JP5223083B2 - 血管新生抑制剤 - Google Patents
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Description
細胞工学 Vol.14,No.4,1995,第426〜431頁
項1.フコキサンチン及び/又はフコキサンチノールを含む、血管新生抑制剤。
項2.フコキサンチン及び/又はフコキサンチノールを含み、糖尿病性網膜症、アテローム性動脈硬化症、肥満、II型糖尿病、リウマチ様関節炎、バセドウ病、カポジ肉腫、アルツハイマー病、歯周病、強皮症、緑内障、乾癬、加齢黄斑変性症からなる群より選択される少なくとも1種の疾患を治療又は予防するための医薬組成物。
項3.フコキサンチノールを含有する化粧料組成物。
項4.フコキサンチノールを0.000001〜10重量%含有する、項3に記載の化粧料組成物。
項5.しわ改善用である項3又は4に記載の化粧料組成物。
(1)血管新生抑制剤
本発明の血管新生抑制剤は、フコキサンチン及び/又はフコキサンチノールを有効成分する。
紫外線照射等による刺激によって皮膚(真皮)において血管新生が惹起されることが、しわが発生する1つの原因であると報告されている(日本化粧品技術者会第23回IFSCCオーランド大会論文報告会講演要旨集)。また、Yano et al., The Journal of Investigative Dermatology, Vol 118, No 5, May 2002においては、内因性の血管新生阻害物質(Thrombospondin-1)が、UV−B照射によって引き起こされる皮膚の脈管化(vascularization)、及びしわ形成を抑制することが確認された。このような知見から、血管新生の抑制がしわ等の皮膚老化を予防するうえで重要であることが知られている。
(1)ワカメからのフコキサンチン及びフコキサンチノールの抽出
市販の乾燥ワカメをブレンダーで粉砕したもの2gにエタノール100mLを加え、3時間スターラーで攪拌した。ろ過して得られたエタノール抽出物をHPLCで分析したところ、フコキサンチン390μgとフコキサンチノール9μgが含まれていた。
J.Nutr.131,2921−2927,2001の方法に従ってフコキサンチンを得た。
分離されたカロテノイド画分をプレートより掻き取り、再度抽出し、カロテノイド抽出物を得た。
(HPLC分取条件)
・流速 1.0mL/min
・カラム温度 40℃
・移動相
(A)アセトニトリル:メタノール:水=75:15:10(v/v/v,0.1%酢酸アンモニウムを含む)と
(B)酢酸エチル:メタノール=30:70(v/v,0.1%酢酸アンモニウムを含む)を用いた2液グラジエント
Wistar系の雄性ラット(6−8週齢、日本クレア株式会社製)をジエチルエーテルにより麻酔し、右大腿動脈切断により出血死させた後、胸部大動脈を取り出し1〜1.5mmの長さに切断した。この動脈片を6ウェル培養プレートに移し、コラーゲンゲル溶液(Cellmatrix type Ia、新田ゼラチン株式会社製)で包埋した後、37℃でゲル化させた。
HUVECを専用培地(HuMedia EG−2、クラボウ)中で1.5×104cells/mlになるように調製し、100μlずつ96well培養プレートに播種した。CO2インキュベーター中で一晩培養してHUVECをプレートに付着させた後、フコキサンチンを10〜100μMの濃度含む専用培地に交換し、CO2インキュベーター中で3日間培養した。フコキサンチンを添加していない専用培地100μlに交換した2時間後、Cell Counting Kit試薬(同仁化学研究所製)10μlを加えて450nmの吸光度をマイクロプレートリーダーで測定することによって、細胞増殖に与える影響を検討した。また、何も添加せずに培養した細胞をcontrolとして用いた。測定された細胞数に基づき、controlを100%とした場合の各濃度における細胞数の相対値を求めた。結果を表2に示す。
96well培養プレートに50μlのMatrigel(Becton Dickinson Bioscience)を加え、37℃のCO2インキュベーター中に1時間置きゲル化させた。HUVECを専用培地(HuMedia EG−2、クラボウ)に1.5×105cells/mlになるように懸濁した。ゲル化したMatrigel上に100μl(1.5×104cells)のHUVEC懸濁液を加えた。そして、フコキサンチンが10又は25μMの濃度になるように加えた後、CO2インキュベーター中で12時間培養した。形成した管腔構造を倒立顕微鏡下で撮影し、画像をコンピューターに取り込み、管腔構造の長さを測定した。また、何も添加せずに培養した細胞をcontrolとして用いた。得られた血管腔の長さに基づき、controlを100%とした場合の各濃度における管腔長(相対値)を求めた。結果を表3に示す。
Claims (3)
- フコキサンチノールを含有する化粧料組成物。
- フコキサンチノールを0.000001〜10重量%含有する、請求項1に記載の化粧料組成物。
- しわ改善用である請求項1又は2に記載の化粧料組成物。
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