーカーを測定することを含み、
任意で、1つまたは複数のマーカーが、ナイーブ様T細胞と正または逆に関連するマーカーである、
態様198記載の方法。
202. アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の活性を評価する工程を含む、態様182~201のいずれか記載の方法。
203. 1つまたは複数の活性が、CAR依存性活性、任意で、抗原に刺激される活性を含む、態様182~202のいずれか記載の方法。
204. 1つまたは複数の活性が、細胞溶解活性またはサイトカイン産生を含む、態様202または203記載の方法。
205. 期間が、少なくとも11日、少なくとも12日、少なくとも13日、少なくとも14日、もしくは少なくとも15日、または少なくとも約11日、少なくとも約12日、少なくとも約13日、少なくとも約14日、もしくは少なくとも約15日である、態様182~204のいずれか記載の方法。
206. 期間が、11日、12日、13日、14日もしくは15日であるか、または約11日、約12日、約13日、約14日もしくは約15日である、態様182~205のいずれか記載の方法。
207. インプット組成物が、インキュベーションの前に試験作用物質または化合物に曝露または接触されていた細胞を含み、任意で、曝露または接触させることが、CARを発現しているT細胞を含むインプット組成物を産生するためのプロセスの1つまたは複数の段階の間に実施される、態様182~206のいずれか記載の方法。
208. 前記方法が、複数のインプット組成物に対して実施され、複数の該インプット組成物のそれぞれが、異なるプロセスにより産生される、態様182~207のいずれか記載の方法。
209. 前記方法が、アウトプット組成物の表現型または活性と、対照組成物の表現型または活性とを比較する工程をさらに含み、
任意で、対照組成物が、CAR依存性活性を刺激するための同じ条件下で少なくとも10日間インキュベートされていたT細胞の該組成物であり、
T細胞の該組成物が、試験作用物質もしくは化合物の存在下で産生されたものではないか、またはインプット組成物と比較して代替的なプロセスにより産生されたものである、態様182~208のいずれか記載の方法。
210. 前記方法が、低下した疲弊、低下した活性化または減少した分化を示すアウトプット組成物を同定する工程をさらに含み、任意で、減少した分化が、1つまたは複数のナイーブ様T細胞マーカーの増加した発現を含む、態様182~209のいずれか記載の方法。
以下の実施例は、例示のみを目的として含まれるものであり、本発明の範囲を限定することを意図しない。
B細胞成熟抗原(BCMA)を、BCMA-Fc融合ポリペプチド(そのC末端でIgGのFc領域に融合された可溶性ヒトBCMAを含有する)を市販のトシル活性化磁気ビーズ(ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせることによって、ビーズにコンジュゲートさせた。ビーズは、第一級アミノ基およびスルフヒドリル基に共有結合する、超常磁性かつ非多孔性かつ単分散性のトシル活性化ビーズである。およそ2.8μm(M-280と命名)または4.5μm(M-450と命名)の直径を有するビーズを使用してコンジュゲーションを実施した。
(BCMAの細胞外ドメイン;SEQ ID NO:1)
GGGGS(リンカー;SEQ ID NO:27)
実施例1に記載したように作製したBCMAコンジュゲートビーズ(直径4.5μm)を、抗BCMA CARを発現するT細胞とインキュベートした。健常ドナー由来の白血球アフェレーシス試料からの免疫親和性に基づく富化によってT細胞を単離した。各々がBCMAに特異的な異なるscFv抗原結合ドメイン、スペーサー、CD28膜貫通領域、4-1BB共刺激性シグナル伝達領域およびCD3ゼータ由来細胞内シグナル伝達ドメインを含有する2つの抗BCMA CAR(抗BCMA CAR #1および抗BCMA CAR #2と命名、scFv部分だけが異なる)の1つをコードするウイルスベクターで、単離されたT細胞を形質導入した。ウイルスベクター構築物はさらに、CAR発現の代理マーカーとしての役割を果たす短縮EGFR(EGFRt)をコードした;EGFRtをコードする領域を、T2Aスキップ配列によってCAR配列と分離した。形質導入後、細胞を増大させ、CAR+ CD4+ T細胞対CAR+ CD8+ T細胞比およそ1:1で製剤化し、そして、得られた組成物を凍結保存によって凍結した。記載の研究について、抗BCMA CAR #1および抗BCMA CAR#2を発現するT細胞組成物の形質導入効率は、EGFRt代理マーカーの検出用の抗EGFR抗体を使用した判定で、それぞれ45%または56%であった。
得られた製剤化組成物がおよそ74%のCD8+細胞および21%のCD4+細胞を含有した以外は実質的に実施例2に記載しているように、抗BCMA CAR+CD4/CD8 T細胞を含有するT細胞組成物を作製し、総細胞の82%が抗BCMA CARに陽性であり(可溶性BCMA-FCを使用した判定で)、68%が抗EGFR抗体を使用した判定でEGFRtに陽性であった。抗BCMA CAR+T細胞を含有する組成物を凍結保存によって凍結して、以下の研究で使用する前に融解した。
実施例1に記載しているような様々な量のBCMA抗原とコンジュゲートされたBCMAコンジュゲートビーズ(直径4.5μm)を抗BCMA CAR+T細胞とインキュベートし、T細胞マーカーの発現を評価した。
BCMAコンジュゲートビーズの存在下での増大を含むプロセスから作製した抗BCMA CAR T細胞の活性を評価した。
実質的に実施例2に記載しているように生産してCD4+T細胞およびCD8+T細胞比1:1で製剤化した低温凍結抗BCMA CAR T細胞を融解した。特段の指定のない限り、実施例1に記載したように作製した5μg/mlまたは50μg/ml BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズ(直径約4.5μm)を、5μMレナリドミドの存在下または非存在下、T細胞対ビーズ比1:2でウェルに加えた。細胞を最大14日インキュベートし、サイトカイン分泌、EGFRt代理マーカーのフローサイトメトリーによる細胞増大、および細胞溶解活性について様々な時点で解析した。
(i)上清中のサイトカインの存在
BCMAコンジュゲートビーズの添加の24時間後、培養上清中のTNF-α、IFNγおよびIL-2の存在を評価した。図9A~9Cに示すように、BCMAコンジュゲートビーズとのインキュベーションは、培養上清中へのIFNγ(図9A)、IL-2(図9B)およびTNF-α(図9C)の分泌を誘導した。サイトカイン産生度は、5μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物と比較して、50μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズと細胞をインキュベートしたときにより大きく、このことは、BCMAビーズを介したCAR刺激が用量依存的であったことを実証している。示すように、レナリドミドは、BCMAコンジュゲートビーズでの刺激後のBCMA誘導性のCAR+T細胞サイトカイン産生を増加させた。
抗BCMA CAR+T細胞を、1μMレナリドミドまたはビヒクルおよび50μg/mL BCMA-Fcコンジュゲートビーズの存在下で2時間インキュベートし、そして、リン酸化STAT 5についてフローサイトメトリーによって細胞を評価した。IFNγおよびTNFαサイトカインレベルを評価するために、抗BCMA CAR+T細胞を、0.1μMまたは1μMレナリドミドまたはビヒクルおよび5μg/mL、50μg/mLまたは200μg/mL BCMA-Fcコンジュゲートビーズの存在下で24時間インキュベートした。細胞を、形質導入された生CD3+細胞に対してゲーティングし、CD4+およびCD8+細胞においてIFNγおよびTNFαの細胞内サイトカイン蓄積についてフローサイトメトリーによって評価した。
4日目(図9G)および7日目(図9H)にモニタリングされた総細胞カウントは、5μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物ではなく50μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズでの抗BCMA CAR+T細胞の刺激後、インキュベーションの開始時点に存在する細胞(破線)と比較して増加した。レナリドミドの存在下でビーズ50ugとインキュベートした細胞において7日目に、増殖のわずかな増加が観察された。
BCMAコンジュゲートビーズの添加の4日および7日後、インキュベートした細胞をCD4またはCD8および抗EGFR抗体で染色して、CAR+T細胞の代理としてEGFRtに陽性の細胞のパーセンテージを判定した。プレーティング時に、BCMA-Fcでの染色によって判定したところ、CD4+細胞の26%が抗BCMA CARを発現し、そして、CD8+細胞の39%が抗BCMA CARを発現した。EGFRt+CD4+T細胞のパーセントは、50μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズの存在下で細胞をインキュベートしたとき、インキュベーション開始時の約26%から4日目までに40%超に増加し(図9J)、そして、7日目までに60%超に増加した(図9K)。図9Kに示すように、EGFRt+CD8+T細胞のパーセントは、50μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズの存在下で細胞をインキュベートしたとき、7日目までにインキュベーション開始時の約38%から60%超に増加した。細胞増大の程度は、5μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズと比較して、50μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズの存在下で細胞をインキュベートしたときに最大であった。レナリドミドの存在は、この研究において、CAR+ T細胞の増大の程度にほとんど影響を及ぼさなかった。
BCMAコンジュゲートビーズとのインキュベーション後のCAR+T細胞の細胞溶解活性を、BCMA+多発性骨髄腫細胞株であるBCMAを発現する標的細胞株RPMI-8226とのインキュベーションによって評価した。レナリドミドの存在下または非存在下での抗BCMA CAR+T細胞とBCMAコンジュゲートビーズ(5μg/mlまたは50μg/ml)とのインキュベーションの7日後、ビーズを培養物から取り出し、5μMレナリドミドのさらなる存在下または非存在下、細胞をRPMI-8226標的細胞とエフェクター細胞対標的細胞比3:1または1:1でプレーティングした。細胞溶解性アッセイを実施するために、顕微鏡検査による標的細胞の追跡を可能にするNucLight Red(NLR)で標的RPMI-8226細胞を標識した。赤色蛍光シグナルによる判定(INCUCYTE(登録商標)Live Cell Analysis System, Essen Bioscienceを使用)で、4日間の期間にわたって生存能力のある標的細胞の喪失を測定することによって、細胞溶解活性を評価した。RPMI-8226標的細胞とのインキュベーションの前に、生存能力のある細胞の数を0日目の細胞に対して正規化した。
各々が同じ抗BCMA CARを発現するT細胞を含有する3人の異なるドナーから抗BCMA CAR T細胞組成物を作製し、融解し、実施例1に記載したように作製した50μg/mL BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来のビーズ(直径約4.5μm)とビーズ対細胞比1:1で7日間インキュベートした。5μMレナリドミドの存在下またはレナリドミドの非存在下(ビヒクル対照)でインキュベーションを行った。7日後に細胞を採取し、3回のさらなるラウンド(各々、初期播種密度に再設定し、同じ濃度のレナリドミドの存在下で追加の7日間インキュベートすることを伴う)で最大28日、再プレーティングした。
白血球アフェレーシス収集システムを使用して対象由来の全血試料から、単核細胞が富化されたヒト白血球アフェレーシス試料を得た。白血球アフェレーシスと同日に、白血球アフェレーシス試料の細胞を、親和性に基づく選択において使用する緩衝液(リン酸緩衝食塩水(PBS)、EDTAおよびヒト血清アルブミンを含有する)中で洗浄し、再懸濁した。T細胞の免疫親和性に基づく選択のために、選択緩衝液中の洗浄した細胞を、CD4およびCD8に特異的なモノクローナル抗体にカップリングされた磁気ビーズと室温で30分間インキュベートし、磁気分離カラムを使用した陽性選択によって富化させた。富化させた1:1比のCD4+細胞およびCD8+細胞を凍結保存培地に再懸濁し、そして、細胞をコントロールレートフリーザー内で凍結保存し、さらなる使用まで液体窒素中で貯蔵した。4人の異なるドナー由来の凍結保存した細胞を使用した。
受容体型チロシンキナーゼ様オーファン受容体1(ROR1)を、ROR1-Fc融合ポリペプチド(そのC末端でIgGのFc領域に融合されたヒトROR1の細胞外ドメインを含有する)を市販のトシル活性化磁気ビーズ(ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせることによって、ビーズにコンジュゲートさせた。ビーズは、第一級アミノ基およびスルフヒドリル基に共有結合する、超常磁性かつ非多孔性かつ単分散性のトシル活性化ビーズであった。およそ2.8μm(M-280と命名)または4.5μm(M-450と命名)の直径を有するビーズを使用してコンジュゲーションを実施した。
CD22を、CD22-Fc融合ポリペプチド(そのC末端でIgGのFc領域に融合されたヒトCD22の細胞外ドメインを含有する)を市販のトシル活性化磁気ビーズ(ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせることによって、ビーズにコンジュゲートさせた。ビーズは、第一級アミノ基およびスルフヒドリル基に共有結合する、超常磁性かつ非多孔性かつ単分散性のトシル活性化ビーズであった。およそ2.8μm(M-280と命名)または4.5μm(M-450と命名)の直径を有するビーズを使用してコンジュゲーションを実施した。
2つの異なる抗CD19抗体 抗イディオタイプ(ID)抗体の1つである、FMC63由来scFv特異的抗ID抗体(表E4に示される配列)を、超常磁性かつ非多孔性かつ単分散性のトシル活性化ビーズである市販のトシル活性化磁気ビーズ(ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせた。ビーズは、第一級アミノ基およびスルフヒドリル基に共有結合された。およそ2.8μm(M-280と命名)または4.5μm(M-450と命名)の直径を有するビーズを使用してコンジュゲーションを実施した。
FMC63由来scFv特異的抗ID B-1コンジュゲートビーズをT細胞とインキュベートした。健常ドナー由来の白血球アフェレーシス試料からの免疫親和性に基づく富化によって、CD3精製のT細胞を単離した。単離された細胞を、FMC63に由来するscFvを有する抗CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入した。ウイルスベクター構築物はさらに、CAR発現の代理マーカーとしての役割を果たす短縮EGFR(EGFRt)をコードした;EGFRtをコードする領域を、T2Aスキップ配列によってCAR配列と分離した。形質導入後、細胞を培養下で増大させ、凍結保存によって凍結した。
FMC63に由来するscFvを有する抗CD19 CARで操作したT細胞を、実質的に実施例10に記載しているように作製した。融解したCD8+T細胞を、ゴルジ阻害剤の存在下で、抗ID B-1コンジュゲートビーズと4時間培養した。TNFα、IFNγおよびIL-2の細胞内サイトカインレベルを、フローサイトメトリーによって、CAR+ T細胞サブセット(代理マーカーの抗EGFRでの陽性表面染色による判定)またはCAR- T細胞サブセット(抗EGFRでの陰性表面染色による判定)のいずれかにおいて判定した。比較として、また、CAR+T細胞(EGFRt+)を、CD19を発現する標的細胞(CD19を発現するように形質導入されたK562細胞、K562-CD19)とエフェクター:T細胞比1:2で培養した。
細胞が反復刺激後にエクスビボ増大できることは、CAR+T細胞の持続能(例えば、初期活性化後)の潜在的な代用であり得、かつ/またはインビボでの機能の指標となる(Zhao et al. (2015) Cancer Cell, 28:415-28)。CAR+T細胞を上記の通り作製し、融解したCD4+またはCD8+CARを発現するT細胞を50,000のCAR+細胞/ウェルで別々にプレーティングした。抗ID B-1コンジュゲートビーズを、実施例10に記載しているようにサイトカインの存在下または非存在下、細胞:ビーズ比1:1または1:5で細胞に加えた。対照として、抗CD3/抗CD28磁気ビーズを、サイトカインの存在下または非存在下、細胞:ビーズ比3:1で細胞に加えた。細胞を3~4日毎に採取し、計数し、そして、細胞数をラウンド毎に初期播種密度に再設定した後で同じ培養条件を使用して新たな標的細胞で再刺激した。14日間の培養期間中の合計で4ラウンドの刺激を行った。刺激のラウンド毎に、倍加数を判定した。
2人の異なる患者ドナーから作製したCARを発現するT細胞を使用した以外は実施例11および12に記載のものと類似の研究を実施した。CD3精製のT細胞を、2人のドナー患者の末梢血単核細胞(PBMC)から単離し、FMC63に由来するscFvを有する抗CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入し、培養で増大させ、凍結し、融解した。
2人のドナー患者の末梢血単核細胞(PBMC)からCD3精製のT細胞を単離し、FMC63に由来するscFvを有する抗CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入し、抗CD3抗体被覆ビーズおよび抗CD28抗体被覆ビーズとの培養で増大させた。増大後、増大させたT細胞を凍結保存によって凍結した。研究のために、凍結T細胞を融解し、CD4+およびCD8+T細胞を細胞内サイトカインレベルまたは表面表現型について評価するか(d=0)、または、融解したCD4+、CD8+またはCD4+/CD8+共培養T細胞を抗ID B-1コンジュゲートビーズの存在下で追加の9日間培養した後、細胞内サイトカインレベルおよび表面マーカー表現型をPMA/イオノマイシンまたはCD19形質導入K562細胞による刺激後に評価した(d=9)。
代表的な健常ドナー由来の試料または多発性骨髄腫患者由来材料から作製した抗BCMA CAR-T細胞を、50μg/mL BCMA-Fcコンジュゲートビーズ(実施例1に記載したように作製した)と、ビーズ:CAR+T細胞比1:1で、7日間、1μMレナリドミドまたはビヒクル対照の1つの存在下で培養した。次いで、異なる条件下で培養したCAR T細胞上のCD25、PD-1、Tim3およびLag3の発現(代理CARマーカーの抗体を使用)をフローサイトメトリーによって評価した。
抗BCMA CAR T細胞を、一般に実施例2に記載しているように作製した。抗BCMA CAR T細胞を、CD4+ T細胞およびCD8+T細胞比1:1で製剤化し、融解し、96ウェルプレート中1ウェル当たり5.0×105の細胞で培養した。抗CD3/抗CD28抗体コンジュゲートビーズまたはBCMAコンジュゲートビーズ(直径4.5または2.8μm)(実施例1に記載したように作製した5μg/ml、50μg/mlまたは200μg/ml BCMAコンジュゲートビーズ組成物由来)を、抗BCMA CAR-T細胞対ビーズ比1:1で培養物に加えた。抗CD3/抗CD28抗体またはBCMAコンジュゲートビーズの非存在下で培養した抗BCMA CAR-T細胞を対照とした。
抗CD2および抗CD19抗体 抗ID抗体被覆ビーズを作製した。マウス抗CD2抗体(クローンRPA-2.10, ED biosciences)および実施例9に記載の抗ID B-2抗イディオタイプ抗体を、およそ4.5μmの直径を有する市販のトシル活性化超常磁性体(M-450と命名;ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせた。
抗CD28および抗CD19抗体 抗ID抗体被覆ビーズを作製した。マウス抗CD28抗体(低エンドトキシン、アジドフリー(LEAF)精製クローンCD28.2(Biolegend))および実施例9に記載の抗ID B-2イディオタイプ抗体を、およそ4.5μmの直径を有する市販のトシル活性化超常磁性体(M-450と命名;ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせた。トシル活性化ビーズ(例えば、およそ4×108のビーズ/mL)1mL当たりに各抗体およそ6.67×10-10モルを加え、実質的に実施例に17記載しているように共有カップリングさせた。カップリング濃度およびビーズカウントに基づいて、ビーズ上の分子の概数は、1ビーズ当たり抗体分子1.79×106個であった。抗体被覆ビーズを、Cellometerでの判定で3.2×108のビーズ/mLの濃度で溶液に懸濁した。
抗CD2抗体、抗CD28抗体で被覆した常磁性ビーズ、および抗CD19抗体 抗ID抗体被覆ビーズを作製した。マウス抗CD2抗体(クローンRPA-2.10, ED biosciences)、マウス抗CD28(LEAF精製クローンCD28.2, Biolegend)および実施例9に記載の抗ID B-2イディオタイプ抗体を、およそ4.5μmの直径を有する市販のトシル活性化超常磁性体(M-450と命名;ThermoFisher, Waltham MA)の表面に共有カップリングさせた。
CD4+細胞およびCD8+細胞の別個の組成物をヒトドナーから単離し、活性化し、FMC63に由来するscFvを有する抗CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入した。次いで、各ドナー由来のCD4+T細胞およびCD8+T細胞を別々に採取し、製剤化し、そして低温凍結した。低温凍結した操作されたCD4+およびCD8+T細胞を融解し、同じドナー由来のCD4+T細胞およびCD8+T細胞比1:1で製剤化して、CAR+T細胞を含有するT細胞組成物を作製した。抗CD19 CARに対する抗IDコンジュゲートビーズを、ビーズ:細胞比1:1で、細胞と14日間インキュベートした。
抗CD19 CARを発現するT細胞を含有する操作されたT細胞組成物を、異なる化合物またはビヒクル対照の存在下で、3人の別個のドナーから作製した。
Claims (37)
- (i)2μmと5μmとの間の直径を含むビーズである粒子、および
(ii)ビーズの表面と結びついた結合分子
を含む表面修飾粒子であって、
結合分子が、特異的にキメラ抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと結合し、かつ、
結合分子が、(i)抗原結合ドメインにより認識されるBCMAである、もしくは、抗原結合ドメインにより認識されるBCMAの細胞外ドメインもしくはその一部である、組換え抗原、または(ii)抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、
表面修飾粒子。 - 結合分子が、組換え抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、該リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、請求項1記載の表面修飾粒子。
- 結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、請求項1または2記載の表面修飾粒子。
- 部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、かつ/または
部分構造が、Fcドメインであるかもしくはそれを含む、
請求項3記載の表面修飾粒子。 - 結合分子が、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントを含み、抗原結合ドメインにより認識される抗原が、CD19である、請求項1~4のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
- キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、請求項5記載の表面修飾粒子。
- キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、請求項5記載の表面修飾粒子。
- 抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、請求項6または7記載の表面修飾粒子。
- 抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部を含む、かつ/または
抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合性フラグメントが、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部を含む、かつ/または
抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体もしくは完全長抗体である、
請求項1~8のいずれか一項記載の表面修飾粒子。 - 結合分子が、結合分子のC末端の100アミノ酸でまたは100アミノ酸以内で、粒子に結びついている、請求項1~9のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
- 結合分子が、前記粒子に共有結合的に結びついている、かつ/または
結合分子が、表面に露出した官能基を介して前記粒子に共有結合的に結びついており、表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基、もしくはヒドラジン基から選択される、かつ/または
結合分子が、トシル基である表面に露出した官能基を介して前記粒子に共有結合的に結びついている、
請求項1~10のいずれか一項記載の表面修飾粒子。 - ビーズである、請求項1~11のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
- 2μmと5μmとの間との間の直径または2.8μmもしくは4.5μmの直径を有する、請求項1~12のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
- 結合分子の少なくとも10コピー、少なくとも102コピー、少なくとも103コピー、少なくとも104コピー、少なくとも105コピーもしくは少なくとも106コピーを含む、請求項1~13のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
- 前記粒子が、粒子の表面と結びついた少なくとも1種の作用物質をさらに含み、少なくとも1種の作用物質が、細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する、請求項1~14のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
- 少なくとも1種の作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、かつ/または
少なくとも1つの作用物質が、粒子に共有結合的に結びついている、かつ/または
結合分子と、粒子と結びついている少なくとも1種の作用物質との比が、1:1である、
請求項15記載の表面修飾粒子。 - 追加的な分子が、共刺激分子もしくは活性化共受容体である、または
追加的な分子が、OX-40、ICOS、DAP10、B7-1、B7-2、CD28、もしくは4-1BBである、または
追加的な分子が、抑制性受容体である、または
追加的な分子が、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLA、もしくはTIGITである、または
追加的な分子が、T細胞表面タンパク質である、または
追加的な分子が、CD2もしくはCD3である、または
追加的な分子が、CD2もしくはCD28である、
請求項15または16記載の表面修飾粒子。 - 抗CD2抗体および抗CD28抗体のうち一方または両方を含む、請求項17記載の表面修飾粒子。
- 請求項1~18のいずれか一項記載の複数の表面修飾粒子を含む、組成物。
- 組成物中の結合分子の濃度が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間である、あるいは
組成物中の結合分子の濃度が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mLである、
請求項19記載の組成物。 - 複数の表面修飾粒子が、2μmと5μmとの間の平均直径を含むか、または
複数の表面修飾粒子が、1g/cm3と2g/cm3との間の平均密度を含む、
請求項19または20記載の組成物。 - 請求項1~18のいずれか一項記載の表面修飾粒子または請求項19~21のいずれか一項記載の組成物と、使用説明書とを含む、キットであって、任意で、
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から選択もしくは富化するためのものであるか、または
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から刺激もしくは増大させるためのものである、
キット。 - 請求項1~18のいずれか一項記載の表面修飾粒子または請求項19~21のいずれか一項記載の組成物と共に、細胞集団をインキュベートする工程を含む、細胞を増大させるための方法。
- 前記集団が、特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を含み、かつ
表面修飾粒子の結合分子または組成物中の表面修飾粒子のそれぞれの結合分子が、キメラ抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと特異的に結合するかまたはそれを特異的に認識し、かつ
結合分子の細胞外抗原結合ドメインへの結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導する、
請求項23記載の方法。 - 細胞外抗原結合ドメインが、特異的にB細胞成熟抗原(BCMA)と結合するかまたはそれを認識し、かつ
結合分子が、BCMAの細胞外ドメインまたは細胞外抗原結合ドメインにより認識される該細胞外ドメインの一部である、
請求項24に記載の方法。 - 細胞外抗原結合ドメインが、特異的にCD19と結合するかまたはそれを認識し、かつ
結合分子が、該抗原結合ドメインと特異的に結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、
請求項24に記載の方法。 - インキュベートする間に、集団中の総細胞と組成物の複数の表面修飾粒子との比が、5:1~1:5、3:1~1:3、もしくは2:1~1:2(両端の値を含む)である、請求項23~26のいずれか一項記載の方法。
- 前記比が、1:1である、請求項27記載の方法。
- インキュベーションが、2時間超、4時間超、8時間超、12時間超、24時間超、2日超、3日超、4日超、5日超、6日超、7日超、8日超、9日超、10日超、11日超、12日超、13日超、14日超、15日超、もしくは16日超にわたって実施される、請求項23~28のいずれか一項記載の方法。
- 前記集団が、免疫細胞を含む、かつ/または
前記集団が、T細胞もしくはNK細胞を含む、かつ/または
前記集団が、人工多能性幹細胞(iPSC)を含む、かつ/または
前記集団が、CD4+ T細胞およびCD8+ T細胞のうち一方もしくは両方を含む、かつ/または
前記集団が、対象、任意でヒト対象から得られた初代細胞を含む、
請求項23~29のいずれか一項記載の方法。 - CD4+細胞とCD8+細胞との比が、1:2と2:1との間もしくは1:3と3:1との間であるか、または1:1である、請求項30記載の方法。
- (a)細胞の組成物を、キメラ抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件下で接触させる工程であって、それにより、インプット組成物を産生する、工程、および
(b)インプット組成物の細胞を、請求項23~31のいずれか一項記載の方法によりインキュベートする工程
を含む、細胞を遺伝子操作する方法。 - 接触させる工程およびインキュベートする工程の少なくとも一部が、同時に実施される、請求項32記載の方法。
- 接触させる工程が、ウイルスベクターによる形質導入により実施される、請求項32または33記載の方法。
- ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、ガンマレトロウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターである、請求項34記載の方法。
- キメラ抗原受容体を含むアウトプット組成物中の細胞の数が、インプット組成物中の抗原受容体を含む細胞の数と比較して、1.2倍、2.0倍、3.0倍、4.0倍、5.0倍、6.0倍、7.0倍、8.0倍、9.0倍、10倍またはそれよりも大きく増加または富化される、請求項32~35のいずれか一項記載の方法。
- 請求項1~18のいずれか一項記載の表面修飾粒子または請求項19~21のいずれか一項記載の組成物と、細胞集団を接触させる工程を含む、細胞を選択または富化する方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022157444A JP2022185055A (ja) | 2017-07-29 | 2022-09-30 | 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 |
Applications Claiming Priority (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762538671P | 2017-07-29 | 2017-07-29 | |
US62/538,671 | 2017-07-29 | ||
US201762596742P | 2017-12-08 | 2017-12-08 | |
US62/596,742 | 2017-12-08 | ||
US201862628889P | 2018-02-09 | 2018-02-09 | |
US62/628,889 | 2018-02-09 | ||
US201862665468P | 2018-05-01 | 2018-05-01 | |
US62/665,468 | 2018-05-01 | ||
PCT/US2018/044263 WO2019027850A1 (en) | 2017-07-29 | 2018-07-28 | CELL EXPANSION REAGENTS EXPRESSING RECOMBINANT RECEPTORS |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022157444A Division JP2022185055A (ja) | 2017-07-29 | 2022-09-30 | 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020528753A JP2020528753A (ja) | 2020-10-01 |
JP2020528753A5 JP2020528753A5 (ja) | 2021-09-02 |
JP7337773B2 true JP7337773B2 (ja) | 2023-09-04 |
Family
ID=63312464
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020504326A Active JP7337773B2 (ja) | 2017-07-29 | 2018-07-28 | 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 |
JP2022157444A Pending JP2022185055A (ja) | 2017-07-29 | 2022-09-30 | 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022157444A Pending JP2022185055A (ja) | 2017-07-29 | 2022-09-30 | 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20230242654A1 (ja) |
EP (1) | EP3661528A1 (ja) |
JP (2) | JP7337773B2 (ja) |
KR (1) | KR20200064060A (ja) |
CN (1) | CN111246861A (ja) |
AU (1) | AU2018310452A1 (ja) |
BR (1) | BR112020001719A2 (ja) |
CA (1) | CA3070573A1 (ja) |
IL (1) | IL272063A (ja) |
MX (1) | MX2020000900A (ja) |
PH (1) | PH12020500160A1 (ja) |
SG (1) | SG11202000606TA (ja) |
WO (1) | WO2019027850A1 (ja) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111544585A (zh) * | 2019-02-11 | 2020-08-18 | 北京卡替医疗技术有限公司 | 一种可助推免疫细胞在体内扩增的佐剂 |
WO2020214937A1 (en) * | 2019-04-19 | 2020-10-22 | Allogene Therapeutics, Inc. | Antibodies against 4g7-derived chimeric antigen receptors |
WO2021100585A1 (ja) * | 2019-11-20 | 2021-05-27 | 国立大学法人東海国立大学機構 | キメラ抗原受容体遺伝子改変リンパ球の調製方法 |
AU2021263765A1 (en) | 2020-04-28 | 2022-12-01 | Juno Therapeutics, Inc. | Combination of BCMA-directed T cell therapy and an immunomodulatory compound |
CN112143707A (zh) * | 2020-09-29 | 2020-12-29 | 广东先康达生物科技有限公司 | 一种治疗自身免疫细胞的免疫细胞及其应用 |
KR102497904B1 (ko) * | 2021-02-10 | 2023-02-10 | 재단법인 아산사회복지재단 | 세포 원심분리 및 농축을 이용한 면역세포 검출 방법 및 면역세포 검출용 칩 |
AU2022241654A1 (en) | 2021-03-22 | 2023-09-28 | Juno Therapeutics, Inc. | Methods of determining potency of a therapeutic cell composition |
KR20230158573A (ko) | 2021-03-22 | 2023-11-20 | 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 | 바이러스 벡터 입자의 효력을 평가하는 방법 |
CN113388042B (zh) * | 2021-06-28 | 2022-02-01 | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 | 一种重组蛋白、重组表达载体、重组细胞和nk细胞激活磁珠及其制备方法和应用 |
WO2023072006A1 (zh) * | 2021-10-25 | 2023-05-04 | 黄�俊 | 多聚体在car表达细胞检测和细胞制备中的应用 |
WO2023102132A1 (en) * | 2021-12-01 | 2023-06-08 | Emory University | Multi-cytokine surface loaded particles and uses in stimulating immune cells for therapeutic applications |
US20240285762A1 (en) * | 2023-02-28 | 2024-08-29 | Juno Therapeutics, Inc. | Cell therapy for treating systemic autoimmune diseases |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016104338A1 (ja) | 2014-12-22 | 2016-06-30 | 和光純薬工業株式会社 | ビオチン化核酸の分離方法 |
JP2017006070A (ja) | 2015-06-24 | 2017-01-12 | 国立研究開発法人情報通信研究機構 | 細胞内膜構造形成方法および細胞内膜構造観察方法 |
WO2017059796A1 (en) | 2015-10-08 | 2017-04-13 | Shanghai Sidansai Biotechnology Co., Ltd | Activation and expansion of t cells |
Family Cites Families (88)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5876435A (ja) | 1981-10-30 | 1983-05-09 | Japan Synthetic Rubber Co Ltd | 重合体粒子 |
US4452773A (en) | 1982-04-05 | 1984-06-05 | Canadian Patents And Development Limited | Magnetic iron-dextran microspheres |
NO155316C (no) | 1982-04-23 | 1987-03-11 | Sintef | Fremgangsmaate for fremstilling av magnetiske polymerpartikler. |
US4554088A (en) | 1983-05-12 | 1985-11-19 | Advanced Magnetics Inc. | Magnetic particles for use in separations |
WO1986002077A1 (en) | 1984-10-02 | 1986-04-10 | Meade Harry M | Production of streptavidin-like polypeptides |
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
US4795698A (en) | 1985-10-04 | 1989-01-03 | Immunicon Corporation | Magnetic-polymer particles |
US5219740A (en) | 1987-02-13 | 1993-06-15 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Retroviral gene transfer into diploid fibroblasts for gene therapy |
US5395688A (en) | 1987-10-26 | 1995-03-07 | Baxter Diagnostics Inc. | Magnetically responsive fluorescent polymer particles |
US5091206A (en) | 1987-10-26 | 1992-02-25 | Baxter Diagnostics Inc. | Process for producing magnetically responsive polymer particles and application thereof |
EP0452342B1 (en) | 1988-12-28 | 1994-11-30 | MILTENYI, Stefan | Methods and materials for high gradient magnetic separation of biological materials |
FR2645160B1 (ja) | 1989-03-31 | 1992-10-02 | Rhone Poulenc Chimie | |
FR2656318B1 (fr) | 1989-12-27 | 1994-02-04 | Rhone Poulenc Chimie | Microspheres "core-shell" magnetisables a base d'organopolysiloxane reticule, leur procede de preparation et leur application en biologie. |
US5318797A (en) | 1990-06-20 | 1994-06-07 | Clarkson University | Coated particles, hollow particles, and process for manufacturing the same |
US5200084A (en) | 1990-09-26 | 1993-04-06 | Immunicon Corporation | Apparatus and methods for magnetic separation |
DE4228458A1 (de) | 1992-08-27 | 1994-06-01 | Beiersdorf Ag | Multicistronische Expressionseinheiten und deren Verwendung |
DE4237113B4 (de) | 1992-11-03 | 2006-10-12 | "Iba Gmbh" | Peptide und deren Fusionsproteine, Expressionsvektor und Verfahren zur Herstellung eines Fusionsproteins |
US5925517A (en) | 1993-11-12 | 1999-07-20 | The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. | Detectably labeled dual conformation oligonucleotide probes, assays and kits |
US5538848A (en) | 1994-11-16 | 1996-07-23 | Applied Biosystems Division, Perkin-Elmer Corp. | Method for detecting nucleic acid amplification using self-quenching fluorescence probe |
US5827642A (en) | 1994-08-31 | 1998-10-27 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Rapid expansion method ("REM") for in vitro propagation of T lymphocytes |
WO1996013593A2 (en) | 1994-10-26 | 1996-05-09 | Procept, Inc. | Soluble single chain t cell receptors |
WO1996018105A1 (en) | 1994-12-06 | 1996-06-13 | The President And Fellows Of Harvard College | Single chain t-cell receptor |
US20020150914A1 (en) | 1995-06-30 | 2002-10-17 | Kobenhavns Universitet | Recombinant antibodies from a phage display library, directed against a peptide-MHC complex |
US6013516A (en) | 1995-10-06 | 2000-01-11 | The Salk Institute For Biological Studies | Vector and method of use for nucleic acid delivery to non-dividing cells |
US5834121A (en) | 1996-01-16 | 1998-11-10 | Solid Phase Sciences Corp. | Composite magnetic beads |
DE19608753C1 (de) | 1996-03-06 | 1997-06-26 | Medigene Gmbh | Transduktionssystem und seine Verwendung |
WO1997034634A1 (en) | 1996-03-20 | 1997-09-25 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Single chain fv constructs of anti-ganglioside gd2 antibodies |
DE69605062T2 (de) | 1996-04-24 | 2000-07-13 | Claude Fell | Zelltrennungsvorrichtung für biologische flüssigkeiten wie blut |
SE506700C2 (sv) | 1996-05-31 | 1998-02-02 | Mikael Kubista | Sond och förfaranden för analys av nukleinsyra |
CA2257109C (en) | 1996-06-04 | 2009-10-06 | University Of Utah Research Foundation | Monitoring hybridization during pcr |
DE19641876B4 (de) | 1996-10-10 | 2011-09-29 | Iba Gmbh | Streptavidinmuteine |
DK0973928T3 (da) | 1997-03-11 | 2010-08-09 | Univ Minnesota | DNA-baseret transposonsystem til indføring af nukleinsyre i DNA i en celle |
JP2001519143A (ja) | 1997-10-02 | 2001-10-23 | スノル・モレキュラー・コーポレーション | 可溶性の一本鎖t細胞レセプタータンパク質 |
US6074884A (en) | 1997-10-09 | 2000-06-13 | Coulter International Corp. | Stable protein-nickel particles and methods of production and use thereof |
JP2001523450A (ja) | 1997-11-13 | 2001-11-27 | リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ミネソタ | 細胞のdnaへの核酸の導入のための核酸転移ベクター |
US5994136A (en) | 1997-12-12 | 1999-11-30 | Cell Genesys, Inc. | Method and means for producing high titer, safe, recombinant lentivirus vectors |
SK17332000A3 (sk) | 1998-05-19 | 2001-06-11 | Avidex Limited | Preskladaný rekombinantný t bunkový receptor-tcr, sekvencie nukleových kyselín, ktoré kódujú rekombinantné tcr reťazce rekombinantného tcr, a spôsob jeho výroby |
GB9812768D0 (en) | 1998-06-13 | 1998-08-12 | Zeneca Ltd | Methods |
JP2002524081A (ja) | 1998-09-04 | 2002-08-06 | スローン − ケッタリング インスティチュート フォー キャンサー リサーチ | 前立腺−特異的膜抗原に特異的な融合受容体およびその使用 |
WO2000023573A2 (en) | 1998-10-20 | 2000-04-27 | City Of Hope | Cd20-specific redirected t cells and their use in cellular immunotherapy of cd20+ malignancies |
AU1675600A (en) | 1998-12-24 | 2000-07-31 | Biosafe S.A. | Blood separation system particularly for concentrating hematopoietic stem cells |
US20040191260A1 (en) | 2003-03-26 | 2004-09-30 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Compositions capable of specifically binding particular human antigen presenting molecule/pathogen-derived antigen complexes and uses thereof |
AU2001265346A1 (en) | 2000-06-02 | 2001-12-17 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Artificial antigen presenting cells and methods of use thereof |
ES2267803T3 (es) | 2000-08-11 | 2007-03-16 | University Of Utah Research Foundation | Sondas de oligonucleotidos marcados individuales. |
JP5312721B2 (ja) | 2000-11-07 | 2013-10-09 | シティ・オブ・ホープ | Cd19特異的再指向免疫細胞 |
EP1227321A1 (en) | 2000-12-28 | 2002-07-31 | Institut für Bioanalytik GmbH | Reversible MHC multimer staining for functional purification of antigen-specific T cells |
DE10113776B4 (de) | 2001-03-21 | 2012-08-09 | "Iba Gmbh" | Isoliertes streptavidinbindendes, kompetitiv eluierbares Peptid, dieses umfassendes Fusionspeptid, dafür codierende Nukleinsäure, Expressionsvektor, Verfahren zur Herstellung eines rekombinanten Fusionsproteins und Verfahren zum Nachweis und/oder zur Gewinnung des Fusionsproteins |
US7070995B2 (en) | 2001-04-11 | 2006-07-04 | City Of Hope | CE7-specific redirected immune cells |
US20090257994A1 (en) | 2001-04-30 | 2009-10-15 | City Of Hope | Chimeric immunoreceptor useful in treating human cancers |
NZ531208A (en) | 2001-08-31 | 2005-08-26 | Avidex Ltd | Multivalent soluble T cell receptor (TCR) complexes |
US7939059B2 (en) | 2001-12-10 | 2011-05-10 | California Institute Of Technology | Method for the generation of antigen-specific lymphocytes |
US6992176B2 (en) | 2002-02-13 | 2006-01-31 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Antibody having a T-cell receptor-like specificity, yet higher affinity, and the use of same in the detection and treatment of cancer, viral infection and autoimmune disease |
WO2003070752A2 (en) | 2002-02-20 | 2003-08-28 | Dyax Corporation | Mhc-peptide complex binding ligands |
ITCZ20020002A1 (it) | 2002-04-11 | 2003-10-13 | Parco Scient E Tecnologico Del | Dispositivo e metodo per il rilevamento simultaneo di differenti anticorpi e antigeni in campioni clinici, alimentari ed ambientali |
US7446190B2 (en) | 2002-05-28 | 2008-11-04 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors |
WO2004033685A1 (en) | 2002-10-09 | 2004-04-22 | Avidex Ltd | Single chain recombinant t cell receptors |
US20050129671A1 (en) | 2003-03-11 | 2005-06-16 | City Of Hope | Mammalian antigen-presenting T cells and bi-specific T cells |
US20060034850A1 (en) | 2004-05-27 | 2006-02-16 | Weidanz Jon A | Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof |
US20090226474A1 (en) | 2004-05-27 | 2009-09-10 | Weidanz Jon A | Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof |
US20090304679A1 (en) | 2004-05-27 | 2009-12-10 | Weidanz Jon A | Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof |
ATE475669T1 (de) | 2004-06-29 | 2010-08-15 | Immunocore Ltd | Einen modifizierten t-zellen-rezeptor exprimierende zellen |
ATE468140T1 (de) | 2005-03-23 | 2010-06-15 | Biosafe Sa | Integriertes system zum sammeln, bearbeiten und transplantieren von zell-subsets, einschliesslich adulter stammzellen, für die regenerative medizin |
US20100207051A1 (en) | 2006-12-21 | 2010-08-19 | Invitrogen Dynal As | Particles and their use in a method for isolating nucleic acid or a method for isolating phosphoproteins |
EP2856876B1 (en) | 2007-03-30 | 2018-01-31 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Constitutive expression of costimulatory ligands on adoptively transferred T lymphocytes |
JP5456689B2 (ja) | 2007-12-07 | 2014-04-02 | ミルテンイ バイオテック ゲーエムベーハー | 試料を少なくとも2つの成分に分離する遠心分離機 |
US8479118B2 (en) | 2007-12-10 | 2013-07-02 | Microsoft Corporation | Switching search providers within a browser search box |
HUE036103T2 (hu) | 2007-12-11 | 2018-06-28 | Univ North Carolina Chapel Hill | Polipurin szakaszon módosított retrovirális vektorok |
US20120164718A1 (en) | 2008-05-06 | 2012-06-28 | Innovative Micro Technology | Removable/disposable apparatus for MEMS particle sorting device |
JP5173594B2 (ja) | 2008-05-27 | 2013-04-03 | キヤノン株式会社 | 管理装置、画像形成装置及びそれらの処理方法 |
WO2011044186A1 (en) | 2009-10-06 | 2011-04-14 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Human single-chain t cell receptors |
SG190997A1 (en) | 2010-12-09 | 2013-07-31 | Univ Pennsylvania | Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer |
US9987308B2 (en) | 2011-03-23 | 2018-06-05 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Method and compositions for cellular immunotherapy |
EP2694553B1 (en) | 2011-04-01 | 2017-10-11 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | T cell receptor-like antibodies specific for a wt1 peptide presented by hla-a2 |
US8398282B2 (en) | 2011-05-12 | 2013-03-19 | Delphi Technologies, Inc. | Vehicle front lighting assembly and systems having a variable tint electrowetting element |
WO2013011011A2 (en) | 2011-07-18 | 2013-01-24 | Iba Gmbh | Method of reversibly staining a target cell |
CN104080797A (zh) | 2011-11-11 | 2014-10-01 | 弗雷德哈钦森癌症研究中心 | 针对癌症的靶向细胞周期蛋白a1的t细胞免疫疗法 |
AU2013221672B2 (en) | 2012-02-13 | 2017-11-09 | Seattle Children's Hospital D/B/A Seattle Children's Research Institute | Bispecific chimeric antigen receptors and therapeutic uses thereof |
WO2013126726A1 (en) | 2012-02-22 | 2013-08-29 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Double transgenic t cells comprising a car and a tcr and their methods of use |
WO2013124474A2 (en) | 2012-02-23 | 2013-08-29 | Stage Cell Therapeutics Gmbh | Chromatographic isolation of cells and other complex biological materials |
SG11201407175RA (en) | 2012-05-03 | 2014-12-30 | Hutchinson Fred Cancer Res | Enhanced affinity t cell receptors and methods for making the same |
SG11201501259QA (en) | 2012-08-20 | 2015-03-30 | Hutchinson Fred Cancer Res | Method and compositions for cellular immunotherapy |
RU2020124583A (ru) | 2012-10-02 | 2020-08-03 | Мемориал Слоан-Кеттеринг Кэнсер Сентер | Композиции и способы для иммунотерапии |
CN105073770B (zh) | 2012-11-16 | 2019-08-06 | Iba股份有限公司 | 链霉亲和素突变蛋白及其使用方法 |
DE112012007250T5 (de) | 2012-12-20 | 2015-10-08 | Mitsubishi Electric Corp. | Fahrzeuginterne Vorrichtung und Programm |
US9108442B2 (en) | 2013-08-20 | 2015-08-18 | Ricoh Company, Ltd. | Image forming apparatus |
GB201506423D0 (en) * | 2015-04-15 | 2015-05-27 | Tc Biopharm Ltd | Gamma delta T cells and uses thereof |
KR20240023204A (ko) | 2014-11-05 | 2024-02-20 | 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 | 형질도입 및 세포 프로세싱을 위한 방법 |
MX2019001184A (es) * | 2016-07-29 | 2019-09-26 | Juno Therapeutics Inc | Anticuerpos anti-idiotípicos y métodos relacionados. |
-
2018
- 2018-07-28 JP JP2020504326A patent/JP7337773B2/ja active Active
- 2018-07-28 AU AU2018310452A patent/AU2018310452A1/en active Pending
- 2018-07-28 CA CA3070573A patent/CA3070573A1/en active Pending
- 2018-07-28 BR BR112020001719-1A patent/BR112020001719A2/pt unknown
- 2018-07-28 WO PCT/US2018/044263 patent/WO2019027850A1/en unknown
- 2018-07-28 CN CN201880062467.5A patent/CN111246861A/zh active Pending
- 2018-07-28 KR KR1020207006167A patent/KR20200064060A/ko not_active Application Discontinuation
- 2018-07-28 MX MX2020000900A patent/MX2020000900A/es unknown
- 2018-07-28 EP EP18759009.6A patent/EP3661528A1/en active Pending
- 2018-07-28 US US16/634,497 patent/US20230242654A1/en active Pending
- 2018-07-28 SG SG11202000606TA patent/SG11202000606TA/en unknown
-
2020
- 2020-01-15 IL IL272063A patent/IL272063A/en unknown
- 2020-01-22 PH PH12020500160A patent/PH12020500160A1/en unknown
-
2022
- 2022-09-30 JP JP2022157444A patent/JP2022185055A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016104338A1 (ja) | 2014-12-22 | 2016-06-30 | 和光純薬工業株式会社 | ビオチン化核酸の分離方法 |
JP2017006070A (ja) | 2015-06-24 | 2017-01-12 | 国立研究開発法人情報通信研究機構 | 細胞内膜構造形成方法および細胞内膜構造観察方法 |
WO2017059796A1 (en) | 2015-10-08 | 2017-04-13 | Shanghai Sidansai Biotechnology Co., Ltd | Activation and expansion of t cells |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20230242654A1 (en) | 2023-08-03 |
CN111246861A (zh) | 2020-06-05 |
RU2020108657A3 (ja) | 2022-04-12 |
CA3070573A1 (en) | 2019-02-07 |
EP3661528A1 (en) | 2020-06-10 |
PH12020500160A1 (en) | 2020-09-28 |
JP2020528753A (ja) | 2020-10-01 |
AU2018310452A1 (en) | 2020-02-13 |
KR20200064060A (ko) | 2020-06-05 |
RU2020108657A (ru) | 2021-09-02 |
MX2020000900A (es) | 2021-01-08 |
WO2019027850A1 (en) | 2019-02-07 |
BR112020001719A2 (pt) | 2020-07-21 |
SG11202000606TA (en) | 2020-02-27 |
JP2022185055A (ja) | 2022-12-13 |
IL272063A (en) | 2020-03-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7337773B2 (ja) | 組換え受容体を発現している細胞を増大させるための試薬 | |
US20240101613A1 (en) | Oligomeric particle reagents and methods of use thereof | |
EP3877054B1 (en) | Process for producing genetically engineered t cells | |
KR20210057730A (ko) | 조작 세포 및 이의 조성물 생성 방법 | |
KR20200046045A (ko) | 유전자 조작된 세포를 제조하기 위한 방법 및 조성물 | |
KR20220101641A (ko) | 세포 선택 및/또는 자극 장치 및 사용 방법 | |
EP3704229B1 (en) | Process for producing a t cell composition | |
US20230181641A1 (en) | Process for producing donor-batched cells expressing a recombinant receptor | |
RU2783956C2 (ru) | Реагенты для размножения клеток, экспрессирующих рекомбинантные рецепторы | |
US20230090117A1 (en) | Methods for t cell transduction | |
RU2795454C2 (ru) | Способы и композиции для получения генно-инженерных клеток | |
RU2777989C2 (ru) | Олигомерные реагенты в виде частиц и способы их применения | |
EA043641B1 (ru) | Способ получения t-клеточной композиции |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200424 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20210210 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210726 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210726 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220527 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220705 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220930 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20220930 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230201 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230427 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230726 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230823 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7337773 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |