JP6765659B2 - 核酸増幅装置、核酸増幅方法及び核酸増幅用チップ - Google Patents
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Description
(1) 変性温度帯と伸長・アニーリング温度帯を形成できるヒーター、前記2つの温度帯間の試料溶液の移動を検出可能な蛍光検出器、前記2つの温度帯間の試料溶液の移動を可能にし、かつ、送液停止時には大気圧開放される1対の送液用機構、核酸増幅用チップを載置可能な基板、試料溶液の移動に関する蛍光検出器からの電気信号が送られて各送液用機構の駆動を制御する制御機構を備え、サーマルサイクル毎の蛍光強度の計測を行うことでリアルタイムPCRを行うことを特徴とするレシプロカルフロー型の核酸増幅装置。
(2) (1)の核酸増幅装置における変性温度帯と伸長・アニーリング温度帯に各々対応する曲線流路、前記曲線流路をつなぐ直線状の中間流路、流路の両端部に(1)の核酸増幅装置における送液用機構に接続可能な接続部を備えた微小流路を少なくとも1つ有する核酸増幅用チップ。
(3) 前記送液用機構がマイクロブロアまたは送風機である、(1)に記載の核酸増幅装置。
(4) 以下の工程を含む、核酸増幅方法:
工程1:変性温度帯と伸長・アニーリング温度帯に各々曲線流路が含まれるように(2)に記載の核酸増幅用チップを(1)に記載の基板上に載置する工程、
工程2:前記微小流路内に試料溶液を導入する工程、
工程3:微小流路両端部の送液用機構接続部と1対の送液用機構を各々接続する工程、
工程4:前記送液用機構により試料溶液を微小流路の2つの曲線流路間で往復させてサーマルサイクリングを行い、さらに中間流路において前記蛍光検出器によりサーマルサイクル毎の試料溶液の蛍光強度の計測と試料溶液の通過の確認を同時に行うことでリアルタイムPCRを行う工程。
(5) 前記蛍光強度の測定が、2種類以上の蛍光波長を同時に計測し、複数の遺伝子のリアルタイムPCRを1本の流路内で同時に測定することを特徴とする、(4)に記載の核酸増幅方法。
(6) 前記蛍光強度の計測を、サーマルサイクル数ごとの蛍光強度の行列(増幅曲線の2次元配列)から導出するサイクル数Ct値から求めた検量線を用いて行うことを特徴とする(4)又は(5)に記載の核酸増幅方法。
(7) 前記核酸増幅方法がポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、逆転写PCR(RT−PCR)、マルチプレックスPCRまたはRT−PCR、およびリアルタイムPCRまたはRT−PCRからなる群より選択される(4)〜(6)のいずれかに記載の核酸増幅方法。
(8) 前記流路が平面基板上に2本以上形成されており、それぞれの流路について独立して送液操作を可能とすることで、割り込み分析を行うことを特徴とする(4)〜(7)のいずれかに記載の核酸増幅方法。
(9) 前記接続部にマイクロピペットのフィルター付きピペットチップの先端を接続して試料溶液を微小流路内に導入し、前記ピペットチップを前記接続部に接続した状態でマイクロピペットを取り外し、その後に前記ピペットチップと前記送液用機構を接続する、(4)〜(8)のいずれかに記載の核酸増幅方法。
(10) 前記流路に導入する試料溶液の容量は、5μL〜50μLの範囲であることを特徴とする(4)〜(9)のいずれかに記載の核酸増幅方法。
(11) (4)〜(10)のいずれかの核酸増幅方法に用いられる、(2)に記載の核酸増幅用チップ。
高速リアルタイムPCR用のPCRチップ及び本発明の装置を用いて、大腸菌(Escherichia coli:E. coli)の定量を行った
レシチンブイヨン液体培地により大腸菌(DH5α株)を一晩培養し、寒天プレート培地検査によるコロニーカウントに基づき、1×104cfu/μLの大腸菌懸濁液を調製後、10倍希釈系列を作製し定量確認用の標準試料とした。
高速リアルタイムPCRは、DNA変性反応及び、アニーリング反応、ならびに各プライマーの3’末端から鋳型DNA配列に合わせDNAポリメラーゼにより複製される伸長反応の3つの過程の繰り返しにより行われる。そのうち、DNA変性反応及びアニーリング反応は、標的DNAの長さに依存せず、短時間で完了する。しかし、伸長反応は、標的DNAの長さ及びDNAポリメラーゼの酵素活性に依存した時間が必要で、高速リアルタイムPCRにおいてもサーマルサイクルの適切な時間設定が必要である。
標的DNA長さが約200 bp用のリバースプライマー配列は5’-CTT TGG TCT TGC GAC G-3’ (配列番号6)、約400 bpのリバースプライマー配列は5’-GCA TGG CTG CAT CAG-3’ (配列番号7)、約600 bpのリバースプライマー配列は5’- CTG ACT TAA CAA ACC GC-3’ (配列番号8)、約800 bpのリバースプライマー配列は5’- TAC CAG GGT ATC TAA TCC-3’ (配列番号9)とし、Tm値はいずれも約50℃に揃えて設定した。
高速リアルタイムPCRにおいて、同一サンプルから複数の標的DNAの有無を確認するマルチプレックスPCR法への適応例として、3種類の蛍光の同時計測が可能な多色蛍光検出器を利用して、Neisseria gonorrhoeae及びChlamydia trachomatis、さらにヒト白血球由来βアクチン遺伝子の同時検出を検討した。
多色蛍光検出器を使用する場合も、各微小流路の中心に位置する直線流路上の1点を検出点として3種類の蛍光強度を同時に計測するように配置されており、加圧により一方の蛇行流路部から送液された当該PCR溶液が、検出点を通過し終えた時点で、送液用マイクロブロアを停止させ、当該PCR溶液を、他方の蛇行流路部内に一定時間保持されることができる。
サーマルサイクル条件は、ホットスタートに96℃で20秒加熱後、さらに96℃で3秒と60℃で8秒を45サイクル繰り返す設定とした。この条件における45サイクルのサーマルサイクル時間は、9分40秒であった。
PCR溶液に逆転写酵素をあらかじめ混合させ、手軽にRNAからの逆転写反応とリアルタイムPCR法を1つの反応液から実施する手法が、One-step逆転写リアルタイムPCR法と呼ばれ、インフルエンザウイルスやノロウイルスなどのRNAウイルスの検出に利用されている。One-step逆転写リアルタイムPCR法では、一般的なRT−PCR法の様における2段階の工程をまとめることで、操作を著しく簡略化できるが、逆転写反応の逆転写酵素と、リアルタイムPCR法のDNAポリメラーゼが互いに干渉するため、PCRの効率が悪くなることが課題となっている。しかし、高速な温度制御により逆転写酵素とDNAポリメラーゼのそれぞれの活性に最適な温度へ速やかに移行することにより、逆転写反応とリアルタイムPCR法のそれぞれを効率よく順番に実施することができ、高効率なOne-step逆転写リアルタイムPCR法を行うことが可能である。実際に、高速リアルタイムPCR用のPCRチップ及び本発明の装置を用いて、ノロウイルスのG1遺伝子及びG2遺伝子を、One-step逆転写リアルタイムPCR法により定量を検討した。
Claims (4)
- 変性温度帯と伸長・アニーリング温度帯を形成できるヒーター、前記2つの温度帯間の試料溶液の移動を検出可能な蛍光検出器、前記2つの温度帯間の試料溶液の移動を可能にし、かつ、送液停止時には大気圧開放される1対の送液用機構、核酸増幅用チップを載置可能な基板、試料溶液の移動に関する蛍光検出器からの電気信号が送られて各送液用機構の駆動を制御する制御機構を備え、サーマルサイクル毎の蛍光強度の計測を行うことでリアルタイムPCRを行うことを特徴とするレシプロカルフロー型の核酸増幅装置(但し、送液用機構がマイクロブロア及び送風機である装置を除く)。
- 試料溶液が変性温度帯と伸長・アニーリング温度帯とを往復運動するサーマルサイクルを用いる核酸増幅方法であって、微小流路中の当該試料溶液の往復送液に送液停止時には大気圧開放される2個の送液用機構を用い、かつ、当該試料溶液が温度帯上の所定の位置へ到達した時点あるいはその直前に、当該送液用機構の送風を停止させる方法であり、前記微小流路は平面上に配置した前記変性温度帯及び前記伸長・アニーリング温度帯に近接するように接触させ、当該微小流路は当該流路の両端が当該送液用機構の停止時に大気圧開放される開放系流路である、核酸増幅方法(但し、送液用機構がマイクロブロア及び送風機である装置を除く)。
- 核酸増幅用チップであって、
該核酸増幅用チップは少なくとも1つの微小流路を備え、
該微小流路は変性温度帯に対応する曲線流路、伸長・アニーリング温度帯に対応する曲線流路、前記2つの曲線流路をつなぐ直線状又は曲線状の中間流路及び前記微小流路の両端部に送液用機構に接続可能な接続部を備え、
該核酸増幅用チップはガラス、石英、シリコン及びプラスチックから選択される材質から構成され、前記中間流路において微小流路内の試料溶液の蛍光強度を測定可能である、核酸増幅用チップ(ただし、前記中間流路が、特表2014−507937号公報の段落番号[0067]に記載の制限ゾーンを含むものを除く)。 - プラスチックから構成されるものである請求項3記載の核酸増幅用チップ。
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JP2020146303A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146313A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146316A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146305A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
WO2020189581A1 (ja) * | 2019-03-15 | 2020-09-24 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | 核酸増幅方法 |
JP7341492B2 (ja) * | 2019-04-05 | 2023-09-11 | 株式会社ゴーフォトン | 反応処理容器、反応処理容器の製造方法および反応処理方法 |
CN109971617A (zh) * | 2019-04-30 | 2019-07-05 | 郭嘉杰 | 一种pcr扩增装置的低温处理系统 |
US11465143B2 (en) | 2019-06-07 | 2022-10-11 | Nippon Sheet Glass Company, Limited | Reaction processing vessel |
CN110628607A (zh) * | 2019-10-10 | 2019-12-31 | 上海纽钛测控技术有限公司 | 适合突发事件现场应用的高效恒温pcr装置及实现方法 |
JP7417794B2 (ja) | 2019-12-10 | 2024-01-19 | 杏林製薬株式会社 | 核酸増幅方法、核酸増幅装置及び核酸増幅用チップ |
EP4202028A1 (en) | 2020-08-11 | 2023-06-28 | Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. | Nucleic acid amplification device, nucleic acid amplification method, and sample solution position control method |
CN116134124A (zh) | 2020-08-11 | 2023-05-16 | 杏林制药株式会社 | 核酸扩增芯片 |
CN112322472B (zh) * | 2020-11-05 | 2022-07-12 | 上海交通大学 | 一种适用于核酸检测的即时检测装置 |
JPWO2022153999A1 (ja) * | 2021-01-14 | 2022-07-21 | ||
WO2022219758A1 (ja) * | 2021-04-14 | 2022-10-20 | 株式会社日立ハイテク | サンプルのpcr解析を実行するためのデバイス、pcr反応装置、pcrシステムおよびpcr方法 |
JP7393070B1 (ja) | 2023-08-04 | 2023-12-06 | 株式会社ゴーフォトン | Pcr方法 |
Family Cites Families (49)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3515646B2 (ja) | 1995-09-18 | 2004-04-05 | 大塚電子株式会社 | マルチキャピラリ電気泳動装置 |
JP2002014100A (ja) | 2000-06-29 | 2002-01-18 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 反応チップ用基板およびこれから作製した反応チップ |
US7094379B2 (en) | 2001-10-24 | 2006-08-22 | Commissariat A L'energie Atomique | Device for parallel and synchronous injection for sequential injection of different reagents |
FR2831081B1 (fr) | 2001-10-24 | 2004-09-03 | Commissariat Energie Atomique | Dispositif d'injection parallelisee et synchronisee pour injections sequentielles de reactifs differents |
US7041481B2 (en) * | 2003-03-14 | 2006-05-09 | The Regents Of The University Of California | Chemical amplification based on fluid partitioning |
JP2005065607A (ja) * | 2003-08-26 | 2005-03-17 | Hitachi Ltd | 遺伝子処理チップおよび遺伝子処理装置 |
CA2479452C (en) | 2003-08-30 | 2008-11-04 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Method and device for determining analytes in a liquid |
JP2005204678A (ja) | 2004-01-19 | 2005-08-04 | Terumo Corp | プレフィルドシリンジ製造方法、プレフィルドシリンジ製造用治具およびプレフィルドシリンジ製造装置 |
KR100552706B1 (ko) | 2004-03-12 | 2006-02-20 | 삼성전자주식회사 | 핵산 증폭 방법 및 장치 |
KR100906749B1 (ko) | 2004-03-25 | 2009-07-09 | (주)바이오니아 | 인터컬레이팅 형광염료가 표지된 프로브를 이용한 핵산 증폭 측정 방법 |
JP3952036B2 (ja) | 2004-05-13 | 2007-08-01 | コニカミノルタセンシング株式会社 | マイクロ流体デバイス並びに試液の試験方法および試験システム |
JP2006271216A (ja) | 2005-03-28 | 2006-10-12 | Dainippon Ink & Chem Inc | 特定の塩基配列を有する核酸の有無を判定するシステムおよび判定方法 |
JP2008539759A (ja) | 2005-05-11 | 2008-11-20 | ナノリティックス・インコーポレイテッド | 多数の温度で生化学的又は化学的な反応を実施する方法及び装置 |
JP4830432B2 (ja) * | 2005-09-30 | 2011-12-07 | 横河電機株式会社 | 化学反応用カートリッジおよびその使用方法 |
GB2433259A (en) | 2005-11-30 | 2007-06-20 | Deltadot Ltd | Nucleic acid amplification method and microfluidic apparatus therefore |
AU2007225038B2 (en) * | 2006-03-15 | 2013-08-29 | Perkinelmer Health Sciences, Inc. | Integrated nucleic acid assays |
JP4685691B2 (ja) | 2006-04-13 | 2011-05-18 | 株式会社日立ソリューションズ | 検査チップ及び検査チップシステム |
JP4903518B2 (ja) | 2006-08-22 | 2012-03-28 | 三菱エンジニアリングプラスチックス株式会社 | 蛍光検出分析基板用芳香族ポリカーボネート樹脂組成物および蛍光検出分析基板 |
WO2008061129A2 (en) * | 2006-11-14 | 2008-05-22 | University Of Utah Research Foundation | Methods and compositions related to continuous flow thermal gradient pcr |
CN101542122B (zh) | 2006-12-09 | 2011-05-04 | 株式会社村田制作所 | 压电微型鼓风机 |
JP5036377B2 (ja) * | 2007-04-09 | 2012-09-26 | 株式会社日立ソリューションズ | 反応装置及び反応チップ |
JP5104097B2 (ja) | 2007-07-27 | 2012-12-19 | 株式会社村田製作所 | 流体移送装置 |
JP4957480B2 (ja) | 2007-09-20 | 2012-06-20 | 株式会社村田製作所 | 圧電マイクロポンプ |
JP5224801B2 (ja) * | 2007-12-21 | 2013-07-03 | キヤノン株式会社 | 核酸増幅装置 |
WO2009113356A1 (ja) | 2008-03-12 | 2009-09-17 | コニカミノルタエムジー株式会社 | 反応検出装置 |
JP5303983B2 (ja) | 2008-03-26 | 2013-10-02 | 株式会社島津製作所 | 反応処理方法及び反応処理装置 |
WO2009125676A1 (ja) | 2008-04-09 | 2009-10-15 | コニカミノルタエムジー株式会社 | 検査システム |
JP5115626B2 (ja) | 2008-06-03 | 2013-01-09 | 株式会社村田製作所 | 圧電マイクロブロア |
EP2312158B1 (en) | 2008-06-05 | 2016-04-27 | Murata Manufacturing Co. Ltd. | Piezoelectric microblower |
RU2385940C1 (ru) * | 2008-10-23 | 2010-04-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИНТЕЛ" | Способ определения нуклеиновых кислот методом полимеразно-цепной реакции в режиме реального времени и устройство для его осуществления |
JP5310373B2 (ja) | 2009-05-14 | 2013-10-09 | ソニー株式会社 | 光学的検出装置 |
EP2437887B1 (en) | 2009-06-04 | 2016-05-11 | Lockheed Martin Corporation | Multiple-sample microfluidic chip for dna analysis |
JP2011117805A (ja) | 2009-12-02 | 2011-06-16 | Beckman Coulter Inc | マイクロ流体チップ |
JP5277214B2 (ja) | 2010-07-27 | 2013-08-28 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | 自動分析装置 |
EP2611942A4 (en) | 2010-08-31 | 2015-01-14 | Canon Us Life Sciences Inc | ANTI-TURNING AT TEMPERATURE CHANGING |
US9114399B2 (en) | 2010-08-31 | 2015-08-25 | Canon U.S. Life Sciences, Inc. | System and method for serial processing of multiple nucleic acid assays |
EP2441520A1 (en) | 2010-10-12 | 2012-04-18 | Eppendorf AG | Real-time amplification and micro-array based detection of nucleic acid targets in a flow chip assay |
EP2661485A4 (en) | 2011-01-06 | 2018-11-21 | Meso Scale Technologies, LLC | Assay cartridges and methods of using the same |
US10131903B2 (en) * | 2011-04-01 | 2018-11-20 | The Regents Of The University Of California | Microfluidic platform for synthetic biology applications |
EP2699698B9 (en) | 2011-04-20 | 2020-07-15 | Mesa Biotech, Inc. | Oscillating amplification reaction for nucleic acids |
JP2013055921A (ja) * | 2011-09-09 | 2013-03-28 | National Institute Of Advanced Industrial Science & Technology | 核酸増幅方法 |
JP5211336B2 (ja) | 2012-02-16 | 2013-06-12 | 株式会社メトラン | ポンプユニット、呼吸補助装置 |
WO2013132645A1 (ja) * | 2012-03-09 | 2013-09-12 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 核酸増幅方法 |
JP6075722B2 (ja) | 2012-06-21 | 2017-02-08 | ハンファテクウィン株式会社Hanwha Techwin Co.,Ltd. | 作業機械 |
US20140005066A1 (en) * | 2012-06-29 | 2014-01-02 | Advanced Liquid Logic Inc. | Multiplexed PCR and Fluorescence Detection on a Droplet Actuator |
JP5692468B2 (ja) | 2012-08-10 | 2015-04-01 | 株式会社村田製作所 | ブロア |
US10550917B2 (en) | 2013-03-14 | 2020-02-04 | Cordell E. Ebeling | Slide-glide privacy blind barrier system |
JP6055922B2 (ja) * | 2013-08-08 | 2016-12-27 | パナソニック株式会社 | マイクロ流体デバイス |
SG11201610707RA (en) * | 2014-07-08 | 2017-01-27 | Nat Inst Of Advanced Ind Scien | Nucleic acid amplification device, nucleic acid amplification method, and chip for nucleic acid amplification |
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