JP6358422B2 - イワベンケイ属植物エキスの製造方法 - Google Patents

Description

本発明は、イワベンケイ属植物エキスの製造方法に関する。

イワベンケイ属（Ｒｈｏｄｉｏｌａ）植物は、ベンケイソウ科（Ｃｒａｓｓｕｌａｃｅａｅ）に属する植物で、蔵薬（チベット生薬）の一つである紅景天として古くから利用されている。イワベンケイ属植物は、リラックス効果や抗鬱効果（非特許文献１）等の様々な機能性を有することが報告されている。そこで、イワベンケイ属植物がもたらす生理活性に注目して、種々の検討が行われている。

例えば、紅景天属植物の粉末及び／又は抽出物を有効成分とする化粧料（特許文献１）、紅景天属植物の粉末、抽出物、またはこれらの混合物を有効成分とする抗糖尿病剤（特許文献２）、ベンケイソウ科紅景天属植物から抽出された抽出物質を含んでなるエストロゲン様組成物（特許文献３）が開示されている。
また、バラ科キイチゴ属（Rubus）植物、フトモモ科植物のユーカリ（Eucalyptus globulus）及びグアバ（Psidium guajava）、ヤマモモ科植物のヤマモモ（Myrica rubra）、マンサク科植物のハマメリス（Hamamelis virginiana）並びにベンケイソウ科植物の紅景天（Rhodiola sacra）からなる群より選択される１種または２種以上の抽出物を有効成分とすることを特徴とするアリルメチルモノスルフィド用消臭剤（特許文献４）が開示され、ベンケイソウ科イワベンケイ属植物より抽出された抽出物を有効成分として含有することを特徴とする消臭剤（特許文献５）が開示されている。特許文献４には、モノスルフィド化合物とアリルメルカプタンやメチルメルカプタン等のチオール化合物とは、消臭メカニズムが大きく相違することが記載され、特許文献５には、アンモニア及びトリメチルアミンに対して消臭効果があることが記載されているが、イワベンケイ属植物の抽出物のメチルメルカプタンに対する消臭効果は、いずれにも記載されていない。

また、イワベンケイ属植物は、強い収斂作用を有しており、イワベンケイ属植物から得られる抽出物の利用においては、その強い渋味や皮膚刺激性等の点で問題がある。
さらに、イワベンケイ属植物に含まれる機能性成分としては、チロソールやその配糖体であるサリドロサイド等が知られている。特に、チロソールは、オリーブオイル等にも含まれ、強い抗酸化活性を有すること（非特許文献２）が報告されている。

特開２０００−１２８７２９号公報 特開２０００−１２８７９３号公報 特開２００８−１２７３７４号公報 特開２００３−３３５６４７号公報 特開２００２−２０３０１号公報

チェン（Ｃｈｅｎ）、外７名、フィトメディスン（Ｐｈｉｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ）、２００９年９月、第１６巻、第９号、ｐ．８３０−８３８ ジョバンニーニ（Ｇｉｏｖａｎｎｉｎｉ)、外７名、ザ・ジャーナル・オブ・ニュートリション（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）、１９９９年、第１２９巻、第７号、ｐ．１２６９−１２７７

本発明の課題は、イワベンケイ属植物を原料として、収斂作用を顕著に低減させ、消臭作用を顕著に向上させたイワベンケイ属植物エキスの製造方法を提供することである。さらに、本発明の課題は、収斂作用を顕著に低減させ、消臭作用を顕著に向上させ、かつ機能性成分であるチロソールの含有量を効率的に増大させたイワベンケイ属植物エキスの製造方法を提供することである。

本発明者らは、鋭意研究を行った結果、イワベンケイ属植物を原料として、該原料をタンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより、上記課題を解決することができることを見出し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、イワベンケイ属植物を原料として、該原料をタンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、収斂作用を顕著に低減させ、消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用を顕著に向上させたイワベンケイ属植物エキスの製造方法を提供するものである。そして、本発明は、さらに、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、収斂作用を顕著に低減させ、消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用を顕著に向上させ、かつ機能性成分であるチロソールを高度に含有する、イワベンケイ属植物エキスの製造方法を提供するものである。

本発明には、下記の態様が含まれる。
項（１）
イワベンケイ属植物を原料として、該原料をタンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、収斂作用を顕著に低減させ、消臭作用を顕著に向上させることを特徴とするイワベンケイ属植物エキスの製造方法。
項（２）
消臭作用がメチルメルカプタンに対する消臭作用である、項（１）に記載の製造方法。
項（３）
前記原料が、粉砕物又は抽出物である、項（１）又は項（２）に記載の製造方法。
項（４）
さらに、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより、チロソールを高度に含有することを特徴とする、項（１）乃至項（３）に記載の製造方法。
項（５）
β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理が、タンナーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理と並行して又はタンナーゼ活性を有する酵素処理後に行われる、項（４）に記載の製造方法。
項（６）
チロソールが遊離のものである、項（４）又は（５）に記載の製造方法。
項（７）
項（１）乃至項（６）のいずれか１項に記載の製造方法により得られるイワベンケイ属植物エキス。

本発明によれば、イワベンケイ属植物のもつ強い収斂作用を低減させ、消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用を顕著に向上させたイワベンケイ属植物エキスを提供することができる。さらに、本発明によれば、イワベンケイ属植物のもつ強い収斂作用を低減させ、消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用を顕著に向上させ、かつ、機能性成分であるチロソールの含有量を効率的に増大させたイワベンケイ属植物エキスを提供することができる。
本発明によるイワベンケイ属植物エキスを用いることにより、チロソールの機能性を利用した飲食品、医薬部外品又は飼料を提供することができる。また、収斂作用が低減されているため、タンパク質を含有する飲食品等に添加しても、凝集等の不具合無く使用することができ、さらに、従来のイワベンケイ属植物による消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用が顕著に向上されていることから、消臭効果も併せ持つ素材として活用することができる。

本発明において、原料のイワベンケイ属植物は、ベンケイソウ科イワベンケイ属に属する植物であればいずれを用いてもよい。例えば、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｒｏｓｅａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓａｃｒａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｆａｓｔｉｇｉａｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｑｕａｄｒｉｆｉｄａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｔａｎｇｕｔｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｌｇｉｄａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｌｓｉａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｄｕｍｕｌｏｓａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｇｅｌｉｄａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｈｅｎｒｙｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｈｅｔｅｒｏｄｏｎｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｋｉｒｉｌｏｗｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｗａｌｌｉｃｈｉａｎａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｌｔｅｒｎａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｎｇｕｓｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｐｏｒｏｎｔｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｔｒｏｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｔｓａｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ａｔｕｎｔｓｕｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｂｒｅｖｉｐｅｔｉｏｌａｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｂｕｐｌｅｕｒｏｉｄｅｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃａｌｌｉａｎｔｈａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉｆｏｌｉａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｏｃｃｉｎｅａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｏｎｃｉｎｎａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｔｉｎｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｄｉｅｌｓｉａｎａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｄｉｓｃｏｌｏｒ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｅｕｒｙｃａｒｐａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｆｏｒｒｅｓｔｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｇａｎｎａｎｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｈａｎｄｅｌｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｈｉｍａｌｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｈｏｂｓｏｎｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｈｕｍｉｌｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｊｕｎｇｇａｒｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｋａｎｓｕｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｋａｓｃｈｇａｒｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｌｉｃｉａｅ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｌｉｋｉａｎｇｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｌｉｔｗｉｎｏｗｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｍａｃｒｏｃａｒｐａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｍａｃｒｏｌｅｐｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｍｅｇａｌｏｐｈｙｌｌａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｎｏｂｉｌｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｏｖａｔｉｓｅｐａｌａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐａｍｉｒｏａｌａｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐａｐｉｌｌｏｃａｒｐａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐｅｔｉｏｌａｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐｒａｉｎｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐｒｉｍｕｌｏｉｄｅｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｐｕｒｐｕｒｅｏｖｉｒｉｄｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｒｅｃｔｉｃａｕｌｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｒｏｂｕｓｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｅｍｅｎｏｖｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｅｒｒａｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｅｘｉｆｏｌｉａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｈｅｒｒｉｆｆｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｉｎｕａｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｍｉｔｈｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｔａｍｉｎｅａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｔａｐｆｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｔｅｐｈａｎｉｉ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓｕｂｏｐｐｏｓｉｔａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｔｅｌｅｐｈｉｏｉｄｅｓ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｔｉｂｅｔｉｃａ、Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｔｉｅｇｈｅｍｉｉ等が挙げられる。本発明において用いる原料のイワベンケイ属植物は、１種を単独で用いてもよく、また複数種を併用してもよい。また、原料のイワベンケイ属植物は、乾燥物でも非乾燥物でも用いることができるが、原料の取り扱いや保存性を考慮したときには、乾燥物を用いることが好ましい。さらに、本発明において使用するイワベンケイ属植物の部位は、特に限定されず、全草であっても、又は、葉、茎、花弁、根茎若しくは種子等であってもよいが、中でも、根茎が入手しやすいという点で好ましい。全草又はいずれの部位でも単独で、又は、併用して用いることができる。

本発明において、原料のイワベンケイ属植物は、粉砕物又は抽出物として用いる。

イワベンケイ属植物の粉砕物は、原料のイワベンケイ属植物を単独で、又は水等の溶媒を加えて粉砕処理した粉砕物であればよい。原料のイワベンケイ属植物を粉砕処理する方法は、特に限定されず、食材の加工に一般に用いられる方法を単独又は組み合わせて処理することができる。粉砕処理に用いる機器としては、例えば、切断、粉砕、摩擦、空気圧、水圧等を利用して加工する各種の裁断機、粉砕機等が挙げられる。イワベンケイ属植物の粉砕物は、粉砕後そのまま又は固液分離して得られた液部を用いることができる。

イワベンケイ属植物の抽出物は、原料のイワベンケイ属植物を水、アルコール又は水−アルコール混合溶液等で抽出した抽出物であればよい。原料のイワベンケイ属植物を抽出する方法は、特に限定されず、公知の手段を単独又は組み合わせて抽出することができる。抽出方法としては、例えば、常温抽出、加熱抽出、加圧抽出、撹拌抽出、超音波抽出等が挙げられる。原料のイワベンケイ属植物は、そのままの形状で抽出してもよく、細切処理又は粉砕処理したものを用いてもよい。イワベンケイ属植物の抽出物は、抽出後そのまま又は固液分離して得られた液部を用いることができる。中でも、抽出後固液分離して得られた液部が好ましい。また、イワベンケイ属植物の抽出物は、その濃縮物を用いることができる。さらに、イワベンケイ属植物の抽出物は、適宜ｐＨ調整剤等の添加物を配合することができる。

本発明においては、イワベンケイ属植物を原料として、該原料をタンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理を行う。本発明において用いるタンナーゼ活性を有する酵素は、食品に用いることができるタンナーゼ活性を有する酵素であればいずれでもよく、該酵素を含むものであってもよい。また、該酵素は、酵素製剤の形でも用いることができる。タンナーゼ活性を有する酵素としては、例えば、タンナーゼ製剤であるタンナーゼ（三菱化学フーズ株式会社製）、タンナーゼＴＡＨ（キッコーマン株式会社製）等が挙げられる。

本発明において、タンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する温度は、通常１０〜６０℃、好ましくは２０〜５５℃、より好ましくは３０〜５０℃である。また、本発明において、タンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する時間は、通常１０分間〜４８時間、好ましくは３０分間〜３６時間、より好ましくは１〜２４時間である。また、本発明において、タンナーゼ活性を有する酵素の添加量は、処理温度及び処理時間により適宜変更することができるが、例えば、酵素製剤として、通常０．０１〜５重量％、好ましくは０．０２〜３重量％、より好ましくは０．０５〜２重量％である。

本発明においては、タンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する前に、原料のイワベンケイ属植物のｐＨを、タンナーゼ活性を有する酵素の至適ｐＨ付近に調整することが好ましい。調整するｐＨは、通常ｐＨ３〜９であり、好ましくはｐＨ４〜８である。なお、前記ｐＨ調整を行った場合、該酵素処理後に中和処理を行ってもよい。ｐＨの調整及び中和処理は、ｐＨ調整剤として一般に食品に利用されているものを用いることができる。ｐＨ調整剤は、食品添加物として指定されたものであれば特に限定されない。ｐＨ調整剤としては、酸、アルカリ、及びそれらの塩等が用いられるが、例えば、塩酸、クエン酸、酢酸、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が挙げられる。

本発明において、得られるイワベンケイ属植物エキスは、イワベンケイ属植物のもつ強い収斂作用を顕著に低下させたものであり、さらに、消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用が顕著に向上されたものである。このことから、該イワベンケイ属植物エキスを喫食したとき、渋味をほとんど感じることがない。さらに、タンパク質を含有する飲食品等に添加した場合に、タンパク質の凝集から生じる沈殿や懸濁等がほとんど発生しない。また、皮膚等に塗布しても皮膚タンパクに対する刺激性が穏やかであるため、安全に使用することができる。そして、安定かつ安全に消臭、特にメチルメルカプタンの消臭に利用することができる。

本発明においては、原料のイワベンケイ属植物を、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理を行ってもよい。本発明において、タンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理すること及びβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理を行うことで、イワベンケイ属植物のもつ強い収斂作用を低減させ、かつ、機能性成分であるチロソールの含有量を効率的に増大させたイワベンケイ属植物エキスを製造することができる。β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理を行う場合は、タンナーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理と並行して又はタンナーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理後に行うことができる。本発明において用いるβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素は、食品に用いることができるβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素であればいずれでもよく、該酵素を含むものであってもよい。また、該酵素は、酵素製剤の形でも用いることができる。β−グルコシダーゼ活性を有する酵素としては、例えば、β−グルコシダーゼ製剤であるスミチーム（登録商標）ＢＧＡ（新日本化学工業株式会社製）、アロマーゼ（登録商標）（天野エンザイム株式会社製）、ラピターゼ（登録商標）ＡＲ２０００（ディー・エス・エムジャパン株式会社製）等が挙げられる。

本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する温度は、通常３０〜７０℃、好ましくは４０〜６５℃、より好ましくは５０〜６０℃である。また、本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する時間は、通常１〜２４時間、好ましくは２〜２０時間である。また、本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素の添加量は、処理温度及び処理時間により適宜変更することができるが、例えば、酵素製剤として、通常０．０１〜５重量％、好ましくは０．０５〜３重量％、より好ましくは０．１〜２重量％である。

本発明においては、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する前に、原料のイワベンケイ属植物のｐＨを、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素の至適ｐＨ付近に調整することが好ましい。調整するｐＨは、通常ｐＨ２〜７であり、好ましくはｐＨ３〜５である。なお、前記ｐＨ調整を行った場合、該酵素処理した後に中和処理を行ってもよい。ｐＨの調整及び中和処理は、ｐＨ調整剤として一般に食品に利用されているものを用いることができる。ｐＨ調整剤は、食品添加物として指定されたものであれば特に限定されない。ｐＨ調整剤としては、酸、アルカリ、及びそれらの塩等が用いられるが、例えば、塩酸、クエン酸、酢酸、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が挙げられる。

本発明において、得られるイワベンケイ属植物エキスが含有する機能性成分であるチロソールの含有量については、少なくとも含有していればよいが、好ましくは固形物あたり０．１％以上であり、より好ましくは固形物あたり０．３％以上である。
なお、本発明においてイワベンケイ属植物エキスが含有するチロソールとは、アグリコンの状態で存在する、いわゆる遊離の状態のものをいう。

本発明においては、上記各酵素処理を行った後に、酵素失活処理を行ってもよい。酵素失活処理は、最終的に得られるイワベンケイ属植物エキスにおいて酵素活性が残存しないように行えばよく、また、酵素失活処理の条件は、前記酵素処理において用いた酵素が失活する条件であれば特に限定されない。酵素失活処理の条件としては、該酵素処理において用いる酵素の種類により異なるが、例えば、タンナーゼ活性を有する酵素の場合、通常、６０℃以上で加熱することで達成され、好ましくは６０〜１００℃程度で１〜１２０分間程度加熱処理すればよい。

本発明により得られるイワベンケイ属植物エキスは、風味が良好で嗜好性に優れていることから、そのままの形態でも利用することができるが、さらに、該イワベンケイ属植物エキスを固液分離した液部として用いることができる。固液分離する方法は、特に限定されず、濾過、遠心分離等の公知の方法により行うことができる。また、本発明により得られるイワベンケイ属植物エキスは、そのまま又は固液分離した液部を常法により濃縮機等で処理して濃縮物として用いてもよく、また、乾燥して用いてもよい。乾燥方法は、特に限定されず、公知の手段を用いて乾燥することができる。乾燥方法としては、例えば、スプレードライヤー、ドラムドライヤー、フリーズドライヤー、エアードライヤー等の公知の手段を用いることができる。また、デキストリン等の賦形剤を添加して乾燥してもよい。さらに、乾燥により得られたものを粉砕後、粉末等として用いてもよく、必要に応じて造粒機等を用いて顆粒品とすることができる。

本発明により得られるイワベンケイ属植物エキスは、そのまま又は水等で希釈して利用することができる。さらに、本発明により得られるイワベンケイ属植物エキスは、種々の加工食品、例えば、即席食品、乳製品、菓子類、調味料、茶飲料、野菜飲料、大豆飲料、豆乳飲料等の各種飲食品に適宜添加、配合して用いることもできる。また、必要に応じて、通常の飲食品の原料や添加物として使用されているものと併用することもできる。

本発明により得られるイワベンケイ属植物エキスは、特定保健用食品、機能性食品、栄養補助食品といった食品や、医薬部外品又は飼料等に用いることができる。形態としては、アンプル、カプセル、丸剤、錠剤、粉末、顆粒、固形、液剤、ゲル、エアロゾル等とすることができるほか、各種製品中に配合することができる。これら製品の調製に当たっては、賦形剤、結合剤、潤沢剤等を適宜配合することができる。

以下、実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の例によって限定されるものではない。なお、本実施例において、各原料及び素材の配合比率、含有比率、濃度は断りのない限り全て重量部基準である。

［調製１］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｒｏｓｅａの根茎乾燥粉末１０ｇに、６０％エタノール水溶液９９０ｇを加えて、４０℃で２時間抽出処理した後、ＰＴＦＥメンブレンフィルター（０．５μｍ）を用いて固液分離を行った。固液分離によって得られた液部をエバポレーターを用いて減圧濃縮することで、イワベンケイ属植物抽出物１５０ｇ（ｐＨ４．５、固形分：０．９％）（調製１）を得た。

［実施例１］
調製１で得られたイワベンケイ属植物抽出物５０ｇを、２０％水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨ６．０に調整した後、タンナーゼ製剤であるタンナーゼ（三菱化学フーズ株式会社製）を０．１ｇ添加して、４０℃で２時間酵素処理を行い、さらに９０℃で１０分間酵素失活処理することで、本発明によるイワベンケイ属植物エキス４５ｇ（固形分：１．０％）（実施例１）を得た。

［評価試験１］
実施例１で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス及び調製１で得られたイワベンケイ属植物抽出物を検体として、収斂作用の評価及びチロソール含量の測定を実施した。収斂作用の評価は、０．１％ゼラチン（和光純薬工業株式会社製）水溶液９９ｇに、各エキス１ｇをそれぞれ添加混合して３０℃で１時間静置した後、吸光度（ＯＤ６６０）を、分光光度計（ＵＶ−１２００：株式会社島津製作所製）を用いて、光路長１ｃｍ、波長６６０ｎｍの条件で測定し、その濁りを判定することで行った。また、各検体について、そのチロソール含量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、下記の条件で測定した。結果を表１に示す。

＜ＨＰＬＣの測定条件＞
検出器：ＵＶ検出器（紫外波長２２５ｎｍ）
カラム：ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ Ｃ１８（内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍ）
移動相：７容量％アセトニトリル水溶液（０．０３容量％ギ酸含有）
流速：１．０ｍｌ／分
カラム温度：４０℃
標品：チロソール（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ社製）を７０％エタノール水溶液に溶解して標品を調製し、検量線を作成した。
検体：各試料を７０％エタノール水溶液で、適宜希釈したもの。

表１に示すとおり、タンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理した実施例１で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスを検体とした場合では、収斂作用によって起こるタンパク質の凝集が少なく、濁りの指標となるＯＤ６６０の値が０．１未満であり、可視的濁りが認められなかった。一方、酵素処理していない調製１で得られたイワベンケイ属植物抽出物を検体とした場合では、濁りの指標となるＯＤ６６０の値が０．１以上であり、可視的濁りが認められた。よって、実施例１で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、酵素処理していない調製１で得られたイワベンケイ属植物抽出物と比較して、顕著に収斂作用が抑制されていることが分かった。また、実施例１で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス、調製１で得られたイワベンケイ属植物抽出物の固形物あたりのチロソール含量が同等であった。即ち、実施例１で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、収斂作用が低いことにより、酵素処理していない調製１で得られたイワベンケイ属植物抽出物と比較して、効果的にチロソールを摂取できることが明らかとなった。

［調製２］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａの根茎乾燥粉末８００ｇに、７０％エタノール水溶液３２００ｇを加えて、５０℃で１時間抽出処理した後、ポリプロピレンメンブレンフィルター（３０μｍ）を用いて固液分離を行った。固液分離によって得られた液部をエバポレーターを用いて減圧濃縮することで、イワベンケイ属植物抽出物１４００ｇ（ｐＨ４．７、固形分：１０．２％）（調製２）を得た。

［実施例２］
調製２で得られたイワベンケイ属植物抽出物２００ｇを、２０％水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨ６．０に調整した後、タンナーゼ製剤であるタンナーゼ（三菱化学フーズ株式会社製）を２ｇ添加して、４０℃で１９時間酵素処理を行った。次いで、β−グルコシダーゼ製剤であるスミチームＢＧＡ（新日本化学工業株式会社製）を２ｇ添加して、６５℃で６時間酵素処理を行った後、９０℃で１０分間酵素失活処理することで、本発明によるイワベンケイ属植物エキス１８０ｇ（固形分：１１．４％）（実施例２）を得た。

［比較例１］
調製２で得られたイワベンケイ属植物抽出物２００ｇに、β−グルコシダーゼ製剤であるスミチームＢＧＡ（新日本化学工業株式会社製）を２ｇ添加して、６５℃で６時間酵素処理を行った後、９０℃で１０分間酵素失活処理することで、β−グルコシダーゼ処理イワベンケイ属植物エキス１８０ｇ（固形分：１０．５％）（比較例１）を得た。

［評価試験２］
実施例２で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス、比較例１で得られたβ−グルコシダーゼ処理イワベンケイ属植物エキス及び調製２で得られたイワベンケイ属植物抽出物を検体として、収斂作用の評価及びチロソール含量の測定を実施した。収斂作用の評価は、０．２％カゼイン（和光純薬工業株式会社製）水溶液９８ｇに、各エキス２ｇをそれぞれ添加混合して３０℃で１時間静置した後、吸光度（ＯＤ６６０）を、分光光度計（ＵＶ−１２００：株式会社島津製作所製）を用いて、光路長１ｃｍ、波長６６０ｎｍの条件で測定することで行った。また、各検体について、評価試験１と同様にして、チロソール含量を測定した。結果を表２に示す。

表２に示すとおり、タンナーゼ活性を有する酵素及びβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理した実施例２で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスを検体とした場合では、収斂作用によって起こるタンパク質の凝集が少なく、濁りの指標となるＯＤ６６０の値が０．１未満であり、可視的濁りが認められなかった。一方、タンナーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理を行わずβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理のみを行った比較例１で得られたβ−グルコシダーゼ処理イワベンケイ属植物エキス及び酵素処理していない調製２で得られたイワベンケイ属植物抽出物を検体とした場合では、濁りの指標となるＯＤ６６０の値が０．１以上であり、可視的濁りが認められた。また、実施例２で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、タンナーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理を行わずβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理のみを行った比較例１で得られたβ−グルコシダーゼ処理イワベンケイ属植物エキス及び酵素処理していない調製２で得られたイワベンケイ属植物抽出物と比較して、固形物あたりのチロソール含量が３．５倍以上であったことから、実施例２で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、収斂作用が低く、またチロソール含量が顕著に高いため、効果的にチロソールを摂取できることが明らかとなった。

［実施例３］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａの根茎乾燥粉末５０ｇに、１５％エタノール水溶液４５０ｇを加え（ｐＨ４．９）、さらに、タンナーゼ製剤であるタンナーゼ（三菱化学フーズ株式会社製）を１ｇ、β−グルコシダーゼ製剤であるスミチームＢＧＡ（新日本化学工業株式会社製）を１ｇ添加して、５０℃で３時間抽出処理を行った。次いで、９０℃で１０分間酵素失活処理を行った後、９５％エタノールを３３０ｇ加えて混合し、ろ紙（ＮＯ．２）を用いて固液分離を行った。固液分離によって得られた液部をエバポレーターを用いて減圧濃縮し、さらにフリーズドライヤーを用いて乾燥・粉末化することで、本発明によるイワベンケイ属植物エキス粉末１６ｇ（実施例３）を得た。

［比較例２］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａの根茎乾燥粉末５０ｇに、１５％エタノール水溶液４５０ｇを加え、５０℃で３時間抽出処理を行った（ｐＨ４．９）後、９５％エタノールを３３０ｇ加えて混合し、ろ紙（ＮＯ．２）を用いて固液分離を行った。固液分離によって得られた液部をエバポレーターを用いて減圧濃縮し、さらにフリーズドライヤーを用いて乾燥・粉末化することで、イワベンケイ属植物抽出物粉末１５ｇ（比較例２）を得た。

［評価試験３］
実施例３で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス粉末及び比較例２で得られたイワベンケイ属植物抽出物粉末を検体として、収斂味の評価及びチロソール含量の測定を実施した。収斂味の評価は、各検体を水道水で１００倍希釈したものについて、パネラー１０人による官能評価によって行った。また、各検体について、評価試験１と同様にして、チロソール含量を測定した。結果を表３に示す。

表３に示すとおり、官能評価において、タンナーゼ活性を有する酵素及びβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理した実施例３で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス粉末は、酵素処理していない比較例２で得られたイワベンケイ属植物抽出物粉末と比較して、収斂味が穏やかであり、摂取しやすいものであった。また、実施例３で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス粉末は、比較例２で得られたイワベンケイ属植物抽出物粉末と比較して、チロソール含量が２倍以上であったことから、実施例３で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、収斂作用が低く、またチロソール含量が顕著に高いため、効果的にチロソールを摂取できることが明らかとなった。

［実施例４］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａの根茎乾燥粉末１０ｇに、水道水１９０ｇを加え（ｐＨ４．９）、さらに、タンナーゼ製剤であるタンナーゼ（三菱化学フーズ株式会社製）を０．２ｇ添加して、５０℃で３時間抽出処理を行った。次いで、８０℃で１０分間加熱処理を行った後、ろ紙（ＮＯ．２）を用いて固液分離を行い、液部を回収することで、本発明によるイワベンケイ属植物エキス１４０ｇ（固形分：１．７％）（実施例４）を得た。

［実施例５］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａの根茎乾燥粉末１０ｇに、水道水１９０ｇを加え（ｐＨ４．９）、さらに、タンナーゼ製剤であるタンナーゼ（三菱化学フーズ株式会社製）を０．２ｇ、β−グルコシダーゼ製剤であるスミチームＢＧＡ（新日本化学工業株式会社製）を０．２ｇ添加して、５０℃で３時間抽出処理を行った。次いで、８０℃で１０分間酵素失活処理を行った後、ろ紙（ＮＯ．２）を用いて固液分離を行い、液部を回収することで、本発明によるイワベンケイ属植物エキス１５０ｇ（固形分２．０％）（実施例５）を得た。

［比較例３］
Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｃｒｅｎｕｌａｔａの根茎乾燥粉末１０ｇに、水道水１９０ｇを加えて、５０℃で３時間抽出処理を行った。次いで、８０℃で１０分間加熱処理を行った後、ろ紙（ＮＯ．２）を用いて固液分離を行い、液部を回収することで、イワベンケイ属植物抽出物１４０ｇ（ｐＨ４．９、固形分１．５％）（比較例３）を得た。

［評価試験４］
実施例４及び実施例５で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス及び比較例３で得られたイワベンケイ属植物抽出物を検体として、メチルメルカプタン消去率及びチロソール含量の測定を実施した。メチルメルカプタン消去率の測定は、３０ｍｌ容量のバイアル瓶に、２００ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．０）で各検体を固形分が０．００５％となるように調整した液５ｍｌ及び１０ｐｐｍメチルメルカプタン水溶液１５０μｌを封入し、３０℃で３０分間攪拌した後、ヘッドスペースガス５００μｌをガスクロマトグラフィー（ＧＣ）を用いてメチルメルカプタンのピーク面積を測定することで行った。また、各検体について、評価試験１と同様にして、チロソール含量を測定した。結果を表４に示す。

表４に示すとおり、タンナーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理した実施例４で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキス及びタンナーゼ活性を有する酵素及びβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理した実施例５で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、酵素処理していない比較例３で得られたイワベンケイ属植物抽出物と比較して、およそ１．３倍もメチルメルカプタン消去率が向上しており、本発明による製造方法を用いることで、消臭作用、特にメチルメルカプタンに対する消臭作用を顕著に向上させることが明らかであった。また、中でも、実施例５で得られた本発明によるイワベンケイ属植物エキスは、他の検体と比較して、チロソール含量が２倍以上であった。

Claims (4)

1. イワベンケイ属植物を原料として、該原料をタンナーゼ活性を有する酵素及びβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、収斂作用を顕著に低減させ、消臭作用を顕著に向上させ、かつチロソールを高度に含有することを特徴とするイワベンケイ属植物エキスの製造方法。
2. β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理が、タンナーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理と並行して又はタンナーゼ活性を有する酵素処理後に行われる、請求項１に記載の製造方法。
3. チロソールが遊離のものである、請求項１又は請求項２に記載の製造方法。
4. 請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載の製造方法により得られるイワベンケイ属植物エキス。