JP6720234B2 - コードされている病原体抗原の発現を増加させるための、ヒストンステムループとポリ(a)配列又はポリアデニル化シグナルとを含むか又はコードしている核酸 - Google Patents
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Description
a)病原体抗原又はその断片、変異体、若しくは誘導体を含む少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている本発明の核酸配列によって解決される。
a)病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体を含む少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)任意でヒストンステムループの3’にヒストン下流要素(HDE)を有しない、少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードすることが特に好ましい。
a)好ましくは、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体を含む少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
c)ポリ(A)配列と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと
を含むか又はコードする。
式(I)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
ステム1又はステム2の境界エレメントN1−6は、1個〜6個、好ましくは2個〜6個、より好ましくは2個〜5個、更により好ましくは3個〜5個、最も好ましくは4個〜5個、又は5個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、
ステム1[N0−2GN3−5]は、エレメントステム2に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N0−2は、0個〜2個、好ましくは0個〜1個、より好ましくは1個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、N3−5は、3個〜5個、好ましくは4個〜5個、より好ましくは4個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、Gは、グアノシン又はそのアナログであり、任意でシチジン又はそのアナログによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム2におけるその相補的ヌクレオチドであるシチジンも、グアノシンによって置換され、
ループ配列[N0−4(U/T)N0−4]は、エレメントステム1とステム2との間に位置し、3個〜5個のヌクレオチド、より好ましくは4個のヌクレオチドの連続配列であり、各N0−4は、互いに独立して、0個〜4個、好ましくは1個〜3個、より好ましくは1個〜2個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、U/Tは、ウリジン又は任意でチミジンを表し、
ステム2[N3−5CN0−2]は、エレメントステム1に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N3−5は、3個〜5個、好ましくは4個〜5個、より好ましくは4個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、N0−2は、0個〜2個、好ましくは0個〜1個、より好ましくは1個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、Cは、シチジン又はそのアナログであり、任意でグアノシン又はそのアナログによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム1におけるその相補的ヌクレオチドであるグアノシンも、シチジンによって置換され、
ステム1及びステム2は、互いに塩基対合して逆相補的配列を形成することができ、前記塩基対合は、例えば、ヌクレオチドAとU/T又はGとCとのワトソン−クリック塩基対合、又は非ワトソン−クリック塩基対合(例えば、ゆらぎ塩基対合、逆ワトソン−クリック塩基対合、フーグスティーン塩基対合、逆フーグスティーン塩基対合)によってステム1とステム2との間で生じ得るか、或いは、互いに塩基対合して部分的に逆相補的な配列を形成することができ、この場合、1つのステムにおける1以上の塩基が、他のステムの逆相補的な配列に相補的塩基を有しないことに基づいて、ステム1とステム2との間で不完全な塩基対合が生じ得る)。
式(Ia)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
式(IIb)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
式(Ic)(ステム境界エレメントを含まない後生動物及び原生動物のヒストンステムループコンセンサス配列):
VGYYYYHHTHRVVRCB(式(Ic)に係る配列番号13)
SGYYYTTYTMARRRCS(式(Ic)に係る配列番号14)
SGYYCTTTTMAGRRCS(式(Ic)に係る配列番号15)
DGNNNBNNTHVNNNCH(式(Ie)に係る配列番号16)
RGNNNYHBTHRDNNCY(式(Ie)に係る配列番号17)
RGNDBYHYTHRDHNCY(式(Ie)に係る配列番号18)
VGYYYTYHTHRVRRCB(式(If)に係る配列番号19)
SGYYCTTYTMAGRRCS(式(If)に係る配列番号20)
SGYYCTTTTMAGRRCS(式(If)に係る配列番号21)
GGYYCTTYTHAGRRCC(式(Ig)に係る配列番号22)
GGCYCTTYTMAGRGCC(式(Ig)に係る配列番号23)
GGCTCTTTTMAGRGCC(式(Ig)に係る配列番号24)
DGHYCTDYTHASRRCC(式(Ih)に係る配列番号25)
GGCYCTTTTHAGRGCC(式(Ih)に係る配列番号26)
GGCYCTTTTMAGRGCC(式(Ih)に係る配列番号27)
H*H*HHVVGYYYYHHTHRVVRCBVHH*N*N*(式(IIc)に係る配列番号28)
M*H*MHMSGYYYTTYTMARRRCSMCH*H*H*(式(IIc)に係る配列番号29)
M*M*MMMSGYYCTTTTMAGRRCSACH*M*H*(式(IIc)に係る配列番号30)
N*N*NNNDGNNNBNNTHVNNNCHNHN*N*N*(式(IIe)に係る配列番号31)
N*N*HHNRGNNNYHBTHRDNNCYDHH*N*N*(式(IIe)に係る配列番号32)
N*H*HHVRGNDBYHYTHRDHNCYRHH*H*H*(式(IIe)に係る配列番号33)
H*H*MHMVGYYYTYHTHRVRRCBVMH*H*N*(式(IIf)に係る配列番号34)
M*M*MMMSGYYCTTYTMAGRRCSMCH*H*H*(式(IIf)に係る配列番号35)
M*M*MMMSGYYCTTTTMAGRRCSACH*M*H*(式(IIf)に係る配列番号36)
H*H*MAMGGYYCTTYTHAGRRCCVHN*N*M*(式(IIg)に係る配列番号37)
H*H*AAMGGCYCTTYTMAGRGCCVCH*H*M*(式(IIg)に係る配列番号38)
M*M*AAMGGCTCTTTTMAGRGCCMCY*M*M*(式(IIg)に係る配列番号39)
N*H*AAHDGHYCTDYTHASRRCCVHB*N*H*(式(IIh)に係る配列番号40)
H*H*AAMGGCYCTTTTHAGRGCCVMY*N*M*(式(IIh)に係る配列番号41)
H*M*AAAGGCYCTTTTMAGRGCCRMY*H*M*(式(IIh)に係る配列番号42)
外膜タンパク質A OmpA、バイオフィルム関連タンパク質Bap、輸送タンパク質MucK(アシネトバクター・バウマンニ、アシネトバクター感染症);変異表面糖タンパク質VSG、微小管関連タンパク質MAPP15、トランスシアリダーゼTSA(トリパノソーマ・ブルーセイ、アフリカ睡眠病(アフリカトリパノソーマ症));HIV p24抗原、HIVエンベロープタンパク質(Gp120、Gp41、Gp160)、ポリプロテインGAG、負因子タンパク質Nef、転写のトランス活性化因子Tat(HIV(ヒト免疫不全ウイルス)、AIDS(後天性免疫不全症候群));ガラクトース阻害性接着タンパク質GIAP、29kDa抗原Eh29、Gal/GalNAcレクチン、タンパク質CRT、125kDa免疫優性抗原、タンパク質M17、アドヘシンADH112、タンパク質STIRP(赤痢アメーバ、アメーバ症);主要表面タンパク質1〜5(MSP1a、MSP1b、MSP2、MSP3、MSP4、MSP5)、IV型分泌系タンパク質(VirB2、VirB7、VirB11、VirD4)(アナプラズマ属、アナプラズマ病);保護抗原PA、浮腫因子EF、致死因子LF、S層相同タンパク質SLH(炭疽菌、炭疽);アクラノリシン(acranolysin)、ホスホリパーゼD、コラーゲン結合タンパク質CbpA(溶血性アルカノバクテリア、溶血性アルカノバクテリア感染症);ヌクレオカプシドタンパク質NP、糖タンパク質前駆体GPC、糖タンパク質GP1、糖タンパク質GP2(フニンウイルス、アルゼンチン出血熱);キチンタンパク質層タンパク質、14kDa表面抗原A14、主要精子タンパク質MSP、MSP重合オーガナイズタンパク質MPOP、MSP繊維タンパク質2 MFP2、MSP重合活性化キナーゼMPAK、ABA−1様タンパク質ALB、タンパク質ABA−1、クチクリンCUT−1(回虫、回虫症);41kDaアレルゲンAsp v13、アレルゲンAsp f3、主要分生子表面タンパク質rodlet A、プロテアーゼPep1p、GPIアンカータンパク質Gel1p、GPIアンカータンパク質Crf1p(アスペルギルス属、アスペルギルス症);ファミリーVP26タンパク質、VP29タンパク質(アストロウイルス科、アストロウイルス感染症);桿小体関連タンパク質1 RAP−1、メロゾイト表面抗原MSA−1、MSA−2(a1、a2、b、c)、12D3、11C5、21B4、P29、変異赤血球表面抗原VESA1、頂端膜抗原1 AMA−1(バベシア属、バベシア症);溶血素、エンテロトキシンC、PXO1−51、グリコレートオキシダーゼ、ABCトランスポーター、ペニシリン結合タンパク質、亜鉛トランスポーターファミリータンパク質、プソイドウリジンシンターゼRsu、プラスミド複製タンパク質RepX、オリゴエンドペプチダーゼF、プロファージ膜タンパク質、タンパク質HemK、鞭毛抗原H、28.5kDa細胞表面抗原(セレウス菌、セレウス菌感染症);大T抗原LT、小T抗原、カプシドタンパク質VP1、カプシドタンパク質VP2(BKウイルス、BKウイルス感染症);29kDa−タンパク質、カスパーゼ−3様抗原、糖タンパク質(ブラストシスチス・ホミニス、ブラストシスチス・ホミニス感染症);酵母表面アドヘシンWI−1(ブラストマイセス・デルマチチジス、ブラストミセス症);核タンパク質N、ポリメラーゼL、基質タンパク質Z、糖タンパク質GP(マチュポウイルス、ボリビア出血熱);外表面タンパク質A OspA、外表面タンパク質OspB、外表面タンパク質OspC、デコリン結合タンパク質A DbpA、デコリン結合タンパク質B DbpB、鞭毛フィラメント41kDaコアタンパク質Fla、塩基性膜タンパク質A前駆体BmpA(免疫優性抗原P39)、外表面22kDaリポタンパク質前駆体(抗原IPLA7)、変異表面リポタンパク質vlsE(ボレリア属、ボレリア感染症);ボツリヌス神経毒素BoNT/A1、BoNT/A2、BoNT/A3、BoNT/B、BoNT/C、BoNT/D、BoNT/E、BoNT/F、BoNT/G、組み換えボツリヌス毒素F HcドメインFHc(ボツリヌス菌、ボツリヌス症(及び乳児ボツリヌス症));ヌクレオカプシド、糖タンパク質前駆体(サビアウイルス、ブラジル出血熱);銅/亜鉛スーパーオキシドジスムターゼSodC、バクテリオフェリチンBfr、50Sリボソームタンパク質RplL、OmpA様膜貫通ドメイン含有タンパク質Omp31、免疫原性39kDaタンパク質M5 P39、亜鉛ABCトランスポーター周辺質亜鉛結合タンパク質znuA、周辺質免疫原性タンパク質Bp26、30Sリボソームタンパク質S12 RpsL、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼGap、25kDa外膜免疫原性タンパク質前駆体Omp25、侵入タンパク質B lalB、誘発因子Tig、分子シャペロンDnaK、推定ペプチジル−プロリルcis−transイソメラーゼSurA、リポタンパク質Omp19、外膜タンパク質MotY Omp16、保存外膜タンパク質D15、リンゴ酸デヒドロゲナーゼMdh、IV型分泌系の成分(T4SS)VirJ、機能未知のリポタンパク質BAB1_0187(ブルセラ属、ブルセラ症);ABCトランスポーターファミリーのメンバー(LolC、OppA及びPotF)、推定リポタンパク質放出系膜貫通タンパク質LolC/E、フラゲリンFliC、バークホルデリア細胞内運動性A BimA、細菌伸長因子−Tu EF−Tu、17kDa OmpA様タンパク質、boaAコードタンパク質、boaBコードタンパク質(セパシア菌及び他のバークホルデリア属の種、バークホルデリア感染症);ミコリルトランスフェラーゼAg85A、ヒートショックタンパク質Hsp65、タンパク質TB10.4、19kDa抗原、タンパク質PstS3、ヒートショックタンパク質Hsp70(マイコバクテリウム・ウルセランス、ブルーリ潰瘍);ノロウイルスメジャー及びマイナーウイルスカプシドタンパク質VP1及びVP2、ゲノムポリプロテイン、サポウイルスカプシドタンパク質VP1、タンパク質Vp3、ゲノムポリプロテイン(カリシウイルス科、カリシウイルス感染症(ノロウイルス及びサポウイルス));主要外膜タンパク質PorA、フラゲリンFlaA、表面抗原CjaA、フィブロネクチン結合タンパク質CadF、アスパラギン酸/グルタミン酸結合ABCトランスポータータンパク質Peb1A、タンパク質FspA1、タンパク質FspA2(カンピロバクター属、カンピロバクター症);解糖酵素エノラーゼ、分泌アスパルチルプロテイナーゼSAP1−10、グリコホスファチジルイノシトール(GPI)結合細胞壁タンパク質、タンパク質Hyr1、補体受容体3関連タンパク質CR3−RP、アドヘシンAls3p、ヒートショックタンパク質90kDa hsp90、細胞表面疎水性タンパク質CSH(通常カンジダ・アルビカンス及び他のカンジダ属の種、カンジダ症);17kDa抗原、タンパク質P26、三量体オートトランスポーターアドヘシンTAA、バルトネラ属アドヘシンA BadA、可変発現外膜タンパク質Vomp、タンパク質Pap3、タンパク質HbpA、エンベロープ関連プロテアーゼHtrA、タンパク質OMP89、タンパク質GroEL、タンパク質LalB、タンパク質OMP43、ジヒドロリポアミドスクシニルトランスフェラーゼSucB(ヘンセラ菌、ネコひっかき病);無鞭毛表面タンパク質2、無鞭毛特異的表面タンパク質SSP4、クルジパイン、トランスシアリダーゼTS、トリポマスティゴート表面糖タンパク質TSA−1、補体調節タンパク質CRP−10、タンパク質G4、タンパク質G2、副鞭毛棹タンパク質PAR2、副鞭毛棹成分Par1、ムチン関連表面タンパク質MPSP(クルーズトリパノソーマ、シャガス病(アメリカトリパノソーマ症));エンベロープ糖タンパク質(gB、gC、gE、gH、gI、gK、gL)(水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)、水痘);主要外膜タンパク質MOMP、推定外膜タンパク質PMPC、外膜複合体タンパク質B OmcB、ヒートショックタンパク質Hsp60 HSP10、タンパク質IncA、III型分泌系由来のタンパク質、リボヌクレオチドレダクターゼ短鎖タンパク質NrdB、プラスミドタンパク質Pgp3、クラミジア外部タンパク質N CopN、抗原CT521、抗原CT425、抗原CT043、抗原TC0052、抗原TC0189、抗原TC0582、抗原TC0660、抗原TC0726、抗原TC0816、抗原TC0828(トラコーマクラミジア、クラミジア属);低カルシウム応答タンパク質E LCrE、クラミジア外部タンパク質N CopN、セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPknD、アシルキャリアータンパク質S−マロニルトランスフェラーゼFabD、一本鎖DNA結合タンパク質Ssb、主要外膜タンパク質MOMP、外膜タンパク質2 Omp2、多形膜タンパク質ファミリー(Pmp1、Pmp2、Pmp3、Pmp4、Pmp5、Pmp6、Pmp7、Pmp8、Pmp9、Pmp10、Pmp11、Pmp12、Pmp13、Pmp14、Pmp15、Pmp16、Pmp17、Pmp18、Pmp19、Pmp20、Pmp21)(肺炎クラミジア、肺炎クラミジア感染症);コレラ毒素B CTB、毒素同時制御ピリンA TcpA、毒素同時制御
ピリンTcpF、毒素同時制御ピリン生合成タンパク質F TcpF、コレラエンテロトキシンサブユニットA、コレラエンテロトキシンサブユニットB、熱安定性エンテロトキシンST、マンノース感受性赤血球凝集素MSHA、外膜タンパク質U ポリンompU、Poring Bタンパク質、多形膜タンパク質D(コレラ菌、コレラ);プロピオニル−CoAカルボキシラーゼPCC、14−3−3タンパク質、プロヒビチン、システインプロテアーゼ、グルタチオントランスフェラーゼ、ゲルソリン、カテプシンLプロテイナーゼCatL、外被タンパク質20.8kDa TP20.8、外被タンパク質31.8kDa TP31.8、リゾホスファチジン酸ホスファターゼLPAP、(肝臓ジストマ、肝ジストマ症);表面層タンパク質SLP、グルタミン酸デヒドロゲナーゼ抗原GDH、毒素A、毒素B、システインプロテアーゼCwp84、システインプロテアーゼCwp13、システインプロテアーゼCwp19、細胞壁タンパク質CwpV、鞭毛タンパク質FliC、鞭毛タンパク質FliD(クロストリジウム・ディフィシル、クロストリジウム・ディフィシル感染症);鼻炎ウイルス:カプシドタンパク質VP1、VP2、VP3、VP4;コロナウイルス:スパイクタンパク質S、エンベロープタンパク質E、膜タンパク質M、ヌクレオカプシドタンパク質N(通常、鼻炎ウイルス及びコロナウイルス、感冒(急性ウイルス性鼻咽頭炎;急性鼻感冒));プリオンタンパク質Prp(CJDプリオン、クロイツフェルト・ヤコブ病(CJD));エンベロープタンパク質Gc、エンベロープタンパク質Gn、ヌクレオカプシドタンパク質(クリミア−コンゴ出血熱ウイルス、クリミア−コンゴ出血熱(CCHF));ビルレンス関連DEADボックスRNAヘリカーゼ VAD1、ガラクトキシロマンナン−タンパク質GalXM、グルクロノキシロマンナンGXM、マンノタンパク質MP(クリプトコッカス・ネオフォルマンス、クリプトコックス症);酸性リボソームタンパク質P2 CpP2、ムチン抗原Muc1、Muc2、Muc3 Muc4、Muc5、Muc6、Muc7、表面接着タンパク質CP20、表面接着タンパク質CP23、表面タンパク質CP12、表面タンパク質CP21、表面タンパク質CP40、表面タンパク質CP60、表面タンパク質CP15、表面関連糖タンパク質gp40、表面関連糖タンパク質gp15、オーシスト壁タンパク質AB、プロフィリンPRF、アピラーゼ(クリプトスポリジウム属、クリプトスポリジウム症);脂肪酸及びレチノール結合タンパク質−1 FAR−1、メタロプロテイナーゼの組織阻害剤TIMP(TMP)、システインプロテイナーゼACEY−1、システインプロテイナーゼACCP−1、表面抗原Ac−16、分泌タンパク質2 ASP−2、メタロプロテアーゼ1 MTP−1、アスパルチルプロテアーゼ阻害剤API−1、表面関連抗原SAA−1、成体特異的分泌因子Xaセリンプロテアーゼ阻害剤抗凝固剤AP、カテプシンD様アスパラギン酸プロテアーゼARR−1(通常ブラジル鉤虫;複数の他の寄生虫、皮膚幼虫移行症(CLM));カテプシンL様プロテアーゼ、53/25kDa抗原、8kDaファミリーのメンバー、辺縁トリプシン様活性を有する嚢虫タンパク質TsAg5、六鉤幼虫タンパク質TSOL18、六鉤幼虫タンパク質TSOL45−1A、乳酸デヒドロゲナーゼA LDHA、乳酸デヒドロゲナーゼB LDHB(有鉤条虫、嚢虫症);pp65抗原、膜タンパク質pp15、カプシド基部外被タンパク質pp150、タンパク質M45、DNAポリメラーゼUL54、ヘリカーゼUL105、糖タンパク質gM、糖タンパク質gN、糖タンパク質H、糖タンパク質B gB、タンパク質UL83、タンパク質UL94、タンパク質UL99(サイトメガロウイルス(CMV)、サイトメガロウイルス感染症);カプシドタンパク質C、プレメンブレンタンパク質prM、膜タンパク質M、エンベロープタンパク質E(ドメインI、ドメインII、ドメインII)、タンパク質NS1、タンパク質NS2A、タンパク質NS2B、タンパク質NS3、タンパク質NS4A、タンパク質2K、タンパク質NS4B、タンパク質NS5(デングウイルス(DEN−1、DEN−2、DEN−3及びDEN−4)−フラビウイルス、デング熱);39kDaタンパク質(二核アメーバ、二核アメーバ症);ジフテリア毒素前駆体Tox、ジフテリア毒素DT、ピリン特異的ソルターゼSrtA、シャフトピリンタンパク質SpaA、先端ピリンタンパク質SpaC、マイナーピリンタンパク質SpaB、表面関連タンパク質DIP1281(ジフテリア菌、ジフテリア);糖タンパク質GP、核タンパク質NP、マイナー基質タンパク質VP24、メジャー基質タンパク質VP40、転写活性化因子VP30、ポリメラーゼ補因子VP35、RNAポリメラーゼL(エボラウイルス(EBOV)、エボラ出血熱);プリオンタンパク質(vCJDプリオン、異型クロイツフェルト・ヤコブ病(vCJD、nvCJD));UvrABC系タンパク質B、タンパク質Flp1、タンパク質Flp2、タンパク質Flp3、タンパク質TadA、ヘモグロビン受容体HgbA、外膜タンパク質TdhA、タンパク質CpsRA、調節因子CpxR、タンパク質SapA、18kDa抗原、外膜タンパク質NcaA、タンパク質LspA、タンパク質LspA1、タンパク質LspA2、タンパク質LspB、外膜成分DsrA、レクチンDltA、リポタンパク質Hlp、主要外膜タンパク質OMP、外膜タンパク質OmpA2(デュクレー菌、軟性下疳);アスパルチルプロテアーゼ1 Pep1、ホスホリパーゼB PLB、アルファマンノシダーゼ1 AMN1、グルカノシルトランスフェラーゼGEL1、ウレアーゼURE、ペルオキシソーム基質タンパク質Pmp1、プロリンリッチ抗原Pra、ヒトT細胞反応性タンパク質TcrP(コクシジオイデス・イミチス(Coccidioides immitis)及びコクシジオイデス・ポサダシ(Coccidioides posadasii)、コクシジオイデス真菌症);アレルゲンTri r 2、ヒートショックタンパク質60 Hsp60、真菌アクチンAct、抗原Tri r2、抗原Tri r4、抗原Tri t1、タンパク質IV、グリセロール3リン酸デヒドロゲナーゼGpd1、浸透圧センサHwSho1A、浸透圧センサHwSho1B、ヒスチジンキナーゼHwHhk7B、アレルゲンMala s 1、アレルゲンMala s 11、チオレドキシンTrx Mala s 13、アレルゲンMala f、アレルゲンMala s(通常白癬菌属(Trichophyton)の種、表皮糸状菌属(Epidermophyton)の種、マラセジア属(Malassezia)の種、ホルタエ・ウェルネッキー、皮膚糸状菌症);タンパク質EG95、タンパク質EG10、タンパク質EG18、タンパク質EgA31、タンパク質EM18、抗原EPC1、抗原B、抗原5、タンパク質P29、タンパク質14−3−3、8kDaタンパク質、ミオフィリン、ヒートショックタンパク質20 HSP20、糖タンパク質GP−89、脂肪酸結合タンパク質FAPB(エキノコックス属、エキノコックス症);主要表面タンパク質2 MSP2、主要表面タンパク質4 MSP4、MSP変異体SGV1、MSP変異体SGV2、外膜タンパク質OMP、外膜タンパク質19 OMP−19、主要抗原タンパク質MAP1、主要抗原タンパク質MAP1−2、主要抗原タンパク質MAP1B、主要抗原タンパク質MAP1−3、Erum2510コードタンパク質、タンパク質GroEL、タンパク質GroES、30kDa主要外膜タンパク質、GE 100kDaタンパク質、GE 130kDaタンパク質、GE 160kDaタンパク質(エーリキア属、エーリキア症);分泌抗原SagA、sagA様タンパク質SalA及びSalB、コラーゲンアドヘシンScm、表面タンパク質Fms1(EbpA(fm)、Fms5(EbpB(fm)、Fms9(EpbC(fm)及びFms10、タンパク質EbpC(fm)、96kDa免疫保護糖タンパク質G1(エンテロコッカス属、エンテロコッカス感染症);ゲノムポリプロテイン、ポリメラーゼ3D、ウイルスカプシドタンパク質VP1、ウイルスカプシドタンパク質VP2、ウイルスカプシドタンパク質VP3、ウイルスカプシドタンパク質VP4、プロテアーゼ2A、プロテアーゼ3C(エンテロウイルス属、エンテロウイルス感染症);外膜タンパク質OM、60kDa外膜タンパク質、細胞表面抗原OmpA、細胞表面抗原OmpB(sca5)、134kDa外膜タンパク質、31kDa外膜タンパク質、29.5kDa外膜タンパク質、細胞表面タンパク質SCA4、細胞表面タンパク質Adr1(RP827)、細胞表面タンパク質Adr2(RP828)、細胞表面タンパク質SCA1、侵入タンパク質invA、細胞分裂タンパク質fts、分泌タンパク質sec 0ファミリー、ビルレンスタンパク質virB、tlyA、tlyC、パルブリン様タンパク質Plp、プレタンパク質トランスロカーゼSecA、120kDa表面タンパク質抗原SPA、138kD複合体抗原、主要100−kDタンパク質(タンパク質I)、細胞質内タンパク質D、保護表面タンパク質抗原SPA(発疹チフスリケッチア、発疹チフス);エプスタイン−バー核抗
原(EBNA−1、EBNA−2、EBNA−3A、EBNA−3B、EBNA−3C、EBNA−リーダータンパク質(EBNA−LP))、潜在膜タンパク質(LMP−1、LMP−2A、LMP−2B)、早期抗原EBV−EA、膜抗原EBV−MA、ウイルスカプシド抗原EBV−VCA、アルカリ性ヌクレアーゼEBV−AN、糖タンパク質H、糖タンパク質gp350、糖タンパク質gp110、糖タンパク質gp42、糖タンパク質gHgL、糖タンパク質gB(エプスタイン−バーウイルス(EBV)、エプスタイン−バーウイルス感染性単核球症);カプシドタンパク質VP2、カプシドタンパク質VP1、主要タンパク質NS1(パルボウイルス属B19、伝染性紅斑(第五病));pp65抗原、糖タンパク質105、主要カプシドタンパク質、エンベロープ糖タンパク質H、タンパク質U51(ヒトヘルペスウイルス6(HHV−6)及びヒトヘルペスウイルス7(HHV−7)、突発性発疹);チオレドキシン−グルタチオンレダクターゼTGR、カテプシンL1及びL2、クニッツ型タンパク質KTM、ロイシンアミノペプチダーゼLAP、システインプロテイナーゼFas2、サポシン様タンパク質−2 SAP−2、チオレドキシンペルオキシダーゼTPx、Prx−1、Prx−2、カテプシンIシステインプロテイナーゼCL3、プロテアーゼカテプシンL CL1、ホスホグリセレートキナーゼPGK、27kDa分泌タンパク質、60kDaタンパク質HSP35アルファ、グルタチオントランスフェラーゼGST、28.5kDa外被抗原28.5kDa TA、カテプシンB3プロテアーゼCatB3、I型シスタチンステフィン−1、カテプシンL5、カテプシンL1g及びカテプシンB、脂肪酸結合タンパク質FABP、ロイシンアミノペプチダーゼLAP(肝蛭及び巨大肝蛭、肝蛭症);プリオンタンパク質(FFIプリオン、致死性家族性不眠症(FFI));毒物アレルゲンホモログ様タンパク質VAL−1、大量に存在する幼虫転写産物(abundant larval transcript)ALT−1、大量に存在する幼虫転写産物ALT−2、チオレドキシンペルオキシダーゼTPX、スズメバチアレルゲンホモログVAH、チオレドキシンペルオキシダーゼ2 TPX−2、抗原タンパク質SXP(ペプチドN、N1、N2、及びN3)、活性化関連タンパク質−1 ASP−1、チオレドキシンTRX、トランスグルタミナーゼBmTGA、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、ミオシン、スズメバチアレルゲンホモログVAH、175kDaコラゲナーゼ、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼGAPDH、角質コラーゲンCol−4、分泌幼虫酸性タンパク質SLAP、キチナーゼCHI−1、マルトース結合タンパク質MBP、解糖酵素フルクトース−1,6−二リン酸アルドラーゼFba、トロポミオシンTMY−1、線虫特異的遺伝子産物OvB20、オンコシスタチンCPI−2、Cox−2(フィラリア上科、フィラリア症);ホスホリパーゼC PLC、非耐熱性エンテロトキシンB、イオタ毒素成分Ib、タンパク質CPE1281、ピルビン酸フェレドキシンオキシドレダクターゼ、伸長因子G EF−G、パーフリンゴリジンO Pfo、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼGapC、フルクトース二リン酸アルドラーゼAlf2、ウェルシュ菌エンテロトキシンCPE、アルファ毒素AT、アルファ類毒素ATd、イプシロン−類毒素ETd、タンパク質HP、大細胞毒素TpeL、エンド−ベータ−N−アセチルグルコサミニダーゼNaglu、ホスホグリセロムターゼPgm(ウェルシュ菌、ウェルシュ菌による食中毒);ロイコトキシンlktA、アドヘシンFadA、外膜タンパク質RadD、高分子量アルギニン結合タンパク質(フゾバクテリウム属、フゾバクテリウム感染症);ホスホリパーゼC PLC、非耐熱性エンテロトキシンB、イオタ毒素成分Ib、タンパク質CPE1281、ピルビン酸フェレドキシンオキシドレダクターゼ、伸長因子G EF−G、パーフリンゴリジンO Pfo、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼGapC、フルクトース二リン酸アルドラーゼAlf2、ウェルシュ菌エンテロトキシンCPE、アルファ毒素AT、アルファ類毒素ATd、イプシロン−類毒素ETd、タンパク質HP、大細胞毒素TpeL、エンド−ベータ−N−アセチルグルコサミニダーゼNaglu、ホスホグリセロムターゼPgm(通常ウェルシュ菌;他のクロストリジウム属の種、ガス壊疽(クロストリジウム性筋壊死));リパーゼA、リパーゼB、ペルオキシダーゼDec1(ゲオトリクム・カンジドゥム、ゲオトリクム症);プリオンタンパク質(GSSプリオン、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群(GSS));包嚢壁タンパク質CWP1、CWP2、CWP3、変異表面タンパク質VSP、VSP1、VSP2、VSP3、VSP4、VSP5、VSP6、56kDa抗原、ピルビン酸フェレドキシンオキシドレダクターゼPFOR、アルコールデヒドロゲナーゼE ADHE、アルファ−ジアルジン、アルファ8−ジアルジン、アルファ1−ジアルジン、ベータ−ジアルジン、システインプロテアーゼ、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、アルギニンデイミナーゼADI、フルクトース−1,6−二リン酸アルドラーゼFBA、ジアルジア属栄養体抗原GTA(GTA1、GTA2)、オルニチンカルボキシルトランスフェラーゼOCT、横紋筋繊維−アセブリン様タンパク質SALP、ウリジンホスホリル様タンパク質UPL、アルファ−チューブリン、ベータ−チューブリン(ランブル鞭毛虫、ランブル鞭毛虫症);ABCトランスポーターファミリーのメンバー(LolC、OppA、及びPotF)、推定リポタンパク質放出系膜貫通タンパク質LolC/E、フラゲリンFliC、バークホルデリア細胞内運動性A BimA、細菌伸長因子−Tu EF−Tu、17kDa OmpA様タンパク質、boaAコードタンパク質(鼻疽菌、鼻疽);シクロフィリンCyp、24kDa第3段階幼虫タンパク質GS24、排出−分泌産物ESP(40kDa、80kDa、120kDa及び208kDa)(有棘顎口虫(Gnathostoma spinigerum)及び剛棘顎口虫(Gnathostoma hispidum)、顎口虫症);ピリンタンパク質、マイナーピリン関連サブユニットpilC、メジャーピリンサブユニット及び変異体pilE、pilS、相変異タンパク質porA、ポリンB PorB、タンパク質TraD、ナイセリア外膜抗原H.8、70kDa抗原、主要外膜タンパク質PI、外膜タンパク質PlA及びPlB、W抗原、表面タンパク質A NspA、トランスフェリン結合タンパク質TbpA、トランスフェリン結合タンパク質TbpB、PBP2、mtrRコードタンパク質、ponAコードタンパク質、膜パーミアーゼFbpBC、FbpABCタンパク質系、LbpABタンパク質、外膜タンパク質Opa、外膜トランスポーターFetA、鉄抑制制御因子MpeR(淋菌、淋病);外膜タンパク質A OmpA、外膜タンパク質C OmpC、外膜タンパク質K17 OmpK17(クレブシエラ・グラヌロマチス、鼡径部肉芽腫(ドノヴァン症));フィブロネクチン結合タンパク質Sfb、フィブロネクチン/フィブリノーゲン結合タンパク質FBP54、フィブロネクチン結合タンパク質FbaA、Mタンパク質1型Emm1、Mタンパク質6型Emm6、免疫グロブリン結合タンパク質35 Sib35、表面タンパク質R28 Spr28、スーパーオキシドジスムターゼ SOD、C5aペプチダーゼScpA、抗原I/II AgI/II、アドヘシンAspA、G関連アルファ2−マクログロブリン結合タンパク質GRAB、表面原線維タンパク質M5(化膿性連鎖球菌、A群連鎖球菌感染症);Cタンパク質β抗原、アルギニンデイミナーゼタンパク質、アドヘシンBibA、105kDaタンパク質BPS、表面抗原c、表面抗原R、表面抗原X、トリプシン耐性タンパク質R1、トリプシン耐性タンパク質R3、トリプシン耐性タンパク質R4、表面免疫原性タンパク質Sip、表面タンパク質Rib、ロイシンリッチ反復タンパク質LrrG、セリンリッチ反復タンパク質Srr−2、Cタンパク質アルファ抗原Bca、ベータ抗原Bag、表面抗原イプシロン、アルファ様タンパク質ALP1、アルファ様タンパク質ALP5表面抗原デルタ、アルファ様タンパク質ALP2、アルファ様タンパク質ALP3、アルファ様タンパク質ALP4、Cベータタンパク質Bac(ストレプトコッカス・アガラクチア、B群連鎖球菌感染症);トランスフェリン結合タンパク質2 Tbp2、ホスファターゼP4、外膜タンパク質P6、ペプチドグリカン関連リポタンパク質Pal、タンパク質D、タンパク質E、接着及び貫通タンパク質Hap、外膜タンパク質26 Omp26、外膜タンパク質P5(フィンブリン)、外膜タンパク質D15、外膜タンパク質OmpP2、5’−ヌクレオチダーゼNucA、外膜タンパク質P1、外膜タンパク質P2、外膜リポタンパク質Pcp、リポタンパク質E、外膜タンパク質P4、フクロキナーゼFucK、[Cu,Zn]−スーパーオキシドジスムターゼSodC、プロテアーゼHtrA、タンパク質O145、アルファ−ガラクトシルセラミド(インフルエンザ菌、インフルエンザ菌感染症);ポリメラーゼ3D、ウイルスカプシドタン
パク質VP1、ウイルスカプシドタンパク質VP2、ウイルスカプシドタンパク質VP3、ウイルスカプシドタンパク質VP4、プロテアーゼ2A、プロテアーゼ3C(エンテロウイルス、主にコクサッキーA型ウイルス及びエンテロウイルス71(EV71)、手足口病(HFMD));RNAポリメラーゼL、タンパク質L、糖タンパク質Gn、糖タンパク質Gc、ヌクレオカプシドタンパク質S、エンベロープ糖タンパク質G1、核タンパク質NP、タンパク質N、ポリプロテインM(シンノンブルウイルス、ハンタウイルス、ハンタウイルス肺症候群(HPS));ヒートショックタンパク質HspA、ヒートショックタンパク質HspB、シトレートシンターゼGltA、タンパク質UreB、ヒートショックタンパク質Hsp60、好中球活性化タンパク質NAP、カタラーゼKatA、空胞化細胞毒素VacA、ウレアーゼアルファUreA、ウレアーゼベータUreb、タンパク質Cpn10、タンパク質groES、ヒートショックタンパク質Hsp10、タンパク質MopB、細胞毒性関連10kDaタンパク質CAG、36kDa抗原、ベータ−ラクタマーゼHcpA、ベータ−ラクタマーゼHcpB(ピロリ菌、ピロリ菌感染症);一体膜タンパク質、凝集傾向タンパク質、O−抗原、毒素抗原Stx2B、毒素抗原Stx1B、接着抗原断片Int28、タンパク質EspA、タンパク質EspB、インチミン、タンパク質Tir、タンパク質IntC300、タンパク質Eae(大腸菌O157:H7、O111及びO104:H4、溶血性尿毒症症候群(HUS));RNAポリメラーゼL、タンパク質L、糖タンパク質Gn、糖タンパク質Gc、ヌクレオカプシドタンパク質S、エンベロープ糖タンパク質G1、核タンパク質NP、タンパク質N、ポリプロテインM(ブニヤウイルス科、腎症候性出血熱(HFRS));糖タンパク質G、基質タンパク質M、核タンパク質N、融合タンパク質F、ポリメラーゼL、タンパク質W、タンパク質C、リンタンパク質p、非構造タンパク質V(ヘニパウイルス(ヘンドラウイルス、ニパーウイルス)、ヘニパウイルス感染症);ポリプロテイン、糖タンパク質Gp2、A型肝炎表面抗原HBAg、タンパク質2A、ウイルスタンパク質VP1、ウイルスタンパク質VP2、ウイルスタンパク質VP3、ウイルスタンパク質VP4、タンパク質P1B、タンパク質P2A、タンパク質P3AB、タンパク質P3D(A型肝炎ウイルス、A型肝炎);B型肝炎表面抗原HBsAg、B型肝炎コア抗原HbcAg、ポリメラーゼ、タンパク質Hbx、preS2中央面タンパク質、表面タンパク質L、大Sタンパク質、ウイルスタンパク質VP1、ウイルスタンパク質VP2、ウイルスタンパク質VP3、ウイルスタンパク質VP4(B型肝炎ウイルス(HBV)、B型肝炎);エンベロープ糖タンパク質E1 gp32 gp35、エンベロープ糖タンパク質E2 NS1 gp68 gp70、カプシドタンパク質C、コアタンパク質Core、ポリプロテイン、ウイルスタンパク質VP1、ウイルスタンパク質VP2、ウイルスタンパク質VP3、ウイルスタンパク質VP4、抗原G、タンパク質NS3、タンパク質NS5A、(C型肝炎ウイルス、C型肝炎);ウイルスタンパク質VP1、ウイルスタンパク質VP2、ウイルスタンパク質VP3、ウイルスタンパク質VP4、大肝炎デルタ抗原、小肝炎デルタ抗原(D型肝炎ウイルス、D型肝炎);ウイルスタンパク質VP1、ウイルスタンパク質VP2、ウイルスタンパク質VP3、ウイルスタンパク質VP4、カプシドタンパク質E2(E型肝炎ウイルス、E型肝炎);糖タンパク質L UL1、ウラシル−DNAグリコシラーゼUL2、タンパク質UL3、タンパク質UL4、DNA複製タンパク質UL5、ポータルタンパク質UL6、ビリオン成熟タンパク質UL7、DNAヘリカーゼUL8、複製開始点結合タンパク質UL9、糖タンパク質M UL10、タンパク質UL11、アルカリ性エキソヌクレアーゼUL12、セリン−スレオニンタンパク質キナーゼUL13、外被タンパク質UL14、ターミナーゼUL15、外被タンパク質UL16、タンパク質UL17、カプシドタンパク質VP23 UL18、主要カプシドタンパク質VP5 UL19、膜タンパク質UL20、外被タンパク質UL21、糖タンパク質H(UL22)、チミジンキナーゼUL23、タンパク質UL24、タンパク質UL25、カプシドタンパク質P40(UL26、VP24、VP22A)、糖タンパク質B(UL27)、ICP18.5タンパク質(UL28)、主要DNA結合タンパク質ICP8(UL29)、DNAポリメラーゼUL30、核基質タンパク質UL31、エンベロープ糖タンパク質UL32、タンパク質UL33、核内膜タンパク質UL34、カプシドタンパク質VP26(UL35)、大外被タンパク質UL36、カプシド集合タンパク質UL37、VP19Cタンパク質(UL38)、リボヌクレオチドレダクターゼ(大サブユニット)UL39、リボヌクレオチドレダクターゼ(小サブユニット)UL40、外被タンパク質/ビリオンホストシャットオフVHSタンパク質(UL41)、DNAポリメラーゼ前進因子UL42、膜タンパク質UL43、糖タンパク質C(UL44)、膜タンパク質UL45、外被タンパク質VP11/12(UL46)、外被タンパク質VP13/14(UL47)、ビリオン成熟タンパク質VP16(UL48、アルファ−TIF)、エンベロープタンパク質UL49、dUTPジホスファターゼUL50、外被タンパク質UL51、DNAヘリカーゼ/プライマーゼ複合体タンパク質UL52、糖タンパク質K(UL53)、転写調節タンパク質IE63(ICP27、UL54)、タンパク質UL55、タンパク質UL56、ウイルス複製タンパク質ICP22(IE68、US1)、タンパク質US2、セリン/スレオニンタンパク質キナーゼUS3、糖タンパク質G(US4)、糖タンパク質J(US5)、糖タンパク質D(US6)、糖タンパク質I(US7)、糖タンパク質E(US8)、外被タンパク質US9、カプシド/外被タンパク質US10、Vmw21タンパク質(US11)、ICP47タンパク質(IE12、US12)、主要転写活性化因子ICP4(IE175、RS1)、E3ユビキチンリガーゼICP0(IE110)、潜在関連タンパク質1 LRP1、潜在関連タンパク質2 LRP2、神経毒性因子RL1(ICP34.5)、潜在関連転写産物LAT(単純ヘルペスウイルス1及び2(HSV−1及びHSV−2)、単純ヘルペス);ヒートショックタンパク質Hsp60、細胞表面タンパク質H1C、ジペプチジルペプチダーゼIV型DppIV、M抗原、70kDaタンパク質、17kDaヒストン様タンパク質(ヒストプラスマ・カプスラーツム、ヒストプラスマ症);脂肪酸及びレチノール結合タンパク質−1 FAR−1、メタロプロテイナーゼの組織阻害剤TIMP(TMP)、システインプロテイナーゼACEY−1、システインプロテイナーゼACCP−1、表面抗原Ac−16、分泌タンパク質2 ASP−2、メタロプロテアーゼ1 MTP−1、アスパルチルプロテアーゼ阻害剤API−1、表面関連抗原SAA−1、表面関連抗原SAA−2、成体特異的分泌因子Xa、セリンプロテアーゼ阻害剤抗凝固剤AP、カテプシンD様アスパラギン酸プロテアーゼARR−1、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、アスパラギン酸プロテアーゼAPR−1、アセチルコリンエステラーゼAChE(ズビニ鉤虫及びアメリカ鉤虫、鉤虫感染症);タンパク質NS1、タンパク質NP1、タンパク質VP1、タンパク質VP2、タンパク質VP3(ヒトボカウイルス(HBoV)、ヒトボカウイルス感染症);主要表面タンパク質2 MSP2、主要表面タンパク質4 MSP4、MSP変異体SGV1、MSP変異体SGV2、外膜タンパク質OMP、外膜タンパク質19 OMP−19、主要抗原タンパク質MAP1、主要抗原タンパク質MAP1−2、主要抗原タンパク質MAP1B、主要抗原タンパク質MAP1−3、Erum2510コードタンパク質、タンパク質GroEL、タンパク質GroES、30kDa主要外膜タンパク質、GE100kDaタンパク質、GE130kDaタンパク質、GE160kDaタンパク質(エーリキア・エウィンギイ、ヒトエーリキア・エウィンギイ症);主要表面タンパク質1−5(MSP1a、MSP1b、MSP2、MSP3、MSP4、MSP5)、IV型分泌系タンパク質VirB2、VirB7、VirB11、VirD4(アナプラズマ・ファゴサイトフィルム、ヒト顆粒球アナプラズマ症(HGA));タンパク質NS1、小疎水性タンパク質NS2、SHタンパク質、融合タンパク質F、糖タンパク質G、基質タンパク質M、基質タンパク質M2−1、基質タンパク質M2−2、リンタンパク質P、核タンパク質N、ポリメラーゼL(ヒトメタニューモウイルス(hMPV)、ヒトメタニューモウイルス感染症);主要表面タンパク質2 MSP2、主要表面タンパク質4 MSP4、MSP変異体SGV1、MSP変異体SGV2、外膜タンパク質OMP、外膜タンパク質19 OMP−19、主要抗原タンパク質MAP1、主要抗原タンパク質MAP1−2、主要抗原タンパク質MAP1B、主要抗原タンパク質MAP1−3、Erum2510コードタンパク質、タンパク質GroEL、タンパク質GroES、30kDa主要外膜タンパク質、
GE100kDaタンパク質、GE130kDaタンパク質、GE160kDaタンパク質(エーリキア・シャフェンシス、ヒト単球エーリキア症);複製タンパク質E1、調節タンパク質E2、タンパク質E3、タンパク質E4、タンパク質E5、タンパク質E6、タンパク質E7、タンパク質E8、主要カプシドタンパク質L1、マイナーカプシドタンパク質L2(ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)感染症);融合タンパク質F、赤血球凝集素−ノイラミニダーゼHN、糖タンパク質G、基質タンパク質M、リンタンパク質P、核タンパク質N、ポリメラーゼL(ヒトパラインフルエンザウイルス(HPIV)、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症);赤血球凝集素(HA)、ノイラミニダーゼ(NA)、核タンパク質(NP)、M1タンパク質、M2タンパク質、NS1タンパク質、NS2タンパク質(NEPタンパク質:核外移行タンパク質)、PAタンパク質、PB1タンパク質(ポリメラーゼ塩基性1タンパク質)、PB1−F2タンパク質及びPB2タンパク質(オルソミクソウイルス科、インフルエンザウイルス(インフルエンザ));ゲノムポリプロテイン、タンパク質E、タンパク質M、カプシドタンパク質C(日本脳炎ウイルス、日本脳炎);RTX毒素、IV型ピリ、主要ピラスサブユニットPilA、調節性転写因子PilS及びPilR、タンパク質sigma54、外膜タンパク質(キンゲラ・キンゲ、キンゲラ・キンゲ感染症);プリオンタンパク質(クーループリオン、クールー);核タンパク質N、ポリメラーゼL、基質タンパク質Z、糖タンパク質GP(ラッサウイルス、ラッサ熱);ペプチドグリカン関連リポタンパク質PAL、60kDaシャペロニンCpn60(groEL、HspB)、IV型ピリンPilE、外膜タンパク質MIP、主要外膜タンパク質MompS、亜鉛メタロプロテイナーゼMSP(レジオネラ・ニューモフィラ、在郷軍人病(レジオネラ病、ポンティアック熱));P4ヌクレアーゼ、タンパク質WD、リボヌクレオチドレダクターゼM2、表面膜糖タンパク質Pg46、システインプロテイナーゼCP、グルコース調節タンパク質78 GRP−78、ステージ特異的S抗原様タンパク質A2、ATPase F1、ベータ−チューブリン、ヒートショックタンパク質70 Hsp70、KMP−11、糖タンパク質GP63、タンパク質BT1、ヌクレオシドヒドロラーゼNH、細胞表面タンパク質B1、リボソームタンパク質P1様タンパク質P1、ステロール24−c−メチルトランスフェラーゼSMT、LACKタンパク質、ヒストンH1、SPB1タンパク質、チオール特異的抗酸化剤TSA、タンパク質抗原STl1、シグナルペプチダーゼSP、ヒストンH2B、表面抗原PSA−2、システインプロテイナーゼb Cpb(リーシュマニア属、リーシュマニア症);主要膜タンパク質I、セリンリッチ抗原−45kDa、10kDaシャペロニンGroES、HSPkDa抗原、アミノ−オキソノナノエートシンターゼAONS、タンパク質組み換え酵素A RecA、アセチル−/プロピオニル−補酵素Aカルボキシラーゼアルファ、アラニンラセマーゼ、60kDaシャペロニン2、ESAT−6様タンパク質EcxB(L−ESAT−6)、タンパク質Lsr2、タンパク質ML0276、ヘパリン結合赤血球凝集素HBHA、ヒートショックタンパク質65 Hsp65、mycP1又はML0041コードタンパク質、htrA2又はML0176コードタンパク質、htrA4又はML2659コードタンパク質、gcp又はML0379コードタンパク質、clpC又はML0235コードタンパク質(らい菌及びマイコバクテリウム・レプロマトシス、らい病);外膜タンパク質LipL32、膜タンパク質LIC10258、膜タンパク質LP30、膜タンパク質LIC12238、Ompa様タンパク質Lsa66、表面タンパク質LigA、表面タンパク質LigB、主要外膜タンパク質OmpL1、外膜タンパク質LipL41、タンパク質LigAni、表面タンパク質LcpA、接着タンパク質LipL53、外膜タンパク質UpL32、表面タンパク質Lsa63、フラゲリンFlaB1、膜リポタンパク質LipL21、膜タンパク質pL40、レプトスピラ表面アドヘシンLsa27、外膜タンパク質OmpL36、外膜タンパク質OmpL37、外膜タンパク質OmpL47、外膜タンパク質OmpL54、アシルトランスフェラーゼLpxA(レプトスピラ属、レプトスピラ症);リステリオリシンO前駆体Hly(LLO)、侵入関連タンパク質Iap(P60)、リステリオリシン調節タンパク質PrfA、亜鉛メタロプロテイナーゼMpl、ホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパーゼC PLC(PlcA、PlcB)、O−アセチルトランスフェラーゼOat、ABCトランスポーターパーミアーゼIm.G_1771、接着タンパク質LAP、LAP受容体Hsp60、アドヘシンLapB、ヘモリシンリステリオリシンO LLO、タンパク質ActA、インターナリンA InlA、タンパク質lnlB(リステリア菌、リステリア症);外表面タンパク質A OspA、外表面タンパク質OspB、外表面タンパク質OspC、デコリン結合タンパク質A DbpA、デコリン結合タンパク質B DbpB、鞭毛フィラメント41kDaコアタンパク質Fla、塩基性膜タンパク質A BmpA(免疫優性抗原P39)、外側表面22kDaリポタンパク質前駆体(抗原IPLA7)、可変表面リポタンパク質vlsE(通常、ライム病ボレリア及び他のボレリア属の種、ライム病(ライムボレリア症));毒物アレルゲンホモログ様タンパク質VAL−1、大量に存在する幼虫転写産物ALT−1、大量に存在する幼虫転写産物ALT−2、チオレドキシンペルオキシダーゼTPX、スズメバチアレルゲンホモログVAH、チオレドキシンペルオキシダーゼ2 TPX−2、抗原タンパク質SXP(ペプチドN、N1、N2、及びN3)、活性化関連タンパク質−1 ASP−1、チオレドキシンTRX、トランスグルタミナーゼBmTGA、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、ミオシン、スズメバチアレルゲンホモログVAH、175kDaコラゲナーゼ、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼGAPDH、角質コラーゲンCol−4、分泌幼虫酸性タンパク質SLAP、キチナーゼCHI−1、マルトース結合タンパク質MBP、解糖酵素フルクトース−1,6−二リン酸アルドラーゼFba、トロポミオシンTMY−1、線虫特異的遺伝子産物OvB20、オンコシスタチンCPI−2、タンパク質Cox−2(バンクロフト糸状虫及びマレー糸状虫、リンパ管フィラリア症(象皮病));糖タンパク質GP、基質タンパク質Z、ポリメラーゼL、核タンパク質N(リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)、リンパ球性脈絡髄膜炎);トロンボスポンジン関連匿名タンパク質TRAP、SSP2スポロゾイト表面タンパク質2、頂端膜抗原1 AMA1、桿小体膜抗原RMA1、酸性塩基性反復抗原ABRA、細胞横断タンパク質PF、タンパク質Pvs25、メロゾイト表面タンパク質1 MSP−1、メロゾイト表面タンパク質2 MSP−2、リング感染赤血球表面抗原RESA肝臓期抗原3 LSA−3、タンパク質Eba−175、セリン反復抗原5 SERA−5、スポロゾイト周囲タンパク質CS、メロゾイト表面タンパク質3 MSP3、メロゾイト表面タンパク質8 MSP8、エノラーゼPF10、肝細胞赤血球タンパク質17kDa HEP17、赤血球膜タンパク質1 EMP1、タンパク質Kベータメロゾイト表面タンパク質4/5 MSP4/5、ヒートショックタンパク質Hsp90、グルタミン酸リッチタンパク質GLURP、メロゾイト表面タンパク質4 MSP−4、タンパク質STARP、スポロゾイト周囲タンパク質関連抗原前駆体CRA(プラスモディウム属、マラリア);核タンパク質N、膜関連タンパク質VP24、マイナー核タンパク質VP30、ポリメラーゼ補因子VP35、ポリメラーゼL、基質タンパク質VP40、エンベロープ糖タンパク質GP(マールブルグウイルス、マールブルグ病(MHF));タンパク質C、基質タンパク質M、リンタンパク質P、非構造タンパク質V、赤血球凝集素糖タンパク質H、ポリメラーゼL、核タンパク質N、融合タンパク質F(麻疹ウイルス、麻疹);ABCトランスポーターファミリーのメンバー(LolC、OppA、及びPotF)、推定リポタンパク質放出系膜貫通タンパク質LolC/E、フラゲリンFliC、バークホルデリア細胞内運動性A BimA、細菌伸長因子−Tu EF−Tu、17kDa OmpA様タンパク質、boaAコードタンパク質、boaBコードタンパク質(類鼻疽菌、類鼻疽(ホイットモア病));ピリンタンパク質、マイナーピリン関連サブユニットpilC、主要ピリンサブユニット及び変異体pilE、pilS、相変異タンパク質porA、ポリンB PorB、タンパク質TraD、ナイセリア外膜抗原H.8、70kDa抗原、主要外膜タンパク質PI、外膜タンパク質PlA及びPlB、W抗原、表面タンパク質A NspA、トランスフェリン結合タンパク質TbpA、トランスフェリン結合タンパク質TbpB、PBP2、mtrRコードタンパク質、ponAコードタンパク質、膜パーミアーゼFbpBC、FbpABCタンパク質系、LbpABタンパク質、外膜タンパク質Opa、外膜
トランスポーターFetA、鉄抑制調節因子MpeR、H因子結合タンパク質fHbp、アドヘシンNadA、タンパク質NhbA、抑制因子FarR(髄膜炎菌、髄膜炎菌性疾患);66kDaタンパク質、22kDaタンパク質(通常、横川吸虫、横川吸虫症);極性管状タンパク質(グルケア属(Glugea)では34kDa、75kDa、及び170kDa、エンセファリトゾーン属(Encephalitozoon)では35kDa、55kDa及び150kDa)、キネシン関連タンパク質、RNAポリメラーゼII最大サブユニット、類似又は一体膜タンパク質YIPA、抗サイレンシングタンパク質1、ヒートショック転写因子HSF、タンパク質キナーゼ、チミジンキナーゼ、NOP−2様核小体タンパク質(微胞子虫門、微胞子虫症);CASP8及びFADD様アポトーシス調節因子、グルタチオンペルオキシダーゼGPX1、RNAヘリカーゼNPH−II NPH2、ポリ(A)ポリメラーゼ触媒サブユニットPAPL、主要エンベロープタンパク質P43K、早期転写因子70kDaサブユニットVETFS、早期転写因子82kDaサブユニットVETFL、メタロエンドペプチダーゼG1型、ヌクレオシドトリホスファターゼI NPH1、複製タンパク質A28様MC134L、RNAポリメラーゼ7kDaサブユニットRPO7(伝染性軟属腫ウイルス(MCV)、伝染性軟属腫(MC));基質タンパク質M、リンタンパク質P/V、小疎水性タンパク質SH、核タンパク質N、タンパク質V、融合糖タンパク質F、赤血球凝集素−ノイラミニダーゼHN、RNAポリメラーゼL(流行性耳下腺炎ウイルス、流行性耳下腺炎);外膜タンパク質OM、細胞表面抗原OmpA、細胞表面抗原OmpB(sca5)、細胞表面タンパク質SCA4、細胞表面タンパク質SCA1、細胞質内タンパク質D、結晶質表面層タンパク質SLP、保護表面タンパク質抗原SPA(発疹熱リケッチア、発疹熱(地方性発疹チフス));アドヘシンP1、アドヘシンP30、タンパク質p116、タンパク質P40、細胞骨格タンパク質HMW1、細胞骨格タンパク質HMW2、細胞骨格タンパク質HMW3、MPN152コードタンパク質、MPN426コードタンパク質、MPN456コードタンパク質、MPN−500コードタンパク質(肺炎マイコプラスマ、マイコプラスマ肺炎);NocA、鉄依存性調節因子タンパク質、VapA、VapD、VapF、VapG、カゼイン分解性プロテアーゼ、フィラメント先端関連43kDaタンパク質、タンパク質P24、タンパク質P61、15kDaタンパク質、56kDaタンパク質(通常、ノカルジア・アステロイデス及び他のノカルジア属の種、ノカルジア症);毒物アレルゲンホモログ様タンパク質VAL−1、大量に存在する幼虫転写産物ALT−1、大量に存在する幼虫転写産物ALT−2、チオレドキシンペルオキシダーゼTPX、スズメバチアレルゲンホモログVAH、チオレドキシンペルオキシダーゼ2 TPX−2、抗原タンパク質SXP(ペプチドN、N1、N2、及びN3)、活性化関連タンパク質−1 ASP−1、チオレドキシンTRX、トランスグルタミナーゼBmTGA、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、ミオシン、スズメバチアレルゲンホモログVAH、175kDaコラゲナーゼ、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼGAPDH、角質コラーゲンCol−4、分泌幼虫酸性タンパク質SLAP、キチナーゼCHI−1、マルトース結合タンパク質MBP、解糖酵素フルクトース−1,6−二リン酸アルドラーゼFba、トロポミオシンTMY−1、線虫特異的遺伝子産物OvB20、オンコシスタチンCPI−2、Cox−2(回旋糸状虫、オンコセルカ症(河川盲目症));43kDa分泌糖タンパク質、糖タンパク質gp0、糖タンパク質gp75、抗原Pb27、抗原Pb40、ヒートショックタンパク質Hsp65、ヒートショックタンパク質Hsp70、ヒートショックタンパク質Hsp90、タンパク質P10、トリオースホスフェートイソメラーゼTPI、N−アセチル−グルコサミン結合レクチンパラコクシン、28kDaタンパク質Pb28(ブラジルパラコクシジオイデス、パラコクシジオイドミコーシス(南アメリカブラストミセス症));28kDaクルジパイン様システインプロテアーゼPw28CCP(通常、ヴェステルマン肺吸虫及び他の肺吸虫属の種、肺吸虫症);外膜タンパク質OmpH、外膜タンパク質Omp28、タンパク質PM1539、タンパク質PM0355、タンパク質PM1417、修復タンパク質MutL、タンパク質BcbC、タンパク質PM0305、ギ酸デヒドロゲナーゼN、タンパク質PM0698、タンパク質PM1422、DNAジャイレース、リポタンパク質PlpE、接着タンパク質Cp39、ヘム獲得系受容体HasR、39kDaカプセル状タンパク質、鉄調節OMP IROMP、外膜タンパク質OmpA87、線毛タンパク質Ptf、線毛サブユニットタンパク質PtfA、トランスフェリン結合タンパク質Tbpl、エステラーゼ酵素MesA、パスツレラ・ムルトシダ(Pasteurella multocida)毒素PMT、接着タンパク質Cp39(パスツレラ属、パスツレラ症);”線維状赤血球凝集素FhaB、アデニレートシクラーゼCyaA、百日咳毒素サブユニット4前駆体PtxD、ペルタクチン前駆体Prn、毒素サブユニット1 PtxA、タンパク質Cpn60、タンパク質brkA、百日咳毒素サブユニット2前駆体PtxB、百日咳毒素サブユニット3前駆体PtxC、百日咳毒素サブユニット5前駆体PtxE、ペルタクチンPrn、タンパク質Fim2、タンパク質Fim3;”(百日咳菌、百日咳);”F1カプセル抗原、ビルレンス関連V抗原、分泌エフェクタータンパク質LcrV、V抗原、外膜プロテアーゼPla,分泌エフェクタータンパク質YopD、推定分泌タンパク質チロシンホスファターゼYopH、ニードル複合体主要サブユニットYscF、タンパク質キナーゼYopO、推定オートトランスポータータンパク質YapF、内膜ABCトランスポーターYbtQ(Irp7)、推定糖結合タンパク質YPO0612、ヒートショックタンパク質90 HtpG、推定スルファターゼタンパク質YdeN、外膜リポタンパク質キャリアータンパク質LolA、分泌シャペロンYerA、推定リポタンパク質YPO0420、溶血素活性化因子タンパク質HpmB、ペスチシン/エルシニアバクチン外膜受容体Psn、分泌エフェクタータンパク質YopE、分泌エフェクタータンパク質YopF、分泌エフェクタータンパク質YopK、外膜タンパク質YopN、外膜タンパク質YopM、コアグラーゼ/フィブリノリジン前駆体Pla;”(ペスト菌、ペスト);タンパク質PhpA、表面アドヘシンPsaA、ニューモリシンPly、ATP依存性プロテアーゼClp、リポエート−タンパク質リガーゼLplA、細胞壁表面アンカータンパク質psrP、ソルターゼSrtA、グルタミル−tRNAシンテターゼGltX、コリン結合タンパク質A CbpA、肺炎球菌表面タンパク質A PspA、肺炎球菌表面タンパク質C PspC、6−ホスホグルコン酸デヒドロゲナーゼGnd、鉄結合タンパク質PiaA、ムレインヒドロラーゼLytB、プロテオンLytC、プロテアーゼA1(肺炎球菌、肺炎球菌感染症);主要表面タンパク質B、ケシン様プロテアーゼKEX1、タンパク質A12、55kDa抗原P55、主要表面糖タンパク質Msg(ニューモシスチス肺炎菌、ニューモシスチス肺炎(PCP));ゲノムポリプロテイン、ポリメラーゼ3D、ウイルスカプシドタンパク質VP1、ウイルスカプシドタンパク質VP2、ウイルスカプシドタンパク質VP3、ウイルスカプシドタンパク質VP4、プロテアーゼ2A、プロテアーゼ3C(ポリオウイルス、ポリオ);タンパク質Nfa1、エキセンジン−3、分泌リパーゼ、カテプシンB様プロテアーゼ、システインプロテアーゼ、カテプシン、ペルオキシレドキシン、タンパク質Cry1Ac(通常、ネグレリア・フォーレリ、原発性アメーバ性髄膜脳炎(PAM));アグノプロテイン、大T抗原、小T抗原、主要カプシドタンパク質VP1、マイナーカプシドタンパク質Vp2(JCウイルス、進行性多病巣性白質脳障害);低カルシウム応答タンパク質E LCrE、クラミジア属外部タンパク質N CopN、セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPknD、アシルキャリアータンパク質S−マロニルトランスフェラーゼFabD、一本鎖DNA結合タンパク質Ssb、主要外膜タンパク質MOMP、外膜タンパク質2 Omp2、多形膜タンパク質ファミリー(Pmp1、Pmp2、Pmp3、Pmp4、Pmp5、Pmp6、Pmp7、Pmp8、Pmp9、Pmp10、Pmp11、Pmp12、Pmp13、Pmp14、Pmp15、Pmp16、Pmp17、Pmp18、Pmp19、Pmp20、Pmp21)(オウム病クラミジア、オウム病);外膜タンパク質P1、ヒートショックタンパク質B HspB、ペプチドABCトランスポーター、GTP結合タンパク質、タンパク質IcmB、リボヌクレアーゼR、ホスファターゼSixA、タンパク質DsbD、外膜タンパク質TolC、DNA結合タンパク質PhoB、ATPase DotB、ヒートショックタンパク質B HspB、膜タンパク質Com1、28kDaタンパク質、DNA−3−メチルアデニングリコシダーゼI
、外膜タンパク質OmpH、外膜タンパク質AdaA、グリシン切断系Tタンパク質(Q熱コクシエラ、Q熱);核タンパク質N、大構造タンパク質L、リンタンパク質P、基質タンパク質M、糖タンパク質G(狂犬病ウイルス、狂犬病);融合タンパク質F、核タンパク質N、基質タンパク質M、基質タンパク質M2−1、基質タンパク質M2−2、リンタンパク質P、小疎水性タンパク質SH、主要表面糖タンパク質G、ポリメラーゼL、非構造タンパク質1 NS1、非構造タンパク質2 NS2(RSウイルス(RSV)、RSウイルス感染症);ゲノムポリプロテイン、ポリメラーゼ3D、ウイルスカプシドタンパク質VP1、ウイルスカプシドタンパク質VP2、ウイルスカプシドタンパク質VP3、ウイルスカプシドタンパク質VP4、プロテアーゼ2A、プロテアーゼ3C(鼻炎ウイルス、鼻炎ウイルス感染症);外膜タンパク質OM、細胞表面抗原OmpA、細胞表面抗原OmpB(sca5)、細胞表面タンパク質SCA4、細胞表面タンパク質SCA1、タンパク質PS120、細胞質内タンパク質D、保護表面タンパク質抗原SPA(リケッチア属、リケッチア感染症);外膜タンパク質OM、細胞表面抗原OmpA、細胞表面抗原OmpB(sca5)、細胞表面タンパク質SCA4、細胞表面タンパク質SCA1、細胞質内タンパク質D(痘瘡リケッチア、リケッチア痘);エンベロープ糖タンパク質GP、ポリメラーゼL、核タンパク質N、非構造タンパク質NSS(リフトバレー熱ウイルス、リフトバレー熱(RVF));外膜タンパク質OM、細胞表面抗原OmpA、細胞表面抗原OmpB(sca5)、細胞表面タンパク質SCA4、細胞表面タンパク質SCA1、細胞質内タンパク質D(斑点熱リケッチア、ロッキー山紅斑熱(RMSF));”非構造タンパク質6 NS6、非構造タンパク質2 NS2、中間カプシドタンパク質VP6、内部カプシドタンパク質VP2、非構造タンパク質3 NS3、RNA依存性RNAポリメラーゼL、タンパク質VP3、非構造タンパク質1 NS1、非構造タンパク質5 NS5、外部カプシド糖タンパク質VP7、非構造糖タンパク質4 NS4、外部カプシドタンパク質VP4;;”(ロタウイルス、ロタウイルス感染症);ポリプロテインP200、糖タンパク質E1、糖タンパク質E2、タンパク質NS2、カプシドタンパク質C(風疹ウイルス、風疹);シャペロニンGroEL(MopA)、イノシトールリン酸ホスファターゼSopB、ヒートショックタンパク質HslU、シャペロンタンパク質DnaJ、タンパク質TviB、タンパク質IroN、フラゲリンFliC、侵入タンパク質SipC、糖タンパク質gp43、外膜タンパク質LamB、外膜タンパク質PagC、外膜タンパク質TolC、外膜タンパク質NmpC、外膜タンパク質FadL、輸送タンパク質SadA、トランスフェラーゼWgaP、エフェクタータンパク質SifA、SteC、SseL、SseJ及びSseF(サルモネラ属、サルモネラ症);”タンパク質14、非構造タンパク質NS7b、非構造タンパク質NS8a、タンパク質9b、タンパク質3a、核タンパク質N、非構造タンパク質NS3b、非構造タンパク質NS6、タンパク質7a、非構造タンパク質NS8b、膜タンパク質M、エンベロープ小膜タンパク質EsM、レプリカーゼポリプロテイン1a、スパイク糖タンパク質S、レプリカーゼポリプロテイン1ab;”(SARSコロナウイルス、SARS(重症急性呼吸器症候群));セリンプロテアーゼ、不定型サルコプテス(Sarcoptes)属抗原1 ASA1、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、システインプロテアーゼ、セリンプロテアーゼ、アポリポタンパク質(ヒゼンダニ、疥癬);グルタチオンSトランスフェラーゼGST、パラミオシン、ヘモグルビナーゼSM32、主要卵抗原、14kDa脂肪酸結合タンパク質Sm14、主要幼虫表面抗原P37、22、6kDa外被抗原、カルパインCANP、三リン酸イソメラーゼTim、表面タンパク質9B、外部カプシドタンパク質VP2、23kDa一体膜タンパク質Sm23、Cu/Zn−スーパーオキシドジスムターゼ、糖タンパク質Gp、ミオシン(住血吸虫属、住血吸虫症(ビルハルツ住血吸虫症));60kDaシャペロニン、56kDa型特異的抗原、ピルビン酸リン酸ジキナーゼ、4−ヒドキシベンゾエートオクタプレニルトランスフェラーゼ(オリエンティア・ツツガムシ、ツツガムシ病);デヒドロゲナーゼGuaB、侵入タンパク質Spa32、インベイシンIpaA、インベイシンIpaB、インベイシンIpaC、インベイシンIpaD、インベイシンIpaH、インベイシンIpaJ(赤痢菌属、赤痢(細菌性赤痢));タンパク質P53、ビリオンタンパク質US10ホモログ、転写調節因子IE63、転写トランス活性化因子IE62、プロテアーゼP33、アルファトランス誘導因子74kDaタンパク質、デオキシウリジン5’−トリホスフェートヌクレオチドヒドロラーゼ、転写トランス活性化因子IE4、膜タンパク質UL43ホモログ、核リンタンパク質UL3ホモログ、核タンパク質UL4ホモログ、複製開始点結合タンパク質、膜タンパク質2、リンタンパク質32、タンパク質57、DNAポリメラーゼ前進因子、ポータルタンパク質54、DNAプライマーゼ、外被タンパク質UL14ホモログ、外被タンパク質UL21ホモログ、外被タンパク質UL55ホモログ、三連ターミナーゼサブユニットUL33ホモログ、三連ターミナーゼサブユニットUL15ホモログ、カプシド結合タンパク質44、ビリオンパッケージングタンパク質43(水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)、帯状疱疹(帯状ヘルペス));短縮型3−ベータヒドロキシ−5−エンステロイドデヒドロゲナーゼホモログ、ビリオン膜タンパク質A13、タンパク質A19、タンパク質A31、短縮型タンパク質A35ホモログ、タンパク質A37.5ホモログ、タンパク質A47、タンパク質A49、タンパク質A51、セマホリン様タンパク質A43、セリンプロテイナーゼ阻害剤1、セリンプロテイナーゼ阻害剤2、セリンプロテイナーゼ阻害剤3、タンパク質A6、タンパク質B15、タンパク質C1、タンパク質C5、タンパク質C6、タンパク質F7、タンパク質F8、タンパク質F9、タンパク質F11、タンパク質F14、タンパク質F15、タンパク質F16(大痘瘡又は小痘瘡、天然痘(痘瘡));アドヘシン/糖タンパク質gp70、プロテアーゼ(スポロトリックス・シェンキィ、スポロトリクス症);ヘム鉄結合タンパク質IsdB、コラーゲンアドヘシンCna、クランピング因子A ClfA、タンパク質MecA、フィブロネクチン結合タンパク質A FnbA、エンテロトキシンA型EntA、エンテロトキシンB型EntB、エンテロトキシンC型EntC1、エンテロトキシンC型EntC2、エンテロトキシンD型EntD、エンテロトキシンE型EntE、毒素ショック症候群毒素−1 TSST−1、スタフィロキナーゼ、ペニシリン結合タンパク質2a PBP2a(MecA)、分泌抗原SssA(ブドウ球菌属、ブドウ球菌性食中毒);ヘム鉄結合タンパク質IsdB、コラーゲンアドヘシンCna、クランピング因子A ClfA、タンパク質MecA、フィブロネクチン結合タンパク質A FnbA、エンテロトキシンA型EntA、エンテロトキシンB型EntB、エンテロトキシンC型EntC1、エンテロトキシンC型EntC2、エンテロトキシンD型EntD、エンテロトキシンE型EntE、毒素ショック症候群毒素−1 TSST−1、スタフィロキナーゼ、ペニシリン結合タンパク質2a PBP2a(MecA)、分泌抗原SssA(ブドウ球菌属、例えば、黄色ブドウ球菌、ブドウ球菌感染症);抗原Ss−IR、抗原NIE、ストロンギラスタチン、Na+−K+ ATPase Sseat−6、トロポミシンSsTmy−1、タンパク質LEC−5、41kDa抗原P5、41kDa幼虫タンパク質、31kDa幼虫タンパク質、28kDa幼虫タンパク質(糞線虫、糞線虫症);グリセロホスホジエステルホスホジエステラーゼGlpQ(Gpd)、外膜タンパク質TmpB、タンパク質Tp92、抗原TpF1、反復タンパク質Tpr、反復タンパク質F TprF、反復タンパク質G TprG、反復タンパク質I TprI、反復タンパク質J TprJ、反復タンパク質K TprK、トレポネーマ膜タンパク質A TmpA、リポタンパク質、15kDa Tpp15、47kDa膜抗原、ミニフェリチンTpF1、アドヘシンTp0751、リポタンパク質TP0136、タンパク質TpN17、タンパク質TpN47、外膜タンパク質TP0136、外膜タンパク質TP0155、外膜タンパク質TP0326、外膜タンパク質TP0483、外膜タンパク質TP0956(梅毒トレポネーマ、梅毒);カテプシンL様プロテアーゼ、53/25kDa抗原、8kDaファミリーのメンバー、辺縁トリプシン様活性を有する嚢虫タンパク質TsAg5、六鉤幼虫タンパク質TSOL18、六鉤幼虫タンパク質TSOL45−1A、乳酸デヒドロゲナーゼA LDHA、乳酸デヒドロゲナーゼB LDHB(テニア属、条虫症);破傷風毒素TetX、破傷風毒素C TTC、140kDa S層タンパク質、フラボタンパク質ベータ−サブユニットCT3、ホスホリパーゼ(レシチナーゼ)、ホスホキャリアータンパク質HPr(破傷風菌、破傷風(開口障害));ゲノム
ポリプロテイン、タンパク質E、タンパク質M、カプシドタンパク質C(ダニ媒介性脳炎ウイルス(TBEV)、ダニ媒介脳炎);58kDa抗原、68kDa抗原、トキソカラ幼虫排出−分泌抗原TES、32kDa糖タンパク質、糖タンパク質TES−70、糖タンパク質GP31、排出−分泌抗原TcES−57、腸周囲液抗原Pe、可溶性抽出物抗原Ex、排出/分泌幼虫抗原ES、抗原TES−120、ポリプロテインアレルゲンTBA−1、カテプシンL様システインプロテアーゼc−cpl−1、26kDaタンパク質(イヌ回虫又はネコ回虫、トキソカラ症(眼幼虫移行症(OLM)及び内臓幼虫移行症(VLM)));短糸タンパク質(MIC1、MIC2、MIC3、MIC4、MIC5、MIC6、MIC7、MIC8)、桿小体タンパク質Rop2、桿小体タンパク質(Rop1、Rop2、Rop3、Rop4、Rop5、Rop6、Rop7、Rop16、Rjop17)、タンパク質SR1、表面抗原P22、主要抗原p24、主要表面抗原p30、高密度顆粒タンパク質(GRA1、GRA2、GRA3、GRA4、GRA5、GRA6、GRA7、GRA8、GRA9、GRA10)、28kDa抗原、表面抗原SAG1、SAG2関連抗原、ヌクレオシドトリホスファターゼ1、ヌクレオシドトリホスファターゼ2、タンパク質Stt3、HesB様ドメイン含有タンパク質、菱形様プロテアーゼ5、トキソメプシン1(トキソプラズマ・ゴンヂ、トキソプラスマ症);43kDa分泌糖タンパク質、53kDa分泌糖タンパク質、パラミオシン、抗原Ts21、抗原Ts87、抗原p46000、TSL−1抗原、カベオリン−1 CAV−1、49kDa新生幼虫抗原、プロサポニンホモログ、セリンプロテアーゼ、セリンプロテイナーゼ阻害剤、45kDa糖タンパク質Gp45(旋毛虫、旋毛虫症);Myb様転写因子(Myb1、Myb2、Myb3)、接着タンパク質AP23、接着タンパク質AP33、接着タンパク質AP33−3、アドヘシンAP51、アドヘシンAP65、接着タンパク質AP65−1、アルファ−アクチニン、キネシン関連タンパク質、テニューリン、62kDaプロテイナーゼ、サブチリシン様セリンプロテアーゼSUB1、システインプロテイナーゼ遺伝子3 CP3、アルファ−エノラーゼEno1、システインプロテイナーゼCP30、ヒートショックタンパク質(Hsp70、Hsp60)、免疫原性タンパク質P270、(膣トリコモナス、トリコモナス症);ベータ−チューブリン、47kDaタンパク質、分泌白血球様プロテイナーゼ−1 SLP−1、50kDaタンパク質TT50、17kDa抗原、43/47kDaタンパク質(ヒト鞭虫、鞭虫症(鞭虫感染症));タンパク質ESAT−6(EsxA)、10kDa濾過抗原EsxB、分泌抗原85−B FBPB、フィブロネクチン結合タンパク質A FbpA(Ag85A)、セリンプロテアーゼPepA、PPEファミリータンパク質PPE18、フィブロネクチン結合タンパク質D FbpD、免疫原性タンパク質MPT64、分泌タンパク質MPT51、カタラーゼ−ペルオキシダーゼ−ペルオキシニトリラーゼT KATG、周辺質リン酸結合リポタンパク質PSTS3(PBP−3、Phos−1)、鉄調節ヘパリン結合赤血球凝集素Hbha、PPEファミリータンパク質PPE14、PPEファミリータンパク質PPE68、タンパク質Mtb72F、タンパク質Apa、免疫原性タンパク質MPT63、周辺質リン酸結合リポタンパク質PSTS1(PBP−1)、分子シャペロンDnaK、細胞表面リポタンパク質Mpt83、リポタンパク質P23、リン酸輸送系パーミアーゼタンパク質pstA、14kDa抗原、フィブロネクチン結合タンパク質C FbpC1、アラニンデヒドロゲナーゼTB43、グルタミンシンテターゼ1、ESX−1タンパク質、タンパク質CFP10、TB10.4タンパク質、タンパク質MPT83、タンパク質MTB12、タンパク質MTB8、Rpf様タンパク質、タンパク質MTB32、タンパク質MTB39、クリスタリン、ヒートショックタンパク質HSP65、タンパク質PST−S(通常、結核菌、結核);外膜タンパク質FobA、外膜タンパク質FobB、細胞内成長遺伝子座IglC1、細胞内成長遺伝子座IglC2、アミノトランスフェラーゼWbtl、シャペロニンGroEL、17kDa主要膜タンパク質TUL4、リポタンパク質LpnA、キチナーゼファミリー18タンパク質、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ、Nif3ファミリータンパク質、IV型ピリグリコシル化タンパク質、外膜タンパク質tolC、FAD結合ファミリータンパク質、IV型ピリン多量体外膜タンパク質、二成分センサタンパク質KdpD、シャペロンタンパク質DnaK、タンパク質TolQ(野兎病菌、野兎病);”MB抗原、ウレアーゼ、タンパク質GyrA、タンパク質GyrB、タンパク質ParC、タンパク質ParE、脂質関連膜タンパク質LAMP、チミジンキナーゼTK、ホスホリパーゼPL−A1、ホスホリパーゼPL−A2、ホスホリパーゼPL−C、表面発現96kDa抗原;”(ウレアプラズマ・ウレアリチカム、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症);非構造ポリプロテイン、構造ポリプロテイン、カプシドタンパク質CP、タンパク質E1、タンパク質E2、タンパク質E3、プロテアーゼP1、プロテアーゼP2、プロテアーゼP3(ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ベネズエラウマ脳炎);糖タンパク質GP、基質タンパク質Z、ポリメラーゼL、核タンパク質N(グアナリトウイルス、ベネズエラ出血熱);ポリプロテイン、タンパク質E、タンパク質M、カプシドタンパク質C、プロテアーゼNS3、タンパク質NS1、タンパク質NS2A、タンパク質AS2B、タンパク質NS4A、タンパク質NS4B、タンパク質NS5(西ナイルウイルス、西ナイル熱);カプシドタンパク質CP、タンパク質E1、タンパク質E2、タンパク質E3、プロテアーゼP2(西部ウマ脳炎ウイルス、西部ウマ脳炎);ゲノムポリプロテイン、タンパク質E、タンパク質M、カプシドタンパク質C、プロテアーゼNS3、タンパク質NS1、タンパク質NS2A、タンパク質AS2B、タンパク質NS4A、タンパク質NS4B、タンパク質NS5(黄熱病ウイルス、黄熱病);推定Yopターゲティングタンパク質YobB、エフェクタータンパク質YopD、エフェクタータンパク質YopE、タンパク質YopH、エフェクタータンパク質YopJ、タンパク質移行タンパク質YopK、エフェクタータンパク質YopT、タンパク質YpkA、鞭毛生合成タンパク質FlhA、ペプチダーゼM48、カリウム流出系KefA、転写調節因子RovA、アドヘシンIfp、トランスロケータータンパク質LcrV、タンパク質PcrV、インベイシンInv、外膜タンパク質OmpF様ポリン、アドヘシンYadA、タンパク質キナーゼC、ホスホリパーゼC1、タンパク質PsaA、マンノシルトランスフェラーゼ様タンパク質WbyK、タンパク質YscU、抗原YPMa(偽結核エルジニア菌、偽結核エルジニア菌感染症);エフェクタータンパク質YopB、60kDaシャペロニン、タンパク質WbcP、チロシン−タンパク質ホスファターゼYopH、タンパク質YopQ、エンテロトキシン、ガラクトシドパーミアーゼ、レダクターゼNrdE、タンパク質YasN、インベイシンInv、アドヘシンYadA、外膜ポリンF OmpF、タンパク質UspA1、タンパク質EibA、タンパク質Hia、細胞表面タンパク質Ail、シャペロンSycD、タンパク質LcrD、タンパク質LcrG、タンパク質LcrV、タンパク質SycE、タンパク質YopE、調節因子タンパク質TyeA、タンパク質YopM、タンパク質YopN、タンパク質YopO、タンパク質YopT、タンパク質YopD、プロテアーゼClpP、タンパク質MyfA、タンパク質FilA、及びタンパク質PsaA(腸炎エルシニア、エルジニア症)。
(括弧内は、抗原が由来する具体的な病原体又は病原体の科、及び前記病原体が関連する感染性疾患である)。
5’−コード領域−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列−3’;又は
5’−コード領域−ヒストンステムループ−ポリアデニル化シグナル−3’;又は
5’−コード領域−ポリ(A)配列−ヒストンステムループ−3’;又は
5’−コード領域−ポリアデニル化シグナル−ヒストンステムループ−3’;又は
5’−コード領域−コード領域−ヒストンステムループ−ポリアデニル化シグナル−3’;又は
5’−コード領域−ヒストンステムループ−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列−3’;又は
5’−コード領域−ヒストンステムループ−ヒストンステムループ−ポリアデニル化シグナル−3’等。
Proのコドンは、CCU又はCCAからCCC又はCCGに改変してよい;
Argのコドンは、CGU又はCGA又はAGA又はAGGからCGC又はCGGに改変してよい;
Alaのコドンは、GCU又はGCAからGCC又はGCGに改変してよい;
Glyのコドンは、GGU又はGGAからGGC又はGGGに改変してよい。
Pheのコドンは、UUUからUUCに改変してよい;
Leuのコドンは、UUA、UUG、CUU又はCUAからCUC又はCUGに改変してよい;
Serのコドンは、UCU又はUCA又はAGUからUCC、UCG又はAGCに改変してよい;
Tyrのコドンは、UAUからUACに改変してよい;
Cysのコドンは、UGUからUGCに改変してよい;
Hisのコドンは、CAUからCACに改変してよい;
Glnのコドンは、CAAからCAGに改変してよい;
Ileのコドンは、AUU又はAUAからAUCに改変してよい;
Thrのコドンは、ACU又はACAからACC又はACGに改変してよい;
Asnのコドンは、AAUからAACに改変してよい;
Lysのコドンは、AAAからAAGに改変してよい;
Valのコドンは、GUU又はGUAからGUC又はGUGに改変してよい;
Aspのコドンは、GAUからGACに改変してよい;
Gluのコドンは、GAAからGAGに改変してよい;
終止コドンUAAは、UAG又はUGAに改変してよい。
B細胞エピトープは、典型的に、好ましくは5アミノ酸〜15アミノ酸、より好ましくは5アミノ酸〜12アミノ酸、更により好ましくは6アミノ酸〜9アミノ酸を有する本明細書に定義する(ネイティブ)タンパク質又はペプチド抗原の外表面に位置する断片であり、これは、即ちそのネイティブな形態の抗体によって認識され得る。
タンパク質又はペプチドのかかるエピトープは、更に、かかるタンパク質又はペプチドの本明細書で言及する変異体のいずれかから選択してよい。これに関連して、抗原決定基は、本明細書に定義するタンパク質又はペプチドのアミノ酸配列において不連続であるが、三次元構造では近接する本明細書に定義するタンパク質又はペプチドのセグメントで構成される高次構造的エピトープ又は不連続エピトープであってもよく、単一ポリペプチド鎖で構成される連続エピトープ又は線状エピトープであってもよい。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含む核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは、前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来する核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは、前記感染性疾患がHIV、好ましくはヒト免疫不全ウイルスによる感染症である場合、前記抗原が、HIV p24抗原、HIVエンベロープタンパク質(Gp120、Gp41、Gp160)、ポリプロテインGAG、負因子タンパク質Nef、転写のトランス活性化因子Tatから選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは、前記感染性疾患がトラコーマクラミジアによる感染症である場合、前記抗原が、主要外膜タンパク質MOMP、推定外膜タンパク質PMPC、外膜複合体タンパク質B OmcB、ヒートショックタンパク質Hsp60 HSP10、タンパク質IncA、III型分泌系由来のタンパク質、リボヌクレオチドレダクターゼ短鎖タンパク質NrdB、プラスミドタンパク質Pgp3、クラミジア外部タンパク質N CopN、抗原CT521、抗原CT425、抗原CT043、抗原TC0052、抗原TC0189、抗原TC0582、抗原TC0660、抗原TC0726、抗原TC0816、抗原TC0828から選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患が、サイトメガロウイルス感染症、好ましくはサイトメガロウイルス(CMV)による感染症である場合、前記抗原が、pp65抗原、膜タンパク質pp15、カプシド基部外被タンパク質pp150、タンパク質M45、DNAポリメラーゼUL54、ヘリカーゼUL105、糖タンパク質gM、糖タンパク質gN、糖タンパク質H、糖タンパク質B gB、タンパク質UL83、タンパク質UL94、タンパク質UL99から選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患が、デング熱、好ましくはデングウイルス(DEN−1、DEN−2、DEN−3、及びDEN−4)−フラビウイルスによる感染症である場合、前記抗原が、カプシドタンパク質C、プレメンブレンタンパク質prM、膜タンパク質M、エンベロープタンパク質E(ドメインI、ドメインII、ドメインII)、タンパク質NS1、タンパク質NS2A、タンパク質NS2B、タンパク質NS3、タンパク質NS4A、タンパク質2K、タンパク質NS4B、タンパク質NS5から選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患がB型肝炎、好ましくはB型肝炎ウイルス(HBV)による感染症である場合、前記抗原が、B型肝炎表面抗原HBsAg、B型肝炎コア抗原HbcAg、ポリメラーゼ、タンパク質Hbx、preS2中央面タンパク質、表面タンパク質L、大Sタンパク質、ウイルスタンパク質VP1、ウイルスタンパク質VP2、ウイルスタンパク質VP3、ウイルスタンパク質VP4から選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患がヒト乳頭腫ウイルス(HPV)感染症、好ましくは乳頭腫ウイルス(HPV)による感染症である場合、前記抗原が、複製タンパク質E1、制御タンパク質E2、タンパク質E3、タンパク質E4、タンパク質E5、タンパク質E6、タンパク質E7、タンパク質E8、メジャーカプシドタンパク質L1、マイナーカプシドタンパク質L2から選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患が、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、好ましくはヒトパラインフルエンザウイルス(HPIV)による感染症である場合、前記抗原が、融合タンパク質F、赤血球凝集素−ノイラミニダーゼHN、糖タンパク質G、基質タンパク質M、リンタンパク質P、核タンパク質N、ポリメラーゼLから選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患が狂犬病、好ましくは狂犬病ウイルスによる感染症である場合、前記抗原が、赤血球凝集素(HA)、ノイラミニダーゼ(NA)、核タンパク質(NP)、M1タンパク質、M2タンパク質、NS1タンパク質、NS2タンパク質(NEPタンパク質:核外移行タンパク質)、PAタンパク質、PB1タンパク質(ポリメラーゼ塩基性1タンパク質)、PB1−F2タンパク質及びPB2タンパク質(オルソミクソウイルス科、インフルエンザウイルス(インフルエンザ));核タンパク質N、大構造タンパク質L、リンタンパク質P、基質タンパク質M、糖タンパク質Gから選択され、最も好ましくは前記抗原が、オルソミクソウイルス科のウイルス、最も好ましくはインフルエンザウイルス、最も好ましくは赤血球凝集素(HA)、ノイラミニダーゼ(NA)、核タンパク質(NP)、基質タンパク質(M1)及び(M2)のうちの一方又は両方、ポリメラーゼタンパク質(PB1)、(PB2)、並びにタンパク質NS1及びNS2に由来する核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患がRSウイルス感染症、好ましくはRSウイルス(RSV)による感染症である場合、前記抗原が、融合タンパク質F、核タンパク質N、基質タンパク質M、基質タンパク質M2−1、基質タンパク質M2−2、リンタンパク質P、小疎水性タンパク質SH、主要表面糖タンパク質G、ポリメラーゼL、非構造タンパク質1 NS1、非構造タンパク質2 NS2から選択される核酸配列を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患が、結核、好ましくは結核菌による感染症である場合、前記抗原が、分泌抗原SssA(ブドウ球菌属、ブドウ球菌性食中毒);分泌抗原SssA(ブドウ球菌属、例えば、黄色ブドウ球菌、ブドウ球菌感染症);分子シャペロンDnaK、細胞表面リポタンパク質Mpt83、リポタンパク質P23、リン酸輸送系パーミアーゼタンパク質pstA、14kDa抗原、フィブロネクチン結合タンパク質C FbpC1、アラニンデヒドロゲナーゼTB43、グルタミンシンターゼ1、ESX−1タンパク質、タンパク質CFP10、TB10.4タンパク質、タンパク質MPT83、タンパク質MTB12、タンパク質MTB8、Rpf様タンパク質、タンパク質MTB32、タンパク質MTB39、クリスタリン、ヒートショックタンパク質HSP65、タンパク質PST−Sから選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている核酸配列であって、
前記ペプチド又はタンパク質が、病原体抗原、又はその断片、変異体、若しくは誘導体、特に、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原、好ましくは細菌感染症、ウイルス感染症、原生動物感染症、真菌感染症等である感染性疾患に関連する病原体由来の抗原を含み、より好ましくは前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス、RSウイルス(RSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、プラスモディウム、黄色ブドウ球菌、デングウイルス、トラコーマクラミジア、サイトメガロウイルス(CMV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、結核菌、狂犬病ウイルス、及び黄熱病ウイルスから選択される病原体に由来し、更により好ましくは前記感染性疾患が黄熱病、好ましくは黄熱病ウイルスによる感染症である場合、前記抗原が、ゲノムポリプロテイン、タンパク質E、タンパク質M、カプシドタンパク質C、プロテアーゼNS3、タンパク質NS1、タンパク質NS2A、タンパク質AS2B、タンパク質NS4A、タンパク質NS4B、タンパク質NS5から選択される核酸配列を提供する。本発明は、更に、前記核酸配列のうちの少なくとも1つを含む組成物又はキット又はキットのパーツを提供する。更に、本発明は、医薬としての、好ましくは感染性疾患を治療するための医薬としての、より好ましくは薬学的に許容できる担体を更に含む感染性疾患を治療するための医薬組成物における前記核酸配列の使用を提供する。更に、本発明は、前記核酸配列又は前記核酸配列を含有する組成物を提供する工程と、前記核酸配列又は前記組成物を無細胞発現系、細胞、組織、及び/又は生物に適用又は投与する工程とを含む、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させる方法を提供する。
実験前に、後生動物及び原生動物のヒストンステムループ配列に基づいてヒストンステムループコンセンサス配列を決定した。ゲノム配列及び発現配列タグを探索することによって多数の天然ヒストンステムループ配列を同定したLopezら(Davila Lopez,M.,&Samuelsson,T.(2008),RNA(New York,N.Y.),14(1),1−10.doi:10.1261/rna.782308)によって提供された補遺から配列を取り出した。先ず、後生動物及び原生動物由来の全配列(4,001配列)又は原生動物由来の全配列(131配列)、又は後生動物由来の全配列(3,870配列)、又は脊椎動物由来の全配列(1,333配列)、又はヒト由来の全配列(84配列)をグループ分けし、アラインメントした。次いで、全ての位置について、存在するヌクレオチドの数を決定した。このようにして得られた表に基づいて、解析した全配列中に存在するヌクレオチドを表す、5つの異なるグループの配列についてのコンセンサス配列を作製した。更に、保存されているヌクレオチドを段階的に強調するために、より限定的なコンセンサス配列を得た。
T7プロモーターに続いて、キタアメリカホタルルシフェラーゼ(ppLuc(GC))をコードしているGCリッチ配列、アルファグロビンの3’非翻訳領域(UTR)の中心部分(ag)、及びポリ(A)配列を含むインビトロ転写用ベクターを構築した。A64ポリ(A)配列で終端するmRNAを得るために、インビトロ転写前にベクターを直鎖状にするために用いられる制限酵素部位をポリ(A)配列の直後に配置した。したがって、インビトロ転写によってこのベクターから得られたmRNAを「ppLuc(GC)−ag−A64」と命名した。
ppLuc(GC)−ag (配列番号43)
ppLuc(GC)−ag−A64 (配列番号44)
ppLuc(GC)−ag−ヒストンSL (配列番号45)
ppLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL (配列番号46)
ppLuc(GC)−ag−A120 (配列番号47)
ppLuc(GC)−ag−A64−ag (配列番号48)
ppLuc(GC)−ag−A64−aCPSL (配列番号49)
ppLuc(GC)−ag−A64−ポリオCL (配列番号50)
ppLuc(GC)−ag−A64−G30 (配列番号51)
ppLuc(GC)−ag−A64−U30 (配列番号52)
ppLuc(GC)−ag−A64−SL (配列番号53)
ppLuc(GC)−ag−A64−N32 (配列番号54)
HA(H1N1/PR8)(GC)−ag−A64−C30(配列番号55)
HA(H1N1/PR8)(GC)−ag−A64−C30−ヒストンSL(配列番号56)
実施例2に係るDNAテンプレートを直鎖状にし、T7−ポリメラーゼを用いてインビトロで転写させた。次いで、DNAテンプレートをDNase処理によって分解した。過剰のN7−メチル−グアノシン−5’−トリホスフェートー5’−グアノシンを転写反応物に添加することによって、5’−CAP構造を含む全mRNA転写産物を得た。このようにして得られたmRNAを精製し、水に再懸濁させた。
2つのmRNAを酵素でアデニル化した:
ppLuc(GC)−ag−A64及びppLuc(GC)−ag−ヒストンSL。
このために、製造業者の指示書に従って、大腸菌ポリ(A)−ポリメラーゼ及びATP(ポリ(A)ポリメラーゼテーリングキット、Epicentre,Madison,USA)と共にRNAをインキュベートした。伸長したポリ(A)配列を含むmRNAを精製し、水に再懸濁させた。アガロースゲル電気泳動を介してポリ(A)配列の長さを決定した。出発mRNAを約250アデニレート伸長させ、得られたmRNAを、それぞれ、ppLuc(GC)−ag−A300及びppLuc(GC)−ag−ヒストンSL−A250と命名した。
HeLa細胞をトリプシン処理し、opti−MEMで洗浄した。opti−MEM200μL中1×105個の細胞に、それぞれ、ppLucをコードしているmRNA0.5μgをエレクトロポレーションした。コントロールとして、ppLucをコードしていないmRNAを別個にエレクトロポレーションした。エレクトロポレーションされた細胞を24ウェルプレート中のRPMI1640培地1mLに播種した。トランスフェクションの6時間後、24時間後、又は48時間後に、培地を吸引し、リシスバッファ200μL(25mM Tris、pH7.5(HCl)、2mM EDTA、10% グリセロール、1% Triton X−100、2mM DTT、1mM PMSF)に細胞を溶解させた。ppLuc活性を測定するまで溶解物を−20℃で保存した。
1ウェル当たり2×104個の細胞という密度になるようにHeLa細胞を96ウェルプレートに播種した。次の日、細胞をopti−MEMで洗浄し、次いで、opti−MEM150μL中リポフェクチン複合体化ppLucコードmRNA0.25μgをトランスフェクトした。コントロールとして、ppLucをコードしていないmRNAを別個にリポフェクトした。幾つかのウェルにおいて、トランスフェクション開始の6時間後に、opti−MEMを吸引し、リシスバッファ200μLに細胞を溶解させた。残りのウェルでは、そのとき、opti−MEMをPTMI1640培地に交換した。これらウェルでは、トランスフェクション開始の24時間後又は48時間後に、培地を吸引し、リシスバッファ200μLに細胞を溶解させた。ppLuc活性を測定するまで溶解物を−20℃で保存した。
溶解物50μL及びルシフェリンバッファ200μL(25mM グリシルグリシン、pH7.8(NaOH)、15mM MgSO4、2mM ATP、75μM ルシフェリン)を用いて、5秒間の測定時間でBioTek SynergyHTプレートリーダーによって相対光単位(RLU)としてppLuc活性を測定した。合計RLUからコントロールRNAのRLUを減じることによって、比RLUを計算した。
RompunとKetavetとの混合物を用いてマウスに麻酔をかけた。ppLucをコードしているmRNAをそれぞれ経皮注射した(注射1回当たり50μL中mRNA0.5μg)。コントロールとして、ppLucをコードしていないmRNAを別個に注射した。注射の16時間後、マウスを屠殺し、組織を回収した。組織サンプルを液体窒素で急速冷凍し、リシスバッファ800μL(25mM Tris、pH7.5(HCl)、2mM EDTA、10%グリセロール、1% Triton X−100、2mM DTT、1mM PMSF)中の組織溶解液(Qiagen)に溶解させた。次いで、4℃で10分間13,500rpmにてサンプルを遠心分離した。ppLuc活性を測定するまで溶解物を−80℃で保存した(7.ルシフェラーゼ発現を参照)。
HAをコードしているmRNA10μg(A/Puerto Rico/8/34の赤血球凝集素、配列番号55及び56)を含むワクチンを、BALB/cマウス(1群当たり8匹)に7日間以内に2回経皮的にワクチン接種した。ネガティブコントロールとして、マウスをバッファで処理した。
HAタンパク質特異的抗体を検出することによって、抗原特異的免疫応答を検出した。したがって、最後のワクチン接種の4週間後に、ワクチン接種したマウスから血液サンプルを採取し、血清を調製した。MaxiSorp(登録商標)プレート(Nalgene Nunc International)をHA タンパク質(Charles River Laboratories)でコーティングした。0.05%Tween−20及び1%BSAを含有する1×PBSでブロッキングした後、希釈マウス血清(1:50)と共にプレートをインキュベートした。次いで、ビオチン結合二次抗体(抗マウスIgG Dianova、カタログ番号115035003)を添加した。洗浄後、セイヨウワサビペルオキシダーゼ−ストレプトアビジンと共に前記プレートをインキュベートし、次いで、ABTS基質(2,2’−アジノ−ビス(3−エチル−ベンズチアゾリン−6−スルホン酸)の変換を測定した。この実験結果を図24に示す。
プロタミンと複合体化しているHAをコードしているmRNA(A/Puerto Rico/8/34の赤血球凝集素、配列番号55及び56)をC57BL/6マウスに経皮的にワクチン接種した(7日間以内に2回)。コントロールマウスをバッファで処理した。最後のワクチン接種の1週間後にマウスを屠殺し、脾臓を摘出し、脾臓細胞を単離した。前記脾臓細胞を、上記抗原由来のペプチド(ペプチドライブラリー)の存在下で7日間再刺激するか、又はネイティブ同系マウスの骨髄細胞から生成された樹状細胞と共にコインキュベートし、これに抗原をコードしているmRNAをエレクトロポレーションした。抗原特異的細胞免疫応答を求めるために、再刺激後にINFガンマの分泌を測定した。INFガンマを検出するために、INFγ(BD Pharmingen,Heidelberg,Germany)に対する抗体を含むコーティングバッファ(0.1M炭酸−重炭酸塩バッファ、pH9.6、10.59g/L Na2CO3、8.4g/L NaHCO3)と共に、コートマルチスクリーンプレート(Millipore)を一晩インキュベートする。刺激物質及びエフェクター細胞を、24時間1:20の比でプレート中にて一緒にインキュベートする。前記プレートを1×PBSで洗浄し、ビオチン結合二次抗体と共にインキュベートする。1×PBS/0.05% Tween−20で洗浄した後、基質(5−ブロモ−4−クロロ−3−インドリルホスフェート/ニトロブルーテトラゾリウム液体基質系(Sigma Aldrich,Taufkirchen,Germany製))を前記プレートに添加したところ、基質の変換を目視で検出することができた。
11.1 ヒストンステムループ配列:
ヒストンステムループ配列の特性評価を行うために、後生動物及び原生動物由来の配列(4,001配列)、又は原生動物由来の配列(131配列)、又は後生動物由来の配列(3,870配列)、又は脊椎動物由来の配列(1,333配列)、又はヒト由来の配列(84配列)をグループ分けし、アラインメントした。次いで、全ての位置について、存在するヌクレオチドの数を決定した。このようにして得られた表に基づいて、解析した全配列中に存在するヌクレオチドを表す、5つの異なるグループの配列についてのコンセンサス配列を作製した。後生動物と原生動物とを合わせたコンセンサス配列では、ループにおけるT/U、並びにステムにおけるG及びC(これらは、塩基対を形成する)の3個のヌクレオチドが保存されていた。構造的には、典型的に、6塩基対のステム及び4ヌクレオチドのループが形成される。しかし、異なる構造も一般的である:84個のヒトヒストンステムループのうち、2個は、4塩基対及び1個の不一致を含む5ヌクレオチドのみのステムを含有する。別のヒトヒストンステムループは、5塩基対のみのステムを含有する。4個の更なるヒトヒストンステムループは、6ヌクレオチド長のステムを含有するが、それぞれ、3箇所の異なる位置において1個の不一致を含む。更に、4個のヒトヒストンステムループは、それぞれ、2箇所の異なる位置において1個のゆらぎ塩基対を含有する。ループについては、細胞性粘菌(D.discoideum)で同定されている5ヌクレオチドのループのように、厳密に4ヌクレオチド長である必要はないと考えられる。
(Cons):存在する全てのヌクレオチドを表す
(99%):存在する全てのヌクレオチドのうちの少なくとも99%を表す
(95%):存在する全てのヌクレオチドのうちの少なくとも95%を表す
(90%):存在する全てのヌクレオチドのうちの少なくとも90%を表す
mRNAからのタンパク質発現に対するポリ(A)とヒストンSLとの組み合わせの効果について調べるために、アルファグロビン3’−UTRの3’に様々な配列を含むmRNAを合成した:丁度3’−UTRの3’で終端し、ポリ(A)配列もヒストンSLも欠損しているmRNA、又はA64ポリ(A)配列若しくはヒストンSLのいずれかを含むmRNA、又は3’−UTRの3’にA64ポリ(A)配列及びヒストンSLの両方を含むmRNA。ルシフェラーゼをコードしているmRNA又はコントロールmRNAをHeLa細胞にエレクトロポレーションした。トランスフェクションの6時間後、24時間後、及び48時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表6及び図20を参照)。
ポリ(A)とヒストンSLとの組み合わせの効果は、ポリ(A)配列の長さ及びポリ(A)とヒストンSLとの順序に依存している可能性があった。したがって、ポリ(A)配列を伸長したmRNA、及びポリ(A)とヒストンSLの順序を逆にしたmRNAを合成した。2つのmRNAは、3’−UTRの3’にA120ポリ(A)配列又はA300ポリ(A)配列を含有していた。1つの更なるmRNAは、3’−UTRの3’に先ずヒストンSL、続いてA250ポリ(A)配列を含有していた。ルシフェラーゼをコードしているmRNA又はコントロールmRNAをHeLa細胞にリポフェクトした。トランスフェクション開始の6時間後、24時間後、及び48時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表8及び図21を参照)。
mRNAからのタンパク質発現に対するポリ(A)とヒストンSLとの組み合わせの効果が特異的であるかどうかを調べるために、ポリ(A)と別の配列との組み合わせを含むmRNAを合成した:これらmRNAは、それぞれ、A64の3’に7つの異なる配列のうちの1つを含有していた。ルシフェラーゼをコードしているmRNA又はコントロールmRNAをHeLa細胞にエレクトロポレーションした。トランスフェクションの6時間後、24時間後、及び48時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表11及び図22を参照)。
インビボにおけるmRNAからのタンパク質発現に対するポリ(A)とヒストンSLとの組み合わせの効果を調べるために、アルファグロビン3’−UTRの3’に様々な配列を含むルシフェラーゼをコードしているmRNA又はコントロールmRNAをマウスに経皮注射した:前記mRNAは、3’−UTRの3’にA64ポリ(A)配列、ヒストンSL、又はA64ポリ(A)配列とヒストンSLの両方を含んでいた。注射の16時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表12及び図23を参照)。
mRNAのワクチン接種による誘発される抗体の誘導に対する、ポリ(A)とヒストンSLとの組み合わせの効果を調べるために、突然変異型アルファグロビン3’−UTRの3’に様々な配列を含むHAをコードしているmRNAをBalb/cマウスに経皮的にワクチン接種した。前記mRNAは、3’−UTRの3’にA64ポリ(A)配列又はA64ポリ(A)とヒストンSLとの両方を含有していた。ワクチン接種マウス及びコントロールマウスにおけるHA特異的抗体のレベルを、血清の連続希釈物を用いてELISAによって分析した(図24を参照)。
抗HA IgG1は、ポリ(A)配列のみを有するmRNAによって誘導された。しかし、ポリ(A)とヒストンSLとの組み合わせは、ポリ(A)配列のみでみられたレベルを超えて抗HA IgG1レベルを著しく強く増加させた。
Claims (22)
- a)少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域と、
b)少なくとも1つのヒストンステムループと、
c)ポリ(A)配列又はポリアデニル化シグナルと
を含むか又はコードしている改変核酸であって、
前記改変核酸の少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域のG/C含量が、野生型核酸のコード領域のG/C含量に比べて増加しており、前記改変核酸にコードされているアミノ酸配列が、前記野生型核酸にコードされているアミノ酸配列に比べて改変されておらず、
前記ペプチド又はタンパク質が、感染性疾患に関連する病原体由来の抗原又はその断片、変異体、若しくは誘導体を含み、
前記断片、又は変異体が、野生型ペプチド又はタンパク質の全アミノ酸配列に対して少なくとも95%の配列同一性を有する配列を含み、かつ、野生型ペプチド又はタンパク質に比べて、同じ生物機能又は特異的活性を有し、
前記誘導体が、野生型ペプチド又はタンパク質の完全長配列、及びN末端又はC末端の更なる配列特徴を含み、
前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス抗原であることを特徴とする核酸。 - 前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス由来の、赤血球凝集素(HA)、ノイラミニダーゼ(NA)、核タンパク質(NP)、M1タンパク質、M2タンパク質、NS1タンパク質、NS2タンパク質(NEPタンパク質:核外移行タンパク質)、PAタンパク質、PB1タンパク質(ポリメラーゼ塩基性1タンパク質)、PB1−F2タンパク質及びPB2タンパク質からなる群から選択される請求項1に記載の核酸。
- 前記病原体抗原が、インフルエンザウイルス由来の、赤血球凝集素(HA)である請求項1から2のいずれかに記載の核酸。
- 前記少なくとも1つのヒストンステムループが、少なくとも1つのペプチド又はタンパク質をコードしているコード領域とは異種である請求項1から3のいずれかに記載の核酸。
- 前記コード領域が、ヒストンタンパク質又はヒストン若しくはヒストン様機能を有する前記ヒストンタンパク質の断片、誘導体、若しくは変異体をコードしておらず、
前記断片、又は変異体が、野生型ペプチド又はタンパク質の全アミノ酸配列に対して少なくとも95%の配列同一性を有する配列を含み、かつ、野生型ペプチド又はタンパク質に比べて、同じ生物機能又は特異的活性を有し、
前記誘導体が、野生型ペプチド又はタンパク質の完全長配列、及びN末端又はC末端の更なる配列特徴を含む請求項4に記載の核酸。 - 前記コード領域が、レポータータンパク質又はマーカー若しくは選択タンパク質をコードしていない請求項1から5のいずれかに記載の核酸。
- 前記核酸が、RNAである請求項1から6のいずれかに記載の核酸。
- 前記核酸が、mRNAである請求項1から7のいずれかに記載の核酸。
- 少なくとも1つのヒストンステムループが、以下の式(I)又は(II)から選択される請求項1から8のいずれかに記載の核酸:
式(I)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
ステム1境界エレメント又はステム2境界エレメントN 1−6 は、1個〜6個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチドから選択され、
ステム1[N 0−2 GN 3−5 ]は、エレメントステム2に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、且つ5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N 0−2 は、0個〜2個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチドから選択され、N 3−5 は、3個〜5個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチドから選択され、Gは、グアノシンであり、任意でシチジンによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム2におけるその相補的ヌクレオチドであるシチジンも、グアノシンによって置換され、
ループ配列[N 0−4 (U/T)N 0−4 ]は、エレメントステム1とステム2との間に位置し、且つ3個〜5個のヌクレオチドの連続配列であり、各N 0−4 は、互いに独立して、0個〜4個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチドから選択され、U/Tは、ウリジン又はチミジンを表し、
ステム2[N 3−5 CN 0−2 ]は、エレメントステム1に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、且つ5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N 3−5 は、3個〜5個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチドから選択され、N 0−2 は、0個〜2個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチドから選択され、Cは、シチジンであり、グアノシンによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム1におけるその相補的ヌクレオチドであるグアノシンも、シチジンによって置換され、
ステム1及びステム2は、互いに塩基対合して逆相補的配列を形成することができ、ステム1とステム2との間で前記塩基対合が生じ得るか、又は互いに塩基対合して部分的に逆相補的な配列を形成することができ、ステム1とステム2との間で不完全な塩基対合が生じ得る)。 - 少なくとも1つのヒストンステムループが、以下の式(Ia)又は(IIa)のうちの少なくとも1つから選択される請求項9に記載の核酸:
式(Ia)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
- 前記ポリ(A)配列が、25個〜400個のアデノシンヌクレオチドの配列を含む請求項1から10のいずれかに記載の核酸。
- 前記ポリ(A)配列が、60個〜250個のアデノシンヌクレオチドの配列を含む請求項1から11のいずれかに記載の核酸。
- 前記ポリアデニル化シグナルが、コンセンサス配列:NN(U/T)ANAを含む請求項1から12のいずれかに記載の核酸。
- 前記ポリアデニル化シグナルが、AA(U/T)AAA又はA(U/T)(U/T)AAAを含む請求項1から13のいずれかに記載の核酸。
- 前記核酸が、安定化核酸である請求項1から14のいずれかに記載の核酸。
- 複数、即ち1超の請求項1から15のいずれかに記載の核酸を含むことを特徴とする組成物、キット又はキットのパーツ。
- 医薬として使用するための請求項1から15のいずれかに記載の核酸又は請求項16に記載の組成物、キット若しくはキットのパーツ。
- 感染性疾患の治療において使用するための請求項1から15のいずれかに記載の核酸又は請求項16に記載の組成物、キット若しくはキットのパーツ。
- 請求項1から15のいずれかに記載の核酸又は請求項16に記載の組成物とを含むことを特徴とする医薬組成物。
- さらに、薬学的に許容できる担体を含むことを特徴とする請求項19に記載の医薬組成物。
- コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させるための請求項1から15のいずれかに記載の核酸又は請求項16に記載の組成物、キット若しくはキットのパーツのインビトロでの使用。
- a)請求項1から15のいずれかに記載の核酸又は請求項16に記載の組成物を提供する工程と、
b)前記核酸又は前記組成物を、無細胞発現系、細胞、又は組織に適用又は投与する工程と
を含むことを特徴とする、コードされているペプチド又はタンパク質の発現を増加させるインビトロでの方法。
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