JP5594367B2 - 抗アレルゲン剤 - Google Patents
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Description
本発明の抗アレルゲン剤に用いる、酸点濃度とは、固体表面の酸点あるいは酸性中心の数量であり、通常は固体の単位重量あたりあるいは単位表面積あたりの数あるいはモル数として表わすことができる。酸点濃度の数量に算入する酸点の酸強度は、pKaで表すことができる。酸強度は、固体表面の酸点が塩基にプロトンを与える性質、または、塩基から電子対を受け取る性質の強さを示しており、酸点のpKaが小さいほど塩基にプロトンを与える性質、または、塩基から電子対を受け取る性質の強さが強くなり、アレルゲンタンパク質を吸着し、不活性化する能力が高くなる。
無極性溶媒中に分散した無機粉体をn−ブチルアミンで滴定し、滴定の終点を指示薬の変色で確認する。反応前の指示薬は塩基型の色を呈しているが、無機粉体に吸着するとその共役酸型の色を呈する。共役酸型の色から塩基型の色に戻るまでに要したn−ブチルアミンの滴定量よりその酸点濃度を決定する。固体の酸点一個とn−ブチルアミン一分子とが対応する。滴定用塩基は固体の酸点と結合した指示薬を置換しなければならないため、その塩基性は指示薬の塩基性よりも強いものでなければならない。通常の滴定方法として、まず無機粉体/ベンゼン分散液に指示薬を加えると、固体酸性により指示薬は酸性色を示すが、反応が完結するまで十分な時間をおくことが好ましい。次にn−ブチルアミンを滴下していき、指示薬の色がもとの色である塩基性色にもどったときのn−ブチルアミンの量から酸点濃度を計算する。
試験管に固体酸を0.1g採取し、ベンゼン2mLを加え軽く振り混ぜる。そこへ、指示薬の0.1%ベンゼン溶液(ただしクリスタルバイオレットはベンゼン溶液でなく、0.1%エタノ−ル溶液とする)を2滴添加し軽く振り混ぜ、色の変化を観察する。その固体酸の酸強度は指示薬の変色が確認された最も強い酸強度(すなわち最も低いpKa値)以下であり、指示薬の変色が確認されない最も弱い酸強度(すなわち最も高いpKa値)より大きいことになる、このことを当該無機固体酸のpKa値は(変色の確認されない最も高いpKa値)〜(変色の確認された最も低いpKa値)として表記する。また、下限を示す適当な指示薬がない場合は(変色の確認された最も低いpKa値)以下、および上限を示す適当な指示薬がない場合は(変色の確認されない最も高いpKa値)より大きい。として表記されるのが一般的である。
アレルゲン不活性化率
=(1−残存アレルゲン量/初期アレルゲン量)×100(%) <式1>
コ−ティング組成物を希釈して用いる場合、組成物中に含まれる前記抗アレルゲン剤の濃度は、分散が容易で保存性が良いことから0.5〜50質量%が好ましく、さらに好ましくは1〜30質量%である。通常、抗アレルゲン効果は、各種形状の製品の表面で抗アレルゲン剤とアレルゲンとが接触することによって発現するので、前記のコ−ティング組成物によって製品の表面に抗アレルゲン剤を固定することは、製品の内部全体に用いるよりも、より少ない量の抗アレルゲン剤で大きな効果を得ることができるので好ましい。
また、添加剤として用いることができるものは酸化亜鉛や酸化チタンなどの顔料、染料、酸化防止剤、耐光安定剤、難燃剤、帯電防止剤、発泡剤、耐衝撃強化剤、ガラス繊維、金属石鹸などの滑剤、防湿剤および増量剤、カップリング剤、核剤、流動性改良剤、消臭剤、木粉、防黴剤、防汚剤、防錆剤、金属粉、紫外線吸収剤、紫外線遮蔽剤などが例示される。
酸点濃度の測定は、無機粉体0.5gを20mLのサンプル瓶に入れ、そこへベンゼン10mLを添加し軽く振り混ぜる。さらに20段階に添加量を振った0.1Nのn−ブチルアミンを加え、振とう機で攪拌する。24時間後にベンゼンで希釈した0.1%メチルレッド溶液を0.5mL加え、メチルレッドの変色を目視で観察する。メチルレッドの変色が確認されない最もn−ブチルアミンの添加量が多いn−ブチルアミンの添加量を、酸点と反応した塩基量とし、酸点濃度(mmol/g)とした。
試料を3mg秤量し、抗原希釈液で40ng/mLに調製したコナヒョウヒダニアレルゲン(Derf2)を500μL添加した。混合物を良く攪拌して、試料とアレルゲンを接触させた後、遠心沈降させ、上澄み液を回収し、ブロッキング剤で処理してある15E11抗体コ−トウェルに添加して室温で静置した。1時間後試料を捨て、各ウェルを洗浄バッファ−で洗浄し、洗浄バッファ−で200ng/mLに希釈した西洋ワサビペルオキシダ−ゼ標識抗Derf2モノクロ−ナル抗体13A4PO(アサヒビ−ル株式会社)を各ウェルへ添加し室温で静置した。1時間後抗体液を捨て、各ウェルを洗浄バッファ−で洗浄し、基質液を各ウェルへ添加して室温で静置した。5分後に2N硫酸を加え反応を停止させ、490nmの吸光度を測定した。結果は、試料を用いずに評価を行うことで吸光度に対するアレルゲン量の関係を求め、各種試料を評価した場合の吸光度から残存アレルゲン量を求め、上記の<式1>から算出することにより各種試料のアレルゲン不活性化率%を表示した。
試料を3mg秤量し、抗原希釈液で10ng/mLに調製したスギ花粉アレルゲン(Cryj1)を500μL添加した。混合物を良く攪拌して、サンプルとアレルゲンを接触させた後、遠心沈降させ、上澄み液を回収し、ブロッキング剤で処理してあるAnti−Cryj1mAb013抗体コ−トウェルに添加して室温で静置した。1時間後サンプルを捨て、各ウェルを洗浄バッファ−で洗浄し、洗浄バッファ−で250ng/mLに希釈した西洋ワサビペルオキシダ−ゼ標識抗Cryj1モノクロ−ナル抗体053(生化学工業株式会社製)を各ウェルへ添加し室温で静置した。2時間後抗体液を捨て、各ウェルを洗浄バッファ−で洗浄し、基質液を各ウェルに添加して室温で静置した。5分後に2N硫酸を加え反応を停止させ、490nmの吸光度を測定した。結果は、コナヒョウヒダニアレルゲンと同様の方法で式1から算出することにより各種試料のアレルゲン不活性化率%を表示した。
原料に硫酸マグネシウムと水ガラスを用いて得られた沈殿物をろ過、水洗、乾燥、解砕することで非晶質ケイ酸マグネシウム(SiO2/MgO=1.3)を得た。得られた非晶質ケイ酸マグネシウムの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
75%リン酸水溶液に15%オキシ塩化ジルコニウム水溶液を添加し、120℃で12時間熟成後、沈殿物をろ過、水洗、乾燥、解砕することでα型リン酸ジルコニウム粉末を得た。得られたα型リン酸ジルコニウムの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
原料に硫酸チタニルとシュウ酸を用いて得られた沈殿物をろ過、乾燥し、500℃で焼成処理後、粉砕することで活性酸化チタンを調整した。得られた酸化チタンの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
市販の活性白土(水澤化学工業製 ガレオンア−スSH)の平均粒径、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
原料に硫酸マグネシウムと水ガラスを用いて得られた沈殿物をろ過、水洗、乾燥、解砕することで結晶質ケイ酸マグネシウム(SiO2/MgO=3.9)を得た。得られた結晶質ケイ酸マグネシウムの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
75%リン酸水溶液に炭酸ジルコニウム水溶液を添加し、98℃で24時間加熱還流後、沈殿物をろ過、水洗、乾燥、解砕することでγ型リン酸ジルコニウムを得た。得られたγ型リン酸ジルコニウムの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
オキシ塩化ジルコニウム水溶液にシュウ酸および75%リン酸水溶液を添加し、さらに苛性ソ−ダでpHを2.7に調整後、98℃で12時間加熱還流後、沈殿物をろ過、水洗、乾燥、解砕することでNASICON型リン酸ジルコニウムを得た。得られたNASICON型リン酸ジルコニウムの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
市販の酸化チタン(石原産業製MC−50)の平均粒径、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
市販の活性アルミナ(水澤化学工業製GNDY−2)の平均粒径、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
原料に水ガラスと硝酸アルミニウムを用いて98℃で撹拌し、得られた沈殿物を400℃で焼成処理後、粉砕することでシリカ−アルミナを調整した。得られたシリカ−アルミナの平均粒径、含水率、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
市販のリン酸アルミニウム(テイカ製 K−WHITE 105)の平均粒径、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
市販のハイドロタルサイト(堺化学工業製HT−P)の平均粒径、酸強度およびELISA法にてダニアレルゲン不活性化効果およびスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表1に示した。また、色調、5wt%水分散液のpH、PPプレ−トの着色性、金属腐食性を測定した結果を表2に示した。
また、スギ花粉アレルゲンの場合もダニアレルゲンの場合と同様に、本発明の抗アレルゲン剤は高いアレルゲン不活性化率を示し抗アレルゲン剤として非常に優れている。これに対して酸点濃度が0.001以下の比較例ではほとんど抗アレルゲン活性を示さなかった。
また、表2の結果から、参考例3及び比較例4の分散液は、5wt%分散液のpHが3より小さくなり、金属腐食性を示した。
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムとアクリルエマルジョンバインダー(東亞合成株式会社製NW-7060、固形分濃度50wt%)とを固形分質量比で2:1になるように混ぜ合わせ、布(成分:綿/アクリル繊維=1/1)に5分浸漬後、120℃で30分乾燥の加工を行い、非晶質ケイ酸マグネシウムの固定量1g/m2の抗アレルゲン布を作製した。抗アレルゲン布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表3に示した。
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムを(東亞合成株式会社製NW-7060、固形分濃度50wt%)と固形分の質量比で2:1 とになるように混ぜ合わせ、布(成分:綿/アクリル繊維=1/1)に5分浸漬後、120℃で30分乾燥の加工を行い、固定量2g/m2の抗アレルゲン布を作製した。抗アレルゲン布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表3に示した。
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムを用いずに実施例7と同様の加工方法により比較布を作製した。比較布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表3に示した。
繊維に固定した実施例1の耐熱性評価
実施例7と同様の方法で抗アレルゲン布を作製し、120℃で100時間熱を加えた後、抗アレルゲン布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果及び変色性を測定した結果を表4に示した。
繊維に固定した実施例1の耐熱性評価
実施例8と同様の方法で抗アレルゲン布を作製し、120℃で100時間熱を加えた後、抗アレルゲン布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果及び変色性を測定した結果を表4に示した。
実施例7と同様の方法で抗アレルゲン布を作製し、ポリ容器へ入れ、そこへイオン交換水を加え、25℃で16時間振とうし、120℃で30分乾燥させた抗アレルゲン布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表5に示した。
実施例8と同様の方法で抗アレルゲン布を作製し、ポリ容器へ入れ、そこへイオン交換水を加え、25℃で16時間振とうし、120℃で30分乾燥させた抗アレルゲン布のスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表5に示した。
樹脂に練り込み加工した実施例1の抗アレルゲン活性評価
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムと粉末状ポリプロピレンを固形分質量比で10:90になるように混ぜ合わせ、220℃で加熱プレスし、膜厚0.2mmの抗アレルゲンフィルムを作製した。抗アレルゲンフィルムのスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表6に示した。
樹脂に練り込み加工した実施例1の抗アレルゲン活性評価
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムと粉末状ポリプロピレンを固形分質量比で20:80になるように混ぜ合わせ、220℃で加熱プレスし、膜厚0.2mmの抗アレルゲンフィルムを作製した。抗アレルゲンフィルムのスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表6に示した。
樹脂に実施例1を練り込まない場合の抗アレルゲン活性評価
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムを用いずに実施例13と同様の加工方法により比較フィルムを作製した。比較フィルムのスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表6に示した。
UV硬化樹脂により加工した実施例1の抗アレルゲン活性評価
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムとアクリル系UV硬化塗料(無溶剤)とを固形分質量比で15:85になるように混ぜ合わせ、バ−コ−タ−によりPETフィルム(東レ製 ルミラ−T60−50)へ厚さ15μmに加工し、25cmの距離で高圧水銀ランプ(強度60W/cm)を用いて、コンベアスピ−ド3.7m/minの条件で紫外線を照射して、組成物を硬化させ、抗アレルゲンフィルムを作製した。抗アレルゲンフィルムのスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表7に示した。
UV硬化樹脂により加工した実施例1の抗アレルゲン活性評価
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムとアクリル系UV硬化塗料とを固形分質量比で30:70になるように混ぜ合わせ、バ−コ−タ−によりPETフィルム(東レ製 ルミラ−T60−50)へ厚さ15μmに加工し、25cmの距離で高圧水銀ランプ(強度60W/cm)を用いて、コンベアスピ−ド3.7m/minの条件で紫外線を照射して、組成物を硬化させ、抗アレルゲンフィルムを作製した。抗アレルゲンフィルムのスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表7に示した。
実施例1を固定しない場合のアクリル系UV硬化塗料により加工したフィルムの抗アレルゲン活性評価
実施例1の無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムを用いずに実施例15と同様の加工方法により比較フィルムを作製した。比較フィルムのスギ花粉アレルゲン不活性化効果を測定した結果を表7に示した。
実使用環境における抗アレルゲン性の評価を行うために、実施例8に準ずる方法で、無機物質である非晶質ケイ酸マグネシウムをアクリルエマルジョンバインダー(東亞合成株式会社製NW-7060、固形分濃度50wt%)と固形分の質量比で2:1とになるように混ぜ合わせたものを、バスタオル(155cm×70cm 成分:綿)に5分浸漬後、120℃で60分乾燥の加工を行い、固定量2g/m2の抗アレルゲン布(バスタオル)を作製した。
スギ花粉の飛散する晴天に、屋外の物干しにバスタオルを6時間天日干しして環境に浮遊するスギ花粉を吸着させた。一晩静置後に不織布をセットした掃除機をバスタオル全面にかけ、アレルゲンを不織布上に吸引回収した。10mlの抗原希釈液(0.1%BSA+PBSバッファー)で不織布上に載ったアレルゲンを抽出し、ELISA法によりスギ花粉アレルゲン(Cryj1)量を測定してアレルゲン回収量とした。天然のスギ花粉の飛散量は、天候や日によって大きく変わるので、3日以上間をあけた別の晴天の日に、同様な吸着試験を3回行ってアレルゲン回収量の結果を表8に示した。表8の1,2,3日目の意味は、3回の異なる日に吸着試験を行ったことを意味する。
非晶質ケイ酸マグネシウムを含まないバインダ−のみを用いたこと以外は実施例17と同じにして比較例12のバスタオルを作製し、実施例17と同じ日に同じ場所で同様に環境に浮遊するスギ花粉を吸着させた。アレルゲン回収量の結果を表8に示した。
Claims (7)
- pKaが4.8以下の酸点の酸点濃度が、0.001mmol/g以上10mmol/g以下の無機粉体からなり、前記無機紛体が非晶質ケイ酸マグネシウムである抗アレルゲン剤。
- レーザー粒度分布計で測定し、体積基準で算出した無機粉体のメジアン径が0.01μm以上50μm以下である、請求項1に記載の抗アレルゲン剤。
- 無機粉体の5wt%水分散液のpHが3以上9以下である、請求項1または2に記載の抗アレルゲン剤。
- 請求項1〜3のいずれかに記載の抗アレルゲン剤とバインダ−または塗料を含むコ−ティング組成物。
- pHが3以上9以下である、請求項4に記載のコ−ティング組成物。
- 請求項4または5に記載のコ−ティング組成物により加工された抗アレルゲン製品。
- 請求項4または5に記載のコ−ティング組成物により加工された抗アレルゲン布。
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