JP6039321B2 - メタロチオネイン産生促進剤及び抗酸化剤 - Google Patents
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Description
メタロチオネインは上記の作用のほかに活性酸素のスカベンジャーの働きがあると報告されている。(非特許文献1参照)
皮膚への太陽紫外線の照射等によって活性酸素が生じ、活性酸素は皮膚に対してDNA損傷等の種々のダメージを加えることはよく知られている。
また、メタロチオネイン以外の多くの活性酸素のスカベンジャーは不安定なものが多い。
メタロチオネインの産生を促進する物質としては、高級脂肪酸亜鉛、金属錯体、ヒノキチオール又はその塩等が知られている。
ここでいう真珠とは,生きた真珠貝の中で球状または半球状(多少の変形を含む)に形成される代謝生産物であって,かつ、この外見しうる部分の主たる構成物質が、真珠貝の真珠層と等質であるものをいう。
真珠貝は貝殻に真珠層を有する貝類をいうが、二枚貝綱、腹足綱、頭足綱などのうち特定の古い系統の貝類を指し、例示すれば、アコヤガイ、シロチョウガイ、クロチョウガイ、ベニコチョウガイ、マベガイ、イガイ、ムラサキイガイ、ヤコウガイ、イケチョウガイ、カワシンジュガイ、カサガイ等が挙げられる。
このうち、アコヤガイ、シロチョウガイ、クロチョウガイが養殖も実施されており原料の確保の点から好ましい。
また、貝殻の内、殻皮層、稜柱層もブラシ、ヘラ、グラインダーを用いて取り除く。また、特開昭62−120319号公報、特開2003−250489号公報、特開2011−72207号公報等にも種々の方法が記載されているので任意の方法を選択すればよい。なお、貝殻付着物はある程度取り除いた方がよいが、殻皮層、稜柱層は場合によっては取り除く必要はない。
真珠は、有核の場合は必要により核を取り除いて用いる。
以上、真珠或いは真珠層を有する貝殻の一方又は両方を用いて、以下の可溶化を行うが可溶化をスムーズに行うために破砕・粉砕工程を必要に応じて加える。
破砕・粉砕は、金槌、棒等で破砕してもよいし、ジャイレトリクラッシャー 、コーンクラッシャー、シングルロールクラッシャー、ダブルロールクラッシャー 、インパクトクラッシャー、ボールミル、ハンマーミル、ロッドミル等のクラッシャーや粉砕機を用いて破砕・粉砕を行ってもよい。
加熱・焼成の条件は通常200〜2000℃で30分〜5時間実施する。
これに、酸を加えて水に可溶化する。
用いる酸は、カルシウムと反応して水に溶解するものであれば用いることができる。例示すれば、塩酸、硝酸、乳酸、酢酸、グリコール酸等の無機酸、有機酸を挙げることができる。
酸は真珠或いは真珠層を有する貝殻が、全て或いは一部が溶解する量を加える。この場合塩酸等の場合、発泡するので、必要に応じて、水を加えて、撹拌する。撹拌は加えた水の量、貝殻の粉砕程度、反応温度、発砲の程度等によって撹拌の強度を選択する。
また、反応時間、反応温度も諸条件によって変化するが、1mm以下に粉砕した場合は、10時間〜1週間程度が好ましい。
これを必要に応じて、濾過、遠心分離等の工程を加えて利用する。
色素類;黄色4号、青色1号、黄色202号等の厚生省令に定められたタール色素別表I及びIIの色素、クロロフィル、リボフラビン、クロシン、紅花、アントラキノン等の食品添加物として認められている天然色素等。
ビタミン類;ビタミンA、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE等。
その他;殺菌剤、防腐剤、その他製剤上必要な成分等。
真珠より核を取り除き、乳鉢ですり潰した。これを1050℃で、3時間焼成した後、放冷した。
これを0.89gに精製水500gを加え、室温で1時間撹拌したのち、ガラスろ紙 GA-55(ADVANTEC)で濾過後、8.5%塩酸でpH6.0に調整した。これを濾過滅菌した。
試験はヒト表皮角化細胞NHEKを用いて実施した。
細胞を24 ウェルプレートに 2×104 cells/well になるように播種した。24時間培養後、培養液を排除し、試験培地1ml に交換し、3日間培養した。3日後に培養液を回収し、回収した培地はメタロチオネイン測定キット(製品名Broad Check Metallotionein Kit 製造会社 フロンティアサイエンス研究所)の付属プロトコールに従い、メタロチオネイン1の測定を行った。
生細胞数はMTTアッセイにて計測した。詳細にはMTT溶液0.3ml を添加し、4時間培養後、0.04N−HClを含む 2-プロパノール0.3mlを加え、プレートシェーカーで 5分間振とうし、プレートリーダーにて540nmおよび630nmの吸光度を測定した。解析は、統計解析ソフトにて分散の検定を行い、分散が等しければ、t検定を行い、不等分散であれば、Welchのt検定を行った。
MTTアッセイより算出したMTT活性あたりのメタロチオネイン産生量について未添加と比較したところ、メタロチオネイン量の濃度依存性のある有意な増加が認められた。
以上のことから、ピュアパールミネラルを添加することで、メタロチオネインの産生促進作用があることが確認され、抗酸化に有効な製剤が得られることがわかった。
Claims (2)
- 真珠及び/又は真珠層を有する貝殻の可溶化物を有効成分とするメタロチオネイン産生促進剤。(但し、抗酸化及び美白用途を除く)
- 焼成した真珠及び/又は真珠層を有する貝殻の可溶化物を有効成分とする請求項1のメ
タロチオネイン産生促進剤。(但し、抗酸化及び美白用途を除く)
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