JP7130910B2

JP7130910B2 - 新規な方法

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Publication number: JP7130910B2
Application number: JP2019521132A
Authority: JP
Inventors: ドミニクイムフェルド，; ロルフシュエッツ，; エリアーヌウルスラワンダー，
Original assignee: DSM IP Assets BV
Current assignee: DSM IP Assets BV
Priority date: 2016-10-27
Filing date: 2017-10-26
Publication date: 2022-09-06
Anticipated expiration: 2037-10-26
Also published as: KR20190075974A; EP3532169A1; WO2018077990A1; CN109890466A; US20190314269A1; JP2019532966A; BR112019008288A2

Description

発明の詳細な説明

本出願は、粉塵粒子、煙霧または煙の大気中への放出により引き起こされる大気汚染の作用から、特にディーゼルおよび都市粉塵特定物質の有害作用などからケラチノサイトを保護する方法であって、プルランおよびナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物ならびにそれらの混合物からなる群から選択される有効量の活性物質を含む化粧料組成物を皮膚に適用することを含む、方法に関する。

いくつかの都市環境は、大気がヒト、動物および植物に有害になるように、ガス、粉塵粒子、煙霧（もしくは煙）または匂いが大気に放出されると起こる、大気汚染のピークに定期的に曝される。大気汚染は、人間の行為と自然の行為の両方に起因し得る。空気を汚染する自然現象として、森林火災、火山噴火、風食、花粉飛散、有機化合物の蒸発および自然放射能が挙げられる。自然の出来事に由来する汚染はそれほど頻繁でない。大気汚染の大部分は、産業および製造活動ならびに化石燃料の燃焼からの排出（たとえば自動車エンジンからの排出）を含む人間の活動に起因する。

粒子状物質（ＰＭ）は、化学反応、燃料燃焼（たとえば、石炭、木材、ディーゼルの燃焼）、産業プロセス、農業（農耕、焼畑）および未舗装道路を通して、または道路建設中に形成される。

よって、都市部の人はその日常環境において、様々な空気汚染物質により、たとえば特に粒子状材料、たとえばケラチノサイトの細胞生存に悪影響を与えるディーゼルおよび都市粉塵粒子により、皮膚を、ひいては特にケラチノサイトなどの皮膚細胞をも攻撃するあらゆる種類の因子に曝され得る。

以上のように、特にディーゼルおよび都市特定物質などの大気汚染の有害作用からケラチノサイトを保護する化粧料組成物が現在も求められている。

驚いたことに、プルランおよびナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物ならびにそれらの混合物が、大気中に見られる汚染物質の悪影響から、たとえば特にディーゼルおよび都市粉塵特定物質からケラチノサイトを効果的に保護することが見出された。

よって、本発明の１つの目的は、粉塵粒子、煙霧または煙の大気中への放出により引き起こされる大気汚染の悪影響から、特にディーゼルおよび都市粉塵特定物質の有害作用からケラチノサイトを保護する方法であって、プルランおよびナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物ならびにそれらの混合物からなる群から選択される有効量の活性物質を含む化粧料組成物を皮膚に適用することと、任意選択的に保護作用を評価することとを含む、方法に関する。

本発明のもう１つの目的は、粉塵粒子、煙霧または煙の大気中への放出により引き起こされる大気汚染の有害作用からの、特にディーゼルおよび都市粉塵特定物質の有害作用からのケラチノサイトの保護のための、プルランおよびナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物ならびにそれらの混合物からなる群から選択される活性物質の、化粧料組成物を調製するための使用である。

本発明のさらなる目的は、ディーゼルおよび都市粉塵特定物質の有害作用からのケラチノサイトの保護のための、プルランおよびナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物ならびにそれらの混合物からなる群から選択される活性物質の化粧料使用に関する。

プルランは、酵母様真菌アウレオバシジウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍｐｕｌｌｕｌａｎｓ）により産生される多糖である。プルランは、主に１，６結合したマルトトリオースおよび一部散在するマルトテトラオース単位からなる本質的に直鎖状のグルカンである。プルランは、たとえばアクアβ（Ｄａｉｓｏ，Ｃｏ．，Ｌｔｄ．製）またはプルラン（株式会社林原（ＨａｙａｓｈｉｂａｒａＣｏ．，Ｌｔｄ．）製）として市販されている。

ナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｕｌａｔａ）抽出物［ＣＡＳ９２１２８－８２－０］は、好ましくはバイオテクノロジーにより生産された微細藻類ナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｕｌａｔａ）の抽出物である。そうした抽出物は、それぞれの藻類の培養、続いて細胞の回収を行うことにより得られる。その後回収した細胞を再水和させ、熱水で抽出する。その後粗抽出物を遠心し、限外濾過を行う。こうして得られたナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｕｌａｔａ）抽出物は、乾燥形態で、または既知の固形分、好ましくは、総水性ナンノクロロプシス（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓ）抽出物に対して０．５～１０ｗｔ．％の範囲で、好ましくは１～５ｗｔ．％の範囲で選択される固形分を含む濃縮した水性抽出物の形態で使用してもよい。

本発明のすべての実施形態において、活性物質は、好ましくはナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物およびプルランを含む活性物質ブレンドの形態で使用される。本発明による特に好適な活性物質ブレンドは、ナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物およびプルランの水性ブレンドである。こうした活性物質ブレンドは、好ましくは＞５０％の水、１～５％のナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物、１０～２５％のプルランおよび３％未満の防腐剤、たとえば好ましくは各々０．１～１％のフェノキシエタノール、安息香酸ナトリウムおよびソルビン酸カリウムから本質的になる。本発明による特に好ましいブレンドは、ＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ（ＤＳＭＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ）から入手可能なＰＥＰＨＡ（登録商標）－ＴＩＧＨＴである。

「有効量」という用語は、生理学的作用を得るのに必要な量をいう。生理学的作用は、１回適用用量により達成してもあるいは反復適用により達成してもよい。投与される投薬量は、言うまでもなく、既知の因子、たとえばそれぞれの活性物質を含む特定の化粧料組成物の生理学的特徴ならびにその投与モードおよび投与経路；年齢、症状の性質および程度；併用処置の種類；処置の頻度；ならびに所望の効果によって異なってもよく、当業者により調整してもよい。

「有害作用から保護する」という用語は、それぞれの活性物質／活性物質の混合物で処置していないケラチノサイトと比較してケラチノサイトの生存率が上昇することをいう。特定の好ましい実施形態では、ケラチノサイトの生存率は、無処置のケラチノサイトと比較すると少なくとも３％、一層好ましくは少なくとも５％上昇する。

「からなる／から本質的になる」という用語は、本発明により使用される場合、列挙された成分の総量が理想的には１００ｗｔ．％になることを意味する。しかしながら、少量の不純物または添加剤が存在し得ることを排除しない。ただしそうした不純物または添加剤の総量は、好ましくは３ｗｔ．％未満、一層好ましくは２ｗｔ．％未満、最も好ましくは１ｗｔ．％未満であり、かつそれらはそれぞれの原料を通じて入るものとする。

よって、別の実施形態では、本発明は、無処置のケラチノサイトと比較するとケラチノサイトの生存率が少なくとも３％、好ましくは少なくとも５％上昇する本発明による方法に言及する。

本発明による化粧料組成物に使用される活性物質の総量は、一般に化粧料組成物の総重量に対して０．００００１～１ｗｔ．％の範囲で、好ましくは０．００００３～０．５ｗｔ．％の範囲で選択される。

有利には、上記に示したすべての定義および優先度を有する、特にＰｅｐｈａ（登録商標）－Ｔｉｇｈｔなどの本発明による活性物質ブレンドの化粧料組成物中の量は、化粧料組成物の総重量に対して０．０１～１０ｗｔ．％の範囲で、一層好ましくは０．１～５ｗｔ．％の範囲で、最も好ましくは０．１～３ｗｔ．％の範囲で選択される。

好ましくは、皮膚に適用されるべき化粧料組成物の量は、好ましくは０．１～２ｍｇ／ｃｍ^２皮膚の範囲、最も好ましくは０．５～２ｍｇ／ｃｍ^２皮膚の範囲など、０．１～３ｍｇ／ｃｍ^２皮膚の範囲で選択される。

「化粧料組成物」という用語は、本明細書で使用する場合、皮膚および／もしくは頭皮の処置、ケアまたは皮膚および／もしくは頭皮の外観の改善を行うのに使用される組成物をいう。特定の有利な化粧料組成物は、スキンケア調製物である。

本発明による化粧料組成物は、特に皮膚などのケラチン物質の外用として理解され得る局所適用向きである。

本発明による化粧料組成物は局所適用向きであるため、生理学的に許容される媒体、すなわち特に皮膚などのケラチン物質との相性がよい媒体を含む。特に生理学的に許容される媒体は、化粧料的に、まずまず薬学的に許容されるキャリアである。

「化粧料的に許容されるキャリア」、「薬学的に許容されるキャリア」という用語はそれぞれ、本明細書で使用する場合、ケラチン物質との相性がよい生理学的に許容される媒体をいう。好適なキャリアは、当該技術分野において周知であり、最終用途に基づき選択される。好ましくは、本発明のキャリアは、皮膚への適用（たとえば、日焼け止め、クリーム、乳液、ローション、パック、セラム、ヒドロディスパージョン（ｈｙｄｒｏｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｓ）、ファンデーション、クリーム、クリームジェルまたはジェル等）に好適である。こうしたキャリアは、当業者によく知られており、皮膚適用に好適な１種または複数種の適合性のある液体もしくは固体充填剤希釈剤、賦形剤、添加剤またはビヒクルを含んでもよい。キャリアの正確な量は、それぞれ活性物質、活性物質ブレンド、および当業者がキャリアと異なるものと分類すると考えられる他の何らかの任意選択的な成分（たとえば、他の活性物質要素）のレベルによって異なる。本発明の化粧料組成物は、好ましくは化粧料組成物の約７５重量％～約９９．９９９重量％、一層好ましくは約８５重量％～約９９．９９重量％、さらに一層好ましくは９０重量％～約９９重量％、最も好ましくは約９３重量％～約９８重量％のキャリアを含む。

本発明の化粧料組成物は、クリーム、ワックス、ペースト、ローション、乳液、ムース、ジェル、オイル、トニックおよびスプレーを含む多種多様な製品タイプに製剤化してもよい。好ましくは活性物質、活性物質ブレンドは、それぞれローション、クリーム、ジェルおよびトニックに製剤化される。これらの製品形態は、以下に限定されるものではないが、ハンドローションおよびボディローション、顔用モイスチャライザー、老化防止剤、ファンデーションを含むメイクアップ料ならびに同種のものを含む、多くの用途に使用してもよい。そうした製品を製剤化するのに必要とされる任意の追加の要素は、製品タイプによって異なり、当業者により常法に従い選択され得る。

本発明の化粧料組成物は、エアロゾルとして製剤化されてスプレー式製品として皮膚に適用される場合、化粧料組成物に噴霧剤が加えられる。

本発明による化粧料組成物は、たとえば本発明による活性物質または活性物質ブレンドを化粧料的に許容されるキャリアと混合することにより、当該技術分野の従来の方法で調製することができる。

本発明の化粧料組成物（キャリアを含む）は、従来の補助剤および添加剤、たとえば防腐剤／酸化防止剤、脂肪物質／オイル、水、有機溶媒、シリコーン、増粘剤、柔軟剤、乳化剤、消泡剤、フレグランスなどの美容要素、界面活性剤、充填剤、アニオン性、カチオン性、非イオン性もしくは両性ポリマーまたはその混合物、噴霧剤、酸性化もしくは塩基性化剤、染料、着色剤／色素、研磨剤、吸収剤、キレート化剤および／もしくは金属イオン封鎖剤、精油、皮膚感覚剤、収斂薬、顔料またはこうした化粧料組成物として通常製剤化される他の任意の成分をさらに含んでもよい。

本発明によれば、本発明による化粧料組成物は、化粧料および／または医薬組成物に従来使用されていたさらなる化粧料的に活性な成分をさらに含んでもよい。例示的な活性成分は、皮膚美白剤；ＵＶ吸収剤、色素沈着過剰の処置のための薬剤；炎症の予防もしくは抑制のための薬剤；引き締め剤、保湿剤、鎮静剤および／または活性化剤のほか、弾性および皮膚バリアを改善する薬剤を包含する。

本発明の化粧料組成物に使用するのに好適な化粧料賦形剤、希釈剤、補助剤、添加剤、ならびにスキンケア業界で通常使用される活性成分の例は、たとえばオンラインＩＮＦＯＢＡＳＥ（ｈｔｔｐ：／／ｏｎｌｉｎｅ．ｐｅｒｓｏｎａｌｃａｒｅｃｏｕｎｃｉｌ．ｏｒｇ／ｊｓｐ／Ｈｏｍｅ．ｊｓｐ）でアクセス可能な、米国パーソナルケア製品評議会（ＰｅｒｓｏｎａｌＣａｒｅＰｒｏｄｕｃｔＣｏｕｎｃｉｌ）（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｅｒｓｏｎａｌｃａｒｅｃｏｕｎｃｉｌ．ｏｒｇ／）によるＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｓｍｅｔｉｃＩｎｇｒｅｄｉｅｎｔＤｉｃｔｉｏｎａｒｙ＆Ｈａｎｄｂｏｏｋに記載されているが、これに限定されるものではない。

さらなる活性成分のほか、賦形剤、希釈剤、補助剤、添加剤等の必要量は、所望の製品形態および用途に基づき、当業者により容易に決定され得る。これらの追加成分は、適切と見なされる場合、油相に加えても、水相に加えてもあるいは別々に加えてもよい。

本明細書に有用なさらなる化粧料的に活性な成分は、場合によっては、２つ以上の効果があってもよいし、あるいは２つ以上の作用機序で働いてもよい。

言うまでもなく、当業者は、上記の任意選択的な追加成分、補助剤、希釈剤および添加剤ならびに／またはそれぞれの量について、本発明による組み合わせと本質的に関連する有利な特性が、想定された追加物により有害な影響を受けないあるいは実質的に有害な影響を受けないように、注意して選択する。

本発明による化粧料組成物は、溶媒または脂肪物質中の懸濁物または分散物の形態でも、または代わりにエマルションまたはマイクロエマルション（特に水中油型（Ｏ／Ｗ）または油中水型（Ｗ／Ｏ）、水中シリコーン型（Ｓｉ／Ｗ）またはシリコーン中水型（Ｗ／Ｓｉ）、ＰＩＴによるエマルション、多重エマルション（たとえば油中水中油型（Ｏ／Ｗ／Ｏ）または水中油中水型（Ｗ／Ｏ／Ｗ））、ピッカリングエマルション、ヒドロゲル、アルコールゲル、リポゲル、単相もしくは多層溶液またはベシクル分散液の形態でも、あるいはさらにペンによって適用してもパックとしてもしくはスプレーとして適用してもよい他の通常の形態でもよい。

化粧料組成物が特にＯ／Ｗ、Ｗ／Ｏ、Ｓｉ／Ｗ、Ｗ／Ｓｉ、Ｏ／Ｗ／Ｏ多層、Ｗ／Ｏ／Ｗ多相のエマルションまたはピッカリングエマルションなどのエマルションである場合、そうした化粧料エマルション中に存在する油相の量は好ましくは、少なくとも１０ｗｔ．％であり、たとえば化粧料組成物の総重量に対して１０～６０ｗｔ．％の範囲で、好ましくは１５～５０ｗｔ．％の範囲で、最も好ましくは１５～４０ｗｔ．％の範囲である。

一実施形態では、本発明による化粧料組成物は有利には、Ｏ／Ｗ乳化剤の存在下で水相に分散した油相を含む水中油（Ｏ／Ｗ）エマルションの形態である。そうしたＯ／Ｗエマルションの調製は、当業者によく知られている。

本発明による化粧料組成物がＯ／Ｗエマルションである場合、本発明による化粧料組成物は有利には、クエン酸ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリルＳＥ（自己乳化型）、ステアリン酸、ステアリン酸の塩、ポリグリセリル－３－メチルグリコースジステアレートのリストから選択される少なくとも１種のＯ／ＷまたはＳｉ／Ｗ乳化剤を含む。さらなる好適な乳化剤として、リン酸エステルおよびその塩、たとえばリン酸セチル（たとえばＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ社のＡｍｐｈｉｓｏｌ（登録商標）Ａとしての）、セチルリン酸ジエタノールアミン（たとえばＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ社のＡｍｐｈｉｓｏｌ（登録商標）ＤＥＡとしての）、セチルリン酸カリウム（たとえばＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ社のＡｍｐｈｉｓｏｌ（登録商標）Ｋとしての）、セテアリル硫酸ナトリウム、ナトリウムグリセリルオレエートホスフェート、水素添加植物リン酸グリセリドおよびそれらの混合物がある。さらなる好適な乳化剤として、オレイン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、イソステアリン酸ソルビタン、ソルビタントリオレエート、セテアリルグルコシド、ラウリルグルコシド、デシルグルコシド、ステアロイルグルタミン酸ナトリウム、ポリステアリン酸スクロースおよび水和ポリイソブテンがある。さらに、乳化剤として１種または複数種の合成ポリマーを使用してもよい。たとえば、ＰＶＰエイコセンコポリマー、アクリレーツ／Ｃ１０－３０アクリル酸アルキルクロスポリマーおよびそれらの混合物。

少なくとも１種のＯ／Ｗ乳化剤、Ｓｉ／Ｗ乳化剤はそれぞれ好ましくは、化粧料組成物の総重量に対して０．５～１０ｗｔ．％の量で、特に０．５～６ｗｔ．％の範囲で、たとえばより具体的には０．５～５ｗｔ．％の範囲で、たとえば最も具体的には１～４ｗｔ．％の範囲で使用される。

本発明による化粧料組成物に使用されるべき特定の好適なＯ／Ｗ乳化剤は、リン酸エステル乳化剤、たとえば有利には８－１０アルキルエチルホスフェート、Ｃ９－１５アルキルホスフェート、セテアレス－２リン酸、セテアレス－５リン酸、セテス－８リン酸、セテス－１０リン酸、リン酸セチル、Ｃ６－１０パレス－４リン酸、Ｃ１２－１５パレス－２リン酸、Ｃ１２－１５パレス－３リン酸、セテアレス－２リン酸ＤＥＡ、リン酸セチルＤＥＡ、オレス－３リン酸ＤＥＡ、セチルリン酸カリウム、デセス－４リン酸、デセス－６リン酸およびトリラウレス－４リン酸を包含する。

本発明による化粧料組成物に使用されるべき特定の好適なＯ／Ｗ乳化剤は、たとえばＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ社カイザーアウークシュト（Ｋａｉｓｅｒａｕｇｓｔ）でＡｍｐｈｉｓｏｌ（登録商標）Ｋとして市販されているセチルリン酸カリウムである。

Ｏ／Ｗ乳化剤のもう１つの特定の好適なクラスは、たとえばオリベム（ＯＬＩＶＥＭ）１０００という商品名で販売されている（ＩＮＣＩ名）セテアリルオリベートおよびソルビタンオリベート（化学組成：オリーブ油脂肪酸のソルビタンエステルおよびセテアリルエステル）として知られるオリーブ油由来の非イオン性自己乳化系である。

特定の一実施形態では、本発明は、Ｏ／Ｗ乳化剤の存在下で水相に分散した油相を含むＯ／Ｗエマルションの形態の、本明細書に示したすべての定義および優先度を有する化粧料組成物であって、Ｏ／Ｗ乳化剤がセチルリン酸カリウムである、化粧料組成物に関する。そうしたＯ／Ｗエマルションの油相の量は、好ましくは少なくとも１０ｗｔ．％、一層好ましくは１０～６０ｗｔ．％の範囲に、最も好ましくは１５～５０ｗｔ．％の範囲に、たとえば１５～４０ｗｔ．％の範囲にある。

本発明による化粧料組成物は一般に、３～１０の範囲のｐＨ、好ましくは４～８の範囲のｐＨ、最も好ましくは４～７．５の範囲のｐＨを有する。ｐＨは、当該技術分野における標準的な方法に従い、好適な酸、たとえばクエン酸、または塩基、たとえば水酸化ナトリウム（たとえば水溶液として）、トリエタノールアミン（ＴＥＡＣａｒｅ）、トロメタミン（ＴｒｉｚｍａＢａｓｅ）およびアミノメチルプロパノール（ＡＭＰ－ＵｌｔｒａＰＣ２０００）で望ましいように容易に調整することができる。

以下の例は、本発明の効果をさらに説明するため提供される。これらの例は、単なる例示であり、いかなる意味でも本発明の範囲を限定することを意図するものではない。

［１．粒子状物質アッセイの説明］
都市大気汚染の確実な代用品として、我々は、国立標準技術研究所（ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｔａｎｄａｒｄｓａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）（ゲイザースバーグ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ）、メリーランド州（ＭＤ）、米国（ＵＳＡ））のＳｔａｎｄａｒｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＭａｔｅｒｉａｌ（登録商標）（ＳＲＭ）１６４９ｂ（「都市粒子状物質）を使用した。粒子状物質ＳＲＭ１６４９ｂをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に再懸濁し、ボルテックスにより激しく振盪し、次いで１時間撹拌した。遠心分離後、上清を、下記表に示したような濃度でＰＥＰＨＡ（登録商標）Ｔｉｇｈｔ（ＤＳＭニュートリショナル・プロダクツ社）を含んだ細胞培養物（０．３ｍｇ／ｍｌ、最終）に加えた。我々は、５％ＣＯ_２の加湿空気雰囲気、３７℃にて無血清ケラチノサイト増殖培地ＣｎＴ－ＰＲで培養した初代ヒト表皮ケラチノサイト（ＣｅｌｌＮＴｅｃＬｔｄ．，ベルン（Ｂｅｒｎ）、スイス（Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ））を使用した。細胞をコンフルエントになる前にサブカルチャーした。培養物中の生存細胞の評価のため、我々は、サーモフィッシャーサイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）製のＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅＣｅｌｌＶｉａｂｉｌｉｔｙＲｅａｇｅｎｔを使用した。ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅは、生細胞の還元力により赤色になり、強い蛍光を発するレサズリン（ｒｅｓａｚｕｒｉｎ）を用いた溶液である。すべてのアッセイを３回ずつ行った。結果を対照に対する、すなわち値を１００％に設定した媒体のみに対するパーセンテージ（％）で細胞生存率として下記表に示す。これらの結果から、それぞれの活性物質が都市粒子状物質のマイナスの作用を効果的に打ち消すことが例証される。

［粒子状物質アッセイの結果］

［２．粉塵粒子、煙霧または煙の大気中への放出により引き起こされる大気汚染の有害作用からケラチノサイトを保護する例示的化粧料組成物］

Claims

都市粉塵粒子状物質の大気中への放出により引き起こされる大気汚染の有害作用からケラチノサイトを保護する非治療的な化粧方法であって、
化粧料組成物を皮膚に適用することを含み、
前記化粧料組成物が、前記化粧料組成物の総重量に対して０．０１ｗｔ．％～１０ｗｔ．％の活性物質ブレンドを含み、
前記活性物質ブレンドは、５０％超の水、１～５％のナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物、１０～２５％のプルランおよび３％未満の防腐剤からなる、方法。
前記活性物質ブレンドの量は、前記化粧料組成物の総重量に対して０．１ｗｔ．％～５ｗｔ．％の範囲で選択される、請求項１に記載の方法。
皮膚に適用されるべき前記化粧料組成物の量は、０．１～３ｍｇ／ｃｍ^２皮膚の範囲で選択される、請求項１または２に記載の方法。
皮膚に適用されるべき前記化粧料組成物の量は、０．１～２ｍｇ／ｃｍ^２皮膚の範囲で選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
皮膚に適用されるべき前記化粧料組成物の量は、０．５～２ｍｇ／ｃｍ^２皮膚の範囲で選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
前記化粧料組成物は、スキンケア調製物であることを特徴とする、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
前記化粧料組成物は、Ｏ／Ｗ乳化剤の存在下で水相に分散した油相を含むＯ／Ｗエマルションであることを特徴とする、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
前記Ｏ／Ｗ乳化剤は、セチルリン酸カリウムであることを特徴とする、請求項７に記載の方法。
都市粉塵粒子状物質の大気中への放出により引き起こされる大気汚染の有害作用からケラチノサイトを保護するための化粧料組成物を調製するための、活性物質ブレンドの化粧料的使用であって、
前記活性物質ブレンドは、５０％超の水、１～５％のナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物、１０～２５％のプルランおよび３％未満の防腐剤からなり、
前記活性物質ブレンドは、前記化粧料組成物の総重量に対して０．０１ｗｔ．％～１０ｗｔ．％の量で用いられる、使用。
都市粉塵粒子状物質の有害作用からケラチノサイトを保護するための組成物であって、
５０％超の水、１～５％のナンノクロロプシス・オキュラータ（ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｃｕｌａｔａ）抽出物、１０～２５％のプルランおよび３％未満の防腐剤からなる、組成物。
前記ケラチノサイトの生存率を少なくとも３％上昇させる、請求項１０に記載の組成物。