JP5351369B2 - 注射用骨ミネラル代替物質用組成物 - Google Patents
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Description
本発明は、イン・ビボ(in vivo)で体液中において硬化する能力を有する骨ミネラル代替物質用の注射用組成物に関する。更に、本発明は、そのような物質を製造する方法に関する。
過去10年の間に、骨粗鬆症、即ち骨折のリスクの増加をもたらす骨量の減少及び微細構造の変化に関係した骨折の数が、およそ二倍になった。平均寿命の継続的な上昇によって、2020年までに60才以上の年令の人々は、ヨーロッパの人口の25%を示し、50才以上の年令の全ての女性の40%が、骨粗鬆症の骨折に苦しむと推定されている。
本発明の目的は、骨折破片の動きの初期抑制を伴う外科手術の間に硬化し、高い機械的強度をもって長年にわたり安定で永続的な移植片を提供し、そしてこの期間に骨の内部へ成長するための多孔性で不規則な構造を示す、生体内において体液中で硬化する能力を有する骨ミネラル代替物質用の注射用組成物を提供することである。
本発明を、添付の図面を参照することによってより詳細に説明する。
改善された特性を有する注射用骨ミネラル代替物質を完成するために、本発明の注射用骨ミネラル代替物質の粘度、凝固時間及び空隙率に及ぼす粒径、水分含量及び促進剤の影響を評価する目的で、試験を行なった。
5CaHPO4・2H2O → Ca5(PO4)3OH + 2H3PO4 + 9H2O (2)
5Ca8H2(PO4)6・5H2O → 8Ca5(PO4)3OH + 6H3PO4 + 17H2O (3)
5Ca3(PO4)2 + 3H2O → 3Ca5(PO4)3OH + H3PO4 (4)
3Ca4(PO4)2O + 3H2O → 2Ca5(PO4)3OH + Ca(OH)2 (5)
2Ca4(PO4)2O + 2Ca(H2PO4)2・H2O → Ca9(HPO4)(PO4)5OH + 2H2O (8)
Ca4(PO4)2O + CaHPO4・2H2O → Ca5(PO4)3OH + 2H2O (9)
3Ca4(PO4)2O + 6CaHPO4・2H2O → 2Ca9(HPO4)(PO4)5OH + 13H2O (10)
Ca4(PO4)2O + CaHPO4 → Ca5(PO4)3OH (11)
3Ca4(PO4)2O + 6CaHPO4 → 2Ca9(HPO4)(PO4)5OH + H2O (12)
3Ca4(PO4)2O + Ca8H2(PO4)6・5H2O → 4Ca5(PO4)3OH + 4H2O (13)
3Ca4(PO4)2O + 3Ca8H2(PO4)6・5H2O → 4Ca9(HPO4)(PO4)5OH + 14H2O (14)
Ca4(PO4)2O + 2Ca3(PO4)2 + H2O → Ca5(PO4)3OH (15)
本発明を、以下の実施例を参照することによって更に説明し例示する。しかしながら、これらの実施例は、いずれにせよ、本発明を制限すると解釈してはならないことに注意すべきである。
対照試験として、純粋の硫酸カルシウム半水和物の注射可能時間及び凝固時間を測定したところ、それぞれ、10分超及び20分超であった。
第二の対照試験として、硫酸カルシウム半水和物とヒドロキシアパタイトとの混合物の注射可能時間及び凝固時間を測定したところ、それぞれ、又、10分超及び20分超であった。
不動添加物(passive additive)の存在下において、硫酸カルシウム半水和物から硫酸カルシウム二水和物を生成する第一の反応について、注射可能時間(IT)及び凝固時間(SI)を検討した。ヒドロキシアパタイトと促進剤の比率を変えた、硫酸カルシウム半水和物、ヒドロキシアパタイト(HA)及び促進剤(Acc)の20種類の異なった混合物を評価した。表3を参照。凝固時間は機械的試験により定量した。重量23g、直径10mm及び長さ35mmの金属製の棒を高さ35mmから落下させた。棒が試料上にいかなる痕跡も残さなかったときの時間を、凝固時間として記録した。
アルファ型リン酸三カルシウム及びアルファ型硫酸カルシウム半水和物に基づいた、異なる二相系の注射用セメントを製造した。
硫酸カルシウム半水和物(CSH)を20重量%未満で含有するα−TCPについて、圧縮強度を更に試験した(CSHは、Boehrlander AB社、Gothenborg、スウェーデンから入手した)。
硫酸カルシウム半水和物及びリン酸カルシウムがそれぞれ凝固反応中に水と反応する時、二つの凝固反応の各々の間に結晶が形成される。最初に、結晶核が創出され、次いで、核からの成長で最終結晶構造が形成される。既に生成した凝固物質の結晶を加えることによって、凝固プロセスにおける核生成ステップが既に完了し、これによって、物質が結晶化し硬化するのに要する時間が短縮される。結晶は、添加した硫酸カルシウム二水和物及びヒドロキシアパタイトの粒子からそれぞれ直接成長する。それ故、これら添加した凝固物質の粒子は、凝固反応において促進剤として作用する。
注射可能時間に及ぼす硫酸カルシウム二水和物の含量の影響を図2に示す。この場合、液体/粉末(L/P)比は0.4ml/gである。注射可能時間の限界は、加重が、手により注射が可能な最高の力に匹敵するNに達したときと定義した。
凝固時間に及ぼす水分含量及び硫酸カルシウム二水和物の含量の影響を図3に示す。ここで、L/Pは液体/粉末比(ml/g)である。凝固時間は、ASTM Standard C266に従い、ギルモアニードル(Gillmore Needles)を使用して測定した。
本発明の組成物においては、硫酸カルシウム半水和物の形態が重要である。アルファ型硫酸カルシウム半水和物(α−CaSO4・1/2H2O)が、その機械的強度の故に使用するのに優れている。β−α−CaSO4・1/2H2Oの圧縮強度が14MPaであるのに対して、α−CaSO4・1/2H2Oは40.4MPaの圧縮強度を有している。
イン・ビトロ(in vitro)及びイン・ビボ(in vivo)におけるヒドロキシアパタイト骨代替品を有する硫酸カルシウムの生分解
ヒドロキシアパタイトを40重量%含有する硫酸カルシウムの分解速度を調べた。物質を、人工体液及びラットの筋肉の嚢状空洞に置いた。得られたブロックの機械強度及び寸法を生分解指数として時間と共に調べた。
圧縮強度試験は、MTS及びInstron8511.20試験装置を使用して行った。物質を取り出した後、試料を自動水準盤(self−levelling platens)の間に直接置き、そして、室温で破壊するまで1mm/分で圧縮した。
物質を取り出した後、物質のブロックの容積をノギスで測定した。
硫酸カルシウム又はヒドロキシアパタイト含有硫酸カルシウムのセメントを、L/P比0.25ml/gで、蒸留水と混合することによって調製した。セメントを混合した後、PFTE型に注入し凝固させた。試料は、直径4mm、長さ8mmであった。六つの円筒状試料を人工体液中に置き、そして、液体を毎日交換した。一週間後、試料を自動水準盤の間に直接置き、室温で破壊するまで圧縮強度試験にかけた。
硫酸カルシウム半水和物(CaSO4・1/2H2O)を、40重量%ヒドロキシアパタイト粉末[Ca10(PO4)6(OH)2;HA]と混合した。POP−HAの混合物を焼結し、空気中で冷却した。促進剤(硫酸カルシウム)をPOP−HAに0.4重量%加え、乾燥粉末をガンマ線照射により滅菌した。
体重約200gのSprague−Dawleyラットを使用し、使用前一週間動物施設に保存した。動物には標準実験食を給餌した。全てのラットを、ペントバルビタール1ml(60mg/ml)、ジアゼパム2ml(5mg/ml)、及び生理食塩水1ml(0.15M)を含有する溶液0.5〜0.6mlの腹腔注射で麻酔した。移植片をラットの筋肉内に挿入した。9匹のラットを各期間の試験に使用した。ラットは、移植後1又は4週間の時点で、過剰投与量のペントバルビタールの腹腔注射によって殺処分された。
インキュベーションの一週間後に、人工体液中又はラットの筋肉の嚢状空洞のそれぞれに置いた円筒状試料の機械強度を記録した。物質の機械強度は、イン・ビトロ並びにイン・ビボの両者で35Mpaから約5Mpaまで低下した。残ったブロックの容積は、元のブロックの容積のほんの1/3乃至1/10であった(表5)。
Claims (15)
- イン・ビボにおいて体液中で、骨の内部への成長のための多孔性構造を時間の経過とともに獲得する二相系の骨代替移植片に硬化する能力を有する骨ミネラル代替物質用の注射用組成物のための乾燥粉末組成物であって、
該乾燥粉末が、
水性液体と反応するとき、硫酸カルシウム二水和物セメントに硬化する能力を有する硫酸カルシウム半水和物である第一の凝結反応成分、
水性液体と反応するとき、リン酸カルシウムセメントに硬化する能力を有するリン酸カルシウムである第二の凝結反応成分、及び
水性液体と該第一の及び/又は第二の凝結反応成分との凝結反応に対する少なくとも一つの促進剤であって、該少なくとも一つの第一の凝結反応成分と水性液体との反応に対する促進剤が、1mm未満の粒径を有し、該第一の凝結反応成分の0.1重量%と10重量%の間で含まれる粒子状硫酸カルシウム二水和物であり、該少なくとも一つの第二の凝結反応成分と水性液体との反応に対する促進剤が、硬化粒子状リン酸カルシウムセメント又はリン酸水素二ナトリウム(Na2HPO4)である促進剤、
を含む、上記組成物。
- 該第一の及び/又は該第二の凝結反応成分が、1〜100μmの粒径を有する微粒子の形態である、請求項1記載の組成物。
- 該硫酸カルシウム半水和物がアルファ型硫酸カルシウム半水和物である、請求項1記載の組成物。
- 該第一の凝結反応成分が、該乾燥粉末の10〜30重量%含まれる、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。
- 該第二の凝結反応成分がアルファ型リン酸三カルシウムである、請求項1記載の組成物。
- 該第二の凝結反応成分が、該乾燥粉末の70〜90重量%含まれる、請求項1、2及び5のいずれか一項に記載の組成物。
- 該粒子状硫酸カルシウム二水和物が50μm未満の粒径を有する、請求項1記載の組成物。
- 該粒子状硫酸カルシウム二水和物が、該第一の凝結反応成分の0.1重量%と2重量%の間で含まれる、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
- 該硬化粒子状リン酸カルシウムセメントが、ヒドロキシアパタイト(HA)、リン酸三カルシウム(TCP)又はこれらの混合物である、請求項1記載の組成物。
- 該硬化粒子状リン酸カルシウムセメントが、20μm未満の粒径を有する、請求項1又は9に記載の組成物。
- 該硬化粒子状リン酸カルシウムセメントが、該第二の凝結反応成分の0.5重量%と5重量%の間で含まれる、請求項1、9及び10のいずれか一項に記載の組成物。
- 請求項1〜11いずれか一項に記載の組成物と水性液体を含む、骨ミネラル代替物質用の注射用組成物であって、該水性液体が蒸留水又は平衡塩溶液を含む、上記組成物。
- 該第二反応成分と該水性液体の反応のための少なくとも一つの該促進剤が、該水性液体に溶解されている、請求項12記載の注射用組成物。
- 該促進剤がリン酸水素二ナトリウム(Na2HPO4)であり、該水性液体の1〜5重量%含まれる、請求項12又は13に記載の注射用組成物。
- 成長因子、抗ガン物質、抗生物質及び抗酸化剤からなる群から選択される一以上の生物学的活性物質を更に含む、請求項1記載の組成物。
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