JP6013969B2 - 卵子又は胚のガラス化凍結保存用治具 - Google Patents
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Classifications
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- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
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Description
<ガラス化液吸収体の作製>
コロナ放電処理により、表面が易接着処理された厚さ250μm、ヘーズ値5.5%、全光線透過率91%の透明PETフィルム上に、接着層として、クラレ(株)製 PVA210(ケン化度87〜89mol%、重合度1000)の5%水溶液を乾燥時質量2g/m2で塗布した。当該塗布層が乾燥する前に、ガラス化液吸収層として、セルロース(キュプラ)繊維で構成された旭化成せんい(株)製の不織布であるBemliese(登録商標) SA14G(坪量14g/m2、密度0.19g/cm3)を当該塗布層に重ねて乾燥させた。以上のようにして、支持体上に接着層とガラス化液吸収層をこの順に有する実施例1のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA117(ケン化度98〜99mol%、重合度1700)を用いた以外は、実施例1と同様に、実施例2のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA217(ケン化度87〜89mol%、重合度1700)を用いた以外は、実施例1と同様に、実施例3のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA224(ケン化度87〜89mol%、重合度2400)を用いた以外は、実施例1と同様に、実施例4のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA617(ケン化度95〜96mol%、重合度1700)を用いた以外は、実施例1と同様に、実施例5のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、紙である大王製紙(株)製 エリエール(登録商標) プロワイプ ソフトマイクロワイパーS220(坪量22g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、実施例1と同様に、実施例6のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、紙である大王製紙(株)製 エリエール(登録商標) プロワイプ ソフトマイクロワイパーS220(坪量22g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、実施例2と同様に、実施例7のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、紙である大王製紙(株)製 エリエール(登録商標) プロワイプ ソフトマイクロワイパーS220(坪量22g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、実施例3と同様に、実施例8のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、紙である大王製紙(株)製 エリエール(登録商標) プロワイプ ソフトマイクロワイパーS220(坪量22g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、実施例4と同様に、実施例9のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、紙である大王製紙(株)製 エリエール(登録商標) プロワイプ ソフトマイクロワイパーS220(坪量22g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、実施例5と同様に、実施例10のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、不織布であるHAINAN XINLONG NONWOVENS CO.,LTD製レーヨン/PET混合の水流交絡法で製造された不織布YM74A(坪量35g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、実施例3と同様に、実施例11のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA103(ケン化度98〜99mol%、重合度300)を用いた以外は、実施例1と同様に、比較例1のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA203(ケン化度87〜89mol%、重合度300)を用いた以外は、実施例1と同様に、比較例2のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
接着層として、クラレ(株)製 PVA235(ケン化度87〜89mol%、重合度3500)を用いた以外は、実施例1と同様に、比較例3のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
ガラス化液吸収層として、紙である大王製紙(株)製 エリエール(登録商標) プロワイプ ソフトマイクロワイパーS220(坪量22g/m2、密度0.21g/cm3)を用いた以外は、比較例3と同様に、比較例4のガラス化液吸収体を作製した。
<ガラス化液吸収体の作製>
濾紙であるアドバンテック社製濾紙No.5C(坪量120g/m2、密度0.57g/cm3)をそのまま用いて比較例5のガラス化液吸収体とした。
<ガラス化液吸収体の作製>
無色透明なフィルムである透明PETフィルム(厚さ250μm、ヘーズ値5.5%、全光線透過率91%)をそのまま用いて比較例6のガラス化液吸収体とした。
<ガラス化液吸収体の作製>
三菱製紙(株)製コート紙(坪量130g/m2、密度1.24g/cm3)をそのまま用いて比較例7のガラス化液吸収体とした。
実施例1〜11、及び比較例1〜7のガラス化液吸収体を50mm角にカットしたものをヘーズ値測定用サンプルとした。更に、水:エチレングリコール=70:30(対容積)の比率で混合してガラス化液を調製して、50mm角にカットした実施例1〜11、比較例1〜7のサンプルを前記ガラス化液に10秒間浸漬し、ゴムロールで絞り余分なガラス化液を除去し、ガラス化液を吸収したときの全光線透過率測定用サンプルとした。
TMダブルビーム方式ヘーズコンピューター、型式HZ−2(スガ試験機(株)製)にて、上記で用意したヘーズ値測定用サンプルのヘーズ値をJIS K7136(プラスチック−透明基材のヘーズの求め方)に従って測定し、また同機を利用して全光線透過率測定用サンプルの全光線透過率をJIS K7361−1(プラスチック−透明材料の全光線透過率の試験方法−第1部)に従って測定した。この結果を表1に示す。
実施例1〜11、及び比較例1〜7の各ガラス化液吸収体を幅2mm、長さ50mmの短冊状にカットした。評価においては、疑似卵子として直径0.1mmのガラスビーズを用いた。水:エチレングリコール=70:30(対容積)の比率で混合して調製したガラス化液に沈めた前記ガラスビーズ1個をマイクロピペットにて2μLのガラス化液と共に吸い込み、前記短冊状にカットしたガラス化液吸収体に滴下付着させた。透過型顕微鏡(オリンパス(株)製、SZH−121)にて、ガラス化液吸収体に滴下した当該ガラスビーズを視認できるかどうかを以下の基準で評価した。これらの結果を、表1の「卵子または胚の確認時の作業性」の項目に示す。
○:疑似卵子の形態が容易に確認できる。
×:疑似卵子の存在の確認が困難またはできない。
実施例1〜11、及び比較例1〜7の各ガラス化液吸収体を幅2mm、長さ50mmの短冊状にカットした。ガラス化液の吸収性の評価においては、ガラス化液として、シグマアルドリッチ社製 修正TCM199培地に、20容積%血清、15容積%DMSO、15容積%エチレングリコール、0.2容積%スクロースが含まれる組成のものを用いた。上記組成のガラス化液を短冊状にカットしたガラス化液吸収体上に、マイクロピペットを用いて2μL滴下付着させた。滴下付着後、ガラス化液吸収体上に付着したガラス化液の液滴の様子を目視で確認し、吸収性を以下の基準で評価した。
◎:ガラス化液滴下付着後、10秒未満でガラス化液が全て吸収された。
○:ガラス化液滴下付着後、10秒未満でガラス化液がほぼ吸収された。
×:ガラス化液滴下付着後、ガラス化液の吸収に10秒以上を要した。または吸収されなかった。
2a ガラス化液吸収体
2b ガラス化液吸収体
2c ガラス化液吸収体
2d ガラス化液吸収体
3 ガラス化液吸収層
4 支持体
5 ガラス化凍結保存用治具
Claims (1)
- 支持体上に接着層とガラス化液吸収層をこの順に有するガラス化液吸収体を少なくとも有する卵子又は胚のガラス化凍結保存用治具であって、該接着層は重合度が700〜3000のポリビニルアルコールを含有し、該ガラス化液吸収体のガラス化液を吸収したときの全光線透過率が60%以上である卵子又は胚のガラス化凍結保存用治具。
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