JP6166247B2 - ヘキサナール特異的暴露有無確認用バイオマーカーおよびそれを用いた確認方法 - Google Patents
ヘキサナール特異的暴露有無確認用バイオマーカーおよびそれを用いた確認方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6166247B2 JP6166247B2 JP2014254874A JP2014254874A JP6166247B2 JP 6166247 B2 JP6166247 B2 JP 6166247B2 JP 2014254874 A JP2014254874 A JP 2014254874A JP 2014254874 A JP2014254874 A JP 2014254874A JP 6166247 B2 JP6166247 B2 JP 6166247B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- gene
- genebank
- hexanal
- registration number
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N hexanal Chemical compound CCCCCC=O JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 150
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 43
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 title claims description 8
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 155
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 44
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 27
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 26
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 claims description 25
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 24
- 102100020675 Krueppel-like factor 2 Human genes 0.000 claims description 22
- 101000775460 Homo sapiens Alcohol dehydrogenase 6 Proteins 0.000 claims description 21
- 101000945965 Homo sapiens CCAAT/enhancer-binding protein delta Proteins 0.000 claims description 21
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims description 21
- 102100031794 Alcohol dehydrogenase 6 Human genes 0.000 claims description 20
- 102100034799 CCAAT/enhancer-binding protein delta Human genes 0.000 claims description 20
- 101001139146 Homo sapiens Krueppel-like factor 2 Proteins 0.000 claims description 19
- 101000628547 Homo sapiens Metalloreductase STEAP1 Proteins 0.000 claims description 18
- 102100026712 Metalloreductase STEAP1 Human genes 0.000 claims description 17
- 101150075117 Ccl12 gene Proteins 0.000 claims description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 15
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 11
- 101000912753 Homo sapiens DNA damage-inducible transcript 4 protein Proteins 0.000 claims description 9
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 claims description 8
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 claims description 8
- 102100026139 DNA damage-inducible transcript 4 protein Human genes 0.000 claims description 8
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 claims description 4
- 101710186679 Kruppel-like factor 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 claims description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YVSWPCCVTYEEHG-UHFFFAOYSA-N rhodamine B 5-isothiocyanate Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(N=C=S)C=C1C(O)=O YVSWPCCVTYEEHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 25
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 21
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 102100030666 Transcriptional and immune response regulator Human genes 0.000 description 6
- 102100024323 Transmembrane protein 182 Human genes 0.000 description 6
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 6
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 101000653455 Homo sapiens Transcriptional and immune response regulator Proteins 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 102100032268 Triadin Human genes 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 239000012855 volatile organic compound Substances 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710186200 CCAAT/enhancer-binding protein Proteins 0.000 description 3
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000831491 Homo sapiens Transmembrane protein 182 Proteins 0.000 description 3
- 102000012547 Olfactory receptors Human genes 0.000 description 3
- 108050002069 Olfactory receptors Proteins 0.000 description 3
- 108091006946 SLC39A5 Proteins 0.000 description 3
- 101710191745 Transmembrane protein 182 Proteins 0.000 description 3
- 102100023142 Zinc transporter ZIP5 Human genes 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 3
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000798086 Homo sapiens Triadin Proteins 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 102000036858 Metal ion transporters Human genes 0.000 description 2
- 108091006974 Metal ion transporters Proteins 0.000 description 2
- 101100403083 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cmt gene Proteins 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- 108091028733 RNTP Proteins 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 238000007621 cluster analysis Methods 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 2
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 2
- FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N silanamine Chemical compound [SiH3]N FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 108010072310 triadin Proteins 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 2-Methylpentane Chemical compound CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000203069 Archaea Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 101001056308 Homo sapiens Malate dehydrogenase, cytoplasmic Proteins 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 102100026475 Malate dehydrogenase, cytoplasmic Human genes 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 206010061924 Pulmonary toxicity Diseases 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 208000018569 Respiratory Tract disease Diseases 0.000 description 1
- CGNLCCVKSWNSDG-UHFFFAOYSA-N SYBR Green I Chemical compound CN(C)CCCN(CCC)C1=CC(C=C2N(C3=CC=CC=C3S2)C)=C2C=CC=CC2=[N+]1C1=CC=CC=C1 CGNLCCVKSWNSDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000005183 environmental health Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000003905 indoor air pollution Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- -1 isopropene Chemical compound 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000010208 microarray analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012775 microarray technology Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 238000001259 photo etching Methods 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 231100000374 pneumotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000007047 pulmonary toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000622 toxicogenomics Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
遺伝子登録番号(Genebank)XM_575808(RGD1559864,similar to mKIAA1045 protein)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_021666(TRDN,triadin)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001109305(TMEM182,transmembrane protein182)、遺伝子登録番号(Genebank)XM_003749799、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001108728(SLC39A5,solute carrier family39(metal ion transporter)、member5)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4、DNA−damage−inducible transcript4)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD,CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP),delta),遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001000421(OLR1075,olfactory receptor1075)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung))、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001115043(LOC684871,similar to Protein C8orf4(Thyroid cancer protein1)(TC−1))。
1)ヘキサナールを暴露させた実験群と正常対照群の肺組織からそれぞれのRNAを分離する工程;
2)工程1)の実験群と対照群のRNAをcDNAに合成し、実験群と対照群を蛍光物質で標識する工程;
3)工程2)の蛍光物質で標識されたcDNAを、本発明のDNAマイクロアレイチップとハイブリダイゼーションさせる工程;
4)反応したDNAマイクロアレイチップを分析する工程;および
5)分析したデータから、本発明のDNAマイクロアレイチップに集積された遺伝子の発現程度を対照群と比較して確認する工程を含む、ヘキサナールに対する暴露有無を確認する方法を提供する。
1)ヘキサナールを暴露させた実験群と正常対照群の肺組織からそれぞれのRNAを分離する工程;
2)前記のRNAを下記の遺伝子に相補的で下記の遺伝子を増幅することができるプライマー対を用いてリアルタイムRT−PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)を実行する工程:
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4,DNA−damage−inducible transcript4)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD,CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP),delta)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung));および
3)工程2)の遺伝子産物を対照群と比較して、発現の程度を確認する工程を含む、ヘキサナールに対する暴露有無を確認する方法を提供する。
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4,DNA−damage−inducible transcript4)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD,CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP),delta)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6、alcohol dehydrogenase6(class V))、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2、Kruppel−like factor2(lung))。
遺伝子登録番号(Genebank):XM_575808(RGD1559864,similar to mKIAA1045 protein)(配列番号13)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_021666(TRDN,triadin)(配列番号15)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001109305(TMEM182,transmembrane protein182)(配列番号16)、
遺伝子登録番号(Genebank):XM_003749799(配列番号17)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001108728(SLC39A5,solute carrier family39(metal ion transporter),member5)(配列番号19)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_080906(DDIT4,DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_013154(CEBPD,CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)(配列番号21)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22)は、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001000421(OLR1075,olfactory receptor1075)(配列番号23)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001115043(LOC684871,similar to Protein C8orf4(Thyroid cancer protein1)(TC−1))(配列番号25)。
遺伝子登録番号(Genebank):XM_575808(RGD1559864,similar to mKIAA1045 protein)(配列番号13)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_021666(TRDN,triadin)(配列番号15)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001109305(TMEM182,transmembrane protein182)(配列番号16)、
遺伝子登録番号(Genebank):XM_003749799(配列番号17)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001108728(SLC39A5、solute carrier family39(metal ion transporter),member5)(配列番号19)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_080906(DDIT4、DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP),delta)(配列番号21)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001000421(OLR1075,olfactory receptor1075)(配列番号23)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24)、
遺伝子登録番号(Genebank):NM_001115043(LOC684871,similar to Protein C8orf4(Thyroid cancer protein1)(TC−1))(配列番号25)。
1)ヘキサナールを暴露させた実験群と正常対照群の肺組織からRNAを分離する工程;
2)工程1)の実験群と対照群のRNAをcDNAに合成し、実験群と対照群を蛍光物質で標識する工程;
3)工程2)の蛍光物質で標識されたcDNAを、本発明のDNAマイクロアレイチップとハイブリダイゼーションさせる工程;
4)反応したDNAマイクロアレイチップを分析する工程;および
5)分析したデータから、本発明の遺伝子の発現程度を対照群と比較して確認する工程。
1)ヘキサナールを暴露させた実験群および正常対照群の肺組織からそれぞれRNAを分離する工程;
2)前記のRNAを下記の遺伝子に相補的で下記の遺伝子を増幅することができるプライマー対を用いてリアルタイムRT−PCRを実行する工程:
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4,DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)(配列番号21)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24 );および
3)工程2)の遺伝子産物を対照群と比較して、発現程度を確認する工程を含むヘキサナールに対する暴露有無を確認する方法を提供する。
プライマー対1:配列番号1で表される順方向プライマーおよび配列番号2で表される逆方向プライマー;
プライマー対2:配列番号3で表される順方向プライマーおよび配列番号4で表される逆方向プライマー;
プライマー対3:配列番号5で表される順方向プライマーおよび配列番号6で表される逆方向プライマー;
プライマー対4:配列番号7で表される順方向プライマーおよび配列番号8で表される逆方向プライマー;
プライマー対5:配列番号9で表される順方向プライマーおよび配列番号10で表される逆方向プライマー;および
プライマー対6:配列番号11で表される順方向プライマーおよび配列番号12で表される逆方向プライマー。
下記の遺伝子に相補的で、下記の遺伝子を増幅することができるプライマー対を含むヘキサナールに対する暴露有無確認用キットを提供する:
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12,chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4、DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)(配列番号21)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22)は、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24)。
プライマー対1:配列番号1で表される順方向プライマーおよび配列番号2で表される逆方向プライマー;
プライマー対2:配列番号3で表される順方向プライマーおよび配列番号4で表される逆方向プライマー;
プライマー対3:配列番号5で表される順方向プライマーおよび配列番号6で表される逆方向プライマー;
プライマー対4:配列番号7で表される順方向プライマーおよび配列番号8で表される逆方向プライマー;
プライマー対5:配列番号9で表される順方向プライマーおよび配列番号10で表される逆方向プライマー;および
プライマー対6:配列番号11で表される順方向プライマーおよび配列番号12で表される逆方向プライマー。
<1−1>ラットモデル選定
本発明者らは、従来の研究と報告を通じてヘキサナール暴露実験のための適切な動物モデルとしてFischer344(SD系)ラットを選定した。
既存の文献で報告されたアルデヒドを用いたラットモデルの公開実験結果とヘキサナールの物理化学的特性による飽和濃度、ガス発生器の特徴を考慮して、暴露濃度を600ppm、1000ppm、1,500ppmに選定した。暴露の方法は、鼻部暴露吸引装置(Nose-only inhalation chamber)を用いた反復吸入方式を選択して、5週間吸入させた。対照物質はフィルタリングしたクリーンエアーを用いて1日1回、一回当たり約4時間暴露し、試験物質であるヘキサナールもまた、1日1回、一回当たり約4時間、合計20回暴露させた。
ラットから摘出した肺組織を重量測定した後、RNA抽出に適切な量にカットしてクライオチューブ(cryotube)に得た。得られた肺組織は、液体窒素を用いて、瞬間凍結(snap frozen)した後、−80℃で保管した。
<2−1>標的RNAの分離と蛍光物質標識
ヘキサナール暴露群と非暴露群の肺組織からのRNA抽出は、トリゾール試薬(Invitrogen life technologies、米国)を用いて、メーカーの方法で全体RNAを分離し、RNeasy mini kit(Qiagen、米国)を用いて精製した。ゲノムDNAは、RNA精製中にRNase-free DNase set(Qiagen、米国)を用いて除去した。各全体RNA試料の量は、分光光度計で測定し、濃度はND-1000 Spectrophotometer(Thermo Fisher Scientific Inc.,米国)とAgilent2100 Bioanalyzer(Agilent)で確認した。
オリゴマイクロアレイ分析のために、前記実施例<2−1>で得られたヘキサナール処理群の全体RNAを用いてcDNAを製造した。前記得られた全体RNA30μgとオリゴ(dT)プライマー2μg(1μg/μl)と混合し、65℃で10分間反応させた後、すぐに氷に入れてアニーリングさせた。前記アニーリングさせたRNAの逆転写反応のために下記の[表1]のように試薬を混合した。ここで、両方の試料は、Microcon YM−30カラム(Millipore、米国)を用いて混合、精製した。
ハイブリダイゼーションおよび洗浄工程は、(株)イバイオジェンの指示方法にしたがって実行した。
スライド上のハイブリダイゼーションイメージは、Agilent C scanner(Agilent technologies、CA、米国)でスキャンした。ここで、緑の蛍光イメージは対照群で、赤色蛍光イメージは実験群でのみ特異的に発現される遺伝子の活性度を示し、黄色の蛍光イメージは緑と赤の補色で、両群の発現に大きな差がないことを意味する。スキャンしたイメージは、遺伝子発現率を得るためにAgilent Feature Extraction 10.7.3.1(Agilent technologies、CA、米国)で分析した。抽出されたデータは、Agilent GeneSpring GX12.6.1(Agilent technologies、CA、米国)を用いて正規化(normalization)を経て、各遺伝子の発現様相を分析した。このようにして得られたデータからヘキサナールに対するマーカー遺伝子を選別した。
前記のマイクロアレイの結果から、ヘキサナールにより濃度依存的に発現が変化した前記<実施例2>遺伝子のうち6種の遺伝子[遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1,six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12、chemokine(CC motif)ligand12)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4,DNA−damage−inducible transcript4)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6,alcohol dehydrogenase6(class V))、遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2,Kruppel−like factor2(lung))]の発現変化の程度を調査し、定量するために、My IQリアルタイムPCR(My IQ Real−time PCR)(Bio−rad,米国)を用いて定量的リアルタイムRT−PCRを実施した。
Claims (8)
- 下記の群から選択されるいずれか一つの遺伝子の核酸配列またはその相補鎖の分子が集積されたヘキサナール(Hexanal)特異的暴露有無確認用DNAマイクロアレイチップ:
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1、six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12、chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4、DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)(配列番号21);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6、alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22);および
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2、Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24)。 - 1)ヘキサナールを暴露させた実験群と正常対照群のFischer344(SD系)ラットの肺組織からそれぞれのRNAを分離する工程;
2)工程1)の実験群と対照群のRNAをcDNAに合成して、実験群と対照群のcDNAを蛍光物質で標識する工程;
3)工程2)でCy3、Cy5、ポリ−L−リジン−フロオレセインイソチオシアネート(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate;FITC)、RITC(rhodamine-B-isothiocyanate)およびローダミン(rhodamine)からなる群から選択される蛍光物質で標識されたcDNAを、請求項1に記載のDNAマイクロアレイチップとハイブリダイゼーションさせる工程;
4)工程3)の反応したDNAマイクロアレイチップを分析する工程;および
5)工程4)の分析したデータから、請求項1に記載のDNAマイクロアレイチップに集積された遺伝子の発現程度を対照群と比較して確認する工程を含む、ヘキサナール暴露有無確認方法。 - 1)ヘキサナールを暴露させた実験群と正常対照群のFischer344(SD系)ラットの肺組織からそれぞれのRNAを分離する工程;
2)前記のRNAを下記の遺伝子に相補的で下記の遺伝子を増幅することができるプライマー対を用いてリアルタイムRT−PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)を実行する工程;および
3)工程2)の遺伝子産物を対照群と比較して、発現程度を確認する工程とを含むヘキサナール暴露有無確認方法:
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1、six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12、chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4、DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)(配列番号21);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6、alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22);および
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2、Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24)。 - 工程2)のプライマー対が、下記のプライマー対からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする請求項3に記載のヘキサナール暴露有無確認方法:
プライマー対1:配列番号1で表される順方向プライマーおよび配列番号2で表される逆方向プライマー;
プライマー対2:配列番号3で表される順方向プライマーおよび配列番号4で表される逆方向プライマー;
プライマー対3:配列番号5で表される順方向プライマーおよび配列番号6で表される逆方向プライマー;
プライマー対4:配列番号7で表される順方向プライマーおよび配列番号8で表される逆方向プライマー;
プライマー対5:配列番号9で表される順方向プライマーおよび配列番号10で表される逆方向プライマー;および
プライマー対6:配列番号11で表される順方向プライマーおよび配列番号12で表される逆方向プライマー。 - 請求項1に記載のDNAマイクロアレイチップを含むヘキサナール暴露有無確認用キット。
- Fischer344(SD系)ラットの肺組織をさらに含むことを特徴とする請求項5に記載のヘキサナール暴露有無確認用キット。
- 下記の遺伝子に相補的で下記の遺伝子を増幅することができるプライマー対を含むヘキサナール暴露有無確認用キット:
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001106629(STEAP1、six transmembrane epithelial antigen of the prostate1)(配列番号14);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001105822(CCL12、chemokine(CC motif)ligand12)(配列番号18);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_080906(DDIT4、DNA−damage−inducible transcript4)(配列番号20);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_013154(CEBPD、CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)、delta)(配列番号21);
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001012084(ADH6、alcohol dehydrogenase6(class V))(配列番号22);および
遺伝子登録番号(Genebank)NM_001007684(KLF2、Kruppel−like factor2(lung))(配列番号24)。 - 前記プライマー対が、下記のプライマー対からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする請求項7に記載のヘキサナール暴露有無確認用キット:
プライマー対1:配列番号1で表される順方向プライマーおよび配列番号2で表される逆方向プライマー;
プライマー対2:配列番号3で表される順方向プライマーおよび配列番号4で表される逆方向プライマー;
プライマー対3:配列番号5で表される順方向プライマーおよび配列番号6で表される逆方向プライマー;
プライマー対4:配列番号7で表される順方向プライマーおよび配列番号8で表される逆方向プライマー;
プライマー対5:配列番号9で表される順方向プライマーおよび配列番号10で表される逆方向プライマー;と
プライマー対6:配列番号11で表される順方向プライマーおよび配列番号12で表される逆方向プライマー。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR10-2014-0078818 | 2014-06-26 | ||
KR1020140078818A KR101671344B1 (ko) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | 헥산알 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016007213A JP2016007213A (ja) | 2016-01-18 |
JP6166247B2 true JP6166247B2 (ja) | 2017-07-19 |
Family
ID=55168532
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014254874A Expired - Fee Related JP6166247B2 (ja) | 2014-06-26 | 2014-12-17 | ヘキサナール特異的暴露有無確認用バイオマーカーおよびそれを用いた確認方法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6166247B2 (ja) |
KR (1) | KR101671344B1 (ja) |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002355079A (ja) * | 2001-03-14 | 2002-12-10 | Takara Bio Inc | 内分泌かく乱物質の検出方法 |
JP2007043950A (ja) * | 2005-08-10 | 2007-02-22 | Azabu Jui Gakuen | ダイオキシン類汚染のスクリーニング用dnaアレイ及びスクリーニング方法、並びにダイオキシン類モニター用遺伝子及び植物形質転換用プラスミドベクター |
KR101398548B1 (ko) * | 2012-05-29 | 2014-05-27 | 한국과학기술연구원 | 저급 지방족 포화 알데하이드류 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 |
KR101398547B1 (ko) * | 2012-05-30 | 2014-05-27 | 한국과학기술연구원 | 저급 지방족 포화 알데하이드류 노출 여부 확인용 마이크로 rna 및 이를 이용한 확인 방법 |
-
2014
- 2014-06-26 KR KR1020140078818A patent/KR101671344B1/ko active IP Right Grant
- 2014-12-17 JP JP2014254874A patent/JP6166247B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR101671344B1 (ko) | 2016-11-02 |
JP2016007213A (ja) | 2016-01-18 |
KR20160001760A (ko) | 2016-01-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101463900B1 (ko) | 2.5 마이크로미터 이하 미세먼지 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
JP6337358B2 (ja) | 個体が大腸癌に罹患する可能性をin vitroで決定するための方法及びキット | |
KR101398548B1 (ko) | 저급 지방족 포화 알데하이드류 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
JP5985676B2 (ja) | ヘキサナール曝露有無確認用マイクロrnaおよびそれを用いた確認方法 | |
JP6085352B2 (ja) | ヘキサナール曝露特異的メチル化マーカー遺伝子およびそれを用いた確認方法 | |
KR100957055B1 (ko) | 트리클로로에틸렌 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를이용한 확인 방법 | |
KR101749566B1 (ko) | 디젤 배기 미립자(diesel exhaust particle) 노출에 따른 염증반응 관련 유전자 발현 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
JP6166247B2 (ja) | ヘキサナール特異的暴露有無確認用バイオマーカーおよびそれを用いた確認方法 | |
KR101398547B1 (ko) | 저급 지방족 포화 알데하이드류 노출 여부 확인용 마이크로 rna 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR101758701B1 (ko) | 엑소좀과 세포주 유래 톨루엔 노출 여부 확인용 마이크로 rna 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR101383653B1 (ko) | 프로피온알데히드 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR101383641B1 (ko) | 부틸알데히드 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR100974228B1 (ko) | 최기형성 및 부작용 유발 약물 검색용 바이오마커 및 이를이용한 최기형성 및 부작용 유발 약물 검색 방법 | |
JP5940635B2 (ja) | 低級脂肪族飽和アルデヒド類特異的メチル化マーカー遺伝子およびそれを用いた低級脂肪族飽和アルデヒド類の曝露の有無を確認する方法 | |
KR101138954B1 (ko) | 갑상선 과산화효소 활성 저해 화학물질 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인방법 | |
JP2002355079A (ja) | 内分泌かく乱物質の検出方法 | |
KR101062784B1 (ko) | 미렉스 특이적 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR101151786B1 (ko) | 트리클로로에틸렌의 인체 노출에 특이적인 유전자 발현 여부 확인용 바이오 마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR101292840B1 (ko) | 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐, 및 인데노(1,2,3―c,d)파이렌 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법 | |
KR101138953B1 (ko) | 갑상선 과산화효소 활성 증가 화학물질 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인방법 | |
KR20090061160A (ko) | 인데노(1,2,3-c,d)파이렌 노출 여부 확인용 바이오마커및 이를 이용한 확인 방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20151215 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160301 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20160816 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161216 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161226 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20170118 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170404 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20170420 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170424 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170606 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170622 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6166247 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |