JP6181666B2 - 過酸−生成組成物 - Google Patents
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Description
本出願は、ここに引用してその全体を援用する、2011年12月19日に出願された米国特許出願第61/577,499号に対する優先権を主張する。
(a)過加水分解活性を有する酵素、該酵素は参照配列の配列番号:1と整列する炭水化物エステラーゼファミリー7(CE−7)シグナチャーモチーフを有し、該シグナチャーモチーフは:
i)配列番号:1の位置118〜120に対応する位置のRGQモチーフ;
ii)配列番号:1の位置186〜190に対応する位置のGXSQGモチーフ;および
iii)配列番号:1の位置303〜304に対応する位置のHEモチーフ
を含み;および
b)
i)構造:
[X]mR5
[式中、X=式R6C(O)Oのエステル基、
R6=所望により、ヒドロキシル基またはC1〜C4アルコキシ基で置換されていてもよいC1〜C7直鎖状、分岐鎖状または環状ヒドロカルビル部位、ここで、R6は、所望により、R6=C2〜C7についての1以上のエーテル結合を含んでよく;
R5=所望により、ヒドロキシル基で置換されていてもよい、C1〜C6直鎖状、分岐鎖状、または環状ヒドロカロビル部位、または5−員環状ヘテロ芳香族部位または6−員環状芳香族またはヘテロ芳香族部位;ここで、R5中の各炭素原子は、個々に、1以下のヒドロキシル基または1以下のエステル基またはカルボン酸基を含み;ここで、R5は、所望により、1以上のエーテル結合を含んでよく;
mは1〜R5中の炭素原子の数の範囲の整数である]
を有するエステル、
ここで、該エステルは25℃において少なくとも5ppmの水への溶解度を有し;
ii)式:
を有するグリセリド;
iii)式:
を有する1以上のエステル;および
iv)アセチル化単糖、アセチル化二糖、およびアセチル化多糖からなる群より選択されるアセチル化糖類;
からなる群より選択され;
を含み、
ここで、該水和可能な接着性フィルムの水和に際して、過酸化水素が該顆粒状漂白成分から放出され、該酵素は有効量の過酸の形成を触媒する。
以下の配列は37C.F.R.§§1.821−1.825(「ヌクレオチド配列および/またはアミノ酸配列の開示を含む特許出願についての要件−配列規則」)を満足しており、世界知的所有権機関(WIPO)標準ST.25(2009)および欧州特許条約(EPC)および特許協力条約(PCT)規則5.2および49.5(aの2)、および実施細則の第208号および付属書Cの配列表の要件に合致する。ヌクレオチドおよびアミノ酸配列データで用いられる記号およびフォーマットは37C.F.R.§1.822に記載された規則を満足する。
(a)構造:
「X」mR5
[式中、Xは式R6C(O)Oのエステル基であり;
R6は、所望により、ヒドロキシル基またはC1〜C4アルコキシ基で置換されていてもよいC1〜C7直鎖状、分岐鎖状または環状ヒドロカルビル部位であり、ここで、R6は、所望により、R6がC2〜C7である場合、1以上のエーテル結合を含んでもよく;
R5は、所望により、ヒドロキシル基で置換されていてもよいC1〜C6直鎖状、分岐鎖状、または環状ヒドロカルビル部位または環状5−員ヘテロ芳香族または6員環状芳香族またはヘテロ芳香族部位であり;ここでR5中の各炭素原子は、個々に、1以下のヒドロキシル基または1以下のエステル基を含み、ここで、R5は、所望により、1以上のエーテル結合を含んでもよく;
mは、1〜R5中の炭素原子の数の範囲の整数である]
を有する1以上のエステル、
ここで、該1以上のエステルは25℃において少なくとも5ppmの水への溶解度を有し;または
b)式:
を有する1以上のグリセリド;または
(c)式:
の1以上のエステル;または
(d)1以上のアセチル化単糖、アセチル化二糖、またはアセチル化多糖;または
(c)(a)から(d)の何れかの組合せ
を相互交換に指す。
本発明の組成物および方法は、酵素の炭水化物ファミリーエステラーゼファミリー7(CE−7ファミリー)のメンバーとして構造的に分類される過加水分解活性を有する酵素を含む(Coutinho,P.M.,Henrissat,B.“Carbohydrate−active enzynes:an integrated detabase approach”in Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering,H.J.Gilbert,G.Davies,B.Henrissat and B.Svensson編,(1999)The Royal Society of Chemistry,Cambridge,pp.3−12参照)。酵素のCE−7ファミリーは、ペルオキシゲンの源と合わせると、種々のカルボン酸エステル基質からペルオキシカルボン酸を生じさせるのに特に有効であることが示されている(各々、ここに引用して援用する、DiCosimo et al.に対する米国特許第7,794,378号;第7,951,566号;第7,723,083号;および第7,964,378号および米国特許出願公開第2008−0176299号、第2010−0087529号、第2011−0081693号、および第2011−0236335号)。
本明細書中で用いるように、用語「標的化ペルヒドロラーゼ」および「過加水分解活性を有する標的化酵素」とは、標的表面、好ましくは標的化体表面に対して親和性を有する少なくとも1つのペプチド成分に融合/結合された少なくとも1つの加水分解酵素(野生型またはその変種)を含む融合蛋白質を指すであろう。標的化ペルヒドロラーゼ内の過加水分解酵素は、過加水分解活性を有するいずれのCE−7炭水化物エステラーゼであってもよい。CE−7ペルヒドロラーゼは、参照配列の配列番号:1と整列するCE−7シグナチャーモチーフの存在によって同定することができ、該シグナチャーモチーフは:
i)配列番号:1の位置118〜120に対応する位置のRGEモチーフ;
ii)配列番号:1の位置186〜190に対応する位置のGXSQGモチーフ;および
iii)配列番号:1の位置303〜304に対応する位置のHEモチーフ
を含む。
PAH−[L]y−OCBDまたはOCBD−[L]y−PAH
[式中、PAHは、例えば、CE−7シグナチャーモチーフ、例えば、配列番号:1を有する過加水分解活性を有する酵素であり、OCBDは口腔表面に対して親和性を有するペプチド成分であり、Lは任意のリンカーであって、yは0〜10の範囲の整数である]
を有する融合蛋白質の形態である。1つの実施形態において、リンカー(L)が存在し、それは、長さが1〜100アミノ酸の範囲のペプチドリンカーである。
口腔表面に対して親和性を有するペプチド成分は、10−5モル濃度(M)以下の口腔表面に対する結合親和性を含む。ある実施形態において、ペプチド成分は、歯のエナメル質に対して10−5モル濃度(M)以下の結合親和性を有する1以上の口腔表面結合ペプチドおよび/または結合性ドメインである。いくつかの実施形態において、結合ペプチドまたはドメインは、少なくとも約50〜500mM塩の存在下で、10−5M以下の結合親和性値を有するであろう。用語「結合親和性」とは、結合ペプチドとその各基質との相互作用の強さを指す。結合親和性は、結合ペプチドの解離定数(「KD」)、または「MB50」の換算で定義され、または測定することができる。
いくつかの実施形態において、パーソナルケア組成物は、安定化された酵素粉末の形態の酵素触媒を用いることができる。酵素粉末を含む配合物を作製し、安定化させるための方法は、米国特許出願公開第2010−0086534号および第2010−0086535号に記載されている。
(a)式:
[X]mR5
[式中、Xは式R6C(O)Oのエステル基であり;
R6は、所望により、ヒドロキシル基またはC1〜C4アルコキシ基で置換されていてもよいC1〜C7直鎖状、分岐鎖状または環状ヒドロカルビル部位であり、ここで、R6は、R6がC2〜C7である場合、所望により、1以上のエーテル結合を含んでよく;
R5は、所望により、ヒドロキシル基で置換されていてもよい、C1〜C6直鎖状、分岐鎖状または環状ヒドロカルビル部位または5−員環状ヘテロ芳香族部位または6−員環状芳香族またはヘテロ芳香族部位であり、ここで、R5中の各炭素原子は、個々に、1以下のヒドロキシル基または1以下のエステル基またはカルボン酸基を含み、ここで、R5は、所望により、1以上の他の結合を含んでよく;
mは、1〜R5中の炭素原子の数の範囲の整数である]
を有する1以上のエステル、
ここで、該1以上のエステルは、25℃において少なくとも5ppmの水への溶解度を有し;または
(b)構造:
を有する1以上のグリセリド:または
(c)式:
の1以上のエステル;または
(d)1以上のアセチル化単糖、アセチル化二糖、またはアセチル化多糖;または
(e)(a)から(d)のいずれかの組合せ
を有するエステルを含んでよい。
限定されるものではないが、滴定、高性能液体クロマトグラフィー(HPLC)、ガスクロマトグラフィー(GC)、質量分析(MS)、毛細管電気泳動(CE)、U.Pinkernell et al.(Anal.Chem.,69(17):3623−3627(1997))によって記載された分析手順、および2,2’−アジノ−ビス(3−エチルベンゾチアゾリン)−6−スルホネート(ABTS)アッセイ(U.Pinkernell et al. Analyst,122:567−571(1997)およびDinu et al. Adv.Funct.Mater.,20:392−398(2010))を含めた種々の分析方法を用いて、本実施例に記載されたように、反応体および生成物を分析することができる。
実施形態1。第一の面および第二の面を備えた水和可能な接着性フィルムを含む歯ホワイトニングストリップであって、該第一の面はそれに付着された顆粒状漂白成分を有し、
ここで、該ストリップは、該フィルムの中または上に、または該フィルムの該第一の面に付着された顆粒中に、
(i)炭水化物エステラーゼファミリー7のメンバーのシグナチャーモチーフを含有する過加水分解活性を有する蛋白質;
(ii)例えば、カルボン酸エステルおよびアシル化合物より選択されたアシルドナー
を含む歯ホワイトニングストリップ(ストリップ1)。
a) MAFFDLPLEELKKYRPERYEEKDFDEFWEETLAESEKFPLDPVFERMESHLKTVEAYDVTFSGYRGQRIKGWLLVPKLEEEKLPCVVQYIGYNGGRGFPHDWLFWPSMGYICFVMDTRGQGSGWLKGDTPDYPEGPVDPQYPGFMTRGILDPRTYYYRRVFTDAVRAVEAAASFPQVDQERIVIAGGSQGGGIALAVSALSKKAKALLCDVPFLCHFRRAVQLVDTHPYAEITNFLKTHRDKEEIVFRTLSYFDGVNFAARAKIPALFSVGLMDNISPPSTVFAAYNYYAGPKEIRIYPYNNHEGGGSFQAVEQVKFLKKLFEKG(配列番号:1)、
b)i)配列番号:1の位置118〜120に対応する位置のRGQモチーフ;ii)配列番号:1の位置186〜190に対応する位置のGXSQGモチーフ;およびiii)配列番号:1の位置303〜304に対応する位置のHEモチーフを有するアミノ酸配列;および
c)配列番号:1に対して少なくとも80%の配列同一性を有するアミノ酸配列
より選択されるアミノ酸配列を含むストリップ1。
a) MAFFDLPLEELKKYRPERYEEKDFDEFWEETLAESEKFPLDPVFERMESHLKTVEAYDVTFSGYRGQRIKGWLLVPKLEEEKLPCVVQYIGYNGGRGFPHDWLFWPSMGYICFVMDTRGQGSGWLKGDTPDYPEGPVDPQYPGFMTRGILDPRTYYYRRVFTDAVRAVEAAASFPQVDQERIVIAGGSQGGGIALAVSALSKKAKALLCDVPFLCHFRRAVQLVDTHPYAEITNFLKTHRDKEEIVFRTLSYFDGVNFAARAKIPALFSVGLMDNISPPSTVFAAYNYYAGPKEIRIYPYNNHEGGGSFQAVEQVKFLKKLFEKGGPGSGGAGSPGSAGGPGSTKPPRTPTANTSRPHHNFGSGGGGSPHHHHHH(配列番号:2)、および
b)配列番号:2に対して少なくとも80%の配列同一性を有するアミノ酸配列
より選択されるアミノ酸配列を含む、口腔表面(例えば、歯のペリクルまたはエナメル質)に結合する、またはそれとで複合体を形成するペルヒドロラーゼ活性を有する蛋白質を含む前記ストリップのいずれか。
唾液または(水道水のような)水の他の源に暴露されると、顆粒は溶解し、反応成分を放出して、所望の過酸を酵素的に生じさせる。水和可能な接着性層の水和はフィルムの粘着性を増加させ、ホワイトニングフィルム/ストリップが標的表面(すなわち、歯のエナメル質)に結合するのを可能とする。
好ましい実施形態1。第一の面および第二の面を備えた水和可能な接着性フィルムを含む歯ホワイトニングストリップであって、該第一の面はそれに付着された顆粒状漂白成分を有し、ここで、該歯ホワイトニングストリップは、さらに、該フィルムの中または上に、または該フィルムの第一の面に付着された顆粒の形態中に;
a)過加水分解活性を有する酵素、該酵素は参照配列の配列番号:1と整列する炭水化物エステラーゼファミリー7(CE−7)シグナチャーモチーフを有し、該シグナチャーモチーフは:
i)配列番号:1の位置118〜120に対応する位置のRGQモチーフ;
ii)配列番号:1の位置186〜190に対応する位置のGXSQGモチーフ;および
iii)配列番号:1の位置303〜304に対応する位置のHEモチーフ
を含み;および
(b)少なくとも1つのアシルドナー基質、該基質は:
i)構造:
[X]mR5
[式中、X=式R6C(O)Oのエステル基、
R6=所望により、ヒドロキシル基またはC1〜C4アルコキシ基で置換されていてもよいC1〜C7直鎖状、分岐鎖状または環状ヒドロカルビル部位、ここで、R6は、所望により、R6=C2〜C7のための1以上のエーテル結合を含んでよく;
R5=所望により、ヒドロキシル基で置換されていてもよいC1〜C6直鎖状、分岐鎖状、または環状ヒドロカルビル部位または5−員環状ヘテロ芳香族部位または6−員環状芳香族またはヘテロ芳香族部位;ここで、R5中の各炭素原子は、個々に、1以下のヒドロキシル基または1以下のエステル基またはカルボン酸基を含み;ここで、R5は、所望により、1以上のエーテル結合を含み;
mは1〜R5中の炭素原子の数の範囲の整数である]
を有するエステル、
ここで、該エステルは25℃において少なくとも5ppmの水への溶解度を有する;
ii)構造:
を有するグリセリド;
iii)式:
の1以上のエステル;および
iv)アセチル化単糖、アセチル化二糖、およびアセチル化多糖からなる群より選択されるアセチル化糖類
からなる群より選択され;
を含み、
ここで、水和可能な接着性フィルムの水和に際して、過酸化水素が顆粒状漂白成分から放出され、該酵素は有効量の過酸の形成を触媒することを特徴とする歯ホワイトニングストリップ。
a)配列番号:1;および
b)配列番号:1に対して少なくとも80%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列
より選択されるアミノ酸配列を含む、好ましい実施形態1記載の歯ホワイトニングストリップ。
a)配列番号:2、および
b)配列番号:2に対して少なくとも80%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列
より選択されるアミノ酸配列を含む、前記好ましい実施形態のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
a)前記好ましい実施形態のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップを含むパッケージングシステムを準備し;
b)該パッケージングシステムから該歯ホワイトニングストリップを取り出し;次いで、
c)該歯ホワイトニングストリップを、歯を白くするのに十分な時間の間、歯に直接的に接触させることを含み、
ここで、該歯ホワイトニングストリップは口腔中に、または歯表面上に存在する水分によって水和されるか、または工程(b)の後であるが工程(c)に先立って水和されることを特徴とする、歯を白くする方法。
a)半乾燥状態の水和可能な接着性フィルムを準備し、
b)顆粒状漂白成分の顆粒を該フィルムの1つの表面に適用し、それにより、該顆粒は該表面に接着し、次いで、
c)該フィルムを乾燥する
ことを含む、歯ホワイトニングストリップを作製する方法。
ストリップは前記したように調製され、水和可能な接着性フィルムを形成し、次いで、フィルムが依然として粘着性である間に、表1中の成分を用いて顆粒化ホワイトニング剤および顆粒化酵素を片面の表面に加える。該ストリップは、適用に際して、口の中でゆっくりと浸食され、従って、除去する必要はない。
ストリップは前記したように調製され、水和可能な接着性フィルムを形成し、次いで、ストリップが依然として接着性である間に、表2中の成分を用いて顆粒化剤を一方の面に、および保護ブロッキング層を他方の面に加える。ブロッキング層は溶解しないため、利用者は、ホワイトニングが起こるのに十分な時間が経過した後に、典型的には、約10〜30分の後にそれを除くべきである。2つの層は、押出または溶媒ベースの成型によって同時に製造することもでき、次いで、顆粒化ホワイトニング剤を水和可能な接着性フィルムの表面に加えることができる。
過酸化水素−ポリビニルピロリドン複合体および過加水分解活性を有する酵素(「酵素」)の種々の粒子サイズを、均一に、トリアセチンを含有する水和可能な接着性ストリップの表面にわたって過酸を生じさせるそれらの能力について評価した。
Claims (18)
- 第一の面および第二の面を備えた水和可能な接着性フィルムを含む歯ホワイトニングストリップであって、
該第一の面はそれに付着された顆粒状漂白成分を有し、ここで、該歯ホワイトニングストリップは、さらに、該フィルムの中または上に、または該フィルムの第一の面に付着された顆粒の形態中に;
a)配列番号:1(SEQ ID NO: 1)を含む酵素;および
b)少なくとも1つのアシルドナー基質を含み、このアシルドナー基質がトリアセチンである歯ホワイトニングストリップ。 - さらに、該水和可能な接着性フィルムの該第二の面に付着されたブロッキング層を含み、該ブロッキング層は該水和可能な接着性フィルムの溶解を阻害することができる請求項1に記載のホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分が、水和に際して溶解することができる水溶性コーティングで被覆された請求項1または2に記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分が固体過酸化物および固体過酸化物ドナーより選択される請求項1〜3のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分が、過酸化物塩、過酸化物複合体、ペルオキシリン酸塩、ペルオキシ炭酸塩、過ホウ酸塩、ペルオキシケイ酸塩、過硫酸塩、ペルオキシリン酸カルシウム、過ホウ酸ナトリウム、炭酸ナトリウム過酸化水素化物、ペルオキシリン酸ナトリウム、過硫酸カリウム、次亜塩素酸塩、過酸化尿素、過酸化水素ポリマー複合体、過酸化水素−ポリビニルピロリドンポリマー複合体、金属過酸化物、過酸化亜鉛、過酸化カルシウム、およびそれらの組合せより選択される請求項1〜4のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分が過酸化尿素、過炭酸ナトリウム、過酸化水素−ポリビニルピロリドンポリマー複合体、およびそれらの2以上の組合せより選択される請求項1〜5のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分の粒子サイズのメジアン直径(D50)が10ミクロン〜300ミクロンである請求項1〜6のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分の粒子サイズのメジアン直径(D50)が100ミクロン〜250ミクロンである請求項1〜7のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該酵素の粒子サイズのメジアン直径(D50)が100ミクロン〜250ミクロンである請求項1〜8のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該ストリップが少なくとも0.1wt%の過酸を生じる請求項1〜9のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該水和可能な接着性フィルムの第一の面上の顆粒状漂白剤の量が0.001mg/cm2〜1mg/cm2の範囲である請求項1〜10のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該水和可能な接着性フィルムが、親水性セルロールエーテル、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ酢酸ビニル、カルボマー、多糖ガム、キサンタンガム、修飾された食品澱粉、ゼラチン、動物または魚類ベースのゼラチン、架橋されたカルボキシビニルコポリマー、架橋されたポリビニルピロリドン、ポリ酸化エチレン、ポリアクリル酸、ポリアクリレート、ポリビニルアルコール、アルジネート、カゼイン、プルラン、およびそれらの2以上の組合せより選択される1以上の水溶性ポリマーを含む請求項1〜11のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該水和可能な接着性フィルムが、親水性セルロースエーテル、ポリビニルアルコール、カルボマー、およびそれらの2以上の組合せより選択される1以上の水溶性ポリマーを含む請求項1〜12のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該水和可能な接着性フィルムが、さらに、可塑剤を含む請求項1〜13のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該水和可能な接着性フィルムが、さらに、プロピレングリコールを含む請求項1〜14のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 該顆粒状漂白成分が水和に際して溶解することができる水溶性コーティングで被覆された請求項1〜15のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- 有効量の過酸が、歯ホワイトニングストリップの表面にわたって実質的に均一な濃度で生じる請求項1〜16のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップ。
- a)請求項1〜17のいずれかに記載の歯ホワイトニングストリップを含むパッケージングシステムを準備し:
b)該パッケージングシステムから該歯ホワイトニングストリップを取り出し:次いで、
c)該歯ホワイトニングストリップを、歯を白くするのに十分な時間の間、歯と直接的に接触させることを含み、
ここで、該歯ホワイトニングストリップは、口腔中に、または歯の表面上に存在する水分によって水和されるか、または工程(b)の後であるが工程(c)に先立って水和されることを特徴とする、歯を白くする方法。
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