JP5982409B2 - Cd70に対する抗体 - Google Patents
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Description
本発明は、ヒトCD70タンパク質へ高親和性で結合し、且つ腫瘍細胞増殖の強力な阻害を示す、抗体及び抗原結合断片に関する。
サイトカイン受容体CD27は、細胞増殖及び分化に加え、アポトーシスにおいて役割を果たす、腫瘍壊死因子受容体(TFNR)スーパーファミリーの一員である。CD27のリガンドは、CD70であり、これはリガンドの腫瘍壊死因子ファミリーに属する。CD70は、2つの可能性のあるN-結合グリコシル化部位を有する20個のアミノ酸の親水性N-末端ドメイン及びC-末端ドメインを有する193個のアミノ酸ポリペプチドである(Goodwin, R.G.らの文献、(1993) Cell 73:447-56;Bowmanらの文献、(1994) Immunol 152: 1756-61)。これらの特徴を基に、CD70は、細胞外C-末端部分を有するII型膜貫通タンパク質であると決定された。
ヒトCD70タンパク質に結合し、且つ先行技術に説明されたCD70抗体とは異なる、一般にはこれを上回る特性を示す抗体又はそれらの抗原結合断片(本明細書においてCD70抗体と称される)を、本明細書において提供する。これらの抗体の優れた特性は、ヒト療法、特にCD70-発現している癌、同じく免疫学的障害の治療における使用に関して利点がある。
(a)ヒトCD70中のアミノ酸配列
(b)アカゲザル(Macaca mulatta)及びカニクイザル(Macaca cynomolgus)のCD70ホモログとの交差反応性;
(c)未変性ヒトCD70及び熱変性された組換えヒトCD70の両方への結合:
により特徴付けられる。
配列番号:49, 配列番号:50, 配列番号:51, 配列番号:52, 配列番号:53, 配列番号:54, 配列番号:55, 配列番号:56, 配列番号:57, 配列番号:58, 配列番号:59, 配列番号:262 及び 配列番号:263、並びに列挙した配列のいずれか1つの配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換を含み;
該可変重鎖CDR2は:
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはD、T、S又はEであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはIであり、
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはN、S、T又はYであり、
X4は、任意のアミノ酸、好ましくはN、M、S又はTであり、
X5は、任意のアミノ酸、好ましくはE、D、Y又はHであり、
X6は、任意のアミノ酸、好ましくはG、D、S又はNであり、
X7は、任意のアミノ酸、好ましくはG、Y、S、D又はMであり、
X8は、任意のアミノ酸、好ましくはT、E、S、N、Y又はRであり、
X9は、任意のアミノ酸、好ましくはT、A又はRであり、及び
X10は、任意のアミノ酸、好ましくはG又はSであるもの;並びに、
配列番号:30、配列番号:32、配列番号:33、配列番号:34、配列番号:249、配列番号:258及び配列番号:259のアミノ酸配列、並びに列挙した配列のいずれか1つの配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を任意に含み、ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換を含み;並びに
該可変重鎖CDR1は:
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはV、G又はAであるもの;
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはD、T、S、N又はGであり、及び
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはY、S又はPであるもの;並びに、
配列番号:10, 配列番号:15, 配列番号:16, 配列番号:248, 配列番号:256 及び 配列番号:257のアミノ酸配列、並びに列挙した配列のいずれか1つの配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を任意に含み、ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換を含む。
該可変軽鎖CDR2は:
(a)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはN又はSであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはN、S又はAであり、及び
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはS、N又はTであるもの;
(b)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはY、V又はLであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはK又はSであり、
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはH又はNであり、及び
X4は、任意のアミノ酸、好ましくはG又はSであるもの;
(c)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはV、I又はYであり、及び
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはN又はTであるもの;
(d)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはYであり、及び
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはR又はMであるもの;
(e)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはD又はGであり、及び
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはS又はIであるもの;並びに、
配列番号:113、配列番号:116、配列番号:120及び配列番号:270のアミノ酸配列、並びに列挙した配列のいずれか1つの配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を任意に含み、ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換を含み、並びに
該可変軽鎖CDR1は:
(a)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはS又はTであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはV又はAであり、
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはS又はTであり、
X4は、任意のアミノ酸、好ましくはS、T又はGであり、
X5は、任意のアミノ酸、好ましくはN又はHであり、
X6は、任意のアミノ酸、好ましくはG、D又はEであるもの;
(b)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはS、N又はIであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはG又はAであり、
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはN又はDであり、
X4は、任意のアミノ酸、好ましくはN又はSであり、
X5は、任意のアミノ酸、好ましくはV又はIであり、
X6は、任意のアミノ酸、好ましくはN又はSであるもの;
(c)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはG又はWであるもの;
(d)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはS又はTであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはE又はRであり、
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはR又はNであり、
X4は、任意のアミノ酸、好ましくはG又はHであり、
X5は、任意のアミノ酸、好ましくはT又はAであるもの;
(e)
X1は、任意のアミノ酸、好ましくはV又はLであり、
X2は、任意のアミノ酸、好ましくはK又はTであり、
X3は、任意のアミノ酸、好ましくはT又はDであるもの;並びに、
配列番号:82、配列番号:87、配列番号:88、配列番号:250、配列番号:251、配列番号:252、配列番号:253、配列番号:267及び配列番号:268のアミノ酸配列、並びに列挙した配列のいずれか1つの配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を任意に含み、ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換を含む。
(i)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:27を含むHCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:160を含むLCDR3、配列番号:119を含むLCDR2、及び配列番号:250を含むLCDR1;
(ii)配列番号:49を含むHCDR3、配列番号:26を含むHCDR2、配列番号:10を含むHCDR1、配列番号:148を含むLCDR3、配列番号:109を含むLCDR2、及び配列番号:77を含むLCDR1;
(iii)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:27を含むHCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:149を含むLCDR3、配列番号:110を含むLCDR2、及び配列番号:78を含むLCDR1;
(iv)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:28を含むHCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:150を含むLCDR3、配列番号:111を含むLCDR2、及び配列番号:79を含むLCDR1;
(v)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:28を含むHCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:151を含むLCDR3、配列番号:110を含むLCDR2、及び配列番号:80を含むLCDR1;
(vi)配列番号:51を含むHCDR3、配列番号:29を含むHCDR2、配列番号:12を含むHCDR1、配列番号:152を含むLCDR3、配列番号:110を含むLCDR2、及び配列番号:80を含むLCDR1;
(vii)配列番号:52を含むHCDR3、配列番号:30を含むHCDR2、配列番号:13を含むHCDR1、配列番号:153を含むLCDR3、配列番号:112を含むLCDR2、及び配列番号:81を含むLCDR1;
(viii)配列番号:53を含むHCDR3、配列番号:31を含むHCDR2、配列番号:14を含むHCDR1、配列番号:154を含むLCDR3、配列番号:113を含むLCDR2、及び配列番号:82を含むLCDR1;
(ix)配列番号:54を含むHCDR3、配列番号:32を含むHCDR2、配列番号:15を含むHCDR1、配列番号:155を含むLCDR3、配列番号:114を含むLCDR2、及び配列番号:83を含むLCDR1;
(x)配列番号:55を含むHCDR3、配列番号:33を含むHCDR2、配列番号:16を含むHCDR1、配列番号:156を含むLCDR3、配列番号:115を含むLCDR2、及び配列番号:84を含むLCDR1;
(xi)配列番号:56を含むHCDR3、配列番号:34を含むHCDR2、配列番号:17を含むHCDR1、配列番号:157を含むLCDR3、を配列番号:116を含むLCDR2、及び配列番号:85を含むLCDR1;
(xii)配列番号:57を含むHCDR3、配列番号:35を含むHCDR2、配列番号:18を含むHCDR1、配列番号:158を含むLCDR3、配列番号:117を含むLCDR2、及び配列番号:84を含むLCDR1;
(xiii)配列番号:58を含むHCDR3、配列番号:36を含むHCDR2、配列番号:19を含むHCDR1、配列番号:159を含むLCDR3、配列番号:118を含むLCDR2、及び配列番号:86を含むLCDR1;
(xiv)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:27を含むHCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:161を含むLCDR3、配列番号:120を含むLCDR2、及び配列番号:88を含むLCDR1;
(xv)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:27を含む HCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:162を含むLCDR3、配列番号:121を含むLCDR2、及び配列番号:89を含むLCDR1;
(xvi)配列番号:50を含むHCDR3、配列番号:27を含むHCDR2、配列番号:11を含むHCDR1、配列番号:163を含むLCDR3、配列番号:122を含むLCDR2、及び配列番号:90を含むLCDR1;
(xvii)配列番号:51を含むHCDR3、配列番号:29を含むHCDR2、配列番号:12を含むHCDR1、配列番号:164を含むLCDR3、配列番号:123を含むLCDR2、及び配列番号:91を含むLCDR1;
(xviii)配列番号:51を含むHCDR3、配列番号:29を含むHCDR2、配列番号:12を含むHCDR1、配列番号:164を含むLCDR3、配列番号:124を含むLCDR2、及び配列番号:91を含むLCDR1;
(xix)配列番号:59を含むHCDR3、配列番号:37を含むHCDR2、配列番号:12を含むHCDR1、配列番号:165を含むLCDR3、配列番号:125を含むLCDR2、及び配列番号:92を含むLCDR1;
(xx)配列番号:59を含むHCDR3、配列番号:37を含むHCDR2、配列番号:20を含むHCDR1、配列番号:165を含むLCDR3、配列番号:126を含むLCDR2、及び配列番号:93を含むLCDR1;
(xxi)配列番号:59を含むHCDR3、配列番号:37を含むHCDR2、配列番号:20を含むHCDR1、配列番号:166を含むLCDR3、配列番号:127を含むLCDR2、及び配列番号:92を含むLCDR1;
(xxii)配列番号:59を含むHCDR3、配列番号:37を含むHCDR2、配列番号:20を含むHCDR1、配列番号:167を含むLCDR3、配列番号:128を含むLCDR2、及び配列番号:94を含むLCDR1;
(xxiii)配列番号:59を含むHCDR3、配列番号:37を含むHCDR2、配列番号:20を含むHCDR1、配列番号:168を含むLCDR3、配列番号:110を含むLCDR2、及び配列番号:95を含むLCDR1;
(xxiv)配列番号:262を含むHCDR3、配列番号:258を含むHCDR2、配列番号:256を含むHCDR1、配列番号:271を含むLCDR3、配列番号:110を含むLCDR2、及び配列番号:267を含むLCDR1;
(xxv)配列番号:263を含むHCDR3、配列番号:259を含むHCDR2、配列番号:257を含むHCDR1、配列番号:273を含むLCDR3、配列番号:270を含むLCDR2、及び配列番号:268を含むLCDR1。
アミノ酸配列
配列番号:177, 配列番号:178, 配列番号:179, 配列番号:180, 配列番号:181, 配列番号:182, 配列番号:183, 配列番号:184, 配列番号:185, 配列番号:186, 配列番号:187, 配列番号:188, 配列番号:212, 配列番号:213, 配列番号:214, 配列番号:215, 配列番号:216, 配列番号:217, 配列番号:218, 配列番号:219, 配列番号:220, 配列番号:221, 配列番号:222, 配列番号:223, 配列番号:224, 配列番号:225, 配列番号:226, 配列番号:227, 配列番号:228, 配列番号:229, 配列番号:274 及び 配列番号:275、及び列挙した配列の1つと少なくとも90%、95%、97%、98%又は99%の配列同一性を示すアミノ酸配列:からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメインを含み、並びに、任意にアミノ酸配列
配列番号:189, 配列番号:190, 配列番号:191, 配列番号:192, 配列番号:193, 配列番号:194, 配列番号:195, 配列番号:196, 配列番号:197, 配列番号:198, 配列番号:199, 配列番号:200, 配列番号:201, 配列番号:202, 配列番号:203, 配列番号:204, 配列番号:205, 配列番号:206, 配列番号:207, 配列番号:208, 配列番号:209, 配列番号:210, 配列番号:211, 配列番号:223, 配列番号:230, 配列番号:231, 配列番号:232, 配列番号:233, 配列番号:234, 配列番号:234, 配列番号:236, 配列番号:237, 配列番号:238, 配列番号:239, 配列番号:240, 配列番号:241, 配列番号:242, 配列番号:243, 配列番号:244, 配列番号:245, 配列番号:245, 配列番号:247, 配列番号:248, 配列番号:276 及び 配列番号:277、及び列挙した配列の1つと少なくとも90%、95%、97%、98%又は99%の配列同一性を示すアミノ酸配列:
からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメインを含む、単離された抗体又はそれらの抗原結合断片を含む。
(i)配列番号:223のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:241のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(ii)配列番号:177のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:189のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(iii)配列番号:178のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:190のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(iv)配列番号:179のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:191のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(v)配列番号:179のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:192のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(vi)配列番号:180のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:193のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(vii)配列番号:181のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:194のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(viii)配列番号:182のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:195のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(ix)配列番号:183のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:196のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(x)配列番号:184のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:197のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xi)配列番号:185のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:198のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xii)配列番号:186のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:199のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xiii)配列番号:187のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:200のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xiv)配列番号:178のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:201のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xv)配列番号:178のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:202のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xvi)配列番号:178のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:203のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xvii)配列番号:178のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:204のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xviii)配列番号:180のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:205のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xix)配列番号:180のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:206のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xx)配列番号:188のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:207のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxi)配列番号:188のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:208のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxii)配列番号:188のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:209のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxiii)配列番号:188のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:210のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxiv)配列番号:188のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:211のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxv)配列番号:274のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:276のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxvi)配列番号:275のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:277のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン。
従って、CD70抗体又はそれらの抗原結合断片の好ましい実施態様は、重鎖可変ドメインを含むものであり、ここで該可変重鎖CDR3は、配列番号:50のアミノ酸配列又はそれらの配列バリアントを含むか又はそれらからなり、ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換を含む。
該可変重鎖CDR3は、配列番号:50のアミノ酸配列又はそれらの配列バリアントを含むか又はそれらからなり;
該可変重鎖CDR2は、配列番号:27、配列番号:249からなる群から選択されるアミノ酸配列及びそれらの配列バリアントを含むか又はそれらからなり;並びに
該可変重鎖CDR1は、配列番号:11、配列番号:248からなる群から選択されるアミノ酸配列及びそれらの配列バリアントを含むか又はそれらからなり;ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含む。
(a)該可変重鎖CDR3が、
該可変重鎖CDR2が、
該可変重鎖CDR1が、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含むもの;
(b)該可変重鎖CDR3が、
該可変重鎖CDR2が、
該可変重鎖CDR1が、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含むもの;
(c)該可変重鎖CDR3が、
該可変重鎖CDR2が、
該可変重鎖CDR1が、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含むもの。
該可変軽鎖CDR2は、配列番号:119、配列番号:110及び列挙した配列の配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;並びに
該可変軽鎖CDR1は、配列番号:87、配列番号:250、配列番号:251、配列番号:252、配列番号:253及び列挙した配列の配列バリアント:からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、並びに、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含む。
(a)該可変軽鎖CDR3が、
該可変軽鎖CDR2が、
該可変軽鎖CDR1が、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含むもの;
(b)該可変軽鎖CDR3が、
該可変軽鎖CDR2が、
該可変軽鎖CDR1が、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含むもの。
該可変重鎖CDR3は、
該可変重鎖CDR2は、
該可変重鎖CDR1は、
該可変軽鎖CDR3は、
該可変軽鎖CDR2は、
該可変軽鎖CDR1は、
ここで該配列バリアントは、列挙した配列中に1、2又は3個のアミノ酸置換(例えば、保存的置換、ヒト化置換又は親和性バリアント)を含むもの:である。
アミノ酸配列配列番号:178, 配列番号:212, 配列番号:213, 配列番号:214, 配列番号:215, 配列番号:216, 配列番号:217, 配列番号:218, 配列番号:219, 配列番号:220, 配列番号:221, 配列番号:222, 配列番号:223, 配列番号:224, 配列番号:225, 配列番号:226, 配列番号:227, 配列番号:228, 配列番号:229, 配列番号:274 及び 配列番号:275、及び列挙した配列の1つと少なくとも90%、95%、97%、98%又は99%の配列同一性を示すアミノ酸配列:からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメインを含み、並びに、任意にアミノ酸配列配列番号:201, 配列番号:230, 配列番号:231, 配列番号:232, 配列番号:233, 配列番号:234, 配列番号:234, 配列番号:236, 配列番号:237, 配列番号:238, 配列番号:239, 配列番号:240, 配列番号:241, 配列番号:242, 配列番号:243, 配列番号:244, 配列番号:245, 配列番号:245, 配列番号:247, 配列番号:248, 配列番号:276 及び 配列番号:277 、及び列挙した配列の1つと少なくとも90%、95%、97%、98%又は99%の配列同一性を示すアミノ酸配列:からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメインを任意に含む、単離された抗体又はそれらの抗原結合断片を含む。
(i)配列番号:223のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:241のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(ii)配列番号:178のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:190のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(iii)配列番号:212のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:230のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(iv)配列番号:213のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:231のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(v)配列番号:214のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:232のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(vi)配列番号:215のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:235のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(vii)配列番号:216のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:234のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(viii)配列番号:217のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:235のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(ix)配列番号:218のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:236のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(x)配列番号:219のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:237のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xi)配列番号:220のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:238のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xii)配列番号:221のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:239のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xiii)配列番号:222のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:240のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xiv)配列番号:224のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:242のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xv)配列番号:225のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:243のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xvi)配列番号:226のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:244のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xvii)配列番号:227のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:245のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xviii)配列番号:228のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:246のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xix)配列番号:229のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:247のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xx)配列番号:223のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:244のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン;
(xxi)配列番号:223のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号:245のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン。
前述の態様及び実施態様において、CD70抗体又はそれらの抗原結合断片は、各々、下記の特徴又は特性の1つ以上、又は任意の組合せを示すことができる:
前記抗体又は抗原結合断片は、ヒトCD70へ高親和性で結合し、Fab断片として試験される場合、ヒトCD70に関するオフレート7×10-4 s-1以下、好ましくは5×10-4 s-1以下、及び典型的には0.4×10-4 s-1〜4.8×10-4 s-1の範囲を示すことができる。
前記抗体又は抗原結合断片は、CD70-発現している細胞の表面のヒトCD70と高親和性で結合することができる。
前記抗体又は抗原結合断片は、サル起源のCD70、具体的にはアカゲザル(Macaca mulatta)及びカニクイザル(Macaca cynomolgus)のCD70ホモログとの交差反応性を示すことができる。
前記抗体又は抗原結合断片は、37℃の貯蔵条件下、及び凍結-解凍サイクルにおいて、高度に安定することができ、このことも大きいコスト削減要因である。
前記抗体は、例えば、癌細胞若しくは他の悪性細胞、又は免疫細胞などの、CD70-発現している細胞に対し、ADCCを示すことができる。
前記抗体又は抗原結合断片は、CD70-発現している細胞のアポトーシスを誘導することができる。
前記抗体は、本明細書の別所記載のように、抗体エフェクター機能を増強する改変などの、Fc領域の改変を含むことができる。特に前記抗体は、非フコシル化IgGであることができる。
なお更なる本発明の態様は、特に癌の治療における、先に列記したCD70抗体を使用する医学的治療方法に関する。
本発明は、下記の実施例及び添付図面を参照し、更に理解されるであろう:
「抗体」又は「免疫グロブリン」−本明細書で使用する用語「免疫グロブリン」は、何らかの関連のある特異的な免疫反応性を有するかどうかに関わらず、2本の重鎖及び2本の軽鎖の組合せを有するポリペプチドを含む。「抗体」とは、関心対象の抗原(例えばヒトCD70)に対し有意な既知の特異的免疫反応活性を有するそのような集成体をいう。用語「CD70抗体」は、ヒトCD70タンパク質に関して免疫学的特異性を示す抗体を意味するように本明細書において使用する。本明細書の別所に記載するように、ヒトCD70に関する「特異性」は、CD70の種ホモログとの交差反応を除外しない。抗体及び免疫グロブリンは、軽鎖と重鎖の間の鎖内共有結合を伴う又は伴わずに、軽鎖及び重鎖で構成される。脊椎動物系の基本的免疫グロブリン構造は、かなり良く理解されている。
1.残基の数により決定された、最も近いマッチングのヒトカノニカル構造クラスと、同一の長さ、
2.対応するヒトH1及びH2のカノニカル構造クラスに関して説明された重要なアミノ酸残基との、少なくとも33%の同一性、好ましくは少なくとも50%の同一性。
(前述の解析を目的として、H1及びH2ループは、個別に処理され、且つ各々その最も近いマッチングのヒトカノニカル構造クラスに対し比較されることに留意されたい)。
1.残基の数により決定された、最も近いマッチングのヒトの構造クラスと、同一の長さ、
2.Vλ又はVκレパトアのいずれかからの、対応するヒトL1又はL2のカノニカル構造クラスに関して説明された重要なアミノ酸残基との、少なくとも33%の同一性、好ましくは少なくとも50%の同一性。
(前述の解析を目的として、L1及びL2ループは、個別に処理され、且つ各々その最も近いマッチングのヒトカノニカル構造クラスに対し比較されることに留意されたい)。
特定の態様において、本明細書に提供する抗体及びそれらの抗原結合断片は、ヒトCD70へ高親和性で結合する。ヒトCD70へ高親和性で結合する抗体又はそれらの抗原結合断片は、ヒトCD70について、及びより特定するとヒトCD70の細胞外ドメインについて、約10nM以下、又は1nM以下、又は0.1nM以下、又は10pM以下の結合親和性(KD)を示すことができる。
特定の態様において、本明細書に提供するCD70抗体又はそれらの抗原結合断片は、高親和性でヒトCD70に結合し、且つCD70とCD27の間の相互作用をブロックすることができる。
特定の態様において、本明細書記載のCD70抗体は、ヒトCD70の細胞外ドメイン内のエピトープへ結合する。
用語「エピトープ」とは、抗体と接触する抗原(例えばヒトCD70)の部分をいう。エピトープは、線状である、すなわちアミノ酸の1つの配列への結合に関与するか、又は高次構造である、すなわち必ずしも近接していない抗原の様々な領域のアミノ酸の2以上の配列への結合に関与するかであることができる。
(a)ヒトCD70中のアミノ酸配列
(b)アカゲザル(Macaca mulatta)及びカニクイザル(Macaca cynomolgus)のCD70ホモログとの交差反応性;
(c)未変性ヒトCD70及び熱変性された組換えヒトCD70への結合:
を示す。
好ましいCD70抗体41D12(ARGX-110)を含む、本明細書記載のCD70抗体は、腎臓癌細胞株において部分的インターナリゼーションを示し、これは抗体のインターナリゼーションが786-O腎臓癌細胞において試験される場合、結合した抗体の実質的割合、すなわち少なくとも30〜40%は、37℃でのインキュベーションの6時間後、更には24時間後であっても、外部にあり続けることを意味する。加えて、CD70抗体は、遅い速度のインターナリゼーションを示すこともできる。これに関して、CD70抗体は、参照CD70抗体9D1(VH配列番号:178;VL配列番号:190)よりもより遅い速度でインターナリゼーションされる場合、緩徐なインターナリゼーションを示すとみなされる。
更に別の態様において、本明細書記載の抗体又はそれらの抗原結合断片は、ラクダ科ファミリーの種のVHドメイン又はVLドメインから得られる、少なくとも1つの超可変ループ又は相補性決定領域を含むことができる。特に該抗体又は抗原結合断片は、ヒトCD70抗原による、非近交系ラクダ科動物、例えばラマの能動免疫により得られた、VH及び/又はVLドメイン、又はそれらのCDRを含み得る。
ラクダ科動物通常型抗体は、引用により本明細書中に組み込まれているUS 12/497,239に考察されているように、下記の要因のために、ヒト治療薬としての有用性のある抗体の調製のための都合の良い出発点を提供する:
1)ラクダ科動物VH及びVLドメインとそれらのヒト対応物の間の高い%配列相同性;
2)ラクダ科動物VH及びVLドメインのCDRと、それらのヒト対応物(すなわち、ヒト-様カノニカルフォールド構造及びカノニカルフォールドのヒト-様組合せ)の間の高度な構造相同性。
ラクダ科動物(例えばラマ)のプラットフォームはまた、得ることができるCD70抗体の機能多様性に関して著しい利点を提供する。
工程2. 生殖細胞系列化に使用される特異的ヒト生殖細胞系列ファミリーメンバーの選択。これは、最高の相同性を伴う生殖細胞系列、又は同じファミリー由来の別の生殖細胞系列ファミリーメンバーであることが好ましい。
工程3. 選択されたヒト生殖細胞系列に最も近いラクダ科動物生殖細胞系列に関するアミノ酸利用の表を基にした生殖細胞系列化について考えられる好ましい位置の同定。
工程4. 最も近いヒト生殖細胞系列から逸脱しているラクダ科動物生殖細胞系列におけるアミノ酸を変更する試み;FR残基の生殖細胞系列化は、CDR残基よりも好ましい。
b. 選択されたヒト生殖細胞系列ファミリーメンバーから逸脱しているが、同じファミリーの他の生殖細胞系列において使用される位置も、生殖細胞系列化プロセスにおいて扱うことができる。
c. 選択されたヒト生殖細胞系列への追加のミスマッチ(例えば、追加の体細胞変異に起因する)も、扱うことができる。
ラクダ科とヒトの生殖細胞系列VH及びVLの間の%配列同一性を分析する前に、それらのカノニカルフォールドを最初に決定することができ、これはH1及びH2又はL1及びL2(及びL3)についてカノニカルフォールドの同一の組合せを持つヒト生殖細胞系列セグメントのファミリーの同定を可能にする。引き続き、関心対象のラクダ科可変領域との最高度の配列相同性を有するヒト生殖細胞系列ファミリーメンバーを、配列相同性のスコア化のために選択することができる。超可変ループL1、L2、L3、H1及びH2のショティアカノニカルクラスの決定を、www.bioinf.org.uk/abs/chothia.htmlのウェブページにおいて公に入手可能なバイオインフォマティクスツールにより実行することができる。このプログラムのアウトプットは、データファイルにおける重要な残基の必要要件を示している。これらのデータファイルにおいて、重要な残基の位置が、各位置で許容されるアミノ酸と共に示される。該抗体の可変領域の配列は、インプットとして入力し、且つカバット番号付けスキームに割りあてるために、最初にコンセンサス抗体配列と並置する。カノニカルフォールドの分析は、Martin及びThorntonにより開発された自動化された方法(Martinらの文献、J. Mol. Biol. 263:800-815 (1996))により誘導された重要残基鋳型のセットを使用する。個々のフレームワーク領域の境界は、ショティアの番号付けスキームの改作であるIMGT番号付けスキーム(Lefrancらの文献、NAR 27:209-212 (1999);http://imgt.cines.fr)を用いて割りあてることができる。
本明細書に開示された分子と「交差競合する」モノクローナル抗体又はそれらの抗原結合断片は、本CD70抗体が結合する部位と同一であるか、又はその部位と重複する部位でヒトCD70に結合するものである。競合するモノクローナル抗体又はそれらの抗原結合断片は、例えば抗体競合アッセイにより、同定することができる。例えば、精製された又は部分的に精製されたヒトCD70の試料は、固形支持体に結合することができる。次に本発明の抗体化合物又はそれらの抗原結合断片、及びそのような本発明の抗体化合物と競合し得ることが疑われるモノクローナル抗体又はそれらの抗原結合断片が添加される。これら2種の分子の一方は、標識されている。標識化合物及び非標識化合物が、CD70上の個別の離れた部位に結合する場合、標識化合物は、疑わしい競合する化合物が存在するかどうかに関わらず、同じレベルで結合するであろう。しかしこの相互作用の部位が同じ又は重複する場合、非標識化合物は競合し、且つ該抗原に結合した標識化合物の量は減少するであろう。非標識化合物が過剰に存在する場合、結合するとしても非常にわずかな標識化合物が結合するであろう。本発明の目的のために、競合するモノクローナル抗体又はそれらの抗原結合断片は、本抗体化合物のCD70への結合を、約50%、約60%、約70%、約80%、約85%、約90%、約95%、又は約99%減少するものである。そのような競合アッセイを実行する手順の詳細は、当該技術分野において周知であり、且つ例えばHarlow及びLaneの著書「抗体、実験マニュアル(Antibodies, A Laboratory Manual)」、Cold Spring Harbor Laboratory Press社、Cold Spring Harbor、New York、567-569頁、ISBN 0-87969-314-2(1988)において認めることができる。そのようなアッセイは、精製された抗体を用い、定量的に実行することができる。標準曲線は、1つの抗体の、それ自身に対する滴定により確立され、すなわち、標識物と競合物の両方で同じ抗体が使用される。非標識の競合するモノクローナル抗体又はそれらの抗原結合断片が、プレートへの標識分子の結合を阻害する能力が、滴定される。これらの結果はプロットされ、所望の結合阻害度を達成するために必要な濃度が比較される。
(a)ヒトCD70中のアミノ酸配列
(b)アカゲザル(Macaca mulatta)及びカニクイザル(Macaca cynomolgus)のCD70ホモログとの交差反応性;
(c)未変性の及び熱変性された組換えヒトCD70への結合:
の同じ組合せを示す、抗体である。
本発明はまた、本発明のCD70抗体をコードしているポリヌクレオチド分子、同じく宿主細胞又は無細胞発現システムにおいて本抗原結合ポリペプチドの発現を可能にする調節配列に機能的に連結された本発明のCD70抗体をコードしているヌクレオチド配列を含む発現ベクター、並びにこの発現ベクターを含む宿主細胞又は無細胞発現システムも提供する。
重要な態様において、本発明はまた、CD70抗体の発現が可能である条件下で、CD70抗体をコードしているポリヌクレオチド(例えば発現ベクター)を含む宿主細胞(又は無細胞発現システム)を培養すること、及び発現されたCD70抗体を回収することを含む、本発明のCD70抗体を産生する方法を提供する。この組換え発現プロセスは、ヒト治療上の使用が意図されたモノクローナル抗体を含む、本発明のCD70抗体の大規模製造において使用することができる。インビボ治療上の使用に適した組換え抗体の大規模製造に好適なベクター、細胞株及び製造プロセスは、一般に、当該技術分野において入手可能であり、且つ当業者には周知であろう。
この抗体又はそれらの抗原結合断片は、配列番号:178に示されたアミノ酸配列を伴う重鎖可変ドメインを含む抗体又はそれらの抗原結合断片よりも大きい温度安定性を示すことができる。
a)H6、H18、H24、H31、H56、H74、H74、H77、H79、H83、H84、H89、H93、H94、H108、H110、及びH112からなる群から選択されるカバット位置での1以上のアミノ酸置換を含む配列番号:178に示されたアミノ酸配列を伴う重鎖可変ドメイン;並びに
b)L2、L11、L12、L25、L26、L30、L46、L53、L60、L61、L67、L68、L76、L80、L81、L85、及びL87からなる群から選択されるカバット位置での1以上のアミノ酸置換を含む配列番号:201に示されたアミノ酸配列を伴う軽鎖可変ドメイン。
本明細書に提供するCD70抗体又はそれらの抗原結合断片は、インビボにおける癌性腫瘍細胞の増殖を阻害するために使用することができ、従ってCD70-発現している癌の治療において有用である。
本発明のまた更なる態様は、ヒト患者における癌の治療又は予防における使用のための、本明細書記載のCD70抗体又は抗原結合断片を提供する。
これらの態様の各々において、低コピー数の癌は、大細胞型B細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、皮膚T細胞リンパ腫、胃癌、肺癌、黒色腫、膠芽細胞腫及び卵巣癌からなる群から選択されることが好ましい。
本明細書記載の驚くべき知見は、癌細胞株の表面上に発現されたCD70に結合されたCD70抗体は、不充分にインターナリゼーションされるということである。このことは、先行技術ではCD70は「インターナリゼーションする標的」としてこれまで説明されているので、驚くべき結果である。結合したCD70抗体の正確なインターナリゼーション度において、様々な癌細胞型の間で変動はあるが、結合したCD70抗体を「完全にインターナリゼーションする」癌細胞は、認められない。例えば、先に迅速にインターナリゼーションすると説明されている腎臓癌細胞株は、実際には、結合した抗体ARGX-110を最大約70%インターナリゼーションすることが示されている。多くの他の癌細胞株は、結合したARGX-110を30%未満、20%未満、又は10%未満さえもインターナリゼーションする。
本実施例において、CD70抗体のインターナリゼーション度において著しい細胞毎の差異が存在すること、及びこれらの差異は、CD70抗体の性質よりもむしろ細胞型に大きく左右される(しかし差異は、抗体ARGX-110を使用した場合に特に顕著である)ことが明らかにされている。結合したCD70抗体の著しいインターナリゼーション度、すなわち6時間後に30%以上、好ましくは40%以上、より好ましくは50%以上、又は更には60%以上のインターナリゼーションを示すこれらの細胞型について、代替治療戦略は、CD70抗体-薬物複合体の使用を基にすることができる。
本発明の範囲は、1種以上の医薬として許容し得る担体又は賦形剤と共に製剤化された、本発明のCD70抗体、又はそれらの抗原結合断片の1つ又は組合せを含有する医薬組成物を含む。そのような組成物は、CD70抗体の1つ又は組合せ(例えば、2以上の異なるもの)を含むことができる。
様々な刊行物が、前述の説明において及び以下の実施例を通じて引用されており、その各々は、その全体が引用により本明細書中に組み込まれている。
本発明は、以下の非限定的な実験的実施例を参照し、更に理解されるであろう。
ラマの免疫化及び末梢血リンパ球(PBL)の収集に加え、引き続きのRNA抽出及び抗体断片の増幅を、De Haardとその同僚により説明されたように行った(De Haard Hらの文献、J. Bact., 187: 4531-4541, 2005)。2頭のラマを、CD70-発現している786-O細胞(ATCC-CRL-1932)により、及び2頭のラマをCD70-発現しているRaji細胞(ATCC-CCL-86)により免疫化した。細胞は、各免疫化のために新たに調製し、且つFACS分析によりCD70発現について検証した。これらのラマは、およそ107個の生存細胞を、6週間にわたり週1回頸部へ筋肉内注射することにより免疫化した。フロイントの不完全アジュバントを、これらの細胞免疫化の部位から2、3cm離して、頸筋に注射した。
独立したVλCλ及びVκCκライブラリーを、タグ付けしないプライマーによる25サイクル、引き続きこれらのプライマーのタグ付け型を用い10サイクルを行う、2段階PCRを用いて構築した(De Haard Hらの文献、Biol. Chem. 274, 1999)。VHCH1ライブラリーを、同じ手法を用い、並行して作製した。個々のライブラリーのサイズは、107〜1010 cfuであった。次にVλCλ及びVκCκライブラリーからの軽鎖を、VHCH1-発現しているベクターに、個別に再クローニングし、各々、「ラムダ」及び「カッパ」ラマFab-ライブラリーを作製した。或いは、消化されたVHCH1アンプリコンを、VλCλ及びVκCκライブラリーへ直接クローニングし、個別のVHCH1ライブラリーの構築を回避した。軽鎖シャッフリングは一般に重鎖シャッフリングよりもより良い親和性バリアントを生むので、本発明者らは、プレクローニングされた軽鎖ライブラリーを作製し、且つこれらの一次レパトアにおいて重鎖アンプリコンを直接クローニングした。
2〜3回のファージ選択を、標準プロトコールを用い、捕獲された組換えCD70(Flag-TNC-CD70)又は直接コートされたCD70のいずれかについて行った。結合したファージの溶出は、トリプシンにより行った。
精製されたラマ-由来の抗-CD70ブロックFabのオフレートを、Biacoreを用いて決定した。組換えヒトCD70を、CM5 Biacoreチップ上に固定した。この固定は、Biacore社により提供された方法に従い、且つNHS/EDCキット(Biacore AB社)を用いて行った:このチップの活性化後、pH5の10mM酢酸緩衝液中の組換えCD70の溶液50μg/mlを調製し、この溶液1μl(50ng)を注入し、表面密度およそ1000RUを生じた。
関心対象のラマ-由来のFabクローンのVH及びVLを、ヒトIgG1の定常領域及びヒトCλ(全ての可変軽鎖領域はラムダ起源である)へ融合し、且つ特許出願WO 2009/145606に開示されたシステムにおいて二価キメラモノクローナル抗体として作製した。これらのキメララマ-ヒトmAbは、プロテインA上で、引き続きゲル濾過により精製した。
細胞ベースのアッセイにおいてブロック能を決定するために、Wyzgolとその同僚により説明されたシステムを使用した(J Immunol (2009) 183: 1851‐1861)。ヒトCD27でトランスフェクションされた線維肉腫細胞株HT1080は、三量体組換えCD70とのライゲーション時にIL-8を分泌し、且つ中和mAbによるこの相互作用のブロックは、低下したサイトカインレベルにより測定することができる。B細胞リンパ腫Raji細胞株をCD70の給源として利用したこのアッセイの改変版を適用したが、この分子は該細胞表面に発現され、その結果可溶性CD70よりもより関連していた。
抗体依存性細胞性細胞傷害作用(ADCC)を、McEarchernらの文献(Blood, (2007) 109: 1185‐1192)に説明された、標準Cr51-放出アッセイを用いて測定した。ヒト末梢血単核細胞(PBMC)を、標準フィコール分離により、ヘパリン処理した全血から精製し、且つNK細胞(すなわち、エフェクター細胞)の給源として使用した。いくつかの個別のドナー由来の血液を使用した。これらの細胞を、ヒトIL-2(NK細胞の刺激のため)200U/mlを含有する培地中に2×106個/mlで懸濁し、且つ37℃で一晩インキュベーションした。翌日、接着細胞及び非接着細胞を収集し、培養培地で1回洗浄した。標的細胞は、786-O細胞(RCC)であり、且つCr51で標識した。標的細胞対エフェクター細胞の比は、1:20であり、且つインキュベーションは、培養培地中に異なる濃度で存在する抗体と2時間行った。キメララマ-ヒトmAbに加えベンチマーク抗体を、様々な濃度で、786-O細胞に対するADCC活性について試験した。
%溶解=(試料CPM−自然放出CPM)/(最大放出CPM−自然放出CPM)×100。
前記抗体の補体依存性細胞傷害作用(CDC)特性を、McEarchernらの文献(Blood, (2007) 109: 1185-1192)に説明された標準アッセイにおいて決定した。最初の対照実験において、U266(MM)細胞及びMHH-PREB1(NHL)細胞を、FACS分析により、CD70抗原の存在について試験した。次の実験において、キメララマ-ヒトCD70 mAbを、3つの異なる濃度及び3、6又は9%ヒト血清(ヒト補体の給源として)の存在下で、両方の細胞株についてのCDC活性について試験した。U266細胞は、9%血清の存在下で、最良のシグナル/ノイズ比を生じることが結論付けられた。
SIMPLE mAbの抗体依存性細胞性貪食作用(ADCP)特性を分析するために、McEarchernらの文献(Blood, (2007) 109: 1185-1192)により説明されたアッセイを実行した。このアッセイにおいて、ヒト末梢血単核細胞(PBMC)を、標準フィコール分離により、ヘパリン処理した全血から精製した。異なるドナー由来の血液を使用した。細胞を、組織培養フラスコ内で、10%FCSを含有するRPMI中で37℃で一晩インキュベーションした。非接着細胞を除去し、接着細胞を、500U/ml rhGM-CSF(7.5μg/75ml)を含有するX-VIVO 15培地75ml中で15日間培養した。15日後、接着細胞を収集した(単球由来マクロファージ(MDM))。
CD70抗体の腎臓癌由来の細胞株786-Oへの結合は、抗体‐受容体複合体の迅速な(1時間以内)インターナリゼーションを生じることが、明らかにされている(Adamらの文献、Br J Cancer (2006) 95: 298‐306)。CD70に対するSIMPLE抗体及びベンチマークmAbのインターナリゼーションを試験するために、786-O細胞を、96-ウェルマイクロタイタープレート上で培養し、且つ37℃で一晩インキュベーションした。2.5μg/ml mAbを添加し、細胞と一緒に37℃で0〜24時間インキュベーションした。プレートを、ストリッピング緩衝液(150mM NaCl、100mMグリシン、pH=2.5;コード「IN」、CD70によりインターナリゼーションされたmAbの量を表す)、又はPBS(コード「OUT」、細胞の外側で受容体に結合したmAbの量を表す)により、5分間3回洗浄した。引き続き、細胞を、4%パラホルムアルデヒドでRTで30分間固定し、PBSで洗浄し、且つ0.2%Triton-X-100(「IN」)又はPBS(「OUT」)と一緒に5分間インキュベーションした。次に細胞を2回洗浄し、100mMグリシンと一緒にRTで10分間インキュベーションし、引き続きPBS+1%BSAと一緒に30分間インキュベーションした。最終的に細胞を、ヤギ抗-ヒトFc(Jackson immunoresearch社、109-005-098)及び抗-ヤギIRDYE800(Li-cor社、926-32214)により染色し、その後Li-Cor Odyssey赤外スキャナー上で分析した。細胞の外側に残存する抗体、すなわちインターナリゼーションされない抗体を、図10において平均MFI OUTとしてスコア化した。結果は、いくつかのmAbは、他のmAbよりも細胞表面により長く残存する(より高いシグナル)ことを明らかにしている。しかしいずれのmAbも、完全にはインターナリゼーションされず:最初(0〜2時間)は、mAbインターナリゼーションは、非常に迅速であるが、その後定常状態に達したように見え、そこでは37℃で24時間のインキュベーション後であっても、mAbの30〜40%は細胞の外側に残存し続ける。SIMPLE抗体27B3は、ベンチマーク抗体SGN70及びMDX69A7と同じほど迅速にインターナリゼーションする。SIMPLE抗体9E1及び19G10は、他のもの同様、24時間のインキュベーション後であっても、依然細胞の外側に高レベルで残存する(図10の下側パネル)ことが観察されることは興味深い。ADCC、CDC及びADCP作用を効果的に誘導するために、高レベルのCD70特異性抗体は、細胞死滅に寄与するエフェクター免疫細胞を動員するよう、標的化された癌細胞の外側に残存することは重要である。他方で、迅速にインターナリゼーションする抗体は、抗体薬物複合体(ADC)としての可能性を有する。
播種された疾患を確立するために、0.2mL PBS中のRaji細胞106個を、C.B.-17重度複合免疫不全(SCID)マウス(Harlan社、インディアナポリス、IN)の外側尾静脈へ注射した。注射後、全てのマウスをプールし、その後1群9匹のマウスで、様々な処置群に無作為に配置した。腹腔内注射による細胞の移植後、1、4、8、11、15日目に、抗体0.5mlを投与した。マウスは、少なくとも週2回モニタリングし、且つマウスが15%〜20%の体重減少、背中を丸める姿勢、嗜眠、頭蓋の膨潤、又は脱水を含む疾患の兆候を示した場合、屠殺した。マウスは用量反応方式で41D12 mAbによる処置を受け取った。加えて、41D12のFc-破壊型(dead version)を、10mg/kgで試験した。このFc-破壊型は、先に文献において説明されており、これはADCC及びCDC活性を有さず、ADCP活性は極めて低い(McEarchernらの文献、Clin Cancer Res (2008) 14(23):7763-72)。結果を、図11に生存曲線として示している。これらのデータは、対照マウスの生存時間の中央値は、27日であることを示している。41D12の0.1mg/kgと等しいかこれよりも多い投与量が投与された場合、生存期間の中央値は、少なくとも67日まで延長された。投与量0.01mg/kgは、依然有効である。41D12のFc-破壊型は、インビボにおいて効力を有さず、これはこのモデルにおけるADCC、CDC及びADCPの重要性を例示している。
少ない量のフコシル基を有する抗体は、ADCCを10〜1000倍増大することが明らかにされている(Iidaらの文献、Clin Cancer Res. (2006) 12(9): 2879‐2887)。フコシル転移酵素遺伝子(FUT8、BioWa社)を欠くCHO細胞株Ms704-PF及びMS705を、キメララマ-ヒトCD70 mAbの重鎖及び軽鎖をコードしている真核生物発現ベクターにより電気穿孔した。薬物耐性クローンを、Excell 325-PF CHO培地における増殖により選択した。クローンを、標準CD70結合ELISAにより、IgG産生についてスクリーニングした。
mAb 27B3のVH及びVL領域と同じカノニカルフォールド構造及び最高のアミノ酸配列同一性を有するヒト生殖細胞系列遺伝子セグメントを、既知のヒト生殖細胞系列遺伝子配列と比較することにより同定した。mAb 27B3に最も近いヒトVH及びVL領域は、各々、ヒトVH3‐48(FR同一性89.7%)及びヒトVL8-61(FR同一性86.1%)であった。JH及びJLのヒト生殖細胞系列遺伝子セグメント配列に最も近いヒト生殖細胞系列は、各々、JH5及びJL7であった。mAb 27B3のVH及びVL領域の最も近いヒト生殖細胞系列VH及びVL配列との配列のアラインメントを、図12に示している。SIMPLE抗体27B3とヒト生殖細胞系列配列のV領域の比較は、12の候補のVH領域のヒト化変異の候補、及び13のVL領域のそれ(CDR1に2及びCDR2に1)を同定した。27B3のVH及びVL配列におけるヒト化変異の概要を、導入された多様性をカバーするのに必要とされるライブラリーサイズと一緒に、表10及び表11に示している。
ファージディスプレイを使用し、CD70への高親和性及び高ヒトFR同一性の両方を持つ生殖細胞系列化された27B3 Fabを選択した。具体的には、Flag-TNC-CD70をビオチニル化し、且つ様々な量のFab発現しているファージと共に、様々な濃度でインキュベーションした。その後ファージとFlag-TNC-CD70の複合体を、ストレプトアビジンでコートされたマイクロタイタープレート上に捕獲し、ビオチニル化されなかったFlag-TNC-CD70を37℃で洗浄した。ファージをトリプシンで溶出し、TG1細胞の感染に使用した。5ラウンドの選択を行い、各ラウンドで洗浄のストリンジェンシーを増大した。選択の各ラウンドに使用した条件の詳細を、表12に示す。
いくつかの生殖細胞系列化された27B3 mAbバリアントを、HEK293細胞において完全長ヒトIgG1分子として発現した。プロテインA精製後、生殖細胞系列化された27B3 mAbクローンの温度安定性を評価した。具体的には、各mAbを、様々な温度で(2〜5℃間隔で)、1時間、PBS緩衝液中濃度100μg/mlでインキュベーションした。その後mAbの温度を、制御された様式で低下し(2時間かけて25℃への低下、その後4℃で一晩インキュベーション)、且つ遠心分離を使用し、凝集物を除去した。上清中の活性mAbの量(総mAb濃度の百分率)を、Biacoreにより測定した。
各時点で採取した試料をまた、Superdex200 10/300 GLカラムを用いるゲル濾過により分析した。被験試料50μlを、PBS+0.02%Tween-20の200μlへ添加した。試料(125μl)を、ゲル濾過のために採取した。分析前に試料を遠心分離し、比較的大きい凝集物を除去した。モノマー性ピークの割合(%)及びモノマー性ピーク面積に加え、保持容量を測定した。結果を、表19、20及び21に示す。
特定の時点で採取した試料を、Biacoreを用いCD70結合における効力について試験した。試料50μlを、PBS+0.02%Tweenの200μlへ添加し、下記のように1/400希釈した:試料(1mg/ml)5μl+HBS-EP+(Biacore緩衝液)195μl、更に10μl+HVS-EP+ 90μl=2.5μg/mlに希釈した。Biacore分析を、高度にCD70コートされたCM5チップ(4000 RU)を用いて行った。mAb 40F1、35G2及び41D12の結果を、図16に示している。参照試料は、100%試料である。
いくつかの生殖細胞系列化された27B3バリアントを、完全長ヒトIgG1分子として、HEK293細胞において発現した。プロテインA精製後、生殖細胞系列化された27B3 mAbのADCC効力を評価した。ADCCを、実施例7において先に説明した方法を用い、測定した。
生殖細胞系列化27B3クローン41D12のVH及びVLアミノ酸配列をコードしている二重遺伝子ベクターを作製した(zaアロタイプ)。41D12の重鎖(配列番号:344)及び軽鎖(配列番号:345)をコードしているヌクレオチド配列を、下記表30に示す。
(18.1 CD70発現している癌細胞株への親和性)
いくつかの癌細胞株を、ARGX-110及びSGN70(US 2010/0129362に説明された)の結合に関して、飽和mAb濃度(少なくとも2μg/ml)で、FACS分析により試験した。これは、4℃(mAbと一緒の細胞の1時間インキュベーション)又は37℃(mAbと一緒の細胞の15分間インキュベーション)のいずれかで行った。結合は、抗-hIgG1-Fc-FITC(AF006、Binding Site社)又は抗-hIgG1-Fc-PE抗体(eBioscience社、12-4998)を用いて行った。
慢性リンパ球性白血病(CLL)患者(2名は高リスク患者、1名は低リスク患者)から採取した初代細胞を、RPMI 1640+10%FBS中の丸底96ウェルプレートに250,000個細胞/ウェルで播種し、且つRPMI+10%FBS中のmAbを、濃度5μg/mlで添加した。37℃で最大5時間インキュベーションした後、細胞を、氷冷したPBSにより2回洗浄した。Alexa Fluor 647で標識したヤギ抗-ヒトIgG(Invitrogen社、カタログ番号21445)を、PBS/1%BSA中に1/500希釈し、4℃で20分間インキュベーションした。プレートを、氷冷したPBSにより2回洗浄し、4%パラホルムアルデヒドを室温で15分間添加し、細胞を固定した。シグナルを、FACSにより測定した。結果は図16に示している。これらの結果は、ARGX-110は、CLL患者由来の細胞へ良好に結合するのに対し、SGN70は、ほとんど結合シグナルを生じなかったことを明らかにしている。
組換えヒトCD70を、CM5 Biacoreチップ上に固定した。この固定は、Biacore社により提供された方法に従い、且つNHS/EDCキット(Biacore AB社)を用いて行い:チップの活性化後、pH5の10mM酢酸緩衝液中の組換えCD70の溶液50μg/mlを調製し、且つこの溶液(50ng)1μlを注入し、およそ1000RUの表面密度を生じた。
SU-DHL-6細胞(びまん性大細胞型B細胞リンパ腫細胞株)を、ウェルに50,000個細胞/ウェルでピペッティングし、次にこれを、300,000個の健常ドナー由来の新たに単離されたPBMC/ウェルへスパイクし、且つmAbを異なる濃度で添加した。これらの試料を、2日間インキュベーションし、細胞株の枯渇について、FACSにより分析した(抗-ヒトCD19 APC(eBioscience社17-0199-42)により測定)。細胞死滅における最良の効力が、ARGX-110により得られ、これはまた最高の溶解率(%)を生じた。これらの結果を図17に示している。
CD70とCD27の間の相互作用は、腫瘍微小環境内での腫瘍細胞の生存、増殖及び/又は免疫抑制に寄与し得る。従ってCD70 mAbのCD70とCD27の間の相互作用をブロックする能力を、ELISAにより評価した。
(20.1 非ヒト種のCD70との交差反応性)
CD70 mAbの動物での交差反応性の決定は、どの動物モデルを、インビボにおける概念研究の論証に使用することができるか、及びどの種が毒性研究に最も適しているかを評価する目的で有用である。アカゲザルCD70は、ヒトCD70と94%同一であり、カニクイザルCD70は、ヒトCD70と95%同一である。異なる種由来の配列のアラインメントを、図19に示している。ヒト配列と比較した差異を強調するために、マウスとラットのCD70配列も含んでいる。
CD70 mAb(ARGX-110、SGN70及びMDX1411)のCD70とCD27の間の相互作用をブロックする能力を、先に実施例19において説明したブロックELISAを用いて試験した。アッセイは、ヒト、アカゲザル及びカニクイザルFlag-TNC-CD70の各抗体のブロック能を測定するように改変した(Wyzgolらの文献、J. Immunol., 2009, 183: 1851‐1861)。
変性された組換えCD70へのCD70 mAbの結合を、ELISAにより評価した。組換えCD70を、95℃で5分間加熱し、引き続き直ちに氷上で5分間冷却することにより変性した。マイクロタイタープレートを、変性した又は変性していないCD70の5μg/mlでコーティングした。プレートをブロックし、且つ試験のためにCD70 mAbを、10μg/mlで適用した。洗浄後、mAbの結合を、抗-ヒトIgG-HRPを用いて検出した。コーティングの陽性対照として、CD70 mAbを使用する代わりに、抗-Flagマウス-由来mAbを適用し、抗-マウス-HRPにより検出した。TMBを基質として使用し、ODを620nmで測定した。このELISAからの結果を、図22に示している。これらの結果は、ARGX-110は、変性したCD70にも依然結合するのに対し、他のmAbは結合しないので、ARGX-110は、SGN70、MDX1411(MDX2H5)及びMDX69A7よりも、様々なエピトープに結合することを明らかにしている。他のmAbの中でも幾つかは、同じく変性したCD70へ結合する(例えば、5F4、9G2、57B6)。
mAbのドメイン認知をマッピングするために、ヒト及びマウスCD70のドメインを交換することにより、ヒト-マウスCD70 ECD融合タンパク質を構築した。この構築は、標準組換えDNA法及びPCR法を用いて行った。マウスとヒトのキメラを、ELISAにおける捕獲のためにFlagタグを、及びタンパク質の三量体化のためにTNCを持つ真核生物発現ベクターへクローニングした(Flag-TNC-CD70)。タンパク質は、HEK293細胞において可溶性タンパク質として発現された。様々なキメラの配列を、図23に示している。
CD70抗体の腎臓癌由来細胞株786-O及びA498への結合は、抗体‐受容体複合体の迅速な(1時間以内)のインターナリゼーションを生じることが明らかにされている(Adamらの文献、Br. J. Cancer, (2006) 95: 298‐306)。mAbであるARGX-110、SGN70及びMDX1411のインターナリゼーションを試験するために、786-O細胞を、96-ウェルマイクロタイタープレートにおいて培養し、且つ37℃で一晩インキュベーションした。mAb 2.5μg/mlを添加し、該細胞と37℃で0〜24時間インキュベーションした。プレートを、ストリッピング緩衝液(150mM NaCl、100mMグリシン、pH=2.5;コード「IN」、CD70によりインターナリゼーションされたmAbの量を表す)、又はPBS(コード「OUT」、該細胞の外側の受容体に結合したmAbの量を表す)により、5分間3回洗浄した。それに続き、細胞を4%パラホルムアルデヒドでRTで30分間固定し、PBSで洗浄し、且つ0.2%Triton-X-100(「IN」)又はPBS(「OUT」)と一緒に5分間インキュベーションした。次に、細胞を、2回洗浄し、100mMグリシンと一緒にRTで10分間インキュベーションし、引き続きPBS+1%BSAと一緒に30分間インキュベーションした。最後に、細胞を、ヤギ抗-ヒトFc(Jackson immunoresearch社、109-005-098)及び抗-ヤギIRDYE800(Li-cor社、926-32214)により染色し、その後Li-Cor Odyssey赤外スキャナー上で分析した。時間の関数としてのmAb OUTの割合(%)を、図24に示している。
Claims (28)
- ヒトCD70に結合する抗体又はその抗原結合断片であって、該抗体又は抗原結合断片が、可変重鎖CDR3、可変重鎖CDR2及び可変重鎖CDR1を含む少なくとも1つの重鎖可変ドメイン(VH)、並びに、可変軽鎖CDR3、可変軽鎖CDR2及び可変軽鎖CDR1を含む少なくとも1つの軽鎖可変ドメイン(VL)を含み、
該可変重鎖CDR3が、
該可変重鎖CDR2が、
該可変重鎖CDR1が、
該可変軽鎖CDR3が、
該可変軽鎖CDR2が、
該可変軽鎖CDR1が、
- 配列番号:223として示されるアミノ酸配列又はそれと少なくとも90%同一性のアミノ酸配列を含むか又はそれからなる、重鎖可変ドメイン(VH)、並びに配列番号:241として示されるアミノ酸配列又はそれと少なくとも90%同一性のアミノ酸配列を含むか又はそれからなる、軽鎖可変ドメイン(VL)を含む、請求項1記載の単離された抗体又はその抗原結合断片。
- 請求項1又は2記載の抗体と同じヒトCD70のエピトープに結合する、単離された抗体又はその抗原結合断片。
- 前記VH及びVLドメイン又はそれらの1以上のCDRがラマに由来し、且つ定常ドメインの1以上がヒト免疫グロブリンに由来する、ラマ-ヒトキメラ抗体である、請求項1〜3のいずれか一項記載の抗体。
- ヒトIgGのヒンジ領域、CH2ドメイン及びCH3ドメインを含む、請求項4記載の抗体。
- 前記ヒトIgGが、ヒトIgG1である、請求項5記載の抗体。
- 細胞表面上にヒトCD70を発現している細胞に対する抗体依存性細胞性細胞傷害作用(ADCC)、補体依存性細胞傷害作用(CDC)及び抗体依存性細胞性貪食作用(ADCP)から選択された1以上のエフェクター機能を示す、請求項1〜6のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片。
- CD70-発現している癌細胞に対し抗体依存性細胞性細胞傷害作用(ADCC)、補体依存性細胞傷害作用(CDC)及び抗体依存性細胞性貪食作用(ADCP)の1以上を示す、請求項7記載の抗体又は抗原結合断片。
- 未変性のヒトFcドメインを含む等価抗体と比べ、増強されたADCC機能を示す、請求項7又は8記載の抗体又は抗原結合断片。
- 非フコシル化IgGである、請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体。
- 請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片をコードしている、単離されたポリヌクレオチド。
- 宿主細胞又は無細胞発現システムにおける抗原結合ポリペプチドの発現を可能にする調節配列に機能的に連結された、請求項11記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
- 請求項12記載の発現ベクターを含む、宿主細胞又は無細胞発現システム。
- 請求項13記載の宿主細胞又は無細胞発現システムを、該抗体又は抗原結合断片の発現を可能にする条件下で培養すること、並びに発現された抗体又は抗原結合断片を回収することを含む、組換え抗体又はその抗原結合断片の製造方法。
- 請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片、及び少なくとも1種の医薬として許容し得る担体又は賦形剤を含有する、医薬組成物。
- 請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片、及び細胞傷害剤を含有する、免疫複合体。
- 請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片の治療有効量を含む、ヒト患者における腫瘍細胞増殖を阻害するための医薬組成物。
- ヒト患者においてCD70-発現している腫瘍細胞の増殖を阻害する用途のための、請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片。
- ヒト患者において癌を治療又は予防する用途のための、請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片。
- 前記癌が、CD70の低コピー数の発現を示す癌であり、該癌は、大細胞型B細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、皮膚T細胞リンパ腫、胃癌、肺癌、黒色腫、膠芽細胞腫及び卵巣癌からなる群から選択される、請求項19記載の用途のための抗体又は抗原結合断片。
- ヒト患者において免疫学的障害を治療する用途のための、請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体又は抗原結合断片。
- 前記免疫学的障害が、自己免疫疾患、全身性紅斑狼瘡(SLE)、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、血管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、チャーグ-ストラウス病、顕微鏡的多発性血管炎、免疫複合体性血管炎、結節性多発動脈炎、川崎病、巨細胞性関節炎、腎炎、ベーチェット症候群、大動脈炎及び高安病からなる群から選択される、請求項21記載の用途のための抗体又は抗原結合断片。
- 請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体の有効量を含み、ここでCD70-発現している細胞は、6時間後に該抗体の30%以下のインターナリゼーションを示し、且つここで該抗体は、ADCC、CDC及びADCPからなる群から選択される少なくとも1つのエフェクター機能を示す、ヒト患者においてCD70-発現している細胞を枯渇するための医薬組成物。
- 前記CD70-発現している細胞が、CD70-発現している癌細胞である、請求項23記載の医薬組成物。
- 前記CD70-発現している癌細胞が、バーキットリンパ腫、大細胞型B細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非-ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、膵癌、胃癌、膠芽細胞腫及び肺癌からなる群から選択される癌型である、請求項24記載の医薬組成物。
- 前記CD70-発現している癌細胞が、バーキットリンパ腫、大細胞型B細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、胃癌及び肺癌からなる群から選択される癌型である、請求項24記載の医薬組成物。
- 前記CD70-発現している細胞が、CD70-発現している活性化されたT細胞である、請求項23記載の医薬組成物。
- 前記ヒトCD70に結合する抗体が、抗体-薬物複合体ではない、請求項23〜27のいずれか一項記載の医薬組成物。
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MX2020008184A (es) | 2018-02-01 | 2020-09-22 | Pfizer | Receptores de antigeno quimericos dirigidos a cd70. |
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US20220047634A1 (en) * | 2018-11-30 | 2022-02-17 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Chimeric antigen receptor factories and methods of use thereof |
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RU2738802C1 (ru) * | 2019-08-21 | 2020-12-17 | Общество с ограниченной ответственностью "Международный Биотехнологический Центр "Генериум" | Определяющие комплементарность участки для связывания cd3 и содержащая их биспецифическая антигенсвязывающая молекула |
CN111909966B (zh) * | 2020-04-01 | 2021-09-21 | 苏州克睿基因生物科技有限公司 | 一种制备经修饰的免疫细胞的方法 |
WO2022002019A1 (zh) * | 2020-06-30 | 2022-01-06 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 抗cd70抗体及其应用 |
US20230266332A1 (en) | 2020-07-28 | 2023-08-24 | Inserm (Institut National De La Santè Et De La Recherch Médicale) | Methods and compositions for preventing and treating a cancer |
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US20240024475A1 (en) | 2020-12-01 | 2024-01-25 | Cure Genetics Co., Ltd | Antigen-Binding Protein Targeting CD70 and Use Thereof |
CN114685657A (zh) * | 2020-12-31 | 2022-07-01 | 康诺亚生物医药科技(成都)有限公司 | 一种功能增强型抗体阻断剂的开发及其应用 |
CN115260303A (zh) * | 2021-05-31 | 2022-11-01 | 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司 | Cd70基因人源化非人动物的构建方法及应用 |
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WO2024040195A1 (en) | 2022-08-17 | 2024-02-22 | Capstan Therapeutics, Inc. | Conditioning for in vivo immune cell engineering |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5892019A (en) | 1987-07-15 | 1999-04-06 | The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services | Production of a single-gene-encoded immunoglobulin |
US5859205A (en) * | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US5573924A (en) | 1992-09-08 | 1996-11-12 | Immunex Corporation | CD27 ligand |
DE19747418C1 (de) | 1997-10-27 | 1999-07-15 | Deutsches Krebsforsch | Inhibitor-Protein des wnt-Signalwegs |
US6500633B1 (en) | 2000-04-26 | 2002-12-31 | Atairgin Technologies, Inc. | Method of detecting carcinomas |
US20030148321A1 (en) | 2001-08-24 | 2003-08-07 | Iris Pecker | Methods and kits for diagnosing and monitoring hematopoietic cancers |
US20070072178A1 (en) | 2001-11-05 | 2007-03-29 | Torsten Haferlach | Novel genetic markers for leukemias |
NZ533240A (en) | 2001-11-27 | 2007-12-21 | Oxford Glycosciences Uk Ltd | Use of polypeptide for the treatment of epithelial-derived cancer |
US7261892B2 (en) | 2001-11-27 | 2007-08-28 | Celltech R&D Limited | Methods for diagnosis and treatment of epithelial-derived cancers |
US8404716B2 (en) | 2002-10-15 | 2013-03-26 | Celgene Corporation | Methods of treating myelodysplastic syndromes with a combination therapy using lenalidomide and azacitidine |
US8039218B2 (en) | 2002-11-14 | 2011-10-18 | John Wayne Cancer Institute | Detection of cancer cells in body fluids |
US20080025989A1 (en) | 2003-02-20 | 2008-01-31 | Seattle Genetics, Inc. | Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders |
US7662387B2 (en) | 2003-02-20 | 2010-02-16 | Seattle Genetics | Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders |
EP1606316A2 (en) | 2003-03-24 | 2005-12-21 | ZymoGenetics, Inc. | Anti-il-20 antibodies and binding partners and methods of using in inflammation |
MXPA06014075A (es) * | 2004-06-03 | 2007-03-15 | Novimmune Sa | Anticuerpos anti-cd3 y metodos de uso de los mismos. |
CA2583208C (en) | 2004-10-15 | 2015-08-25 | Seattle Genetics, Inc. | Anti-cd70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders |
US8337838B2 (en) | 2004-10-15 | 2012-12-25 | Seattle Genetics, Inc. | Anti-CD70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders |
US7641903B2 (en) | 2004-10-15 | 2010-01-05 | Seattle Genetics, Inc. | Anti-CD70 antibody and its use for the treatment and prevention of cancer and immune disorders |
WO2006047249A1 (en) | 2004-10-22 | 2006-05-04 | Zymogenetics, Inc. | Anti-il-22ra antibodies and binding partners and methods of using in inflammation |
WO2006113747A2 (en) | 2005-04-19 | 2006-10-26 | Prediction Sciences Llc | Diagnostic markers of breast cancer treatment and progression and methods of use thereof |
AU2006236225C1 (en) * | 2005-04-19 | 2013-05-02 | Seagen Inc. | Humanized anti-CD70 binding agents and uses thereof |
US20080280297A1 (en) | 2005-07-15 | 2008-11-13 | The Trustees Of Columbia University In The City Of | Compositions and Methods for Differential Diagnosis of Chronic Lymphocytic Leukemia |
CN101370830A (zh) * | 2005-09-26 | 2009-02-18 | 米德列斯公司 | 抗cd70的人单克隆抗体 |
EA016186B1 (ru) | 2005-09-26 | 2012-03-30 | Медарекс, Инк. | Человеческие моноклональные антитела к cd70 и их применение |
US7723477B2 (en) | 2005-10-31 | 2010-05-25 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting Wnt-dependent solid tumor cell growth |
US20070237764A1 (en) * | 2005-12-02 | 2007-10-11 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with restricted diversity sequences |
NZ573646A (en) | 2006-06-12 | 2012-04-27 | Wyeth Llc | Single-chain multivalent binding proteins with effector function |
ES2523915T5 (es) * | 2006-12-01 | 2022-05-26 | Seagen Inc | Agentes de unión a la diana variantes y usos de los mismos |
AU2007333098A1 (en) * | 2006-12-14 | 2008-06-19 | Medarex, Inc. | Human antibodies that bind CD70 and uses thereof |
AR062123A1 (es) * | 2007-07-27 | 2008-10-15 | Inst Nac De Tecnologia Agropec | Dominio vhh monomerico derivado de anticuerpos de camelidos anti-vp6 dominio dimerico, metodo de inmunodeteccion de rotavirus, composiciones, metodos de prevencion y tratamiento de infecciones con rotavirus |
KR100807069B1 (ko) | 2007-09-21 | 2008-02-25 | 고려대학교 산학협력단 | 암 치료용 의약 조성물 |
US20100267626A1 (en) | 2007-11-05 | 2010-10-21 | Novartis Ag | Methods and compositions for measuring wnt activation and for treating wnt-related cancers |
ES2588194T3 (es) * | 2008-04-11 | 2016-10-31 | Seattle Genetics, Inc. | Detección y tratamiento de cáncer pancreático, de ovario y otros cánceres |
EP2297301A1 (en) | 2008-05-28 | 2011-03-23 | U-Protein Express B.V. | Method for the production of proteins or protein fragments |
GB2461546B (en) * | 2008-07-02 | 2010-07-07 | Argen X Bv | Antigen binding polypeptides |
WO2010014948A1 (en) | 2008-08-01 | 2010-02-04 | The University Of Utah Research Foundation | Methods of treatment using wnt inhibitors |
US20110190157A1 (en) | 2008-08-15 | 2011-08-04 | The Regents Of The University Of California | Biomarkers for Diagnosis and Treatment of Chronic Lymphocytic Leukemia |
WO2010037041A2 (en) | 2008-09-26 | 2010-04-01 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Frizzled-binding agents and uses thereof |
CN102257003B (zh) * | 2008-12-19 | 2017-04-05 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 用于产生针对细胞相关抗原如p2x7、cxcr7或cxcr4的免疫球蛋白的基因免疫 |
ES2571235T3 (es) | 2009-04-10 | 2016-05-24 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | Procedimiento para el tratamiento de un tumor sanguíneo que utiliza el anticuerpo anti-TIM-3 |
DK2987487T3 (da) | 2009-08-10 | 2020-12-07 | Samumed Llc | Indazolinhibitorer af wnt-signalvejen og terapeutiske anvendelser deraf |
WO2011035433A1 (en) | 2009-09-23 | 2011-03-31 | University Health Network | Selected strains on serum-free growth media for proteomics analysis of lung cancer biomarkers |
MX2012005791A (es) | 2009-11-19 | 2012-07-03 | Merck Serono Sa | Anticuerpos humanizados contra el receptor alfa de la interleucina 22 humana. |
WO2011081164A1 (ja) | 2009-12-29 | 2011-07-07 | 協和発酵キリン株式会社 | 抗cd27抗体 |
GB2476681B (en) | 2010-01-04 | 2012-04-04 | Argen X Bv | Humanized camelid VH, VK and VL immunoglobulin domains |
TR201807750T4 (tr) | 2010-06-11 | 2018-06-21 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | Anti-TIM-3 antikoru. |
DK3020730T3 (en) | 2011-01-19 | 2019-04-15 | Cantargia Ab | ANTI-IL1RAP ANTIBODIES AND THEIR USE FOR TREATMENT OF SOLID TUMORS |
SI2686347T1 (en) | 2011-03-16 | 2018-08-31 | Argenx Bvba | Antibodies against CD70 |
US8841418B2 (en) | 2011-07-01 | 2014-09-23 | Cellerant Therapeutics, Inc. | Antibodies that specifically bind to TIM3 |
JO3625B1 (ar) | 2011-09-22 | 2020-08-27 | Amgen Inc | بروتينات رابطة للأنتيجين cd27l |
GB2504139B (en) * | 2012-07-20 | 2014-12-31 | Argen X Bv | Antibodies to highly conserved targets produced by the immunisation of Camelidae species |
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ES2649673T3 (es) | 2012-06-15 | 2018-01-15 | Curegenix Inc. | Compuesto como inhibidor de la señalización WNT, composición, y uso del mismo |
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MX356698B (es) | 2013-02-14 | 2018-06-11 | Bristol Myers Squibb Co | Compuestos de tubulisina, metodos para obtenerlos y uso. |
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