JP6963502B2 - ポリα−1,3−グルカン系ポリマーのコロイド分散液 - Google Patents

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Description

本出願は、2015年2月6日に出願された米国仮特許出願第62/112,960号の利益を主張するものであり、この全てはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本開示は、コロイド分散液の分野に関する。具体的には、本開示は、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液中での使用に関する。
酵素的合成、又は微生物もしくは植物宿主の遺伝子組み換え技術を用いた新規な構造の多糖類を見出したいとの願いから、研究者らは、生分解性であり、再生可能な資源を主体とする原料から経済的に製造可能な多糖類を発見してきた。1つのそのような多糖はポリα−1,3−グルカンであり、α−1,3−グリコシド結合を有することを特徴とするグルカンポリマーである。このポリマーは、ストレプトコッカス サリバリウス(Streptococcus salivarius)から単離されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素とスクロースの水溶液とを接触させることによって単離された(非特許文献1)。ポリα−1,3−グルカンから作製されるフィルムは、最大150℃の温度に耐え、β−1,4−結合した多糖類から得られるポリマーと比べて優れている(非特許文献2)。
特許文献1には、ストレプトコッカス サリバリウス(Streptococcus salivarius)gtfJ酵素を使用した、ヘキソース単位を含みポリマー中の少なくとも50%のヘキソース単位がα−1,3−グリコシド結合を介して連結されている多糖繊維の作製法が開示されている。この酵素は、最終生成物としてのポリα−1,3−グルカン及びフルクトースを生成する重合反応において、基質としてスクロースを利用する(Simpson et al.,1995)。開示されているグルカントリアセテートポリマーは、溶媒中又は溶媒を含む混合物中に臨界濃度を超えて溶解した際に液晶溶液を形成した。この溶液から連続的で頑丈な繊維が紡糸された。グルカンへ戻す再生の後、繊維製品での使用に非常に適した綿状の繊維が形成され、使用された。
米国特許第7,000,000号明細書
Simpson et al.,Microbiology 141:1451−1460,1995 Ogawa et al.,Fiber Differentiation Methods 47:353−362,1980
食品、油田、医薬品、パーソナルケア及び特殊品産業などの様々な用途での潜在的な有用性を備えた新規なコロイド分散液の開発が望まれている。
第1の実施形態においては、本開示は、(a)ポリα−1,3−グルカン、又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒;を含有するコロイド分散液に関する。
第2の実施形態においては、ポリα−1,3−1,6−グルカンは、(a)少なくとも30%のグリコシド結合がα−1,3結合であり、(b)少なくとも30%のグリコシド結合がα−1,6結合である、α−1,3及びα−1,6−グリコシド結合を有する。
第3の実施形態においては、ポリα−1,3−グルカン及びポリα−1,3−1,6−グルカンは、5nm〜200nmの平均粒径サイズを有する粒子を含む。
第4の実施形態においては、粒子は球状又は円筒状の形態を有する。
第5の実施形態においては、粒子は10nm〜200μmの平均凝集径サイズを有する凝集体を形成する。
第6の実施形態においては、溶媒は水である。
第7の実施形態においては、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンはコロイド分散液全体の0.1重量%〜15重量%を占める。
第8の実施形態においては、コロイド分散液は少なくとも10cPsの粘度を有する。
第9の実施形態においては、コロイド分散液は1〜14のpHを有する。
第10の実施形態においては、コロイド分散液はpHが2〜11の範囲にわたって変化する際に粘度が10%未満しか変化しない粘度及びpHを有する。
第11の実施形態においては、コロイド分散液は塩又は界面活性剤を更に含有し、コロイド分散液は塩又は界面活性剤の添加後に10%未満しか変化しない粘度を有する。
第12の実施形態においては、コロイド分散液はずり流動挙動又はずり粘稠挙動を有する。
第13の実施形態においては、コロイド分散液はパーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態である。
第14の実施形態においては、本開示は、(a)ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒;を含有するコロイド分散液を含むパーソナルケア製品に関する。
第15の実施形態においては、本開示は、(a)ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒;を含有するコロイド分散液を含む食品に関する。
第16の実施形態においては、本開示は、(a)酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するスラリーを製造すること;(b)スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを分離すること;(c)ウエットケーキを水で洗浄すること;及び(d)ウエットケーキを水に分散させてポリα−1,3−グルカンコロイド分散液を形成すること;
を含むポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液の製造方法に関する。
第17の実施形態においては、本開示は、(a)20〜25℃で24時間の酵素反応溶液の加熱;(b)ポリα−1,3−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス サリバリウス(Streptococcus salivarius)gtfJである;(c)ポリα−1,3−1,6−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス オラリス(Streptococcus oralis)gtf4297、ストレプトコッカス sp.(Streptococcus sp.)C150 gtf 3298、又はストレプトコッカス ミュータンス(Streptococcus mutans)gtf 0544である;(d)塩基性緩衝水溶液がアルカリ金属リン酸塩緩衝液であるpH緩衝剤を有する;(e)アルカリ金属がカリウムであるアルカリ金属リン酸塩緩衝液;(f)塩基性緩衝水溶液が7〜5のpHを有する;(g)抗菌剤がFERMASURE(登録商標)である;及び(h)ウエットケーキが60重量%〜80重量%の水を含む;
のうちの少なくとも1つを有し得る、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液の製造方法に関する。
第18の実施形態においては、本開示は、(a)酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するスラリーを製造すること;(b)スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを分離すること;(c)ウエットケーキを水で洗浄すること;及び(d)ウエットケーキを水に分散させてポリα−1,3−グルカンコロイド分散液を形成すること;
を含む方法に従って作製されるポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液に関する。
本明細書に引用されている全ての特許文献及び非特許文献の開示内容は、それらの全体が参照により本明細書に包含される。
本明細書において、用語「コロイド分散液」とは、分散相と分散媒体とを有する不均一系、すなわち微視的に分散されている不溶性の粒子が別の物質全体に懸濁されていることをいう。水の中のコロイド分散液の例は親水コロイドである。コロイド分散液は安定なコロイド分散液であってもよいし、不安定なコロイド分散液であってもよい。安定なコロイド分散液は、室温で及び/又は高温で、例えば40〜50℃で少なくとも1か月の期間、目に見える沈殿なしで安定である。不安定な分散液では、同じ条件で、分散液から沈降した少なくとも一部のポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンが見られる場合がある。沈降した物質を撹拌すると、通常はコロイド分散液が再形成されるであろう。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液は安定な分散液である。別の実施形態においては、コロイド分散液は不安定な分散液である。
用語「ポリα−1,3−グルカン」、「α−1,3−グルカンポリマー」及び「グルカンポリマー」は、本明細書においては同じ意味で使用される。ポリα−1,3−グルカンは、少なくとも50%のグリコシド結合がα−1,3−グルカン結合である、グリコシド結合によって互いに連結したグルコースモノマー単位を含むポリマーである。ポリα−1,3−グルカンは多糖の一種である。ポリα−1,3−グルカンの構造は以下のように示すことができる。
Figure 0006963502
ポリα−1,3−グルカンは、化学的な手法を用いて作製することができる。あるいは、これはポリα−1,3−グルカンを生成する菌類などの様々な微生物からこれを抽出することによって得ることができる。またあるいは、ポリα−1,3−グルカンは、例えば米国特許第7,000,000号明細書、並びに米国特許出願公開第2013/0244288号明細書及び第2013/0244287号明細書(これら全ては参照により本明細書に包含される)に記載されているように、1種以上のグルコシルトランスフェラーゼ(gtf)酵素(例えばgtfJ)を利用してスクロースから酵素的に製造することができる。
用語「ポリα−1,3−1,6−グルカン」、「α−1,3−1,6−グルカンポリマー」、及び「ポリ(α−1,3)(α−1,6)グルカン」は本明細書では同じ意味で使用される(これらの用語における結合の記号「1,3」及び「1,6」の順序は重要ではない)。本明細書におけるポリα−1,3−1,6−グルカンは、グリコシド結合によって互いに連結した(すなわちグリコシド結合)グルコースモノマー単位を含むポリマーであって、グリコシド結合の少なくとも30%がα−1,3−グリコシド結合であり、グリコシド結合の少なくとも30%がα−1,6−グリコシド結合であるポリマーである。ポリα−1,3−1,6−グルカンは、混合グリコシド結合成分を含む多糖の種類である。本明細書の特定の実施形態においては、用語ポリα−1,3−1,6−グルカンの意味からは、連続的に互いに交互するα−1,3結合と−1,6結合とを含むグルカンである「オルタナン」は除外される(米国特許第5702942号明細書、米国特許出願公開第2006/0127328号明細書)。互いに「連続的に交互する」α−1,3結合と−1,6結合は、視覚的に…G−1,3−G−1,6−G−1,3−G−1,6−G−1,3−G−1,6−G−1,3−G−…と表すことができ、Gは例えばグルコースを表す。
本明細書においてポリα−1,3−グルカン化合物の作製のために使用されるポリα−1,3−グルカンのグルコースモノマー単位間のα−1,3であるグリコシド結合の割合は、少なくとも50%、60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、又は100%(又は50%〜100%の任意の整数値)である。したがって、このような実施形態においては、ポリα−1,3−グルカンは50%、40%、30%、20%、10%、5%、4%、3%、2%、1%、又は0%(又は0%〜50%の任意の整数値)未満の、α−1,3−ではないグリコシド結合を有する。
グルカンウエットケーキは、濾過により水を除去することによってグルカンコロイド分散液から形成される。水はグルカン固体粒子表面上に残り、また粒子間に捕捉される。グルカンコロイド分散液が流動可能な液体である一方で、ウエットケーキは軟らかい固体状の稠度を有する。
本明細書における用語「ポリα−1,3−グルカンスラリー」は、ポリα−1,3−グルカン、スクロース、1種以上のグルコシルトランスフェラーゼ酵素、グルコース、及びフルクトースなどのグルコシルトランスフェラーゼ酵素反応の成分を含む水性混合物のことをいう。
本明細書における用語「ポリα−1,3−グルカンウエットケーキ」は、スラリーから分離されてから水又は水溶液で洗浄されたポリα−1,3−グルカンのことをいう。ウエットケーキを作製する場合にはポリα−1,3−グルカンは乾燥されない。
本明細書で使用される用語「粘度」は、親水コロイドなどの流体又は水性組成物がこれを流動させようとする力に対して抵抗する程度の尺度のことをいう。本明細書で使用され得る様々な粘度の単位には、センチポアズ(cPs)及びパスカル−秒(Pa・s)が含まれる。センチポアズは100分の1ポアズであり、1ポアズは0.100kg・m−1・s−1に相当する。したがって、本明細書において使用される用語「粘度調整剤」及び「粘度修正剤」は、流体又は水性組成物の粘度を変える/修正することができるもののことをいう。
本明細書において使用される用語「ずり流動挙動」は、せん断速度が増加するにつれてコロイド分散物の粘度が減少することをいう。本明細書において使用される用語「ずり粘稠挙動」は、せん断速度が増加するにつれてコロイド分散物の粘度が増加することをいう。本明細書において、「せん断速度」とは、コロイド分散液に累進せん断変形が加えられる時点の速度をいう。回転によってせん断変形が加えられてもよい。
本明細書におけるポリα−1,3−グルカン及びポリα−1,3−グルカン化合物の「分子量」は、数平均分子量(M)又は重量平均分子量(M)として表すことができる。あるいは、分子量はダルトン、グラム/モル、DPw(重量平均重合度)、又はDPn(数平均重合度)として表すこともできる。これらの分子量の大きさを計算するためには、高圧液体クロマトグラフィー(HPLC)、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)、又はゲル浸透クロマトグラフィー(GPC)などの様々な手法が当該技術分野で公知である。
用語「体積パーセント(percent by volume、volume percent)」、「体積%」、及び「v/v%」は、本明細書においては同じ意味で使用される。溶液中の溶質の体積パーセントは、式:[(溶質の体積)/(溶液の体積)]×100%を使用して決定することができる。
用語「重量パーセント(重量%)」、「重量パーセンテージ(wt%)」、及び「重量−重量パーセンテージ(%w/w)は、本明細書においては同じ意味で使用される。重量パーセントとは、組成物、混合物、又は溶液中に含まれる質量を基準とした物質のパーセンテージのことをいう。
粘度は、3℃〜110℃(又は3〜110℃の任意の整数)の任意の温度でコロイド分散液を用いて測定することができる。あるいは、粘度は4℃〜30℃、又は20℃〜25℃の温度で測定することができる。粘度は、大気圧(約760torr)又は他の任意のそれより高い若しくは低い圧力で測定することができる。
本明細書に開示のコロイド分散液の粘度は、粘度計もしくはレオメーターを使用して、あるいは当該技術分野で公知の任意の他の手段を使用して測定することができる。ずり流動挙動又はずり粘稠挙動を示す(すなわち流動条件によって変動する粘度を有する液体)本開示のこれらの親水コロイド及び水溶液の粘度を測定するためにレオメーターを使用できることは当業者が理解するであろう。そのような実施形態の粘度は、例えば10〜1000rpm(回転毎分)(又は10〜1000rpmの任意の整数)の回転せん断速度で測定することができる。あるいは、粘度は10、60、150、250、又は600rpmの回転せん断速度で測定することができる。
本明細書に開示のコロイド分散液のpHは2.0〜12.0であってもよい。あるいは、pHは2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0;又は4.0〜8.0;又は3.0〜11.0であってもよい。ある実施形態においては、コロイド分散液の粘度は3.0〜11.0のpHで大きく変動しない。
本明細書に開示のポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン化合物は、少なくとも0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、又は15%の重量パーセント(wt%)でコロイド分散液の中に存在していてもよい。
本明細書に開示のコロイド分散液は、パーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態であってもよく、及び/又はそれらの中に含まれていてもよい。本明細書のポリα−1,3−グルカン化合物は、これら製品のそれぞれの中の増粘剤として使用することができる。そのような増粘剤は、必要に応じて、米国特許第8,541,041号明細書(この開示の全体は参照により本明細書に組み込まれる)に開示されているものなどの1種以上の他の種類の増粘剤と組み合わせて使用されてもよい。
本明細書におけるパーソナルケア製品としては、これらに特に限定されるものではないが、例えばスキンケア組成物、化粧品組成物、抗真菌性組成物、及び抗菌性組成物が挙げられる。本明細書におけるパーソナルケア製品は、例えばローション、クリーム、ペースト、バーム、軟膏、ポマード、ジェル、液体、これらの組み合わせ等の形態であってもよい。本明細書に開示のパーソナルケア製品は、少なくとも1種の活性成分を含んでいてもよい。活性成分は、一般的には意図する薬理作用を生じさせる成分として認識される。
ある実施形態においては、ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するコロイド分散液は、水分の不足に関連する肌のダメージに対処するために肌に塗布することができるスキンケア製品であってもよい。スキンケア製品は、肌の外観(例えばかさついた、ひび割れた、及び/又は赤い肌の見かけを軽減)及び/又は肌の感触(例えば肌の軟らかさ及び緻密さを改善しながら肌の荒れ及び/又は乾燥を軽減)に対処するために使用されてもよい。コロイド分散液に加えて、スキンケア製品は、酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコーン、固い脂肪、ビタミンA、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリン、又はコロイド状オートミール、及びこれらの組み合わせなどの、肌の疾患の治療もしくは予防、化粧効果の付与、又は肌への保湿効果の付与のための1種以上の活性成分を更に含有していてもよい。スキンケア製品は、例えばセラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクワラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、スフィンゴ糖脂質、尿素、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウム、又はピロリドンカルボン酸ナトリウムなどの1種以上の天然保湿因子を含んでいてもよい。スキンケア製品の中に含まれ得る他の成分としては、これらに限定されるものではないが、グリセリド、杏仁油、菜種油、スクワラン、スクワレン、ヤシ油、トウモロコシ油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、ベニバナ油、ゴマ油、シアバター、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、チャノキ油、シアバター、パーム油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸、及びオレンジ油が挙げられる。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含むスキンケア製品は、オイル、ワックス、香料、UV吸収剤、顔料、アミノ酸、脂肪酸、染料、酸化防止剤、ビタミン、レチノール、αヒドロキシ酸、サリチル酸、又は上に列挙した成分のいずれかのうちの1種以上を更に含んでいてもよい。
ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンは、パーソナルケア製品組成物の総重量基準で0.05〜15重量%の範囲でパーソナルケア製品中に存在していてもよい。別の実施形態においては、ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンは0.1〜10重量%、又は0.1〜5重量%の範囲で存在していてもよく、全ての重量パーセントはパーソナルケア製品組成物の総量基準である。
いくつかの実施形態においては、パーソナルケア製品は、ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するコロイド分散液と、1種以上のオイルと、1種以上の乳化剤と、水と、1種以上の保存料とを含むか、これらから本質的になる。別の実施形態においては、パーソナルケア製品は、ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するコロイド分散液と、1種以上のオイルと、1種以上の乳化剤と、水と、1種以上のエモリエントと、1種以上の保存料とを含むか、これらから本質的になる。また別の実施形態においては、パーソナルケア製品は、ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するコロイド分散液と、1種以上のオイルと、1種以上の乳化剤と、水と、1種以上のエモリエントと、1種以上の香料と、1種以上の保存料とを含むか、これらから本質的になる。
本明細書のパーソナルケア製品は、これらに限定されるものではないが、例えばリップクリーム、マスカラ、口紅、ファンデーション、頬紅、アイライナー、リップライナー、リップグロス、他の化粧品、日焼け止め(サンスクリーン、サンブロック)、マニュキュア、ムース、ヘアスプレー、スタイリングジェル、ネイルコンディショナー、バスジェル、シャワージェル、ボディーソープ、洗顔料、シャンプー、ヘアコンディショナー(リーブイン又は洗い流し)、クリームリンス、毛髪染料、ヘアカラー製品、ヘアシャイン製品、ヘアセラム、くせ毛防止製品、枝毛修復製品、リップバーム、スキンコンディショナー、コールドクリーム、保湿剤、ボディースプレー、石鹸、ボディースクラブ、スクラブ剤、収れん化粧水、スクラッフィングローション、脱毛剤、パーマ液、ふけ防止剤、制汗用組成物、消臭剤、シェービング製品、プレシェービング製品、アフターシェービング製品、洗浄剤、スキンジェル、リンス、歯磨き粉、又は洗口液などの、化粧品又は他の製品の形態であってもよい。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含むパーソナルケア製品は、オイル、ワックス、香料、UV吸収剤、UV吸収剤、顔料、アミノ酸、脂肪酸、染料、酸化防止剤、ビタミン、レチノール、αヒドロキシ酸、サリチル酸、又は上に列挙した成分のいずれかのうちの1種以上を更に含んでいてもよい。
本明細書における医薬品は、例えば乳液、液体、エリキシル剤、ゲル、懸濁液、溶液、クリーム、又は軟膏の形態であってもよい。また、本明細書における医薬品は、本明細書に開示のいずれかのパーソナルケア製品の形態であってもよい。医薬品は、1種以上の医薬的に許容可能な担体、希釈剤、及び/又は医薬的に許容可能な塩を更に含んでいてもよい。本明細書に開示のポリα−1,3−グルカン化合物は、カプセル、カプセル材料、錠剤コーティングの中で、並びに薬剤及び薬品のための賦形剤としても使用することができる。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含む医薬品は、活性成分、甘味料、着色剤、ラクトース、レシチン、香料、酸化マグネシウム、リンゴ酸、安息香酸、ベンジルアルコール、パラベン、炭酸塩、ワックス、オイル、セルロース、コーンスターチ、又はこれらの組み合わせのうちの1種以上を更に含んでいてもよい。医薬品の一部となり得る不活性成分は、アメリカ食品医薬品局(FDA)によって注意深く管理されている。公知のFDAに認められているこれらの成分のうちのいずれも、医薬品の一部として使用することができる。
本明細書における食品の非限定的な例としては、野菜、肉、及び大豆パティ;改質海産物;改質チーズスティック;クリームスープ;肉汁及びソース;サラダドレッシング;マヨネーズ;オニオンリング;ジャム、ゼリー、及びシロップ;パイのフィリング;フライドポテト及び押出成形ポテトなどのジャガイモ製品;フライ料理の衣用生地、パンケーキ/ワッフル、及びケーキ;ペットフード;飲料;冷菓;アイスクリーム;カッテージチーズ、ヨーグルト、チーズ、及びサワークリームなどの発酵乳製品;ケーキのアイシング及びグレーズ;ホイップクリーム;膨張させた及び膨張させていない焼いた食品等が挙げられる。
ポリα−1,3−グルカン及び/又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するコロイド分散液は、食品中の増量剤として使用されてもよく、あるいは別の実施形態においては、食品中の油脂の少なくとも一部の代替物として使用されることで食品の低脂肪バージョンが製造されてもよい。
家庭用品又は工業製品の非限定的な例は液体洗剤である。グルカンコロイド分散液は、液体洗剤製剤の成分を安定化するための構造化剤又は増粘剤として使用することができる。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含有する家庭用品は、アルコール、界面活性剤、ポリマー、顔料、染料、香料、酵素、ビルダー、キレート化剤、pH調整剤、アミン、オイル、ワックス、又はこれらの組み合わせのうちの1種以上を更に含有していてもよい。家庭用品用の公知の数多くの成分をコロイド分散液と共に使用することができる。これらの公知の成分のいずれも使用することができる。
本開示は、(a)ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒;を含有するコロイド分散液に関する。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液は、(a)ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒から本質的になる。別の実施形態においては、コロイド分散液は、1重量%未満のスクロース及び/又はフルクトースを含有し、ここで重量パーセントはコロイド分散液の総量基準である。ポリα−1,3−1,6−グルカンは、(a)少なくとも30%、40%、又は50%のグリコシド結合がα−1,3結合であり、(b)少なくとも30%、40%、又は50%のグリコシド結合がα−1,6結合である、α−1,3及びα−1,6−グリコシド結合を有する。
ポリα−1,3−グルカン及びポリα−1,3−1,6−グルカンは、5nm、10nm、又は20nmと、100nm、150nm、又は200nmとの間の平均粒径サイズを有する粒子を含む。好ましくは、粒子は5nm〜200nm、より好ましくは10nm〜100nmの平均粒径サイズを有する。粒子は球状又は円筒形状を有していてもよい。典型的には、粒子は実質的に球状の形態である。実質的に、とは、粒子の50%超が球状の形態であることを意味する。粒子は、10nm、100nm、1μm、又は10μmと、100μm、150μm、又は300μmとの間の平均凝集径サイズを有する凝集体を形成していてもよい。好ましくは、凝集体は10nm〜250μm、より好ましくは10μm〜225μmの平均凝集径サイズを有する。全ての場合において、平均サイズは、D50粒子サイズ、又は、粒子の50%がD50値よりも大きく粒子の50%がD50値よりも小さい粒子サイズのことをいう。
コロイド分散液のための溶媒は水であってもよい。別の実施形態においては、溶媒は、水と、50重量%未満の水と混和性のある1種以上の有機溶媒(例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、プロパノール、アセトン、エチレングリコール、酢酸、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、又はこれらの組み合わせ)との組み合わせであってもよく、ここでの重量パーセントは溶媒の総量基準である。
コロイド分散液の、α−1,3−グリコシド結合を有することを特徴とするポリα−1,3−グルカン、又はα−1,3及びα−1,6−グリコシド結合を有することを特徴とするポリα−1,3−1,6−グルカンは、コロイド分散液全体の0.1、1、又は5重量%と、10、15、20、40、又は60重量%との間を占める。好ましくは、コロイド分散液のポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンは、0.1重量%〜15重量%、より好ましくは0.1重量%〜10重量%を占める。
コロイド分散液は、少なくとも10、100、1,000、10,000、100,000、又は1,000,000cPsの粘度を有する。
コロイド分散液は、1又は2と、11、12、13、又は14との間のpHを有する。pHは好ましくは1〜14であり、より好ましくは2〜11である。
コロイド分散液は、pHが1又は2と11、12、13、又は14との間の範囲にわたって変化する際に粘度が10、20、30、40、又は50%未満しか変化しない、粘度及びpHを有する。好ましくは、pHが1〜14の範囲にわたって変化する際に粘度は50%未満しか変化せず、より好ましくは、pHが2〜11の範囲にわたって変化する際に粘度は10%未満しか変化しない。
コロイド分散液は、塩又は界面活性剤の添加後に10%未満しか変化しない粘度を有するような塩又は界面活性剤を更に含有していてもよい。
コロイド分散液は、ずり流動挙動又はずり粘稠挙動を有する。
コロイド分散液は、パーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態で使用することができる。
本開示は更に、(a)ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒;を含有するコロイド分散液を含むパーソナルケア製品に関する。
本開示はまた更には、(a)ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカン;及び(b)溶媒;を含有するコロイド分散液を含む食品に関する。
本開示はまた更には、(a)酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するスラリーを製造すること;(b)スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを分離すること;(c)ウエットケーキを水で洗浄すること;及び(d)ウエットケーキを水に分散させてポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液を形成すること;を含むポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液の製造方法に関する。方法は、(a)20〜25℃で24時間の酵素反応溶液の加熱;(b)ポリα−1,3−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス サリバリウス(Streptococcus salivarius)gtfJである;(c)ポリα−1,3−1,6−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス オラリス(Streptococcus oralis)gtf4297、ストレプトコッカス sp.(Streptococcus sp.)C150 gtf 3298、又はストレプトコッカス ミュータンス(Streptococcus mutans)gtf 0544である;(d)塩基性緩衝水溶液がアルカリ金属リン酸塩緩衝液であるpH緩衝剤を有する;(e)アルカリ金属がカリウムであるアルカリ金属リン酸塩緩衝液;(f)塩基性緩衝水溶液が7〜5のpHを有する;(g)抗菌剤がFERMASURE(登録商標)亜塩素酸ナトリウムである;及び(h)ウエットケーキが60重量%〜80重量%の水を含む;
のうちの少なくとも1つを有し得る。
本開示はまた更には、(a)酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するスラリーを製造すること;(b)スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンを分離すること;(c)ウエットケーキを水で洗浄すること;及び(d)ウエットケーキを水に分散させてポリα−1,3−グルカンコロイド分散液を形成すること;を含む方法によって調製されるポリα−1,3−グルカン又はポリα−1,3−1,6−グルカンのコロイド分散液に関する。
試験方法
粒径は、ポリα−1,3−グルカンのスラリーを用いて原子間力顕微鏡(AFM)で分析した一次粒径によって測定した。10uLのポリα−1,3−グルカンスラリーを、劈開したてのマイカ表面の上に載せ、6000r/sで10秒回転させ、室温で乾燥させ、AFMのタッピングモードで撮像した。AFM画像は、Dimensional Icon走査型プローブDimensional Icon走査型プローブ顕微鏡(Bruker,Santa Barbara,CA)を使用して得た。顕微鏡はタッピングモードで操作した。この中では、カンチレバーは共鳴点で振動し、フィードバック制御が一定のタッピング振幅になるように調節する。典型的には、タッピングモードはトポグラフィー画像と位相的な画像の両方を得るために使用された。トポグラフィー画像は、表面の定量的な三次元画像であり、画像の全てのピクセルの色又は明度は高さを表す。走査は、37〜55N/mのばね定数を有する125−/m−の長さの市販のシリコン製OTESPチップを使用し、0.85〜0.65の中程度のタッピング比で300kH超の周波数を使用して空気中で行った。
粒子凝集サイズは、Beckman Coulter LS13320を用いて測定した。これは、0.4〜2000umの範囲の粒子の領域の体積分布を決定するためにレーザー回折を利用する。粒径分布測定のために、標準的なフラウンホーファー回帰モデルを使用した。試料の安定性及び装置の再現性の確認として、試験は3回繰り返す。
粘度は、温度を制御(20℃)するための再循環浴及びYULA15−E(Z)スピンドルを備えたBrookfield DV3Tレオメーターによって測定した。せん断速度は、0.01〜250rpmから増加させ、その後、せん断速度を20秒毎に7.05(1/s)ずつ増加させるグラジエントプログラムを用いて増加させた。
pHはVWR symphony H10Pによって測定した。
グリコシド結合の決定は、NMR(核磁気共鳴)によって決定した。gtf酵素により合成されたグルカン生成物中の20個のグリコシド結合を13C NMR又はH NMRによって決定した。
13C NMRのために、50℃で撹拌しながら3重量%のLiClを含む1mLの重DMSOの中に、乾燥グルカンポリマー(25〜30mg)を溶解させた。ガラスピペットを使用して、0.8mLの溶液を5−mmのNMR管の中に移した。26041.7Hzのスペクトル窓を使用して、スペクトル周波数125.76MHzで、CPDULクライオプローブを備えたBruker Avance 500−MHz NMRスペクトロメーター(Billerica,MA)を使用して25個の定量的な13C NMRスペクトルを得た。取り込み時間0.629秒、パルス間遅延5秒、6000 30パルスで、waltzデカップリングを用いた逆ゲートデカップリングパルスシーケンスを使用した。時間ドメインのデータは2.0Hzの指数関数的乗算を使用して変換した。
H NMRのために、分析天秤の上で約20mgのグルカンポリマー試料をバイアルの中に秤量した。バイアルを天秤から取り出し、3重量%のLiClを含む0.8mLの重DMSO(DMSO−d6)をバイアルの中に添加した。混合物を、グルカン試料が溶解するまで磁気撹拌子5を用いて撹拌し、90℃まで温めた。溶液を室温まで放冷した。室温で撹拌しながら、20体積%のトリフルオロ酢酸(TFA)が入ったDMSO−d6溶液0.2mLをポリマー溶液に添加した。全てのヒドロキシルプロトンシグナルを、炭水化物環のプロトンシグナル10が生じるスペクトル領域の外に出すために、TFAを添加した。最終的な溶液の一部の0.8mLを、ガラスピペットを使用して5−mmのNMR管の中に移した。定量的なH NMRスペクトルは、500MHz以上のプロトン周波数でNMRスペクトロメーターを使用して得た。スペクトルは、11.0ppmのスペクトル窓及び5.5ppmのトランスミッターオフセットを使用して得た。パルス間15遅延10秒及び取り込み時間1.5秒で、90°のパルスを32パルスかけた。時間ドメインのデータは0.15Hzの指数関数的乗算を使用して変換した。
本開示を以降の実施例においてさらに詳しく定義する。これらの実施例は本開示の特定の好ましい態様を示しているが、これらは例示のためのみに示されていることが理解されるべきである。上の議論及びこれらの実施例から、当業者であれば本開示の特徴の本質を突き止めることができ、またその趣旨及び範囲から逸脱することなしに本開示の様々な変更及び変形を行って様々な用途及び条件に適応させることができる。
実施例1
ポリα−1,3−グルカンを含有するコロイド分散液の調製
米国特許第7,000,000号明細書では、ストレプトコッカス サリバリウス(Streptococcus salivarius)gtfJ酵素を使用した、ヘキソース単位を含み、ポリマー中の少なくとも50%のヘキソース単位がα−1,3−グリコシド結合を介して連結されている多糖繊維が開示された。この酵素は、最終生成物としてのポリα−1,3−グルカン及びフルクトースを生成する重合反応において、基質としてスクロースを利用する。
ポリα−1,3−グルカンのスラリーは米国特許出願第2013/0244288号明細書(これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる)に記載のストレプトコッカス サリバリウス(Streptococcus salivarius)gtfJ酵素(100ユニット/L)、OmniPur Sucroseから入手したスクロース(EM8550)(100g/L)、Sigma Aldrichから入手したリン酸カリウム緩衝液(10mM)、DuPontから入手したFermaSure(登録商標)抗菌剤(100ppm)を含む、pH5.5に調整された水溶液(0.5L)から調製した。得られた酵素反応溶液を20〜25℃に24時間維持した。反応で合成されるポリα−1,3−グルカンは水に不溶性であることからスラリーが形成された。反応で生成したポリα−1,3−グルカンの固体を、40マイクロメートルの濾紙上に325−メッシュスクリーンが取り付けられたブフナー漏斗を使用して集め、約60重量%〜80重量%の水を含むウエットケーキを形成した。ポリα−1,3−グルカンのウエットケーキをその後、高せん断、高温、長い混合時間、又は別の混合工程なしで、従来の撹拌装置を使用して水に分散させる。例えば、水への分散には、典型的には8000rpmで周囲温度で5分、Ika Ultra−Turrax(登録商標) T25 デジタル分散機を使用する。
実施例2a〜c
ポリα−1,3−1,6−グルカンを含有するコロイド分散液の調製
ポリα−1,3−1,6−グルカンは、ポリα−1,3−1,6−グルカンのスラリーから作製した。ポリα−1,3−1,6−グルカンのスラリーは、実施例2a〜cについて、それぞれ米国特許出願第2014/0087431号明細書(これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる)に記載のストレプトコッカス オラリス(Streptococcus oralis)gtf 4297、ストレプトコッカス sp.(Streptococcus sp.)C150 gtf 3298、又はストレプトコッカスミュータンス(Streptococcus mutans)gtf 0544の酵素(100ユニット/L)、OmniPur Sucroseから入手したスクロース(EM8550)(100g/L)、Sigma Aldrichから入手したリン酸カリウム緩衝液(50mM)、及びDuPontから入手したFermaSure(登録商標)(100ppm)を含む、pH6.5に調整された水溶液(0.5L)から調製した。得られた酵素反応溶液を22〜25℃に24〜30時間維持した。反応で合成されるポリα−1,3−1,6−グルカンは水に不溶性であることからスラリーが形成された。反応で生成したポリα−1,3−1,6−グルカンの固体を、40マイクロメートルの濾紙上に325−メッシュスクリーンが取り付けられたブフナー漏斗を使用して集め、約60重量%〜80重量%の水を含むウエットケーキを形成した。その後、ポリα−1,3;1,6−グルカンのウエットケーキを典型的には8000rpmで5分、Ika Ultra−Turrax(登録商標) T25 デジタル分散機を使用して水に分散させる。異なる酵素で異なる比率の1,3対1,6のグリコシド結合の比率が得られた。酵素ストレプトコッカス オラリス(Streptococcus oralis)gtf 4297は、31%のα−1,3結合と67%のα−1,6結合を生成し、ストレプトコッカス sp.(Streptococcus sp.)C150 gtf 3298は、50%のα−1,3結合と50%のα−1,6結合を生成し、ストレプトコッカス ミュータンス(Streptococcus mutans)gtf 0544は、62%のα−1,3結合と36%のα−1,6結合を生成した。
実施例3
グルカンの一次粒径
一次粒径は、実施例1に記載したポリα−1,3−グルカンのスラリーを使用して原子間力顕微鏡(AFM)を用いて分析した。10uLのポリα−1,3−グルカンスラリーを劈開したてのマイカ表面の上に載せ、6000r/sで10秒回転させ、室温で乾燥させ、AFMのタッピングモードで撮像した。AFM画像は、Dimensional Icon走査型プローブDimensional Icon走査型プローブ顕微鏡(Bruker,Santa Barbara,CA)を使用して得た。顕微鏡はタッピングモードで操作した。この中では、カンチレバーは共鳴点で振動し、フィードバック制御によって一定のタッピング振幅になるように調節される。典型的には、タッピングモードはトポグラフィー画像と位相的な画像の両方を得るために使用された。トポグラフィー画像は、表面の定量的な三次元画像であり、画像中の全てのピクセルの色又は明度は高さを表す。走査は、37〜55N/mのばね定数を有する125−/m−の長さの市販のシリコン製OTESPチップを使用し、0.85〜0.65の中程度のタッピング比で300kH超の周波数を使用して空気中で行った。AFM画像は、一次粒子の平均径が20〜30nmであることを示している。
実施例4
グルカンの粒径分布
粒径分布は、Beckman Coulter LS13320を用いて実施例1及び実施例2で記載した試料を用いて測定した。これは、0.4〜2000umの範囲の粒子の領域の体積分布を決定するためにレーザー回折を利用する。粒径分布測定のために、標準的なフラウンホーファー回帰モデルを使用した。試料の安定性及び装置の再現性の確認として、試験は3回繰り返す。表1中、D10、D50、及びD90は、それぞれ累積分布における10%、50%、及び90%での粒子又はクラスターの直径を示す。D50は、粒径分布のメジアン径又は中央値を示す。
Figure 0006963502
実施例5
グルカンの粒子形状
ほとんどの粒子は通常球状の形態を有しているが、幾らかの粒子は円筒状又は棒状の形態を有している。円筒形状の大きさを測定する目的で、円筒形状の粒子の質量を球状の形態を有しているかのように調整した後に直径を有効径として計算する。
実施例6
グルカンの粘度に対するせん断速度の影響
5重量%のポリα−1,3−グルカン分散液を調製するために、8.6gのポリα−1,3−グルカンのウエットケーキ(L6B1C6、29重量%)を実施例1に記載したように50mLの脱イオン水の中に分散させた。水に分散されたポリα−1,3−グルカンの様々なせん断速度での粘度を決定するために、温度を制御(20℃)するための再循環浴及びYULA15−E(Z)スピンドルを備えたBrookfield DV3Tレオメーターを使用して親水コロイド試料に対して様々なせん断速度をかけた。せん断速度は、0.01〜250rpmから増加させ、その後、せん断速度を20秒毎に7.05(1/s)ずつ増加させるグラジエントプログラムを用いて増加させた。表2にまとめられている結果は、水の中に分散されているポリα−1,3−グルカンの粘度が、せん断速度が増加するにつれて減少することを示している。この観察結果は、親水コロイドが著しいずり流動挙動を示すことを意味する。
Figure 0006963502
実施例7
グルカンの粘度に対するpHの影響
実施例1に記載の通りに5重量%のポリα−1,3−グルカンの水性分散液の6つのアリコートを調製した。水性分散液のpHは5.5であった。2つのアリコートを1Nの硝酸を使用してpH2.0〜pH4.0に調整した。3つのアリコートを1Nの水酸化ナトリウムを使用してpH7.0、pH9.0及びpH11.0に調整した。1つのアリコートはpH調整なしで使用した。粘度測定は上述した通りに行った。表3にまとめられている結果は、水中に分散されたグルカンの粘度にpHは有意な影響を与えないことを示している。
Figure 0006963502
実施例8
グルカンの粘度に対する塩化アルミニウムの影響
15重量%の塩化アルミニウムが入った5重量%のポリα−1,3−グルカン分散液を調製するために、均一化方法を使用して、8.6gのポリα−1,3−グルカンウエットケーキ(L6B1C6,29重量%)及び7.5gの塩化アルミニウムを実施例1に記載の通りに50mLの脱イオン水の中に分散させた。5重量%のポリα−1,3−グルカン分散液は実施例6に記載の通りに調製した。実施例6に記載の通りに粘度測定を行った。表4にまとめられている結果は、塩化アルミニウムの存在は水中のグルカンの粘度に有意な影響を与えなかったことを示している。
Figure 0006963502
実施例9
グルカンの粘度に対する界面活性剤の影響
2重量%の界面活性剤が入った5重量%のポリα−1,3−グルカン分散液を調製するために、8.6gのポリα−1,3−グルカンウエットケーキ(L6B1C6,29重量%)及び1gの界面活性剤を実施例1に記載の通りに50mLの脱イオン水の中に分散させた。CTAB(臭化セントリモニウム)、モノオレイン酸ソルビタン、Tween20(又はポリソルベート20)、及びZelec AN(アミン中和リン酸エステル)を含む4つの異なる界面活性剤を用いて4つの試料を調製した。5重量%のポリα−1,3−グルカンの分散液は実施例6に記載の通りに調製した。実施例6に記載の通りに粘度測定を行った。表5にまとめられている結果は、界面活性剤の存在は水中のグルカンの粘度に有意な影響を与えなかったことを示している。
Figure 0006963502
実施例10
パーソナルケア用製剤中でのグルカンの利用
スキンケア用製剤の試作品を作製するために、表6中の(A)と(B)を2つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して75℃で混合した。5分後、(A)を(B)に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを75℃で1分混合した。次いで、(C)を(A)と(B)との混合物に45℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は500rpmに設定した。
Figure 0006963502
ニキビ治療用製剤の試作品を作製するために、表7中の(D)と(E)を2つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して75℃で混合した。5分後、(D)を(E)に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを75℃で1分混合した。次いで、(F)を(D)と(E)との混合物に45℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は500rpmに設定した。
Figure 0006963502
ロールオン式の制汗製剤の試作品を作製するために、表8中の(G)と(H)を2つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して75℃で混合した。5分後、(G)を(H)に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを75℃で1分混合した。次いで、(C)を(G)と(H)の混合物に45℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は500rpmに設定した。
Figure 0006963502
ヘアケア製剤の試作品を作製するために、表9中の(J)と(K)を2つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して75℃で混合した。5分後、(J)を(K)に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを75℃で1分混合した。次いで、(L)を(J)と(K)との混合物に45℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は500rpmに設定した。
Figure 0006963502
実施例11
ハンドローションの調製
官能評価のために様々なハンドローションを調製した。ハンドローションは、下の基本手順に従って、表10の成分を使用して調製した。
室温で、相Aの成分を混合物が均一になるまで撹拌した。相Bの成分を別の容器の中で合わせ、均一になるまで手でマイズした。相Bの均一な組成物を相Aの均一な混合物に撹拌しながらゆっくり添加した。添加が完了した後、混合物を5000〜9000回転毎分(rpm)で5〜10分間混合することにより均一化した。次いで相Cの成分を撹拌しながら添加することで目的とするハンドローションを形成した。比較例Bのために、20重量%の水酸化ナトリウム水溶液を添加することによってローションのpHを5.5に調整した。DI水は脱イオン水を意味する。%活性は、各実施例で添加された組成物中の成分の割合を意味する。重量%は最終的な製剤中の成分の重量割合である。
Figure 0006963502
Figure 0006963502
Figure 0006963502
皮膚感触の結果:ASTM E1490−3に従って、二重盲検の皮膚感触分析を行った。この試験で評価された主要な特性は:拭き取り後のぬるつき、使用後のべたつき、取り出し時の曳糸性、及び取り出し時のべたつきであった。パネリストは1〜5のスケールで特性を評価した。1が最も小さい特性を示し、5が最も大きい特性を示す。結果は、各特性についてのパネリストの採点の平均値として下の表11に報告されている。これらの値の合計平均は、ポリα−1,3−グルカンを用いて製造されたローションについての全体な感覚の体感がキサンタンガム又はCarbopol Ultrez 10のいずれかを用いて製造された同様のローションの結果よりも勝っていることを示している。
Figure 0006963502
実施例12
低脂肪マヨネーズ中でのグルカンの利用
表12の全ての成分をSilversonホモジナイザーを用いて6500rpmで5分混合することによって、低脂肪マヨネーズをポリα−1,3−グルカンを用いて調製した。得られた配合物は、低脂肪マヨネーズのテクスチャを全脂肪製品と同様な水準に回復させた。
Figure 0006963502

Claims (11)

  1. ポリα−1,3−グルカンのコロイド分散液を含む製品の製造方法であって、
    (a)ポリα−1,3−グルカンのウエットケーキを提供すること、ここで、ポリα−1,3−グルカンはウエットケーキの作製中に乾燥されることがなく、そして、ポリα−1,3−グルカンの少なくとも50%のグリコシド結合がα−1,3−グリコシド結合である;
    (b)前記ウエットケーキを水を含有する液体に分散し、ポリα−1,3−グルカンのコロイド分散液を提供すること;
    (c)前記コロイド分散液を含む、パーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品を提供すること;
    を含み、
    ここで、(a)のウエットケーキが、
    (i)スクロースとポリα−1,3−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼとを含む水溶性反応液を提供すること、ここで、ポリα−1,3−グルカンを含むスラリーが製造され、;および
    (ii)スラリーをろ過して、ポリα−1,3グルカンのウエットケーキを提供すること
    によって提供される、
    方法。
  2. さらに、(a)と(b)との間に、ウエットケーキを水を含有する液体で洗浄することを含む、請求項1に記載の方法。
  3. ウエットケーキが、さらにグルコシルトランスフェラーゼを含む、請求項1または2に記載の方法。
  4. ポリα−1,3−グルカンのグリコシド結合の少なくとも90%が、α−1,3−グリコシド結合である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
  5. ポリα−1,3−グルカンのグリコシド結合の少なくとも95%が、α−1,3−グリコシド結合である、請求項4に記載の方法。
  6. ウエットケーキが60重量%〜80重量%の水を含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
  7. コロイド分散液が0.1重量%〜15重量%のポリα−1,3−グルカンを含む、請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
  8. (c)でパーソナルケア製品が提供される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
  9. (c)で家庭用品が提供される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
  10. (c)で食品が提供される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
  11. (c)で医薬品が提供される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
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