JP5550732B2 - 血小板豊富血漿（ｐｒｐ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法 - Google Patents
血小板豊富血漿（ｐｒｐ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5550732B2 JP5550732B2 JP2012535101A JP2012535101A JP5550732B2 JP 5550732 B2 JP5550732 B2 JP 5550732B2 JP 2012535101 A JP2012535101 A JP 2012535101A JP 2012535101 A JP2012535101 A JP 2012535101A JP 5550732 B2 JP5550732 B2 JP 5550732B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- prp
- platelet
- rich plasma
- collagen
- type
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 title claims description 197
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 38
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 title claims description 35
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 13
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 title claims description 8
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 45
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 38
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 38
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 38
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 claims description 30
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 claims description 30
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims description 28
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims description 26
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 25
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 25
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 16
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 16
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 claims description 16
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 claims description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 4
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 24
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 13
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 8
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 5
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 4
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N Adenosine diphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 102000013373 fibrillar collagen Human genes 0.000 description 3
- 108060002894 fibrillar collagen Proteins 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 2
- 101001078143 Homo sapiens Integrin alpha-IIb Proteins 0.000 description 2
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 2
- 102100025306 Integrin alpha-IIb Human genes 0.000 description 2
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 108010045569 atelocollagen Proteins 0.000 description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- PVPBBTJXIKFICP-UHFFFAOYSA-N (7-aminophenothiazin-3-ylidene)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(=[NH2+])C=C2SC3=CC(N)=CC=C3N=C21 PVPBBTJXIKFICP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 108010014172 Factor V Proteins 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000005755 Intercellular Signaling Peptides and Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010070716 Intercellular Signaling Peptides and Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 229960005188 collagen Drugs 0.000 description 1
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 102000034240 fibrous proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005899 fibrous proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 108010000685 platelet-derived growth factor AB Proteins 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000025934 tissue morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000002407 tissue scaffold Substances 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3604—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
- A61L27/3616—Blood, e.g. platelet-rich plasma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/24—Collagen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Botany (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
Description
本発明は、塩化カルシウム溶液と第１型コラーゲンで血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化
して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法に関し、より詳しくは、トロンビンを使
用しないで、骨欠損治療又は傷治癒（wound healing）のために、組織再生が求められる
全ての部位に移植できる血小板豊富血漿（ＰＲＰ）ゲル（gel）を作って病変部位に移植
できるようにしたものである。
この発明は、結果的に血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化させて血小板豊富血漿（ＰＲＰ
）ゲル（gel）から組織再生に有用な成長因子（growth factor）を誘導することで、簡便
で、かつ速く組織再生をなすことに効果的であるようにしたものであり、これによって、
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を病変に適用する方法の信頼性を大幅向上させて、患者が満足
することができるようにした非常に有用な発明である。
して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法に関し、より詳しくは、トロンビンを使
用しないで、骨欠損治療又は傷治癒（wound healing）のために、組織再生が求められる
全ての部位に移植できる血小板豊富血漿（ＰＲＰ）ゲル（gel）を作って病変部位に移植
できるようにしたものである。
この発明は、結果的に血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化させて血小板豊富血漿（ＰＲＰ
）ゲル（gel）から組織再生に有用な成長因子（growth factor）を誘導することで、簡便
で、かつ速く組織再生をなすことに効果的であるようにしたものであり、これによって、
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を病変に適用する方法の信頼性を大幅向上させて、患者が満足
することができるようにした非常に有用な発明である。
周知のように、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）は全血から密度勾配遠心分離を通じて分離した
自己由来の物質であり、少量の血漿に多量の血小板が濃縮されており、白血球が高濃度で
含まれた非活性物質である。
自己由来の物質であり、少量の血漿に多量の血小板が濃縮されており、白血球が高濃度で
含まれた非活性物質である。
血管内の非活性化された血小板は、丸い形態を維持しながら血管内を循環するが、約１
０日位のライフタイム（life time）を有し、血液の中に２〜４×１０8／ｍＬ位存在する
ことが知られている。
０日位のライフタイム（life time）を有し、血液の中に２〜４×１０8／ｍＬ位存在する
ことが知られている。
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の内の血小板は、血管内に含まれている物質を通じて活性化
されて、成長因子（growth factor）と多様な活性物質（active substance）を排出する
ようになるが、活性化させる物質には、コラーゲン、トロンビン、アデノシン二リン酸（
adenosine diphosphate：ＡＤＰ）とエピネフリン（epinephrine）がある。特に、コラー
ゲンとトロンビンは強い作動薬（strong agonist）として知られているが、コラーゲンは
、図１に示すように、特異的なシークエンスが血小板を内皮層に付着させて活性化を誘導
することが知られている。
されて、成長因子（growth factor）と多様な活性物質（active substance）を排出する
ようになるが、活性化させる物質には、コラーゲン、トロンビン、アデノシン二リン酸（
adenosine diphosphate：ＡＤＰ）とエピネフリン（epinephrine）がある。特に、コラー
ゲンとトロンビンは強い作動薬（strong agonist）として知られているが、コラーゲンは
、図１に示すように、特異的なシークエンスが血小板を内皮層に付着させて活性化を誘導
することが知られている。
活性因子により血小板が活性化されれば、血小板のアルファ顆粒（alpha granules）の
脱顆粒（degranulation）により成長因子（growth factor）が放出されて初期傷治癒（wo
und healing）に重要な役割をし、この時に、放出される成長因子（growth factor）には
、血小板由来成長因子（platelet derived growth factor：ＰＤＧＦ−ＡＢ）、トランス
フォーミング成長因子（transforming growth factor-b1：ＴＧＦ−ｂ１）、血管内皮成
長因子（vascular endothelial growth factor：ＶＥＧＦ）、 上皮成長因子（epidermal
growth factor：ＥＧＦ）とインシュリン様成長因子（insulin-like growth factor：Ｉ
ＧＦ）等がある。また、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）は生体外条件でサイトカインなどを放
出して、繊維芽細胞のＤＮＡを合成し、コラーゲンの生成を増加させて、コラーゲン構造
を組織化するようになる。
脱顆粒（degranulation）により成長因子（growth factor）が放出されて初期傷治癒（wo
und healing）に重要な役割をし、この時に、放出される成長因子（growth factor）には
、血小板由来成長因子（platelet derived growth factor：ＰＤＧＦ−ＡＢ）、トランス
フォーミング成長因子（transforming growth factor-b1：ＴＧＦ−ｂ１）、血管内皮成
長因子（vascular endothelial growth factor：ＶＥＧＦ）、 上皮成長因子（epidermal
growth factor：ＥＧＦ）とインシュリン様成長因子（insulin-like growth factor：Ｉ
ＧＦ）等がある。また、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）は生体外条件でサイトカインなどを放
出して、繊維芽細胞のＤＮＡを合成し、コラーゲンの生成を増加させて、コラーゲン構造
を組織化するようになる。
しかしながら、液状状態の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の適用の際は、傷内への注入が困
難であり、周辺組織の損失がある。そこで、物理的性質を伴う凝固（clotting）形態のゲ
ル化（gelation）の開発が必要である。このゲル化について、トロンビンを使用する研究
が最近に主に進行した。
しかしながら、動物由来蛋白質であるトロンビン（主に、牛由来）を使用する際に、ルー
プス（lupus）のような免疫反応が観察されたという報告がある。換言すれば、トロンビ
ンは、抗体と関連して臨床的な問題がある要因であることが知られている。トロンビンは
血小板活性体として最も有力な成分である。
しかしながら、トロンビンを用いるときは、トロンビン、プロトロンビン、Ｖ因子（fact
or V）、カルジオリピン（cardiolipin）に対する抗体が要求される。また、動物研究を
通じて手術後の出血や、自己免疫性症候群等の臨床の問題点があることが分かった。この
ような問題点はまれにしか起きないとは言え、開発するに当たって看過できない問題点で
ある。トロンビンの使用は損傷した傷の広がりやゲルの異常な強度などを引き起こすかも
しれない。
難であり、周辺組織の損失がある。そこで、物理的性質を伴う凝固（clotting）形態のゲ
ル化（gelation）の開発が必要である。このゲル化について、トロンビンを使用する研究
が最近に主に進行した。
しかしながら、動物由来蛋白質であるトロンビン（主に、牛由来）を使用する際に、ルー
プス（lupus）のような免疫反応が観察されたという報告がある。換言すれば、トロンビ
ンは、抗体と関連して臨床的な問題がある要因であることが知られている。トロンビンは
血小板活性体として最も有力な成分である。
しかしながら、トロンビンを用いるときは、トロンビン、プロトロンビン、Ｖ因子（fact
or V）、カルジオリピン（cardiolipin）に対する抗体が要求される。また、動物研究を
通じて手術後の出血や、自己免疫性症候群等の臨床の問題点があることが分かった。この
ような問題点はまれにしか起きないとは言え、開発するに当たって看過できない問題点で
ある。トロンビンの使用は損傷した傷の広がりやゲルの異常な強度などを引き起こすかも
しれない。
また、トロンビン−活性化ゲルは収縮力が高いので、傷空間を詰める施術時には難しさ
がある。ここに、トロンビンの代替物質の重要性が要求される。
がある。ここに、トロンビンの代替物質の重要性が要求される。
コラーゲンは硬い繊維状蛋白質（rigid fibrous protein）で、哺乳類結合組織の主要
蛋白質構成成分であり、全体蛋白質の３０％以上を占める。コラーゲンは、組織における
形態、強度及び柔軟性（shape、strength and flexibility）を提供し、組織スキャフォ
ールド(tissue scaffolding)、細胞付着、細胞移動、血管生成、組織形態形成と組織回復
（tissue repair）などの多様な機能をする。
コラーゲンは、血小板の強い作動薬（strong agonist）で、血小板を活性化させ、血小板
を凝集（platelet aggregation）させ、線維型コラーゲン（fibrillar collagen）は、可
溶性コラーゲン（soluble collagen）より強力に血小板の凝集（platelet aggregation）
を誘導し、血小板付着（platelet adhesion）を維持（supporting）するようにする。こ
のような差異点の原因が明らかになってはいないが、線維型コラーゲン（fibrillar coll
agen）が活性化された血小板の作用を増加させる分子と結合する可能性があると推測され
る。
蛋白質構成成分であり、全体蛋白質の３０％以上を占める。コラーゲンは、組織における
形態、強度及び柔軟性（shape、strength and flexibility）を提供し、組織スキャフォ
ールド(tissue scaffolding)、細胞付着、細胞移動、血管生成、組織形態形成と組織回復
（tissue repair）などの多様な機能をする。
コラーゲンは、血小板の強い作動薬（strong agonist）で、血小板を活性化させ、血小板
を凝集（platelet aggregation）させ、線維型コラーゲン（fibrillar collagen）は、可
溶性コラーゲン（soluble collagen）より強力に血小板の凝集（platelet aggregation）
を誘導し、血小板付着（platelet adhesion）を維持（supporting）するようにする。こ
のような差異点の原因が明らかになってはいないが、線維型コラーゲン（fibrillar coll
agen）が活性化された血小板の作用を増加させる分子と結合する可能性があると推測され
る。
第１型コラーゲンは、哺乳類の結合組織で最も多い量を占めて、再生医学と組織工学分
野で天然足場（scaffold）として最も多い研究が進行しているコラーゲンであって、第１
型コラーゲンのこのような長所はトロンビンを代えて血小板を活性化させ、形態を維持す
る役割をするようになる。
野で天然足場（scaffold）として最も多い研究が進行しているコラーゲンであって、第１
型コラーゲンのこのような長所はトロンビンを代えて血小板を活性化させ、形態を維持す
る役割をするようになる。
しかしながら、従来は塩化カルシウム溶液と上記第１型コラーゲンで血小板豊富血漿（
ＰＲＰ：Platelet rich plasma）を活性化して組織再生を誘導する組成物がなかったので
、多くの問題点を内包していたが、他の代案がないので、動物由来蛋白質であるトロンビ
ン（主に、牛由来）のみを使用していた。
ＰＲＰ：Platelet rich plasma）を活性化して組織再生を誘導する組成物がなかったので
、多くの問題点を内包していたが、他の代案がないので、動物由来蛋白質であるトロンビ
ン（主に、牛由来）のみを使用していた。
本発明は、上記のような従来技術の諸問題点を解消するために案出したものであって、
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を動物由来蛋白質であるトロンビン（主に、牛由来）と使用す
ることにより生じる免疫反応及び臨床的な問題点を改善するために第１型コラーゲンを使
用しようとすることを第１目的としたものである。
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を動物由来蛋白質であるトロンビン（主に、牛由来）と使用す
ることにより生じる免疫反応及び臨床的な問題点を改善するために第１型コラーゲンを使
用しようとすることを第１目的としたものである。
第２目的は、骨欠損治療又は傷治癒（wound healing）のために、全血を少量採取した後
、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離して第１型コラーゲンと混合して注入することによっ
て、自己由来の物質である血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と免疫反応がほとんどないアテロコ
ラーゲンを使用することによって臨床的に拒否反応が無いようにしたものである。
、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離して第１型コラーゲンと混合して注入することによっ
て、自己由来の物質である血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と免疫反応がほとんどないアテロコ
ラーゲンを使用することによって臨床的に拒否反応が無いようにしたものである。
第３目的は、施術場所で簡便で、かつ速く血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離して塩化カ
ルシウム溶液と第１型コラーゲンと混合して注入することで、急病患者や反復された再手
術患者に効果的な組織再生をなすようにしたものである。
ルシウム溶液と第１型コラーゲンと混合して注入することで、急病患者や反復された再手
術患者に効果的な組織再生をなすようにしたものである。
第４目的は、本発明により採取された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を塩化カルシウム溶液
と第１型コラーゲンと混合して組織再生を目的とする部位に適用すれば、第１型コラーゲ
ンが血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化させて血小板豊富血漿（ＰＲＰ）ゲル（gel）か
ら組織再生に有用な成長因子（growth factor）を誘導することで、簡便で、かつ速く組
織再生をなすことに効果的であるようにしたものである。
と第１型コラーゲンと混合して組織再生を目的とする部位に適用すれば、第１型コラーゲ
ンが血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化させて血小板豊富血漿（ＰＲＰ）ゲル（gel）か
ら組織再生に有用な成長因子（growth factor）を誘導することで、簡便で、かつ速く組
織再生をなすことに効果的であるようにしたものである。
特に第５目的は、第１型コラーゲンを作動薬にして血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と凝固（
clotting）した時に、トロンビンを作動薬にして血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と凝固（clot
ting）した時より成長因子（growth factor）によって類似な、又はより多い量の成長因
子を放出することによって、より効果的な組織再生を誘導するようにしたものである。
clotting）した時に、トロンビンを作動薬にして血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と凝固（clot
ting）した時より成長因子（growth factor）によって類似な、又はより多い量の成長因
子を放出することによって、より効果的な組織再生を誘導するようにしたものである。
また、第６目的は、本発明により分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を塩化カルシウム
溶液と第１型コラーゲンと混合して骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）が要求さ
れる全ての部位に注入することで、効果的な組織再生を可能にしたものである。
最後に本願発明の第７目的は、結果的に血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を病変に適用する方法
の信頼性を大幅に向上させて、患者が満足することができるようにした血小板豊富血漿（
ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法を提供する。
溶液と第１型コラーゲンと混合して骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）が要求さ
れる全ての部位に注入することで、効果的な組織再生を可能にしたものである。
最後に本願発明の第７目的は、結果的に血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を病変に適用する方法
の信頼性を大幅に向上させて、患者が満足することができるようにした血小板豊富血漿（
ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法を提供する。
このような目的の達成のために、本発明は全血から、全血基準値より５．８〜７．６倍高
まった血小板豊富血漿（ＰＲＰ：Platelet rich plasma）を分離するステップと、上記血
小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合して前記血小板豊富血漿を不溶性
に転換するステップと、次に、上記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（Ｐ
ＲＰ）を第１型コラーゲンと混合して血小板の凝集を誘導するステップと、を含み、上記
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステップは、全血から血小
板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離する工程を通じて採取された１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲ
Ｐ）を分岐コネクタを用いて０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍＬ濃度の塩化カルシウム溶液と
１回混合することを特徴とする、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを使用しないで
活性化して組織再生を誘導する組成物の製造方法を提供する。
まった血小板豊富血漿（ＰＲＰ：Platelet rich plasma）を分離するステップと、上記血
小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合して前記血小板豊富血漿を不溶性
に転換するステップと、次に、上記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（Ｐ
ＲＰ）を第１型コラーゲンと混合して血小板の凝集を誘導するステップと、を含み、上記
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステップは、全血から血小
板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離する工程を通じて採取された１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲ
Ｐ）を分岐コネクタを用いて０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍＬ濃度の塩化カルシウム溶液と
１回混合することを特徴とする、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを使用しないで
活性化して組織再生を誘導する組成物の製造方法を提供する。
また、本発明は、上記した製造方法により製造された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性
化して組織再生を誘導する組成物を提供する。
化して組織再生を誘導する組成物を提供する。
前述したように、本発明は、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を動物由来蛋白質であるトロン
ビン（主に、牛由来）と使用することにより生じる免疫反応及び臨床的な問題点を改善す
るために第１型コラーゲンを使用したものである。
ビン（主に、牛由来）と使用することにより生じる免疫反応及び臨床的な問題点を改善す
るために第１型コラーゲンを使用したものである。
上記した本発明の技術的構成は、骨欠損治療又は傷治癒（wound healing）のために、全
血を少量採取した後、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離して第１型コラーゲンと混合して
注入することによって、自己由来の物質である血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と免疫反応が殆
どないアテロコラーゲンを使用することで、臨床的に拒否反応のないようにしたものであ
る。
血を少量採取した後、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離して第１型コラーゲンと混合して
注入することによって、自己由来の物質である血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と免疫反応が殆
どないアテロコラーゲンを使用することで、臨床的に拒否反応のないようにしたものであ
る。
そして、本発明は施術場所で簡便で、かつ速く血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離して塩
化カルシウム溶液と第１型コラーゲンと混合して注入することで、急病患者や反復された
再手術患者に効果的な組織再生をなすようにしたものである。
化カルシウム溶液と第１型コラーゲンと混合して注入することで、急病患者や反復された
再手術患者に効果的な組織再生をなすようにしたものである。
また、本発明により採取された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を塩化カルシウム溶液と第１
型コラーゲンと混合して組織再生を目的とする部位に適用すれば、第１型コラーゲンが血
小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化させて血小板豊富血漿（ＰＲＰ）ゲル（gel）から組織
再生に有用な成長因子（growth factor）を誘導することで、簡便で、かつ速く組織再生
をなすことに効果的であるようにしたものである。
型コラーゲンと混合して組織再生を目的とする部位に適用すれば、第１型コラーゲンが血
小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化させて血小板豊富血漿（ＰＲＰ）ゲル（gel）から組織
再生に有用な成長因子（growth factor）を誘導することで、簡便で、かつ速く組織再生
をなすことに効果的であるようにしたものである。
特に本発明は、第１型コラーゲンを作動薬にして血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と凝固（cl
otting）した時に、トロンビンを作動薬にして血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と凝固（clotti
ng）した時より成長因子（growth factor）によって類似な、又はより多い量の成長因子
（growth factor）を放出することによって、より効果的な組織再生を誘導するようにし
たものである。
otting）した時に、トロンビンを作動薬にして血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と凝固（clotti
ng）した時より成長因子（growth factor）によって類似な、又はより多い量の成長因子
（growth factor）を放出することによって、より効果的な組織再生を誘導するようにし
たものである。
加えて、本発明により分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を塩化カルシウム溶液と第１
型コラーゲンと混合して骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）が要求される全ての
部位に注入することで、効果的な組織再生を可能にしたものである。
型コラーゲンと混合して骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）が要求される全ての
部位に注入することで、効果的な組織再生を可能にしたものである。
最後に、本願発明は結果的に、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を病変に適用する方法の信頼
性を大幅向上させて、患者が満足することができるようにした非常に有用な発明である。
性を大幅向上させて、患者が満足することができるようにした非常に有用な発明である。
以下、このような効果達成のための本発明の好ましい実施形態を添付した図面によって
詳細に説明する。
詳細に説明する。
本発明に適用された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘導する組成物
及びその製造方法は、図２、図３に図示されたように構成される。
及びその製造方法は、図２、図３に図示されたように構成される。
以下、本発明を説明するに当たって、関連した公知機能又は構成に対する具体的な説明
が本発明の要旨を却って曖昧にする惧れがあると判断される場合には、その詳細な説明は
省略する。
が本発明の要旨を却って曖昧にする惧れがあると判断される場合には、その詳細な説明は
省略する。
そして、後述する用語は本発明での機能を考慮して設定された用語であって、これは生
産者の意図又は慣例によって変わることがあるので、本明細書の全般に亘る内容に基づい
て定義されるべきである。
産者の意図又は慣例によって変わることがあるので、本明細書の全般に亘る内容に基づい
て定義されるべきである。
まず、本発明は全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ：Platelet rich plasma）を分離する
ステップ、上記血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステップ、
次に、上記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を第１型コラーゲ
ンと混合するステップを経て血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘導する
組成物を製造するようにする。
ステップ、上記血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステップ、
次に、上記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を第１型コラーゲ
ンと混合するステップを経て血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘導する
組成物を製造するようにする。
一方、本発明は上記の構成部を適用するに当たって、多様に変形可能であり、多様な形
態を取ることができる。
態を取ることができる。
そして、本発明は上記の詳細な説明で言及する特別な形態に限定されるものでなく、む
しろ添付した請求範囲により定義される本発明の精神と範囲内にある全ての変形物と均等
物及び代替物を含むことと理解されるべきである。
しろ添付した請求範囲により定義される本発明の精神と範囲内にある全ての変形物と均等
物及び代替物を含むことと理解されるべきである。
上記のように構成された本発明の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘
導する組成物の製造方法の作用効果を説明する。
導する組成物の製造方法の作用効果を説明する。
まず、本発明は全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ：Platelet rich plasma）を分離する
ステップを経る。
ステップを経る。
この際、上記全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離するステップは、動物又は患者
から１０ｍｌの全血を３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含まれた真空試
験管で採取した後、１，７５０〜１，９００Ｇで、３〜５分間、１次遠心分離するステッ
プを経る。
から１０ｍｌの全血を３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含まれた真空試
験管で採取した後、１，７５０〜１，９００Ｇで、３〜５分間、１次遠心分離するステッ
プを経る。
次に、上記遠心分離により軟膜（Buffy coat）を含んだ上層液（血漿層）を収集するス
テップを経る。
テップを経る。
以後、収集された上記軟膜（Buffy coat）を含んだ上層液（血漿層）をブラントニード
ル（Blunt needle）を用いて新たな真空試験管に移した後、４，５００〜５，０００Ｇで
、４〜６分間、２次遠心分離するステップを経る。
ル（Blunt needle）を用いて新たな真空試験管に移した後、４，５００〜５，０００Ｇで
、４〜６分間、２次遠心分離するステップを経る。
次に、底層（試験管の底から約１ｍＬに該当）の濃縮された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）
をブラントニードル（Blunt needle）を用いて採取するステップを経る。
をブラントニードル（Blunt needle）を用いて採取するステップを経る。
また、本発明は上記血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステ
ップを経る。
ップを経る。
この際、上記血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステップは
、全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離する工程を通じて採取された約１ｍＬの血小
板豊富血漿（ＰＲＰ）を三方活栓等の分岐コネクタを用いて０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍ
Ｌ濃度の塩化カルシウム溶液と１回混合することを特徴とする。
、全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離する工程を通じて採取された約１ｍＬの血小
板豊富血漿（ＰＲＰ）を三方活栓等の分岐コネクタを用いて０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍ
Ｌ濃度の塩化カルシウム溶液と１回混合することを特徴とする。
また、本発明は上記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を第１
型コラーゲンと混合するステップを経て、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再
生を誘導する組成物を製造するようにする。
型コラーゲンと混合するステップを経て、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再
生を誘導する組成物を製造するようにする。
この際、上記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を第１型コラ
ーゲンと混合するステップは、上記第１型コラーゲンを室温に放置するステップを経る。
ーゲンと混合するステップは、上記第１型コラーゲンを室温に放置するステップを経る。
以後、塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と不透明性状の２０
〜５０ｍｇ／ｍＬ濃度の第１型コラーゲンを分岐コネクタで連結して４回混合するステッ
プを経る。
〜５０ｍｇ／ｍＬ濃度の第１型コラーゲンを分岐コネクタで連結して４回混合するステッ
プを経る。
次に、注射器に充填した血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と第１型コラーゲン混合物を骨欠損治
療、又は傷治癒（wound healing）等、組織再生が要求される全ての部位に注入するステ
ップを経る。
療、又は傷治癒（wound healing）等、組織再生が要求される全ての部位に注入するステ
ップを経る。
そして、上記第１型コラーゲンは２０〜５０ｍｇ／ｍＬの濃度が好ましい。
また、上記室温に、１５〜３０分間放置することが好ましい。
上記した本発明の実施形態を以下に説明すれば、次の通りである。
（実施形態１）
まず、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の分離のための構成キットは、次の通り用意する。
１）３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含まれた真空試験管
２）真空試験管ホルダー
３）真空試験管針
４）真空試験管（Plain type）
５）３ｍＬ注射器
６）ブラントニードル（Blunt needle）
（実施形態１）
まず、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の分離のための構成キットは、次の通り用意する。
１）３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含まれた真空試験管
２）真空試験管ホルダー
３）真空試験管針
４）真空試験管（Plain type）
５）３ｍＬ注射器
６）ブラントニードル（Blunt needle）
上記のように構成された構成物により血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の分離方法を実施する
。まず、
１）患者から１０ｍＬの全血を３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含まれ
た真空試験管に採取する。
２）真空試験管に盛られた全血を１，７５０〜１，９００Ｇで、３〜５分、遠心分離する
。この際、遠心分離機の重力加速度（Ｇ）と時間は全血を血球細胞、軟膜（Buffy coat）
と血漿に分離できる最適の条件である。
３）真空試験管の蓋を開けた後、ブラントニードル（Blunt needle）を連結した注射器を
用いて軟膜（Buffy coat）を含んだ上層液（血漿層）を採取して新たな真空試験管（Plai
n type）に移す。
４）新たな真空試験管に移された軟膜（Buffy coat）が含まれた血漿を４，５００〜５，
０００Ｇで、４〜６分、遠心分離する。この際、遠心分離機の重力加速度と時間は血漿内
にある血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を濃縮させる最適の条件である。
５）真空試験管の蓋を開けた後、ブラントニードル（Blunt needle）を連結した注射器を
用いて試験管の底層（試験管の底から約１ｍＬに該当）の濃縮された血小板豊富血漿（Ｐ
ＲＰ）を採取する。
６）全血１０ｍＬから分離された血小板１ｍＬの分離効率を確認するために、血小板（Pl
atelet）の特異的な表面マーカー（Surface marker）であるＣＤ４１、白血球（Leukocyt
e）の特異的な表面マーカー（Surface marker）であるＣＤ４５を反応させてフローサイ
トメトリー（Flow cytometry）を用いて発現細胞数を測定する。
測定結果は、分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の血小板（Platelet）は全血基準値（
Base lines）より５．８〜７．６倍高まった。臨床的に要求される推奨条件では、その数
は、全血６ｍＬ体積当たり基準値の４．０〜６．０倍（約１００万の血小板／ｍＬ）であ
る。よって、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）分離方法は、推奨条件を満足する。また、白血球
（Leukocyte）も基準値（Base lines）より２．８〜４．２倍高まった。よって、血小板
豊富血漿（ＰＲＰ）を適用する時に、抗ウイルス効果（antiviral effect）を期待するこ
とができる。
。まず、
１）患者から１０ｍＬの全血を３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含まれ
た真空試験管に採取する。
２）真空試験管に盛られた全血を１，７５０〜１，９００Ｇで、３〜５分、遠心分離する
。この際、遠心分離機の重力加速度（Ｇ）と時間は全血を血球細胞、軟膜（Buffy coat）
と血漿に分離できる最適の条件である。
３）真空試験管の蓋を開けた後、ブラントニードル（Blunt needle）を連結した注射器を
用いて軟膜（Buffy coat）を含んだ上層液（血漿層）を採取して新たな真空試験管（Plai
n type）に移す。
４）新たな真空試験管に移された軟膜（Buffy coat）が含まれた血漿を４，５００〜５，
０００Ｇで、４〜６分、遠心分離する。この際、遠心分離機の重力加速度と時間は血漿内
にある血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を濃縮させる最適の条件である。
５）真空試験管の蓋を開けた後、ブラントニードル（Blunt needle）を連結した注射器を
用いて試験管の底層（試験管の底から約１ｍＬに該当）の濃縮された血小板豊富血漿（Ｐ
ＲＰ）を採取する。
６）全血１０ｍＬから分離された血小板１ｍＬの分離効率を確認するために、血小板（Pl
atelet）の特異的な表面マーカー（Surface marker）であるＣＤ４１、白血球（Leukocyt
e）の特異的な表面マーカー（Surface marker）であるＣＤ４５を反応させてフローサイ
トメトリー（Flow cytometry）を用いて発現細胞数を測定する。
測定結果は、分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の血小板（Platelet）は全血基準値（
Base lines）より５．８〜７．６倍高まった。臨床的に要求される推奨条件では、その数
は、全血６ｍＬ体積当たり基準値の４．０〜６．０倍（約１００万の血小板／ｍＬ）であ
る。よって、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）分離方法は、推奨条件を満足する。また、白血球
（Leukocyte）も基準値（Base lines）より２．８〜４．２倍高まった。よって、血小板
豊富血漿（ＰＲＰ）を適用する時に、抗ウイルス効果（antiviral effect）を期待するこ
とができる。
そして、下記の表のように、全血を２段階遠心分離（１段階；１，７５０〜１，９００
Ｇで、３〜５分、２段階；４，５００〜５，０００Ｇで、４〜６分）して、血小板豊富血
漿（ＰＲＰ）１ｍＬを分離した後、血小板（Platelet）の特異的な表面マーカー（Surfac
e marker）であるＣＤ４１、白血球（Leukocyte）の特異的な表面マーカー（Surface mar
ker）であるＣＤ４５を反応させてフローサイトメトリー（Flow cytometry）を用いて発
現細胞数を測定した。測定結果は、分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の血小板（Plat
elet）は基準値（Base lines）より５．８〜７．６倍、白血球（Leukocyte）も基準値（B
ase lines）より２．８〜４．２倍高まった。
Ｇで、３〜５分、２段階；４，５００〜５，０００Ｇで、４〜６分）して、血小板豊富血
漿（ＰＲＰ）１ｍＬを分離した後、血小板（Platelet）の特異的な表面マーカー（Surfac
e marker）であるＣＤ４１、白血球（Leukocyte）の特異的な表面マーカー（Surface mar
ker）であるＣＤ４５を反応させてフローサイトメトリー（Flow cytometry）を用いて発
現細胞数を測定した。測定結果は、分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）の血小板（Plat
elet）は基準値（Base lines）より５．８〜７．６倍、白血球（Leukocyte）も基準値（B
ase lines）より２．８〜４．２倍高まった。
（実施形態２）
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）、塩化カルシウム溶液、及び第１型コラーゲン混合物の移植
のための構成キットは次の通り用意する。
１）１ｍＬ、３ｍＬ注射器
２）分岐コネクタ(三方活栓Connecta；登録商標）
３）塩化カルシウム溶液
４）２０〜５０ｍｇ／ｍＬの第１型コラーゲン
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）、塩化カルシウム溶液、及び第１型コラーゲン混合物の移植
のための構成キットは次の通り用意する。
１）１ｍＬ、３ｍＬ注射器
２）分岐コネクタ(三方活栓Connecta；登録商標）
３）塩化カルシウム溶液
４）２０〜５０ｍｇ／ｍＬの第１型コラーゲン
上記のように構成された構成物により血小板豊富血漿（ＰＲＰ）、塩化カルシウム溶液
、及び第１型コラーゲン混合物と移植方法を実施する。まず、実施形態１により分離した
１）１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲＰ）が充填された注射器を０．３０〜０．５５ｍｇ／
ｍＬ濃度の塩化カルシウム溶液を充填した注射器と分岐コネクタで連結して１回混合する
。
、及び第１型コラーゲン混合物と移植方法を実施する。まず、実施形態１により分離した
１）１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲＰ）が充填された注射器を０．３０〜０．５５ｍｇ／
ｍＬ濃度の塩化カルシウム溶液を充填した注射器と分岐コネクタで連結して１回混合する
。
即ち、図２は全血から分離した血小板豊富血漿（ＰＲＰ）１ｍＬ、塩化カルシウム溶液
、及び第１型コラーゲンとを混合した写真であって、（ａ）は塩化カルシウム溶液０．２
５ｍｇ／ｍＬが含まれた写真であり、（ｂ）は塩化カルシウム溶液０．３ｍｇ／ｍＬが含
まれた写真であり、（ｃ）は塩化カルシウム溶液０．５ｍｇ／ｍＬが含まれた写真であっ
て、本発明は塩化カルシウム溶液と第１型コラーゲン混合物の血小板の凝集（Platelet a
ggregation）のための適正な塩化カルシウム濃度は０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍＬが好ま
しい。
、及び第１型コラーゲンとを混合した写真であって、（ａ）は塩化カルシウム溶液０．２
５ｍｇ／ｍＬが含まれた写真であり、（ｂ）は塩化カルシウム溶液０．３ｍｇ／ｍＬが含
まれた写真であり、（ｃ）は塩化カルシウム溶液０．５ｍｇ／ｍＬが含まれた写真であっ
て、本発明は塩化カルシウム溶液と第１型コラーゲン混合物の血小板の凝集（Platelet a
ggregation）のための適正な塩化カルシウム濃度は０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍＬが好ま
しい。
そして、塩化カルシウム溶液の成分であるカルシウムイオン（Ｃａ2+）は血液凝固（Bl
ood coagulation）で可溶性（soluble）から不溶性（insoluble）に転換させる役割をす
る。カルシウムイオン（Ｃａ2+）のこのような特徴は分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ
）１ｍＬと第１型コラーゲンの混合物の血小板の凝集（platelet aggregation）を誘導す
るようになる。血小板の凝集（platelet aggregation）のための塩化カルシウム溶液の濃
度は０．２５ｍｇ／ｍＬ以下の場合、血小板の凝集（Platelet aggregation）が形成され
ず、最高０．５５ｍｇ／ｍＬ以上の場合、浸透圧作用により細胞が損傷を受けるようにな
る。
ood coagulation）で可溶性（soluble）から不溶性（insoluble）に転換させる役割をす
る。カルシウムイオン（Ｃａ2+）のこのような特徴は分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ
）１ｍＬと第１型コラーゲンの混合物の血小板の凝集（platelet aggregation）を誘導す
るようになる。血小板の凝集（platelet aggregation）のための塩化カルシウム溶液の濃
度は０．２５ｍｇ／ｍＬ以下の場合、血小板の凝集（Platelet aggregation）が形成され
ず、最高０．５５ｍｇ／ｍＬ以上の場合、浸透圧作用により細胞が損傷を受けるようにな
る。
２）２０〜５０ｍｇ／ｍＬ濃度の第１型コラーゲンを室温に１５〜３０分間静置して可溶
性コラーゲンを線維型コラーゲンに変化させる。この際、第１型コラーゲンを室温に静置
する理由は、第１に、第１型コラーゲンを可溶性コラーゲン（soluble collagen）状態か
ら線維型コラーゲン（fibrillar collagen）化させるために温度を高めたものであり、第
２に、本発明の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）が第１型コラーゲンの線維型コラーゲン（fibr
illar collagen）混合物と可溶性コラーゲン（soluble collagen）混合物の各成長因子（
growth factor）放出量の差が殆どなかったのであり、第３に、一般的に第１型コラーゲ
ンの線維型コラーゲン（fibrillar collagen）が可溶性コラーゲン（soluble collagen）
より血小板の凝集（platelet aggregation）を誘導し、血小板付着（platelet adhesion
）を維持（supporting）するようにする。
性コラーゲンを線維型コラーゲンに変化させる。この際、第１型コラーゲンを室温に静置
する理由は、第１に、第１型コラーゲンを可溶性コラーゲン（soluble collagen）状態か
ら線維型コラーゲン（fibrillar collagen）化させるために温度を高めたものであり、第
２に、本発明の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）が第１型コラーゲンの線維型コラーゲン（fibr
illar collagen）混合物と可溶性コラーゲン（soluble collagen）混合物の各成長因子（
growth factor）放出量の差が殆どなかったのであり、第３に、一般的に第１型コラーゲ
ンの線維型コラーゲン（fibrillar collagen）が可溶性コラーゲン（soluble collagen）
より血小板の凝集（platelet aggregation）を誘導し、血小板付着（platelet adhesion
）を維持（supporting）するようにする。
３）１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液混合物が盛られた注射器を
同量の２０〜５０ｍｇ／ｍＬ濃度の線維型第１型コラーゲンと分岐コネクタで連結して４
回混合する。
同量の２０〜５０ｍｇ／ｍＬ濃度の線維型第１型コラーゲンと分岐コネクタで連結して４
回混合する。
４）注射器に充填された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）、塩化カルシウム溶液、及び第１型コ
ラーゲン混合物を骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）等、組織再生が要求される
全ての部位に注入する。
ラーゲン混合物を骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）等、組織再生が要求される
全ての部位に注入する。
（実施形態３）
実施形態２の４）に代えて、１）注射器に充填された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）、塩化カ
ルシウム溶液、及び第１型コラーゲン混合物を底の丸いガラスチューブに込める。
実施形態２の４）に代えて、１）注射器に充填された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）、塩化カ
ルシウム溶液、及び第１型コラーゲン混合物を底の丸いガラスチューブに込める。
２）３７℃の培養器で１５分間培養して混合物を凝固（clotting）させる。この際、３７
℃の培養器で培養させる理由は、この混合物を組織部位に移植して凝固（clotting）され
るものと同一な環境を作るためである。
℃の培養器で培養させる理由は、この混合物を組織部位に移植して凝固（clotting）され
るものと同一な環境を作るためである。
３）凝固（clotting）された混合物は滅菌された２４ウェル（well）培養容器に１ｍＬの
ＤＭＥＭを添加して３７℃の培養器で培養する。
ＤＭＥＭを添加して３７℃の培養器で培養する。
上記のような方法により患者から１０ｍＬの全血を採取して２段階の遠心分離により分離
するステップを通じて濃縮された１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を次のステップにお
いて、塩化カルシウム溶液と混合し、さらに次のステップにおいて、第１型コラーゲンと
混合して骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）等、組織再生が要求される全ての部
位に移植できるようにしたものであるので、臨床的には拒否反応がないし、短時間に血小
板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離し、第１型コラーゲンと混合して移植することで、効果的で
、かつ速く骨欠損治療及び傷治癒（wound healing）等、組織再生を誘導できるようにな
る。
するステップを通じて濃縮された１ｍＬの血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を次のステップにお
いて、塩化カルシウム溶液と混合し、さらに次のステップにおいて、第１型コラーゲンと
混合して骨欠損治療、又は傷治癒（wound healing）等、組織再生が要求される全ての部
位に移植できるようにしたものであるので、臨床的には拒否反応がないし、短時間に血小
板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離し、第１型コラーゲンと混合して移植することで、効果的で
、かつ速く骨欠損治療及び傷治癒（wound healing）等、組織再生を誘導できるようにな
る。
特に、本発明の図３は、分離された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を各々トロンビン（Thro
mbin）と第１型コラーゲンで活性化させた後、３７℃の、５％ＣＯ2培養器で培養培地を
入れて培養した培養物で、従来のトロンビン混合物（Ａ）は１５日経過後、大部分が分解
（degradation）されたが、本発明のコラーゲン混合物（Ｂ）は１５日まで初期と比較し
て大きさの変化が殆どないまま、形態を維持することが分かる。
mbin）と第１型コラーゲンで活性化させた後、３７℃の、５％ＣＯ2培養器で培養培地を
入れて培養した培養物で、従来のトロンビン混合物（Ａ）は１５日経過後、大部分が分解
（degradation）されたが、本発明のコラーゲン混合物（Ｂ）は１５日まで初期と比較し
て大きさの変化が殆どないまま、形態を維持することが分かる。
本発明は、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその
製造方法の技術的手段は、実際に同一結果を反復実施可能なものであって、特にこのよう
な本願発明を実施することによって、技術発展を促進して産業発展に貢献することができ
るので、保護する価値が十分にある。
製造方法の技術的手段は、実際に同一結果を反復実施可能なものであって、特にこのよう
な本願発明を実施することによって、技術発展を促進して産業発展に貢献することができ
るので、保護する価値が十分にある。
Claims (5)
- 全血から、全血基準値より５．８〜７．６倍高まった血小板豊富血漿（ＰＲＰ：Platel
et rich plasma）を分離するステップと、
前記血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合して前記血小板豊富血漿を
不溶性に転換するステップと、
次に、前記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を第１型コラーゲ
ンと混合して血小板の凝集を誘導するステップと、
を含み、
前記血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と塩化カルシウム溶液とを混合するステップは、
全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離する工程を通じて採取された１ｍＬの血小板豊
富血漿（ＰＲＰ）を分岐コネクタを用いて０．３０〜０．５５ｍｇ／ｍＬ濃度の塩化カル
シウム溶液と１回混合することを特徴とする、
血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを使用しないで活性化して組織再生を誘導する組
成物の製造方法。 - 前記全血から血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を分離するステップは、
動物又は患者から１０ｍｌの全血を３．２％クエン酸ナトリウム（Sodium citrate）が含
まれた真空試験管で採取した後、１，７５０〜１，９００Ｇで、３〜５分間、１次遠心分
離するステップと、
前記遠心分離により軟膜（Buffy coat）を含んだ上層液（血漿層）を収集するステップと
、
以後、収集された前記軟膜（Buffy coat）を含んだ上層液（血漿層）をブラントニードル
（Blunt needle）を用いて新たな真空試験管に移した後、４，５００〜５，０００Ｇで、
４〜６分間、２次遠心分離するステップと、
次に、底層（試験管の底から約１ｍＬに該当）の濃縮された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を
ブラントニードル（Blunt needle）を用いて採取するステップと、
からなることを特徴とする、請求項１に記載の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを
使用しないで活性化して組織再生を誘導する組成物の製造方法。 - 前記塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）を第１型コラーゲンと
混合するステップは、
前記第１型コラーゲンを室温に放置するステップと、
以後、塩化カルシウム溶液が混合された血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と不透明性状の２０〜
５０ｍｇ／ｍＬ濃度の第１型コラーゲンを分岐コネクタで連結して４回混合するステップ
と、
次に、血小板豊富血漿（ＰＲＰ）と第１型コラーゲン混合物を骨欠損治療又は傷治癒（wo
und healing）のために、組織再生が要求される全ての部位に注入するために注射器に充
填するステップと、
を含むことを特徴とする、請求項１に記載の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを使
用しないで活性化して組織再生を誘導する組成物の製造方法。 - 前記第１型コラーゲンは、２０〜５０ｍｇ／ｍＬ濃度で混合することを特徴とする、請
求項１に記載の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを使用しないで活性化して組織再
生を誘導する組成物の製造方法。 - 前記第１型コラーゲンは、室温に、１５〜３０分間放置して混合することを特徴とする
、請求項１に記載の血小板豊富血漿（ＰＲＰ）をトロンビンを使用しないで活性化して組
織再生を誘導する組成物の製造方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2009-0101387 | 2009-10-23 | ||
| KR1020090101387A KR101114712B1 (ko) | 2009-10-23 | 2009-10-23 | 염화칼슘용액과 제1형 콜라겐으로 혈소판풍부혈장(ｐｒｐ)을 활성화하여 조직재생을 유도하는 조성물의 제조방법 |
| PCT/KR2009/006745 WO2011049263A1 (ko) | 2009-10-23 | 2009-11-17 | 혈소판풍부혈장(ｐｒｐ)을 활성화하여 조직재생을 유도하는 조성물 및 그 제조방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2013508066A JP2013508066A (ja) | 2013-03-07 |
| JP5550732B2 true JP5550732B2 (ja) | 2014-07-16 |
Family
ID=43900476
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2012535101A Active JP5550732B2 (ja) | 2009-10-23 | 2009-11-17 | 血小板豊富血漿（ｐｒｐ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法 |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9011929B2 (ja) |
| EP (1) | EP2491961B1 (ja) |
| JP (1) | JP5550732B2 (ja) |
| KR (1) | KR101114712B1 (ja) |
| CN (1) | CN102573943B (ja) |
| AU (2) | AU2009354233B2 (ja) |
| BR (1) | BR112012009560B8 (ja) |
| CA (1) | CA2778351C (ja) |
| CY (1) | CY1115850T1 (ja) |
| DK (1) | DK2491961T3 (ja) |
| ES (1) | ES2526759T3 (ja) |
| HR (1) | HRP20141098T1 (ja) |
| MX (1) | MX2012004635A (ja) |
| PL (1) | PL2491961T3 (ja) |
| PT (1) | PT2491961E (ja) |
| SI (1) | SI2491961T1 (ja) |
| SM (1) | SMT201400189B (ja) |
| WO (1) | WO2011049263A1 (ja) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2442242B1 (es) * | 2012-08-09 | 2014-11-25 | Biotechnology Institute, I Mas D, S.L. | Composición con factores de crecimiento destinada al tratamiento intranasal de una enfermedad neurodegenerativa u otra patología del sistema nervioso central, y su método de fabricación. |
| CN105263511A (zh) * | 2013-03-21 | 2016-01-20 | 科尔普兰特有限公司 | 用于组织再生的包含胶原和prp的组合物 |
| KR101495449B1 (ko) * | 2013-11-12 | 2015-02-23 | 전북대학교산학협력단 | 혈소판 패치의 제조 방법 |
| US9708597B2 (en) * | 2014-01-17 | 2017-07-18 | General Electric Company | Electric pulse generation systems using capacitive coupling |
| US9452199B2 (en) * | 2014-01-17 | 2016-09-27 | General Electric Company | Platelet activation and growth factor release using electric pulses |
| US10421956B2 (en) | 2014-01-17 | 2019-09-24 | General Electric Company | Electric pulse generation systems using capacitive coupling |
| CN104587525A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-05-06 | 深圳中元生物科技有限公司 | 包含血小板及透明质酸的支架及其制备方法 |
| JP6875619B2 (ja) * | 2015-02-26 | 2021-05-26 | 株式会社細胞応用技術研究所 | 多血小板血漿の保存方法 |
| EP3316780B1 (en) * | 2015-07-02 | 2020-12-02 | Arthrex, Inc. | Methods for preparation of enriched biological fluids |
| KR20170006820A (ko) | 2015-07-10 | 2017-01-18 | 주식회사 글로원 | 혈소판 농축 방법 및 이를 위한 농축기구 |
| WO2017082441A1 (ko) * | 2015-11-13 | 2017-05-18 | 중부대학교 산학협력단 | 활성화된 혈소판 풍부 혈장을 유효성분으로 포함하는 동물의 창상 치료용 수의학적 조성물 |
| CN110337490A (zh) | 2017-01-11 | 2019-10-15 | 脊核细胞有限责任公司 | 增强成纤维细胞治疗活性的方法 |
| CN108619497A (zh) * | 2017-03-23 | 2018-10-09 | 黄丽伟 | 一种可以促进皮肤胶原再生的组合物及其制备方法和应用 |
| CN107349468B (zh) * | 2017-07-02 | 2020-12-04 | 江西瑞济生物工程技术股份有限公司 | 一种羊膜干细胞凝胶及其制备方法和应用 |
| TW201936627A (zh) * | 2018-02-26 | 2019-09-16 | 鄭本岡 | 具有高活化細胞因子的血清之備製方法 |
| US10968423B2 (en) | 2018-02-26 | 2021-04-06 | General Electric Company | System and method for electric pulse based activation of biological samples |
| CN109513045B (zh) * | 2018-11-20 | 2021-01-15 | 温州生物材料与工程研究所 | 具有双层不同内部孔径结构的蛋白基水凝胶及其制备方法 |
| CN111249527A (zh) * | 2018-12-03 | 2020-06-09 | 陕西佰傲再生医学有限公司 | 一种富血小板血浆的软组织填充剂及其制备方法 |
| US20220233752A1 (en) * | 2019-05-24 | 2022-07-28 | Know Bio, Llc | Photoactivated blood products and methods and apparatus for fabrication and use of same |
| CN110478531A (zh) * | 2019-08-02 | 2019-11-22 | 中南大学湘雅医院 | 一种富血小板血浆组织工程支架及其制备方法 |
| CN111110915A (zh) * | 2020-02-28 | 2020-05-08 | 珠海中信大有科技有限公司 | 用于构建肌骨组织的自体生长因子补片的制作方法及应用 |
| IT202000024385A1 (it) * | 2020-10-15 | 2022-04-15 | Biomedical Res Srl | Composizione a base di concentrati piastrinici autologhi e di una miscela di fattori biologici isolata dal colostro per l’uso nel trattamento di condizioni che richiedono la riparazione e la rigenerazione tessutale |
| CN113244458B (zh) * | 2021-05-08 | 2022-07-08 | 康膝生物医疗(深圳)有限公司 | 一种用于修复关节软骨损伤的复合材料及其制备方法 |
| CN113577387A (zh) * | 2021-06-09 | 2021-11-02 | 康膝生物医疗(深圳)有限公司 | 一种复合prp和胶原蛋白的温敏水凝胶制备方法及应用 |
| CN114288472A (zh) * | 2021-12-07 | 2022-04-08 | 武汉亚洲生物材料有限公司 | 一种基于富血小板血浆的人工骨修复材料及制备方法 |
| WO2023196787A2 (en) * | 2022-04-04 | 2023-10-12 | Vascudyne, Inc. | Improved constructed tissue |
| CN115400270A (zh) * | 2022-09-08 | 2022-11-29 | 南开大学 | 缓释富血小板血浆的复合支架材料及其制备方法与应用 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6096309A (en) * | 1997-06-18 | 2000-08-01 | Cohesion Technologies, Inc. | Compositions containing thrombin and microfibrillar nanometer collagen, and methods for preparation and use thereof |
| US6322785B1 (en) * | 1999-03-02 | 2001-11-27 | Natrex Technologies | Methods and compositions for bone graft implants |
| KR20020012170A (ko) * | 1999-04-02 | 2002-02-15 | 추후제출 | 폴리산과 폴리에테르의 조성물 및 이들을 유착 방지에이용하는 방법 |
| NZ523763A (en) | 2000-06-29 | 2005-02-25 | Biosyntech Canada Inc | Compostion and method for the repair and regeneration of cartilage and other tissues |
| DE10360628A1 (de) * | 2003-12-19 | 2005-07-21 | Dade Behring Marburg Gmbh | Kontrollplasma für Thrombinaktivitätstests |
| JPWO2006129703A1 (ja) * | 2005-05-31 | 2009-01-08 | 学校法人 久留米大学 | 活性化部分トロンボプラスチン時間の検査方法 |
| US8052969B2 (en) | 2006-12-28 | 2011-11-08 | Arthrex, Inc. | Method of making plasma enriched with platelets using a double syringe system where the second sytringe is within the first syringe and use thereof |
| ES2333498B1 (es) | 2007-08-02 | 2011-01-10 | Biotechnology Institute, I Mas D, S.L. | Metodo y compuesto para el tratamiento de enfermedades o dolencias articulares o para el tratamiento de la piel con fines esteticos u otros, y el metodo de preparacion del compuesto. |
-
2009
- 2009-10-23 KR KR1020090101387A patent/KR101114712B1/ko active IP Right Grant
- 2009-11-17 SI SI200931063T patent/SI2491961T1/sl unknown
- 2009-11-17 JP JP2012535101A patent/JP5550732B2/ja active Active
- 2009-11-17 CN CN200980162094.XA patent/CN102573943B/zh active Active
- 2009-11-17 DK DK09850622.3T patent/DK2491961T3/en active
- 2009-11-17 US US13/502,116 patent/US9011929B2/en active Active
- 2009-11-17 EP EP09850622.3A patent/EP2491961B1/en active Active
- 2009-11-17 AU AU2009354233A patent/AU2009354233B2/en not_active Ceased
- 2009-11-17 WO PCT/KR2009/006745 patent/WO2011049263A1/ko active Application Filing
- 2009-11-17 CA CA2778351A patent/CA2778351C/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-11-17 PL PL09850622T patent/PL2491961T3/pl unknown
- 2009-11-17 MX MX2012004635A patent/MX2012004635A/es active IP Right Grant
- 2009-11-17 ES ES09850622.3T patent/ES2526759T3/es active Active
- 2009-11-17 BR BR112012009560A patent/BR112012009560B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2009-11-17 PT PT98506223T patent/PT2491961E/pt unknown
-
2014
- 2014-08-07 AU AU2014210601A patent/AU2014210601A1/en not_active Abandoned
- 2014-11-11 HR HRP20141098AT patent/HRP20141098T1/hr unknown
- 2014-11-28 CY CY20141101000T patent/CY1115850T1/el unknown
- 2014-12-18 SM SM201400189T patent/SMT201400189B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112012009560B1 (pt) | 2021-03-09 |
| AU2014210601A1 (en) | 2014-08-28 |
| EP2491961A1 (en) | 2012-08-29 |
| CY1115850T1 (el) | 2017-01-25 |
| SI2491961T1 (sl) | 2015-01-30 |
| DK2491961T3 (en) | 2014-12-01 |
| KR20110044615A (ko) | 2011-04-29 |
| AU2009354233A1 (en) | 2012-06-07 |
| ES2526759T3 (es) | 2015-01-15 |
| CA2778351A1 (en) | 2011-04-28 |
| EP2491961A4 (en) | 2013-09-04 |
| CN102573943A (zh) | 2012-07-11 |
| SMT201400189B (it) | 2015-01-15 |
| CN102573943B (zh) | 2015-04-08 |
| MX2012004635A (es) | 2012-07-30 |
| PL2491961T3 (pl) | 2015-03-31 |
| BR112012009560B8 (pt) | 2021-06-22 |
| KR101114712B1 (ko) | 2012-02-29 |
| US9011929B2 (en) | 2015-04-21 |
| AU2009354233B2 (en) | 2014-08-28 |
| EP2491961B1 (en) | 2014-10-01 |
| US20120201897A1 (en) | 2012-08-09 |
| PT2491961E (pt) | 2014-11-14 |
| WO2011049263A1 (ko) | 2011-04-28 |
| BR112012009560A2 (pt) | 2020-11-17 |
| HRP20141098T1 (hr) | 2015-02-13 |
| JP2013508066A (ja) | 2013-03-07 |
| CA2778351C (en) | 2015-06-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5550732B2 (ja) | 血小板豊富血漿（ｐｒｐ）を活性化して組織再生を誘導する組成物及びその製造方法 | |
| Ehrenfest et al. | Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte-and platelet-rich fibrin (L-PRF) | |
| JPWO2004018615A1 (ja) | フィブリン含有組成物 | |
| AU2004207261B2 (en) | Autologous or homologous coagulant produced from anticoagulated whole blood | |
| US10456500B2 (en) | Implantable preparations for regeneration of tissues and treatment of wounds, their method of preparation, and method of treatment of patients with said implantable preparations | |
| CN113667636A (zh) | 猪血小板裂解液及其制备方法 | |
| US20140065121A1 (en) | Blood plasma based hydrogels for tissue regeneration and wound healing applications | |
| Mallis et al. | Investigating the production of platelet lysate obtained from low volume Cord Blood Units: Focus on growth factor content and regenerative potential | |
| US20210060066A1 (en) | Compositions and methods for platelet enriched fibrin constructs | |
| Sood et al. | Platelet Concentrates-Part I. | |
| KR100956267B1 (ko) | 엘라스틴을 안정화제로서 함유하는 반유동성 이식용 조성물 | |
| Toit et al. | Platelet-Rich Fibrin (PRF): A growth factor-rich biomaterial. part 1-the platelet concentrates milieu & review of the literature | |
| Sethi et al. | Platelet Rich Plasma (PRP)-A Simplified Chairside Technique for Tissue Engineering. | |
| CZ308844B6 (cs) | Způsob přípravy prostředku pro náhradu lidské chrupavkovité tkáně a prostředek tímto způsobem připravený | |
| CZ32739U1 (cs) | Prostředek pro náhradu lidské chrupavkovité tkáně | |
| Gupta | Platelet Rich Fibrin (PRF): Revolutionary Boon to Dentistry. | |
| Joshi | Patient-Derived Hydrogel as a Sacrificial Matrix for Efficient Cell Loading | |
| WO2022250969A1 (en) | Methods and systems for preparation of mononuclear-platelet rich fibrin matrix, and compounds thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131022 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140121 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140507 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140520 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5550732 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |