KR20150030091A

KR20150030091A - 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유하는 모발 또는 두피 상태 개선용 조성물

Info

Publication number: KR20150030091A
Application number: KR20130109333A
Authority: KR
Inventors: 이옥찬; 김동현; 황경환; 염명훈; 조준철
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2013-09-11
Filing date: 2013-09-11
Publication date: 2015-03-19
Also published as: KR102052517B1

Abstract

본 발명은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유하는 모발 또는 두피 상태 개선용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 사용함으로써 백모 및 탈모를 방지하며, 두피에 대한 자극을 완화하고 비듬, 두피 염증 등을 억제하여 전반적인 모발 상태를 개선시키고 두피에 대한 정화 및 진정 효과가 우수한 조성물에 대한 것이다.

Description

인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유하는 모발 또는 두피 상태 개선용 조성물{Composition for improving condition of hair and scalp containing Panax ginseng polysaccharides and Green tea polysaccharides}

두피는 표피(epidermis), 진피(dermis), 피하조직(subcutaneous tissue)으로 구성되어 있으며, 가장 바깥조직이 표피이다. 표피는 신체의 민감한 조직을 손상받지 않도록 보호해주는 기능을 한다. 그러나 외부의 온도, 습도의 변화, 공해물질 등의 여러 가지 물리적, 화학적 외부의 자극과 스트레스, 영향 결핍 등으로 인해 두피의 기능을 상실할 수 있으며, 나아가서는 탈모에도 영향을 미칠 수 있다.

또한, 미용을 중시하는 현대사회에서는 개성표현 욕구를 충족시키기 위하여 남녀노소를 불문하고 많은 사람들이 염모제, 퍼머제 등을 사용하고 있다. 그러나, 일부 민감성 두피의 경우는 이러한 염색, 퍼머 등의 화학적 시술로 인해 두피의 가려움이나 따가움과 같은 자극현상과 염증이 유발되며, 이는 환경적 탈모로 이어지고 있다.

이와 같이, 여러 가지 원인에 의한 환경으로부터의 자극, 스트레스, 화학적 시술 등으로부터 두피를 보호하고, 탈모를 방지하면서 모발 생장을 촉진할 수 있고, 생태계 친화적이면서 환경과 인간에 무해한 성분에 관한 연구가 지속되고 있다.

이에 본 발명자들은 인삼으로부터 유래한 인삼 다당체와 녹차로부터 유래한 녹차 다당체를 동시에 사용할 경우, 상승 효과에 의하여 이들 물질을 각각 사용하는 경우에 비하여 백모 및 탈모 방지, 비듬 억제 등의 효과가 뛰어남을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 동시에 사용함으로써 우수한 모발 또는 두피 상태 개선 효과를 나타내는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 모발 또는 두피 상태 개선용 피부 외용제 조성물 또는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유함으로써 백모 및 탈모를 방지하고, 두피 자극을 완화시키며, 두피 가려움 및 비듬을 방지하는데 효과적일 뿐만 아니라, 모발을 더 부드럽고 윤기나게 한다.

본 발명의 조성물은 유효성분으로서 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유함으로써, 우수한 모발 또는 두피 상태 개선 효과를 제공한다.

본 발명에서 사용되는 인삼(Panax ginseng C.A. Meyer) 다당체는 분자량이 34,600인 펙틴(pectin) 유사물질로서, 갈락투론산(galacturonic acid)이 60% 정도를 차지하고, 그 외 아라비노스, 람노오스, 글루코스 및 갈락토오스 등이 측쇄를 구성하고 있다. 본 발명에서 사용되는 인삼은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로서, 본 발명에서 인삼은 그 종류 및 년근에 제한없이 사용가능하며, 말리거나 말리지 않은 인삼을 모두 사용할 수 있다. 또한 본 발명에서 인삼은 그 부위에 제한없이 사용 가능하며, 구체적으로는 인삼의 뿌리를 사용할 수 있다.

또한, 본 발명에서 사용되는 녹차(Green tea) 다당체는 녹차로부터 유래한 것으로서, 다른 식물에서 발견되는 다당체와는 달리 산성 다당체군이며, 광합성을 통해 만들어진 당 성분과 아미노산이 결합되어 생성된 것이다. 본 발명에서 녹차는 그 종류 및 재배 일수에 제한없이 사용가능하며, 말리거나 말리지 않은 녹차를 모두 사용할 수 있다. 또한 본 발명에서 녹차는 그 부위에 제한없이 사용 가능하며, 구체적으로는 녹차의 잎을 사용할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 인삼 다당체와 녹차 다당체는 당업계에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있으며, 그 방법이 특별히 한정되지 않는다.

구체적으로, 38~42℃에서 물로 인삼 뿌리 또는 녹차 잎 추출물을 제조한 후에 이를 농축하고, 이를 필터로 불순물을 제거한 다음, 여기에 에탄올을 적가하고 열풍 건조시킴으로써 녹차 다당체 및 인삼 다당체를 수득할 수 있다.

본 발명의 조성물은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유할 수 있으며, 바람직하게는 인삼 다당체와 녹차 다당체를 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.005~9.5중량%, 0.01~9중량%, 0.03~8.5중량%, 0.05~8중량%, 0.07~7.5중량%, 0.09~7중량%, 0.1~6.5중량%, 0.3~6중량%, 0.5~5.5중량% 또는 0.7~5중량%의 양으로 함유할 수 있다.

본 발명에 있어서, 인삼 다당체와 녹차 다당체는 중량비로 0.1~10:1의 범위로 혼합하여 사용된다. 또한, 상기 두 성분의 병용에 따른 상승 효과를 극대화하기 위하여, 바람직하게는 인삼 다당체와 녹차 다당체를 중량비로 0.5~9.5:1, 1~9:1 또는 1.5~8.5:1의 범위로 혼합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 조성물은 비듬 방지용 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 모발과 두피에 축적된 독소를 효과적으로 배출하여 두피를 정화하고, 비듬균의 증식과 성장을 억제하여 두피염증반응을 예방할 수 있으며, 또한 활성산소의 생성 및 작용을 억제하는 항산화 효능이 뛰어나 두피를 진정시키고 강화시키며 본연의 방어력을 강화시키는 효과를 제공할 수 있다.

본 발명의 조성물은 육모용 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 휴지기 모발주기의 성장기 모발주기로의 이행을 촉진시킴으로써 모발의 생장을 촉진하고, 탈모를 방지하는 효과를 제공할 수 있다.

본 발명의 조성물은 백모 방지용 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 멜라노사이트에서 MITF의 발현을 현저히 상승시켜 백모를 억제하며 흑모 유발을 촉진시킬 수 있다.

본 발명의 조성물은 두피의 가려움, 따가움 등의 자극 현상을 감소시키고 두피 염증을 완화하여 진정시킴으로써 민감성, 자극성 또는 반응성 두피를 안정화시킬 수 있다. 또한, 거칠어지고 손상된 모발을 부드럽고 매끄럽게 해주는 컨디셔닝 효과도 제공함으로써 모발 상태를 건강하게 개선시킬 수 있다.

본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물, 특히 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

특히, 본 발명의 피부 외용제 조성물은 모발 또는 두피용 조성물로서 제형이 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어 헤어토닉, 모발 영양화장수, 스칼프트리트먼트, 헤어트리트먼트, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어로션 또는 두피 모발 겸용 트리트먼트 등으로 제형화될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~5중량%, 구체적으로 0.01~3중량%일 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 제형화될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물을 의약품에 적용할 경우에는, 본 발명에서 사용되는 유효성분에 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제형화할 수 있으며, 본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다.

상기 경구 투여를 위한 제형으로서는 정제, 환제, 과립제, 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제, 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여를 위한 제형으로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 상법에 따라 실시함으로써, 유효성분을 용이하게 제형화할 수 있으며, 이 때 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 유효 성분의 투여 용량은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적당한 용량의 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5mg/kg/일 내지 50mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

[참조예 1] 인삼 다당체의 제조

건조된 백삼 1kg을 믹서기로 분쇄한 뒤 여기에 정제수 10ℓ를 넣고, 38~42℃ 온수로 24시간 교반 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 정제수 양의 1/10까지 감압 농축하였다. 여기에 농축된 양의 4배수의 에탄올을 적가하고 열풍 건조시켜 인삼 다당체 65g을 얻었다.

[참조예 2] 녹차 다당체의 제조

1차 가공된(덖음 과정) 녹차 잎 1kg을 믹서기로 분쇄한 뒤 여기에 정제수 10ℓ를 넣고, 38~42℃ 온수로 24시간 교반 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 정제수 양의 1/10까지 감압 농축하였다. 여기에 농축된 양의 4배수의 에탄올을 적가하고 열풍 건조시켜 녹차 다당체 72g을 얻었다.

[실시예 1] 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물의 제조

상기 참조예 1에서 제조한 인삼 다당체와 참조예 2에서 제조한 녹차 다당체를 1:3의 비율로 혼합하였다.

[실시예 2] 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물의 제조

상기 참조예 1에서 제조한 인삼 다당체와 참조예 2에서 제조한 녹차 다당체를 1:1의 비율로 혼합하였다.

[실시예 3] 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물의 제조

상기 참조예 1에서 제조한 인삼 다당체와 참조예 2에서 제조한 녹차 다당체를 3:1의 비율로 혼합하였다.

[참고예 1] 제형예 및 비교제형예의 제조

하기 표 1의 조성으로 샴푸를 제조하였다. 구체적으로, 계면활성제와 에틸렌글리콜디스테아레이트를 정제수에 첨가하여 80℃가 될 때까지 가열하여 균일하게 용해시킨 후, 교반하에 40℃까지 서서히 냉각시키고, 상기 혼합물에 본 발명에 따른 유효성분과 방부제, 점도조절제, 향료, 모발 컨디셔닝제를 투입하여 혼합한 후, 교반하에 실온까지 냉각시켜 제조하였다.

성분	제형예			비교제형예
성분	1	2	3	1	2	3
라우릴황산암모늄	10	10	10	10	10	10
폴리옥시에틸렌라우릴황산암모늄	5	5	5	5	5	5
코코아미도프로필베타인	2	2	2	2	2	2
에틸렌글리콜디스테아레이트	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
코코일 모노에탄올아미드	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8
실시예 1	5.0	-	-	-	-	-
실시예 2	-	5.0	-	-	-	-
실시예 3	-	-	5.0	-	-	-
참조예 1	-	-	-	5.0	-	-
참조예 2	-	-	-	-	5.0	-
폴리쿼터늄-10	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
청색1호	0.0002	0.0002	0.0002	0.0002	0.0002	0.0002
황색4호	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
메틸파라벤	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
향료	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8
구연산	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
디메치콘	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
물	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100

[시험예 1] 비듬감소 효과 시험

비듬이 비교적 많은 19~35세의 남성 60명을 선정하여 10명씩 6개 그룹으로 나누고 각 그룹에 대하여 제형예 1 내지 3, 비교제형예 1 내지 3의 샴푸를 1개월간 다음과 같은 방식으로 사용하게 한 후 비듬 감소율을 측정하였다.

시험 개시전에 보통 통상의 샴푸로 세발하고, 세발 후 2일간 누적된 비듬을 채집하여 채집된 비듬의 중량과 각각의 샴푸로 2일에 한번씩 세발하여 시험종료 후 2일간 누적된 비듬의 중량을 비교 평가하였다. 이때 누적된 비듬은 진공 흡입 장치로써 두피로부터 직접 채집하여, 하기 수학식 1에 의거하여 비듬 감소율을 구하고 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

	비듬감소율(%)
제형예 1	34.5
제형예 2	34.2
제형예 3	32.9
비교제형예 1	30.8
비교제형예 2	29.8
비교제형예 3	2.5

상기한 표 2에서 알 수 있는 바와 같이, 인삼 다당체 및 녹차 다당체를 함유하지 않는 비교제형예 3을 사용한 경우에는 비듬방지 효과가 거의 나타나지 않는다. 그러나, 인삼 다당체 또는 녹차 다당체를 함유하는 비교제형예 1 또는 2, 제형예 1 내지 3을 사용한 경우에는 비듬이 감소함을 확인할 수 있으며, 특히 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 사용한 제형예 1 내지 3의 경우에는 이들 다당체의 혼합 사용에 따른 상승 효과로 인하여 현저하게 우수한 비듬방지 효과를 나타냄을 알 수 있다.

[시험예 2] 두피 가려움증 방지 효과 시험

비교적 두피 가려움을 심하게 느끼는 25~45세의 남녀 60명을 선정하여 10명씩 6개 그룹으로 나누고 각 그룹에 대하여 제형예 1 내지 3, 비교제형예 1 내지 3의 샴푸를 3일에 1회씩 2주간 사용하게 한 후 두피 가려움 방지 효과를 하기 평가기준을 통하여 평가하고 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

[평가 기준]

매우 우수하다 - 5점

우수하다 - 4점

보통이다 - 3점

불량하다 - 2점

매우 불량하다 - 1점

구분	두피의 가려움증 방지 효과
제형예 1	3.3
제형예 2	3.4
제형예 3	3.3
비교제형예 1	3.0
비교제형예 2	2.8
비교제형예 3	2.3

상기한 표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 인삼 다당체 및 녹차 다당체를 함유하지 않는 비교제형예 3을 사용한 경우에는 두피 가려움증 방지 효과가 좋지 않았으며, 인삼 다당체 또는 녹차 다당체를 함유하는 비교제형예 1 또는 2를 사용한 경우에는 두피 가려움증 방지 효과가 나타나지만, 그 정도가 보통 정도임을 알 수 있다. 반면, 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 사용한 제형예 1 내지 3의 경우에는 이들 다당체의 혼합 사용에 따른 상승 효과로 인하여 보다 우수한 두피 가려움증 방지 효과를 나타냄을 알 수 있다.

[시험예 3] 모낭 모유두 세포 증식 효과

모발을 구성하는 케라틴 단백질은 모근부 케라틴형성세포 (keratinocyte)에서 생성되며, 이 케라틴형성세포는 모유두 세포로부터 분화된다. 본 조성물의 모유두 세포를 활성을 평가하기 위하여 본 발명에서는 DP6(rat immortalized dermal papilla cell) 세포주를 사용하였다(Wendy Filsell, Journal of Cell Science 107, 1761-1772 (1994)). 본 모유두 세포주는 수컷 PVG 래트 수염의 모근에서 현미해부(microdissection) 방법으로 분리하여 배양한 세포주이며, 10% FBS(Fetal bovine serum)가 함유된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium, Gibco BRL, Gaithersburg, MD, USA)에서 5% CO₂, 37℃가 유지되는 인큐베이터에서 24시간 동안 배양하였다. DP6을 96 웰 플레이트에 넣고 24시간 동안 37℃ 인큐베이터에서 배양한 후 상기 실시예 1~3 및 참조예 1~2를 각각 5ppm, 10ppm및 20ppm의 농도로 처리하였다. 약물 처리 24시간 경과 후에 WST-1 키트(Roche)를 사용하여 세포 증식능을 측정하였다. 결과는 하기 표 4에 나타내었다.

구분		세포 증식능(%)
무처리 대조군(Control)		100
실시예 1	5ppm	113
	10ppm	117
	20ppm	129
실시예 2	5ppm	112
	10ppm	117
	20ppm	127
실시예 3	5ppm	112
	10ppm	117
	20ppm	126
참조예 1	5ppm	108
	10ppm	113
	20ppm	121
참조예 2	5ppm	110
	10ppm	115
	20ppm	125

상기한 표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 인삼 다당체 및 녹차 다당체로 처리하지 않은 대조군에 비하여 인삼 다당체 또는 녹차 다당체로 처리한 참조예 1 및 2의 경우 모유두 세포 증식 효과가 더 우수함을 알 수 있다. 특히, 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 사용한 실시예 1 내지 3의 경우에는 이들 다당체의 혼합 사용에 따른 상승 효과로 인하여 모유두 세포의 증식이 더 효과적으로 증가하는 한편, 이는 농도 의존적으로 유의차있게 증가하는 것을 확인할 수 있다.

[시험예 4] 칼륨 이온 채널 활성 증가 효과 평가

탈모 치료제인 미녹시딜은 잠재적인 미토콘드리아 칼륨 이온 채널 오프너(K_ATP channel opener)로 알려져 있으며, 안드로겐성 탈모의 치료에 사용되는 대표적인 약물이다. 이러한 미녹시딜의 기작을 평가하기 위해서 두피의 진피를 구성하는 섬유아 세포에서 K_ATP 채널을 막는 톨부타미드(SIGMA AlDRICH, T0891)를 처리하여 세포증식을 억제하고, 다시 칼륨 이온 채널을 열어 세포증식이 회복되는 시험법을 사용하였다.

본 조성물의 K_ATP 채널 오프너로서의 기능을 평가하기 위해서 본 발명에서는 섬유아세포주인 NIH3T3(Mouse embryonic fibroblast cell line) 세포주를 사용하였다. 본 세포주는 NIH 스위스 마우스 배아(Swiss mouse embryo)에서 분리한 섬유아 세포주를 3T3 프로토콜로 자연 불멸화시킨 세포주이다. 상기 세포주는 10% FBS가 함유된 DMEM(Gibco BRL, Gaithersburg, MD, USA)에서 5% CO₂, 37℃가 유지되는 인큐베이터에서 24시간 동안 배양하였다. NIH3T3을 96웰 플레이트에 넣고 24시간 동안 37℃ 인큐베이터에서 배양한 후 2.5mM 톨부타미드를 처리하고, 10분 뒤에 양성대조군인 미녹시딜 10μM과 상기 실시예 1 내지 3, 참조예 1 및 2를 각각 2.5ppm, 5ppm 및 10ppm의 농도로 처리하며, 약물 처리 48시간 경과 후에 WST-1 키트(Roche)를 사용하여 세포 증식능을 측정하였다. 결과는 하기 표 5에 나타내었다.

구분		세포 증식능(%)
무처리 대조군(Control)		100
미녹시딜		132
실시예 1	2.5ppm	110
	5ppm	114
	10ppm	122
실시예 2	2.5ppm	111
	5ppm	115
	10ppm	124
실시예 3	2.5ppm	111
	5ppm	116
	10ppm	125
참조예 1	2.5ppm	106
	5ppm	111
	10ppm	119
참조예 2	2.5ppm	106
	5ppm	112
	10ppm	118

상기 표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 인삼 다당체 및 녹차 다당체로 처리하지 않은 대조군에 비하여 인삼 다당체 또는 녹차 다당체로 처리한 참조예 1 및 2의 경우 섬유아 세포의 증식 효과가 더 우수함을 알 수 있다. 특히, 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 사용한 실시예 1 내지 3의 경우에는 이들 다당체의 혼합 사용에 따른 상승 효과로 인하여 섬유아 세포의 증식이 더 효과적으로 증가하는 한편, 이는 농도 의존적으로 유의차있게 증가하는 것을 확인할 수 있다.

[시험예 5] 멜라닌 생성 촉진 효과 시험

RPMI 배지에 5%의 우태아혈청, 100IU의 페니시린G 및 0.2μM의 TPA를 첨가한 배지에 멜라닌 세포(melan-a)를 24웰플레이트(24-well microtiter plate)에 50,000세포/웰이 되도록 분주하였다. 다음날 분주된 세포에 시험 물질로서 실시예 1 내지 3, 참조예 1 및 2를 각각 최종농도 10ppm 또는 50ppm으로 처리하고, 음성 대조군으로는 0.1% DMSO를, 양성 대조군으로는 100μM IBMX를 처리한 후에 37℃ 온도에서 3일간 배양하였다. 배양 후, PBS로 웰을 씻어주고 1N NaOH를 100㎕씩 넣은 후 세포 안의 멜라닌을 용해시켰다. 용해된 멜라닌의 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)를 이용하여 405nm에서 측정하였다. 진세노사이드 Y의 멜라닌 생성 촉진 효과를 대조군과 비교한 결과는 하기 표 6에 나타내었다.

구분		멜라닌 합성양(%)
DMSO(0.1%)		100
IBMX(100μM)		120
실시예 1	10ppm	109
실시예 1	50ppm	121
실시예 2	10ppm	110
실시예 2	50ppm	122
실시예 3	10ppm	110
실시예 3	50ppm	124
참조예 1	10ppm	105
참조예 1	50ppm	117
참조예 2	10ppm	106
참조예 2	50ppm	119

상기 표 6을 보면, 인삼 다당체와 녹차 다당체가 멜라노사이트의 멜라닌 합성을 촉진시키며, 특히 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 사용한 실시예 1 내지 3의 경우에는 이들 다당체의 혼합 사용에 따른 상승 효과로 인하여 우수한 멜라닌 생성 촉진 효과를 나타냄을 알 수 있다.

[시험예 6] 멜라노사이트에서의 MITF 및 티로시나제 발현 촉진 효과

501mel 세포주를 이용하여 6웰플레이트(6-well microtiter plate)에 500,000세포/웰이 되도록 분주하고, 각공에 음성 대조군으로는 DMSO 0.1%, 양성 대조군으로는 IBMX 100μM, 그리고 시험군으로는 실시예 1 내지 3, 참조예 1 및 2를 각각 10ppm으로 처리하여, 37℃ 온도에서 24시간, 48시간, 72시간 동안 배양한 후 단백질을 얻었다. 이렇게 얻은 단백질에 대하여 MITF 및 티로시나제 항체를 이용하여 웨스턴 블랏을 하였다. 단백질 추출과 웨스턴 블랏은 통상적으로 당업자가 사용하는 표준 방법으로 수행하였다. 웨스턴 블랏 후 그 결과를 음성 대조군을 100으로 하고 이 값과 비교하여 하기 표 7 및 8에 나타내었다.

MITF 항체를 이용한 웨스턴 블랏

구분	24시간	48시간	72시간
IBMX	119	97	212
실시예 1	86	118	156
실시예 2	84	114	150
실시예 3	80	111	148
참조예 1	78	110	148
참조예 2	76	106	142

티로시나제 항체를 이용한 웨스턴 블랏

구분	24시간	48시간	72시간
IBMX	155	147	287
실시예 1	134	160	188
실시예 2	135	162	191
실시예 3	138	167	193
참조예 1	125	154	176
참조예 2	127	157	184

상기 표 7 및 8을 보면, 인삼 다당체와 녹차 다당체는 멜라노사이트에서 MITF와 티로시나제 단백질 발현을 상승시키며, 특히 인삼 다당체와 녹차 다당체를 혼합하여 처리한 경우에 MITF와 티로시나제 단백질 발현을 상승시키는 효과가 매우 우수함을 확인할 수 있다.

[참고예 2] 제형예 4~6 및 비교제형예 4~6의 제조

상기 실시예 1~3, 참조예 1 및 2를 사용하여 하기 표 9의 조성에 따라 두피 에센스를 제조하였다. 보다 구체적으로는 실시예 1~3, 참조예 1 및 2의 효능 물질, 폴리옥시에틸렌 수소화된 피마자유(Polyoxyethylene Hydrogenated Castor Oils)/ POE(60) (Emalex HC-60, Nihon Emulsion Co.,Ltd.), 살리실릭산 0.2%, 에탄올 10%, 증류수, 암모늄아크릴로일디메칠타우레이트/브이피코폴리머(제조사: Aristoflex) 및 페녹시에탄올(Phenoxyethanol, PE)을 사용하였다.

(단위: 중량%)

성분	제형예			비교제형예
성분	4	5	6	4	5	6
폴리옥시에틸렌 수소화된 피마자유/ POE(60)	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
실시예 1	0.2	-	-	-	-	-
실시예 2	-	0.2	-	-	-	-
실시예 3	-	-	0.2	-	-	-
참조예 1	-	-	-	0.2	-	-
참조예 2	-	-	-	-	0.2	-
살리실릭산	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
에탄올	10	10	10	10	10	10
증류수	88.3	88.3	88.3	88.3	88.3	88.3
암모늄아크릴로일디메칠타우레이트/브이피코폴리머	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
페녹시에탄올	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3

[시험예 7] 피부 자극 시험

본 발명에 따른 조성물의 사용시 피부 자극 여부를 확인하기 위하여 비교적 두피 가려움을 심하게 느끼는 25~45세의 남녀 60명을 선정하여 10명씩 6개 그룹으로 나누고 각 그룹에 대하여 제형예 4~6, 비교제형예 4~6의 두피 에센스를 사용하도록 하였다. 구체적으로는, 등피부를 씻은 후에 물기를 닦아내고, 항온항습실(온도 24 ± 4℃, 상대습도 40~45%)에서 15분간 대기하도록 하였다. 효능 물질을 0.2% 함유한 두피 에센스를 각각 흐르지 않을 정도의 동량을 탈지면에 충분히 도포하여 등 피부의 위치 중 정해서 부착하였다. 시험물질을 부착하고 24시간과 48시간 경과 후 피험자가 자극의 정도를 0점에서 4점(0= 자극 없음, 1= 아주 약함, 2 = 약함, 3 = 중간, 4 = 심함)까지로 표시하였으며(총 2회 측정), 따가움, 화끈거림 등 자극감에 대하여 평가하였다.

각 시간대별로 상기 등급에 따른 자극을 호소한 피험자의 숫자를 하기 표 10에 나타내었다. 또한, 피부 자극 여부를 평균 수치(Mean score)로 도출하기 위해 평균값을 계산하고, 결과를 하기 표 10에 나타내었다.

시험물질명	시험 농도	24hr				48hr				반응인원	판정
시험물질명	시험 농도	1	2	3	4	1	2	3	4	(n=10)	판정
제형예 4	0.20%	1	0	0	0	0	0	0	0	1	자극없음
제형예 5	0.20%	1	0	0	0	0	0	0	0	1	자극없음
제형예 6	0.20%	1	0	0	0	0	0	0	0	1	자극없음
비교제형예 4	0.20%	1	0	0	0	0	0	0	0	1	자극없음
비교제형예 5	0.20%	1	0	0	0	0	0	0	0	1	자극없음
비교제형예 6	0.20%	0	0	0	0	1	0	0	0	1	자극없음

상기 표 10의 결과에서, 제형예 4~6, 비교제형예 4 및 5의 인삼 다당체 또는 녹차 다당체, 또는 이들 다당체 혼합물을 포함하는 조성물은 다당체를 포함하지 않는 비교제형예 6과 동일하게 피부 자극이 없음을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 인삼 및 녹차 유래의 다당체를 유효성분으로 사용함으로써 인체에 안전하고 피부에 자극이 없으며, 장기간 사용하여도 부작용이 없음을 알 수 있다.

[참고예 3] 제형예 7~9 및 비교제형예 5~9의 제조

상기 실시예 1~3, 참조예 1 및 2를 사용하여 하기 표 11의 조성에 따라 두피 및 모발 겸용 트리트먼트 조성물을 제조하였다. 유상과 수상을 배합기에 따로 준비한 후, 유상을 수상에 서서히 첨가하고 호모믹서를 이용하여 3,000rpm으로 10분간 유화시킨 후 실온까지 냉각시켜 제형예 7~9 및 비교제형예 7~9의 두피 및 모발 겸용 트리트먼트를 제조하였다.

성분 (중량%)	제형예			비교제형예
성분 (중량%)	7	8	9	7	8	9
정제수	잔액 (to 100)	잔액 (to 100)	잔액 (to 100)	잔액 (to 100)	잔액 (to 100)	잔액 (to 100)
실시예 1	0.5	-	-	-	-	-
실시예 2	-	0.5	-	-	-	-
실시예 3	-	-	0.5	-	-	-
참조예 1	-	-	-	0.5	-	-
참조예 2	-	-	-	-	0.5	-
세틸트리메칠암모늄클로라이드	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
세틸알코올	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
스테아릴알코올	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
방부제, 색소 및 향료	적량	적량	적량	적량	적량	적량

[시험예 8] 관능시험

상기 제형예 7~9 및 비교제형예 7~9의 두피 및 모발 겸용 트리트먼트 조성물에 대하여 다음과 같은 방법으로 관능테스트를 진행하였다. 전문평가요원 60명을 10명씩 6개 그룹으로 나누고 각 그룹에 대하여 상기 제형예 7~9 및 비교제형예 7~9의 두피 및 모발 겸용 트리트먼트를 사용하게 한 후 하기의 표 12에 나타난 평가 항목에 대하여 비교 테스트를 하도록 하였으며, 가장 낮은 점수를 1로 하고 가장 높은 점수를 5로 하여 테스트를 진행하였다. 테스트 결과는 하기 표 12에 나타내었다.

항목	두피 가려움	두피 자극감	모발 부드러움/매끄러움
제형예 7	3.0	2.9	2.2
제형예 8	3.0	3.0	2.4
제형예 9	2.8	2.8	2.4
비교제형예 7	3.3	3.1	2.1
비교제형예 8	3.1	3.0	2.3
비교제형예 9	4.1	3.8	1.5

상기 표 12를 보면, 인삼 또는 녹차 다당체를 포함하는 제형예 7~9 및 비교제형예 7~9의 경우 다당체를 전혀 포함하지 않는 비교제형예 9를 사용한 경우와 비교하여 두피의 가려움이 감소되고 자극감도 완화되었으며, 또한 모발 상태도 보다 좋아짐을 알 수 있다. 특히, 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물을 포함하는 제형예 7~9를 사용하는 경우 특히 그 효과가 우수함을 확인할 수 있다.

[제제예 1] 헤어 토닉

하기 표 13에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어 토닉을 제조하였다.

성분	중량비(%)
에탄올	50
멘톨	0.02
글리세린	3
살리실산	0.05
참조예 1의 인삼 다당체	0.5
참조예 2의 녹차 다당체	0.5
향료 및 색소	적당량
정제수	잔액 (to 100)

[제제예 2] 헤어 로션

하기 표 14에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어 로션을 제조하였다.

성분	중량비(%)
세토스테아릴알코올	2.0
EDTA 2Na	0.2
히드록시에틸셀룰로오즈	0.5
미네랄오일	5.0
참조예 1의 인삼 다당체	0.5
참조예 2의 녹차 다당체	0.5
방부제	적당량
향료 및 색소	적당량
정제수	잔액 (to 100)

[제제예 3] 모발 영양화장수

하기 표 15에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 모발 영양화장수를 제조하였다.

성분	중량비(%)
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	0.7
미네랄 오일	10.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.2
참조예 1의 인삼 다당체	0.5
참조예 2의 녹차 다당체	0.5
방부제	적당량
향료 및 색소	적당량
정제수	잔액 (to 100)

[제제예 4] 헤어샴푸

하기 표 16에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어샴푸를 제조하였다.

성분	중량%
정제수	잔액 (To 100)
참조예 1의 인삼 다당체	0.5
참조예 2의 녹차 다당체	0.5
소디윰라우릴설파이트	36.0
코카미도프로필베타인	8.0
팔미티딘말레이트	2.0
글라이콜스테아레이트	1.5
폴리쿼터니윰 10	0.5
사이트릭애씨드	0.1
글리세린	2.0
방부제, 색소 및 향료	적량

[제제예 5] 헤어 린스

하기 표 17에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어 린스를 제조하였다.

성분	중량%
정제수	잔액 (To 100)
참조예 1의 인삼 다당체	0.5
참조예 2의 녹차 다당체	0.5
프로필렌글라이콜	2.0
세틸트리메칠암모늄클로라이드	1.0
세틸알코올	3.0
스테아릴알코올	3.0
미네랄오일	0.5
사이트릭애씨드	0.2
폴리디메칠실록산	1.0
방부제, 색소 및 향료	적량

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

인삼 다당체와 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 모발 또는 두피 상태 개선용 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유되는 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 중량비로 0.1~10:1의 비율로 혼합사용되는 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 비듬 방지용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 육모용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 백모 방지용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 두피 자극 완화용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 모발 부드러움 개선용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
인삼 다당체와 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 모발 또는 두피 상태 개선용 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유되는 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 중량비로 0.1~10:1의 비율로 혼합사용되는 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 물; 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기 용매; 및 상기 유기용매와 물의 혼합용매; 중에서 선택된 용매를 이용하여 38~42℃에서 3~24시간 동안 추출하여 제조된 인삼 추출물 또는 녹차 추출물로부터 수득한 것임을 특징으로 하는, 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 조성물은 비듬 방지용임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 조성물은 육모용임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 조성물은 백모 방지용임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제9항에 있어서, 상기 조성물은 두피 자극 완화용임을 특징으로 하는 약학 조성물.