JP5444425B2 - ニゲロースを有効成分とする皮膚に塗布する抗炎症剤 - Google Patents
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Description
ヒト正常表皮細胞(クラボウ(株)製)を、EpiLife−KG2培地(クラボウ(株)製)を用いて培養し、これを24ウェルプレートに1000cells/cm2の密度で播種し、コンフレント状態まで培養した。この培養細胞に、ニゲロオリゴ糖液(日食テイストオリゴ)を0、0.1、0.5、1.0%となるように添加した。24時間後に、リン酸緩衝液(PBS(−))で2回洗浄し、その後、ウェル内をPBS(−)に置換して、紫外線(UV−B)を50mJ/cm2照射した。照射後、PBS(−)を除去し、培地を添加し、サンプルを再添加した。24時間後、培地上清を採取し、遠心分離を行なって、浮遊物を除去した後に測定キット(IL−6測定用として、Quantikine Human IL-6(R&D Systems Inc,社製)、TNF−α測定用として、Quantikine Human TNF-α/TNFSF1A(R&D Systems Inc,社製))を用いてIL−6およびTNF−αの産生量を測定した。測定は2度行い、平均値を算出した。結果をそれぞれ表1、表2に示す。
マウス由来B−16メラノーマ細胞を、テオフィリン(和光純薬工業(株)製)0.9mM、ウシ胎児血清(フナコシ(株)製)10%を含有するイーグル培地を用いて培養し、これを60mmディッシュ1枚あたり20,000cells播種し、播種24時間後、培地交換を行った。その後、ニゲロオリゴ糖液(日食テイストオリゴ)を0、0.5、1、2、3、4および5%となるように添加した。3日間培養した後、各試験区の細胞を回収し、PBS(−)洗浄、トリクロロ酢酸処理、エタノール洗浄を行い、残留物を窒素ガスで風乾させてメラニンを回収した。2mol/L水酸化ナトリウムで溶解させた後、波長400nmの吸収を測定することにより、メラニン量の定量を行った。また、各試験区の細胞数を測定し、細胞1個あたりのメラニン量を算出し、各試験区の抑制率を算出した。測定は3度行い、平均値を算出した。結果を表3に示す。
無作為に抽出した20〜50歳代の敏感肌であると感じている合計54名を被験者とし、表4〜6に示した処方例1〜3ならびに比較例1〜3の皮膚化粧料を通常の方法で連日2週間使用してもらった。
全顔、特に頬部の状態を目視で観察して、以下の評価基準にもとづいて評価した。
A:改善された。
B:やや改善された。
C:変わらない。
D:やや悪化した。
E:悪化した。
全顔、特に頬部の状態を目視で観察して、以下の評価基準にもとづいて評価した。
A:改善された。
B:やや改善された。
C:変わらない。
D:やや悪化した。
E:悪化した。
A:良くなった。
B:やや良くなった。
C:変わらない。
D:やや悪くなった。
E:悪くなった。
ヒト正常表皮細胞(クラボウ(株)製)を、EpiLife−KG2培地(クラボウ(株)製)を用いて培養し、これを24ウェルプレートに1,000cells/cm2の密度で播種し、コンフレント状態まで培養した。この培養細胞に、ニゲロース((株)林原生物化学研究所製)をそれぞれ0、0.1、0.5、1.0%となるように添加した。24時間後に、リン酸緩衝液(PBS(−))で2回洗浄し、その後、ウェル内をPBS(−)に置換して、紫外線(UV−B)を50mJ/cm2照射した。照射後、PBS(−)を除去し、培地を添加し、サンプルを再添加した。24時間後、培地上清を採取し、遠心分離を行なって、浮遊物を除去した後に測定キット(IL−6測定用として、Quantikine Human IL-6(R&D Systems Inc,社製)、TNF−α測定用として、Quantikine Human TNF-α/TNFSF1A(R&D Systems Inc,社製))を用いてIL−6およびTNF−αの産生量を測定した。測定は2度行い、平均値を算出した。結果をそれぞれ表8および9に示す。
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
グリセリルモノステアレート 3.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 3.0
セタノール 2.0
スクワラン 3.0
2−エチルヘキサン酸グリセリル 10.0
グリセリン 7.0
エチルパラベン 0.1
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ステアリン酸 10.0
セタノール 2.0
ラノリン 1.0
ミリスチン酸イソプロピル 3.0
モノステアリン酸ポリエチレングリコール 1.5
トリエタノールアミン 0.8
ソルビトール(70%) 4.0
メチルパラベン 0.1
香料 0.01
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ヒアルロン酸 0.01
グリセリルモノステアレート 2.0
ポリオキシエチレン(4)ラウリルエーテルリン酸ナトリウム 0.5
ステアリン酸 5.0
ベヘニルアルコール 1.0
ラノリン 2.0
スクワラン 5.0
2−エチルヘキサン酸グリセリル 4.0
顔料 10.0
プロピレングリコール 7.0
トリエタノールアミン 1.0
エチルパラベン 0.1
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ラノリン 2.0
流動パラフィン 5.0
ステアリン酸 2.0
セタノール 1.0
グリセリン 2.0
スクワラン 5.0
2−エチルヘキサン酸グリセリル 4.0
顔料 10.0
プロピレングリコール 7.0
トリエタノールアミン 1.0
エチルパラベン 0.1
香料 0.01
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ヒアルロン酸 0.01
ステアリン酸 2.0
エタノール 0.5
流動パラフィン 10.0
ラノリン脂肪酸イソプロピル 3.0
ラノリン 4.0
スクワラン 5.0
セスキイソステアリン酸ソルビタン 1.0
プロピレングリコール 5.0
トリエタノールアミン 0.6
エチルパラベン 0.1
香料 0.01
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ステアリン酸 3.5
エタノール 0.5
流動パラフィン 3.0
ラノリン 0.5
スクワラン 2.0
プロピレングリコール 3.0
トリエタノールアミン 0.8
エチルパラベン 0.1
カルボキシビニルポリマー1%液(アルカリ中和) 8.0
香料 0.01
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
モノラウリン酸ポリオキシエチレン(20)ソルビタン 1.0
1,3−ブチレングリコール 3.0
ソルビトール(70%) 2.0
ピロリドンカルボン酸ナトリウム液 3.0
エタノール 15.0
アスコルビン酸 0.1
メチルパラベン 0.1
香料 0.01
精製水 残部
合計 100
ニゲロオリゴ糖液 1.0
モノラウリン酸ポリオキシエチレン(20)ソルビタン 1.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
ソルビトール(70%) 2.0
ピロリドンカルボン酸ナトリウム液 3.0
エタノール 15.0
アスコルビン酸 0.1
メチルパラベン 0.1
色素 0.01
香料 0.01
精製水 残部
合計 100
Claims (2)
- ニゲロースを有効成分として含む皮膚に塗布する抗炎症剤。
- さらにニゲロシルグルコースまたはニゲロシルマルトースから選択される1または2以上の糖を含む請求項1記載の皮膚に塗布する抗炎症剤。
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