KR101807954B1 - 산옥잠화 추출물을 함유하는 피하지방 감소 개선용 화장품 조성물 - Google Patents

Abstract

본원은 산옥잠화 추출물을 함유하는 피하지방 감소 개선용 화장품 조성물에 관한 것으로, 상기 추출물은 중간엽 줄기세포로부터 지방세포로 분화를 촉진시켜 지방조직을 증가시키며, 콜라겐 합성을 촉진키는 효과를 가지고 있어, 피하지방 감소 개선용 화장품에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

산옥잠화 추출물을 함유하는 피하지방 감소 개선용 화장품 조성물 {Cosmetic Composition comprising Hosta lancifolia extract having the effect of improving the loss of subcutaneous fat}

본 발명은 산옥잠화 추출물을 함유하는 피하지방 감소 또는 손실 개선용 화장품 조성물에 관한 것이다.

피하지방 조직은 피부의 볼륨과 강도를 좌우하는 역할을 하며 특히 얼굴 부위의 피부는, 노화가 진행됨에 따라 피하지방의 두께가 감소하여 주름이나, 탄력저하의 원인이 된다 (Fenske et al., J Am Acad Dermatol. 1986, 15:571-585; Rho et al., Bioorg Med Chem Lett. 2014, 24(9):2141-2145.). 그리고, 폐경기 여성에게 나타나는 호르몬, 혈액, 지방, 뼈 등의 대사 이상으로 인한 체내 지방의 재분포는 피부미용에 부정적으로 작용하고, 대사성 질환의 발병률을 높인다.

최근, 지방세포를 피하에 이식하는 성형시술이 광범위하게 진행되고 있다. 특히 리포필링(lipofilling)으로 불리기도 하는 지방 이식은 노화 피부의 주름 개선을 비롯하여, 코성형, 턱선 및 이마선의 교정, 화상이나 상처로 인하여 함몰된 피부, 암 절제 수술로 상실된 부분 등에 사용한다. 하지만 지방 이식 후 이식 부피의 40 ~ 60%가 소실되는 문제가 있다 (S Eremia et al., 2000, Dermatol. Sur. 26, 1150-1158; Fulton JE et al., 2001, Dermatol. Clin. 19(3), 523-530).

따라서 피부미용 관점에서는 피하지방을 이식할 때, 이식되는 지방조직을 유지하거나 증가시킬 수 있는 방법이 필요하다. 또한 이식이 아닌 다른 방법으로 지방세포를 증가시켜 피하지방층을 증가시킴으로써 피하지방이 감소되는 것을 억제하는 것이 필요하다. 이러한 피하지방층 증가를 주름개선 및 피부의 처짐 방지 등의 미용성형 분야에 유용하게 사용될 수 있다 (Hu S et al., Ann Plast Surg. 2007 Jun;58(6):602-607; Yoshimura K et al., Aesthetic Plast Surg. 2008 ;32(1):48-55). 최근 피부 진피와 피하지방의 지방조직이 외부 세균이나 피부 상재균으로부터 피부를 보호하는 자연면역(natural immunity, innate immunity)에 중요한 역할을 한다는 사실이 알려져 있다 (Zhang et al., Science. 2015, 347:67-71).

따라서 피하지방조직의 유지 및 보호는 피부미용 측면 뿐 아니라 피부면역기능에도 매우 중요하다.

한편, 현재까지 주름개선이나 피부의 탄력 증진을 기대하는 화장품은 진피의 콜라겐을 증가시키거나, 콜라겐을 분해하는 효소를 억제하거나, 세포외기질(extracellular matrix)의 항상성을 조절하는데 초점을 둔 것들이 대부분이다.

그러나, 피부의 기본적인 구조가 피하지방조직의 부피에 의해 유지되는 것임을 고려할 때, 지방 조직의 볼륨을 증가시키는 것이 피부의 볼륨 및 탄력을 유지하는 또 다른 해결책이 될 수 있을 것이다. 최근 지방세포에서 주로 만들어지는 사이토카인(cytokine)인 아디포넥틴(adiponectin)이 진피 섬유아세포의 콜라겐과 ECM의 생합성을 촉진시킨다는 보고가 있다 (Ezure and Amano. Biofactors. 2007, 31:229-236). 피하지방의 경우, 복부나 내장지방과는 달리 제2형 당뇨병의 인슐린 저항성과는 무관하다는 증거들이 최근 제시되고 있다 (Cnop et al., Diabetes. 2002, 51(4):1005-1015).

즉, 피하지방의 증가는 인슐린 감수성 측면에서 복부지방이나 내장지방에 비교하였을 때 피부 미용 측면에서의 장점과 피부의 자연면역 관점에서의 장점이 있다. 그러므로, 피하지방을 증가시키거나 아디포넥틴 생합성을 증가시키는 조성물은 노화를 방지하는 화장품, 피부미용, 피부성형 보형물의 보조제 등으로 유용하게 사용될 수 있을 것이다.

대한민국 등록특허 제1609345호에는 계혈등, 고량강, 독활 및 천련자 추출물 중 적어도 1종 이상을 포함하는 인간 중간엽줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진용 조성물이 개시되어 있으며, 대한민국 공개특허 제2012-0026689호에는 애엽 추출물을 포함하는 인간 중간엽줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진용 조성물이 개시되어 있다.

하지만 산옥잠화 또는 이의 추출물의 지방세포 분화 촉진에 대한 것은 전혀 개시되어 있지 않다.

본원은 산옥잠화 추출물을 함유하는 피하지방 감소 개선용, 즉 피하지방이 감소하는 것을 지연시키거나 또는 억제하는 화장품 조성물을 제공하고자 한다.

한 양태에서 본원은 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방조직의 피하지방 감소 개선용 화장품 조성물을 제공한다.

본원에 따른 조성물에 포함되는 추출물은 유기용매 추출물, 특히 에탄올 추출물이다.

본원에 따른 추출물 또는 이를 포함하는 조성물은 피하지방 조직의 피하지방 감소를 억제하여, 콜라겐 생성 촉진 등을 통해 피부 주름, 특히 노화에 의한 주름개선, 탄력 증가와 같은 피부케어용 화장품에 유용하게 사용될 수 있다.

이런 측면에서 본원은 다른 양태에서 산옥잠화 추출물을 포함하는 피부케어 화장품 조성물을 제공한다.

다른 양태에서 본원은 또한 산옥잠화 추출물을 포함하는 콜라겐 생성 촉진용 화장품 조성물을 제공한다.

또 다른 양태에서 본원은 또한 산옥잠화 추출물을 포함하는 피부 주름 개선용 화장품 조성물을 제공한다.

본원에 따른 추출물 또는 조성물에 의한 피하지방 조직의 피하지방 감소 억제는 피하지방 조직의 중간엽 줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진에 의한 것으로 이런 측면에서 본원은 또한 본원은 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방 조직의 중간엽 줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진용 화장품 조성물을 제공한다.

본원에 따른 추출물은 또한 상술한 바와 같은 다용한 용도를 위해 건강기능 식품으로 제공될 수 있다.

이런 측면에서 본원은 산옥잠화 추출물을 포함하는 콜라겐 생성 촉진용 식품 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서 본원은 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방 조직의 중간엽 줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진용 키트로 이러한 키트는 상기 목적을 위해 다양한 용도로 특히 인비트로에서 사용될 수 있다.

본 발명의 산옥잠화 추출물을 함유하는 피하지방 감소 억제용 화장품 조성물은 피하지방조직의 지방세포 분화를 촉진시키고 아디포넥틴을 증가시키는 효과를 나타낸다.

따라서 상기 조성물은 증가 된 지방세포 그리고 이로부터 분비되는 아디포넥틴에 의한 효과가 필요한 다양한 화장품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. 콜라겐 합성이 촉진되고, 피하지방층을 구성하거나, 피부노화에 따라 감소하는 지방세포를 유지함으로써 피부의 탄력을 늘리고 볼륨감을 주므로 피부지방 감소 개선 등의 피부미용 용도로 사용할 수 있다. 또한 피하지방층을 증가시키므로 생활습관 또는 노화 등으로 인한 주름 억제 또는 개선, 피부탄력 증가 또는 개선, 또는 피부의 처짐 방지 등과 같은 미용 성형에 효과적으로 사용될 수 있다.

상기 지방세포 분화 촉진 효과는 특정 부위의 지방조직에 한정되는 것이 아니며 예를 들어 지방층이 많은 안면부위는 물론, 여성의 가슴 부위 또는 둔부, 손등, 발등에도 적용 가능하다.

도 1은 본원의 일 구현예에 따른 산옥잠화 추출물에 의한 hAT-MSC의 지방분화 촉진 효과를 나타낸 것이다. 오일레드오(Oil Red O) 염색으로 hAT-MSC 지방분화 촉진 효과를 평가하였다.
도 2는 본원의 일 구현예에 따른 산옥잠화 추출물에 의한 hAT-MSC의 아디포넥틴 생합성 촉진 효과를 나타낸 것이다.
도 3은 본원의 일 구현예에 따른 산옥잠화 추출물에 의한 HDEs에서의 콜라겐 합성 촉진 효과를 나타낸 것이다.

본원은 생체 내 독성이 없는 천연물을 연구하고 검색하던 중 산옥잠화 추출물이 중간엽줄기세포가 지방세포로 분화하는 것을 촉진하고, 이에 따라 아디포넥틴이 증가시킨다는 발견에 기초한 것이다.

이에 한 양태에서 본원은 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방조직에 존재하는 피하지방 감소 개선 또는 억제용 화장품 조성물에 관한 것이다.

피하지방조직은 진피와 근막 사이에 위치하며 진피와 근막 사이를 느슨하게 결합시켜 주는 결합조직을 말하며 주로 지방세포로 구성된다. 피하지방조직에서 지방세포 분화가 촉진되면 피하지방조직층을 구성하는 지방세포가 증가되어 피부노화에 따라 감소하는 지방세포 수를 보충하고 일정 숫자로 유지 또는 증가하게 한다. 또한 상기 증가된 지방세포로부터 방출되는 물질로 인해 피부의 탄력을 증가시키게 하고 피부 볼륨감을 주면서, 피부 주름이 억제되고, 궁극적으로 피부노화가 개선된다.

본원의 산옥잠화 추출물은 중간엽 줄기세포로부터 지방세포로의 분화를 촉진하게 한다.

본원에 따른 조성물에 포함되는 추출물은 산옥잠화(Hosta lancifolia) 유래이다. 산옥잠화는 한국과 일본 등지에 주로 분포하며 산과 들판의 그늘진 습한 자리에 자생한다. 높이는 20 ~ 70cm까지 자라고 잎은 땅속에서 자라나며 생김새는 길쭉한 타원 꼴 또는 피침 꼴로 잎자루의 길이가 대략 10cm이다. 꽃은 7~8월에 피고 연한 보랏빛이며 뭉친 잎 사이에서 길이 60 ~ 100cm 쯤 되는 꽃대가 자라난다 (「몸에 좋은 산야초」, 2009. 11. 15., (주)넥서스). 식용뿐 아니라 약용으로는 理氣(이기), 補虛(보허), 和血(화혈), 止痛(지통)의 효능이 있다고 알려져 있다 (이미주, 2010, “한국의 야생화”, http://www.yasangwha.co.kr/).

본원에 사용되는 산옥잠화는 줄기가 주로 사용되나, 생리활성을 포함하는 한, 종피, 잎, 줄기, 뿌리, 종자 및 열매가 또한 사용될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 용어 "추출물(extract)"이란 천연물로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질을 의미한다. 상기 추출물은 물, 또는 적절한 유기용매 예를 들어, 메탄올, 에탄올 등, 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할 수 있으며, 추출물, 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다. 또한 상기 추출물에는 상기 추출과정을 거친 추출물을 분획한 것도 포함된다.

상기 용매는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 이로 제한하는 것은 아니나, 구체적으로는 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올, 프로판올 및 이소프로판올 등을 포함하는, 탄소수 1 내지 5의 저가 알코올, 에틸아세테이트 등의 극성용매와 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매와 같은 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있고, 특히 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매일 수 있으며, 더욱 특히는 물, 50 내지 100%의 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올일 수 있다. 본원에 따른 일 구현예에서는 유기용매, 특히 에탄올이 용매로 사용되어 우수한 효과를 나타낸다.

본원의 추출물은 통상의 식물 추출물의 공지된 일반적 제조방법을 사용하여 제조될 수 있으며, 특별히 제한되지 않는다. 예를 들면, 초음파 추출법, 환류 냉각 추출법, 열수 추출법 또는 상기 용매를 추출용매로 하여 공지의 방법에 의해 제조하는 방법일 수 있다 (예를 들어 Nomura T. Phenolic compounds of the mulberry tree and related plants. In: Herz, W.; Grisebach, H.; Kirby, G.W.; Tamm, Ch. (eds.) Fortschritte der chemie organischer naturstoffe. Springer-Veriag, Wien, 53:87-201 (1988)). 또한 추출과정을 거친 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획 시 용매는 2종 이상 개별적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하여 각 용매의 추출물을 제조할 수 있다. 추출물 제조온도는 4 내지 120℃일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 추출시간은 특별히 한정되지는 않으나 10분 내지 30일 일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다. 제조된 추출물은 이후 감압 여과 또는/및 동결건조하여 용매를 제거할 수 있다. 예를 들면, 산옥잠화에 용매를 1:1 내지 1:20 중량비로 가열 순환식 추출탱크에 넣고, 정제수 또는 식용 알콜을 가하여 80 내지 100℃에서 6-24시간 정도 추출한 후 여과하여 여액을 얻고, 잔여물에 다시 정제수 또는 식용 알콜을 가하여 동일한 과정을 수회 반복할 수 있다. 여액을 합하여, 그 자체로 사용하거나, 이를 진공 농축기로 감압하에서 농축한 후, 열풍 또는 동결 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 분쇄하여 사용할 수 있다.

본원의 일 구현예에서, 본 발명의 산옥잠화 추출물은, 재료 30g당 에탄올 10 내지 500ml를 가한 후 추출하는 방법으로 실시된다. 추출 온도는 약 30 내지 150℃일 수 있으나, 이에 한정되진 않는다. 추출시간은 한정되진 않으나 30분 내지 수일 일 수 있으며, 통상의 추출 기기나 초음파분쇄 추출기를 이용할 수 있다. 제조된 추출물은 이후 감압 여과 및 건조하여 사용될 수 있다. 본원에서 건조공정은 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조 또는 적외선건조 등을 포함하는 방법으로 수행할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본원에 따른 일 구현예에서 본원의 산옥잠화 추출물에 의하여 상기 중간엽 줄기세포로부터 지방세포로의 분화가 촉진되고 이에 따라 아디포넥틴 분비가 증가하고, 지방조직도 증가함으로써 피하지방 감소 개선이 이루어진다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "중간엽줄기세포"는 골수(bone marrow), 혈액, 진피 또는 골막에서 분리되는 줄기세포로서, 다양한 세포 예컨대 지방세포, 연골세포 및 뼈세포 등으로 분화할 수 있는 다능성 세포를 의미한다.

상기 중간엽줄기세포는 동물, 바람직하게는 포유동물, 보다 바람직하게는 인간 유래이다.

본 명세서에 사용된 상기 ‘아디포넥틴’은 지방 세포 분화 과정 중 지방세포에서 분비되는 대표적인 아디포카인(adipokine) 중 하나이다.

한편, 다른 일 구현예에서 본원의 상기 추출물은 콜라겐 합성을 촉진시킨다. 상기 콜라겐은 피부, 혈관, 뼈, 치아, 근육 등 모든 결합조직의 주된 단백질이다. 종래에는 콜라겐의 피부 보습 효과 및 상처 치유 효과를 이용하기 위하여 화장품 또는 연고 등과 같은 피부 외용제 조성물에 콜라겐을 배합하였으나, 콜라겐 자체의 경피 흡수가 어려워 상기 효과를 기대하기 어렵다. 하지만 본원의 상기 추출물과 같이 진피 등과 같은 조직에서 콜라겐 합성을 촉진시키면 인체에 안정하면서도 콜라겐의 효과를 기대할 수 있다.

즉, 본원에 따른 화장품 조성물은 지방조직을 이루는 지방세포의 분화를 촉진하고 아디포넥틴의 생합성을 증가시킴으로써 근본적으로 피부의 볼륨감을 증가시켜 줄 수 있고, 또한 콜라겐의 합성을 증가시켜, 결과적으로 피부의 탄력을 지속적으로 유지하고 주름을 개선시킬 수 있다.

이런 측면에서 본원은 산옥잠화 추출물을 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 화장품 조성물로 제공될 수 있다.

이런 측면에서 본원에 따른 조성물은 피부탄력 개선 또는 증가; 또는 피부 주름 개선 또는 주름 억제용 화장품 조성물로 제공될 수 있다.

이런 측면에서 본원에 따른 조성물은 피부케어 화장품 조성물로 제공될 수 있다. 이러한 피부케어 화장품 조성물은 특히, 습관 또는 노화에 의한 주름 억제, 개선, 피부 탄력 증가 또는 개선을 목적으로 사용될 수 있다.

따라서 본원에 따른 산옥잠화 추출물을 포함하는 화장품용 조성물은 미용 또는 성형 목적으로 사용될 수 있다.

본원에서 사용된 용어 ‘화장품’은 인체를 청결미화하여 용모를 밝게 변화시키거나 피부, 모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 물품을 의미하며, 인체에 대한 작용이 경미한 것을 말한다. 통상적인 의미로서, 샴푸, 린스, 로션, 크림, 오일, 세정용 제품 및 기능성 화장품을 모두 포함한다. 기능성 화장품이란 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 화장품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 화장품군이나 화장품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 화장품을 의미한다.

본원에 따른 화장품 조성물은 화장품, 예를 들면, 크림, 앰플, 스킨, 에센스, 샴푸, 비누 등으로 제공될 수 있으며, 다른 측면에서 기초 화장품 조성물(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 보디오일), 색조 화장품 조성물(화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 또는 마스크 또는 팩의 형태로 제조될 수 있다.

본원에 따른 화장품 조성물이 적용될 수 있는 부위는 신체의 특정 지방 조직에 한정되는 것은 아니며 예를 들면, 지방층이 많은 여성의 가슴 부위, 손등, 발등 및 둔부를 포함할 수 있다. 적용되는 부위에 다양한 투여 경로, 예를 들면 전신 또는 국소, 특히 국소 투여, 경피, 또는 주사, 특히 경피 경로로 투여될 수 있다.

본원에 따른 화장품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본원의 산옥잠화 추출물을 포함하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 화장품, 예를 들면 크림의 경우, 식물성 오일, 유화제, 증점제, 향료, 물, 산화방지제, 및 UV 흡수제를 포함 할 수 있다.

본원에 따른 조성물에 포함되는 추출물의 함량은 목적하는 제품의 구체적 용도 또는 제형 등에 따라 달라질 수 있으나, 전체 조성물 중에 약 0.001 내지 약 50 중량% 로 포함될 수 있으나, 이 범위를 벗어나는 것을 제외하는 것은 아니다.

본원의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 상기 추출물 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및/또는 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.

본원의 화장용 조성물은 공액리놀레산, 리놀레산, 감마-리놀레산, 알파-리놀레산을 포함하는 불포화지방산 또는 프로필렌 글리콜을 포함하는 수용성 기제 물질을 포함할 수 있다.

또한 본원의 화장용 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 마스크, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본원에 따른 화장품 조성물은 화장품용으로/피부학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. "화장품용으로/피부학적으로 허용가능한"은 지나친 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 조직(예를 들어, 피부 또는 모발)과 접촉하여 사용하기에 적합함을 의미한다.

본원 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리움 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다. 바람직한 투여 유형에 따르면, 본 발명의 조성물은 최소한 하나의 약학적으로 허용되는 부형제, 특히 피부학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있다.

또한, 상기 각 제형의 피부용 조성물에 있어서, 상기한 필수 성분 이외의 다른 성분들은 기타 피부용 조성물 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 선정하여 배합할 수 있다.

본 발명의 조성물은 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 투여 시에도 안심하고 사용할 수 있다.

한편, 지방세포에서 아디포넥틴이 분비되는데 상기 아디포넥틴은 인슐린 감수성을 증가시켜 혈당을 낮추는 효과를 지닌다. 본원의 상기 산옥잠화 추출물은 지방세포 분비를 촉진시키고, 이에 따라 아디포넥틴을 증가시키므로, 2차 당뇨병 등과 같은 대사성 질환에 유용하게 사용될 수 있다.

이에 다른 양태에서 본 발명은 산옥잠화 추출물을 함유하는 대사성 질환 예방 및 치료용 조성물 또는 대사성 질환의 개선을 위한 건강식품으로 제공될 수 있다.

상기 대사성 질환은 비만, 제2형 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질병을 말한다.

본 발명에 따른 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 '약학적으로 유효한 양'의 산옥잠화 추출물을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 유효한 양'이란 대사성 질환을 예방, 개선 및 치료하기에 충분한 양을 말한다. 본 발명에 따른 산옥잠화 추출물의 약학적으로 유효한 양은 0.5 ~ 100 mg/day/체중kg, 바람직하게는 0.5 ~ 5 mg/day/체중kg 일 수 있다.

또한 본 발명은 상기 기술한 본원의 추출물을 포함하는 조성물은 식품, 예를 들면, 건강보조식품, 기능성 식품, 식품첨가제 등으로 제공될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 용어 "식품"이란 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 기능성식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다.

본 명세서에서 사용된 용어 "기능성 식품"이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 특히 "건강기능식품"을 포함한다.

본 명세서에서 사용된 용어 "건강보조식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 가공한 식품으로서, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 건강보조의 목적으로 특정성분을 원료로 하거나 식품원료에 들어있는 성분을 추출, 농축, 정제, 혼합 등의 방법으로 제조, 가공한 식품을 말한다.

상기 기능성 식품 및 건강보조식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 더욱 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본원의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스낵류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효 음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

일 구현예에서는 기능성 음료로 제조되며, 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미하며, 특히 피부 탄력 향상, 콜라겐 합성 촉진을 위한 음료를 의미한다.

본원의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위해서 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 본 발명이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예

실시예 1. 산옥잠화 추출물의 제조

산옥잠화 30g을 에탄올(95.0 ~ 95.5v/v%), 200ml에 넣은 다음 ASE300 ACCELERATED SOLVENT EXTRACOR (DIONEX Corporation) 기기를 이용하여 50도씨에서 1500psi 압력하에 20분간 분쇄하였다. 또한 Ultrasonic cleaner (BRANSON Ultrasonics corporation) 소니케이터 기기를 이용하여 50도씨에서 3일 정도 추가 분쇄하였다. 이렇게 분쇄된 산옥잠화 추출물을 Modul spin 40 (Biotron corporation) 기기를 이용하여 40도씨에서 24시간 동안 건조하였으며, 사용 전 70% 에탄올에 녹여서 사용하였다.

실시예 2. 산옥잠화 추출물에 의한 지방세포 분화 촉진 효능

실시예 2-1. 인간의 지방유래 중간엽줄기세포 배양

인간의 지방유래 중간엽줄기세포(human adipose tissue derived mesenchymal stem cells, hAT-MSCs)(Lonza, Inc. Walkersville, MD, USA)는 제조사의 설명서에 따라 배양하였다.

실시예 2-2. 산옥잠화 추출물의 지방세포 분화 촉진 효능

hAT-MSC의 지방세포 분화는 인도메타신(indomethacin)을 제외한 채로 제조사의 방법에 따라 유도하였다. 구체적으로, 중간엽줄기세포의 배양액에 인슐린 1μg/ml, 덱사메타손(Dexamethasone, DEXA) 1μM, 이소부틸메틸잔틴(isobutylmethylxanthine, IBMX) 0.5mM 을 넣고 배양하여 hAT-MSC를 지방세포로 분화시켰으며, 실험군의 경우 지방세포 분화 유도시에 산옥잠화 추출물을 50μg/ml 과 25μg/ml 농도로 배지에 첨가하였다. 양성 대조군으로는 글리벤클라마이드(Glibenclamide) 10μM 과 아스피린(Aspirin) 300μM 을 각각 사용하여, IDX 배지와 같이 처치하였다. 중간엽줄기세포의 지방세포 분화를 시작한 지 14일 후, 세포 배양액을 제거하고, 10ml의 인산염 완충액(Phosphate Buffered Saline, PBS)으로 세포를 세척한 후, 10% 포르말린/PBS 용액 0.2ml/cm²을 사용하여 세포를 10분간 고정시켰다. 고정된 세포를 60% 이소프로판올 용액 0.5ml/cm²로 1회 세척하고, 오일레드오(Oil Red O)를 60% 이소프로판올에 녹인 염색액 0.2ml/cm²로 10분간 지방세포 내의 지질체를 염색하였다. 이어서, 헤마톡실린(hematoxylin)으로 재염색을 행하여 세포핵을 쉽게 구분되도록 한 후 현미경으로 관찰하였고 그 관찰 결과를 도 1에 나타내었다. 도 1에서 볼 수 있는 바와 같이, 산옥잠화 추출물은 중간엽줄기세포의 세포 사멸을 유도하지 않으면서 지방세포의 분화를 촉진하였다.

실시예 3. 산옥잠화 추출물에 의한 인간의 중간엽줄기세포의 지방세포 분화 촉진 효과의 정량적 측정

상기 실시예 2에서와 같이 중간엽줄기세포로부터 지방세포의 분화를 유도한 후 마지막 배지 교체를 한 후 이틀 뒤 세포배양 상층액에서 아디포넥틴의 발현양을 측정하여, 지방분화 촉진 효과에 대한 정량적 비교를 실시하였다. 아디포넥틴(adiponectin)은 지방세포에서 분비되는 대표적인 아디포카인(adipokine) 중 하나로서, 항당뇨작용을 비롯하여 다양한 효능을 나타내는 것으로 보고되어 있다. 예를 들어 당뇨병에 있어서 아디포넥틴은 인슐린 감수성을 증가시켜 혈당을 낮춤으로써 당뇨병을 예방하는 효능을 나타낸다. 이러한 아디포넥틴은 지방세포가 분화되면서 발현이 증가하는 단백질로 알려져 있다. 아디포넥틴과 다른 사이토카인의 측정은 알엔디시스템사(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA)의 DuoSet Kit를 사용하였다. 결과로 도 2에서 볼 수 있는 바와 같이, IDX 에 의해 지방세포로의 분화를 유도한 경우, 산옥잠화 추출물이 처리되지 않은 것에 비해 중간엽줄기세포의 지방세포 분화가 산옥잠화 추출물이 처리된 실험군에서 아디포넥틴의 발현양이 통계적으로 유의성 있게 증가하는 것으로 나타났다. 통계는 일원분산분석(ANOVA) 후, post hoc test를 수행하여 검증하였으며, p 값이 0.05 이하일 때 유의적인 차이가 있는 것으로 표시하였다.

실시예 4. 산옥잠화 추출물에 의한 사람의 섬유아세포에서 콜라겐 합성 촉진 효과

사람의 섬유아세포(human dermal fibroblast, HDFs)(Lonza, Inc. Walkersville, MD, USA)는 제조사의 방법대로 배양하였다. 콜라겐 타입1(BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA)과 상기 섬유아세포를 이용해 인공진피모델(human dermal equivalents, HDEs)을 만들었다. 구체적으로 인공진피의 콜라겐 농도는 1mg/ml로 만들었으며 콜라겐과 섬유아세포 혼합물을 37.8℃에서 60분 동안 중합을 진행시켰다. 3차원 콜라겐 겔(3-dimensional collagen gel)이 수축을 시작하기 전인 2 ~ 3일 이내에 실험을 진행했다. 인공진피모델에서 콜라겐 타입1 합성을 측정하기 위해 상층액을 취하여 프로콜라겐 타입1 C-펩타이드(Procollagen type I C-peptide, PICP)를 PICP ELISA kit (Takara Bio, Shiga, Japan)를 이용해서 정량적으로 확인했다. 결과로 도 3에서 볼 수 있는 바와 같이, 대조군에 비해 IDX를 처리한 경우에 HDEs에서 콜라겐 합성이 소폭 증가했고, 산옥잠화 추출물이 처리되지 않은 것에 비해 산옥잠화 추출물이 처리된 실험군에서 통계적으로 유의성 있게 콜라겐 합성이 증가함을 발견하였다. 통계는 일원분산분석(ANOVA) 후, post hoc test를 수행하여 검증하였으며, p 값이 0.05 이하일 때 유의적인 차이가 있다고 표시하였다.

이상에서 본원의 예시적인 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본원의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본원의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본원의 권리범위에 속하는 것이다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.

Claims (9)

1. 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방조직의 피하지방 감소 개선용 화장품 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서, 상기 추출물은 유기용매 추출물인, 피하지방 조직의 피하지방 감소 개선용 화장품 조성물.
   
3. 삭제
4. 산옥잠화 추출물을 포함하는 피부탄력 증가 또는 개선용 화장품 조성물.
   
5. 삭제
6. 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방 조직의 중간엽 줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진용 화장품 조성물.
   
7. 삭제
8. 삭제
9. 산옥잠화 추출물을 포함하는 피하지방 조직의 중간엽 줄기세포의 지방세포로의 분화 촉진용 키트.

Images