JP5680910B2 - 風味の改善された豆乳乳酸発酵物 - Google Patents
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Description
[1]分岐鎖アミノ酸が添加された豆乳を乳酸菌により発酵させて得られる豆乳乳酸発酵物;
[2]分岐鎖アミノ酸が、バリン、ロイシンおよびイソロイシンよりなる群から選択される1種以上のアミノ酸である、上記[1]に記載の豆乳乳酸発酵物;
[3]豆乳乳酸発酵物中のジアセチル量が3ppm以下である、上記[1]または[2]に記載の豆乳乳酸発酵物;
[4]乳酸菌が、ラクトバチラス属、ロイコノストック属またはストレプトコッカス属に属する乳酸菌を含む、上記[1]〜[3]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[5]分岐鎖アミノ酸がバリンであり、バリンが豆乳に対し0.005%以上添加される、上記[1]〜[4]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;ならびに
[6]飲食品である、上記[1]〜[5]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[7]分岐鎖アミノ酸が、ロイシンおよびイソロイシンの組み合わせである、上記[1]〜[6]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[8]分岐鎖アミノ酸が、0.1〜0.5%のBetamino BC/Kとして添加される、上記[1]〜[6]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[9]乳酸菌が、ストレプトコッカス・サーモフィラスを含む、上記[1]〜[8]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[10]豆乳の大豆固形分が4.5%より多い、上記[1]〜[9]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[11]動物由来成分を含まない、上記[1]〜[10]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;
[12]pHが5.0以下である、上記[1]〜[11]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物;ならびに
[13]豆乳乳酸発酵物中のジアセチル量が2ppm以下である、上記[1]〜[12]のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物
にも関する。
(1)豆乳に分岐鎖アミノ酸を添加する工程、および
得られた分岐鎖アミノ酸添加豆乳を乳酸菌により発酵させる工程
を含む、豆乳乳酸発酵物の製造方法に関する。
さらに、本発明は、
(2)乳酸菌がストレプトコッカス・サーモフィラスを含み、発酵が39〜43℃で行われる、上記(1)に記載の豆乳乳酸発酵物の製造方法;
(3)発酵が6〜16時間行われる、上記(1)または(2)に記載の豆乳乳酸発酵物の製造方法;ならびに
(4)発酵終了時のpHが4.8以下である、上記(1)〜(3)のいずれかに記載の豆乳乳酸発酵物の製造方法
にも関する。
L−バリンを添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物の製造
市販の無調整豆乳(株式会社フードケミファ社製、大豆品種:珠美人、大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)にL−バリン(日本理化学薬品株式会社製)を0.1%添加した。得られたL−バリン含有豆乳に市販のヨーグルト発酵粉末スターター(ダニスコ社製、ストレプトコッカス・サーモフィラスおよびラクトバチルス・ブルガリカスを含む凍結乾燥品)を最終濃度で28mg/Lの濃度(ストレプトコッカス・サーモフィラス約3.0×106cfu/mL、ラクトバチルス・ブルガリカス約3.0×103cfu/mL含有)となるように添加して41℃±1℃にて10時間、発酵物のpHが4.80以下になるまで、半嫌気条件で静置発酵した。なお、ストレプトコッカス・サーモフィラスは生育できないがラクトバチルス・ブルガリカスは生育可能なpH5.2に調製した選択培地を用いて菌数を測定し、ラクトバチルス・ブルガリカスは豆乳中ではほとんど生育しないことが確認された。発酵後、4℃にて1日間冷却し、カードの形成された豆乳乳酸発酵物を得た(本発明品1)。なお、実施例、比較例いずれにおいても、発酵時間の増加とともに発酵物のpHは減少したが、発酵時間が16時間を越えるとpHはほとんど減少しなくなった。
アミノ酸無添加の豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物の製造
市販の無調整豆乳(大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)をそのまま、または滅菌水で希釈し、各大豆固形分濃度(7.2%、5.4%、4.5%、2.7%、1.8%、0.9%)に調整した希釈豆乳に、それぞれ実施例1と同様の条件で、ヨーグルトスターターを接種し、発酵させ、発酵後、冷却し、カードの形成された豆乳乳酸発酵物を得た(比較品)。
官能評価
実施例1で得られた豆乳乳酸発酵物(本発明品1)と、比較例1で大豆固形分濃度9.0%の豆乳から得られたアミノ酸無添加の豆乳乳酸発酵物(比較品1)について官能評価を行った。風味の評価方法として、9名のパネラーにより本発明品1と比較品1の風味を比較する官能評価を行った。また、同パネラーに対し、本発明品1を1個と比較品1を2個の計3個1組にし、3個のうち最も好ましい風味のものを1つ選ばせる3点比較法を実施した。この結果を表1に示す。さらに、13名のパネラーに対し、比較品1と本発明品1を各1個ずつの計2個1組にし、2個のうち最も好ましい風味のものを1つ選ばせる2点比較法も実施した。評価は全てブラインド形式で行った。
ジアセチル生成量の測定1
ジアセチルの定量には内部標準液として1−Pentanol(和光純薬工業社製)を用いた内部標準法を採用した。まず、既知濃度(1ppm、5ppm、10ppm、20ppm、40ppm)のジアセチル標品(東京化成工業社製)と内部標準液(10ppm)の酢酸メチル溶解液を作製し、ガスクロマトグラフィーFID(Flame Ionization Detector)法(Agilent社製)を用いて内部標準液とジアセチルのピーク面積値の比率を用いて検量線(R2=0.999)を作製した。豆乳乳酸発酵物中のジアセチルの抽出には、酢酸メチルを用いた溶媒抽出法を採用し、抽出の際に予め終濃度10ppmとなるような内部標準液を添加した。得られた抽出液をガスクロマトグラフィーに供し、作製した検量線に従ってジアセチルの濃度を定量した。比較例1で得られた各豆乳乳酸発酵物をサンプルとし、ジアセチル量を測定した結果を図1に示す。乳酸発酵前の豆乳中の大豆固形分量が減少するに従って、乳酸菌によって生成されるジアセチルの量が減少する傾向があることがわかった。
また、比較例1で得られた、濃度の異なる豆乳を用いて得られた豆乳乳酸発酵物について、実施例2の方法に準じて官能評価を行ったところ、実施例2の結果と、実施例3の結果から、豆乳乳酸発酵物中のジアセチル生成と発酵臭との間に相関があることがわかった。豆乳乳酸発酵物中のジアセチル量が2〜3ppm以上であると、官能評価で独特の不快な発酵臭として感じられ、風味の面で好ましくない豆乳乳酸発酵物となることがわかった。
L−バリンを添加した希釈豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物
大豆固形分4.5%の希釈豆乳(0.00035%のL−バリン含有)に、実施例1と同様の手法を用いてL−バリンを0.1%添加して発酵させて、希釈豆乳乳酸発酵物を得た。この希釈豆乳乳酸発酵物と、比較例で大豆固形分4.5%の希釈豆乳を発酵させて得た、アミノ酸無添加の希釈豆乳乳酸発酵物について、パネラー3名により実施例2と同様に官能評価を行ったところ、大豆固形分の少ない豆乳(例えば大豆固形分4.5%以下の豆乳)を発酵させた場合(ジアセチルの生成量が少ない場合)でも、豆乳への分岐鎖アミノ酸添加により若干の風味の改善が認められた。
各種分岐鎖アミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物1
実施例1において、発酵前の無調整豆乳(大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)に、L−バリンの代わりに図2に記載の各種アミノ酸を0.1%添加(複数種のアミノ酸を添加する場合はそれぞれのアミノ酸を終濃度で0.1%添加)した以外は実施例1と同様の手法を用いて、各種豆乳乳酸発酵物を得た。得られた豆乳乳酸発酵物のそれぞれについて、実施例3と同様の手法を用いてジアセチルの生成量を測定した結果を図2に示す。L−ロイシンおよびL−イソロイシンは、それぞれ単独(0.1%)で豆乳に添加した場合、L−バリンと比較するとジアセチルの生成抑制効果が弱かったが、組み合わせて共添加することで、顕著なジアセチル生成抑制効果が見られ、官能評価でも発酵臭の軽減が確認された。
各種分岐鎖アミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物2(ジアセチル生成量の測定2)
実施例1において、発酵前の無調整豆乳(大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)に、L−バリンの代わりに図3に記載の各種アミノ酸を0.1%添加(複数種のアミノ酸を添加する場合はそれぞれのアミノ酸を終濃度で0.1%添加)した以外は実施例1と同様の手法を用いて、各種豆乳乳酸発酵物を得た。得られた豆乳乳酸発酵物のそれぞれについて、以下の手法を用いてジアセチルの生成量(相対値)を測定した。
測定には、ヘッドスペースガスクロマトグラフィー・マススペクトル法(Agilent社製)を用いた。20mlヘッドスペース用バイアルにサンプルの豆乳乳酸発酵物を10g分注し、80℃、15分間バイアル中で気液平衡を行い、ガスクロマトカラムに供した。得られたトータルイオンクロマトグラムからジアセチルのピーク面積値を算出した。分岐鎖アミノ酸を添加していない豆乳乳酸発酵物(比較品1)中に含まれるジアセチルのピーク面積値を100%とし、各種アミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物中のジアセチル量を相対値として図3に示した。
L−ロイシンおよびL−イソロイシンは、それぞれ単独(0.1%)で豆乳に添加した場合、L−バリンと比較するとジアセチルの生成抑制効果が弱かったが、複数種を共添加することで、顕著なジアセチル生成抑制効果が見られ、官能評価でも発酵臭の軽減が確認された。
分岐鎖アミノ酸以外のアミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物1
L−バリンの代わりにスレオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒスチジン、セリン、アルギニン、リジン、トリプトファン、チロシン、フェニルアラニン、アラニン、プロリンまたはグリシンを各0.1%用いた以外は、実施例1と同様の手法を用いて、それぞれのアミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物を得た。
実施例2および実施例6に記載の方法に準じてアミノ酸無添加の豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物(比較例1)と比較したところ、上記のアミノ酸添加によるジアセチル生成の抑制作用は見られなかった。
分岐鎖アミノ酸以外のアミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物2
L−バリンの代わりにシステインまたはメチオニンを各0.1%用いた以外は、実施例1と同様の手法を用いて、それぞれのアミノ酸を添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物を得た。
実施例2および実施例6に記載の方法に準じてアミノ酸無添加の豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物(比較例1)と比較したところ、上記のアミノ酸添加により、ジアセチル生成の抑制作用は見られたが、アミノ酸由来の硫黄臭により、風味の面で好ましい豆乳乳酸発酵物は得られなかった。
L−バリンを各種濃度で添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物
実施例1において、図4に記載の各量(0.001%、0.005%、0.01%、0.1%)のL−バリンを発酵前の無調整豆乳(大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)に添加した以外は実施例1と同様の手法を用いて、各種豆乳乳酸発酵物を得た。得られた豆乳乳酸発酵物のそれぞれについて、実施例3と同様の手法を用いてジアセチルの生成量を測定した結果を図4に示す。
L−バリンを50ppm(0.005%)以上添加した豆乳乳酸発酵物では、ジアセチル生成抑制作用が見られたが、L−バリンを10ppm(0.001%)添加した豆乳乳酸発酵物では、ジアセチル生成抑制作用が弱かった。発酵臭の原因となるジアセチルの生成を効果的に抑えるには発酵前の豆乳(大豆固形分9.0%)に、少なくとも50ppmのL−バリンを添加することが好ましいと考えられた。
Betamino BC/Kを添加した豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物
実施例1において、分岐鎖アミノ酸を多く含む、植物性原料(砂糖大根(ビート))由来のBetamino BC/K粉末(製造者:AMINO GmbH(ドイツ))を図5に記載の各量(0.05%、0.01%、0.1%、0.5%)、L−バリンの代わりに発酵前の無調整豆乳(大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)に添加した以外は実施例1と同様の手法を用いて、各種豆乳乳酸発酵物を得た。得られた豆乳乳酸発酵物のそれぞれについて、実施例3と同様の手法を用いてジアセチルの生成量を測定した結果を図5に示す。
Betamino BC/Kを添加した場合にも、豆乳乳酸発酵物におけるジアセチルの生成が飛躍的に抑制され、また、官能評価で風味改善効果も確認された。添加量が0.5%より多い場合、Betamino BC/K独特の臭いが優先し、あまり好まれない風味となった。一方、Betamino BC/Kを0.01%、0.005%添加した豆乳発酵物ではジアセチル生成抑制作用が弱かった。発酵臭の原因となるジアセチルの生成を効果的に抑えるためには発酵前の豆乳(大豆固形分9.0%)に、少なくとも0.1%のBetamino BC/Kを添加することが好ましいと考えられた。
各種乳酸菌を用いた豆乳乳酸発酵物の製造
市販の無調整豆乳(株式会社フードケミファ社製、大豆品種:珠美人、大豆固形分9.0%、0.0007%のL−バリン含有)にラクトバチルス属乳酸菌(ラクトバチルス・カルバタス、ラクトバチルス・ペントーサス)またはロイコノストック属乳酸菌(ロイコノストック・メセンテロイデス)を実施例1に記載の手法に準じて添加し、30℃にて24時間、半嫌気条件で静置発酵した。得られた豆乳乳酸発酵物それぞれについて、実施例6に記載の方法に準じてアミノ酸無添加の豆乳を用いた豆乳乳酸発酵物(比較例1)と比較したところ、これらの乳酸菌による乳酸発酵でもジアセチル生成が確認された。
豆乳中の分岐鎖アミノ酸含有量の測定
豆乳(フードケミファ社製、大豆固形分9.0%、大豆品種:珠美人)に2Nの塩酸を添加し、pH4.5まで下げ、大豆タンパク質を凝集させた。その後、10000rpmで10分間遠心し、上清(ホエー)を回収し、分子量10000の膜で処理し、適宜希釈を行い、液体クロマトグラフィーを用いて遊離アミノ酸量の定量を行った。大豆固形分9.0%の豆乳中の分岐鎖アミノ酸量は、L−バリンが0.007mg/ml(7.0ppm)、L−ロイシンが0.007mg/ml(7.0ppm)、L−イソロイシンが0.005mg/ml(5.0ppm)であった。
Claims (6)
- 分岐鎖アミノ酸が添加された豆乳を乳酸菌により発酵させて得られる豆乳乳酸発酵物であって、
分岐鎖アミノ酸が、L−バリン、L−ロイシンおよびL−イソロイシンよりなる群から選択される1種以上のアミノ酸であり、
分岐鎖アミノ酸が、豆乳に対し0.005%以上1%以下または豆乳中の大豆固形分量に対し0.05%以上11%以下添加され、ここで、分岐アミノ酸の添加量は、豆乳中にもともと含まれる分岐鎖アミノ酸を含まない量である、豆乳乳酸発酵物。 - 豆乳乳酸発酵物中のジアセチル量が3ppm以下である、請求項1に記載の豆乳乳酸発酵物。
- 乳酸菌が、ラクトバチラス属、ロイコノストック属またはストレプトコッカス属に属する乳酸菌を含む、請求項1または2に記載の豆乳乳酸発酵物。
- 乳酸菌が、ストレプトコッカス・サーモフィラスを含む、請求項3に記載の豆乳乳酸発酵物。
- 飲食品である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の豆乳乳酸発酵物。
- 豆乳に分岐鎖アミノ酸を添加する工程、および
得られた分岐鎖アミノ酸添加豆乳を乳酸菌により発酵させる工程
を含む、豆乳乳酸発酵物の製造方法であって、
分岐鎖アミノ酸が、L−バリン、L−ロイシンおよびL−イソロイシンよりなる群から選択される1種以上のアミノ酸である、製造方法。
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