JP5442442B2 - 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 - Google Patents
新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5442442B2 JP5442442B2 JP2009534896A JP2009534896A JP5442442B2 JP 5442442 B2 JP5442442 B2 JP 5442442B2 JP 2009534896 A JP2009534896 A JP 2009534896A JP 2009534896 A JP2009534896 A JP 2009534896A JP 5442442 B2 JP5442442 B2 JP 5442442B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- hemagglutinin
- vaccine
- nucleic acid
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 202
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 198
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims description 62
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims description 60
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims description 60
- 239000013598 vector Substances 0.000 title claims description 44
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 195
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 112
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 97
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 70
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 58
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 claims description 53
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 claims description 53
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 claims description 53
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 claims description 53
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 claims description 50
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 47
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 47
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 47
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 43
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 38
- 241000271566 Aves Species 0.000 claims description 36
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 31
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 claims description 29
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 21
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 20
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 16
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 13
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims description 12
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 claims description 12
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 claims description 11
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 9
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 6
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 5
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 claims description 3
- 208000009620 Orthomyxoviridae Infections Diseases 0.000 claims description 3
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 claims description 3
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 claims description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 65
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 59
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 40
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 40
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 40
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 26
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 21
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 20
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 20
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 19
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 17
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 15
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 14
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 14
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 11
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 11
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 11
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 11
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 11
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 8
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 7
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 7
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 6
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 6
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 241000283216 Phocidae Species 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 4
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 4
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 description 3
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 3
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 3
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 3
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical compound NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 2
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical class OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 2
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N Isobutene Chemical compound CC(C)=C VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N Isoprene Chemical compound CC(=C)C=C RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 101710141347 Major envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 2
- 108700001237 Nucleic Acid-Based Vaccines Proteins 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- 241000701093 Suid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M decanoate Chemical compound CCCCCCCCCC([O-])=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- -1 for example Chemical group 0.000 description 2
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-KVTDHHQDSA-N (2r,3r,4r)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULQISTXYYBZJSJ-UHFFFAOYSA-N 12-hydroxyoctadecanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)CCCCCCCCCCC(O)=O ULQISTXYYBZJSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFIMISVNSAUMBU-UHFFFAOYSA-N 2-(hydroxymethyl)-2-(prop-2-enoxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(CO)(CO)COCC=C RFIMISVNSAUMBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIHBGTRZFAVZRV-UHFFFAOYSA-N 2-Hydroxyoctadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)=O KIHBGTRZFAVZRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMHYVXGZRGOICM-AUYXYSRISA-N 2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC UMHYVXGZRGOICM-AUYXYSRISA-N 0.000 description 1
- JVTIXNMXDLQEJE-UHFFFAOYSA-N 2-decanoyloxypropyl decanoate 2-octanoyloxypropyl octanoate Chemical compound C(CCCCCCC)(=O)OCC(C)OC(CCCCCCC)=O.C(=O)(CCCCCCCCC)OCC(C)OC(=O)CCCCCCCCC JVTIXNMXDLQEJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWVRTSZDKPRPDF-UHFFFAOYSA-N 5-(piperidin-1-ylmethyl)-3-pyridin-3-yl-5,6-dihydro-2h-1,2,4-oxadiazine Chemical compound C1CCCCN1CC(N=1)CONC=1C1=CC=CN=C1 QWVRTSZDKPRPDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 description 1
- 102100022717 Atypical chemokine receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- BMHUVCXWEJMHQV-UHFFFAOYSA-N C(C(O)CO)CC(COC(C)COC(C)CO)O Chemical compound C(C(O)CO)CC(COC(C)COC(C)CO)O BMHUVCXWEJMHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 1
- 241001227713 Chiron Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 241000712469 Fowl plague virus Species 0.000 description 1
- 241000700662 Fowlpox virus Species 0.000 description 1
- 101000678879 Homo sapiens Atypical chemokine receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001033280 Homo sapiens Cytokine receptor common subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 241000188845 Porcine adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000485664 Protortonia cacti Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010073443 Ribi adjuvant Proteins 0.000 description 1
- 241000287219 Serinus canaria Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010092262 T-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 1
- NKVLDFAVEWLOCX-GUSKIFEASA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl] (4ar,5r,6as,6br,9s,10s,12ar)-10-[(2r,3r,4s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)CO[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1OC(=O)[C@]12CCC(C)(C)CC1C1=CCC3[C@@]([C@@]1(C[C@H]2O)C)(C)CCC1[C@]3(C)CC[C@@H]([C@@]1(C)C=O)O[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO2)O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)C(=O)NCCCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@](O)(CO)[C@H]1O NKVLDFAVEWLOCX-GUSKIFEASA-N 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940086737 allyl sucrose Drugs 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 230000027645 antigenic variation Effects 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108010029566 avian influenza A virus hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000003836 bluetongue Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000004475 gamma-delta t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000005571 horizontal transmission Effects 0.000 description 1
- 102000055647 human CSF2RB Human genes 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000017555 immunoglobulin mediated immune response Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 235000020130 leben Nutrition 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFFLGGQVNFXPEV-UHFFFAOYSA-N n-decene Natural products CCCCCCCCC=C AFFLGGQVNFXPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000000554 physical therapy Methods 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000223 polyglycerol Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 229940010310 propylene glycol dioleate Drugs 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000004250 tert-Butylhydroquinone Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
本発明は、医薬分野、好ましくは、感染症分野に関する。特に、本発明は、インフルエンザタンパク質、それらのタンパク質をコードする核酸分子およびベクターならびにワクチンに関する。特に、本発明は、インフルエンザ感染の治療用と予防用、さらにインフルエンザウイルスの種内または種間での伝染の予防用に、そのタンパク質、核酸分子、ベクターならびにワクチンのいずれかを使用することに関する。
インフルエンザ感染は、動物およびヒトにおいて重大な感染である。インフルエンザは、連続して抗原性の変更/改変を受け、動物保有宿主性を有するウイルスによって引き起こされる。したがって、新しい異常発生および世界的流行が将来起こる可能性があり、疾病の根絶を達成することは困難であろう。本分野においてインフルエンザウイルスは公知であり、たとえばP.Palese,Nature Medicine,vol.10,no.12,pp.S82〜S86,December 2004に、さらなる参考文献とともにより詳細に開示されている。つまり、インフルエンザAウイルスのゲノムは8つの一本鎖断片からなり、ウイルス粒子はその表面に2つの主な糖タンパク質を有する:赤血球凝集素(H)およびノイラミニダーゼ(N)である。少なくとも16の異なる赤血球凝集素(H1からH16)および9の異なるノイラミニダーゼ(N1からN9)亜型があり、インフルエンザウイルス間でかなりの抗原変異が存在している。
前世紀では、ブタはインフルエンザの世界的流行の重大なベクターであった。ブタ、ラクダ、およびアザラシ、好ましくはブタが、トリインフルエンザウイルスの「混合チャンバ」であり、それゆえに家禽からインフルエンザウイルスの天然保有宿主である哺乳類へ種のハードルを越えて潜在的な危険因子に相当する。これは、通常感染しやすい動物、たとえばブタで、確立された哺乳類(ブタ)インフルエンザウイルスおよびトリインフルエンザウイルスの両方の二重感染によって生じる。この二重感染はヒトまたはブタの世界的流行の要因となり得る新しい組換えウイルスを生み出す可能性がある。近年の兆候においては、しかしながら、哺乳類インフルエンザウイルスと現在のトリH5型の組換え体は、あまり感染力が高い組換え体を生み出さないであろうことが示されている。一方、トリインフルエンザウイルスは、ブタに感染することができ、自然発生変異体はブタに適応することができる。ウイルスは、ブタ(または他の哺乳類)個体群において水平伝播を引き起こすことができるとすぐに、重大なハードルを乗り越えることができると考えられる。
近年のインフルエンザワクチンには、サブユニットワクチン(Babaiら,Vaccine 1999,17(9-10):1223-1238;Crawfordら,Vaccine 1999,17(18):2265-2274;Johanssonら,Vaccine 1999,17(15-16):2073-2080)、弱毒化されたワクチン(Horimotoら,Vaccine 2004,22(17-18):2244-2247)、DNAワクチン(Watabeら,Vaccine 2001,19(31):4434-4444)および不活性化インフルエンザワクチン(Caoら,Vaccine 1992,10(4):238-242)が挙げられ、後者は、工業規模でもっとも広く使用されている(Lipatovら,J Virol 2004,78(17):8951-8959)。
現在、商業用ワクチンとして用いられているものはないが、サブユニットワクチン、組換え赤血球凝集素およびノイラミニダーゼ(Babaiら,Vaccine 1999,17(9-10):1223-1238;Crawfordら,Vaccine 1999,17(18):2265-2274;Johanssonら,Vaccine 1999,17(15-16):2073-2080)は、不活性化ワクチンの好適な代替品になる可能性がある。このようなワクチンの調製は、不活性化ワクチンよりも明らかに安全である。さらにサブユニットワクチンは体内のインフルエンザウイルス内部タンパク質への抗体応答を生み出さず、従って、ワクチン化された動物と感染した動物との間で区別をすることができる(Crawfordら,Vaccine 1999,17(18):2265-2274)。
バキュロウイルス/昆虫細胞系は、トリインフルエンザ亜型から単離された赤血球凝集素遺伝子を発現するのに用いられる(Babaiら,Vaccine 1999,17(9-10):1223-1238;Crawfordら,Vaccine 1999,17(18):2265-2274;Johanssonら,Vaccine 1999,17(15-16):2073-2080);Nweら,BMC Mircobiology 2006,6(16):doi:10.1186/1471-2180-6-16)。しかしながら、それらの組換えタンパク質はいくつかの場合も保護的でない、または、少なくともいくつかの種においては有効性がわずかに低くとどまるようである(Treanorら,Vaccine 2001,19:1732-1737)。
本発明の形態の前に、本明細書中で使用される際に、そして添付された請求の範囲において、単数形「a」、「an」および「the」は、文脈がはっきりと他に決定している場合を除いて複数形の言及を含むものとする。したがって、たとえば、「調製」の言及においては、複数のそのような調製を含む;「担体」の言及においては、1以上の担体および本分野においての当業者に公知であるものと同等のものを含む、などである。そのほかに定義しない場合において、本明細書中で使用される全ての技術および科学用語は、本発明が属する分野の通常用いられる能力を有するものによって共通に理解されるような同様の意味を有する。すべての記載された範囲と数値は、他に示した場合、または本分野の当業者によってそれ以外を意味することが場合を除いて、1〜5%で変動する可能性があり、それゆえに用語「約」は明細書において省略される。方法および材料は、本明細書中で説明されるものと同じまたは等価のものを、本発明のプラクティスまたは実験において用いることができるが、好ましい方法、機器および材料はこれから説明する。本明細書中で言及されるすべての刊行物は、本発明に関して用いられうる参考文献を公表することで物質、賦形剤、担体および方法論を説明し、開示する目的のために引用により本明細書中に取り込まれるものとする。本明細書中のいかなるものも本発明が先行発明によってそのような開示に先行する権利がないことを承認するものと解してはならない。
上述の技術的問題の解決は、本請求の範囲に特徴付けられる説明と形態によって達成される。
本発明は、インフルエンザウイルスのH5タンパク質であって、アミノ酸223Nおよび改変328K+を有し、H5タンパク質のアミノ酸位置の番号付けは、配列番号1に例示されるアミノ酸位置に従い、328K+は、H5タンパク質のアミノ酸位置328で第2リジン(K+)を挿入したことを意味するH5タンパク質に関する。好ましくは、そのようなH5タンパク質および本発明におけるさらなるH5タンパク質は、単離されたH5タンパク質である。驚くことに、上述の改変を有するH5タンパク質は、位置223および328/329で対応するアミノ酸を有さないH5タンパク質と比較して高い抗原性を有する。
本明細書中で用いられる用語「赤血球凝集素5(H5)」または「トリインフルエンザのH5」または「H5タンパク質」は、いずれかの自然発生するH5タンパク質およびいずれかのH5タンパク質の改変形態に制限されず、アミノ酸223Nおよび改変328K+を有するH5タンパク質の中でH5タンパク質の欠失、置換および/または挿入変異体を含むことを意味する。
さらなる形態において、本発明は、少なくともアミノ酸223Nおよび改変328K+を有し、標準赤血球凝集素抑制アッセイで抗原特性を示すいずれかのペプチド断片を意味するH5タンパク質の少なくとも一部に関するものでもあり、H5タンパク質のアミノ酸位置の番号付けは、配列番号1に例示されるアミノ酸位置に従い、そして、改変328K+はH5タンパク質のアミノ酸位置328で第2リジン(K+)が挿入されていることを意味する。
つまり、HIアッセイを行なってHA特異的抗体の存在を検出した。非相同H5N2ウイルス、A/chicken/Mexico/232/94を、HIアッセイで4つの赤血球凝集ユニット(4HAユニット)の濃度で用いた。U型底のマイクロタイタープレートで、PBSで2倍に段階希釈した血清を、次に同量ウイルスの4HAユニットを含む同量(25μL)と混合し、室温(約25℃)で30分間インキュベートした。PBSで0.5%の濃度にしたニワトリの赤血球細胞を、血清−ウイルス含有ウェルに添加し、室温で40分間インキュベートした。HIタイターは赤血球凝集反応の抑制が見られたもっとも高い血清希釈の逆数として定量した。
さらに本発明におけるH5タンパク質の抗原性部位は、H5タンパク質の欠失変異体に限定されるものではなく、以下を含む:
i.アミノ酸223Nを取り囲みかつ含むアミノ酸配列の少なくとも35、30、25、20、18、15、13、10、9、またはもっとも好ましくは8連続アミノ酸;および
ii.アミノ酸改変328K+を取り囲みかつ含むアミノ酸配列の少なくとも35、30、25、20、18、15、13、10、9、またはもっとも好ましくは8連続アミノ酸、および
iii.実施例2に説明する標準赤血球凝集素抑制アッセイにおける赤血球凝集抑制を示すH5タンパク質の該抗原性部位のいずれか。
さらに本発明における好ましいH5タンパク質は:
i.アミノ酸223Nおよび改変328K+を有する上述のそれらのいずれか;
ii.アミノ酸94N/223Nおよび改変328K+を有する上述のそれらのいずれか;
iii.アミノ酸223N、および改変328K+を有するトリ起源のいずれかのH5タンパク質で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
iv.アミノ酸94N/223Nおよび改変328K+を有するトリ起源のいずれかのH5タンパク質で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
v.アミノ酸155N/223Nおよび改変328K+を有するトリ起源のいずれかのH5タンパク質で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
vi.アミノ酸120N/155N/223Nおよび改変328K+を有するトリ起源のいずれかのH5タンパク質で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
vii.改変94N/223Nおよび改変328K+を有するいずれかのH5タンパク質;または
viii.改変94N/155N/223Nおよび改変328K+を有するいずれかのH5タンパク質;または
ix. 改変94N/120N/155N/223Nおよび改変328K+を有するいずれかのH5タンパク質;または
x. 改変223N、および改変328K+、および以下からなるの群から選択されるアミノ酸クラスターの1以上を有するいずれかのH5タンパク質:
a. aa 93−95: GNF
b. aa 123−125: SDH
c. aa 128−130: SSG
d. aa 138−140: GSS
e. aa 226−228: MDF
f. aa 270−272: EVE
g. aa 309−311: NKL;または
xi.アミノ酸223N、および改変328K+、および以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1以上を有するいずれかのH5タンパク質:
a. aa 93−95: GNF
b. aa 128−130: SSG
c. aa 138−140: GSS;または
xii.配列番号4のアミノ酸配列を有するいずれかのH5タンパク質
i.配列番号1、配列番号2、配列番号3;配列番号4;配列番号5または配列番号6のアミノ酸配列または;
ii.上述したような標準赤血球凝集素抑制における赤血球凝集抑制を構成するi)のポリペプチドに対する少なくとも85%配列相同性、より好ましくは少なくとも約90%配列相同性、さらにより好ましくは少なくとも約95%配列相同性、さらにより好ましくは少なくとも約97%配列相同性、さらにより好ましくは少なくとも約98%配列相同性、そしてさらにより好ましくは約99%配列相同性を有するいずれかのペプチド;または
iii.少なくともi)またはii)のペプチドのいずれかの35、30、25、20、18、15、13、10、9、またはもっとも好ましくは8連続アミノ酸を含むi)またはii)のポリペプチドのいずれかの抗原性部位;または
iv.アミノ酸36T、36K、83A、83T、83D、86A、86V、120N、120S、155N、155S、156A、156T、189R、189K、212K、212R、212E、223N、223N、または120N/155Nを有するi)、ii)またはiii)のいずれかのペプチド
v.以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1またはそれ以上を有するi)、ii)、iii)またはiv)のいずれかのペプチド
a. aa 93−95: GNF
b. aa 123−125: SDH
c. aa 128−130: SSG
d. aa 138−140: GSS
e. aa 226−228: MDF
f. aa 270−272: EVE
g. aa 309−311: NKL;または
vi.以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1またはそれ以上を有するi)、ii)、iii)またはiv)のいずれかのペプチド
a. aa 93−95: GNF
b. aa 128−130: SSG
c. aa 138−140: GSS。
表1 H5抗原
# 表1において示されたアミノ酸位置は配列番号1で定義された例示的な位置を言及する。言い換えると、表1のアミノ酸223は、配列番号1の配列のアミノ酸223を言及している。
- この位置でアミノ酸が参照配列と比較して可変であることを意味する。
i.上述の方法で改変したNCBI登録No.AAT65209、CAJ32556、ABC47656、CAF21874、CAF21870、AAC58998、AAC58997、AAC58996、AAC58994、AAC58993、AAC58992、AAC58991、AAC58990、AAC58995、AAS45134、AAN17270、AAN17269、AAN17268、AAN17267、AAN17266、AAN17265、AAN17264、AAN17263、AAN17262、AAN17261、AAN17260、AAN17259、AAN17257、AAN17256、AAN17255、AAN17254、AAA43083、AAA43082、AAB19079、BAE48696、BAE48693、BAE48696、BAE48695、BAE48694、BAE48692、BAE48691、BAE48690、BAE48689、BAE48688、BAE48687、BAE48686、BAE48685、BAE48684、BAE48683、AAC58999、ABC72082、AAV91149、AAP71993、AAP71992、AAP71991、AAP71990、AAP71989、AAP72011、AAP72010、AAP72009、AAP72008、AAP72007、AAP72006、AAP72005、AAP72004、AAP72003、AAP72002、AAP72001、AAP72000、AAP71999、AAP71998、AAP71997、AAP71996、AAP71995、AAP71994、AAF99718、ABF58847、AAG38534、AAC32102、AAC32099、AAL75847、AAC32101、AAC32098、AAC32088、AAC32078、AAR99628、AAC32100、AAM49555、AAL75843、AAL75839、AAD13573、AAD13568、AAF04720、AAF04719、AAC34263、AAR16155、AAD13574、AAD13570、AAD13575、AAD13572、AAD13569、AAD13567、AAD13566、AAK57506、AAG01225、AAG01215、AAG01205、AAG01195またはABD83813の配列を有するペプチドであり、それらの配列は上述した野生型配列の部分ではない改変223Nおよび328K+を含むことを意味する;または
ii.上述したような標準赤血球凝集素抑制における赤血球凝集素抑制を構成するi)のポリペプチドに対する少なくとも85%配列相同性、より好ましくは少なくとも約90%配列相同性、さらにより好ましくは少なくとも約95%配列相同性、さらにより好ましくは少なくとも約97%配列相同性、さらにより好ましくは少なくとも約98%配列相同性、そしてさらにより好ましくは約99%配列相同性を有するペプチド;
iii.アミノ酸36T、36K、83A、83T、83D、86A、86V、120N、120S、155N、155S、156A、156T、189R、189K、212K、212R、212E、263A、263T、または120N/155Nを有するi)またはii)のペプチドのいずれか;または
iv.以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1以上を有するi)、ii)またはiii)のそのようなペプチドのいずれか:
a. aa 93−95: GNF
b. aa 123−125: SDH
c. aa 128−130: SSG
d. aa 138−140: GSS
e. aa 226−228: MDF
f. aa 270−272: EVE
g. aa 309−311: NKL;または
v.以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1以上を有するi)、ii)またはiii)のそのようなペプチドのいずれか:
a. aa 93−95: GNF
b. aa 128−130: SSG
c. aa 138−140: GSS
i.アミノ酸223Nをコードするコード配列を包囲しかつ含むヌクレオチド配列の少なくとも105、90、75、60、48、45、39、30、27、または最も好ましくは24連続アミノヌクレオチド;および
ii.改変328K+をコードするコード配列を包囲しかつ含むヌクレオチド配列の少なくとも105、90、75、60、48、45、39、30、27、または最も好ましくは24連続アミノヌクレオチド;および
iii.実施例2で説明するような標準赤血球凝集素抑制アッセイにおいて赤血球凝集素抑制を示すH5タンパク質の該抗原部位のいずれか。
好ましくは、配列番号1または配列番号4をコードするアミノ酸223Nおよび/または328K+をコードするヌクレオチドのそれらを包囲するヌクレオチドである。
i.アミノ酸223Nおよび改変328K+をコードする上記のそれらのいずれか;
ii.アミノ酸94N/223Nおよび改変328K+をコードする上記のそれらのいずれか;
iii.アミノ酸223N、および改変328K+をコードするトリ起源のいずれかの核酸分子で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
iv.アミノ酸94N/223Nおよび改変328K+をコードするトリ起源のいずれかの核酸分子で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
v.アミノ酸155N/223Nおよび改変328K+をコードするトリ起源のいずれかの核酸分子で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
vi.アミノ酸120N/155N/223Nおよび改変328K+を有するトリ起源のH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子で、トリ起源とは、生成されたH5配列がトリインフルエンザウイルスタイプ5に感染した家禽からもともと単離したウイルス単離分に由来することを意味する;または
vii.改変94N/223Nおよび改変328K+を有するH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子;または
viii.改変94N/155N/223Nおよび改変328K+を有するH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子;または
ix. 改変94N/120N/155N/223Nおよび改変328K+を有するH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子;または
x. 改変223N、および改変328K+、および以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1以上を有するH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子:
a. aa 93−95: GNF
b. aa 123−125: SDH
c. aa 128−130: SSG
d. aa 138−140: GSS
e. aa 226−228: MDF
f. aa 270−272: EVE
g. aa 309−311: NKL;または
xi.アミノ酸223N、および改変328K+、および以下からなる群から選択されるアミノ酸クラスターの1以上を有するH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子:
a. aa 93−95: GNF
b. aa 128−130: SSG
c. aa 138−140: GSS
xii.配列番号4のアミノ酸配列を有するH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子。
インフルエンザウイルスのH5タンパク質のコード配列を含む核酸配列における上述の改変のいずれかを導入するための方法は、本分野において公知である。本発明における全インフルエンザウイルスのゲノム配列は、たとえば、US6,951,754に開示された方法とさらなる先行文献とに従って改変できる。
さらなる実施形態において、本発明は、上述した核酸分子のいずれかを含むベクターにも関する。言い換えると、本発明は、いずれかの上述したH5タンパク質またはそれの一部を含むベクターに関する。好ましくは、該ベクターは発現ベクターであり、上述したH5タンパク質またはその一部のいずれかを発現することができる。本発明におけるベクターは、バクテリア、酵母または動物細胞にインビボまたはインビトロでトランスフェクションまたはインフェクションすることに適する。
他の局面において、本発明は、大量の組換えH5タンパク質を製造するおよび/または回収する方法を提供する:i)配列をコードしているH5DNAを含む組換えウイルスベクターで培養中の感受性細胞を感染させ(H5タンパク質は、組換えウイルスベクターによって発現される)、そしてii)その後、細胞培養からH5タンパク質を回収する。大量のH5タンパク質とは、制限されるものではないが、約20μg/mL細胞培養より多く、好ましくは、約25μg/mLより多く、さらに好ましくは、約30μg/mLより多く、さらにより好ましくは、約40μg/mLより多く、さらに好ましくは、約50μg/mLより多く、さらにより好ましくは、約60μg/mLより多く、さらにより好ましくは、約80μg/mLより多く、さらにより好ましくは、約100μg/mLより多く、さらにより好ましくは、約150μg/mLより多く、もっとも好ましくは、約190μg/mLより多いことを意味する。
好ましい形態において、H5タンパク質は、H5タンパク質を発現する全(つまり無傷の)SF+細胞を採取することによって回収される。
好ましい細胞は、H5DNAを含みかつH5タンパク質を発現する適したウイルスベクターで感染させた感受性細胞である。好ましくは細胞が昆虫細胞で、より好ましくはそれらが商標SF+昆虫細胞(プロテインサイエンスコーポレイション、メリデン、CT)として販売されている昆虫細胞を含む。好ましい細胞培養は、約0.3〜2.0×106細胞/mL、より好ましくは約0.35〜1.9×106細胞/mL、より好ましくは約0.4〜1.8×106細胞/mL、より好ましくは約0.45〜1.7×106細胞/mL、そして最も好ましくは約0.5〜1.5×106細胞/mLの間の細胞数で行なわれる。
適した成長培地も、本分野における当業者によって好ましい成長培地はExcell420(JRH バイオサイエンシーズ,Inc.,Lenexa,KS)などのような血清フリー昆虫細胞培地と決定することができる。
H5DNA配列を含む組換えウイルスベクターは、感受性細胞の感染に用いた場合、約0.03〜1.5の間、より好ましくは約0.05〜1.3の間、さらにより好ましくは0.09〜1.1の間、もっとも好ましくは約0.1〜1.0の間の好ましい感染多重度(MOI)を有する。好ましくは、上述のMOIは細胞培養液の1mLに関する。好ましくは、本明細書中で説明される方法は、H5DNAを含み、約0.03〜1.5の間、より好ましくは約0.05〜1.3の間、さらにより好ましくは0.09〜1.1の間、もっとも好ましくは約0.1〜1.0の間のMOI(感染多重度)を有するH5タンパク質を発現する組換えウイルスベクターと、0.35〜1.9×106細胞/mL、より好ましくは約0.4〜1.8×106細胞/mL、さらにより好ましくは約0.45〜1.7×106細胞/mL、そしてもっとも好ましくは約0.5〜1.5×106細胞/mLでの感染を含む。
したがって、本発明の1つの局面は、好ましくは上述した量で、H5タンパク質を生産し、および/または、回収する方法を提供し、i)上記で定義したMOIで組換えウイルスベクターと培養した感受性細胞(上記参照)の感染を可能とする、ii)組換えウイルスベクターによってH5タンパク質を発現する、iii)その後感染後5〜8日後得られる細胞および/または10%未満にまで生存能力が減少した細胞からH5タンパク質を回収する。好ましくは、組換えウイルスベクターは、配列をコードしているH5DNAを含む組換えバキュロウイルスであり、細胞はSF+細胞である。さらに、培養において、感染後の期間、雑菌混入の巨視的および微視的な兆候、または細胞形態学に特殊な変化を定期的に調べることが好ましい。雑菌混入している培養は破棄しなければならない。
「免疫原性または免疫学性組成物」は、細胞宿主での免疫学的応答および/または化合物または興味深いワクチンに対する抗体媒介免疫応答を引き出す少なくとも1つの抗体を含む物質の組成物を言及する。通常、「免疫学的応答」は、制限されないが、1以上の以下の要素を含む:注目する組成物またはワクチンに含まれる抗原に対する抗体の生産または活性化、B細胞、ヘルパーT細胞、サプレッサーT細胞、および/または細胞傷害性T細胞、およびまたはガンマ−デルタT細胞。好ましくは、新しい感染に対する耐性が高まる、および/または、疾病の医学的重症度が緩和するように、宿主は治療的または防御的いずれかの免疫学的応答を示すだろう。そのような防御は、感染宿主、短期回復時間および/または感染宿主におけるより低いウイルスタイターによって通常に示される症状の緩和または欠如のいずれかによって現れるだろう。
したがって、本発明は、i)上記で定義したMOIで組換えウイルスベクターと培養中に多くの感受性細胞(上記参照)の感染を可能とする、ii)組換えウイルスベクターによってH5タンパク質を発現する、iii)その後感染後5〜8日後得られる細胞および/または10%未満にまで生存能力が減少した細胞からH5タンパク質を回収し、そしてiv)組換えウイルスベクターを不活性化することによって、好ましくは上述した量で、H5タンパク質を生産し、および/または、回収する方法を提供する。
不活性化の後に、サンプルにおける組換えH5タンパク質の相対量を様々な方法で定量することができる。好ましい量の定量方法は、SDS−PAGEデンシトメトリー法、ELISA、および臨床結果でワクチンの公知の量を関連付ける動物ワクチン研究(血清学など)を含む。SDS−PAGEは定量に利用する場合、組換えH5タンパク質の未知量を含むサンプル材料をゲルに流し、一緒に組換えH5タンパク質の様々な既知量を含むサンプルを流す。次に標準曲線を、既知サンプルをベースにして作成し、未知サンプルにおける組換えH5の量はこの標準曲線と比較して定量することができる。ELISAは一般的に抗原定量の業界標準として理解されており、それらは定量に適している。
さらなる局面において、本発明は一般的にワクチンまたは医薬組成物に関し、以下を含む:
i.本明細書中で記載した1以上のH5タンパク質;
ii.本明細書中で記載した1以上のいずれかのH5タンパク質をコードする核酸分子;および/または
iii.いずれかの核酸分子を含み、かつ上述したいずれかのH5タンパク質をコードしている上述した1以上のベクター;および
iv.医薬的に許容される担体および/または賦形剤。
上述した用語「医薬組成物」「医薬/ワクチン組成物」は、制限はされないが、感染を減弱または予防するためのワクチン、感染の治療および緩和のための物質の組成物を含む。
核酸ベースのワクチン、好ましくはインフルエンザ赤血球凝集素をコードするcDNAは、たとえばDeckら, Vaccine 1997; 15(1):71-78; Ulmerら, Science 1993; 259:1745-1749; Ulmerら, Vaccine 1994;12(16):1541-1544に開示されている。それらの方法のいずれかは、核酸ベースのワクチン、好ましくは上述したインフルエンザH5タンパク質をコードするcDNAワクチンの製造のために用いられる。
当業者には、抗原と一緒に該組成物/ワクチンに含まれうる追加成分がわかる(たとえばRemington's Pharmaceutical Sciences. (1990). 18th ed. Mack Publ., Easton参照)。専門家は、公知の注入可能で生理学的に許容可能である殺菌溶液を用いることができる。使用準備済の溶液を調製するために、水性等張液、たとえば生理食塩水または血漿タンパク質溶液はすぐに手に入れることができる。医薬組成物/ワクチンは、たとえばキットの部分として、殺菌条件で用いる前に直接公知の注入溶液を再構築できる凍結乾燥物(lyophylisates)または乾燥調製物として存在することもできる。
希釈剤は、水、生理食塩水、デキストロース、エタノール、グリセロールなどを含むことができる。等張剤は、塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトールおよびラクトースを特に含むことができる。安定剤は、アルブミンおよびエチレンジアミン四酢酸のアルカリ塩を特に含むことができる。
本明細書中で用いられる「アジュバント」は、水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウム、サポニン、たとえばQuil A,QS−21(ケンブリッジバイオテックInc.,ケンブリッジMA)、GPI−0100(ガレニカ(Galenica)ファーマスーティカルズ,Inc.,バーミングハム,AL)、油中水エマルション、水中油エマルション、水中油中水エマルションを含むことができる。
さらに、SPTエマルションは、”Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach” M. PowellおよびM. Newman出版, Plenum Press, 1995の147ページに説明されており、エマルションMF59は、同じ本の183ページに説明されている。
好ましくは、アジュバントは、1用量につき約100μg〜約10mgの量添加される。さらに好ましくは、アジュバントは、1用量につき約100μg〜約10mgの量添加される。さらに好ましくは、アジュバントは、1用量につき約500μg〜約5mgの量添加される。さらに好ましくは、1用量につきアジュバントは約750μg〜約2.5mg添加される。もっとも好ましくは、アジュバントは1用量につき約1mg添加される。
i.本明細書中で説明されたインフルエンザウイルスのH5タンパク質のいずれか1つの治療学的な有効量で、前記H5タンパク質が、アミノ酸223Nおよび328K+を有し、H5タンパク質のアミノ酸位置の番号付けは、配列番号1に例示されるアミノ酸位置に従い、328K+は、H5タンパク質のアミノ酸位置328で第2リジン(K+)を挿入したことを意味する;および
ii.上述の医薬的に許容されるアジュバント。
a)エマルシゲン(EMULSIGEN(登録商標))、水中油エマルション(o/w);
b)エマルシゲン−D(EMULSIGEN−D(登録商標)、水中油(o/w)とジメチルジオクタデシルアンモヌム(dimethyldioctadecylammonum)ブロマイド(DDA);
c)ポリゲン、コポリマー
d)エマルシゲン−P(EMULSIGEN−P(登録商標))、水中油(o/w)と専売免疫刺激剤
e)カルビゲン、コポリマー
f)エマルシゲン−75(EMULSIGEN−75(登録商標))、水中油(o/w)と架橋ポリマーとを含む二重アジュバント
g)ISA 70は、油中水(w/o)
もっとも好ましくは、アジュバントはエマルシゲン、エマルシゲン−D、エマルシゲン−P、エマルシゲン−75、エマルシゲンおよびエマルシゲン−Pからなる群から選択されるエマルシゲンベースのアジュバントのような水中油エマルションである。
本明細書中で用いられる用語「抗原」は、限定されないが、免疫グロブリン(抗体)またはT細胞抗原受容体のような免疫系の抗原認識分子と特異的に相互作用することができ、該抗原が投与される宿主において該抗原に対する免疫応答を誘発、活性化、または刺激することのできるペプチド、ポリペプチド、グリコペプチド、またはポリサッカライドを意味する。用語「抗原」は、核酸分子、好ましくはDNA−またはRNA分子で、それぞれは、前記核酸分子にコードされた抗原に対して免疫応答を誘発、活性または刺激する免疫グロブリン(抗体)またはT細胞抗原受容体のような免疫系の抗原認識分子と特異的に相互作用できるペプチド、ポリペプチドまたは糖ペプチドをコードする核酸分子をもいう。本発明において用いられる医薬組成物の調製のために使用される抗原は、微生物または微生物の抗原性部位および/または調製物である。この関連において、本明細書中で用いられる用語「免疫付与」は、限定されないが、免疫応答を生じさせることおよびその強化を意味する。用語「免疫応答」は、すでに上述した。
具体的な実施形態において、ワクチンは、コレラ毒素Bまたはコレラ毒素A/Bキメラのようなコレラ毒素と混合されてまたは結合されて投与することができる(chimera (Hajishengallis , J Immunol., 154:4322-32, 1995; Jobling and Holmes, Infect Immun., 60:4915-24, 1992)。コレラ毒素Bサブユニットの使用をベースとする粘膜ワクチンは開示されている(LebensとHolmgren, Dev Biol Stand 82:215-27, 1994)。その他の形態において、熱不安定性エンテロトキシン(LT)との混合は、粘膜ワクチンに調製することができる。
他の局面において、本発明は、上述した医薬/ワクチン組成物を調製する方法に関し、好ましくは、上述した組換え体、H5発現バキュロウイルスを含むワクチンを製造する方法に関する。概して、この方法は、構築物をウイルスにトランスフェクトする工程を含み、該構築物は、以下を含む:i)本明細書に記載した組み換えH5cDNA、ii)増殖培地中の感染細胞を前記トランスフェクトした細胞に感染させる工程、iii)本明細書に記載した組換えH5タンパク質をウイルスに発現させる工程、iv)培地から発現したタンパク質を回収する工程、v)そして、適したアジュバントおよび/または他の医薬的に許容される担体と発現されたH5タンパク質を混合することで組成物を調製する工程。
さらに、本発明のワクチン組成物は、希釈剤、等張剤、安定剤、および/または保存剤も含むことができる。希釈剤は、水、生理食塩水、デキストロース、エタノール、グリセロールなどを含むことができる。等張剤は、無機または有機塩、たとえば塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトールおよびラクトース、特にサッカライド、トレハロース、マンニトール、サッカロースを含むことができる。安定剤は、アルブミンおよびエチレンジアミン四酢酸のアルカリ塩を含むことができる。好ましいアジュバントは、上述したとおりである。
本明細書中で説明されたH5タンパク質、H5タンパク質をコードしている核酸分子、本明細書中で説明しているH5タンパク質のいずれかをコードする核酸分子を含むベクターおよびH5タンパク質、核酸分子またはベクターのいずれかを含む医薬/ワクチン組成物のいずれかは医薬として使用でき、好ましくはインフルエンザウイルス、もっとも好ましくはインフルエンザAウイルスによって引き起こされた感染の治療および予防のために使用することができる。H5タンパク質はこのようにして得られ、H5タンパク質のいずれかをコードする核酸分子、H5タンパク質のいずれかをコードした核酸分子を含むベクター、および本明細書中で説明されたH5タンパク質、核酸分子またはベクターのいずれかを含む医薬/ワクチン組成物は、獣医薬と同様にヒトの治療および予防用に用いることができる。獣医薬として用いる場合、家禽、好ましくはトリ、ニワトリ、アヒル、七面鳥および同等の哺乳類、好ましくはブタ、ウシ、ウマ、オットセイ(seal)、ラクダ、イヌ、ネコ、ハムスター、マウスなどが好ましい。
さらに、本明細書中で説明したようにこのようにして得られるH5タンパク質、いずれかのH5タンパク質をコードする核酸分子、いずれかのH5タンパク質をコードするいずれかの核酸分子を含むベクターは、医薬組成物の調製に用いることができる。上述のように、その医薬組成物/ワクチン組成物は、ヒトの治療および/または予防に用いることができ、同様に動物、たとえば家禽、好ましくはトリ、ニワトリ、アヒル、七面鳥および同等の哺乳類、好ましくはブタ、ウシ、ウマ、オットセイ、ラクダ、イヌ、ネコ、ハムスター、マウスなどに用いることができる。
さらなる局面において、本発明は、インフルエンザウイルスの治療または予防のための方法にも関し、該方法は、本明細書で説明したようにその治療が必要な対象に対するH5タンパク質の治療学的な有効量の投与を含む。さらに、本発明は、インフルエンザウイルス感染の治療または予防の方法に関し、該方法は、本明細書中で説明したようにその治療が必要な対象に対してH5タンパク質をコードしたH5核酸分子またはベクターを治療学的に有効量投与することを含む。さらに、本発明は、インフルエンザウイルス感染の治療または予防の方法に関し、該方法は、本明細書で説明したように、その治療が必要な対象にH5タンパク質、核酸分子、またはベクターを含むワクチンを治療学的に有効量投与することを含む。このような必要な対象は、ヒトと同様に、動物、好ましくは家禽さらに好ましくはトリ、ニワトリ、アヒル、七面鳥または哺乳類、好ましくはブタ、ウシ、ウマ、オットセイ、ラクダ、イヌ、ネコ、ハムスター、マウスなどとすることができる。
好ましくは、本明細書中で説明されたいずれかのH5タンパク質、いずれかのH5タンパク質をコードした核酸分子またはベクター、または医薬/ワクチン組成物は、鳥類、ブタまたはヒトインフルエンザウイルスまたはそれらの組合せまたはハイブリッドによって引き起こされる。
さらなる形態において、パーツのキットは、少なくとも1以上のトリまたは哺乳類病原体の抗体および医薬、さらなる抗原のヒトまたは獣医学的使用の情報表示を含む。
H5HA 抗原を含む組換えバキュロウイルスは、以下のようにして作り出した。:H5HA(配列番号2)のコード配列を化学的に合成し、トランスファーベクターpVL1392(BD バイオサイエンスファーミンゲン(Biosciences Pharmingen)、サンディエゴ、CA)にサブクローン化した。H5HA MutK+(配列番号4)は、オリゴヌクレオチドプライマーおよびクイックチェンジ(QuikChange(登録商標))サイトダイレクト変異生成キット(ストラタジーン、ラ ホーヤ、CA)を用いて作り出し、トランスファーベクターpVL1392(BD バイオサイエンスファーミンゲン、サンディエゴ、CA)にサブクローンした。H5HA抗原(配列番号2)およびH5HA MutK+(配列番号4)をコードした遺伝子を含むpVL1392プラスミドを、その際、ダイアモンドバック(DiamondBac(登録商標))(シグマ)バキュロウイルスDNAとSf9昆虫細胞(BDバイオサイエンスファーミンゲン)に共トランスフェクションし、配列番号2にコードされた遺伝子H5HAおよび配列番号4にコードされたH5HA mutK+を含む組換えバキュロウイルスを作り出した。H5HA(配列番号2)およびH5HA MutK+(配列番号4)をコードする遺伝子を含む組換えバキュロウイルスをプラーク精製して、そして、マスターシードウイルス(MSV)は、SF+セルラインで繁殖し、分注し、−70℃で保存した。昆虫細胞は上述したように作り出したH5HA抗原(配列番号2)およびH5HA MutK+(配列番号4)抗原を発現するMSVまたはワーキングシードウイルスに感染させ、間接蛍光抗体アッセイまたはウエスタンブロットでポリクローナル血清およびモノクローナル抗体によって検出した。
バキュロウイルスベースの発現システムによって昆虫細胞で発現したクルードな全細胞の培養物のH5HAタンパク質およびH5HA MutK+を採取した。バキュロウイルスを約32および39℃の間で、72〜96時間、5mM環化バイナリーエチレンイミン(cyclized binary ethylenimine)(BEI)(最終濃度)の存在下で不活性化した。不活性化が完了したのち、5mMの最終濃度で0.3Mのチオ硫酸ナトリウムを添加し、残留BEIを中和した。中和後、様々なアジュバントを添加し、以下のワクチン/医薬化合物を生み出した。
1.はじめに
本検討の目的は、実験ワクチン組換えH5赤血球凝集素(HA)抗原のクルード抽出物がブタにおける赤血球凝集素抑制(HI)タイターを誘導する力を測定することであった。様々なアジュバントはH5HA抗原で評価した。
本検討において評価したHA H5プロトタイプは、従来のH5HAまたはH5HA MutK+のいずれかの抗原を含む。従来のH5HA MutK+は、S120N、D150N、S223Nおよび328mutK+での3つの特異的アミノ酸変更を含むように設計された従来のH5HAからなるのに対して、従来のH5HAは、A/duck/China/E319−2/03に由来した。H5HA MutK+は、アミノ酸94Nも含む。H5HA MutK+における特定のアミノ酸変更は、A/HK/213/03のHAとより密接に類似しているH5HAを生じる。A/HK/213/03のH5HAのアミノ酸組成は、H5HAの抗体認識に役立つものとこれまで考えられている。
表1.検討概説
子ブタは、検討の開始時に3週±5日齢だった。子ブタは、検討の開始時には臨床的に健康だった。血液サンプルは検討0日、21日および35日目に採取した。
全ての検討動物は、相対的な健康状態に関して検討1日から35日まで毎日調査した。それぞれのワクチン接種から7日間、注射部位を毎日調べ、可視反応を記録した。検討35日目の動物の最終段階で、全ての動物は無痛的に安楽死させた。
実施例2で説明したワクチン501から514をブタワクチン検討に用いた。
4.赤血球凝集素抑制アッセイ
0日目および21日目にブタをH5HA含有プロトタイプでワクチン接種した。ブタ血清を0、21、35日目に赤血球凝集素抑制(HI)アッセイによる評価用に採取した。HIアッセイを行なってHA特異的抗体の有無を検出した。非相同H5N2ウイルス、A/chicken/Mexico/232/94をHIアッセイで4つの赤血球凝集ユニット(4HAユニット)の濃度で用いた。U型底のマイクロタイタープレートで、PBSで2倍に段階希釈した血清を、次に同量ウイルスの4HAユニットを含む同量(25μL)と混合し、室温(約25℃)で30分間インキュベートした。PBSで0.5%の濃度にしたニワトリの赤血球細胞を、血清−ウイルス含有ウェルに添加し、室温で40分間インキュベートした。HIタイターは赤血球凝集反応の抑制が見られた最も高い血清希釈の逆数として決定した。
HIテストは、0日および21日目にメキシコ政府公式H5N1(A/chicken/Mexico/232/94)[4HAユニット]1×1mLのワクチン接種処方計画を用いた。
BIV H5(インフルエンザAウイルス(A/duck/China/E319−2/03(H5N1)由来)
BIV H5 K+(S120N、D155N、S223Nおよび追加された328K+を含む変異BIV H5)
1.はじめに
この検討の目的は、組換えH5MutK+赤血球凝集素(H5HA MutK+)抗原のクルード抽出物を含む実験ワクチンのニワトリにおける赤血球凝集抑制(HI)タイターを誘導する能力を決定することであった。さらに、不活性化ボルバック(Volvac(登録商標))AI(ベーリンガーインゲルハイムヴェトメディカ、メキシコ)および、従来の組換えH5抗原(H5HA)をコントロールとして用いた。その上、さまざまなアジュバントをH5HA抗原とともに評価した。
2.検討設計
1または10日齢でSPFトリ(15−25)に対して首の後ろで皮下経路によってさまざまな実験ワクチンを0.5mlにてそれぞれ独立してワクチン接種した;全てのトリは実験の間アイソレーターで維持した。えさと水とは自由に与えた。ワクチン接種から31または32日後にH5N2高病原性トリインフルエンザ型で攻撃した。
血清サンプルは、ワクチン接種から15、30日後にトリを頸静脈から採血して得た。得られた血清は、赤血球凝集抑制(HI)テストを行なうまで4℃で保存し、実施例3に説明したように、抗体タイターを得た。
4つの異なる調製物を別々に評価した:
1.従来のオイルエマルション H5HA Mut k+:H5HA mutk+抗原は、ベーリンガーインゲルハイムヴェトメディカ製造物に基づいたオイルエマルション(フロイント不完全アジュバント)で調製された
2.セピック(Seppic)H5HA Mut k+:H5HA mutk+抗原は、サプライヤーの推奨に基づいて非従来性アジュバント(ISA206、W/O/W、セピックから)で調製した。
3.従来のオイルエマルション:H5HA抗原は、ベーリンガーインゲルハイムヴェトメディカ製造物に基づいたオイルエマルション(フロイント不完全アジュバント)で調製された
4.セピック(Seppic)H5HA:H5HA抗原は、サプライヤーの推奨に基づいて非従来性アジュバント(ISA206、W/O/W、セピックから)で調製した。
トリインフルエンザベーリンガーインゲルハイムヴェトメディカオイルエマルションワクチンは、コントロールVolvac(登録商標)AI(ベーリンガーインゲルハイムヴェトメディカ、メキシコ)を用いた。
ワクチン接種したニワトリおよびワクチン接種していないニワトリに対してH5N2の攻撃ウイルスのトリあたり106.7CEIDを含む0.2mlを鼻腔経路接種で接種することで攻撃をした。接種して10日後に生き残った全てのニワトリを動物ラボ手順に従って安楽死させた。
Claims (23)
- インフルエンザウイルスの赤血球凝集素H5タンパク質であって、
配列番号1のアミノ酸配列を含み、配列番号1の位置223のアミノ酸がアスパラギンで置換され、位置328のアミノ酸に第二のリジンが挿入され、位置155のアミノ酸がアスパラギンに置換され、さらにアミノ酸位置120にアスパラギンを有する、前記赤血球凝集素H5タンパク質。 - 配列番号4のアミノ酸配列を含む請求項1記載の赤血球凝集素H5タンパク質。
- トリインフルエンザウイルスを起源とする請求項1または2記載のH5タンパク質。
- 請求項1〜3のいずれか1つに記載の赤血球凝集素H5タンパク質をコードした核酸分子。
- 請求項4に記載の核酸分子を含むベクター。
- a.請求項1〜3のいずれか1つに記載の赤血球凝集素H5タンパク質、請求項4に記載の核酸分子、または請求項5に記載のベクター、および
b.医薬的に許容されるキャリアおよび/または賦形剤
を含むワクチン。 - 賦形剤が1以上のアジュバントである請求項6に記載のワクチン。
- アジュバントが水中油アジュバントである請求項7に記載のワクチン。
- ワクチンが1以上の抗原を含む請求項6〜8のいずれか1つに記載のワクチン。
- 抗原が家禽または哺乳類の病原体の抗原である請求項9に記載のワクチン。
- 追加の抗原としてインフルエンザウイルスの赤血球凝集素H3、H7またはH9を含む請求項10に記載のワクチン。
- 請求項1〜3のいずれか1つの赤血球凝集素H5タンパク質を製造する方法であって、以下の工程を含む方法:
a. 赤血球凝集素H5タンパク質をコードする核酸を単離または増幅する工程、
b. 発現ベクターで前記赤血球凝集素H5タンパク質をコードする核酸のクローニングをする工程、
c. 前記赤血球凝集素H5タンパク質を発現する工程。 - 発現ベクターが組換えバキュロウイルスである請求項12に記載の方法。
- H5タンパク質が昆虫細胞で発現される請求項12または13に記載の方法。
- 請求項1〜3のいずれか1つに記載の赤血球凝集素H5タンパク質を含むワクチンを製造する方法であって、以下の工程を含む方法:
a.請求項1〜3のいずれか1つに記載の赤血球凝集素H5タンパク質を得る工程、
b.工程a)の赤血球凝集素H5タンパク質を医薬的に許容されるキャリアおよび/または賦形剤と混合する工程。 - 請求項4に記載の赤血球凝集素H5核酸または請求項5に記載のベクターを含むワクチンを製造する方法であって、以下の工程を含む方法:
a.請求項4に記載の赤血球凝集素H5核酸分子または請求項5に記載のベクターを得る工程、
b.工程a)の赤血球凝集素H5核酸分子またはベクターを医薬的に許容されるキャリアおよび/または賦形剤と混合する工程。 - 獣医薬として使用するための請求項7〜11のいずれか1つに記載のワクチン。
- ウイルスインフルエンザによって引き起こされる感染の予防または治療用医薬組成物の調製のための請求項1〜3のいずれか1つに記載のH5タンパク質の使用。
- ウイルスインフルエンザによって引き起こされる感染の予防用または治療用医薬組成物の調製のための請求項4に記載の核酸分子の使用。
- ウイルスインフルエンザによって引き起こされる感染の予防用または治療用医薬組成物の調製のための請求項5に記載のベクターの使用。
- ウイルスインフルエンザ感染が鳥類、ブタまたはヒトインフルエンザウイルスまたはそれらの組合せまたはハイブリッドによって引き起こされる請求項18〜20のいずれかに記載の方法。
- 以下を含むキット:
a.請求項1〜3のいずれかに1つに記載のH5タンパク質、請求項4に記載の核酸分子、請求項5に記載のベクター、または請求項6〜11のいずれか1つに記載のワクチン;および
b.インフルエンザウイルスによって引き起こされる感染の治療または予防のためのa)のH5タンパク質、核酸分子、ベクターまたはワクチンの使用法を記載したパッケージリーフレット。 - 少なくとも1以上の家禽または哺乳類病原体の追加の抗原を含む請求項22記載のキット。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US86314206P | 2006-10-27 | 2006-10-27 | |
US60/863,142 | 2006-10-27 | ||
US11/923,326 | 2007-10-24 | ||
US11/923,326 US8202967B2 (en) | 2006-10-27 | 2007-10-24 | H5 proteins, nucleic acid molecules and vectors encoding for those, and their medicinal use |
PCT/US2007/082699 WO2008052173A2 (en) | 2006-10-27 | 2007-10-26 | Novel h5 proteins, nucleic acid molecules and vectors encoding for those, and their medicinal use |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013165132A Division JP2014012008A (ja) | 2006-10-27 | 2013-08-08 | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010508030A JP2010508030A (ja) | 2010-03-18 |
JP2010508030A5 JP2010508030A5 (ja) | 2010-12-16 |
JP5442442B2 true JP5442442B2 (ja) | 2014-03-12 |
Family
ID=39325469
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009534896A Active JP5442442B2 (ja) | 2006-10-27 | 2007-10-26 | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 |
JP2013165132A Withdrawn JP2014012008A (ja) | 2006-10-27 | 2013-08-08 | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013165132A Withdrawn JP2014012008A (ja) | 2006-10-27 | 2013-08-08 | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8202967B2 (ja) |
EP (1) | EP2086576B8 (ja) |
JP (2) | JP5442442B2 (ja) |
KR (2) | KR20150041200A (ja) |
AU (1) | AU2007308869B2 (ja) |
BR (1) | BRPI0718183B8 (ja) |
CA (1) | CA2664914C (ja) |
CO (1) | CO6210831A2 (ja) |
DK (1) | DK2086576T3 (ja) |
ES (1) | ES2391123T3 (ja) |
MX (1) | MX2009004243A (ja) |
MY (1) | MY150226A (ja) |
PL (1) | PL2086576T3 (ja) |
PT (1) | PT2086576E (ja) |
RU (1) | RU2479589C2 (ja) |
SG (1) | SG176419A1 (ja) |
SI (1) | SI2086576T1 (ja) |
WO (1) | WO2008052173A2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014012008A (ja) * | 2006-10-27 | 2014-01-23 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TW200731986A (en) * | 2005-10-28 | 2007-09-01 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Use of vaccines for the treatment/prevention of the transmission of pathogens |
ES2559421T3 (es) | 2007-03-14 | 2016-02-12 | Takeda Vaccines, Inc. | Purificación de partículas similares a virus |
WO2010063033A2 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-03 | Merial Limited | Recombinant avian influenza vaccine and uses thereof |
CN102946900A (zh) * | 2010-03-11 | 2013-02-27 | 免疫设计公司 | 用于大流行流感的疫苗 |
CA2813078A1 (en) | 2010-10-04 | 2012-04-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Hemagglutinin polypeptides, and reagents and methods relating thereto |
AR088028A1 (es) * | 2011-08-15 | 2014-05-07 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Proteinas h5, de h5n1 para un uso medicinal |
JOP20130186B1 (ar) | 2012-06-22 | 2021-08-17 | Takeda Vaccines Montana Inc | تنقية الجزيئات الشبيهة بالفيروسات |
WO2014127825A1 (en) * | 2013-02-21 | 2014-08-28 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | H5 proteins of h5n1 influenza virus for use as a medicament |
JP2015015931A (ja) * | 2013-07-12 | 2015-01-29 | 株式会社Umnファーマ | ウイルス様粒子を含む培養物の製造方法 |
JOP20190088A1 (ar) | 2016-10-21 | 2019-04-21 | Us Agriculture | نواقل مؤتلفة للتعبير عن مولدات مضاد فيروس انفلونزا الطيور و استخداماتها |
JP7337921B2 (ja) * | 2018-11-06 | 2023-09-04 | ベーリンガー インゲルハイム フェトメディカ ゲーエムベーハー | 鳥インフルエンザウイルスh5亜型に対する免疫原性組成物 |
CN117229370A (zh) * | 2022-06-08 | 2023-12-15 | 中科南京生命健康高等研究院 | H5n6禽流感广谱性疫苗的开发及其应用 |
Family Cites Families (62)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US382425A (en) | 1888-05-08 | Brandt | ||
US2909462A (en) | 1955-12-08 | 1959-10-20 | Bristol Myers Co | Acrylic acid polymer laxative compositions |
US4769331A (en) | 1981-09-16 | 1988-09-06 | University Patents, Inc. | Recombinant methods and materials |
US4769330A (en) | 1981-12-24 | 1988-09-06 | Health Research, Incorporated | Modified vaccinia virus and methods for making and using the same |
US5338683A (en) | 1981-12-24 | 1994-08-16 | Health Research Incorporated | Vaccinia virus containing DNA sequences encoding herpesvirus glycoproteins |
US4722848A (en) | 1982-12-08 | 1988-02-02 | Health Research, Incorporated | Method for immunizing animals with synthetically modified vaccinia virus |
US5505941A (en) | 1981-12-24 | 1996-04-09 | Health Research, Inc. | Recombinant avipox virus and method to induce an immune response |
US5364773A (en) | 1991-03-07 | 1994-11-15 | Virogenetics Corporation | Genetically engineered vaccine strain |
US5174993A (en) | 1981-12-24 | 1992-12-29 | Health Research Inc. | Recombinant avipox virus and immunological use thereof |
US4603112A (en) | 1981-12-24 | 1986-07-29 | Health Research, Incorporated | Modified vaccinia virus |
US5833975A (en) | 1989-03-08 | 1998-11-10 | Virogenetics Corporation | Canarypox virus expressing cytokine and/or tumor-associated antigen DNA sequence |
US4745051A (en) | 1983-05-27 | 1988-05-17 | The Texas A&M University System | Method for producing a recombinant baculovirus expression vector |
US4552758A (en) * | 1983-12-20 | 1985-11-12 | St. Jude Children's Research Hospital | Human use of avian-human reassortants as vaccines for influenza A virus |
US4945050A (en) | 1984-11-13 | 1990-07-31 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor |
IL84154A0 (en) | 1986-10-16 | 1988-03-31 | Microgenesys Inc | Polypeptides derived from the envelope gene of human immunodeficiency virus in recombinant baculovirus infected insect cells and vaccines against acquired immune deficiency syndrome containing the same |
US5075109A (en) | 1986-10-24 | 1991-12-24 | Southern Research Institute | Method of potentiating an immune response |
US5811128A (en) | 1986-10-24 | 1998-09-22 | Southern Research Institute | Method for oral or rectal delivery of microencapsulated vaccines and compositions therefor |
GB8717430D0 (en) | 1987-07-23 | 1987-08-26 | Celltech Ltd | Recombinant dna product |
EP0386185A1 (fr) | 1988-07-29 | 1990-09-12 | IntraCel Corporation | Procede d'expression genetique de proteines heterologues par des cellules transfectees in vivo |
CA2003300A1 (en) | 1988-11-21 | 1990-05-21 | Franklin Volvovitz | Skin test and test kit for aids |
DK0465529T3 (da) | 1989-03-21 | 1998-10-05 | Vical Inc | Ekspression af exogene polynukleotidsekvenser i et hvirveldyr |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
US5552143A (en) | 1989-03-24 | 1996-09-03 | The Wistar Institute Of Anatomy & Biology | Recombinant cytomegalovirus vaccine |
US5591439A (en) | 1989-03-24 | 1997-01-07 | The Wistar Institute Of Anatomy And Biology | Recombinant cytomegalovirus vaccine |
US5690938A (en) | 1989-07-07 | 1997-11-25 | Oravax, Inc. | Oral immunization with multiple particulate antigen delivery system |
US5436146A (en) | 1989-09-07 | 1995-07-25 | The Trustees Of Princeton University | Helper-free stocks of recombinant adeno-associated virus vectors |
GB9001766D0 (en) | 1990-01-25 | 1990-03-28 | Univ Court Of The University O | Vaccines |
DK0528859T3 (da) | 1990-04-24 | 1998-09-14 | Flustat Pty Ltd | Oral vaccine, som omfatter antigen knyttet til overfladen af røde blodlegemer |
WO1992015672A1 (en) | 1991-03-07 | 1992-09-17 | Virogenetics Corporation | Genetically engineered vaccine strain |
US5997878A (en) | 1991-03-07 | 1999-12-07 | Connaught Laboratories | Recombinant poxvirus-cytomegalovirus, compositions and uses |
EP0561034B1 (en) | 1991-08-26 | 1999-06-09 | IMMUNO Aktiengesellschaft | Direct molecular cloning of a modified chordopox virus genome |
US5643578A (en) | 1992-03-23 | 1997-07-01 | University Of Massachusetts Medical Center | Immunization by inoculation of DNA transcription unit |
US5807722A (en) | 1992-10-30 | 1998-09-15 | Bioengineering Resources, Inc. | Biological production of acetic acid from waste gases with Clostridium ljungdahlii |
US5846945A (en) | 1993-02-16 | 1998-12-08 | Onyx Pharmaceuticals, Inc. | Cytopathic viruses for therapy and prophylaxis of neoplasia |
IL108915A0 (en) | 1993-03-18 | 1994-06-24 | Merck & Co Inc | Polynucleotide vaccine against influenza virus |
FR2711670B1 (fr) | 1993-10-22 | 1996-01-12 | Pasteur Institut | Vecteur nucléotidique, composition le contenant et vaccin pour l'immunisation à l'encontre d'une hépatite. |
DE69536091D1 (de) | 1994-01-27 | 2010-09-09 | Univ Massachusetts Medical | Immunisierung durch Impfung von DNS Transkriptionseinheit |
EP0758397B1 (en) | 1994-04-29 | 2005-06-22 | Baxter Healthcare S.A. | Recombinant poxviruses with foreign polynucleotides in essential regions |
JPH11502222A (ja) | 1995-03-23 | 1999-02-23 | キャンタブ ファーマシューティカルズ リサーチ リミティド | 遺伝子供給用ベクター |
WO1998000166A1 (en) | 1996-07-03 | 1998-01-08 | Merial, Inc. | Recombinant canine adenovirus (cav) containing exogenous dna |
US6183752B1 (en) | 1997-02-05 | 2001-02-06 | Pasteur Merieux Serums Et Vaccins | Restenosis/atherosclerosis diagnosis, prophylaxis and therapy |
US6204281B1 (en) * | 1998-07-10 | 2001-03-20 | Novartis Ag | Method of treatment and pharmaceutical composition |
KR100862758B1 (ko) | 2000-04-28 | 2008-10-13 | 세인트 쥬드 칠드런즈 리써치 호스피탈 | 감염성 인플루엔자 바이러스 생성용 dna 트랜스펙션시스템 |
AU2002218742A1 (en) | 2000-07-11 | 2002-01-21 | Johns Hopkins University | Application of photochemotherapy for the treatment of cardiac arrhythmias |
JPWO2002062381A1 (ja) * | 2001-02-05 | 2004-06-03 | 久光製薬株式会社 | バキュロウイルスベクターワクチン |
WO2003013609A1 (en) * | 2001-08-03 | 2003-02-20 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Sustained-release medicines |
AU2003274925A1 (en) | 2002-08-27 | 2004-03-19 | Dow Agrosciences Llc | Use of escherichia coli heat labile toxin as an adjuvant in birds and poultry |
CA2816222A1 (en) * | 2003-06-16 | 2005-03-03 | Medimmune Vaccines, Inc. | Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants |
EP1644971B1 (en) | 2003-07-04 | 2011-03-23 | Nxp B.V. | Precursor solution, method of preparation thereof and use thereof |
US20080254065A1 (en) | 2004-03-09 | 2008-10-16 | Chiron Corporation | Influenza Virus Vaccines |
ES2454266T3 (es) | 2004-05-25 | 2014-04-10 | Medimmune, Llc | Variantes de la hemaglutinina y la neuraminidasa de influenza |
CN1748795A (zh) * | 2004-09-17 | 2006-03-22 | 金宁一 | 多价禽流感重组活载体疫苗 |
RU2283139C1 (ru) * | 2005-03-21 | 2006-09-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ получения антигенов для вакцины против вирусов гриппа |
BRPI0609362A2 (pt) * | 2005-04-11 | 2010-03-30 | Us Gov Health & Human Serv | vetor de adenovìrus recombinante, adenovìrus recombinante, composição imunogênica e método para a produção da referida composição imunogênica |
US7871626B2 (en) * | 2005-08-04 | 2011-01-18 | St. Jude Children's Research Hospital | Modified influenza virus for monitoring and improving vaccine efficiency |
PT1937301E (pt) | 2005-10-18 | 2015-09-14 | Novavax Inc | Partículas idênticas a vírus (vlps) da gripe funcionais |
TW200731986A (en) * | 2005-10-28 | 2007-09-01 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Use of vaccines for the treatment/prevention of the transmission of pathogens |
WO2008033105A1 (en) | 2006-09-13 | 2008-03-20 | Dso National Laboratories | Hemagglutinin antibody and uses thereof |
US8202967B2 (en) | 2006-10-27 | 2012-06-19 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | H5 proteins, nucleic acid molecules and vectors encoding for those, and their medicinal use |
CN102869379B (zh) | 2010-04-30 | 2015-04-15 | 淡马锡生命科学研究院有限公司 | H5n1谱系的通用疫苗 |
AR088028A1 (es) | 2011-08-15 | 2014-05-07 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Proteinas h5, de h5n1 para un uso medicinal |
WO2014127825A1 (en) | 2013-02-21 | 2014-08-28 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | H5 proteins of h5n1 influenza virus for use as a medicament |
-
2007
- 2007-10-24 US US11/923,326 patent/US8202967B2/en active Active
- 2007-10-26 BR BRPI0718183A patent/BRPI0718183B8/pt active IP Right Grant
- 2007-10-26 SG SG2011077781A patent/SG176419A1/en unknown
- 2007-10-26 WO PCT/US2007/082699 patent/WO2008052173A2/en active Search and Examination
- 2007-10-26 PT PT07863555T patent/PT2086576E/pt unknown
- 2007-10-26 SI SI200731036T patent/SI2086576T1/sl unknown
- 2007-10-26 DK DK07863555.4T patent/DK2086576T3/da active
- 2007-10-26 ES ES07863555T patent/ES2391123T3/es active Active
- 2007-10-26 RU RU2009119597/10A patent/RU2479589C2/ru active
- 2007-10-26 CA CA2664914A patent/CA2664914C/en active Active
- 2007-10-26 PL PL07863555T patent/PL2086576T3/pl unknown
- 2007-10-26 MY MYPI20091667A patent/MY150226A/en unknown
- 2007-10-26 EP EP07863555.4A patent/EP2086576B8/en active Active
- 2007-10-26 KR KR20157008683A patent/KR20150041200A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-10-26 KR KR1020097010893A patent/KR101520307B1/ko active IP Right Grant
- 2007-10-26 MX MX2009004243A patent/MX2009004243A/es active IP Right Grant
- 2007-10-26 JP JP2009534896A patent/JP5442442B2/ja active Active
- 2007-10-26 AU AU2007308869A patent/AU2007308869B2/en active Active
-
2009
- 2009-04-27 CO CO09042413A patent/CO6210831A2/es active IP Right Grant
-
2012
- 2012-05-21 US US13/476,405 patent/US8592558B2/en active Active
-
2013
- 2013-08-08 JP JP2013165132A patent/JP2014012008A/ja not_active Withdrawn
- 2013-10-23 US US14/061,249 patent/US9375469B2/en active Active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014012008A (ja) * | 2006-10-27 | 2014-01-23 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5442442B2 (ja) | 新規h5タンパク質、それらをコードする核酸分子およびベクター、ならびにそれらの医薬的使用 | |
US10369211B2 (en) | Influenza H5 vaccines | |
KR20080065680A (ko) | 종 간의 인플루엔자 병원체의 전파를 치료/예방하기 위한백신의 용도 | |
EP2630155B1 (en) | Novel hemagglutinin 5 (h5) proteins for the treatment and prevention of influenza infections | |
US20160361409A1 (en) | H5 proteins of h5n1 influenza virus for use as a medicament | |
TWI413647B (zh) | 新穎h5蛋白質、編碼彼等之核酸分子及載體及其醫藥用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101026 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20101026 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20121105 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130131 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130408 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130808 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20130819 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130924 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131101 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20131127 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20131218 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5442442 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |