JP6417032B2 - オリゴヌクレオチドフラグメント、ならびにこれを用いる標的核酸配列の変異体の選択的増幅の方法および用途 - Google Patents
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Description
本発明は、分子生物学の分野に属し、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法に、特にオリゴヌクレオチドフラグメント、およびこれを用いた、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法に関する。本発明はさらに、核酸変異体を検出するキットの用途に関し、これは、例えば核酸増幅、腫瘍インビトロ診断、および遺伝子タイピング等の分野において広く適用される。
(1)増幅用の鋳型を調製するために、反応系において、オリゴヌクレオチドフラグメント中のプライマー領域を、標的核酸配列とハイブリダイズさせるステップと;
(2)増幅系において、核酸ポリメラーゼによってプライマー領域の3'末端を伸長させるステップと;を含み、
(3)検出されるべきサンプル中の変異体が鋳型として用いられる場合、オリゴヌクレオチドフラグメントの変異体認識領域およびプライマー領域が、安定したヘアピン構造を形成することができない配列が生じるように伸長することで、増幅反応が進み、
検出されるべきサンプル中の検出されるべきでない核酸変異体が鋳型として用いられる場合、オリゴヌクレオチドフラグメントの変異体認識領域およびプライマー領域が、ヘアピン構造を形成する配列が生じるように伸長することで、増幅反応が阻害される、
方法を提供する。
本実施例において、標的核酸配列の2つの変異体を、それぞれ104コピーおよび105コピーの量で加えた。ここで、一方の変異体は、EGFR G719S突然変異型配列(配列番号1)を挿入したプラスミドDNAであり、他方の変異体は、EGFR野生型配列(配列番号2)を挿入した同じプラスミドであった。
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGaGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
本実施例において、標的核酸配列の2つの変異体を、それぞれ104コピーおよび105コピーの量で加えた。ここで、一方の変異体は、EGFR T790M突然変異型配列(配列番号5)を挿入したプラスミドDNAであり、他方の変異体は、EGFR野生型配列(配列番号6)を挿入した同じプラスミドであった。
CTGGCCACCATGCGAAGCCACACTGACGTGCCTCTCCCTCCCTCCAGGAAGCCTACGTGATGGCCAGCGTGGACAACCCCCACGTGTGCCGCCTGCTGGGCATCTGCCTCACCTCCACCGTGCAGCTCATCATGCAGCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCTGGACTATGTCCGGGAACACAAAGACAATATTGGCTCCCAGTACCTGCTCAACTGGTGTGTGCAGATCGCAAAGGTAATCAGGGAAGGGAGATACGGGGAGGGGAGATAAGGAGCCAGGATCCT
CTGGCCACCATGCGAAGCCACACTGACGTGCCTCTCCCTCCCTCCAGGAAGCCTACGTGATGGCCAGCGTGGACAACCCCCACGTGTGCCGCCTGCTGGGCATCTGCCTCACCTCCACCGTGCAGCTCATCACGCAGCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCTGGACTATGTCCGGGAACACAAAGACAATATTGGCTCCCAGTACCTGCTCAACTGGTGTGTGCAGATCGCAAAGGTAATCAGGGAAGGGAGATACGGGGAGGGGAGATAAGGAGCCAGGATCCT
本実施例において、標的核酸配列の2つの変異体を、それぞれ104コピーおよび105コピーの量で加えた。ここで、一方の変異体は、EGFR G719S突然変異型配列(配列番号1)を挿入したプラスミドDNAであり、他方の変異体は、EGFR野生型配列(配列番号2)を挿入した同じプラスミドであった。
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGaGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
本実施例において、標的核酸配列の2つの変異体を、それぞれ100コピーおよび104コピーの量で加えた。ここで、一方の変異体は、EGFR G719S突然変異型配列(配列番号1)を挿入したプラスミドDNAであり、他方の変異体は、EGFR野生型配列(配列番号2)を挿入した同じプラスミドであった。
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGaGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
本実施例において、標的核酸配列の2つの変異体を、同じ量にした。ここで、一方の変異体は、EGFR G719S突然変異型配列(配列番号1)を挿入したプラスミドDNAであり、他方の変異体は、EGFR野生型配列(配列番号2)を挿入した同じプラスミドであった。
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGaGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
TTTCCAGCATGGTGAGGGCTGAGGTGACCCTTGTCTCTGTGTTCTTGTCCCCCCCAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGTAAGGTCCCTGGCACAGGCCTCTGGGCTGGGCCGCAGGGCCTCTCATGGTCTGGTGGGGAGCCCAGAGTCCTTGCAAGCTGTATATTTCCATCATCTACTTTACTCTTTGTTTCACTGAGT
本実施例において、標的核酸配列の2つの変異体を、同じ量にした。ここで、一方の変異体は、エキソン19欠失を有するEGFR突然変異型配列(配列番号12)を挿入したプラスミドDNAであり、他方の変異体は、エキソン19を有するEGFR野生型配列(配列番号13)を挿入した同じプラスミドであった。
TTCGGGGTGCATCGCTGGTAACATCCACCCAGATCACTGGGCAGCATGTGGCACCATCTCACAATTGCCAGTTAACGTCTTCCTTCTCTCTCTGTCATAGGGACTCTGGATCCCAGAAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAGACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCGATGTGAGTTTCTGCTTTGCTGTGTGGGGGTCCATGGCTCTGAACCTCAGGCCCACCTTTTCTCATGTCTGGCAGCTGCTCTGCTCTAGACCCTGCTCATCTCCACATCCTAAATGTTCACTTTC
TTCGGGGTGCATCGCTGGTAACATCCACCCAGATCACTGGGCAGCATGTGGCACCATCTCACAATTGCCAGTTAACGTCTTCCTTCTCTCTCTGTCATAGGGACTCTGGATCCCAGAAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCGATGTGAGTTTCTGCTTTGCTGTGTGGGGGTCCATGGCTCTGAACCTCAGGCCCACCTTTTCTCATGTCTGGCAGCTGCTCTGCTCTAGACCCTGCTCATCTCCACATCCTAAATGTTCACTTTC
Claims (7)
- オリゴヌクレオチドフラグメントを用いた、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法であって、ここで、該オリゴヌクレオチドフラグメントは、3'末端にプライマー領域および5'末端に変異体認識領域を含み、これらの領域が共有結合的に連結するオリゴヌクレオチドフラグメントにおいて、変異体認識領域が、核酸二本鎖安定化因子と共有結合的に連結し、またはヌクレアーゼによって加水分解され得ない修飾因子を含み、変異体認識領域が、プライマー領域の伸長から生じる配列とヘアピン構造を形成し、前記方法は、
(1)増幅用の鋳型を調製するために、反応系において、オリゴヌクレオチドフラグメント中のプライマー領域を、標的核酸配列とハイブリダイズさせるステップと;
(2)増幅系において、核酸ポリメラーゼによってプライマー領域の3'末端を伸長させるステップと;を含み、
(3)検出されるべきサンプル中の変異体が鋳型として用いられる場合、オリゴヌクレオチドフラグメントの変異体認識領域およびプライマー領域が、安定したヘアピン構造を形成することができない配列が生じるように伸長することで、増幅反応が進み、
検出されるべきサンプル中の検出されるべきでない核酸変異体が鋳型として用いられる場合、オリゴヌクレオチドフラグメントの変異体認識領域およびプライマー領域が、ヘアピン構造を形成する配列が生じるように伸長することで、増幅反応が阻害される、方法。 - 修飾因子が、塩基類似体、核酸骨格、デオキシリボース類似体、ペプチド核酸、またはチオホスフェートを含むことを特徴とする、請求項1に記載の、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法。
- 核酸二本鎖安定化因子が、ロックド核酸、ペプチド核酸、またはDNA副溝バインダーの1つまたは1つ超の組合せを含むことを特徴とする、請求項1に記載の、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法。
- 核酸二本鎖安定化因子が、変異体認識領域に直接的に連結する、または共有結合的に連結することを特徴とする、請求項1に記載の、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法。
- 色素方法、ハイブリダイゼーションプローブ検出方法、加水分解プローブ検出方法、Taqman(商標)プローブ方法、または分子ビーコン方法を含む、異なる核酸変異体を識別しない検出方法が併用されることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法。
- 配列決定方法または高解像度融解曲線方法を含む、異なる核酸変異体を識別する方法が併用され;代替として、異なる核酸変異体を識別するハイブリダイゼーションプローブ、異なる核酸変異体を識別する加水分解プローブ、異なる核酸変異体を識別するTaqman(商標)プローブ、または異なる核酸変異体を識別する分子ビーコンの方法が併用されることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法。
- 増幅系が、温度の上昇によって反応を開始する系であることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の、標的核酸配列の変異体の選択的増幅方法。
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Family Cites Families (48)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4469863A (en) | 1980-11-12 | 1984-09-04 | Ts O Paul O P | Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof |
US5235033A (en) | 1985-03-15 | 1993-08-10 | Anti-Gene Development Group | Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
DE3529478A1 (de) | 1985-08-16 | 1987-02-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | 7-desaza-2'desoxyguanosin-nukleotide, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung zur nukleinsaeure-sequenzierung |
CA1308516C (en) | 1987-07-06 | 1992-10-06 | J. William Lown | Oligopeptide anticancer and antiviral agents |
US5216141A (en) | 1988-06-06 | 1993-06-01 | Benner Steven A | Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages |
US5639611A (en) | 1988-12-12 | 1997-06-17 | City Of Hope | Allele specific polymerase chain reaction |
US5137806A (en) | 1989-12-11 | 1992-08-11 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the detection of sequences in selected DNA molecules |
EP0515506B1 (en) | 1990-02-16 | 2000-01-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Improvements in the specificity and convenience of the polymerase chain reaction |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5386023A (en) | 1990-07-27 | 1995-01-31 | Isis Pharmaceuticals | Backbone modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through reductive coupling |
US5210015A (en) | 1990-08-06 | 1993-05-11 | Hoffman-La Roche Inc. | Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase |
JPH04234422A (ja) | 1990-10-31 | 1992-08-24 | Internatl Business Mach Corp <Ibm> | 二重硬化エポキシバックシール処方物 |
US5840867A (en) | 1991-02-21 | 1998-11-24 | Gilead Sciences, Inc. | Aptamer analogs specific for biomolecules |
US5644048A (en) | 1992-01-10 | 1997-07-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for preparing phosphorothioate oligonucleotides |
US5273991A (en) | 1992-07-29 | 1993-12-28 | Research Corporation Technologies, Inc. | Imidazole-containing compositions and methods of use thereof analogs of distamycin |
US5338671A (en) | 1992-10-07 | 1994-08-16 | Eastman Kodak Company | DNA amplification with thermostable DNA polymerase and polymerase inhibiting antibody |
US5538848A (en) | 1994-11-16 | 1996-07-23 | Applied Biosystems Division, Perkin-Elmer Corp. | Method for detecting nucleic acid amplification using self-quenching fluorescence probe |
US5637684A (en) | 1994-02-23 | 1997-06-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Phosphoramidate and phosphorothioamidate oligomeric compounds |
US5698674A (en) | 1994-04-13 | 1997-12-16 | The Regents Of The University Of California | Triheterocyclic peptides capable of binding the minor and major grooves of DNA |
GB9416005D0 (en) | 1994-08-08 | 1994-09-28 | Erba Carlo Spa | Peptidic compounds analogous to distamycin a and process for their preparation |
US5637621A (en) | 1994-11-14 | 1997-06-10 | Nzym, Inc. | Methods and compositions for treating Botrytis infections |
US5877280A (en) | 1995-06-06 | 1999-03-02 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Thermostable muts proteins |
US5773258A (en) | 1995-08-25 | 1998-06-30 | Roche Molecular Systems, Inc. | Nucleic acid amplification using a reversibly inactivated thermostable enzyme |
CA2244139C (en) | 1996-02-02 | 2005-06-07 | Pharmacia & Upjohn S.P.A. | Distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor and antiviral agents |
GB9623522D0 (en) | 1996-11-11 | 1997-01-08 | Pharmacia & Upjohn Spa | Benzoheterocycle distamycin derivatives process for preparing them and their use as antitumour and antiviral agents |
AU5794498A (en) * | 1996-12-10 | 1998-07-03 | Genetrace Systems, Inc. | Releasable nonvolatile mass-label molecules |
GB9812768D0 (en) | 1998-06-13 | 1998-08-12 | Zeneca Ltd | Methods |
JP2003529609A (ja) | 2000-03-16 | 2003-10-07 | ジーンソフト インコーポレイティッド | 核酸結合部分を含む荷電した化合物およびその利用法 |
EP1364046B1 (en) * | 2000-05-23 | 2011-11-30 | Variagenics, Inc. | Methods for genetic analysis of dna to detect sequence variances |
US7435541B2 (en) | 2000-05-23 | 2008-10-14 | Sequenom, Inc. | Restriction enzyme genotyping |
JP2004501915A (ja) | 2000-06-27 | 2004-01-22 | ジェネラブス・テクノロジーズ・インコーポレーテッド | 抗菌、抗真菌または抗腫瘍活性を有する新規な化合物 |
JP2005102502A (ja) * | 2001-11-21 | 2005-04-21 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | 一本鎖目的核酸断片の増幅方法 |
AU2002222737A1 (en) * | 2001-12-08 | 2003-06-23 | Seegene, Inc | Annealing control primer system for regulating primer annealing specificity and its applications |
GB0130868D0 (en) | 2001-12-24 | 2002-02-06 | Univ Strathclyde | New compounds |
AUPS076802A0 (en) * | 2002-02-26 | 2002-03-21 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Selective nucleic acid amplification |
US8394944B2 (en) * | 2002-09-20 | 2013-03-12 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Dual-purpose primers and probes for providing enhanced hybridization assays by disruption of secondary structure formation |
CN1580277A (zh) * | 2003-08-06 | 2005-02-16 | 博微生物科技股份有限公司 | 携带于dna分子内的秘密信息的隐藏方法及其解密方法 |
US7408051B2 (en) | 2004-04-14 | 2008-08-05 | Applera Corporation | Modified oligonucleotides and applications thereof |
ES2546848T3 (es) * | 2006-03-10 | 2015-09-29 | Epigenomics Ag | Un método para identificar una muestra biológica para el análisis de la metilación |
US7803543B2 (en) * | 2007-01-19 | 2010-09-28 | Chang Gung University | Methods and kits for the detection of nucleotide mutations using peptide nucleic acid as both PCR clamp and sensor probe |
US8399189B2 (en) * | 2007-03-08 | 2013-03-19 | University Of Utah Research Foundation | Primers for melting analysis |
CN102186996A (zh) * | 2008-10-20 | 2011-09-14 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 改进的等位基因特异性扩增 |
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