JP6603038B2 - 歯の石灰化のためのフッ化物組成物および方法 - Google Patents

Description

本発明は、歯の表面、特に歯のエナメル質を石灰化するための組成物に関する。齲蝕、歯の腐食、酸蝕、およびフッ素症によって引き起こされる歯のエナメル質における低石灰化病変（表面下病変を含む）を石灰化する方法も提供される。

（背景）
齲蝕は、通常は歯垢中の歯科病原性細菌による食事の糖質の発酵から生成する有機酸で歯の硬組織が脱灰されることによって開始される。齲蝕は、依然として公衆衛生上の大問題である。さらに、修復された歯の表面は、修復の辺縁の周囲では齲蝕に対して感受性がある可能性がある。大半の先進国において、フッ化物の使用により齲蝕の有病率が低下した場合でさえ、この疾患は、公衆衛生上の大問題のままである。歯の酸蝕または腐食は、食事からのまたは逆流した酸による歯のミネラルの喪失である。象牙質知覚過敏は、保護石灰化層であるセメント質の喪失によって象牙質細管が曝露されることによる。歯石は、歯の表面へのリン酸カルシウムのミネラルの望ましくない沈着である。したがって、これらの病態、齲蝕、歯の腐食、象牙質知覚過敏、および歯石はすべて、リン酸カルシウムのレベルの不均衡である。

無作為化比較臨床試験で、フッ化物含有歯磨剤および含漱剤は齲蝕経験を有意に低減することが実証された（非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５）。これらの口腔ケア製品の齲蝕活動性を低減する有効性は、フッ化物イオンを歯垢に取り込むそれらの能力に起因する。というのは、複数の担当医師が、歯垢中フッ化物レベルと齲蝕発生率は逆相関の関係にあることを示唆しているからである（非特許文献６、非特許文献７、非特許文献８；非特許文献９；非特許文献１０）。

歯垢中のフッ化物イオンは、歯垢中の細菌による有機酸によって歯のエナメル質が脱灰される間に生成するカルシウムおよびホスフェートイオンの存在下に、フルオロハイドロキシアパタイトの形成を直接に促進する（非特許文献１１）。これは、現在エナメル質脱灰を予防する際のフッ化物イオンの作用の主要なメカニズムと考えられている（非特許文献１１；非特許文献１０）。しかし、フッ化物を塗布したとき、唾液または歯垢中のカルシウムおよびホスフェートイオンが十分に利用できる場合、フッ化物イオンは以前に脱灰したエナメル質の再石灰化を促進することもできる。フルオロアパタイトの単位格子１個を形成するのには、２個のフッ化物イオンに付き、１０個のカルシウムイオンおよび６個のホスフェートイオンが必要である。したがって、フッ化物イオンの局所塗布時に、カルシウムおよびホスフェートイオンの利用能が純エナメル質再石灰化の発生を律速することができる。これは、口腔乾燥（口渇）状態で極めて悪化する。さらに、フッ化物処置は、特に子供においてフッ素症を招く可能性があるので、石灰化効果を実現するのに必要なフッ化物の全量を低減するために、フッ化物の存在量に対して最高の有効性を有する歯科処置組成物を生成することは有利であろう。

Ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｌｂｏｕｒｎｅ名義の特許文献１（その内容は、参照により本明細書に完全に組み込まれる）には、アルカリ性ｐＨで生成されたカゼインホスホペプチド−非結晶リン酸カルシウム複合体（ＣＰＰ−ＡＣＰ）およびＣＰＰ安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム複合体（ＣＰＰ−ＡＣＦＰ）が記載されている。ＣＰＰ−ＡＣＰ（Ｒｅｃａｌｄｅｎｔ（商標）として市販）は、エナメル質表面下病変をｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｓｉｔｕにおいて再石灰化することがわかっている（非特許文献１２；非特許文献１３；非特許文献１４）。

複合体を形成する活性があるＣＰＰは、完全長カゼインタンパク質の一部であろうとなかろうとそのように行う。完全長カゼインをトリプシン消化した後単離することができる活性（ＣＰＰ）の例は、特許文献２に明記され、例えば、以下の通りＢｏｓ α_ｓ１−カゼインＸ−５Ｐ（ｆ５９−７９）［１］、Ｂｏｓ β−カゼインＸ−４Ｐ（ｆ１−２５）［２］、Ｂｏｓ α_ｓ２−カゼインＸ−４Ｐ（ｆ４６−７０）［３］、およびＢｏｓ α_ｓ２−カゼインＸ−４Ｐ（ｆ１−２１）［４］のペプチドが挙げられる。

Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ名義の特許文献３および特許文献４は、ＣＰＰ−ＡＣＰ複合体およびフッ化物を含有する口腔用組成物において測定可能なフッ化物イオンレベルを維持することの難しさを確認し、測定可能なフッ化物レベルを維持するための追加の成分を提供する。

ＣＰＰ−ＡＣＰ複合体またはフッ化物組成物の再石灰化活性を増強させて、齲蝕のような病態をよりよく処置することは有用であろう。

国際公開第９８／４０４０６号パンフレット 米国特許第５，０１５，６２８号明細書 国際公開第０３／０５９３０３号パンフレット 国際公開第０３／０５９３０４号パンフレット

Ｂｉｅｓｂｒｏｃｋ ＡＲ， Ｆａｌｌｅｒ ＲＶ， Ｂａｒｔｉｚｅｋ ＲＤ１ Ｃｏｕｒｔ ＬＫ， ＭｃＣｌａｎａｈａｎ ＳＦ （１９９８）． Ｒｅｖｅｒｓａｌ ｏｆ ｉｎｃｉｐｉｅｎｔ ａｎｄ ｒａｄｉｏｇｒａｐｈｉｃ ｃａｒｉｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ａｎｄ ｓｔａｎｎｏｕｓ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｄｅｎｔｉｆｒｉｃｅｓ ｉｎ ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｄｅｎｔ ９：５−１０ Ｂｉｅｓｂｒｏｃｋ ＡＲ， Ｇｅｒｌａｃｈ ＲＷ， Ｂｏｌｌｍｅｒ ＢＷ， Ｆａｌｌｅｒ ＲＶ， Ｊａｃｏｂｓ ＳＡ， Ｂａｒｔｉｚｅｋ ＲＤ （２００１）． Ｒｅｌａｔｉｖｅ ａｎｔｉ−ｃａｒｉｅｓ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ １１００， １７００， ２２００， ａｎｄ ２８００ ｐｐｍ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｉｏｎ ｉｎ ａ ｓｏｄｉｕｍ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｄｅｎｔｉｆｒｉｃｅ ｏｖｅｒ １ ｙｅａｒ． Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ Ｄｅｎｔ Ｏｒａｌ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ ２９：３８２−３８９． Ｃｕｒｎｏｗ ＭＭ， Ｐｉｎｅ ＣＭ， Ｂｕｒｎｓｉｄｅ Ｇ， Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ ＪＡ， Ｃｈｅｓｔｅｒｓ ＲＫ， Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ Ｅ （２００２）． Ａ ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｓｕｐｅｒｖｉｓｅｄ ｔｏｏｔｈｂｒｕｓｈｉｎｇ ｉｎ ｈｉｇｈ−ｃａｒｉｅｓ−ｒｉｓｋ ｃｈｉｌｄｒｅｎ． Ｃａｒｉｅｓ Ｒｅｓ ３６：２９４−３００． Ｄａｖｉｅｓ ＧＭ， Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ ＨＶ， Ｅｌｌｗｏｏｄ ＲＰ， Ｂｅｎｔｌｅｙ ＥＭ， Ｂｌｉｎｋｈｏｒｎ ＡＳ， Ｔａｙｌｏｒ ＧＯ， ｅｔ ａｌ． （２００２）． Ａ ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ ｆｒｅｅ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｔｏｏｔｈｐａｓｔｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ａｇｅ ｏｆ １２ ｍｏｎｔｈｓ ｏｎ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｃａｒｉｅｓ ｉｎ ５−６ ｙｅａｒ ｏｌｄ ｃｈｉｌｄｒｅｎ． Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ Ｄｅｎｔ Ｈｅａｌｔｈ １９：１３１−１３６． Ｂｉｅｓｂｒｏｃｋ ＡＲ， Ｂａｒｔｉｚｅｋ ＲＤ， Ｇｅｒｌａｃｈ ＲＷ， Ｊａｃｏｂｓ ＳＡ， Ａｒｃｈｉｌａ Ｌ （２００３）． Ｄｏｓｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｄｅｎｔｉｆｒｉｃｅ ａｔ ９ ａｎｄ ２１ ｍｏｎｔｈｓ ｗｉｔｈ ｓｕｐｅｒｖｉｓｅｄ ｂｒｕｓｈｉｎｇ． Ａｍ Ｊ Ｄｅｎｔ １６：３０５−３１２． Ｄｕｃｋｗｏｒｔｈ ＲＭ， Ｍｏｒｇａｎ ＳＮ， Ｇｉｌｂｅｒｔ ＲＪ （１９９２）． Ｏｒａｌ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉ−ｃａｒｉｅｓ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ． Ｊ Ｄｅｎｔ Ｒｅｓ ７１ Ｓｐｅｃ Ｎｏ：８３６−８４０． Ｄｕｃｋｗｏｒｔｈ ＲＭ， Ｓｔｅｗａｒｔ Ｄ （１９９４）． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｏｕｔｈｗａｓｈｅｓ ｏｆ ｖａｒｉａｂｌｅ ＮａＦ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｂｕｔ ｃｏｎｓｔａｎｔ ＮａＦ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｎ ｏｒａｌ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ． Ｃａｒｉｅｓ Ｒｅｓ ２８：４３−４７． Ｈａｒｔｓｈｏｒｎｅ ＪＥ， Ｇｒｏｂｌｅｒ ＳＲ， Ｌｏｕｗ ＡＪ， Ｃａｒｓｔｅｎｓ ＩＬ， Ｌａｕｂｓｃｈｅｒ ＪＡ （１９９４）． Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｌａｑｕｅ ｉｎｄｅｘ ｓｃｏｒｅｓ， ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｌａｑｕｅ， ｐｌａｑｕｅ ｐＨ， ｄｅｎｔａｌ ｃａｒｉｅｓ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｄｒｉｎｋｉｎｇ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｈｏｏｌ ｃｈｉｌｄｒｅｎ． Ｊ Ｄｅｎｔ Ａｓｓｏｃ Ｓ Ａｆｒ ４９：５−１０． Ｓｋｏｌｄ−Ｌａｒｓｓｏｎ Ｋ， Ｍｏｄｅｅｒ Ｔ， Ｔｗｅｔｍａｎ Ｓ （２０００）． Ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｐｌａｑｕｅ ｉｎ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ ａｆｔｅｒ ｔｏｐｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｖａｒｎｉｓｈｅｓ． Ｃｌｉｎ Ｏｒａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇ ４：３１−３４． Ｌｙｎｃｈ ＲＪ， Ｎａｖａｄａ Ｒ， Ｗａｌｉａ Ｒ （２００４）． Ｌｏｗ−ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｉｎ ｐｌａｑｕｅ ａｎｄ ｓａｌｉｖａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｓａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｍｉｎｅｒａｌｉｓａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｍｅｌ； ｒｏｌｅ ｏｆ ｆｌｕｏｒｉｄｅ ｔｏｏｔｈｐａｓｔｅｓ， ｌｎｔ Ｄｅｎｔ Ｊ：３０４−３０９． ｔｅｎ Ｃａｔｅ ＪＭ （１９９９）． Ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｔｈｅｏｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌｕｏｒｉｄｅ． Ａｃｔａ Ｏｄｏｎｔｏｌ Ｓｃａｎｄ ５７：３２５−３２９． Ｒｅｙｎｏｌｄｓ ＥＣ （１９９８）． Ａｎｔｉｃａｒｉｏｇｅｎｉｃ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｏｆ ａｍｏｒｐｈｏｕｓ ｃａｌｃｉｕｍ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｔａｂｉｌｉｓｅｄ ｂｙ ｃａｓｅｉｎ ｐｈｏｓｐｈｏｐｅｐｔｉｄｅｓ． Ｉｎｖｉｔｅｄ ｒｅｖｉｅｗ． Ｓｐｅｃ Ｃａｒｅ Ｄｅｎｔｉｓｔ １８：８−１６． Ｓｈｅｎ Ｐ， Ｃａｉ Ｆ， Ｎｏｗｉｃｋｉ Ａ， Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｊ， Ｒｅｙｎｏｌｄｓ ＥＣ （２００１）． Ｒｅｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｍｅｌ ｓｕｂｓｕｒｆａｃｅ ｌｅｓｉｏｎｓ ｂｙ ｓｕｇａｒ−ｆｒｅｅ ｃｈｅｗｉｎｇ ｇｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｃａｓｅｉｎ ｐｈｏｓｐｈｏｐｅｐｔｉｄｅ−ａｍｏｒｐｈｏｕｓ ｃａｌｃｉｕｍ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ． Ｊ Ｄｅｎｔ Ｒｅｓ ８０：２０６６−２０７０． Ｒｅｙｎｏｌｄｓ ＥＣ， Ｃａｉ Ｆ， Ｓｈｅｎ Ｐ， Ｗａｌｋｅｒ ＧＤ （２００３）． Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｉｎ ｐｌａｑｕｅ ａｎｄ ｒｅｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｍｅｌ ｌｅｓｉｏｎｓ ｂｙ ｖａｒｉｏｕｓ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ｃａｌｃｉｕｍ ｉｎ ａ ｍｏｕｔｈｒｉｎｓｅ ｏｒ ｓｕｇａｒ−ｆｒｅｅ ｃｈｅｗｉｎｇ ｇｕｍ． Ｊ Ｄｅｎｔ Ｒｅｓ ８２：２０６−２１１．

したがって、本発明の目的は、従来技術に関係する難点および／または欠陥の１つまたは複数を克服または少なくとも軽減することである。

（発明の要旨）
一態様では、本発明は、安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）およびフッ化物イオン源を含む歯の石灰化のための組成物を提供する。ＡＣＰもフッ化物イオンを含有することができ、これらのフッ化物イオンは、安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）複合体の一部分とすることができる。

この組成物としては、任意の適切な口腔用組成物、具体的には患者が使用する口腔／歯科衛生を維持するための組成物および／または歯科医師が使用する処置組成物を挙げることができる。このような組成物としては、歯磨きペースト、歯磨きゲル、歯磨き粉、歯科用クリーム、液体歯磨き、洗口剤、トローチ、チューインガム、歯肉マッサージクリーム、含嗽錠、および歯科用修復剤を挙げることができる。

本発明の別の態様では、歯の表面または表面下を石灰化する方法であって、安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源を含む組成物を提供することを含む方法が提供される。好ましい一実施形態では、歯の表面はエナメル質である。

本発明の別の態様では、齲蝕を処置および／または予防する方法であって、歯のエナメル質中の齲蝕病変を、安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源を含む組成物と接触させることを含む方法が提供される。

フッ化物イオン源を含む口腔用組成物の歯の再石灰化有効性は、該組成物に安定化ＡＣＰを添加することによって実質的に向上できることが今回明らかになった。さらに、フッ化物イオン源を含む口腔用組成物から歯のエナメル質へのフッ化物イオンの取り込みは、該組成物に安定化ＡＣＰを包含させることによって増大させることができる。

したがって、本発明の別の態様では、フッ化物イオン源を有する口腔用組成物の再石灰化の有効性を増大させる方法であって、該口腔用組成物に安定化ＡＣＰを組み込むことを含む方法が提供される。

本発明の別の態様では、フッ化物イオン源を有する口腔用組成物で処置した後の歯の表面および表面下へのフッ化物イオンの取り込みを増大させる方法であって、該口腔用組成物に安定化ＡＣＰを組み込むことを含む方法が提供される。

好ましくは、歯の表面および表面下は歯のエナメル質である。

別の態様では、本発明は、フッ化物イオン源を有する口腔用組成物で処置した後の歯垢へのフッ化物の取り込みを増大させる方法であって、該口腔用組成物に安定化ＡＣＰを組み込むことを含む方法を提供する。

通常は、本発明の方法では、フッ化物イオンは、ＡＣＰとは別に供給されるが、実質的に同時に供給される。

ＡＣＰは、好ましくは塩基性可溶性の形のＡＣＰである。

フッ化物イオンは、組成物中に１ｐｐｍを超える量で存在することが好ましい。より好ましくは、３ｐｐｍを超える量である。別の実施形態では、１０ｐｐｍを超えることが好ましい。下記に示す典型的な実施態様では、この量は数百または数千ｐｐｍとすることができる。フッ化物含有量は、通常は当技術分野で一般的に使用される方式で、口腔用組成物中でのｐｐｍとして測定される。フッ化物が安定化ＡＣＰを含む供給源から供給される場合、ｐｐｍは、フッ化物のその供給源、通常は生物学的に利用可能なフッ化物の溶液または懸濁液中の濃度を意味する。

フッ化物イオンは、任意の適切な供給源に由来するものとすることができる。フッ化物イオン源は、遊離フッ化物イオンまたはフッ化塩を含むことができる。フッ化物イオン源としては例えば、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム、フッ化第一スズ、ケイフッ化ナトリウム、およびアミンフッ化物が挙げられるが、これらに限定されない。これらは、溶液（通常は、水溶液）または懸濁液として提供することができる。

好ましくは、ＡＣＰはホスホペプチド（ＰＰ）で安定化されている。好ましくは、ホスホペプチド（下記に定義する）はカゼインホスホペプチドである。好ましい一実施形態では、ＡＣＰはカゼインホスホペプチド安定化ＡＣＰ複合体の形である。

本発明の別の態様では、歯の表面または表面下を石灰化する方法であって、ＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源を歯の表面または表面下に塗布することを含む方法が提供される。好ましくは、該歯の表面および表面下は歯のエナメル質である。好ましい一実施形態では、該歯の表面は、齲蝕病変、歯の酸蝕によって引き起こされた病変、白斑病変、またはフッ素症病変の１つまたは複数からなる群から選択される病変を含む歯のエナメル質である。

一実施形態では、該歯の表面はこのような処置が必要である。本発明は、齲蝕、象牙質知覚過敏、フッ素症、または歯石を患っている対象者を処置する方法も含む。

驚くべきことに、フッ化物イオン源を含む口腔用組成物に安定化ＡＣＰを包含させることによって、安定化ＡＣＰを含まない口腔用組成物の場合に比べて、エナメル質病変域全体を通して再石灰化が生じ、病変の表面および表面下を被覆する範囲が増大することが明らかになった。

したがって、本発明の別の態様では、表面下エナメル質病変を再石灰化する方法であって、表面下エナメル質病変を、安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源を含む組成物と接触させることを含む方法が提供される。

別の態様では、歯の表面または表面下の石灰化のための医薬品の製造における安定化ＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本発明の別の態様では、フッ化物イオン源を有する口腔用組成物の再石灰化の有効性を増大させるための組成物の製造における安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本発明の別の態様では、フッ化物イオン源を有する口腔用組成物で処置した後の歯の表面および表面下へのフッ化物イオンの取り込みを増大させるための口腔用組成物の製造における安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本発明の別の態様では、フッ化物イオン源を有する口腔用組成物で処置した後の歯垢へのフッ化物イオンの取り込みを増大させるための口腔用組成物の製造における安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本発明の別の態様では、表面下エナメル質病変を再石灰化するための組成物の製造における安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源の使用が提供される。

特定の理論または作用機序に拘泥するものではないが、フッ化物イオンはＡＣＰと相互作用して、正常な歯のエナメル質より酸への曝露に対して抵抗性がある歯の表面との接触時にフルオロアパタイトを形成すると考えられる。これによって、優れた齲蝕抵抗性をもつ歯のエナメル質を生じることができる。この機序の別の部分は、ＰＰ安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム複合体を形成するフッ化物イオンが関与することがある（使用中、ｉｎ ｓｉｔｕにおいて塩基性非結晶リン酸カルシウムおよびフッ化物イオンの混合物を含むことがある）。非結晶フッ化リン酸カルシウムの使用としては、ＡＣＰと非結晶フッ化リン酸カルシウムとの混合物の使用が挙げられる。

本発明の説明の文脈では、「ホスホペプチド」または「ＰＰ」は、少なくとも１つのアミノ酸がリン酸化されているアミノ酸配列を意味する。好ましくは、ホスホペプチドは、アミノ酸配列−Ａ−Ｂ−Ｃ−の１つまたは複数を含み、式中、Ａはホスホアミノ残基であり、Ｂはホスホアミノ残基を含む任意のアミノアシル残基であり、Ｃはグルタミル、アスパルチル、またはホスホアミノ残基から選択される。ホスホアミノ残基はいずれも、独立にホスホセリル残基とすることができる。Ｂは、望ましくは残基であり、その側鎖は比較的に大きくも疎水性でもない。これは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＬｙｓとすることができる。

別の実施形態では、配列中のホスホアミノ酸の少なくとも２つは、好ましくは隣接している。好ましくは、ホスホペプチドは、配列Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅを含み、式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立に、ホスホセリン、ホスホトレオニン、ホスホチロシン、ホスホヒスチジン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸であり、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、およびＥの少なくとも２つ、好ましくは３つはホスホアミノ酸である。好ましい一実施形態では、ホスホアミノ酸残基はホスホセリン、最も好ましくは３つの隣接するホスホセリン残基である。ＤおよびＥは独立に、グルタミン酸またはアスパラギン酸であることも好ましい。

本明細書で使用される用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」（またはその文法上の変形）は、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」と等しく、同義に使用することができ、他の要素または特徴の存在を排除するものと見なされるべきでないことも理解されよう。

ＡＣＰとしては、ＡＣＦＰも挙げることができ、あるいはＡＣＰの代わりに、ＡＣＦＰを本発明の組成物および方法に含めることができる。

一実施形態では、ＡＣＰまたはＡＣＦＰは、未変化のカゼインまたはカゼインの断片の形のカゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）で安定化されており、形成された複合体は、好ましくは式［ＣＰＰ（ＡＣＰ）_８］_ｎまたは［（ＣＰＰ）（ＡＣＦＰ）_８］_ｎを有し、式中、ｎは１以上、例えば６である。形成された複合体は、コロイド複合体とすることができ、この場合、コア粒子は凝集して、水に懸濁した大きい（例えば、１００ｎｍ）コロイド粒子を形成する。したがって、ＰＰは、カゼインタンパク質またはポリホスホペプチドとすることができる。

ＰＰは、任意の供給源に由来することができる。これは、完全長カゼインポリペプチドを含めて、より大きいポリペプチドの場合に存在することができ、あるいはカゼイン、または他のホスホアミノ酸に富んだタンパク質、具体的にはホスフィチンのトリプシンもしくは他の酵素消化または化学的消化、または化学もしくは組み換え合成によって単離することができる。ただし、上述する配列−Ａ−Ｂ−Ｃ−またはＡ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅを含むことを条件とする。このコア配列に隣接する配列は、任意の配列とすることができる。しかし、α_ｓ１（５９−７９）［１］、β（１−２５）［２］、α_ｓ２（４６−７０）［３］、およびα_ｓ２（１−２１）［４］における隣接配列が好ましい。隣接配列は、場合によっては１つまたは複数の残基の欠失、付加、または保存的置換によって改変することができる。隣接領域のアミノ酸組成および配列は重要ではない。下記の表１に、保存的置換の例を示す。

隣接配列は、非自然発生アミノ酸残基も含むことができる。遺伝暗号によってコードされない、よく遭遇するアミノ酸としては、下記が挙げられる。
ＧｌｕおよびＡｓｐについての２−アミノアジピン酸（Ａａｄ）；
ＧｌｕおよびＡｓｐについての２−アミノピメリン酸（Ａｐｍ）；
Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、および他の脂肪族アミノ酸についての２−アミノ酪酸（Ａｂｕ）；
Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、および他の脂肪族アミノ酸についての２−アミノヘプタン酸（Ａｈｅ）；
Ｇｌｙについての２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）；
Ｖａｌ、およびＬｅｕおよびＩｌｅについてのシクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）；
ＡｒｇおよびＬｙｓについてのホモアルギニン（Ｈａｒ）；
Ｌｙｓ、Ａｒｇ、およびＨｉｓについての２，３−ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）；
Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、およびＡｌａについてのＮ−エチルグリシン（ＥｔＧｌｙ）；
ＡｓｎおよびＧｌｎについてのＮ−メチルアスパラギン（ＥｔＡｓｎ）；
Ｌｙｓについてのヒドロキシリシン（Ｈｙｌ）；
Ｌｙｓについてのアロヒドロキシリシン（ＡＨｙｌ）；
Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、およびＴｈｒについての３−（および４）ヒドロキシプロリン（３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ）；
Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、およびＶａｌについてのアロイソロイシン（Ａｌｌｅ）；
Ａｌａについてのｐ−アミジノフェニルアラニン；
Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、ＡｌａについてのＮ−メチルグリシン（ＭｅＧｌｙ、サルコシン）。

ＩｌｅについてのＮ−メチルイソロイシン（Ｍｅｌｌｅ）；
Ｍｅｔおよび他の脂肪族アミノ酸についてのノルバリン（Ｎｖａ）；
Ｍｅｔおよび他の脂肪族アミノ酸についてのノルロイシン（Ｎｌｅ）；
Ｌｙｓ、Ａｒｇ、およびＨｉｓについてのオルニチン（Ｏｒｎ）；
Ｔｈｒ、Ａｓｎ、およびＧｌｎについてのシトルリン（Ｃｉｔ）およびメチオニンスルホキシド（ＭＳＯ）；
ＰｈｅについてのＮ−メチルフェニルアラニン（ＭｅＰｈｅ）、トリメチルフェニルアラニン、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ）フェニルアラニン、トリフルオリルフェニルアラニン。

一実施形態では、ＰＰは、α_ｓ１（５９−７９）［１］、β（１−２５）［２］、α_ｓ２（４６−７０）［３］、およびα_ｓ２（１−２１）［４］からなる群から選択される１つまたは複数のホスホペプチド類である。

好ましい実施形態では、本発明の組成物は、ホスフェート緩衝剤および／またはカルシウムキレート剤を含まない。

本発明の一実施態様では、安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）およびフッ化物イオン源を含む歯の石灰化用組成物であって、ホスフェート緩衝剤および／またはカルシウムキレート剤を含まない組成物が提供される。

本発明の別の実施形態では、安定化ＡＣＰ複合体は、フッ化物イオン源を含む口腔用組成物、具体的には歯磨きペースト、洗口剤、または口腔用製剤に組み込まれて、齲蝕、歯の崩壊、歯の酸蝕、および／またはフッ素症の予防および／または処置に役立つ。ＡＣＰ複合体は、組成物の０．０１重量％〜５０重量％、好ましくは１．０重量％〜５０重量％を構成することができる。口腔用組成物の場合、ＡＣＰ複合体の投与量は、組成物の０．０１重量％〜５０重量％、好ましくは１．０重量％〜５０重量％であることが好ましい。特に好ましい一実施形態では、本発明の口腔用組成物は約２％のＣＰＰ−ＡＣＰを含有する。フッ化物イオンは、口腔用組成物中に約２００ｐｐｍ〜３０００ｐｐｍの範囲の濃度で存在することができる。好ましい一実施形態では、フッ化物イオンは、約４００ｐｐｍ〜約１５００ｐｐｍの範囲の濃度で存在する。さらに好ましい一実施形態では、口腔用組成物中のフッ化物イオンは約９００ｐｐｍの濃度で存在する。

上記の作用剤を含有する本発明の口腔用組成物を、口腔に適用できる様々な形態、具体的には歯磨きペースト、歯磨き粉、および液体歯磨きを含めて歯磨剤、洗口剤、トローチ、チューインガム、歯科用ペースト、歯肉マッサージクリーム、含嗽錠、乳製品、ならびに他の食糧として調製および使用することができる。本発明に従う口腔用組成物は、特定の口腔用組成物のタイプおよび形に応じて、追加のよく知られている材料をさらに含むことができる。

本発明のいくつかの好ましい形では、口腔用組成物は、特性が実質的に液体、具体的には洗口剤またはリンスとすることができる。このような調合物では、ビヒクルは、通常は水−アルコールの混合物、望ましくは下記に示す保湿剤を含む水−アルコールの混合物である。一般に、水とアルコールの重量比は約１：１〜約２０：１の範囲である。このタイプの調合物中の水−アルコールの混合物の全量は、通常は調合物の約７０重量％〜約９９．９重量％の範囲である。該アルコールは、通常はエタノールまたはイソプロパノールである。エタノールが好ましい。

本発明のこのような液体および他の調合物のｐＨは、一般に約５〜約９、通常は約５．０〜７．０の範囲である。該ｐＨは、酸（例えば、安息香酸）または塩基（例えば、水酸化ナトリウム）、または緩衝剤（安息香酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、または重炭酸ナトリウムなどの場合と同様に）で調節することができる。

本発明の他の望ましい形では、安定化ＡＣＰ組成物は、特性が実質的に固体またはペースト、具体的には歯磨き粉、歯科用錠剤、または歯磨きペースト（歯科用クリーム）、またはゲル歯磨剤とすることができる。このような固体またはペースト状の口腔用調合物のビヒクルは、一般に歯科上許容できる研磨材料を含有する。研磨材料の例は、水不溶性メタリン酸ナトリウム、メタリン酸カリウム、リン酸三カルシウム、リン酸カルシウム二水和物、無水第二リン酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム、オルトリン酸マグネシウム、リン酸三マグネシウム、炭酸カルシウム、水和アルミナ、仮焼アルミナ、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸ジルコニウム、シリカ、ベントナイト、およびそれらの混合物である。他の適切な研磨材料としては、熱硬化性樹脂粒子、具体的にはメラミン−、フェノール−、および尿素−ホルムアルデヒド類、ならびに架橋ポリエポキシド類およびポリエステル類が挙げられる。好ましい研磨材料としては、粒径約５ミクロンまで、平均粒径約１．１ミクロンまで、表面積約５０，０００ｃｍ^２／ｇまでの結晶シリカ、シリカゲルまたはコロイド状シリカ、および複雑な非結晶アルミノケイ酸アルカリ金属塩が挙げられる。

視覚的に透明なゲルを使用する場合、コロイド状シリカ研磨剤、具体的には商標ＳＹＬＯＩＤでＳｙｌｏｉｄ ７２およびＳｙｌｏｉｄ ７４として販売されているもの、または商標ＳＡＮＴＯＣＥＬでＳａｎｔｏｃｅｌ １００、アルミノケイ酸アルカリ金属複合体は、歯磨剤でよく使用されるゲル化剤−液体（水および／または保湿剤を含む）系の屈折率に近い屈折率を有するので特に有用である。

いわゆる「水不溶性」研磨材料の多くは、特性がアニオン性であり、少量の可溶性材料も含む。したがって、不溶性メタリン酸ナトリウムを任意の適切な方式、例えばＴｈｏｒｐｅ’ｓ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｖｏｌｕｍｅ ９， ４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， ｐｐ． ５１０−５１１に示されている方式で形成することができる。Ｍａｄｒｅｌｌ塩およびＫｕｒｒｏｌ塩と呼ばれる不溶性メタリン酸ナトリウムの形は、適切な材料のさらなる例である。これらのメタリン酸塩は、水に対してわずかな溶解性しか示さず、したがって一般に不溶性メタホスフェート（ＩＭＰ）と呼ばれる。その中には、不純物として、少量の可溶性ホスフェート材料が通常は数％、具体的には最高４重量％存在している。不溶性メタホスフェートの場合は可溶性トリメタリン酸ナトリウムを含むと思われる可溶性ホスフェート材料の量は、望むなら水で洗浄することによって低減またはなくすことができる。不溶性メタリン酸アルカリ金属塩は、通常は材料の１％以下が３７ミクロンより大きい粒径の粉末の形で使用される。

研磨材料は、一般に固体またはペースト組成物中、約１０％〜約９９％の重量濃度で存在する。好ましくは、これは、歯磨きペーストでは約１０％〜約７５％の量、歯磨き粉では約７０％〜約９９％の量で存在する。歯磨きペーストでは、研磨材料がシリカ性である場合、一般に約１０重量％〜３０重量％の量で存在する。他の研磨材料は、通常は約３０重量％〜７５重量％の量で存在する。

歯磨きペーストでは、液体ビヒクルは、通常は調合物の約１０重量％〜約８０重量％の範囲の量で水および保湿剤を含むことができる。グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、およびポリプロピレングリコールは、適切な保湿剤／担体の例である。また、水、グリセリン、およびソルビトールの液体混合物も有利である。屈折率が考慮すべき重要な点である透明なゲルでは、約２．５重量／重量％〜３０重量／重量％の水、０重量／重量％〜約７０重量／重量％のグリセリン、および約２０重量／重量％〜８０重量／重量％のソルビトールを使用することが好ましい。

歯磨きペースト、クリーム、およびゲルは、通常は天然もしくは合成増粘剤、またはゲル化剤を約０．１重量／重量％〜約１０重量／重量％、好ましくは約０．５重量／重量％〜約５重量／重量％の割合で含有する。適切な増粘剤は、例えばＬａｐｏｒｔｅ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄによって上市されているＬａｐｏｎｉｔｅ（例えば、ＣＰ、ＳＰ ２００２、Ｄ）として入手可能なコロイド状合成ケイ酸マグネシウムアルカリ金属複合体クレーである合成ヘクトライトである。Ｌａｐｏｎｉｔｅ Ｄは、約５８．００重量％のＳｉＯ_２、約２５．４０重量％のＭｇＯ、約３．０５重量％のＮａ_２Ｏ、約０．９８重量％のＬｉ_２Ｏ、ならびに水、および微量の金属である。その真比重は２．５３であり、見掛けかさ密度は、水分８％で１．０ｇ／ｍｌである。

他の適切な増粘剤としては、アイリッシュモス（Ｉｒｉｓｈ ｍｏｓｓ）、イオタカラゲナン、トラガカントゴム、デンプン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルプロピルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース（例えば、Ｎａｔｒｏｓｏｌとして入手可能）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、およびコロイド状シリカ、具体的には微粉砕Ｓｙｌｏｉｄ（例えば、２４４）が挙げられる。可溶化剤、具体的にはプロピレングリコール、ジプロピレングリコール、およびヘキシレングリコールのような保湿性ポリオール類、具体的にはメチルセロソルブやエチルセロソルブのようなセロソルブ類、オリーブ油、ヒマシ油、およびワセリンのような直鎖で少なくとも約１２個の炭素を含む植物油類および蝋類、ならびに酢酸アミル、酢酸エチル、および安息香酸ベンジルのようなエステルも含むことができる。

口腔用調合物は、通常通り一般に適切な表示パッケージで販売またはその他の方法で分配されることが理解されよう。したがって、口腔用リンスの瓶は、口腔用リンス剤または洗口剤として物質が記載され、その使用のための指示が記載されているラベルを有する。歯磨きペースト、クリーム、またはゲルは、歯磨きペースト、ゲル、または歯科クリームとして物質が記載されているラベルを有する、一般に押出しチューブ、通常はアルミニウム、ライニング鉛、またはプラスチックのチューブ、または内容量を計量するための他のスクイーズ、ポンプ、または加圧ディスペンサー中に入っている。

有機表面活性剤を本発明の組成物中で使用して、予防作用の増大を実現させ、口腔全体への活性剤の徹底した完全な分散を実現する助けとなり、本組成物を美容上許容できるものにすることができる。有機表面活性材料は、好ましくはアニオン性、非イオン性、または両性であり、好ましくは活性剤と相互作用しない。表面活性剤として、組成物に洗浄性および起泡性を付与する洗浄効果のある材料を使用することが好ましい。アニオン性界面活性剤の適切な例は、水溶性高級脂肪酸モノグリセリド一硫酸塩類、具体的には水添ヤシ油脂肪酸の一硫酸化モノグリセリドのナトリウム塩、高級アルキル硫酸塩類、具体的にはラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールスルホン酸塩類、具体的にはドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、高級アルキルスルホ−アセテート類、１，２−ジヒドロキシプロパンスルホネートの高級脂肪酸エステル類、および低級脂肪族アミノカルボン酸化合物の実質的に飽和の高級脂肪族アシルアミド類、具体的には脂肪酸、アルキル基、またはアシル基などに１２個〜１６個の炭素を有するものである。最後に述べたアミド類の例は、Ｎ−ラウロイルサルコシン、ならびにＮ−ラウロイル、Ｎ−ミリストイル、またはＮ−パルミトイルサルコシンのナトリウム塩、カリウム塩、およびエタノールアミン塩であり、石鹸または類似の高級脂肪酸材料を実質的に含むべきでない。本発明の口腔用組成物におけるこれらのサルコナイト化合物の使用は、特に有利である。というのは、これらの材料は、歯のエナメル質の酸溶液への溶解性の低下をもたらすことに加えて、炭水化物分解による口腔での酸生成の抑制において顕著な効果を長期に示すからである。使用に適した水溶性非イオン性界面活性剤の例は、エチレンオキシドと、それと反応することができる疎水性長鎖（例えば、約１２個〜２０個の炭素原子の脂肪族鎖）を有する様々な反応性水素含有化合物との縮合生成物であり、この縮合生成物（「エトキサマー」）は、ポリ（エチレンオキシド）と脂肪酸類、脂肪アルコール類、脂肪アミド類、多価アルコール類（例えば、ソルビタンモノステアレート）、およびポリプロピレンオキシド（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ材料）との縮合生成物のような親水性ポリオキシエチレン部分を含む。

表面活性剤は、通常は約０．１重量％〜５重量％の量で存在する。該表面活性剤は、本発明の活性剤の溶解を助け、それによって可溶化保湿剤の必要量を低減できることは注目に値する。

様々な他の材料、具体的にはホワイトニング剤、保存剤、シリコーン、クロロフィル化合物、および／またはアンモニア化材料、具体的には尿素、リン酸二アンモニウム、およびそれらの混合物を、本発明の口腔用調製物に組み込むことができる。これらのアジュバントが存在する場合は、所望の特性および特徴に実質的に悪影響を及ぼさない量で調合物に組み込む。

任意の適切な矯味または甘味材料も使用することができる。適切な矯味構成要素の例は、矯味油、例えばスペアミント油、ペパーミント油、冬緑油、サッサフラス油、チョウジ油、セージ油、ユーカリ油、マヨラナ油、シナモン油、レモン油、およびオレンジ油、ならびにサリチル酸メチルである。適切な甘味剤としては、スクロース、ラクトース、マルトース、ソルビトール、キシリトール、シクラミン酸ナトリウム、ペリラルチン、ＡＭＰ（アスパルチルフェニルアラニン、メチルエステル）、サッカリンなどが挙げられる。適切には、矯味剤および甘味剤はそれぞれまたは一緒になって、調合物の約０．１％から５％超を構成する。

本発明の組成物は、例えば温かいガム基材に掻き混ぜることによって、あるいは例えばジェルトン、ゴムラテックス、ビニライト樹脂などであるガム基材の外側表面を、望ましくは通常の可塑剤または軟化剤、糖、または他の甘味剤、具体的にはグルコース、ソルビトールなどでコーティングすることによって、ロゼンジ、またはチューインガム、または他の製品に組み込むこともできる。

別の態様では、発明は、上述するＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源を含む医薬組成物と、医薬として許容できる担体を共に含む組成物を提供する。このような組成物は、歯科用抗齲蝕組成物および処置組成物からなる群から選択することができる。歯科用組成物または治療組成物は、ゲル、液体、固体、粉末、クリーム、またはロゼンジの形とすることができる。治療組成物は、錠剤またはカプセル剤の形とすることもできる。例えば、下記：水；グリセロール；ＣＰＰ−ＡＣＰ；フッ化ナトリウム、Ｄ−ソルビトール；二酸化ケイ素；カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）；プロピレングリコール；二酸化チタン；キシリトール；リン酸；グアーガム；酸化亜鉛；サッカリンナトリウム；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル；酸化マグネシウム；ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、およびｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルを含有するクリーム製剤を使用することができる。

本発明はさらに、齲蝕、または歯の崩壊、歯の腐食、およびフッ素症のいずれか１つまたは複数を処置または予防するためのその使用に関する指示書を備えた上述する製剤を含む。

別の態様では、本発明は、（ａ）フッ化物イオン源、および（ｂ）薬剤として許容できる担体中のＣＰＰ−ＡＣＰ複合体を含むパーツのキットを提供する。望ましくは、キットはさらに、歯の表面の石灰化を必要とする患者において歯の表面の石灰化のために使用するための指示書を含む。一実施形態では、作用剤および複合体は、患者の処置に適した量で存在する。本発明はまた、歯の表面に塗布する前にフッ化物源と混合するための（ａ）フッ化物イオン源、および（ｂ）薬剤として許容できる担体中のＣＰＰ−ＡＣＰ複合体を含む再石灰化改善システムも提供する。

別の態様では、本発明は、口腔ケア組成物中のフッ化物イオンの再石灰化効果を向上させる方法であって、安定化ＡＣＰを口腔ケア組成物に添加することを含む方法を提供する。

別の態様では、本発明は、フッ化物のエナメル質病変への取り込みを改善する方法であって、歯のエナメル質中の病変を安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源を含む組成物と接触させることを含む方法を提供する。

本発明の別の態様では、歯の表面または表面下の石灰化のための医薬品の製造における安定化ＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本発明の別の態様では、齲蝕の処置および／または予防のための医薬品の製造における安定化ＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本発明の別の態様では、歯の酸蝕を処置および／または予防する方法であって、歯のエナメル質中の齲蝕による病変を、安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源を含む組成物と接触させることを含む方法。

本発明の別の態様では、歯の酸蝕の処置および／または予防のための医薬品の製造における安定化ＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源の使用が提供される。

本明細書は具体的にはヒトにおける適用に言及しているが、本発明が動物の適用にも有用であることは明らかに理解されよう。したがって、すべての態様において、本発明は、ウシ、ヒツジ、ウマ、および家禽のような家畜；ネコやイヌのようなコンパニオン動物；ならびに動物園の動物に有用である。

次に、本発明をさらに、下記の実施例および図によって説明するが、これらに限定されない。

図について、図１は、ｉｎ ｓｉｔｕにおける再石灰化およびｉｎ ｖｉｔｒｏにおける酸への曝露（ＡＣ）の後のエナメル質表面下病変の代表的なマイクロラジオグラムを示す。
本発明はまた、以下の項目を提供する。
（項目１）
歯の表面および表面下を石灰化する方法であって、安定化ＡＣＰまたは安定化ＡＣＦＰ、およびフッ化物イオン源を含む組成物を提供することを含む、方法。
（項目２）
上記組成物が、歯磨きペースト；歯磨きゲル；歯磨き粉；歯科用クリーム；液体歯磨き；洗口剤；トローチ；チューインガム；歯肉マッサージクリーム；含嗽錠、および歯科用修復剤からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目３）
組成物が、安定化ホスホペプチドであるＡＣＰを含む、項目１に記載の方法。
（項目４）
上記フッ化物イオン源が、遊離フッ化物イオン；フッ化ナトリウム；モノフルオロリン酸ナトリウム；フッ化第一スズ；ケイフッ化ナトリウム、およびアミンフッ化物からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目５）
表面下エナメル質病変を再石灰化するための方法であって、表面下エナメル質病変を、安定化ＡＣＰおよびフッ化物イオン源を含む組成物と接触させることを含む、方法。
（項目６）
上記組成物が、歯磨きペースト；歯磨きゲル；歯磨き粉；歯科用クリーム；液体歯磨き；洗口剤；トローチ；チューインガム；歯肉マッサージクリーム；含嗽錠、および歯科用修復剤からなる群から選択される、項目５に記載の方法。
（項目７）
上記ＡＣＰが安定化ホスホペプチドである、項目５に記載の方法。
（項目８）
齲蝕を処置および／または予防する方法であって、歯のエナメル質中の齲蝕病変を、安定化ＡＣＰを含む組成物と接触させることを含む、方法。
（項目９）
歯の表面または表面下の石灰化のための医薬品の製造における安定化ＡＣＰ複合体およびフッ化物イオン源の使用。
（項目１０）
フッ化物イオン源を有する口腔用組成物で処置した後の歯の表面および表面下へのフッ化物の取り込みを増大させる方法であって、該口腔用組成物に安定化ＡＣＰを組み込むことを含む、方法。
（項目１１）
フッ化物イオン源を有する口腔用組成物の歯の再石灰化有効性を増大させる方法であって、該口腔用組成物に安定化ＡＣＰを組み込むことを含む、方法。
（項目１２）
フッ化物イオン源を含む口腔用組成物で処置した後の歯垢へのフッ化物取り込みを増大させる方法であって、該口腔用組成物に安定化ＡＣＰを組み込むことを含む方法。

（実施例１）
歯垢フッ化物試験は、暗号化した３つの口腔用リンス剤を含む無作為化二重盲検三元配置クロスオーバーデザインで行われた。３つの口腔用リンス剤は、（ｉ）Ｒｅｃａｌｄｅｎｔ Ｐｔｙ Ｌｔｄ（Ｍｅｌｂｏｕｒｎｅ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）から供給された２重量／体積％のＣＰＰ−ＡＣＰ（Ｒｅｃａｌｄｅｎｔ（商標））および脱イオン水中ＮａＦとして４５０ｐｐｍのＦ、（ｉｉ）脱イオン水中ＮａＦとして４５０ｐｐｍのＦ、（ｉｉｉ）プラセボ対照リンス剤としての脱イオン水であった。ＣＰＰ−ＡＣＰ口腔用リンス剤を１Ｍ ＨＣｌでｐＨ７．０に調整した。対象者には、暗号化したリンス剤を不透明プラスチックチューブで供給し、それぞれリンス剤の１５ｍｌを６０秒間、１日３回（朝食後、昼食後、および就寝前の夜）、４日間使用し、口腔用リンス剤使用の日誌を記入した。５日目、リンス剤を朝食後に使用し、歯肉縁上歯垢を２〜３時間後に回収した。対象者は、リンス剤を使用している間、すべての口腔衛生手順を控えた。対象者にはそれぞれ、処置の間に４週間の休薬期間を設けて各口腔用リンス剤を使用するように交差させた。Ｇｒａｃｅｙキュレット７／８を用いて、全ての歯頬側面および舌側面から歯肉縁上歯垢を回収した。歯垢を計量済みの微小遠心管に集め、再計量し、次いで−７０℃で保存した。歯垢試料を解凍した後、５分間２０，０００ｇで遠心し、Ｊｏｕａｎ ＲＣ１０．１０ロータリーエバポレータで乾燥し、次いで再計量して、乾燥重量を確定した。次いで、ボルテックス混合器中で、乾燥した試料を２００μｌの１Ｍ ＨＣｌと１分間混合することによって抽出し、次いでＢｒａｎｓｏｎ １２超音波浴（Ｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｅｄ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ， Ｍｅｌｂｏｕｒｎｅ， Ａｕｓｔｒａｌｉａ）中、氷水で８時間処理した。遠心した（２０，０００ｇ、５分間）後、上澄み中のフッ化物イオン濃度を、以前に記載されたように確定した（ＳｉｌｖａおよびＲｅｙｎｏｌｄｓ、１９９６）。歯垢中フッ化物レベルは、ノンパラメトリックＦｒｉｅｄｍａｎｓ検定を用いてＷｉｌｃｏｘｏｎ符号付順位検定で統計解析した（Ｎｏｒｕｓｉｓ， １９９３）。

フッ化物リンス剤は両方とも、歯垢中フッ化物レベルの上昇をもたらし、４５０ｐｐｍのフッ化物リンス剤で、プラセボ対照リンス剤で得られたフッ化物レベルのほぼ２倍であった（表２）。４５０ｐｐｍのフッ化物リンス剤に２％のＣＰＰ−ＡＣＰを添加することによって、フッ化物イオンの歯垢への取り込みが有意に増大し、歯垢中フッ化物レベルは、フッ化物リンス剤で得られたレベルの２倍を超えた。歯垢の乾燥重量については、３つのリンス剤間で有意差は認められなかったが、２％のＣＰＰ−ＡＣＰと４５０ｐｐｍのフッ化物リンス剤で得られた歯垢の乾燥重量は、他の２つのリンス剤で得られた乾燥重量より高い傾向を示した。

（実施例２）
再石灰化試験は、以前に記載されたｉｎ ｓｉｔｕモデルを用いて、５つの歯磨きペーストスラリーを含む無作為化二重盲検五元配置クロスオーバー再石灰化試験として行われた（Ｓｈｅｎら、２００１；Ｒｅｙｎｏｌｄｓら、２００３）。表面下脱灰病変を含む６つのヒトエナメル質半スラブを取り付けた口蓋プレートを、Ｓｈｅｎら（２００１）によって記載されたように準備した。歯磨きペーストを暗号化した製品として調製し、製品の基材は、ソルビトール、シリカ、ラウリル硫酸ナトリウム、矯味剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、二酸化チタン、キサンタンガム、サッカリンナトリウム、および水で構成された。この製剤のｐＨをリン酸で７．０に調整した。５つの歯磨きペースト製剤を調製した。（ｉ）プラセボ、（ｉｉ）フッ化ナトリウムとして１１００ｐｐｍのフッ化物、（ｉｉｉ）フッ化ナトリウムとして２８００ｐｐｍのフッ化物、（ｉｖ）２％のＣＰＰ−ＡＣＰ、および（ｖ）２％のＣＰＰ−ＡＣＰとフッ化ナトリウムとして１１００ｐｐｍのフッ化物。ペースト１ｇを脱イオン水４ｍｌに添加し、ボルテックスで６０秒間混合することによって、歯磨きペーストスラリーを調製した。対象者は、スラリーで、１回６０秒間、１日４回（次の時間：午前１０．００、午前１１．３０、午後２．００、および午後３．３０）、１４日間すすいだ。対象者は、歯磨きペーストスラリー使用の日誌を記入し、プレートを装着している間は飲食、または口腔衛生手順を行わないように指示された。プレートは、口内に装着していないときは、シールした湿潤プラスチック袋中に室温で保存した。対象者は、脱イオン水を使用してプレートをすすぐように指示された。各処置が終了した後、エナメル質半スラブをプレートから取り外し、酸曝露の準備をした。

再石灰化病変の酸曝露については、被検エナメル質ブロックを耐酸性マニキュア液で被覆して、各再石灰化ウィンドウの（１×３ｍｍ^２）の半分のみを曝露した。スラブを３〜４ｃｍの歯科用ワックス棒の先端に載せ、撹拌していない乳酸／Ｃａｒｂｏｐｏｌ脱灰緩衝液（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，１９９７）４０ｍｌに３７℃で８時間浸漬した。この酸曝露が終了した後、エナメル質スラブを脱イオン水ですすぎ、両方のウィンドウの正中線で分割して、２つのブロックにした。再石灰化病変および酸曝露再石灰化病変を含むこれら２つのエナメル質ブロックを、元の脱灰病変を含むそれらの対照ブロックと対にし、以前に記載されたように包埋し、切片化し、マイクロラジオグラムを撮った（Ｓｈｅｎら、２００１）。病変および隣接する良好なエナメル質の影像を走査し、ｌｉｊｉｍａら（２００４）によって記載されたように各病変のミネラルプロファイル（％）を確定した。台形積分で算出された、元の脱灰病変と良好なエナメル質の濃度プロファイルでの領域間の差をΔＺｄで表す。台形積分で算出された、再石灰化病変と良好なエナメル質の濃度プロファイルでの領域間の差をΔＺｒで表す。再石灰化の百分率（Ｒ（％））は、ΔＺ値の変化の百分率を表す。例えば、

データを、反復測定ＡＮＯＶＡを用いてポストホックＳｃｈｅｆｆｅ検定で統計解析した（Ｎｏｒｕｓｉｓ， １９９３）。

すべての歯磨きペースト製剤は、ｉｎ ｓｉｔｕ試験でエナメル質表面下病変中のミネラルを置換した（表３）。フッ化物は用量反応性の再石灰化をもたらした。２８００ｐｐｍの製剤は、１１００ｐｐｍの製剤より有意に多くのミネラルを置換し、その１１００ｐｐｍの製剤は、プラセボ対照より有意に多くのミネラルを置換した。２％のＣＰＰ−ＡＣＰを含む歯磨きペーストは、２８００ｐｐｍのフッ化物製剤に類似の再石灰化のレベルをもたらし、２％のＣＰＰ−ＡＣＰと１１００ｐｐｍのフッ化物を含むペーストは、２８００ｐｐｍのフッ化物のペーストを含めて、他のどの製剤より優れていた。再石灰化後の病変のマイクロラジオグラフィによって、フッ化物イオン単独では、表層の再石灰化を促進する傾向があり、ＣＰＰ−ＡＣＰは、フッ化物の存在下でさえ、病変全体を通して再石灰化を促進したことが明らかになった（図１）。

ｉｎ ｓｉｔｕにおける再石灰化エナメル質スラブのｉｎ ｖｉｔｒｏでの酸曝露によって、プラセボ処置エナメル質スラブからミネラルが実質的に喪失した。２％のＣＰＰ−ＡＣＰで再石灰化した病変からは、酸曝露時に、より少ない量のミネラルが喪失した。フッ化物製剤で処置したエナメル質から少量のミネラルが喪失する傾向があったが、その喪失には統計的有意性が見られなかった。２％のＣＰＰ−ＡＣＰと１１００ｐｐｍのフッ化物を含有するペーストについて、酸曝露後の残留再石灰化部は、２８００ｐｐｍのフッ化物を含有するペーストを含めて、他のすべてのペーストで得られた残留再石灰化部に比べて、有意に大きかった。酸曝露後の再石灰化病変のマイクロラジオグラフィによって、酸が主に再石灰化域下からミネラルを除去したことが明らかになった。

このｉｎ ｓｉｔｕ試験によって、フッ化物によるエナメル質表面下病変の再石灰化において明確な用量反応性が示された。１１００ｐｐｍのＦ−を含有する歯磨きペーストによる再石灰化は８．２％±０．２％であり、２８００ｐｐｍのＦ−を含有する歯磨きペーストによる再石灰化は１５．５％±２．４％であった。エナメル質表面下病変を再石灰化する上で、２％のＣＰＰ−ＡＣＰを含有するペーストは１１００ｐｐｍのＦ−を含有するペーストに比べて優れているが、２８００ｐｍのＦを含有するペーストとは有意差が見られないことも明らかになった。２％のＣＰＰ−ＡＣＰと１１００ｐｐｍのＦ−を含有するペーストは、２８００ｐｐｍのＦ−を含有するペーストより大きな再石灰化部をもたらした。２％のＣＰＰ−ＡＣＰを１１００ｐｐｍのＦ−に添加すると、１１００ｐｐｍのＦ−のペーストに比べて、エナメル質表面下の再石灰化が１５６％増大した。

カゼインホスホペプチド類（ＣＰＰ）は、非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）を安定化するだけでなく、歯の表面にＡＣＰを送達および局在化させることがわかっている（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ、１９９８；Ｒｅｙｎｏｌｄｓら１９９９；Ｒｅｙｎｏｌｄｓら２００３）。洗口剤中のＣＰＰ−ＡＣＰは、ＣＰＰが唾液ペリクル、および歯肉縁上歯垢バイオフィルム中の細菌の表面に結合して、歯肉縁上歯垢中のカルシウムおよび無機ホスフェートイオンのレベルを有意に上昇させた（Ｒｅｙｎｏｌｄｓら、２００３）。この臨床試験は、ＣＰＰ−ＡＣＰがフッ化物イオンの歯垢への取り込みを促進できることも実証した。したがって、フッ化物含有歯磨きペースト製剤が添加されると、ＣＰＰ−ＡＣＰは、カルシウム、ホスフェート、およびフッ化物イオンの歯肉縁上歯垢への取り込みを促進するはずである。本ｉｎ ｓｉｔｕ試験は、歯磨きペースト製剤として送達されたＣＰＰ−ＡＣＰは、エナメル表面下の再石灰化において非常に有効であること、形成されたミネラルは天然のエナメル質アパタイトより酸に対して抵抗性があることを実証した。フッ化物の存在下でＣＰＰ−ＡＣＰによって再石灰化されたエナメル質は、天然のエナメル質またはＣＰＰ−ＡＣＰによって再石灰化されたエナメル質に比べて、酸曝露に対して高い抵抗性を示した。これは、Ｆ−イオン存在下のＣＰＰ−ＡＣＰが耐酸性フルオロアパタイトによる再石灰化を促進することを示唆している。これらの結果は、ＣＰＰ−ＡＣＰの歯磨きペースト製剤への添加によって、フッ化物のエナメル質表面下病変を耐酸性フルオロアパタイトで再石灰化する能力が有意に増強されることを実証した。

（実施例３）
電子線マイクロプローブ波長分散型分光法を使用して、再石灰化病変中のフッ化物レベルを下記の通り測定した。

エナメル質切片を、１インチ標本ホルダー上でエポキシ樹脂に包埋した。樹脂をフラットポリッシュして、２４００グリットの研摩紙を用いて、エナメル質切片を曝露した。光学的滑らかさを実現するために、３μｍおよび１μｍのダイヤモンド研磨ペーストを布パッド上で使用し、０．２５μｍの酸化アルミニウムペーストで最終仕上げを行った。Ｄｙｎａｖａｃ ３００を用いて、試料および標準物質をすべて２０ｎｍの炭素でコーティングした。電子線プローブ（８９００Ｒ ＳｕｐｅｒＰｒｏｂｅ ＪＥＯＬ， Ｊａｐａｎ）を、加速電圧１５ｋＶ、試料電流１２ｎＡ、取り出し角４０°で操作した。滞留時間は、ピークについては１０秒、各点に付きバックグラウンドについて１０秒を使用した。Ｆの検出限界は８００ｐｐｍであった。標準物質の収集中に使用するビーム径は、１０μｍのスポットであり、病変解析の直径は２μｍであった。カルシウム、リン、フッ素、および塩素のＸ線強度を、それぞれペンタエリスリトール、ペンタエリスリトール、合成Ｗ／Ｓｉ層、ペンタエリスリトールのフィルター結晶を備えた４つの分光計を用いて同時に測定した。標準物質は、直径１０μｍ（非合焦点）および２μｍ（合焦点）のビームを使用して、Ｘ線カウント強度を較正して解析した。標準物質は、カルシウム対リンの比１．６６７、フッ化物含有量３．７０重量％の合成フルオロアパタイトであった。病変の基底部から表層に向けて病変を横断して、カルシウム、リン、フッ素、酸素、および塩素の元素マップおよび定量ラインスキャンを収集した。ＳＴＲＡＴＡ（Ｔｈｉｎ Ｆｉｌｍ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐａｃｋａｇｅ）で実施するＰｈｉ（ＲｈｏＺ）−Ｐａｒａｂｏｌｉｃ法補正手順を使用して、データを補正した。

酸曝露後の再石灰化病変のマイクロラジオグラフィによって、酸が主に再石灰化域下からミネラルを除去したことが明らかになった。プラセボ、１１００ｐｐｍのＦ、および２％のＣＰＰ−ＡＣＰと１１００ｐｐｍのＦのペーストについて再石灰化病変のフッ化物レベルを、電子線マイクロプローブ波長分散型分光法を使用して確定した（表４）。２％のＣＰＰ−ＡＣＰと１１００ｐｐｍのＦのペーストは、１１００ｐｐｍのＦのペーストに比べて、病変に取り込まれたフッ化物が有意に多かった（表４）。さらに、２％のＣＰＰ−ＡＣＰと１１００ｐｐｍのＦのペーストについて、フッ化物レベルの測定値は、再石灰化ミネラルがフルオロアパタイトであると推定して予測されたレベルに近かった（表４）。

（実施例４）
下記の材料を有する局所クリームを、本発明に従って生成することができる。
水
グリセロール
ＣＰＰ−ＡＣＰ複合体
Ｄ−ソルビトール
カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）
プロピレングリコール
二酸化ケイ素
二酸化チタン
キシリトール
リン酸
フッ化ナトリウム
矯味剤
サッカリンナトリウム
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル
ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル
（実施例５）
下記の組成物を有する口腔用リンス製剤を、本発明に従って生成することができる。
水
アルコール
ポロキサマー４０７
ラウリル硫酸ナトリウム
ＣＰＰ−ＡＣＰ複合体
フッ化ナトリウム
矯味剤
サッカリンナトリウム
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル
ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル
（実施例６）
下記の組成物を有する無糖チューインガム製剤を、本発明に従って生成することができる。
結晶質ソルビトール／マンニトール／キシリトール
ガム基材
炭酸カルシウム
グリセリン
ＣＰＰ−ＡＣＰ複合体
フッ化ナトリウム
矯味油
水
明細書に開示および定義する本発明は、本文または図面に記載され、あるいはそれから明らかな個々の特徴のうち２つ以上の組合せの代替すべてに及ぶことが理解されよう。これらの様々な組合せはすべて、本発明の様々な代替の態様を構成する。

Claims (8)

1. 歯科病変におけるｉｎ ｓｉｔｕ耐酸性フルオロアパタイトの形成のための製剤の製造における、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）と、遊離フッ化物イオンの使用であって、該製剤が、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）、および遊離フッ化物イオンを含み、カルシウムキレート剤もホスフェート緩衝剤も含まない、使用。
2. 病変におけるフッ化物レベルを上昇させるための製剤の製造における、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）と、遊離フッ化物イオンの使用であって、該製剤が、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）、および遊離フッ化物イオンを含み、カルシウムキレート剤もホスフェート緩衝剤も含まない、使用。
3. ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）と、遊離フッ化物イオンを含まない製剤で処置された歯科病変と比較して、再石灰化した歯科病変における前記フッ化物レベルが、４．６倍を超えて上昇する、請求項２に記載の使用。
4. 前記フッ化物レベルの上昇が、電子線マイクロプローブ波長分散型分光法によって決定される、請求項３に記載の使用。
5. 歯垢中フッ化物レベルを上昇させるための製剤の製造における、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）と、遊離フッ化物イオンの使用であって、該製剤が、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）、および遊離フッ化物イオンを含み、カルシウムキレート剤もホスフェート緩衝剤も含まない、使用。
6. 前記歯垢が歯肉縁上歯垢である、請求項５に記載の使用。
7. 前記歯垢中フッ化物レベルが、乾燥重量１ｍｇあたり１４．４ｎｍｏｌより高い、請求項５または６に記載の使用。
8. 前記歯垢中フッ化物レベルが、ホスホペプチド−安定化非結晶リン酸カルシウム（ＡＣＰ）またはホスホペプチド−安定化非結晶フッ化リン酸カルシウム（ＡＣＦＰ）と、遊離フッ化物イオンを含まない製剤で処置された歯垢と比較して、１．９５倍を超えて上昇する、請求項５または６に記載の使用。