JP5320294B2 - プロバソプレシンまたはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンiiを使用する、急性冠動脈症候群についてのリスク層化 - Google Patents
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Description
本発明はまた、以下の項目を提供する。
(項目1)
急性冠動脈症候群のリスク層化のための方法であって、プロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIが、in vitro診断により測定される、方法。
(項目2)
急性冠動脈症候群、特に心筋梗塞および狭心症の高いリスクおよび/または好ましくない予後を有する患者を識別するための、項目1に記載の急性冠動脈症候群のリスク層化のための方法。
(項目3)
上記患者が症候性および/または無症候性の患者、特に救急治療患者である、項目1または2に記載の急性冠動脈症候群のリスク層化のための方法。
(項目4)
特に集中医療または救急医療において、急性冠動脈症候群、特に心筋梗塞(AMI)および狭心症(AP)の治療管理のための、項目1から3の一項に記載の急性冠動脈症候群のリスク層化のための方法。
(項目5)
特に集中医療または救急医療において、特に薬物を用いたさらなる処置および治療についての臨床判断を下すための、項目1から4の一項に記載の急性冠動脈症候群のリスク層化のための方法。
(項目6)
心筋梗塞または狭心症の早期もしくは鑑別診断または予後のin vitro診断のための方法であって、マーカープロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIが検査対象患者で測定される、方法。
(項目7)
急性冠動脈症候群、特に心筋梗塞または狭心症のin vitro診断および/または早期もしくは鑑別診断および/または予後のための方法であって、マーカーニューロフィジンIIまたはその断片および部分ペプチドが、検査対象患者で測定される、方法。
(項目8)
急性冠動脈症候群、心筋梗塞、または狭心症のin vitro診断のための方法であって、マーカープロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIが、ナトリウム利尿タンパク質、特にANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、proBNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列との組み合わせで検査対象患者で測定される、方法。
(項目9)
項目8に記載の急性冠動脈症候群、心筋梗塞、または狭心症のin vitro診断のための方法であって、予防、予後、鑑別診断的早期発見および識別、重症度評価、ならびに予後評価について、診断が治療と共に行われることを特徴とする、方法。
(項目10)
診断のために、上記マーカープロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIの6〜20pmol/Lのカットオフ(閾値)、特に6〜10pmol/L、または予後のために、10〜30pmol/Lのカットオフ(閾値)、特に10〜20pmol/Lが、有意(特異的)であることを特徴とする、項目1〜9の一項に記載の方法。
(項目11)
in vitro診断の炎症マーカー、心臓血管マーカー、神経ホルモンマーカー、または虚血マーカーの群から選択される少なくとも1つの追加的なマーカーも使用して、測定が実行されることを特徴とする、項目1〜10の一項に記載の方法。
(項目12)
上記炎症マーカーが、C−反応性タンパク質(CRP)、TNF−アルファのようなサイトカイン、IL−6のようなインターロイキン、プロカルシトニン(1〜116および3〜116)、およびVCAMまたはICAMのような接着分子を含む群から選択されることを特徴とする、項目1〜11の一項に記載の方法。
(項目13)
上記心臓血管マーカーが、クレアチンキナーゼ、ミオグロビン、ミエロペルオキシダーゼ、ナトリウム利尿タンパク質、特にANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、pro−BNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列、心筋トロポニン、あるいはCRP、ならびにプロガストリン放出ペプチド(proGRP)、プロエンドセリン−1、プロレプチン、プロニューロペプチド−Y、プロソマトスタチン、プロニューロペプチド−YY、プロオピオメラノコルチン、プロアドレノメデュリン(proADM)、または各々の場合その部分配列のような循環調節(プロ)ホルモンを含む群に由来する少なくとも1つのマーカーから選択されることを特徴とする、項目1〜12の一項に記載の方法。
(項目14)
上記虚血マーカーが、トロポニンIおよびT、ならびにCK−MBを含む群に由来する少なくとも1つのマーカーから選択されることを特徴とする、項目1〜13の一項に記載の方法。
(項目15)
上記神経ホルモンマーカーが、少なくとも1つのナトリウム利尿タンパク質、特にANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、proBNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列であることを特徴とする、項目1〜14の一項に記載の方法。
(項目16)
上記マーカーの並列または同時測定が実行されることを特徴とする、項目1〜15の一項に記載の方法。
(項目17)
上記測定が少なくとも1つの患者試料に対して実行されることを特徴とする、項目1〜16の一項に記載の方法。
(項目18)
上記測定が自動分析機、特にKryptorシステムを使用して実行されることを特徴とする、項目1〜17の一項に記載の方法。
(項目19)
上記測定が、迅速検査、特に単一パラメーター測定または多重パラメーター測定を使用して実行されることを特徴とする、項目1〜18の一項に記載の方法。
(項目20)
リスク層化が、予後、鑑別診断的早期発見および識別、重症度評価、ならびに予後評価のために、急性冠動脈症候群の治療と併せて実行されることを特徴とする、項目1〜19の一項に記載の方法。
(項目21)
急性冠動脈症候群、心筋梗塞、または狭心症のリスク層化のための、および/あるいは心筋梗塞あるいは狭心症の早期もしくは鑑別診断または予後のin vitro診断のための、プロバソプレシン(proAVP)あるいはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIの使用。
(項目22)
ナトリウム利尿タンパク質、特にANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、proBNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列と組み合わせた、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、および/または狭心症の診断のための、プロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIの使用。
(項目23)
プロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIを測定するための検出試薬、および場合により項目11から15の一項に記載の追加的なマーカー、および補助試薬を含有する、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、および/または狭心症のリスク層化用キット。
(項目24)
項目6から15の一項に記載の方法を実行するための診断デバイス。
(項目25)
ナトリウム利尿タンパク質、特にANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、proBNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列、および場合により項目11から15の一項に記載の追加的なマーカー、および補助試薬と組み合わせて、プロバソプレシン(proAVP)またはその断片および部分ペプチド、特にコペプチンまたはニューロフィジンIIを測定するための検出試薬を含有する、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、および/または狭心症の診断用キット。
驚くべきことに、proBNP(NT−ProBNP)とコペプチンとの組み合わせが、MI早期診断の感受性の著しい増加を可能にしたことが示された(表1を参照)。proBNP(NT−ProBNP)は、コペプチン>7.5pmol/Lおよび/またはproBNP(NT−ProBNP)>200pmol/mLを、例えば、対応する個々のマーカーに匹敵するおよそ95%の特異性で評価した結果、コペプチンの診断有効度より劣っていたが、個々のマーカーとしてのコペプチンの感受性と比較して、非事象群においては全ての時点で3〜6%の感受性の増加、および事象群においては6〜9.5%の増加を可能にした。
採血は、標準的な血清モノベット(monovetten)を使用して行った。20〜40分間の凝固時間後、2000gで15分間遠心分離を実施し、その後デカントにより血清を分離した。血清試料は、さらなる使用のために−20℃で保管した。
驚くべきことに、入院後180日以内に事象を示したMI患者は、事象を示さない患者よりさらに高いコペプチン濃度を示したことが示された。MI症状出現後の6時間以内に、コペプチンは、30pmol/Lの例示的カットオフ(閾値)で、およそ1:2の相対的リスクを示した(<30pmol/Lの患者と比較して、コペプチン>30の患者は、その後の事象について2倍のリスクを有した)。
上記の記載によりニューロフィジン用のラジオイムノアッセイを準備し(Pullan(上記))、神経下垂体ニューロフィジンを単離し定量した。このようにして、ウサギを免疫し、高力価の抗ニューロフィジン抗血清の回収をもたらした。最も高力価の抗血清を、イムノアッセイ用に1:100,000の濃度で使用した。クロラミンT法を使用して、精製ニューロフィジンを放射ヨウ素標識(radioiodize)し、アッセイにおいてトレーサーとして使用した。ウマ標準血清中の精製ニューロフィジンを希釈して、基準物質として使用した。アッセイは以下のように実行した。50−μLの試料または標準物質を、100μLのトレーサー(1測定当たり12,000dpm)および100μLの希釈された抗ニューロフィジン抗血清と混合し、4℃で24時間インキュベートした。100mMリン酸ナトリウム、pH7.5および0.1%BSAを、緩衝液として使用した。60%エタノールを加え、次に4℃および5,000gで15分間遠心分離することにより、抗体に結合したトレーサーを遊離トレーサーから分離した。上澄みを廃棄し、ペレット中の残留放射能を測定した。分析は、Multicalcソフトウェアを使用して実施した。アッセイは、22pg/mLの分析検出限界を有していた。アッセイは、400pg/mLまでの測定範囲を有していた。下記に記述するように、様々な患者に由来する血漿試料を測定するためにアッセイを使用した。>400pg/mLの測定値を有する試料は、測定範囲内の測定値をもたらすように適切に希釈して測定した。
急性心筋梗塞の66患者で、心筋梗塞の発生後6時間以内に試料を採取し、ニューロフィジンを測定した。比較の目的のために、200人の健康対照でニューロフィジンを測定した。心筋梗塞の診断についての受信者−操作者−特性分析(Receiver−Operator−Characteristics Analyse)は、0.95のAUCをもたらした。カットオフ値が213pg/mLの場合、62.6%の感受性が98%の特異性で得られた。カットオフ値が136.1pg/mLの場合、84%の感受性が95%の特異性で得られた。
急性心筋梗塞の66患者で、心筋梗塞の発生後6時間以内または梗塞後2日目に試料を採取し、ニューロフィジンを測定した。360日の期間、患者を観察した。この期間中、58患者は有害事象を示さず、8人が死亡、または心不全にため再入院した。
受信者−操作者−特性分析を使用して、心不全による死亡または再入院の予後についての最良のカットオフ値(感受性および特異性の最大積として定義された):777pg/mLを決定した。このカットオフ値では、予後の感受性は62.5%であり、特異性は73%だった。777pg/mLのカットオフ値における有害事象の尤度比は、2.3だった。
受信者−操作者−特性分析を使用して、心不全による死亡または再入院の予後についての最良のカットオフ値(感受性および特異性の最大積として定義された):261pg/mLを決定した。このカットオフ値では、予後の感受性は68.8%であり、特異性は73%だった。261pg/mLのカットオフ値における有害事象の尤度比は、2.6だった。
Claims (27)
- 急性冠動脈症候群の好ましくない予後を有する患者の識別のために、患者から採取した血液中のコペプチンまたはニューロフィジンIIをインビトロで測定する方法。
- 心筋梗塞および狭心症の好ましくない予後を有する患者の識別のための、請求項1に記載の方法。
- 前記患者が症候性および/または無症候性の患者である、請求項1または2に記載の方法。
- 患者が救急治療患者である、請求項3に記載の方法。
- 前記識別が、集中医療または救急医療において、急性冠動脈症候群、心筋梗塞(AMI)または狭心症(AP)の治療管理のためのものであることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記識別が、集中医療または救急医療において、薬物を用いたさらなる処置および治療についての臨床判断を下すためのものであることを特徴とする、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
- 検査対象患者における、心筋梗塞または狭心症の予後評価のためのin vitro指標のために、患者から採取した血液中のコペプチンまたはニューロフィジンIIをインビトロで測定する方法。
- 検査対象患者における、急性冠動脈症候群、心筋梗塞または狭心症の予後評価のためのin vitro指標のために、患者から採取した血液中のニューロフィジンIIをインビトロで測定する方法。
- 検査対象患者から採取した血液において、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、または狭心症の好ましくない予後を有する患者の識別のために、コペプチンまたはニューロフィジンIIを、ナトリウム利尿タンパク質との組み合わせでインビトロで測定する方法。
- ナトリウム利尿タンパク質がANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、proBNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列である、請求項9に記載の方法。
- 前記識別が、治療と組み合わせた予後評価のためのものであることを特徴とする、請求項9または10に記載の方法。
- 予後の指標については、コペプチンまたはニューロフィジンIIの10〜30pmol/Lもしくは10〜20pmol/Lのカットオフ(閾値)が、有意(特異的)であることを特徴とする、請求項1〜11のいずれか一項に記載の方法。
- 炎症マーカー、心臓血管マーカー、神経ホルモンマーカー、または虚血マーカーの群から選択される少なくとも1つの追加的なマーカーをさらに測定する、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記炎症マーカーが、C−反応性タンパク質(CRP)、TNF−アルファのようなサイトカイン、インターロイキン、プロカルシトニン(1〜116および3〜116)、および接着分子を含む群から選択されることを特徴とする、請求項13に記載の方法。
- インターロイキンがIL−6であり、接着分子がVCAMまたはICAMである、請求項14に記載の方法。
- 前記心臓血管マーカーが、クレアチンキナーゼ、ミオグロビン、ミエロペルオキシダーゼ、ナトリウム利尿タンパク質、心筋トロポニン、あるいはCRP、ならびに循環調節(プロ)ホルモンを含む群に由来する少なくとも1つのマーカーから選択されることを特徴とする、請求項13に記載の方法。
- ナトリウム利尿タンパク質がANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、pro−BNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列であり、循環調節(プロ)ホルモンがプロガストリン放出ペプチド(proGRP)、プロエンドセリン−1、プロレプチン、プロニューロペプチド−Y、プロソマトスタチン、プロニューロペプチド−YY、プロオピオメラノコルチン、プロアドレノメデュリン(proADM)、または各々の場合その部分配列である、請求項16に記載の方法。
- 前記虚血マーカーが、トロポニンIおよびT、ならびにCK−MBを含む群に由来する少なくとも1つのマーカーから選択されることを特徴とする、請求項13に記載の方法。
- 前記神経ホルモンマーカーが、少なくとも1つのナトリウム利尿タンパク質であることを特徴とする、請求項13に記載の方法。
- ナトリウム利尿タンパク質が、ANP(またはANF)、proANP、NT−proANP、BNP、proBNP、もしくはNT−proBNP、または各々の場合その部分配列である、請求項19に記載の方法。
- 前記マーカーの並列または同時測定が実行されることを特徴とする、請求項1〜20のいずれか一項に記載の方法。
- 前記測定が少なくとも1つの患者試料に対して実行されることを特徴とする、請求項21に記載の方法。
- 前記測定が、迅速検査を使用して実行されることを特徴とする、請求項21または22に記載の方法。
- 迅速検査が単一パラメーター測定または多重パラメーター測定である、請求項23に記載の方法。
- 前記識別又は予後評価が急性冠動脈症候群の治療と組み合わせた予後評価のために実行されることを特徴とする、請求項1〜24のいずれか一項に記載の方法。
- コペプチンまたはニューロフィジンIIを測定するための検出試薬および補助試薬を含有する、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、および/または狭心症の好ましくない予後を有する患者の識別用キット。
- さらに請求項13から20のいずれか一項に記載の追加的なマーカーの検出試薬を含有する、請求項26に記載のキット。
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