JP5419993B2 - ヌクレオチドコンジュゲートを使用する免疫測定法のための方法及び装置 - Google Patents
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Description
第1の例は、図5に示すように、被験物のためのコンジュゲートとして検出抗体及びALP酵素を架橋する合成オリゴヌクレオチドに基づく酵素結合免疫測定法(ELISA)である。
A(DE) 5’−アミノC12−(T)20−TGATCGCTACGGTGGTATTGT−3’(配列番号1) 6−FAM、ここでFAMは蛍光標識である
A’(AP) 5’−チオール修飾因子C6 S−S−(T)20−ACAATACCACCGTAGCGATC*A−3’6FAM(配列番号2)(FAMは蛍光標識である)
*はホスホロチオエート結合を表す
(T)20は、20個の「T」残基を表す
下記のALP−DNAコンジュゲートのための試験系として、相補的合成オリゴヌクレオチド配列と結合したビーズを作製した。
タンパク質−DNAのコンジュゲーションのために、チオール修飾合成オリゴヌクレオチドを、メルカプタン(DTT)を用いて処理し、遊離のスルフヒドリル基を作り出し、遊離のスルフヒドリル基はその後、そのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル基を介してタンパク質のアミン基と結合したLC−SPDP(スクシンイミジル6−[3’−(2−ピリジルジチオ)−プロピオンアミド)ヘキサノエートクロスリンカーの2−ピリジルジチオ基と反応させることができる。
オリゴヌクレオチドを含有するスルフヒドリルを処理する間、LC−SPDPクロスリンカーのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル部分は、タンパク質分子上のアミン基と反応し、クロスリンカーとタンパク質との共有結合を形成し、DTTと反応した合成オリゴヌクレオチドと反応させるために後で使用される、露出された2−ピリジルジチオ基が残る。
この項では、抗体構成オリゴヌクレオチドコンジュゲートの合成について記載する。
上記のように、合成オリゴヌクレオチドを、メルカプタンを用いて処理し、遊離のスルフヒドリル基を作製する。
PEP−3 F(ab’)2を、当業者にはよく知られている標準的手順を使用して、R&D Systems,Incのヤギ抗TNIペプチド3抗体、カタログ番号G−129−Cのペプシン切断により調製した。およそ200μL中1mgのこのタンパク質を、10μLの20mMのLC−SPDPと、室温において混合しながら1.5時間反応させた。次いで、先に記載したように、S−300カラムに試料を添加し、処理した。
標準的なcTnIカートリッジを使用すること及び、コンジュゲート試料を含む又は含まないMWC cTnI被験物を使用することにより抗体競合アッセイを実施した。シグナルの減少は、被験物がDNAコンジュゲートのF(ab)分子又はF(ab)分子を含有する標準的コンジュゲートにより結合されていることを示す。図29において観察されるように、上で作製されたDNA−コンジュゲートはシグナルを減少させ、被験物を結合させる能力を有することが予想される。
DNAに基づくコンジュゲートによる被験物の検出:
4μLのPEP−3F(ab’)2−A[E0031]を、4μLのALP−A’[E0030]コンジュゲートに加え、51.9pgのcTnI MWC(Manufacturer’s Working Calibrator:製造業者実用キャリブレータ)を、16μLの血漿に加え、コンジュゲートを含まない「イムノ」i−STATカートリッジ(捕捉抗体と結合したビーズ、起電性基質を含有するが、cTnI検出コンジュゲートは含有しない標準的cTnIカートリッジ、この能力は上記の新たに合成されたコンジュゲートにより供給される)において試験した。MWCを含まない対照もまた実施した。
本発明の第2の例は、図6に示すように、被験物のためのポリマーコンジュゲートとして検出抗体及びALP酵素を架橋する合成オリゴヌクレオチドに基づく酵素結合免疫測定法(ELISA)である。この例において、シグナルコンジュゲートは、被験物が存在する場合、捕捉部位におけるシグナル発生の可能性を増加させる、多数のALP−合成オリゴヌクレオチドコンジュゲートとその後ハイブリダイズする、抗体に結合した反復する相補的DNA配列により作製される。反復する相補的DNA配列は、環状の合成DNAを作ることにより作製され、その後5’−チオール含有合成オリゴヌクレオチドをプライマー配列として使用し、ローリングサークル型増幅に使用されるPhi29 DNAポリメラーゼを使用して、この配列の相補的マルチマーDNAを作製する。次いで、特定のDNA配列を抗体分子にコンジュゲートし、その後相補的合成オリゴヌクレオチドとコンジュゲートしたALP分子とハイブリダイズする。
合成オリゴヌクレオチド配列
A(DE) 5’−−チオール修飾因子C6 S−S−(T)20−TGATCGCTACGGTGGTATTGT−3’(配列番号3)
A’(AP)5’−チオール修飾因子C6 S−S−(T)20−ACAATACCACCGTAGCGATC*A−3’(配列番号2)6FAM
X 5’−pACAATACCACCGTAGCGATCAAGTTATGCAACGCGGGAGTTGTGTATGAAGT−3’(配列番号4)
*は、ホスホロチオエート結合を表す
(T)20は、20個の「T」残基を表す
pは、リン酸化5’を表す
ALP−A’ DNAタンパク質コンジュゲートを作製するために例1に記載した同じ方法を、例2にも使用する。このコンジュゲートは、E0030と名付ける。
合成オリゴヌクレオチドサークルの構築:
100,000pmolの合成オリゴヌクレオチドXを、0.05M MOPS(2−(N−モルホリノ)プロパンスルホン酸)、pH7.5、0.01MのKCL、5mMのMgCl2、1.0mMのDTT、0.05mMのATP、2.5mMのMnCl2及び20,000単位のCirclase ssDNA Ligase(Epicentre)中でインキュベートした。反応を、60℃において一晩進行させる。この材料のアリコートを、後のゲル分析のために4℃に配置する。次いで、処理した合成オリゴヌクレオチドを、10,000単位の個々のExonucleaseI及びExonucleaseIIIを用いて、37℃において45分間処理し、その後90℃に10分間加熱することによって不活性化する。処理したオリゴヌクレオチドを、上記のようにP−6樹脂(BioRad)を使用してサイズ排除クロマトグラフィーによって精製する。次いで、処理したオリゴヌクレオチドを、20%のアクリルアミド/7Mの尿素変性ゲルにおけるゲル電気泳動により、環状であることを確認する。未処理の合成オリゴヌクレオチドと比較した電気泳動の変化により、環状化を確認する。
タンパク質−DNAのコンジュゲーションのために、テール付き合成オリゴヌクレオチドのチオール修飾部分を、メルカプタン(DTT)を用いて処理し、遊離のスルフヒドリル基を作り出し、遊離のスルフヒドリル基はその後、そのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル基を介してタンパク質のアミン基と結合したLC−SPDP(スクシンイミジル6−[3’−(2−ピリジルジチオ)−プロピオンアミド)ヘキサンノエートクロスリンカーの2−ピリジルジチオ基と反応させることができる。
PEP−3F(ab’)2を、標準的手順を使用して、R&D Systems, Incのヤギ抗TNIペプチド3抗体、カタログ番号G−129−Cのペプシン切断により調製した。およそ200μL中1mgのこのタンパク質を、10μLの20mMのLC−SPDPと、室温において混合しながら1.5時間反応させた。次いで、先に記載したように、S−300カラムに試料を添加し、処理した。
4μLのPEP−3F(ab’)2−テール付きオリゴヌクレオチドを、4μLのALP−A’[E0030]コンジュゲートに加え、51.9pgのcTnI MWC(製造業者実用キャリブレータ)を、16μLの血漿に加え、コンジュゲートを含まない「イムノ」i−STATカートリッジ(捕捉抗体と結合したビーズ、起電性基質を含有するが、cTnI検出コンジュゲートは含有しない標準的cTnIカートリッジ、この能力は上記の新たに合成されたコンジュゲートにより供給される)において試験した。MWCを含まない対照もまた実施した。
本発明の別の例は、図6に示すように、被験物のためのポリマーコンジュゲートとして検出抗体及びALP酵素を架橋する合成オリゴヌクレオチドに基づく酵素結合免疫測定法(ELISA)である。この例において、コンジュゲートは、被験物が存在する場合、捕捉部位におけるシグナル発生の可能性を増加させる、多数のALP−合成オリゴヌクレオチドコンジュゲートとその後ハイブリダイズする、抗体に結合した反復する相補的DNA配列により作製される。反復する相補的DNA配列は、合成オリゴヌクレオチドをファージミドにクローニングし、当業者によく知られている技術によって一本鎖DNAを単離し、その後5’−チオール含有合成オリゴヌクレオチドをプライマー配列として使用し、T4 DNAポリメラーゼ(又は鎖置換能を有する任意の他のDNAポリメラーゼ)を使用してこの配列の相補的マルチマーDNAを作製する。次いで、特定のDNA配列を抗体分子にコンジュゲートし、その後相補的合成オリゴヌクレオチドとコンジュゲートしたALP分子とハイブリダイズする。
合成オリゴヌクレオチド配列
A(DE) 5’−−チオール修飾因子C6 S−S−(T)20−TGATCGCTACGGTGGTATTGT−3’(配列番号3)
A’(AP) 5’−チオール修飾因子C6 S−S−(T)20−ACAATACCACCGTAGCGATC*A−3’6FAM(配列番号2)
Y 5’−AATTACAATACCACCGTAGCGATCACTACT−3’(配列番号5)
Y’ 5’−AGCTAGTAGTGATCGCTACGGTGGTATTGT−3’(配列番号6)
*は、ホスホロチオエート結合を表す
(T)20は、20個の「T」残基を表す
pは、リン酸化5’を表す
ALP−A’ DNAタンパク質コンジュゲートを作製するために例1に記載した同じ方法を、例3にも使用する。このコンジュゲートは、E0030と名付ける。
DNAプラスミドを利用して、特定のDNA断片をそれらの中にクローニングできる環状DNA断片を作製する。f1複製起点を含むファージミドのプラスミドは、ヘルパーファージを使用して一本鎖DNAに変換できる。この一本鎖DNAは、容易に拡大、単離及び精製できる。すべてのプロトコルは当業者にはよく知られており、Sambrook及びRussell(2001年、Molecular Cloning:A Laboratory Manual、第3版、Cold Spring Harbour Laboratory Press、Cold Spring Harbour、New York)に見出されるプロトコルに基づく。次いで、この材料をその後使用して、Phi29又はT4 DNAポリメラーゼなどの鎖置換DNAポリメラーゼを使用して、ELISAアッセイに使用するテール付きDNA断片を作製できる。
5,000pmol量の合成オリゴヌクレオチドAを、1×PBSE中の調製した一本鎖DNA鋳型に加える。混合物を65℃に加熱し、100mLの水を含むビーカーにおいて、1時間かけて室温にゆっくりと冷却させる。このことにより、遊離の3’−ヒドロキシを有するチオール含有合成オリゴヌクレオチドと、上で調製した環状DNA構造とは効率的にアニーリングされる。
タンパク質−DNAのコンジュゲーションのために、テール付き合成オリゴヌクレオチドのチオール修飾部分を、メルカプタン(DTT)を用いて処理し、遊離のスルフヒドリル基を作り出し、遊離のスルフヒドリル基はその後、そのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル基を介してタンパク質のアミン基と結合したLC−SPDP(スクシンイミジル6−[3’−(2−ピリジルジチオ)−プロピオンアミド)ヘキサノエートクロスリンカーの2−ピリジルジチオ基と反応させることができる。
PEP−3F(ab’)2を、標準的手順を使用して、R&D Systems,Incのヤギ抗TNIペプチド3抗体、カタログ番号G−129−Cのペプシン切断により調製した。およそ200μL中100ugのこのタンパク質を、10μLの20mMのLC−SPDPと、室温において混合しながら1.5時間反応させた。次いで、先に記載したように、S−300カラムに試料を添加し、処理した。
4μLのPEP−3F(ab’)2−テール付きDNAを、4μLのALP−A’[E0030]コンジュゲートに加え、51.9pgのcTnIMWC(製造業者実用キャリブレータ)を、16μLの血漿に加え、コンジュゲートを含まない「イムノ」i−STATカートリッジ(捕捉抗体と結合したビーズ、起電性基質を含有するが、cTnI検出コンジュゲートは含有しない標準的cTnIカートリッジ、この能力は上記の新たに合成されたコンジュゲートにより供給される)において試験した。MWCを含まない対照もまた実施した。
Claims (19)
- 標的被験物を含有することが疑われる生物試料を受け入れるための試料流入口、
電極を含有する導管、
洗浄液を含有する領域、及び
廃液チャンバー、
を含み、
前記電極上で免疫測定法が形成され、この免疫測定法が、
前記標的被験物に結合した固定化一次抗体、
可溶化剤中に配置され、第1の一本鎖ヌクレオチドに結合した、前記標的被験物に対する二次抗体、及び
第1の一本鎖ヌクレオチドと相補的な塩基対を有する第2の一本鎖ヌクレオチドとそれぞれ結合した1種又は複数種のシグナル成分、
を含み、ここで、
洗浄液が、前記導管の中の前記電極から前記廃液チャンバーへと前記生物試料を洗浄することができ;
可溶化剤が、前記導管内に配置されるように構成されたマトリックスであり;
第1の一本鎖ヌクレオチド及び第2の一本鎖ヌクレオチドの3’末端又は5’末端が、保護化学基を組み込むことによって、前記導管の中において、血液試料中の内因性エキソヌクレアーゼ活性から保護される;
免疫測定法を実施するための単回使用カートリッジ。 - 1種又は複数種のシグナル成分が、蛍光成分、色成分及び放射性成分からなる群から選択される非酵素的検出部分を含む、請求項1に記載のカートリッジ。
- 1種又は複数種のシグナル成分が1種又は複数種のシグナル酵素を含み、カートリッジが、
酵素基質を含有する領域をさらに含み、
前記酵素基質が前記1種又は複数種のシグナル酵素と反応して、前記生物試料中の前記標的被験物の量に比例して前記電極においてシグナルを発生させることができる、請求項1に記載のカートリッジ。 - 一次抗体が標的被験物の第1のエピトープと結合する、請求項3に記載のカートリッジ。
- 二次抗体が標的被験物の第2のエピトープと結合する、請求項3に記載のカートリッジ。
- 1種又は複数種のシグナル酵素が、アルカリホスファターゼ、グルコースオキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ、ウレアーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ及びベータガラクトシダーゼからなる群から選択される、請求項3に記載のカートリッジ。
- 可溶化剤中に配置され、第1のヌクレオチドと共有結合したFAB断片、及び
第2のヌクレオチドとそれぞれ共有結合した1種又は複数種のシグナル成分、
を含み、
前記第1のヌクレオチドが1つ又は複数の反復配列を有し、
第2のヌクレオチドが前記第1のヌクレオチド上の1つ又は複数の反復配列の1つに結合しており、FAB断片とシグナル成分との比が反復配列の数によって調節され;、
可溶化剤が、免疫測定法を行うよう構成された装置の導管内に配置されるように構成されたマトリックスであり;並びに
第1の一本鎖ヌクレオチド及び第2の一本鎖ヌクレオチドの3’末端又は5’末端が、保護化学基を組み込むことによって、前記導管の中において、血液試料中の内因性エキソヌクレアーゼ活性から保護される;
免疫測定法において使用するための組成物。 - 1種又は複数種のシグナル成分が、蛍光成分、色成分及び放射性成分からなる群から選択される非酵素的検出部分を含む、請求項7に記載の組成物。
- 1種又は複数種のシグナル成分が、1種又は複数種のシグナル酵素を含む、請求項7に記載の組成物。
- 第1のヌクレオチド及び第2のヌクレオチドが、5’末端、3’末端又はヌクレオチド配列内部にカップリング部分を含有する、請求項9に記載の組成物。
- カップリング部分が、アミノ修飾因子、チオール修飾因子及びジチオールからなる群から選択される修飾ホスホラミダイトから作製される、請求項10に記載の組成物。
- 保護化学基がホスホロチオエートである、請求項9に記載の組成物。
- 1種又は複数種のシグナル酵素が、アルカリホスファターゼ、グルコースオキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ、ウレアーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ及びベータガラクトシダーゼからなる群から選択される、請求項9に記載の組成物。
- 第1のヌクレオチドが、少なくとも3つの1種又は複数種のシグナル酵素の、少なくとも3つの第2の配列と結合する少なくとも3つの反復配列を有する、請求項9に記載の組成物。
- 第1のヌクレオチドが、少なくとも3つの1種又は複数種のシグナル酵素の、少なくとも5つの第2の配列と結合する少なくとも5つの反復配列を有する、請求項9に記載の組成物。
- 被験物が固定化された一次抗体及び二次抗体と結合するように生物試料を接触させて、免疫測定法を形成するステップであって、二次抗体が可溶化剤中に配置され、合成ヌクレオチド架橋を介して少なくとも1種のシグナル酵素と結合する上記ステップ、
前記免疫測定法から前記生物試料を洗浄するステップ、及び
シグナル酵素との反応により発生したシグナルに基づいて被験物の存在を決定するステップ、
を含み、ここで、
可溶化剤が、免疫測定法を行うよう構成された装置の導管内に配置されるように構成されたマトリックスであり;並びに
第1の一本鎖ヌクレオチド及び第2の一本鎖ヌクレオチドの3’末端又は5’末端が、保護化学基を組み込むことによって、前記導管の中において、血液試料中の内因性エキソヌクレアーゼ活性から保護される;
生物試料中の被験物の存在を決定する方法。 - (a)患者由来の試料を、cTnI上の第1のエピトープと結合することができる一次抗体が結合された表面に適用するステップ、
(b)cTnI上の第2のエピトープと結合することができる二次抗体を加えるステップであって、この二次抗体が、可溶化剤中に配置され、シグナル成分と結合した1つ又は複数の第2の鎖ポリヌクレオチドと結合した第1の鎖ポリヌクレオチド配列をさらに含む上記ステップ、及び
(c)二次抗体の結合の程度を決定するステップ、
を含み、ここで、
可溶化剤が、cTnI検出のための免疫測定法を行うよう構成された装置の導管内に配置されるように構成されたマトリックスであり;並びに
第1の一本鎖ヌクレオチド及び1つ又は複数の第2の一本鎖ヌクレオチドの3’末端又は5’末端が、保護化学基を組み込むことによって、前記導管の中において、血液試料中の内因性エキソヌクレアーゼ活性から保護される;
患者が心筋梗塞を患っている可能性があるかどうかを決定する方法。 - シグナル成分がシグナル酵素を含む、請求項17に記載の方法。
- ステップ(a)より前に患者が心筋梗塞を患っていない、請求項17に記載の方法。
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US9199234B2 (en) | 2011-05-27 | 2015-12-01 | Abbott Point Of Care Inc. | TSH antibodies for point-of-care immunoassay formats |
US8617826B2 (en) | 2011-05-27 | 2013-12-31 | Abbott Point Of Care Inc. | TSH immunoassays employing scavenging reagents for cross-reacting endocrine glycoprotein hormone analogues |
CA2855840C (en) | 2011-12-14 | 2023-08-29 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Composition and method for the diagnosis and treatment of iron-related disorders |
UY34905A (es) | 2012-07-12 | 2014-01-31 | Abbvie Inc | Proteínas de unión a il-1 |
CN103159854B (zh) * | 2013-03-07 | 2015-09-30 | 浙江大学 | 抗体与微珠连接方法 |
US9488663B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-11-08 | Abbott Point Of Care Inc. | Electrochemical methods and devices for amending urine samples for immunosensor detection |
US9651547B2 (en) | 2013-03-14 | 2017-05-16 | Abbott Point Of Care Inc. | Electrochemical methods and devices for amending urine samples for immunosensor detection |
US9005901B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-04-14 | Abbott Laboratories | Assay with internal calibration |
US9157910B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-10-13 | Abbott Laboratories | Assay with increased dynamic range |
AU2014407088B2 (en) | 2014-09-26 | 2021-09-23 | Somalogic Operating Co., Inc. | Cardiovascular risk event prediction and uses thereof |
US10822637B2 (en) | 2015-10-01 | 2020-11-03 | Dynamic Biosensors Gmbh | Method for detecting molecular interactions using an immobilized nucleic acid |
CN105372415B (zh) * | 2015-11-17 | 2017-05-10 | 武汉金开瑞生物工程有限公司 | 一种dna标记抗体的方法 |
CN105259350B (zh) * | 2015-11-20 | 2017-05-31 | 北京科技大学 | 基于量子点多级检测标记物传感器及其制备方法 |
US20180149656A1 (en) * | 2016-11-29 | 2018-05-31 | The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. | Regeneratable Biosensor and Methods of Use Thereof |
WO2019069372A1 (ja) * | 2017-10-03 | 2019-04-11 | 株式会社ニコン | 検出対象の測定方法、捕捉プローブ固定化担体、検出キット、及び流体デバイス |
JP2020016522A (ja) * | 2018-07-25 | 2020-01-30 | 国立大学法人 岡山大学 | 磁性粒子を用いた免疫染色法 |
EP3872490B1 (en) * | 2018-10-24 | 2023-03-08 | Toppan Printing Co., Ltd. | Cup for immunoassay, method for producing same, and immunoassay method |
WO2021026403A1 (en) | 2019-08-07 | 2021-02-11 | Abbott Laboratories | Methods for detecting assay interferents and increasing dynamic range |
EP4069731A4 (en) * | 2019-12-03 | 2024-05-29 | Alamar Biosciences Inc | NUCLEIC ACID-COUPLED IMMUNE SANDWICH ASSAY (NULISA) |
CA3175523A1 (en) | 2020-04-13 | 2021-10-21 | Antti Virtanen | Methods, complexes and kits for detecting or determining an amount of a .beta.-coronavirus antibody in a sample |
CN114544965B (zh) * | 2020-11-11 | 2023-04-28 | 艾克发(北京)生物技术有限公司 | 一种多重信号放大系统及其在免疫吸附竞争法检测中的应用 |
GB2607599A (en) * | 2021-06-07 | 2022-12-14 | Vidya Holdings Ltd | Improvements in or relating to an assay cartrdige |
KR102306097B1 (ko) * | 2021-07-13 | 2021-09-28 | (주)바이오메트릭스 테크놀로지 | 고감도 면역접합체, 이의 제조방법, 이를 포함한 체외 진단시약 및 체외 진단키트 |
CN116256519B (zh) * | 2023-02-17 | 2024-01-16 | 成都诺森医学检验有限公司 | 一种抗原超敏检测方法 |
Family Cites Families (35)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5656493A (en) | 1985-03-28 | 1997-08-12 | The Perkin-Elmer Corporation | System for automated performance of the polymerase chain reaction |
US5096669A (en) | 1988-09-15 | 1992-03-17 | I-Stat Corporation | Disposable sensing device for real time fluid analysis |
WO1991013356A1 (en) | 1990-02-20 | 1991-09-05 | Coulter Corporation | Improved antibody-enzyme direct conjugates and method of making same |
US5518900A (en) * | 1993-01-15 | 1996-05-21 | Molecular Tool, Inc. | Method for generating single-stranded DNA molecules |
US5635602A (en) * | 1993-08-13 | 1997-06-03 | The Regents Of The University Of California | Design and synthesis of bispecific DNA-antibody conjugates |
US5416026A (en) | 1993-10-04 | 1995-05-16 | I-Stat Corporation | Method for detecting the change in an analyte due to hemolysis in a fluid sample |
US5447440A (en) | 1993-10-28 | 1995-09-05 | I-Stat Corporation | Apparatus for assaying viscosity changes in fluid samples and method of conducting same |
US5593639A (en) | 1994-05-26 | 1997-01-14 | Japan Synthetic Rubber Co., Ltd. | Blood-sampling vessel |
WO1995034651A2 (en) * | 1994-06-14 | 1995-12-21 | Neurocrine Biosciences, Inc. | Corticotropin-releasing factor2 receptors |
CA2126952C (en) | 1994-06-28 | 2010-12-14 | Sithian Pandian | Probe, kit, and method of amplification for increasing the sensitivity of nucleic acid hybridization assays |
US5514253A (en) | 1994-07-13 | 1996-05-07 | I-Stat Corporation | Method of measuring gas concentrations and microfabricated sensing device for practicing same |
US5609824A (en) | 1994-07-13 | 1997-03-11 | I-Stat Corporation | Methods and apparatus for rapid equilibration of dissolved gas composition |
GB9518864D0 (en) * | 1995-09-14 | 1995-11-15 | Cambridge Res & Innovation | Oligonucleotides and their uses |
US6117631A (en) * | 1996-10-29 | 2000-09-12 | Polyprobe, Inc. | Detection of antigens via oligonucleotide antibody conjugates |
US6030827A (en) | 1998-01-23 | 2000-02-29 | I-Stat Corporation | Microfabricated aperture-based sensor |
US20030215821A1 (en) * | 1999-04-20 | 2003-11-20 | Kevin Gunderson | Detection of nucleic acid reactions on bead arrays |
WO2001036666A1 (en) | 1999-11-15 | 2001-05-25 | I-Stat Corporation | Apparatus and method for assaying coagulation in fluid samples |
US6438498B1 (en) | 2000-02-10 | 2002-08-20 | I-Stat Corporation | System, method and computer implemented process for assaying coagulation in fluid samples |
US7473767B2 (en) * | 2001-07-03 | 2009-01-06 | The Institute For Systems Biology | Methods for detection and quantification of analytes in complex mixtures |
EP2221377B2 (en) * | 2002-02-01 | 2017-05-17 | Life Technologies Corporation | Oligonucleotide compositions with enhanced efficiency |
US7419821B2 (en) * | 2002-03-05 | 2008-09-02 | I-Stat Corporation | Apparatus and methods for analyte measurement and immunoassay |
US20040002095A1 (en) * | 2002-03-22 | 2004-01-01 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Universal signal amplification tail |
US7015317B2 (en) * | 2002-05-02 | 2006-03-21 | Abbott Laboratories | Polynucleotides for the detection and quantification of hepatitis B virus nucleic acids |
US20040018495A1 (en) * | 2002-07-24 | 2004-01-29 | Xing-Xiang Li | Microparticle based signal amplification for the detection of analytes |
US20040018577A1 (en) * | 2002-07-29 | 2004-01-29 | Emerson Campbell John Lewis | Multiple hybrid immunoassay |
US7122384B2 (en) * | 2002-11-06 | 2006-10-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Resonant light scattering microparticle methods |
US20050095627A1 (en) * | 2003-09-03 | 2005-05-05 | The Salk Institute For Biological Studies | Multiple antigen detection assays and reagents |
US7682833B2 (en) | 2003-09-10 | 2010-03-23 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with improved sample closure |
US7723099B2 (en) | 2003-09-10 | 2010-05-25 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with immuno-reference electrode |
EP2418018B1 (en) | 2004-12-23 | 2013-05-22 | Abbott Point of Care Inc. | Methods for the separation nucleic acids |
US7494776B2 (en) * | 2005-07-07 | 2009-02-24 | Beckman Coulter, Inc. | Labeled complementary oligonucleotides to detect oligonucleotide-linked ligands |
JP5178528B2 (ja) | 2005-12-29 | 2013-04-10 | アボット ポイント オブ ケア インコーポレイテッド | 分子診断用増幅システムおよび方法 |
US8101403B2 (en) * | 2006-10-04 | 2012-01-24 | University Of Washington | Method and device for rapid parallel microfluidic molecular affinity assays |
WO2008049620A1 (en) * | 2006-10-25 | 2008-05-02 | Hexal Gentech Forschungs Gmbh | Semi-solid controlled release composition |
WO2008122310A1 (en) | 2007-04-04 | 2008-10-16 | Chimera Biotec Gmbh | Method for the detection of an analyte in biological matrix |
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