JP6089055B2 - クマリン誘導体を含有する医薬 - Google Patents
クマリン誘導体を含有する医薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6089055B2 JP6089055B2 JP2015056815A JP2015056815A JP6089055B2 JP 6089055 B2 JP6089055 B2 JP 6089055B2 JP 2015056815 A JP2015056815 A JP 2015056815A JP 2015056815 A JP2015056815 A JP 2015056815A JP 6089055 B2 JP6089055 B2 JP 6089055B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- trifluoromethyl
- sulfonylamino
- phenyl
- medicament according
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 0 *=C1Oc(c(OS(c(cc2)ccc2N)(=O)=O)ccc2)c2C=C1NC(c1cccc(C(F)(F)F)c1)I(=O)=O Chemical compound *=C1Oc(c(OS(c(cc2)ccc2N)(=O)=O)ccc2)c2C=C1NC(c1cccc(C(F)(F)F)c1)I(=O)=O 0.000 description 2
- HNPBQCUEDPLGGE-UHFFFAOYSA-N [O-][N+](c(cc1)ccc1S(Oc1cccc(C=C2NS(c3cc(C(F)(F)F)ccc3)(=O)=O)c1OC2=O)(=O)=O)=O Chemical compound [O-][N+](c(cc1)ccc1S(Oc1cccc(C=C2NS(c3cc(C(F)(F)F)ccc3)(=O)=O)c1OC2=O)(=O)=O)=O HNPBQCUEDPLGGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
アルコキシとは、好ましくはメトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、イソブトキシ、sec-ブトキシ、t-ブトキシ等の炭素数1乃至4の直鎖状又は分岐状のアルコキシ基を表す。
ハロゲンとは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等を表す。
3-[(3-メトキシフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-メトキシベンゼンスルホネート[化合物2]
3-[(2-メトキシフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 2-メトキシベンゼンスルホネート[化合物3]
2-オキソ-3-(p-トルイルスルホニルアミノ)クロメン-8-イル 4-メチルベンゼンスルホネート[化合物4]
3-(m-トルイルスルホニルアミノ)-2-オキソクロメン-8-イル 3-メチルベンゼンスルホネート[化合物5]
3-(o-トルイルスルホニルアミノ)-2-オキソクロメン-8-イル 2-メチルベンゼンスルホネート[化合物6]
3-[(4-クロロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-クロロベンゼンスルホネート[化合物7]
3-[(3-クロロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-クロロベンゼンスルホネート[化合物8]
3-[(2-クロロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 2-クロロベンゼンスルホネート[化合物9]
3-[(4-フルオロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-フルオロベンゼンスルホネート[化合物10]
3-[(3-フルオロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-フルオロベンゼンスルホネート[化合物11]
3-[(2-フルオロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 2-フルオロベンゼンスルホネート[化合物12]
3-[(4-シアノフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-シアノベンゼンスルホネート[化合物13]
3-[(3-シアノフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-シアノベンゼンスルホネート[化合物14]
3-[(2-シアノフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 2-シアノベンゼンスルホネート[化合物15]
3-[(4-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-ニトロベンゼンスルホネート[化合物16]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-ニトロベンゼンスルホネート[化合物17]
3-[(2-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 2-ニトロベンゼンスルホネート[化合物18]
3-[(4-ヒドロキシフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-ヒドロキシベンゼンスルホネート[化合物19]
3-(ベンゼンスルホニルアミノ)-2-オキソクロメン-8-イル 4-シアノベンゼンスルホネート[化合物20]
3-[(3-シアノフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物22]
3-[(4-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物23]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物24]
3-[(3-フルオロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物25]
3-[(3,4-ジフルオロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物26]
2-オキソ-3-[[4-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物27]
2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物28]
3-[(4-クロロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物29]
2-オキソ-3-[(4-フェニルフェニル)スルホニルアミノ]クロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物30]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物31]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物32]
2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物33]
3-(ベンゼンスルホンアミド)-2-オキソクロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物34]
3-(ベンゼンスルホンアミド)-2-オキソクロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物35]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル ピリジン-3-スルホネート[化合物36]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル メタンスルホネート[化合物37]
2-オキソ-3-(3-ピリジルスルホニルアミノ)クロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物38]
3-(メタンスルホンアミド)-2-オキソクロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物39]
3-(メタンスルホンアミド)-2-オキソクロメン-8-イル ベンゼンスルホネート[化合物40]
3-[(4-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物42]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル チオフェン-2-スルホネート[化合物43]
2-オキソ-3-(2-チエニルスルホニルアミノ)クロメン-8-イル 3-ニトロベンゼンスルホネート[化合物44]
4-[[8-(3-ニトロフェニル)スルホニルオキシ-2-オキソクロメン-3-イル]スルファモイル]安息香酸[化合物45]
塩酸2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-アミノベンゼンスルホネート[化合物46]
3-[(4-アミノフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物47]
エチル 4-[3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル]オキシスルホニルベンゾエート[化合物48]
4-[3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル]オキシスルホニル安息香酸 [化合物49]
2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-ニトロベンゼンスルホネート[化合物50]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物51]
2-オキソ-3-[(4-フェニルフェニル)スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物52]
2-オキソ-3-[(4-フェニルフェニル)スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物53]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-ニトロベンゼンスルホネート[化合物54]
2-オキソ-3-[(4-フェニルフェニル)スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-ニトロベンゼンスルホネート[化合物55]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物56]
2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物57]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物58]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物59]
2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-ブロモベンゼンスルホネート[化合物60]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-フェニルベンゼンスルホネート[化合物62]
2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-フェニルベンゼンスルホネート[化合物63]
2-オキソ-3-[[4-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-フェニルベンゼンスルホネート[化合物64]
3-[(3-ブロモフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-フェニルベンゼンスルホネート[化合物65]
2-オキソ-3-[(4-フェニルフェニル)スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-フェニルベンゼンスルホネート[化合物66]
2-オキソ-3-[[4-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-ニトロベンゼンスルホネート[化合物67]
2-オキソ-3-[[4-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 3-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物68]
3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物69]
2-オキソ-3-[(4-フェニルフェニル)スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホネート[化合物70]
(1)前記一般式(I)で表されるクマリン誘導体並びにその薬学的に許容される塩及び水和物の少なくとも一種を含有する医薬。
(2)R1及びR2が同一又は異なって、アルコキシ、アルキル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、フェニル又は1若しくは2のハロゲンで置換されていてもよいフェニルである上記(1)記載の医薬。
(3)R1及びR2が同一又は異なって、アルコキシ、アルキル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、フェニル又は1若しくは2のハロゲンで置換されているフェニルである上記(2)記載の医薬。
(4)R1及びR2の両方がトリフルオロメチルで置換されているフェニルである上記(3)記載の医薬。
(5)R1又はR2の一方がトリフルオロメチルで置換されているフェニルである上記(3)記載の医薬。
(6)R1又はR2の一方がトリフルオロメチルで置換されているフェニルで、他方がハロゲンで置換されているフェニルである上記(5)記載の医薬。
(7)ハロゲンが臭素である上記(6)記載の医薬。
(8)関節症の予防又は治療剤である上記(1)乃至(7)のいずれかに記載の医薬。
(9)関節症が変形性関節症である上記(8)記載の医薬。
(10)関節症が関節リウマチである上記(8)記載の医薬。
(11)経口剤である上記(1)乃至(10)のいずれかに記載の医薬。
(12)注射剤である上記(1)乃至(10)のいずれかに記載の医薬。
(13)ヒアルロン酸が配合された注射剤である上記(12)に記載の医薬。
以下の実施例1から5により製造された本化合物の物性における融点はYamato MP-21型融点測定器を使用して測定し、温度計の補正は行っていない。NMRスぺクトルはBruker AVANCEIII500型核磁気共鳴装置で測定し、内部標準としてテトラメチルシランを用いた。シリカゲルカラムクロマトグラフィーはシリカゲルPSQ100B(富士シリシア化学)を用いて行った。薄層クロマトグラフィーはSilica gel F254(Merck、No. 5715)を使用し、検出はUVランプ及び5 w/v%リンモリブデン酸-エタノール発色試薬、ヨウ素‐シリカゲルを用いた。また、試薬及び溶媒は市販品をそのまま用いた。
(1)3-アセチルアミノ-2-オキソクロメン-8-イルベンゼンスルホネートの製造
Mp. 229-231℃. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 2.15 (s, 3H), 7.22-7.34 (m, 2H), 7.58-7.89 (m, 6H), 8.58 (s, 1H), 9.81 (s, 1H).
Mp. 129-131℃. 1H-NMR (DMSO-d6) δ : 5.88 (s, 2H), 6.64 (s, 1H), 6.93-7.87 (m, 8H).
3-[(4-メトキシフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-メトキシベンゼンスルホネート [化合物1] の製造
3-[(4-ヒドロキシフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル 4-ヒドロキシベンゼンスルホネート [化合物19] の製造
塩酸2-オキソ-3-[[3-(トリフルオロメチル)フェニル]スルホニルアミノ]クロメン-8-イル 4-アミノベンゼンスルホネート [化合物46] の製造
4-[3-[(3-ニトロフェニル)スルホニルアミノ]-2-オキソクロメン-8-イル]オキシスルホニル安息香酸 [化合物49] の製造
(1)軟骨片の培養
ウシ中手指節関節軟骨片を48ウェルプレートの各ウェルに4個ずつ入れ、25μmol/Lの被験物質を含む基礎培地(D-MEM;Dulbecco's Modified Eagle Medium、2 mmol/Lグルタミン、25 mmol/L Hepes、100μg/mL ストレプトマイシン、100 IU/mL ペニシリン及び5.6μg/mLアンホテリシンBを含む)で2時間前処理した。ヒトリコンビナントIL-1α(3 ng/mL)を添加し、4日間、37℃、5 vol% CO2に設定したCO2インキュベーター中で培養した。培養上清及び軟骨片を回収し、それぞれ測定まで凍結保存した。
回収した軟骨片を、パパイン溶液〔1 mg/mLパパイン、100 mmol/Lリン酸ナトリウムpH 6.5、5 mmol/L L-システイン、5 mmol/Lエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム(EDTA)〕で、65℃、約16時間処理し可溶化した。得られた抽出液中のsGAG量を、アルシアンブルー染色法を応用した定量キットsGAG Alcian Blue Binding Kit(Wieslab AB)を用いて測定した。また、培養上清中のsGAGはパパイン処理を行わずに測定した。下式により、各sGAG遊離率を求め、sGAG遊離抑制率を算出した。
sGAG遊離率(%)=〔培養上清中の総sGAG量÷(培養上清中の総sGAG量+軟骨片中の総sGAG量)〕×100
sGAG遊離抑制率(%)=〔(IL-1α刺激sGAG遊離率−被験物質sGAG遊離率)÷(IL-1α刺激sGAG遊離率−無刺激sGAG遊離率)〕×100
(1)HFLS-OA細胞の培養
HFLS-OA細胞を2 vol%ウシ胎児血清(FBS)を含むD-MEMで104 cells/well/100μLとなるように96ウェルプレートに播種し、24時間培養した。被験物質(200μmol/L)とヒトリコンビナントTNF-α(10 ng/mL)を添加し、5日間培養した。
細胞増殖 ELISA、BrdU 発色キット(ロシュ・ダイアグノスティックス)を用い、キット添付のプロトコルに準じて実施した。HFLS-OA細胞を3日間培養した後、各ウェルにリン酸緩衝生理食塩水(PBS)に溶解した5-ブロモ-2'-デオキシウリジン(BrdU)10μL(100μmol/L、pH 7.4)を添加し、更に48時間培養した。各ウェルより培養上清を除去した後、200μL/wellの固定変性溶液を加えて30分放置して細胞の固定とDNAの変性を行った。固定変性溶液を完全に除去した後、100μLのペルオキシダーゼ標識抗BrdU抗体溶液を添加し、室温で90分間反応させた。PBSで洗浄後、各ウェルに100μLの基質液(テトラメチルベンジジン)を添加し、吸光度を測定した。TNF-α添加によるBrdUの取り込み増加を細胞増殖率100%として、各被験物質添加時の細胞増殖率を算出した。
(1)ウシ軟骨片の培養
ウシ中手指節関節軟骨片(直径4 mm)を24ウェルプレートの各ウェルに6〜8個ずつ入れ、基礎培地1 mLで37℃、5 vol% CO2に設定したCO2インキュベーター中で一晩培養した。その後、5、10又は20μmol/Lの被験物質を含む基礎培地で2時間培養し、ヒトリコンビナントIL-1α(3 ng/mL)を添加して更に8時間培養した。培養終了後、培養液を廃棄し、軟骨片にRNA安定化剤を添加して4℃で一晩インキュベートした後、軟骨片をはさみで細切し、マイクロチューブに入れてRNA抽出時まで凍結保存した。
Tissue Lyser(QIAGEN)を用いて、マイクロチューブに入った軟骨片を粉砕し(25Hz、5分、2回)、1mLのQIAzol Lysis Reagent(QIAGEN)を加えて懸濁し、200μLのクロロホルムを添加・混和後、遠心(4℃、1500 rpm)して上清を回収した。Total RNAは、上清をQIACube(QIAGEN)と RNeasy Micro Kit(QIAGEN)を用いて、抽出・精製した。cDNAは、Omniscript RT kit(QIAGEN)とOligo(dT)12-18 Primer(Invitrogen)を用いて、Total RNAより作製した。
上記(2)で抽出したTotal RNAから合成したcDNAを用いて、Light Cycler LC480(ロシュ・ダイアグノスティックス)による蛍光色素SYBR GREEN Iを用いた常法のリアルタイムPCR法により、軟骨基質分解酵素〔MMP(Matrix metalloproteinase)-1、MMP-3、ADAMTS(A Disintegrin and metalloprotease with thrombospondin motifs)-4及びADMTS-5〕の遺伝子発現量を測定した。検量線はDNA定量キットPicoGreen dsDNA Quantitation kit(Molecular Probes)で定量したPCR産物を102〜107 コピー/μLとなるように希釈し作成した。得られた各測定値より、内部標準のGlyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH)遺伝子10000 コピー当たりのコピー数を算出して、遺伝子発現量の抑制率を求め、最終的に各被検物質のIC50(μmol/L)及び95%信頼区間を算出した。
変形性関節症(OA)の病態モデル動物であるモノヨード酢酸ナトリウム(MIA)誘発OAラットを用いて、OAに伴う疼痛に対する本化合物の効果を調べるために、機械刺激に対する50%反応閾値(痛覚過敏の指標)及びMIA非投与後肢への重量負荷率(関節痛の指標)を測定した。
1.MIA誘発OAラットへの本化合物の反復経口投与試験
(1)MIA誘発OAラットの作製
6週齢雄性Wistar系ラットの右膝関節内に生理食塩液で調製したMIAを300μg/50μLの用量で単回投与し、左膝関節内には生理食塩液50μLを投与して、MIA誘発OAラットを作製した。また、正常対照群には、両膝の関節内に生理食塩液50μLを投与した。
実験動物の6週齢雄性Wistar系ラットは、MIA投与5-6日後のMIA非投与後肢への重量負荷率、MIA投与7日後の機械刺激に対する50%反応閾値(各測定方法は後述)及び体重を測定して、1群6匹として下記の5群に群編成を行った。
・正常対照群
・発症対照群
・被験薬 2 mg/kg/日群
・被験薬 10 mg/kg/日群
・被験薬 50 mg/kg/日群
被験薬は化合物60を0.5 w/v%のカルボキシメチルセルロースナトリウム(0.5%CMC)で懸濁して調製した。
群編成直後(MIA投与7日後)から、2、10及び50 mg/kg/日の用量で被験薬を28日間反復経口投与した。また、正常対照群及び発症対照群には5 mg/kg/日の用量で0.5%CMCを同様に投与した。
(4−1)機械刺激に対する50%反応閾値の測定(フォン・フライ試験)
群編成時(MIA投与7日後)及びMIA投与35日後に、底が金網の透明アクリルゲージに上記(2)記載の5群のラットを入れ、約3分間馴化させた後に、機械刺激に対する50%反応閾値を測定した。
測定は、Chaplanら(Journal of Neuroscience Methods、53巻、1号、55-63頁、1994年)及びDixonら(Annual Review of Pharmacology and Toxicology、20巻、441-462頁、1980年)の方法に準じ、フォン・フライ・フィラメント(von Frey filament、North Coast Medical Inc.製)を用いて行った。8本のフィラメント〔刺激荷重(g):0.4、0.6、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、15.0〕のうち、2.0 gのフィラメントより開始し、軽度にフィラメントが湾曲する程度の力で2〜3秒間、足底に対し垂直に当て、後肢が逃避反応を示した場合を陽性反応とした。陽性反応が見られた場合は一つ下の、反応がなかった場合は一つ上の強さのフィラメントで同様に刺激し、反応が陰性から陽性へ又は陽性から陰性へ変化した時点を最初の2反応とし、その後4回連続してup-down法により刺激を行った。合計6回の刺激に対する反応を用いて、機械刺激に対する50%反応閾値を測定し、各群の平均値±標準誤差を算出した。なお、陽性反応がないまま15.0 gの刺激まで行った場合は15.0 g、逆に陽性反応が0.4 gまで続いた場合は0.25 gを各々の閾値とした。
MIAの後肢膝関節内への投与によりOAを誘発した方のラットは疼痛症状を発症する。そのため、当該ラットにおいては、MIA投与後肢への体重の加重を避け、痛みのないMIA非投与後肢への体重負荷が上昇する。しかし、被験薬の投与で疼痛症状が改善した場合は、ラットはMIA投与後肢への加重が容易となり、その分MIA非投与後肢への重量負荷率が低下する。このMIA非投与後肢への重量負荷率を指標にして、本化合物の鎮痛作用を測定した。
MIA非投与後肢への重量負荷率は、群編成時(MIA投与5-6日後)及びMIA投与34日後の被験薬投与直前に、小動物用鎮痛評価装置(Incapacitance Tester:Linton Instrumentation社製)を用いて、上記(2)記載の5群のラットの左右の後肢への重量配分を測定し、以下の式を用いて求めた。被験薬の投与は上記(3)と同様に行った。
MIA非投与後肢への重量負荷率(%)
=〔(MIA非投与後肢への体重負荷−MIA投与後肢への体重負荷)÷(MIA非投与後肢への体重負荷+MIA投与後肢への体重負荷)〕×100
(1)MIA誘発OAラットの作製及び群編成
上記1.(1)及び(2)と同様に、MIA誘発OAラットを作製して、1群8匹として下記の9群に群編成を行った。
・正常対照群
・発症対照群
・HA群
・被験薬A 1μg/関節+HA群
・被験薬A 3μg/関節+HA群
・被験薬A 9μg/関節+HA群
・被験薬B 0.3μg/関節+HA群
・被験薬B 1μg/関節+HA群
・被験薬B 3μg/関節+HA群
被験薬A及びBとしてそれぞれ化合物17及び60を用い、被験薬A配合HA溶液中の被験薬Aの濃度が20、60及び180μg/mL、並びに被験薬B配合HA溶液中の被験薬Bの濃度が6、20及び60μg/mL となるように、10 v/v%のジメチルスルホキシド(DMSO)を含むPBSを用いて調製した。また、各配合溶液及びHA溶液のHA濃度は5 mg/mLに10 v/v%のDMSOを含むPBSを用いて調製した。
MIA投与7、12、19、26及び33日後に、被験薬配合HA溶液及びHA溶液をラットの右膝関節内に50μL投与した。また、正常対照群及び発症対照群には同様の方法で10 v/v%のDMSOを含むPBSを反復関節内投与した。
(3−1)機械刺激に対する50%反応閾値の測定(フォン・フライ試験)
上記1.(4)の(4−1)と同様に、群編成時(MIA投与7日後)及びMIA投与34日後に、上記(1)記載の9群のラットの機械刺激に対する50%反応閾値を測定した。
上記1.(4)の(4−2)と同様に、MIA非投与後肢への重量負荷率を群編成時(MIA投与5-6日後)及びMIA投与34日後の被験薬投与直前に、上記(1)記載の9群のラットの左右後肢への重量配分を測定し、MIA非投与後肢への重量負荷率を求めた。
関節リウマチの病態モデル動物であるコラーゲン誘発関節炎マウスを用いて、本化合物の関節リウマチに対する効果を調べる以下の実験を行った。
(1)コラーゲン誘発関節炎マウスの作製
3 mg/mLの牛軟骨由来II型コラーゲン液をフロイント完全アジュバントと等量混合してエマルジョンとし、6週齢雄性DBA/1Jマウスの尾根部皮内に150μg/0.1 mL/マウスを投与して一次感作した。偽処置群としてマウスの尾根部皮内に0.1 mLの生理食塩液を投与した。一次感作から21日後に、3 mg/mLのII型コラーゲン液に3 mmol/mLの塩酸を加えて2 mg/mLに希釈し、フロイント不完全アジュバントと等量混合してエマルジョンとし、一次感作したマウスの尾根部皮内に100μg/mL/マウスを投与して二次感作した。偽処置群の尾根根部皮内に0.1 mLの生理食塩液を投与した。
実験動物の6週齢雄性DBA/1Jマウスは、上記(1)の二次感作後に体重を測定して、体重を基準に1群14匹として下記の5群に群編成を行った。最終的に測定した動物数は1群当たり11乃至14匹であった。
・偽処置群
・発症対照群
・被験薬 2 mg/kg/日群
・被験薬 10 mg/kg/日群
・被験薬 50 mg/kg/日群
・イグラチモド 50 mg/kg/日群
被験薬(化合物60)及びイグラチモドを0.5 w/v%のカルボキシメチルセルロースナトリウム(0.5%CMC)で懸濁して各濃度に調製した。
II型コラーゲンの一次感作の21日後から65日後まで、2、10及び50 mg/kg/日の用量の被験薬又は50 mg/kg/日の用量のイグラチモドを、マウス用経口ゾンデを用いて1日1回反復経口投与した。また、偽処置群及び発症対照群には5 mg/kg/日の用量で0.5%CMCを同様に投与した。
群編成時及びII型コラーゲンの一次感作56日後に、上記(2)の各群のマウスについて、下記の関節炎スコア判定基準により四肢のスコアを判定し、それを加算して関節炎スコアとした。
0:症状なし(正常)
1:1本の指が赤く腫れている(1関節に浮腫)
2:2本以上の指が赤く腫れている(2関節以上又は足甲に浮腫)
3:指と踵が赤く腫れている(足根、足首の浮腫)
4:足全体の関節の動きが悪い(重度の浮腫又は関節の変形)
Claims (13)
- R1及びR2が同一又は異なって、アルコキシ、アルキル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、フェニル又は1若しくは2のハロゲンで置換されていてもよいフェニルである請求項1に記載の医薬。
- R1及びR2が同一又は異なって、アルコキシ、アルキル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、フェニル又は1若しくは2のハロゲンで置換されているフェニルである請求項2に記載の医薬。
- R1及びR2の両方がトリフルオロメチルで置換されているフェニルである請求項3に記載の医薬。
- R1又はR2の一方がトリフルオロメチルで置換されているフェニルである請求項3に記載の医薬。
- R1又はR2の一方がトリフルオロメチルで置換されているフェニルで、他方がハロゲンで置換されているフェニルである請求項5に記載の医薬。
- ハロゲンが臭素である請求項6に記載の医薬。
- 関節症の予防又は治療剤である請求項1乃至7のいずれか一項に記載の医薬。
- 関節症が変形性関節症である請求項8に記載の医薬。
- 関節症が関節リウマチである請求項8に記載の医薬。
- 経口剤である請求項1乃至10のいずれか一項に記載の医薬。
- 注射剤である請求項1乃至10のいずれか一項に記載の医薬。
- ヒアルロン酸が配合された注射剤である請求項12に記載の医薬。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015056815A JP6089055B2 (ja) | 2014-03-20 | 2015-03-19 | クマリン誘導体を含有する医薬 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2014058337 | 2014-03-20 | ||
JP2014058337 | 2014-03-20 | ||
JP2015056815A JP6089055B2 (ja) | 2014-03-20 | 2015-03-19 | クマリン誘導体を含有する医薬 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015193610A JP2015193610A (ja) | 2015-11-05 |
JP2015193610A5 JP2015193610A5 (ja) | 2016-11-10 |
JP6089055B2 true JP6089055B2 (ja) | 2017-03-01 |
Family
ID=54433006
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015056815A Active JP6089055B2 (ja) | 2014-03-20 | 2015-03-19 | クマリン誘導体を含有する医薬 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6089055B2 (ja) |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1994023714A1 (en) * | 1993-04-09 | 1994-10-27 | Toyama Chemical Co., Ltd. | Immunomodulator, cell adhesion inhibitor, and agent for treating and preventing autoimmune diseases |
AR007115A1 (es) * | 1996-05-15 | 1999-10-13 | Hoechst Ag | Cromanos sustituidos con sulfonamida, procedimiento para su preparacion, su empleo para la preparacion de medicamento o agente de diagnostico, asi como medicamento que los contiene |
DE102004063910B4 (de) * | 2004-07-05 | 2006-12-28 | Bioplanta Arzneimittel Gmbh | Trisubstituierte Benzopyranone sowie diese enthaltende Pflanzenextrakte und Mittel |
WO2006092739A1 (en) * | 2005-01-14 | 2006-09-08 | Glaxosmithkline Istrazivacki Centar Zagreb D.O.O. | Anti-inflammatory conjugates of macrolides and coumarins |
JP5325103B2 (ja) * | 2007-07-20 | 2013-10-23 | 中外製薬株式会社 | p27蛋白質誘導剤 |
TWI583677B (zh) * | 2012-09-21 | 2017-05-21 | 日本臟器製藥股份有限公司 | 香豆素衍生物 |
WO2015141775A1 (ja) * | 2014-03-20 | 2015-09-24 | 日本臓器製薬株式会社 | クマリン誘導体を有効成分として含有する治療・予防剤 |
-
2015
- 2015-03-19 JP JP2015056815A patent/JP6089055B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2015193610A (ja) | 2015-11-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2488642C (en) | Aryl carbonyl derivatives as glucokinase activators | |
KR101600374B1 (ko) | 텔로머라제 활성화 화합물 및 이의 사용 방법 | |
UA123725C2 (uk) | Заміщені поліциклічні похідні піридону та їх проліки | |
JP6091016B2 (ja) | クマリン誘導体 | |
JP6089055B2 (ja) | クマリン誘導体を含有する医薬 | |
WO2019120237A1 (zh) | 一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途 | |
Gutierrez-Lara et al. | Synthesis and in vitro AMPK activation of cycloalkyl/alkarylbiguanides with robust in vivo antihyperglycemic action | |
WO2014047447A2 (en) | Fto modulating compounds and methods of use | |
JP5924830B2 (ja) | クマリン誘導体を有効成分として含有する治療・予防剤 | |
Jiang et al. | The expression of MDM2 gene promoted chondrocyte proliferation in rats with osteoarthritis via the Wnt/β-catenin pathway | |
CN113387909A (zh) | 2,3-环氧丁二酰衍生物的医药用途 | |
CN109134491A (zh) | 双氢青蒿素衍生物在制备治疗非自身免疫滑膜炎药物中的应用 | |
CN116850180B (zh) | 软木花椒素在制备治疗类风湿关节炎的药物中的应用 | |
JPWO2011058943A1 (ja) | Mchr1アンタゴニスト活性を有する化合物とnpyy5受容体アンタゴニスト活性を有する化合物を組み合わせてなる医薬組成物 | |
CN117285461A (zh) | 一种8-喹啉磺酰胺-3g衍生物及其应用 | |
CN117143040A (zh) | 一种环丁烯二酮基苯并恶唑衍生物及其制备方法和应用 | |
Wasilewicz et al. | Genistein stimulates the viability and prevents myofibroblastic transformation in human trabecular meshwork cells stimulated by TGF-β | |
WO2012169571A1 (ja) | 新規なn-(ピリジン-2-イル)アルカンアミド誘導体およびそれらを有効成分とするship2阻害剤 | |
Gutierrez-Lara et al. | Research Article Synthesis and In Vitro AMPK Activation of Cycloalkyl/Alkarylbiguanides with Robust In Vivo Antihyperglycemic Action | |
CN114796494A (zh) | Pfkfb3的抑制剂在治疗视网膜退行性病变中的应用、药物和筛选方法 | |
CN106102726A (zh) | 4‑苄磺酰基‑2‑丁腈 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160920 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160920 |
|
RD07 | Notification of extinguishment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7427 Effective date: 20160926 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161019 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20161207 |
|
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20170111 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170117 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170206 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6089055 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |