JP5740157B2 - サルサブファミリーBアデノウイルスSAdV−28、−27、−29、−32、−33および−35ならびにそれらの用途 - Google Patents
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Description
サルアデノウイルス28(SAdV−28)、サルアデノウイルス27(SAdV−27)、サルアデノウイルス29(SAdV−29)、サルアデノウイルス32(SAdV−32)、サルアデノウイルス33(SAdV−33)およびサルアデノウイルス(SAdV−35)の単離された核酸配列およびアミノ酸配列、ならびにこれらの配列を含有するベクターを本明細書に提供する。本発明のベクターおよび細胞の多数の使用方法もまた提供される。
サルアデノウイルス28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33およびSAdV−35からの新規核酸およびアミノ酸配列(それらのそれぞれはチンパンジー糞便から単離された)が提供される。組換えタンパク質若しくはフラグメントまたは他の試薬のin vitro製造での使用のための新規アデノウイルスベクターおよびそれらのベクターを製造するためのパッケージング細胞株もまた提供される。治療若しくはワクチンの目的上の異種分子の送達における使用のための組成物がさらに提供される。こうした治療若しくはワクチン組成物は挿入された異種分子を保有するアデノウイルスベクターを含有する。加えて、該新規SAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33およびSAdV−35配列は、組換えアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターの製造に必要とされる不可欠のヘルパー機能の提供において有用である。従って、こうした製造法でこれらの配列を使用するヘルパー構築物、方法および細胞株が提供される。
ニング、制限若しくはライゲーション段階、および天然に見出されるポリヌクレオチドと異なる構築物をもたらす他の手順の多様な組合せの産物であることを意味している。組換えウイルスは組換えポリヌクレオチドを含んでなるウイルス粒子である。該用語は、それぞれ元のポリヌクレオチド構築物の複製物および元のウイルス構築物の子孫を包含する。
本発明は、サルSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33およびSAdV−35の核酸配列およびアミノ酸配列を提供し、それらのそれぞれはそれらが天然に会合している他物質から単離されている。これらのアデノウイルスのそれぞれはヒトサブグループBと同一サブグループにあることが決定されている。
本明細書に提供されるSAdV−28核酸配列は配列番号1のヌクレオチド1ないし35610を包含する。本明細書に提供されるSAdV−27核酸配列は配列番号39のヌクレオチド1ないし35592を包含する。本明細書に提供されるSAdV−29核酸配列は配列番号71のヌクレオチド1ないし35646を包含する。本明細書に提供されるSAdV−32核酸配列は配列番号103のヌクレオチド1ないし35588を包含する。本明細書に提供されるSAdV−33核酸配列は配列番号134のヌクレオチド1ないし35694を包含する。本明細書に提供されるSAdV−35核酸配列は配列166のヌクレオチド1ないし35606を包含する。
15ヌクレオチドであり、そして機能的フラグメントすなわち生物学的に興味深いフラグメントを包含する。例えば、機能的フラグメントは、所望のアデノウイルス産物を発現し得るか、若しくは組換えウイルスベクターの製造で有用でありうる。こうしたフラグメントは本明細書の表に列挙される遺伝子配列およびフラグメントを包含する。該表は、SAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33およびSAdV−35配列中の転写領域およびオープンリーディングフレームを提供する。ある種の遺伝子について、転写物およびオープンリーディングフレーム(ORF)は配列番号1、29、71、103、134および166に提示されるものに相補的な鎖上に位置する。例えばE2b、E4およびE2aを参照されたい。コードされるタンパク質の計算された分子量もまた示される。SAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33および/若しくはSAdV−35のE1aオープンリーディングフレームならびにE2bのオープンリーディングフレームは内部スプライス部位を含有することに注意されたい。これらのスプライス部位は上の表中に示される。
保有する宿主細胞、例えば293細胞中でのヘルパー機能との相同的組換えの可能性を大きく最小化するか若しくは排除する。
99/47691号明細書もまた参照されたい。これらの方法はヒト以外の霊長類のAAV血清型を包含するヒト以外の血清型のAAVの製造でもまた使用しうる。必要なヘルパー機能(例えばE1a、E1b、E2aおよび/若しくはE4 ORF6)を提供するSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33およびSAdV−35配列は、ヒト起源に典型的であるrAAVパッケージング細胞中に存在するいずれかの他のアデノウイルスとの組換えの可能性を最小化若しくは排除する一方での必要なアデノウイルス機能の提供においてとりわけ有用であり得る。従って、SAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33若しくはSAdV−35の選択された遺伝子若しくはオープンリーディングフレームをこれらのrAAV製造方法で利用しうる。
は、裸のDNA、プラスミド、ウイルス若しくはいずれかの他の遺伝因子の形態にあり得る。
本明細書に記述されるアデノウイルス核酸によりコードされるタンパク質、酵素およびそれらのフラグメントのようなSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33若しくはSAdV−35アデノウイルスの遺伝子産物が提供される。他の方法により生成されるこれらの核酸配列によりコードされるアミノ酸配列を有する、SAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33若しくはSAdV−35のタンパク質、酵素およびそれらのフラグメントがさらに包含される。こうしたタンパク質は、上の表で同定されるオープンリーディングフレームによりコードされるもの、表2中のタンパク質(配列表にもまた示される)ならびに該タンパク質およびポリペプチドのそれらのフラグメントを包含する。
されるところのサル由来キャプシドタンパク質は、これらのタンパク質の生成手段に対する制限を伴わず、キメラキャプシドタンパク質、融合タンパク質、人工キャプシドタンパク質、合成キャプシドタンパク質および組換えキャプシドタンパク質を制限なしに包含する、上で定義されたところのSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33若しくはSAdV−35キャプシドタンパク質またはそれらのフラグメントを含有するいかなるアデノウイルスキャプシドタンパク質も包含する。
多様な目的上改変しうる。ヘキソンタンパク質はアデノウイルスの血清型の決定子であるため、こうした人工ヘキソンタンパク質は人工血清型を有するアデノウイルスをもたらすとみられる。他の人工キャプシドタンパク質を、チンパンジーAdペントン配列および/若しくは本発明のファイバー配列ならびに/またはそれらのフラグメントを使用してもまた構築し得る。
なお他の改変は当業者に容易に明らかであろう。本明細書に提供されるSAdV28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33および/若しくはSAdV−35タンパク質に対する最低約99%の同一性を有するタンパク質がさらに包含される。
は当業者に公知の技術を使用して製造する。これらの抗体は、診断および臨床的な方法およびキットを包含する多様な目的上使用しうる。
Ther.2001 May;8(10):795−803およびMedina−Kauwe LKら、Gene Ther.2001 Dec;8(23):1753−1761に記述されるものに類似の様式でサルペントン配列を使用する融合タンパク質の製造によりこうした目的上容易に利用しうる。あるいは、サルAdタンパク質IXのアミノ酸配列を、米国特許出願第20010047081号明細書に記述されるとおり細胞表面受容体にベクターの標的を定めるのに利用しうる。適するリガンドはCD40抗原、RGD含有若しくはポリリシン含有配列などを包含する。例えばヘキソンタンパク質および/若しくはファイバータンパク質を包含するなお他のサルAdタンパク質をこれらおよび類似の目的上使用されるため使用しうる。
本明細書に記述される組成物は、治療若しくはワクチンいずれかの目的上細胞に異種分子を送達するベクターを包含する。本明細書で使用されるところのベクターは、裸のDNA、ファージ、トランスポゾン、コスミド、エピソーム、プラスミド若しくはウイルスを制限なしに包含するいかなる遺伝因子も包含しうる。こうしたベクターはSAdV28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33および/若しくはSAdV−35のサルアデノウイルスDNAならびにミニ遺伝子を含有する。「ミニ遺伝子」若しくは「発現カセット」により、選択された異種遺伝子、ならびに宿主細胞中での該遺伝子産物の翻訳、転写および/若しくは発現を駆動するのに必要な他の調節エレメントの組合せを意味している。
は別の方法で例えば突然変異若しくは改変により損傷されることを意味している。所望の場合は遺伝子領域全体を除去しうる。遺伝子破壊若しくは欠失の他の適する部位は本出願の別の場所で論考する。
導入遺伝子の選択、「ミニ遺伝子」のクローニングおよび構築ならびにウイルスベクターへのその挿入に使用される方法は、本明細書に提供される教示を考えれば当該技術分野の熟練内にある。
導入遺伝子は、目的のポリペプチド、タンパク質若しくは他の産物をコードする導入遺伝子に隣接するベクター配列に異種の核酸配列である。核酸コーディング配列は、宿主細胞中での導入遺伝子の転写、翻訳および/若しくは発現を可能にする様式で調節成分に効果的に連結されている。
ることをさらに包含する。ある状況において、異なる導入遺伝子を、タンパク質の各サブユニットをコードする、または異なるペプチド若しくはタンパク質をコードするのに使用しうる。これは、該タンパク質サブユニットをコードするDNAの大きさが大きい場合、例えば免疫グロブリン、血小板由来増殖因子若しくはジストロフィンタンパク質について望ましい。細胞が多サブユニットタンパク質を産生するために、細胞を多様なサブユニットのそれぞれを含有する組換えウイルスに感染させる。あるいは、1タンパク質の多様なサブユニットを同一導入遺伝子によりコードしうる。この場合、単一導入遺伝子がサブユニットのそれぞれをコードするDNAを包含し、各サブユニットのDNAは配列内リボソーム進入部位(IRES)により分離される。これは、サブユニットのそれぞれをコードするDNAの大きさが小さい、例えばサブユニットをコードするDNAおよびIRESの全体の大きさが5キロ塩基未満である場合に望ましい。IRESに対する一代替として、該DNAは翻訳後事象で自己切断する2Aペプチドをコードする配列により分離されうる。例えばM.L.Donnellyら、J.Gen.Virol.、78(Pt 1):13−21(Jan 1997);Furler,S.ら、Gene Ther.、8(11):864−873(June 2001);Klump H.ら、Gene Ther.、8(10):811−817(May 2001)を参照されたい。この2AペプチドはIRESよりかなり小さく、空間が制限因子である場合にそれを使用に十分に適するようにする。しかしながら、選択された導入遺伝子はいかなる生物学的に活性の産物若しくは他の産物、例えば研究に所望の産物をコードしてもよい。
ミニ遺伝子について上で同定された主要エレメントに加え、該ベクターは、本発明により製造されるプラスミドベクターでトランスフェクトされた若しくはウイルスに感染した細胞中でのその転写、翻訳および/若しくは発現を可能にする様式で導入遺伝子に作動可能に連結されている必要な慣習的調節領域もまた包含する。本明細書で使用されるところの「作動可能に連結されている」配列は、目的の遺伝子に隣接する発現制御配列、およびトランスで若しくは少し離れて作用して目的の遺伝子を制御する発現制御配列の双方を包含する。
分化段階の存在により、または複製細胞中でのみ調節され得る。誘導可能なプロモーターおよび誘導可能な系はInvitrogen、ClontechおよびAriadを制限なしに包含する多様な商業的供給源から入手可能である。多くの他の系が記述されておりかつ当業者により容易に選択され得る。例えば、誘導可能なプロモーターは、亜鉛で誘導可能なヒツジメタロチオニン(metallothionine)(MT)プロモーターおよびデキサメサゾン(Dex)で誘導可能なマウス乳癌ウイルス(MMTV)プロモーターを包含する。他の誘導可能な系は、T7ポリメラーゼプロモーター系(第WO 98/10088号明細書);エクジソン昆虫プロモーター(Noら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、93:3346−3351(1996))、テトラサイクリンで抑制可能な系(Gossenら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、89:5547−5551(1992))、テトラサイクリンで誘導可能な系(Gossenら、Science、268:1766−1769(1995)、Harveyら、Curr.Opin.Chem.Biol.、2:512−518(1998)もまた参照されたい)を包含する。他の系は、FK506二量体、カストラジオール(castradiol)を使用するVP16若しくはp65、ジフェノールムリスレロン(diphenol murislerone)、RU486で誘導可能な系(Wangら、Nat.Biotech.、15:239−243(1997)およびWangら、Gene Ther.、4:432−441(1997))ならびにラパマイシンで誘導可能な系(Magariら、J.Clin.Invest.、100:2865−2872(1997))を包含する。いくつかの誘導可能なプロモーターの有効性は時間とともに増大する。こうした場合には、複数のリプレッサーをタンデムに挿入することにより(例えばIRESによりTetRに結合したTetR)こうしたシステムの有効性を高め得る。あるいは、所望の機能についてスクリーニングする前に最低3日待機し得る。この系の有効性を高めるための既知手段により所望のタンパク質の発現を高め得る。(例えばウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント(WPRE)を使用して)
d.Sci.USA、88:5611−5(1991))、および神経特異的vgf遺伝子(Piccioliら、Neuron、15:373−84(1995))のような神経の(neuronal)について既知である。
一態様において、サルアデノウイルスプラスミド(若しくは他のベクター)を使用してアデノウイルスベクターを製造する。一態様においてアデノウイルスベクターは複製欠損であるアデノウイルス粒子である。一態様において、アデノウイルス粒子はE1aおよび/若しくはE1b遺伝子中の欠失により複製欠損にされている。あるいは、アデノウイルスは、場合によってはE1aおよび/若しくはE1b遺伝子を保持しつつ別の手段により複製欠損にされている。該アデノウイルスベクターは、アデノウイルスゲノムに対する他の突然変異、例えば他の遺伝子中の温度感受性突然変異若しくは欠失もまた含有し得る。他の態様において、アデノウイルスベクター中に無傷のE1aおよび/若しくはE1b領域を保持することが望ましい。こうした無傷のE1領域は、アデノウイルスゲノム中のその天然の場所に配置しうるか、若しくは天然のアデノウイルスゲノム中の欠失の部位(例えばE3領域中)に置くことができる。
の部分の欠失をいかなる組合せで使用してもよい。例えば、一例示的ベクター中で、アデノウイルス配列は、E3の欠失を伴う若しくは伴わない、E1遺伝子およびE4遺伝子、若しくはE1、E2aおよびE3遺伝子、若しくはE1およびE3遺伝子、若しくはE1、E2aおよびE4遺伝子などの欠失を有しうる。上で論考されたとおり、こうした欠失を温度感受性突然変異のような他の突然変異とともに使用して所望の結果を達成しうる。
従って、ミニ遺伝子を保有するため使用されるウイルスベクターのサルアデノウイルス遺伝子含量に依存して、ヘルパーアデノウイルス若しくは非複製ウイルスフラグメントが、該ミニ遺伝子を含有する感染性組換えウイルス粒子を製造するのに必要な十分なサルアデノウイルス遺伝子配列を提供するのに必要でありうる。有用なヘルパーウイルスは、アデノウイルスベクター構築物に存在せずかつ/若しくは該ベクターがトランスフェクトされるパッケージング細胞株により発現されない、選択されたアデノウイルス遺伝子配列を含有する。一態様において、該ヘルパーウイルスは複製欠損でありかつ上述された配列に加えて多様なアデノウイルス遺伝子を含有する。こうしたヘルパーウイルスは、望ましくはE1発現細胞株とともに使用する。
上述された遺伝子のいずれかで欠失された組換えサルアデノウイルス(Ad)を生成するためには、欠失された遺伝子領域の機能を、該ウイルスの複製および感染性に不可欠である場合はヘルパーウイルス若しくは細胞株、すなわち補完若しくはパッケージング細胞株により該組換えウイルスに供給しなければならない。多くの状況で、ヒトE1を発現する細胞株を使用してチンパンジーAdベクターをトランス補完し(transcomplement)得る。これは、本発明のチンパンジーAd配列と現在入手可能なパッケージング細胞で見出されるヒトAdE1配列の間の多様性により、現在のヒトE1含有細胞の使用が複製および製造過程の間の複製能力のあるアデノウイルスの生成を予防するため、とりわけ有利である。しかしながら、ある状況では、E1遺伝子産物を発現しかつE1欠失サルアデノウイルスの製造に利用し得る細胞株を利用することが望ましいであろう。こうした細胞株は記述されている。例えば米国特許第6,083,716号明細書を参照されたい。
一般に、ミニ遺伝子を含んでなるベクターをトランスフェクションにより送達する場合、該ベクターは、約1×104細胞ないし約1×1013細胞、および好ましくは約105細胞に対し約5μgから約100μgまでのDNA、および好ましくは約10ないし約50μgのDNAの量で送達される。しかしながら、宿主細胞に対するベクターDNAの相対量は、選択されるベクター、送達方法および選択される宿主細胞のような因子を考慮に入れて調節してよい。
ソーム、ウイルスなどを包含する当該技術分野で既知の若しくは上で開示されたいずれのベクターでもよい。ベクターの宿主細胞への導入は、トランスフェクションおよび感染を包含する当該技術分野で既知の若しくは上で開示されたところのいずれの手段によっても達成しうる。アデノウイルス遺伝子の1種若しくはそれ以上が、宿主細胞のゲノム中に安定に組込まれうるか、エピソームとして安定に発現されうるか、若しくは一過性に発現されうる。遺伝子産物は全部、エピソーム上で一過性に発現されうるか若しくは安定に組込まれうるか、または、遺伝子産物のいくつかが安定に発現されうる一方で他者は一過性に発現される。さらに、アデノウイルス遺伝子のそれぞれのプロモーターは、構成的プロモーター、誘導可能なプロモーター若しくは天然のアデノウイルスプロモーターから独立に選択しうる。プロモーターは、例えば生物体若しくは細胞の特定の生理学的状態により(すなわち分化状態により、または複製中の若しくは静止状態の細胞中で)、あるいは外的に添加される因子により調節しうる。
組換えSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33および/若しくはSAdV−35に基づくベクターは、in vitro、ex vivoおよびin vivoでヒト若しくはサル以外の家畜患者への遺伝子移入に有用である。
1欠失の場所に挿入された遺伝子を含有する組換えアデノウイルスを、上述されたところのE1発現細胞株にトランスフェクトしうる。あるいは、複製能力のあるアデノウイルスを別の選択された細胞株で使用しうる。該トランスフェクトした細胞をその後慣習的様式で培養して、組換えアデノウイルスにプロモーターから遺伝子産物を発現させる。該遺伝子産物をその後、既知の慣習的なタンパク質単離および培養物からの回収方法により培養物から回収しうる。
一態様において、上述された組換えベクターを公表された遺伝子治療方法に従ってヒトに投与する。選択された導入遺伝子を持つサルウイルスベクターは、好ましくは生物学的に適合性の溶液若しくは製薬学的に許容できる送達ベヒクルに懸濁して患者に投与しうる。適するベヒクルは滅菌生理学的食塩水を包含する。製薬学的に許容できる担体であることが既知かつ当業者に公知の他の水性および非水性の等張の滅菌注入溶液ならびに水性および非水性の滅菌懸濁液を本目的上使用しうる。
細胞を形質導入し、ならびに不要な有害作用を伴わず若しくは医学上許容できる生理学的効果を伴い治療上の利益を提供するのに十分なレベルの遺伝子移入および発現を提供するのに十分な量で投与する。慣習的かつ製薬学的に許容できる投与経路は、限定されるものでないが、網膜への直接送達および他の眼内送達法、肝への直接送達、吸入、鼻内、静脈内、筋肉内、気管内、皮下、皮内、直腸、経口および他の非経口投与経路を挙げることができる。投与経路は、所望の場合は組合せうるか、または導入遺伝子若しくは状態に依存して調節しうる。投与経路は主として処置されている状態の性質に依存することができる。
導入遺伝子によりコードされる有用な治療的産物は、インスリン、グルカゴン、成長ホルモン(GH)、副甲状腺ホルモン(PTH)、成長ホルモン放出因子(GRF)、卵胞刺激ホルモン(FSH)、黄体化ホルモン(LH)、ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)、血管内皮増殖因子(VEGF)、アンジオポエチン、アンジオスタチン、顆粒球コロニー刺激因子(GCSF)、エリスロポエチン(EPO)、結合組織増殖因子(CTGF)、塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)、酸性線維芽細胞増殖因子(aFGF)、上皮成長因子(EGF)、トランスフォーミング増殖因子(TGF)、血小板由来増殖因子(PDGF)、インスリン様増殖因子IおよびII(IGF−1およびIGF−II)、TGF、アクチビン、インヒビンを包含するトランスフォーミング増殖因子スーパーファミリーのいずれか1種、若しくは骨形成タンパク質(BMP)BMP1〜15のいずれか、ヘレグルイン(heregluin)/ニューレグリン/ARIA/増殖因子のneu分化因子(NDF)ファミリーのいずれか1種、神経成長因子(NGF)、脳由来神経栄
養因子(BDNF)、ニューロトロフィンNT−3およびNT−4/5、毛様体神経栄養因子(CNTF)、グリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)、ニューツリン、アグリン、セマフォリン/コラプシンのファミリーのいずれか1種、ネトリン−1およびネトリン−2、肝細胞増殖因子(HGF)、エフリン、ノギン、ソニックヘッジホッグならびにチロシン水酸化酵素を制限なしに包含するホルモンならびに増殖および分化因子を包含する。
疫無防備状態の患者で有用であり得る。他の型の天然に存在しない遺伝子配列は、標的の過剰発現を低下させるのに使用し得るアンチセンス分子およびリボザイムのような触媒核酸を包含する。
ずれかの送達を必要としうる。本発明はこれらの治療レジメンに制限されず、多様なそれらが当業者に容易に明らかであろう。
該組換えSAdV−28ベクターは免疫原性組成物としてもまた使用しうる。本明細書で使用されるところの免疫原性組成物は、それに対する体液性(例えば抗体)若しくは細胞性(例えば細胞傷害性T細胞)応答が、哺乳動物、および好ましくは霊長類への送達後に該免疫原性組成物により送達される導入遺伝子産物に対し開始される組成物である。組換えサルAdは所望の免疫原をコードする遺伝子をそのアデノウイルス配列欠失のいずれかに含有し得る。該サルアデノウイルスは、ヒト起源のアデノウイルスに比較して多様な動物種で生組換えウイルスワクチンとしての使用により良好に適することがありそうであるが、しかしこうした使用に制限されない。該組換えアデノウイルスは、免疫応答の誘導にきわめて重要でありかつ病原体の伝播を制限することが可能な抗原(1種若しくは複数)が同定されておりかつcDNAが利用可能であるいかなる病原体に対する予防的若しくは治療的ワクチンとしても使用し得る。
ならびに主にヒト以外の動物における口蹄疫の原因であるアプトウイルス属を包含する。ウイルスのピコルナウイルス科内の標的抗原はVP1、VP2、VP3、VP4およびVPGを包含する。別のウイルス科は、流行性胃腸炎の重要な原因病原体であるノーウォーク群のウイルスを包含するカルシウイルス(calcivirus)科を包含する。ヒトおよびヒト以外の動物で免疫応答を誘導するための抗原の標的指向化における使用に望ましいなお別のウイルス科は、シンドビスウイルス、ロスリバーウイルス、ならびにベネズエラ、東部および西部ウマ脳炎を包含するアルファウイルス属、ならびに風疹ウイルスを包含するルビウイルスを包含するトガウイルス科である。フラビウイルス科は、デング熱、黄熱病、日本脳炎、セントルイス脳炎およびダニ媒介性脳炎ウイルスを包含する。他の標的抗原は、C型肝炎、あるいは伝染性気管支炎ウイルス(家禽)、ブタ伝染性胃腸炎ウイルス(ブタ)、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス(ブタ)、ネコ伝染性腹膜炎ウイルス(ネコ)、ネコ腸内コロナウイルス(ネコ)、イヌコロナウイルス(イヌ)のような多数のヒト以外のウイルスおよび感冒を引き起こしうるヒト呼吸器コロナウイルスならびに/または非A、非B若しくは非C型肝炎を包含するコロナウイルス科から生成しうる。コロナウイルス科内の標的抗原は、E1(M若しくはマトリックスタンパク質ともまた呼ばれる)、E2(S若しくはスパイクタンパク質ともまた呼ばれるS)、E3(HE若しくはヘマグルチン−エルテロース(hemagglutin−elterose)ともまた呼ばれる)糖タンパク質(全コロナウイルスに存在するわけではない)またはN(ヌクレオキャプシド)を包含する。なお他の抗原は、ベシクロウイルス属(例えば水疱性口内炎ウイルス)およびリッサウイルス属(例えば狂犬病)を包含するラブドウイルス科に対し標的とされうる。
さいフラグメントのいずれも包含しうる。同様にtatタンパク質のフラグメントも選択しうる。(米国特許第5,891,994号明細書および米国特許第6,193,981号明細書を参照されたい。)D.H.Barouchら、J.Virol.、75(5):2462−2467(March 2001)およびR.R.Amaraら、Science、292:69−74(6 April 2001)に記述されるHIVおよびSIVタンパク質もまた参照されたい。別の例において、HIVおよび/若しくはSIVの免疫原性タンパク質若しくはペプチドを使用して融合タンパク質若しくは他の免疫原性分子を形成しうる。例えば、2001年8月2日公開の第WO 01/54719号明細書および1999年4月8日公開の第WO 99/16884号明細書に記述されるHIV−1 Tatおよび/若しくはNef融合タンパク質ならびに免疫化レジメンを参照されたい。本発明は本明細書に記述されるHIVおよび/若しくはSIV免疫原性タンパク質若しくはペプチドに制限されない。加えて、これらのタンパク質に対する多様な改変が記述されているか、若しくは当業者により容易に作成され得る。例えば米国特許第5,972,596号明細書に記述される改変gagタンパク質を参照されたい。さらに、いかなる所望のHIVおよび/若しくはSIV免疫原も単独若しくは組合せで送達しうる。こうした組合せは単一ベクター若しくは複数のベクターからの発現を包含しうる。場合によっては、別の組合せは、タンパク質の形態の免疫原の1種若しくはそれ以上の送達を伴う1種若しくはそれ以上の発現された免疫原の送達を必要としうる。こうした組合せを下により詳細に論考する。
ersinia)(パスツレラ);ストレプトバシラス モニリフォルミス(streptobacillus moniliformis)およびスピリルムを包含し;グラム陽性桿菌は、リステリア モノシトゲネス(listeria monocytogenes);エリジペロスリックス ルシオパチエ(erysipelothrix rhusiopathiae);ジフテリア菌(Corynebacterium diphtheria)(ジフテリア);コレラ;炭疽菌(B.anthracis)(炭疽);ドノヴァン症(鼠径部肉芽腫);およびバルトネラ症を包含する。病原性嫌気性細菌により引き起こされる疾患は破傷風;ボツリヌス中毒;他のクロストリジア(clostridia);結核;らい;および他のミコバクテリアを包含する。病原性スピロヘータ疾患は梅毒;トレポネーマ症;イチゴ腫、ピンタおよび風土病性梅毒;ならびにレプトスピラ症を包含する。より高病原性の細菌および病原性真菌により引き起こされる他の感染症は、放線菌症;ノカルジア症;クリプトコックス症、ブラストミセス症、ヒストプラスマ症およびコクシジオイデス真菌症;カンジダ症、アスペルギルス症およびムコール症;スポロトリクス症;パラコクシジオイデス真菌症、ペトリエリジオーシス(petriellidiosis)、トルロプシス症、菌腫およびクロモミコーシス;ならびに皮膚糸状菌症を包含する。リケッチア感染症は、発疹チフス、ロッキー山熱、Q熱およびリケッチア痘を包含する。マイコプラスマおよびクラミジア感染症の例は:マイコプラスマ肺炎;性病性リンパ肉芽腫;オウム病;および周産期クラミジア感染症を包含する。病原性真核生物は病原性原生動物および蠕虫を包含し、また、それらにより生じられる感染症は:アメーバ症;マラリア;リーシュマニア;トリパノソーマ症;トキソプラスマ症;ニューモシスチス カリニ(Pneumocystis carinii);Trichans;トキソプラスマ(Toxoplasma gondii);バベシア症;ジアルジア症;旋毛虫症;フィラリア症;住血吸虫症;線虫;吸虫(trematodes)すなわち吸虫(flukes);および条虫(cestode)(条虫(tapeworm))感染症を包含する。
うに分類されるか若しくは異なって分類される他の生物体が将来同定かつ/若しくはこうした目的上使用されうる。本明細書に記述されるウイルスベクターおよび他の構築物が、これらの生物学的剤への感染症若しくはそれらとの他の有害反応を予防かつ/若しくは処置することができる、これらの生物体、ウイルス、それらのトキシン若しくは他の副生成物からの抗原を送達するのに有用であることが容易に理解されるであろう。
選択された遺伝子の治療レベル若しくは免疫のレベルをモニターしてブースターの必要性(あれば)を決定し得る。CD8+ T細胞応答若しくは場合によっては血清中の抗体力価の評価後に任意のブースター免疫化が望ましいかもしれない。場合によっては、組換えSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33および/若しくはSAdV−35ベクターを、単回投与で、あるいは多様な組合せレジメンで、例えば他の有効成分を必要とする処置のレジメン若しくはクールと組合せで、またはプライム−ブースト(prime−boost)レジメンで送達しうる。多様なこうしたレジメンが当該技術分野で記述されており、そして容易に選択されうる。
Amara、Science、292:69−74(6 April 2001)を参照されたい。例えば、DNAプライムは、単一転写物からのGag、Pol、Vif、VPXおよびVprならびにEnv、TatおよびRevを送達しうる。あるいは、SIV Gag、PolおよびHIV−1 Envを組換えSAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33および/若しくはSAdV−35アデノウイルス構築物中で送達する。なお他のレジメンは第WO 99/16884号明細書および第WO 01/54719号明細書に記述されている。
ある。
糞便サンプルは、ルイジアナ大学ニューイベリア研究センター(University
of Louisiana New Iberia Research Center)、4401 W.Admiral Doyle Drive,New Iberia,Louisiana,USAのチンパンジーのコロニー、およびテキサス大学M.D.アンダーソンがんセンターマイケル・E.キーリング比較医学研究センター(Michael E.Keeling Center for Comparative Medicine and Research,University of Texas M.D.Anderson Cancer Center)、Bastrop,Texas,USAのチンパンジーのコロニーから得た。ハンクス緩衝塩類溶液の懸濁液中のチンパンジー糞便サンプルからの上清を0.2ミクロンシリンジフィルターを通して除菌した。各濾過したサンプル100μlをヒト細胞株A549培養物に接種した。これらの細胞を、10%FBS、1%ペニシリン−ストレプトマイシンおよび50μg/mlゲンタマイシンを含むハムF12中で増殖させた。培養約1ないし2週後に数回の接種を伴う細胞培養物で視覚的細胞変性効果(CPE)が明らかであった。該アデノウイルスを、アデノウイルス精製のための標準的な公表された塩化セシウム勾配技術を使用して、A549細胞中の培養物から精製した。精製したアデノウイルスからのDNAを単離し、そしてQiagen Genomic services、独国ヒルデンにより完全に配列決定された。
公表された報告ならびにAdC1(SAdV−21)での発明者の経験の双方が、サブグループBアデノウイルス中のE1欠失がHEK 293細胞中でAd5 E1遺伝子により補完されないことを示したため、種BアデノウイルスSAdV−27、SAdV−28、SAdV−29、SAdV−32およびSAdV−35に基づくベクターを、AdC1を使用してハイブリッドアデノウイルスベクターを構築するという以前に記述された戦略(Royら、J Virol.Methods.(2007)141、14−21;Royら、J Gen Virol.(2006)87、2477−2485)に基づき構築した。ここでキメラ構築物の左および右端はチンパンジーアデノウイルスPan 5(サルアデノウイルス22として知られる)由来である。
公表された報告およびAdC1での発明者の経験の双方が、サブグループBアデノウイルス中のE1欠失がHEK 293細胞中でAd5 E1遺伝子により補完されないことを示したため、ハイブリッドアデノウイルスを、AdC1を使用する戦略(Royら、J
Virol.Methods.(2007)141、14−21; Royら、J Gen Virol.(2006)87、2477−2485)に基づき生成した。ここでキメラ構築物の左および右端はチンパンジーアデノウイルスPan 5(サルアデノウイルス22として知られる)由来である。
pPan5C1delRIからのAd C1セグメント(ClaIとEcoRIの間)を、オリゴマーSAD27 topおよびSAD27 botをアニーリングすることにより創製されるDNAリンカーで置き換えた。配列番号198:SAD27 top−CGCGCCGAGCATTCATGCTTGTACGTA−CCCACGCACAGCT
TTAAACATTTGおよび配列番号199:SAD27 bot−AATTCAAATGTTTAAAGCTGTGCGTGGGTACGTACAAGCATGAATGCTCGG。このプラスミドがpC5endsSAD27 oligoである。
プラスミドpC5endsSAD27 oligoをAscIおよびEcoRIで消化し、そしてPCR生成した3873bpフラグメント(またAscIおよびEcoRIで消化した)をクローン化してpC5endsSAD27PCRを創製した。該PCRフラグメントは、鋳型としてSAdV−27ウイルスDNAを使用し、製造元の説明書に従ってNEB Phusion PCRキットを使用してプライマーSAD27 AscおよびSAD27 RIを使用して生成した。該PCRプライマーはそれぞれAscIおよびEcoRI部位を含有した。
配列番号200:SAD27 Asc-TACCACCAGCGGCGCGCCAGACATCAAG
配列番号201:SAD27 RI−AAATGGAATTCAAATGTTTAAAGCTGTG
プラスミドpC5endsSAD27PCRをAscIで消化し、そしてSAdV−27ウイルスDNA AscI(7951−17458)フラグメントの9507bpフラグメントをクローン化した。正しい向きをもつクローンをpC5SAD27 PCR Ascと呼んだ。
プラスミドpC5SAD27 PCR AscをPacIで消化し、そしてSAdV−27ウイルスDNA PacI(18409−29019)の10610bpフラグメントをクローン化した。正しい向きをもつクローンをpC5C27delAsc−Pacと呼んだ。
プラスミドpC5C27delAsc−PacをMluI+SbfIで消化し、そして
SAdV−27ウイルスDNA MluI(16026)−SbfI(23007)の6981bpフラグメントをクローン化してpC5/C27 IPを創製した。
ローンの構築
公表された報告およびAdC1での発明者の経験の双方が、サブグループBアデノウイルス中のE1欠失がHEK 293細胞中でAd5 E1遺伝子により補完されないことを示したため、ハイブリッドアデノウイルスを、AdC1を使用する戦略(Royら、J
Virol.Methods.(2007)141、14−21;Royら、J Gen Virol.(2006)87、2477−2485)に基づき生成した。ここでキメラ構築物の左および右端はチンパンジーアデノウイルスPan 5(サルアデノウイルス22として知られる)由来である。
pPan5C1delRIからのAd C1セグメント(ClaIとEcoRIの間)を、SAdV−28ウイルスDNAを鋳型として使用してPCR生成したフラグメントで置き換えた。PCRプライマーはそれぞれClaIおよびEcoRI部位を含有する。プライマーCCATCTATCGATGCATAATCAGCAAACC(配列番号33(W33 fwd、Tm −64.5°))およびCTCAAATGGAATTCAAATGTTTAAAG(配列番号34)を使用した。プライマー「W33 fwd」はClaI部位(下線を付けられる)を含有する。ClaI部位の後の2塩基は野生型配列でCAであるが、しかし該プライマー中でClaI部位を細菌中でメチル化されないものに転化するようにGCに変化されている。この変化は、106アミノ酸のE3タンパク質中で1アミノ酸を変え(S94C)、これはAd4の推定の11Kタンパク質CR1δに相同である)。プライマー「W33 rev」はEcoRI部位(下線を付けられる)を含有する。対応する野生型Ad配列はGAATCCである。該変化された塩基は、この変化により変えられないイソロイシン(E4 orf 6/7タンパク質の残基123)のコドンである。ClaI部位はSAdV−28の30273のものと同一であり;Ad Pan 5からのE4領域にそれをスプライシングすることがキメラE4 orf 6/7を創製する(pPan5C1delRI中のEcoRI部位がAd Pan 5 E4 orf 6/7タンパク質のオープンリーディングフレーム内にある)ように、EcoRI部位を該プライマー中で創製した。
プラスミドpPan5C1delR1−W33 PCRをAscIおよびClaIで消化し、そしてSAdV−28ウイルスDNAのAscI(11065)ないしClaI(18577)フラグメント(pol遺伝子中に存在するAscI部位と唯一のClaI部位の間)をクローン化してpPan5−W33 delAsc delClaを生じた。
リメラーゼ遺伝子を創製するため)。
プラスミドpPan5−W33 delAsc delClaをAscIで消化し、そしてSAdV−28ウイルスDNAのAscI(7941)ないしAscI(11065)フラグメントをクローン化した(キメラポリメラーゼ遺伝子を創製する)。正しい向きをもつクローンをpPan5−W33 del Claと呼んだ。
プラスミドpPan5−W33 del ClaをClaIで消化し、そしてSAdV−28ウイルスDNAのClaI(18577)ないしClaI(30273)フラグメントをクローン化した。正しい向きをもつクローンをpC5/C28 IPと呼んだ。
公表された報告およびAdC1での発明者の経験の双方が、サブグループBアデノウイルス中のE1欠失がHEK 293細胞中でAd5 E1遺伝子により補完されないことを示したため、ハイブリッドアデノウイルスを、AdC1を使用する戦略(Royら、J
Virol.Methods.(2007)141、14−21;Royら、J Gen Virol.(2006)87、2477−2485)に基づき生成した。ここでキメラ構築物の左および右端はチンパンジーアデノウイルスPan 5(サルアデノウイルス22として知られる)由来である。
pPan5C1delRIからのAd C1セグメント(ClaIとEcoRIの間)を、SAdV−29ウイルスDNAを鋳型として使用してPCR生成したフラグメントで置き換えた。PCRプライマーはそれぞれClaIおよびEcoRI部位を含有する。プライマーCCATCTATCGATGCATAATCAGCAAACC(配列番号33)およびCTCAAATGGAATTCAAATGTTTAAAG(配列番号34)を使用した。プライマー「W33 fwd」はClaI部位(下線を付けられる)を含有する。ClaI部位の後の2塩基は野生型配列でCAであるが、しかし該プライマー中で細菌中でClaI部位をメチル化されないものに転化するようにGCに変化されている。この変化は、106アミノ酸のE3タンパク質中で1アミノ酸(S94C)を変え、これはAd
4の推定の11Kタンパク質CR1δに相同である)。プライマー「W33 rev」はEcoRI部位(下線を付けられる)を含有する。対応する野生型Ad配列はGAATCCである。変化された塩基は、この変化により変えられないイソロイシン(E4 orf
6/7タンパク質の残基123)のコドンである。
プラスミドpPan5C1delR1−C29 PCRをAscIおよびClaIで消化し、そしてSAdV−29ウイルスDNAのAscI(11094)ないしClaI(18583)フラグメント(pol遺伝子中に存在するAscI部位と唯一のClaI部位の間)をクローン化してpPan5−C29 delAsc delClaを生じた。
プラスミドpPan5−C29 delAsc delClaをAscIで消化し、そしてSAdV−29ウイルスDNAのAscI(7945)ないしAscI(11094)フラグメントをクローン化した(キメラポリメラーゼ遺伝子を創製する)。正しい向きをもつクローンをpPan5−C29 del Claと呼んだ。
プラスミドpPan5−C29 del ClaをClaIで消化し、そしてSAdV−29ウイルスDNAのClaI(18583)ないしClaI(30303)フラグメントをクローン化した。正しい向きをもつクローンをpC5/C29 IPと呼んだ。プラスミドpC5/C29 IPは、内的な25603bpセグメント(bp#7955−bp#33557)がSAdV−29からの機能的に類似の24817bp(bp#7945−bp#32761)セグメントにより置き換えられているE1欠失Ad Pan 5(SAdV−22)ウイルスDNAを持つ。すなわち、これは、プレ末端タンパク質、52/55Kタンパク質、ペントンベース、pVII、Mu、ヘキソン、エンドプロテアーゼ、DNA結合タンパク質、100K足場タンパク質、33Kタンパク質、pVIII、E3領域およびファイバーのSAdV−22遺伝子のSAdV−29からのものでの置換をもたらす。SAdV−29フラグメントの左端のAscI部位はDNAポリメラーゼのオープンリーディングフレームの最初(1192残基タンパク質の残基236)にあり、そしてキメラタンパク質をもたらす。SAdV−29フラグメントの右端を構成するEcoRI部位はE4 orf 6/7のオープンリーディングフレーム内にある。該右端を、再生されるE4 orf 6/7翻訳産物がAd Pan 5とSAdV−29の間のキメラであるようなAd Pan 5からのPCR生成した右端フラグメントに連結した。
公表された報告およびAdC1での発明者の経験の双方が、サブグループBアデノウイルス中のE1欠失がHEK 293細胞中でAd5 E1遺伝子により補完されないことを示したため、ハイブリッドアデノウイルスを、AdC1を使用する戦略(Royら、J
Virol.Methods.(2007)141、14−21;Royら、J Gen Virol.(2006)87、2477−2485)に基づき生成した。ここでキメラ構築物の左および右端はチンパンジーアデノウイルスPan 5(サルアデノウイルス22として知られる)由来である。
pPan5C1delRIからのAd C1セグメント(ClaIとEcoRIの間)を、鋳型としてSAdV−32ウイルスDNAを使用してPCR生成したフラグメントで置き換えた。
プラスミドpPan5C1 C32 PCRをAscIおよびMluIで消化し、そしてSAdV−32ウイルスDNAのAscI(7945)ないし MluI(16058)フラグメントをクローン化してPan5/C32 del Mluを生じた。
プラスミドpPan5/C32 del MluをMluIで消化し、そしてSAdV−32ウイルスDNAのMluI(16058ないし30510)フラグメントをクローン化した。正しい向きをもつクローンをpC5/C32 IPと呼んだ。
n 5(SAdV−22)ウイルスDNAを持つ。すなわち、これは、プレ末端タンパク質、52/55Kタンパク質、ペントンベース、pVII、Mu、ヘキソン、エンドプロテアーゼ、DNA結合タンパク質、100K足場タンパク質、33Kタンパク質、pVIII、E3領域およびファイバーのSAdV−22遺伝子のSAdV−32からのものでの置換をもたらす。SAdV−32フラグメントの左端のAscI部位はDNAポリメラーゼのオープンリーディングフレームの最初(1192残基タンパク質の残基236)にあり、そしてキメラタンパク質をもたらす。SAdV−32フラグメントの右端を構成するEcoRI部位はE4 orf 6/7のオープンリーディングフレーム内にある。該右端を、再生されるE4 orf 6/7翻訳産物がAd Pan 5とSAdV−32の間のキメラであるようなAd Pan 5からのPCR生成した右端フラグメントに連結した。
公表された報告およびAdC1での発明者の経験の双方が、サブグループBアデノウイルス中のE1欠失がHEK 293細胞中でAd5 E1遺伝子により補完されないことを示したため、ハイブリッドアデノウイルスを、AdC1を使用する戦略(Royら、J
Virol.Methods.(2007)141、14−21;Royら、J Gen Virol.(2006)87、2477−2485)に基づき生成した。ここでキメラ構築物の左および右端はチンパンジーアデノウイルスPan 5(サルアデノウイルス22として知られる)由来である。
プラスミドpPan5C1delRIをAscIおよびEcoRIで消化し、そしてSAdV−35ウイルスDNAのAscI(11058)ないしEcoRI(22198)フラグメントをクローン化してpPan5CI C35 Asc−RIを生じた。
プラスミドpPan5CI C35 Asc−RIをAscIで消化し、そしてSAdV−35ウイルスDNAのAscIフラグメント(7928ないし11058)をクローン化した。正しい向きをもつクローンをpPan5CI C35 Asc−RI+Ascと呼んだ。
プラスミド pPan5CI C35 Asc−RI+AscをEcoRIで消化し、そしてSAdV−35ウイルスDNAのEcoRIフラグメント(22198ないし32738)をクローン化した。正しい向きをもつクローンをpC5/C35 IPと呼んだ。
II、E3領域およびファイバーのSAdV−22遺伝子のSAdV−35からのものでの置換をもたらす。SAdV−35フラグメントの左端のAscI部位はDNAポリメラーゼのオープンリーディングフレームの最初(1192残基タンパク質の残基236)にあり、そしてキメラタンパク質をもたらす。SAdV−35フラグメントの右端を構成するEcoRI部位はE4 orf 6/7のオープンリーディングフレーム内にある。該右端を、再生されるE4 orf 6/7翻訳産物がAd Pan 5とSAdV−35の間のキメラであるようなAd Pan 5からのPCR生成した右端フラグメントに連結した。
インフルエンザウイルス核タンパク質を発現するE1欠失アデノウイルスベクターを構築するため、H1N1 A型インフルエンザウイルスNP(A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai、GenBank受託番号AF389119.1)をコードするヌクレオチド配列をコドン最適化しかつ完全合成した(Celtek Genes、テネシー州ナッシュビル)。ヒトサイトメガロウイルス初期プロモーター、合成イントロン(プラスミドpCI(Promega、ウィスコンシン州マディソンから得た)、コドン最適化したA型インフルエンザNPコーディング配列およびウシ成長ホルモンポリアデニル化シグナルから構成される発現カセットを構築した。該プラスミドpShuttle CMV PI FluA NPは、それがそれぞれまれに切断する制限酵素I−CeuIおよびPI−SceI(New England Biolabs)の認識部位により隣接されている上述された発現カセットを持つ。E1欠失アデノウイルスベクターの分子クローンを創製するため、まれに切断する制限酵素I−CeuIおよびPI−SceIの認識部位がE1欠失の代わりに挿入されているE1欠失アデノウイルスのプラスミド分子クローンを最初に創製した。該E1欠失アデノウイルスプラスミドをその後I−CeuIおよびPI−SceIで消化し、そして発現カセット(同一酵素により消化した)を連結した。生じるアデノウイルスプラスミド分子クローンを、組換えアデノウイルスベクターをレスキューするためHEK 293細胞にトランスフェクトした。トランスフェクション後のレスキューが、制限酵素消化により該プラスミドから直鎖状アデノウイルスゲノムを最初に放出することにより促進されることが見出された。
野生型SAdV−27、SAdV−28、SAdV−29、SAdV−32およびSAdV−35を、直接免疫蛍光によりモニターされる感染阻害中和抗体アッセイを使用して、ヒトアデノウイルス5(亜種C)およびチンパンジーアデノウイルス7(SAdV−24)ならびにヒトプールIgGと比較して交差中和活性について評価した。ヒトプールIgG(Hu Pooled IgG)は商業的に購入され、そして一般ヒト集団が曝露される多数の抗原に対する抗体をそれが含有するために、免疫無防備状態の患者での投与に承認されている。ヒトプールIgGについてのサルアデノウイルスに対する中和抗体の存在若しくは非存在は、一般集団におけるこれらのアデノウイルスに対する抗体の頻度の反映である。
および0.2%Triton中の透過処理(4℃、20分)後に、DAPI、およびHAdV−5に対し生じさせたヤギFITC標識した広範に交差反応性の抗体(Virostat)で染色した。感染のレベルはFITC陽性細胞の数を顕微鏡下に計数することにより決定した。NAB力価はアデノウイルス感染をナイーブ血清対照と比較して50%若しくはそれ以上阻害する最高血清希釈として報告する。
形質細胞様樹状細胞をヒト末梢血単核細胞(PBMC)から単離し、そして96ウェルプレート中の培地中で培養しそしてアデノウイルスに感染させた。48時間後に細胞を遠心沈殿しかつ上清を収集し、そしてインターフェロンαの存在について分析した。
ある。従って、生成されたデータ(下で論考する)は複数ドナーからの細胞の分析に由来する。とは言え、驚くべきことに、インターフェロン若しくは他のサイトカイン放出に基づくサブグループの分離は、複数ドナーからの細胞を分析する場合でさえ維持される。
Claims (8)
- SAdV−28のヘキソンタンパク質、配列番号11のアミノ酸1ないし944であるヘキソンタンパク質、SAdV−28のペントンタンパク質、配列番号6のアミノ酸1ないし582であるペントンタンパク質、およびSAdV−28のファイバータンパク質、配列番号21のアミノ酸1ないし323であるファイバータンパク質、を含んでなるアデノウイルスキャプシド、を有する組換えアデノウイルスであって、
前記キャプシドが、宿主細胞中でのその転写、翻訳および/若しくは発現を指図する発現制御配列に作動可能に連結されている遺伝子を保有する異種分子を被包化する、上記組換えアデノウイルス。 - 複製および被包化に必要な5’および3’アデノウイルスシスエレメントをさらに含んでなる、請求項1に記載の組換えアデノウイルス。
- 前記組換えアデノウイルスがE1遺伝子の全部若しくは一部を欠く、請求項1に記載の組換えアデノウイルス。
- 前記組換えアデノウイルスが複製欠損である、請求項3に記載の組換えアデノウイルス。
- 前記組換えアデノウイルスがハイブリッドキャプシドを有する、請求項1に記載の組換えアデノウイルス。
- 前記アデノウイルスキャプシドが、SAdV−28、SAdV−27、SAdV−29、SAdV−32、SAdV−33およびSAdV−35から選択される1種以上のキャプシドタンパク質を含んでなる、請求項5に記載の組換えアデノウイルス。
- 製薬学的に許容できる担体中の請求項1ないし6のいずれか1に記載の組換えアデノウイルスを含んでなる組成物。
- E1a、配列番号30;
E1b、スモールT/19K、配列番号23;
E1b、ラージT/55K、配列番号2;
IX、配列番号3;
52/55D、配列番号4;
IIIa、配列番号5;
VII、配列番号7;
V、配列番号8;
pX、配列番号9;
VI、配列番号10;
エンドプロテアーゼ、配列番号12;
100kD、配列番号13;
33kD、配列番号32;
22kD、配列番号25;
VIII、配列番号14;
E3/12.5K、配列番号15;
CR1−α、配列番号26;
gp19K、配列番号16;
CR1−β、配列番号27;
CR1−γ、配列番号17;
CR1−δ、配列番号18;
RID−α、配列番号19;
RID−β、配列番号28;ならびに
E3/14.7K、配列番号20
よりなる群から選択される1種若しくはそれ以上のサルアデノウイルスタンパク質を含んでなる、請求項1ないし6のいずれか1に記載の組換えアデノウイルス、を含んでなる組成物。
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Family Cites Families (17)
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NZ530245A (en) * | 2001-06-22 | 2007-04-27 | Wistar Inst | Methods of inducing a cytotoxic immune response and recombinant simian adenovirus compositions useful therein |
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