JP5641708B2 - 皮膚外用剤等の配合成分に対する安定化剤と皮膚外用剤の製造方法 - Google Patents
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Description
<実施例1>
フラーレンによるハイドロキノンの光分解抑制作用について試験を行った。フラーレン試料として、RadicalSponge(ビタミンC60バイオリサーチ(株)、登録商標)を使用した。RadicalSpongeは、混合フラーレン(C60、C70)をPVPにて包接した後、1,3−ブチレングリコールと水に溶解したものであり、組成はPVP10%、1,3−ブチレングリコール75%、水15%、C60 約200ppmである。RadicalSponge1%は、約2ppmのC60を含有している。
HPLCカラム:Cosmosil 5C18MSII(4.6mm×150mm)
展開溶媒:20%→100%メタノール
流速:0.5mL/min
検出:UV 280nm
2%ハイドロキノン溶液を100%としたときのHPLC分析による相対量の経時変化を図1に示す。紫外線の照射時間と共にハイドロキノン(HQ)の分解が見られた。この分解は0.1%ラジカルスポンジ添加で分解の遅延が見られ、1%ラジカルスポンジ添加で分解が抑制された。
<実施例2>
実施例1において確認されたフラーレンによるハイドロキノンの光分解抑制作用について、その機構を検討した。実施例1で使用した石英セルを用いて、4%ハイドロキノン溶液を収容した石英セルと蒸留水を収容した石英セルを重ねて、蒸留水を収容した石英セル側から15分間の紫外線照射を行った(条件1)。一方、別途に4%ハイドロキノン溶液を収容した石英セルと5%Radical Sponge溶液を収容した石英セルを重ねて、フラーレン溶液を収容した石英セル側から15分間の紫外線照射を行った(条件2)。
<実施例3>
フラーレンによるコエンザイムQ10の光分解抑制作用について試験を行った。フラーレン試料としてRadicalSpongeを使用した。コエンザイムQ10(Sigma C9538)の0.03%エタノール溶液に、RadicalSponge0.1%、1%を添加した2つの試料と、Radical Spongeを添加しないコエンザイムQ10の0.03%エタノール溶液のそれぞれを光路長1cmの石英セルに3mL収容し、5日間の蛍光灯(可視光)照射を行った。
HPLCカラム:Cosmosil 5C18MSII(4.6mm×150mm)
展開溶媒:アセトニトリル70%−クロロホルム30%
流速:1mL/min
検出:UV 275nm
HPLC分析によるコエンザイムQ10の量の経時変化を図3に示す。0.1%のRadicalSponge添加により、コエンザイムQ10の光分解抑制効果が認められ、1%のRadical Sponge添加によりコエンザイムQ10の光分解はさらに抑制された。
<実施例4>
次に、フラーレン試料として、油溶性フラーレンのLipo Fullerne(LF:ビタミンC60バイオリサーチ(株)、登録商標)を用いてコエンザイムQ10の光分解抑制作用について試験を行った。LipoFullerneは、植物性スクワランに混合フラーレン(C60、C70)を溶解したものであり、C60を約200ppm含有する。
HPLCカラム:Cosmosil 5C18MSII(4.6mm×150mm)
展開溶媒:65%メタノール/35%エタノール
流速:1mL/min
検出:UV 254nm
HPLC分析によるコエンザイムQ10の量の経時変化を図5に示す。1%および5%のLipo Fullerne添加により、コエンザイムQ10の光分解抑制効果が認められた。
<実施例5>
フラーレンによるアスタキサンチンの安定化作用について、アスタキサンチン退色法により試験を行った。アスタキサンチンのクロロホルム溶液(1mg/mL)1.1mL、Tween40のクロロホルム溶液(0.2mg/mL)2.2mL、リノール酸のクロロホルム溶液(0.1mg/mL)440μLの混合液を調製し、次いでクロロホルムをエバポレーターで除去した後、リン酸緩衝液(pH7.0)72mLで希釈し、アスタキサンチン溶液を調製した。
<実施例6>
フラーレンによるアスタキサンチンの光分解抑制作用について、アスタキサンチン退色法により試験を行った。アスタキサンチンのクロロホルム溶液(1mg/mL)275μL、Tween40のクロロホルム溶液(0.2mg/mL)550μLの混合液を調製し、次いでクロロホルムをエバポレーターで除去した後、リン酸緩衝液(pH7.0)18mLで希釈し、アスタキサンチン溶液を調製した。
<実施例7>
次に、フラーレン試料として、油溶性フラーレンのLipo Fullerne(LF:ビタミンC60バイオリサーチ(株)、登録商標)を用いてレチノールの光分解抑制作用について試験を行った。
HPLCカラム:Cosmosil 5C18MSII(4.6mm×150mm)
展開溶媒:100%メタノール
流速:0.5mL/min
検出:UV 254nm
HPLC分析によるレチノール量の経時変化を図12に示す。紫外線照射時間の経過と共にLipo Fullerne未添加の試料ではレチノールの分解が見られた。これに対して、Lipo Fullerneの添加により、濃度依存的にレチノール分解が抑制された。
Claims (3)
- スクワラン類に溶解したフラーレンを有効成分として含有することを特徴とするユビキノンの光分解抑制用安定化剤。
- ユビキノンがコエンザイムQ10であることを特徴とする請求項1に記載のユビキノンの光分解抑制用安定化剤。
- ユビキノンを配合する工程と、請求項1または2に記載の光分解抑制用安定化剤をフラーレンが最終濃度で0.2〜10ppmとなるように配合する工程とを含むことを特徴とする皮膚外用剤の製造方法。
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