JP5106109B2 - コラーゲン産生増強剤とその用途 - Google Patents

Description

本発明は、新規なコラーゲン産生増強剤及びコラーゲン産生増強用の組成物、詳細には、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を含んでなるコラーゲン産生増強剤及び当該コラーゲン産生増強剤を含有するコラーゲン産生増強用の組成物に関する。
背景技術

今日、高齢化社会を迎え、世の中の多くの中高年齢者、とりわけ、女性にとって、老化に伴う皮膚の厚みの減少、新陳代謝の低下などの変化や骨密度の低下は、悩みの種であり、特に、顕著に感じられる、顔面のコジワ・シワ、弛みの発生、張りの消失、皮膚の弾力の減少などにともなう容貌の変化は、その代表的なものである。これまでにも、皮膚の保湿性を確保するためにコラーゲンや、ヒアルロン酸などのムコ多糖を配合した化粧品が、老化防止用の化粧品として開発されてきたものの、それだけでは、皮膚の老化防止に充分な効果は得られていない。近年、老化に関する研究が進んだことにより、真皮を形成するコラーゲン線維の顕著な減少が、皮膚の老化の主要な原因となっていることが明らかになってきた。そして、顔面のコジワやシワの発生、張りの消失、弛みの発生、皮膚の弾力の低下などの容貌の変化の原因は、コラーゲン線維の減少と関係していることが示唆されてきており、皮膚の老化の原因には様々なものがあるものの、結局は、真皮に存在する線維芽細胞のコラーゲン産生能の低下や、線維芽細胞自身の増殖性の低下により、コラーゲンの代謝が低下することに帰結する。

また、線維芽細胞におけるコラーゲンの産生量の低下は、単に皮膚の老化を進行させるのみでなく、皮膚の重要な機能の一つである生体防御能の低下や、さらには、骨や血管をはじめとするコラーゲンによりその構造が維持されている体内の組織、臓器の脆弱化を引き起こし、健康に支障をきたす原因となる。しかしながら、コラーゲンは蛋白質であり、経口摂取や皮膚表面に塗布しただけでは、直接体内に吸収されにくいし、まして、線維芽細胞のコラーゲン産生活性を増強することはできないので、皮膚の老化の根本的な予防・治療とはなり得ない。そこで、皮膚、血管、骨をはじめとする組織の老化防止や健康の維持・増進などを目的として、真皮や骨、血管をはじめとする組織・臓器の主要な構成成分であるコラーゲンの産生を持続して、健常レベルに増強することが可能で、且つ、安全なコラーゲン産生増強剤の開発が望まれており、例えば、Ｌ−アスコルビン酸の誘導体やローヤルゼリーを配合したコラーゲン産生増強剤が提案されている（特開２００３−１７１２９０号公報参照）。また、グルコースなどの糖質がコラーゲンの産生を増強することも報告されている（例えば、ハン ディー シー（Ｈａｎ Ｄ． Ｃ．）ら ジャーナル オブ ジ アメリカンソサイアティー オブ ネフロロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ）、第１０巻、第９号、第１８９１−１８９９頁（１９９９年）参照）。しかしながら、これらの成分も、組成物の配合処方や使用条件などによっては、安定性などの点で問題となる場合があり、新規コラーゲン産生増強剤の開発が望まれている。

一方、α，α−トレハロースは、２分子のグルコースが還元性基同士で結合してなる二糖類であり、その糖質誘導体は分子内に当該α，α−トレハロース構造を有する３個以上のグルコースからなる非還元性の糖質で、これらの糖質は何れも、食品、化粧品、医薬部外品或いは医薬品などの分野において、蔗糖などに代わる糖質として、保湿作用、澱粉の老化防止、脂質の劣化抑制、蛋白質の変性抑制などの特性を利用した飲食品や皮膚外用剤用の需要が急速に伸びつつある。

α，α−トレハロース及びこのα，α−トレハロースの糖質誘導体は公知の物質であり、例えば、同じ出願人により、これら糖質の製造方法やその用途に関する特許も多数出願されている（例えば、特開平７−１４３８７６号公報、特開平７−２１３２８３号公報、特開２０００−２２８９８０号公報、国際公開ＷＯ ２００４／０５６２１６号明細書参照）。また、α，α−トレハロースは、コラーゲン産生増強剤の賦形剤としての使用も開示されている（例えば、特開２００３−１７１２９０号公報参照）ものの、これらの文献には、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体が、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に顕著な増強作用を発揮することについての記載はなく、また、示唆もされておらず、これまで、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体が、コラーゲン産生を増強する点に着目したものはない。

本発明は、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を効果的に増強する手段を提供することを課題とする。

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体が、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を極めて効率よく増強するという予想外の知見を見出し、本発明を完成した。

本発明は、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体が、ヒトを含む動物に対して、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を顕著に増強する作用を示すという知見に基づくものである。また、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体は、安定で、かつ、安全で、重篤な副作用の懸念もないので、長期連用が可能であり、ヒトを含む動物類が簡便かつ快適に、皮膚の老化防止、美容と健康の維持・増進、骨や血管の強化等のために利用することができる。

本発明で使用するα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体はヒトを含む動物においてＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を増強する作用を発揮するので、いずれもこの発明において有利に用いることができる。したがって、本発明のコラーゲン産生増強剤においては、これらのα，α−トレハロース及びα，α−トレハロースの糖質誘導体の１種又は２種以上が全体として有効量含まれてさえいればよい。

本発明で使用するα，α−トレハロース及びα，α−トレハロースの糖質誘導体は、発酵法、酵素法、合成法など種々の方法で調製することができ、これらを含有するシラップ、マスキット、非晶質粉末、含密結晶粉末、結晶などが有利に利用できる。このα，α−トレハロース及びα，α−トレハロースの糖質誘導体は、必ずしも高度に精製されておらずともよく、調製の過程で共存する他の糖質との未分離組成物としての形態、それらを部分精製、或いは、高度に精製したものであってもよく、或いは、製造工程で共存する還元性糖を水素添加して糖アルコールに変換したものであってもよく、ヒトを含む哺乳類においてＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生増強作用を実質的に妨げない他の適宜の成分との混合物の形態であってもよい。なお、本発明は、α，α−トレハロースやその誘導体の調製に関するものではないので詳細な説明は略するけれども、経済性を問題にするのであれば、例えば、特開平７−１４３８７６号公報、特開平７−２１３２８３号公報、特開２０００−２２８９８０号公報、国際公開ＷＯ ２００４／０５６２１６号明細書などに開示された非還元性糖質生成酵素及びトレハロース遊離酵素を澱粉部分加水分解物に作用させる方法が好適である。この方法によると、廉価な材料である澱粉から、α，α−トレハロースやα，α−トレハロース含有糖質が高収率で得られる。ちなみに、斯かる方法により調製されたα，α−トレハロースの市販品としては、含水結晶トレハロースを固形物換算で９８質量％以上含有する食品級のα，α−トレハロース粉末（株式会社林原商事販売、商品名「トレハ」）がある。また、α，α−トレハロースの糖質誘導体を含有する糖質としては、例えば、α−マルトシルα，α−トレハロースを無水物換算で５０質量％以上含有し、その他のα，α−トレハロースの糖質誘導体を無水物換算で約７質量％含有する市販のシラップ（株式会社林原商事販売、商品名「ハローデックス」）や、これを水素添加して共存する還元性糖質をその糖アルコールに変換した、α−マルトシルα，α−トレハロースを無水物換算で５０質量％以上含有し、その他のα，α−トレハロースの糖質誘導体を無水物換算で約１０質量％含有するシラップ（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）がある。

本発明で使用するα，α−トレハロースの糖質誘導体は、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を増強できるものであれば、特に制限はない。具体的には、分子内にトレハロース構造を有する３個以上のグルコースからなる非還元性オリゴ糖から選ばれる１種又は２種以上の糖質であれば、いずれでもよい。より具体的には、α，α−トレハロース分子の少なくとも一方のグルコースに、モノ−グルコース、ジ−グルコース、トリ−グルコース及びテトラ−グルコースから選ばれる何れかが結合したものなどをいう。

上記のα，α−トレハロースの糖質誘導体のなかでも、α−グルコシルα，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、α−マルトトリオシルα，α−トレハロース及びα−マルトテトラオシルα，α−トレハロースなど、分子の末端にトレハロース構造を持つ糖質が、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生の増強作用が強く、本発明に有利に利用できる。とりわけ、国際公開ＷＯ ２００４／０５６２１６号明細書などに開示されたα−マルトシルα，α−トレハロースを主成分として含有し、他に、α−グルコシルα，α−トレハロース、α−マルトトリオシルα，α−トレハロース、これら以外のα−グリコシルα−グルコースから選ばれる１種又は２種以上を含有する糖質が望ましい。この場合、全糖質に対して、α−マルトシルα，α−トレハロースを、無水物換算で、約５質量％以上、望ましくは約１０質量％以上、さらに望ましくは約３０質量％以上含有する糖質が望ましい。

本発明のコラーゲン産生増強剤には、そのコラーゲン産生増強作用を妨げない範囲で、ブドウ糖、果糖、グルコサミン、ラクトース、蔗糖、α，β−トレハロース、β，β−トレハロース、ラクトスクロース、マルトオリゴ糖、水飴などの糖類、サイクロデキストリンや同じ出願人による国際公開ＷＯ ０２／１０３６１号明細書などに記載のサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖、或いは、特開平２００５−９５１４８号公報（特願２００４−１７４８８０号明細書）などに記載のサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖などの環状の糖類、エリスリトール、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、還元水飴などの糖アルコール類、アスパルテーム、ステビア抽出物、スクラロース、アセスルファムＫなどの高甘味度甘味料、プルラン、カラギーナン、コンドロイチン硫酸などのムコ多糖体やその塩類、天然ガム類、キチン、キトサン、カルボキシメチルセルロースをはじめとする合成高分子ポリマー、コラーゲン、ゼラチンなどの増粘剤の何れか１種又は２種以上を添加することができる。

また、本発明のコラーゲン産生増強剤には、α，α−トレハロース及びα，α−トレハロースの糖質誘導体以外のもの、例えば、特開平１０−２０３９５２号公報に開示されているブナ科ブナ属の木の芽からの抽出物などのα，α−トレハロース及びα，α−トレハロースの糖質誘導体以外のコラーゲン産生増強作用を持つ成分も、必要に応じて配合することができる。さらに必要に応じて、海洋深層水、牡蠣殻カルシウムなどのミネラル類、乳化剤、香料、香辛料、色素、例えば、ビタミンＢ_１、ビタミンＢ_２、ビタミンＢ_６、ビタミンＢ_１２、Ｌ−アスコルビン酸、ビタミンＥ、ルチン・ヘスペリジン・ナリンジンなどのビタミンＰ類或いは、これらビタミン類の誘導体などのビタミン類や、アミノ酸類、ＣｏＱ１０（コエンザイムＱ１０）、アデノシンやその誘導体、それらのモノフォスフェイト、ジフォスフェイト或いはトリフォスフェイトなどの塩基類などの成分を１種又は２種以上を含有させることも有利に実施できる。なかでも、コンドロイチン硫酸などのムコ多糖類、ＣｏＱ１０（コエンザイムＱ１０）、アデノシンやその誘導体、それらのモノフォスフェイト、ジフォスフェイト或いはトリフォスフェイトなどの塩基類を併用すると、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体のコラーゲン産生増強作用をさらに増強することもできる。これらの成分の選択基準は、通常、本発明のコラーゲン産生増強剤の各々の利用分野の必要性に応じて適宜選択される。

本発明でいうＬ−アスコルビン酸類とは、Ｌ−アスコルビン酸及びその誘導体を意味し、そのままで、或いは、酵素などにより分解や修飾されるなどして、線維芽細胞のコラーゲン産生を誘発する作用を発揮できる物質を意味する。具体的には、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシドなどのＬ−アスコルビン酸配糖体、Ｌ−アスコルビン酸配糖体のアシル化誘導体、Ｌ−アスコルビン酸のリン酸エステルや硫酸エステルやこれらの塩類などがある。通常、ヒトを含む動物の生体内には、線維芽細胞のコラーゲン産生に必要な量のＬ−アスコルビン酸が存在するので、本発明のコラーゲン産生増強剤に、Ｌ−アスコルビン酸類を加える必要は無いが、生体内のＬ−アスコルビン酸量の不足によりコラーゲン産生が低下している場合には、Ｌ−アスコルビン酸類を併用することが望ましい。その場合のＬ−アスコルビン酸類の使用量の基準は、ヒトを含む動物のコラーゲン産生に必要とされる量を、本発明のコラーゲン産生増強剤の各々の利用分野に応じて適宜選択すればよい。

本発明のコラーゲン産生増強剤の使用方法について、ヒトの場合を例にとって説明すると、本発明のコラーゲン産生増強剤は経口的に使用しても非経口的に使用してもコラーゲン産生増強作用を発揮する。また、本発明のコラーゲン産生増強剤は、上述のような作用故に、経口的及び非経口的使用のいずれの場合にも、コラーゲン産生の増強に有効である。使用目的にもよるが、通常、食品又は液剤、シロップ剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの形態で経口的或いは経管的（経胃、経腸など）に摂取するか、皮膚外用剤として経皮的に投与してもよく、場合によっては、点眼剤、注射液、輸液、腹腔や胸腔の灌流液、臓器・傷口・眼・鼻腔・火傷、炎症部位などの洗浄液・消毒液、腹膜透析液、組織や臓器の保存液などの形態で非経口的に使用することで、対象部位のコラーゲン産生を増強し、組織や臓器の強化や傷口・火傷・炎症部位の治癒の促進などにも有利に利用できる。なお、本発明でいう皮膚外用剤は、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を配合した組成物が直接皮膚に接触するものであれば、何れでもよく、化粧品、医薬部外品、医薬品だけでなく、洗剤などの雑貨類なども含む。

本発明のコラーゲン産生増強剤は、ヒトを含む動物類に、経口的、経皮的、或いは注射（腹腔内等の灌流を含む）のいずれの経路で投与した場合にも、その有効成分が速やかに生体内に吸収されて、真皮、組織、骨、臓器などに存在する線維芽細胞におけるＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を増強するので、ヒトを含む動物類が当該コラーゲン産生増強剤を摂取すると、コラーゲンの産生が安定的に増強されて、加齢に伴う老化、透析、炎症を伴う疾患や手術などにより発生する組織の障害や、紫外線をはじめとする因子によりダメージを受けた皮膚などでのコラーゲン産生能の低下を回復し、皮膚に張りや潤いを与え、コジワ・シワを除去し、皮膚の弾力を回復したり、骨や血管をはじめとする各種組織、臓器を強化したり、創傷を治癒する効果を奏することができる。また、特に、経皮投与にあっては、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体が、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を持続して増強して、その皮膚の真皮や角化層を、強化して生体防御能を増強すると共に、肌の荒れを抑制・改善することから、加齢に伴う老化や、紫外線や有害微生物などをはじめとする因子によりダメージを受けた皮膚のコラーゲン産生能の低下を速やかに回復し、皮膚に張りや潤いを与え、コジワ・シワを除去し、肌の荒れや皮膚の弾力を回復したり、頭皮を含む皮膚に適用する化粧品として利用する場合にも、上記の作用効果による皮膚疾患の予防ならびに当該疾患に対する治療効果の改善や発育毛・育毛などに奏効する。さらに、本発明のコラーゲン産生増強剤及び／又はそれを含有する組成物を化粧品などとして皮膚に直接塗布する場合は、必要に応じて、例えば、同じ出願人による国際公開ＷＯ ０１／６０３８８号明細書などに開示されたイオン導入具を用いることによって、皮膚への浸透を促進してもよい。従って、本発明のコラーゲン産生増強剤は、シワやコジワの発生の抑制剤や改善剤、発毛・育毛剤、組織の強化剤などとしても利用することができる。しかも、本発明のコラーゲン産生増強剤は、ヒトを含む動物が簡便に利用できて、健康の維持・増進にも利用でき、例えば、強壮剤や、健康食品、健康補助食品、特別用途食品、保健機能食品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、ペットフード、雑貨などの形態で利用することもできる。

本発明のコラーゲン産生増強剤の摂取量又は投与量は、対象とするヒトをはじめとする動物やペットなどの種類、齢、性別などによって異なるものの、無水物換算でα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を、体重１ｋｇあたり、通常、０．００１ｇ乃至２ｇ、望ましくは、０．０１ｇ乃至１ｇを経口的（経管投与を含む）或いは経皮投与以外の非経口的に、１日１回又は数回に分けて、効果に応じて、連日又は１日以上の間隔をおいて摂取するか、或いは、投与すればよい。経口的に投与される強壮剤、健康食品、健康補助食品、特別用途食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、ペットフードなどでは、例えば、液剤、錠剤、粉末剤、顆粒剤、ペースト剤、シラップ剤、カプセル剤など、各々の用途に応じた形態のものを用いることができる。この場合、通常、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を、無水物換算で０．１質量％以上、望ましくは、１質量％以上含有する。また、本発明のコラーゲン産生増強剤を、化粧品などとして皮膚に直接接触させる皮膚外用剤の場合には、当該コラーゲン産生増強剤に使用されるα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体は、無水物換算で、皮膚外用剤全量中、０．１質量％乃至２０質量％、好ましくは、１質量％乃至２０質量％であり、安定した効果を得るには２質量％乃至２０質量％が特に望ましく、１日１回又は数回に分けて、効果に応じて、連日又は１日以上の間隔をおいて皮膚に噴霧や塗布などの方法で接触させればよい。２０質量％よりさらに増量しても効果に差が無いだけでなく、皮膚外用剤の形態によっては、物性面や使用感等で配合処方上の問題が発生する場合があるので、これを配合量の上限とした。なお、皮膚外用剤の物性面や使用感等で好ましくない場合以外は、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体の皮膚外用剤への配合量に上限はない。また、α，α−トレハロースの誘導体を配合した皮膚外用剤にベタ付き感が認められる場合には、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリグルタミン酸ナトリウム、スクレログルカン、クインズシードエキス、プルランなどの水溶性多糖類等の増粘剤やエタノールを併用するか、ブチレングリコールとグリセロールとを、質量比で１：２０乃至２０対１の割合で配合すればよい。

本発明のコラーゲン産生増強剤は、上記で述べたようにそれ自体で有用である一方、他の成分に配合してなる組成物の形態としても有利に利用できる。本発明のコラーゲン産生増強剤を含有する組成物を製造するには、対象とする動物類やその摂取方法又は投与方法などに応じて選ばれる適宜の組成にしたがって、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体と、以上に示したような飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、ペットフードの分野の何れかにおいて使用することのできる１種又は２種以上の成分とを、個々の含量に基づいて、目的に応じて混合するなどの工程を適宜実施し、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を含有する組成物を調製し、必要に応じて所望の形状に成形すればよい。本発明のコラーゲン産生増強剤或いはこれを含有せしめた組成物の調製は、その各成分を、原料の段階から製品の段階に至るまでの適宜の工程、或いは、既存の製品に対して、例えば、希釈、濃縮、乾燥、濾過、遠心分離、混和、混捏、溶解、融解、分散、懸濁、乳化、浸漬、浸透、散布、塗布、被覆、噴霧、注入、晶出、固化、逆ミセル化などの方法の１種又は２種以上を適宜組み合わせて、実施することができる。なお、上記医薬品などのように、経口・経腸摂取や皮膚への適用以外の方法による生体内への投与目的の製剤などは、菌及びパイロジェンを除去しておくのが望ましい。

本発明で用いる、ヒトを含む動物への経口的又は経皮的適用ないしは皮膚外用に許容される成分としては、上記或いは上記以外の、本発明の組成物の個々の利用分野で通常使用される、例えば、水、アルコール、澱粉質、蛋白質、アミノ酸、線維質、糖質、脂質、脂肪酸、ビタミン、ミネラル、着香料、着色料、甘味料、調味料、香辛料、防腐剤、酸化防止剤、乳化剤、界面活性剤、粉体などを挙げることができる。

本発明のコラーゲン産生増強剤或いはこれを配合した組成物は、コラーゲン産生を増強できる旨の表示をして、コラーゲン産生増強の目的に使用することができる。本発明のコラーゲン産生増強剤を配合した組成物の形態には特に制限はない。望ましい皮膚外用剤の形態としては、例えば、国際公開ＷＯ ２００４／０５６２１６号明細書などに開示されたようなローション、乳液、クリーム、固型、粉末、ゼリー、ムース、パック、フェイスマスク、フィルムなどの形態の基礎化粧品、洗浄用化粧品、入浴用化粧品、口腔化粧品、日焼け・日焼け止め化粧品、メークアップ化粧品、頭髪化粧品（発毛剤、育毛剤など）や、台所用洗剤のように肌に直接影響を及ぼす雑貨類などが挙げられる。医薬品としては、皮内、皮下、血管内投与用の注射、腹腔内灌流液・洗浄液、腹膜透析などの透析液、外傷の洗浄液・消毒液、点眼剤、点鼻剤、外用剤などを挙げることができる。食品の場合は、例えば、コラーゲン産生増強のために用いられるものである旨の表示をしたアイスクリーム、アイスキャンデー、シャーベットなどの氷菓、氷蜜などのシロップ、バタークリーム、カスタードクリーム、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペーストなどのスプレッド及びペースト、チョコレート、ゼリー、キャンディー、グミゼリー、キャラメル、チューインガム、プリン、シュークリーム・スポンジケーキをはじめとする焼き菓子などの洋菓子、ジャム、マーマレード、シロップ漬、糖菓などの加工果実ないしは加工野菜、まんじゅう、ういろう、あん、羊羮、水羊羮、カステラ、飴玉、米菓などの和菓子、麺類、求肥、米飯、総菜、乾燥食品、レトルト食品、冷凍食品、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、みりん、テーブルシュガー、コーヒーシュガーなどの調味料などが挙げられる。望ましい飲料の形態としては、例えば、合成酒・醸造酒・発泡酒・果実酒・洋酒などの酒類、ジュース・ミネラル飲料・炭酸飲料・乳酸飲料・乳酸菌飲料・スポーツドリンク・栄養ドリンク剤、緑茶・紅茶・ウーロン茶などの茶飲料・コーヒー・ココアなどの清涼飲料などとすることができる。以上のような本発明の組成物は、本発明のコラーゲン産生増強剤を、製品質量あたり、通常、０．０１質量％乃至２０質量％、望ましくは、０．１質量％乃至１０質量％含有する。

以下、実験に基づいてより詳細に本発明を説明する。

＜実験１：Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に及ぼすα，α−トレハロースの影響＞
α，α−トレハロースのＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に及ぼす影響を調べる実験を、正常ヒト新生児包皮皮膚線維芽細胞（Ｆｉｂｒｏｃｅｌｌ ＮＨＤＦ、倉敷紡績株式会社販売）（以下、「ＮＨＤＦ細胞」と略記する。）を使用して、「バイオサイエンス、バイオテクノロジー、アンド バイオケミストリー」（Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第６８巻、第４号、第７６７−７７３頁（２００４年）に記載された方法に基づいて行った。以下、その方法を略記する。
＜試験溶液＞
１０％（ｖ／ｖ）牛胎児血清及び抗生物質を含むダルベッコのＭＥＭ培地（以下、「Ｄ−ＭＥＭ培地」と略記する。）に、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原生物化学研究所販売、試薬級）（以下、「ＡＡ−２Ｇ」と略記することがある。）とα，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所販売、試薬級）とを、ＡＡ−２Ｇの最終濃度が５０μＭ、α，α−トレハロースの最終濃度が７．５ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ或いは３０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解して試験液を調製した。
＜ＮＨＤＦ細胞におけるコラーゲン産生量の定量方法＞
Ｄ−ＭＥＭ培地を用いて継代培養したＮＨＤＦ細胞を回収し、Ｄ−ＭＥＭ培地に再懸濁し、９６ウエルマイクロプレートに、２．５×１０^４細胞／２００μｌ／ウエルで播種して２４時間培養した。その後、培養液を吸引除去し、試験液の何れかを２００μｌ／ウエル添加して、５日間培養を行った。対照として、Ｄ−ＭＥＭ培地、α，α−トレハロースを３０ｍｇ／ｍｌ含有するＤ−ＭＥＭ培地或いは５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地の何れかを、２００μｌ／ウエル添加して、５日間培養を行った。その後、培養液を吸引除去し、各々のウエルに１ｍｇ／ｍｌペプシン含有１Ｍ酢酸を、５０μｌ／ウエル加えて、４時間振盪して細胞表面に付着したコラーゲンを可溶化し、細胞中に蓄積されたコラーゲン量を、シリコン（Ｓｉｒｃｏｌ）コラーゲン定量キット（バイオカラー社（Ｂｉｏｃｏｌｏｒ Ｌｔｄ）販売）で測定した。実験は、対照或いは試験液について、各々３ウエルを使用して行い、各ウエル当たりのコラーゲン量の平均を求めてコラーゲン産生量とした。なお、ＮＨＤＦ細胞の培養は何れの場合も５容量％炭酸ガス培養装置を使用した。結果は、ＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭで培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量を１００とする相対値を求め、表１に示す。

表１から明らかなように、ＡＡ−２Ｇ無添加のＤ−ＭＥＭ培地及びこれにα，α−トレハロースを添加した培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、各々４３或いは４１となり、α，α−トレハロース単独では、ＡＡ−２Ｇに見られるコラーゲン産生増強作用は認められなかった。これに対して、５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地にα，α−トレハロースを７．５ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ或いは３０ｍｇ／ｍｌ添加した培地で培養したＮＨＤＦ細胞の場合には、コラーゲン産生量は、各々、１５０、２１７、２６４となり、α，α−トレハロースの添加量に依存したＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生の増強が認められた。

＜実験２：Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に及ぼす糖質の影響＞
ＮＨＤＦ細胞を使用して、コラーゲン産生に及ぼす、α，α−トレハロース及びマルトースの影響を調べる実験を以下のようにして行った。
＜試験液＞
Ｄ−ＭＥＭ培地に、ＡＡ−２Ｇと、含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所販売、試薬級）又は含水結晶マルトース（株式会社林原生物化学研究所販売、試薬級）の何れかとを、ＡＡ−２Ｇの最終濃度が５０μＭ、α、α−トレハロース或いはマルトースの最終濃度が０．６ｍｇ／ｍｌ、１．７ｍｇ／ｍｌ、５．０ｍｇ／ｍｌ或いは１５．０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解し、試験液を調製した。
＜ＮＨＤＦ細胞におけるコラーゲン産生量の定量方法＞
ＮＨＤＦ細胞の培養及びコラーゲン産生量の定量方法については実験１と同様に行った。また、ＮＨＤＦ細胞の培養上清を回収して、その上清中に放出されたコラーゲン量についても、シリコンコラーゲン定量キットを用いて測定した。対照として、５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地を使用した。実験は、対照或いは試験液について、各々３ウエルを使用して行い、その平均を求めてコラーゲン産生量とした。結果は、細胞表面への沈着、培養上清中或いはこれらの合計のコラーゲン産生量について、５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地を使用した時のＮＨＤＦ細胞の細胞表面への沈着、培養上清中或いはこれらの合計コラーゲン産生量を１００とする相対値を求め、表２に示す。

表２から明らかなように、α，α−トレハロースを添加した５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地で培養した場合には、細胞表面への沈着及び培養上清中の何れにおいても、α，α−トレハロースの添加量に依存したＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生の増強が認められた。一方、マルトースを添加した場合には、培養上清中のコラーゲン量の増強は認められたものの、細胞表面への沈着のコラーゲン及び細胞表面への沈着と上清中のコラーゲンの合計量は、マルトースの添加量の増加に伴い、抑制されることが確認された。

＜実験３：Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に及ぼす、α，α−トレハロース＜α，α−トレハロースの糖質誘導体の影響＞
α，α−トレハロースがＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を増強する作用を有することが確認されたので、α，α−トレハロースの糖質誘導体についても同様の作用効果があるかどうかを確認する実験を以下のようにして行った。
＜試験液＞
Ｄ−ＭＥＭ培地に、ＡＡ−２Ｇと、含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所販売、試薬級）、α−マルトシルα，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所製造、純度９８％以上）、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップ（株式会社林原商事販売、商品名「ハローデックス」、無水物換算で、α−マルトシルα，α−トレハロースを約５３％、その他のα，α−トレハロースの糖質誘導体を合計で約５％含有、固形分濃度約７５％）の何れかの糖質とを、ＡＡ−２Ｇの最終濃度が５０μＭ、糖質の最終濃度が１５．０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解し、試験液を調製した。また、対照として、Ｄ−ＭＥＭ培地に、含水結晶α，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップの何れかの糖質を、最終濃度が１５．０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解した試験液を調製した。なお、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップを添加した培地は、これに含まれるα，α−トレハロースの糖質誘導体として１５．０ｍｇ／ｍｌとなるように調製した。
＜ＮＨＤＦ細胞におけるコラーゲン産生量の定量方法＞
ＮＨＤＦ細胞の培養及びコラーゲン産生量の定量方法、については実験１と同様に行った。また、結果も、実験１と同様に、ＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量を１００とする相対値を求め、表３に示す。

表３から明らかなように、ＡＡ−２Ｇ無添加のＤ−ＭＥＭ培地、及び、これにα，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップの何れかの糖質を添加した培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、３９乃至４５となり、何れの糖質も単独では、ＡＡ−２Ｇに見られるコラーゲン産生増強作用は認められなかった。これに対して、５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地にα，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップの何れかを添加した培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、各々、２２７、１８２、１６３となり、何れの糖質を添加した場合にも、ＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生の増強が認められた。

＜実験４：Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に及ぼす、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体、或いは、これらの糖質とヒアルロン酸及び／又はコンドロイチン硫酸併用の影響＞
Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生に及ぼす、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体、或いは、これらの糖質とヒアルロン酸及び／又はコンドロイチン硫酸併用の影響を調べる実験を以下のように行った。
＜試験液＞
Ｄ−ＭＥＭ培地に、ＡＡ−２Ｇと、含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所販売、試薬級）、α−マルトシルα，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所製造、純度９８％以上）又はα，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップ（株式会社林原商事販売、商品名「ハローデックス」）を、ＡＡ−２Ｇの最終濃度が５０μＭ、糖質の最終濃度が１５．０ｍｇ／ｍｌとなるように溶解した。また、これらの溶液に、ヒアルロン酸を１ｍｇ／ｍｌ、コンドロイチン硫酸を１ｍｇ／ｍｌ、或いはヒアルロン酸とコンドロイチン硫酸を各々０．５ｍｇ／ｍｌとなるように溶解した試験溶液を調製した。なお、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップ（無水物換算で、α，α−トレハロースの糖質誘導を約５９％含有）を添加した培地は、これに含まれるα，α−トレハロースの糖質誘導体として１５．０ｍｇ／ｍｌとなるように調製した。
＜ＮＨＤＦ細胞におけるコラーゲン産生量の定量方法＞
ＮＨＤＦ細胞の培養及びコラーゲン産生量の定量方法、については実験１と同様に行った。また、結果も、実験１と同様に、ＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量を１００とする相対値を求め、表４に示す。

表４から明らかなように、ＡＡ−２Ｇ無添加のＤ−ＭＥＭ培地、及び、これにα，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップの何れかを添加した培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、３９乃至４２となり、何れの糖質も単独では、ＡＡ−２Ｇに見られるコラーゲン産生増強作用は認められなかった。また、５０μＭのＡＡ−２Ｇ含有Ｄ−ＭＥＭ培地にα，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、又はα，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップの何れかの糖質を添加した培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、各々、２０３、１５８、１５４となり、何れの糖質を添加した場合にも、実験３と同様に、ＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生の増強が認められた。これらに対して、α，α−トレハロース、α−マルトシルα，α−トレハロース、又はα，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップとヒアルロン酸を加えた培地で培養した場合ＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、各々、２７６、１９９、１９２となり、前記３種の糖質の何れかとコンドロイチン硫酸を添加した培地で、培養した場合には、各々、２５６、１８８、１８０となった。また、前記３種の糖質の何れかと、ヒアルロン酸及びコンドロイチン硫酸とを添加した培地で培養した場合のＮＨＤＦ細胞のコラーゲン産生量は、各々、３４４、２７６、２５６となった。これらの結果は、ヒアルロン酸又はコンドロイチン硫酸は、α，α−トレハロースやその糖質誘導体によるＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生を、さらに増強する作用を有していることを示している。また、ヒアルロン酸とコンドロイチン硫酸を併用した場合の方が、そのどちらか一方を添加した場合よりも、α，α−トレハロースやその糖質誘導体によるＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生量が多いことから、ヒアルロン酸とコンドロイチン硫酸は、相乗的に、α，α−トレハロースやその糖質誘導体によるＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生を増強することが確認された。

＜実験５：皮膚に及ぼすα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体と、ヒアルロン酸及び／又はコンドロイチン硫酸併用の影響＞
皮膚に及ぼすα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体、及び、ヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸の影響を調べる実験を以下のように行った。すなわち、生体内には、一定量のＬ−アスコルビン酸が存在するので、Ｌ−アスコルビン酸によるコラーゲン産生は恒常的に行われている。そこで、下記化粧水の基本処方に、下記表５に示す組み合わせ、配合量で、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸、含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所販売、化粧品用）、α，α−トレハロースの糖質誘導体としてこれを含有するシラップ（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」、無水物換算で、α−マルトシルα，α−トレハロースを約５３％、その他のα，α−トレハロースの糖質誘導体を合計で約５％含有、固形分濃度約７５％）を加え、精製水を適量加えて１００質量部の化粧水を調製した。なお、表５に示す各糖質の添加量は無水物換算で示す。なお、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップは、α，α−トレハロースの糖質誘導体が、表５に示す配合割合となるように添加した。
＜化粧水の基本処方＞
グリセリン ５質量部
１，３−ブチレングリコール ６．５質量部
ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ソルビタン
モノラウリル酸エステル １．２質量部
エチルアルコール ８質量部
乳酸 ０．０５質量部
乳酸ナトリウム ０．１質量部
パラメトキシケイ皮酸−２−エチルヘキシル ０．１質量部
防腐剤 適 量
香料 適 量
＜化粧水の皮膚のシワ、コジワや弛みに対する効果の評価＞
表５に示す何れかの配合処方の化粧水を、皮膚のシワ、コジワや弛みに悩む女性１１人を被験者として、毎日３回４ヶ月間顔面に使用してもらい、使用前と比較した皮膚の状態を自己申告により評価した。評価は、皮膚のシワ、コジワや弛みについての変化を、皮膚に張りがあり、シワやコジワの深さが浅くなり、その数も少くなくなった（著効）、皮膚に張りがあり、シワやコジワの深さが浅くなった数も少くなくなった（有効）、皮膚の弛みは改善したものの、シワやコジワの深さや数には変化がなかった（やや有効）、変化なし（無効）の４段階とし、それぞれの評価をした被験者の人数を表５に示す。

表５から明らかなように、基本処方の化粧水に、２質量部乃至２０質量部のα，α−トレハロースを添加した化粧水を使用した場合には、何れも１１人中６人が有効以上と評価し、２質量部乃至２０質量部のα，α−トレハロースの糖質誘導体を添加した化粧水を使用した場合には、何れも１１人中５人が有効以上と評価し、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体に皮膚の弛み、シワやコジワに対する改善効果・抑制効果があることが確認された。さらに、０．１質量部のα，α−トレハロース或いはα，α−トレハロースの糖質誘導体を添加した場合には、何れも有効例が認められ、１質量部添加した場合には、何れも著効例が認められた。これらの結果は、α，α−トレハロースやその糖質誘導体には、皮膚のシワやコジワの改善効果・抑制効果のあることを示している。また、基本処方の化粧水に、ヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸と、２質量部のα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体とを添加した化粧水を使用した場合には、２質量部のα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を単独で使用した場合に比して、皮膚の弛み、シワやコジワに対する強い改善効果が認められた。このヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸によるα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体の皮膚の弛み、シワやコジワの改善効果の増強は、ヒアルロン酸ナトリウム又はコンドロイチン硫酸を単独で配合した場合よりも、両者を併用した場合の方が強いことが確認された。基本処方の化粧水、或いは、これにヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸を、表５に示す量添加した化粧水を使用した場合には、これらの化粧水を、著効や有効と評価した被験者はいなかった。

＜実験６：皮膚に及ぼすα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体と、ヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸とに、さらに、アデノシンモノフォスフェイト及び／又はコエンザイムＱ１０とを併用した場合の影響＞
皮膚に及ぼすα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体と、ヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸とに、さらに、アデノシンモノフォスフェイト（以下、「ＡＭＰ」と略記する場合がある）及び／又はコエンザイムＱ１０（以下、「ＣｏＱ１０」と略記する場合がある）とを併用した場合の影響を調べる実験を以下のように行った。すなわち、実験５で使用したもの同じ化粧水の基本処方に、下記表６に示す組み合わせ、配合量で、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸、含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所販売、化粧品用）、α，α−トレハロースの糖質誘導体としてこれを含有するシラップ（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）に、さらにＡＭＰ、ＣｏＱ１０を加え、これに精製水を適量加えて１００質量部の化粧水を調製した。なお、表６に示す各糖質の添加量は、無水物換算で示す。また、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップは、表α，α−トレハロースの糖質誘導体が、表６に示す配合割合となるように添加した。この配合の何れかの化粧水を、実験５と同様に皮膚のシワ、コジワや弛みに悩む女性１１人を被験者として、毎日３回３ヶ月間顔面に使用してもらい、実験５と同じ方法で、皮膚のシワ、コジワや弛みに対する効果を評価した結果を表６に示す。

表６から明らかなように、基本処方の化粧水に、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体と、ＡＭＰ及び／又はＣｏＱ１０を添加した化粧水を使用した場合には、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を単独で使用した場合に比して、皮膚の弛み、シワやコジワに対する強い改善効果が認められた。このＡＭＰ及び／又はＣｏＱ１０によるα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体による皮膚の弛み、シワやコジワの改善効果の増強は、ＡＭＰ又はＣｏＱ１０を単独で化粧水に配合した場合よりも、両者を併用した場合の方が強いことが確認された。また、基本処方の化粧水に、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体、０．１質量部のヒアルロン酸、０．１質量部のコンドロイチン硫酸を添加し、これにさらに、ＡＭＰ及び／又はＣｏＱ１０を添加した化粧水を使用した場合には、α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘体と０．１質量部のヒアルロン酸ナトリウム及び０．１質量部のコンドロイチン硫酸を添加した化粧水を使用した場合に比して、皮膚の弛み、シワやコジワに対する強い改善効果が認められた。このＡＭＰ及び／又はＣｏＱ１０によるα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体とヒアルロン酸ナトリウム及びコンドロイチン硫酸を添加した化粧水による皮膚の弛み、シワやコジワの改善効果の増強は、ＡＭＰ又はＣｏＱ１０を単独で配合した場合よりも、両者を併用した場合の方が強いことが確認された。

これらの実験結果は、α，α−トレハロース及びその糖質誘導体がＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を増強する顕著な作用を有することを示すものであり、α，α−トレハロースやその誘導体を含んでなる組成物が、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生の増強剤、皮膚の緩みの改善剤・抑制剤、シワやコジワの改善剤・抑制剤として利用できることを物語っている。また、ヒアルロン酸ナトリウム及び／又はコンドロイチン硫酸や、さらには、ＡＭＰ及び／又はＣｏＱ１０が、α，α−トレハロースやその糖質誘導体によるＡＡ−２Ｇによるコラーゲン産生をさらに増強する作用を有することは、α，α−トレハロースやその糖質誘導体を含んでなる組成物に、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸、ＡＭＰ及びＣｏＱ１０から選ばれる何れか１以上を配合した組成物が、α，α−レハロースやその糖質誘導体を含んでなる組成物よりも、Ｌ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生の増強剤、皮膚の緩みの改善剤・抑制剤、シワやコジワの改善剤・抑制剤として、さらに有利に利用できることを物語っている。

以下、本発明を実施例に基づきさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

＜コラーゲン産生増強剤＞
以下の成分を以下の配合で均一に混合して、コラーゲン産生増強剤を調製した。
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事
販売、商品名「トレハ」） ４９質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原
生物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」） １質量部

本品は、コラーゲン産生を増強する作用を示し、皮膚にうるおいを与え、皮膚の老化防止に奏効する、簡便に利用できかつ著効を示すコラーゲン産生増強剤である。また、本品は、適度な酸味により良好な呈味を示すので、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付して、コラーゲン産生の増強のための健康補助食品として、このまま経口的に摂取することも、又、水やその他の飲料などに溶解して摂取することも自由である。さらには、特別用途食品、保健機能食品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、ペットフード、雑貨などに配合して、これらにコラーゲン増強作用を付与することも自由である。

本品を１ｇずつ打錠して錠菓を調製した。本品はコラーゲン産生を増強する旨を表示して販売することができる。

＜健康補助食品＞
以下の成分を以下の配合で均一に混合して、粉末状のコラーゲン産生増強用の健康補助食品を調製した。本品を、上記実験１で使用したものと同じＤ−ＭＥＭ培地で希釈し、実験１に準じて、本品のコラーゲン産生の増強活性を測定し、当該活性が発揮されていることを確認した。
Ｌ−アスコルビン酸 ５質量部
鹿角霊芝（株式会社林原生物化学研究所販売） １．５質量部
藍（株式会社林原生物化学研究所販売） １．５質量部
α，α−トレハロースの糖質含有シラップ（株式会
社林原商事販売、商品名「ハローデックス」） ２５質量部
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事
販売、商品名「トレハ」） １０質量部

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強に使用することのできる健康補助食品として利用することができる。また、本品は、皮膚組織の正常化と老化防止に優れた効果を有し、まろやかな甘味と適度な酸味により良好な呈味を示す、日常的に利用する健康補助食品として好適である。また、本品は、ヒトのみならず、家畜、ペットなどの動物のための経口摂取又は経管投与用組成物として、或いは、魚、エビ、カニなどの養殖動物用にも直接或いは餌に混合するなどして有利に利用できる。

また、このコラーゲン産生増強用の健康補助食品に、１質量％となるようにショ糖脂肪酸エステルを添加し、打錠機を用いて１錠あたり約３００ｍｇの錠剤に成形した。本品は、持続してコラーゲン産生増強作用を示す、長期間安定な、携帯にも便利で、かつ、経口摂取の容易な、著効を示すコラーゲン産生増強用の健康補助食品である。また、本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強に使用することのできる健康補助食品として利用することができる。

＜健康補助食品＞
以下の成分を以下の配合で均一に混合して、粉末状のコラーゲン産生増強用の健康補助食品を調製した。調製後、当該コラーゲン産生増強剤が安定してコラーゲン産生増強作用を示すことを確認した。
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事
販売、商品名「トレハ」） ５．５質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原
商事販売、商品名「アスコフレッシュ」） １．５質量部
コンドロイチン硫酸ナトリウム １質量部
キトサン １質量部
糖転移ルチン（株式会社林原商事販売、商品名「α
Ｇルチン」 １質量部
アデノシンモノフォスフェイト ０．１質量部
コエンザイムＱ１０ ０．０５質量部

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強に使用することのできる健康補助食品として利用することができる。また、本品は、皮膚組織の正常化と老化防止に優れた効果を有し、まろやかな甘味と適度な酸味により良好な呈味を示す、日常的に利用する健康補助食品として好適である。

＜健康補助飲料＞
粉末マルチトール ５００質量部
実施例１の方法で調製したコラーゲン産生増強剤 １００質量部
粉末卵黄 １９０質量部
脱脂粉乳 ２００質量部
塩化ナトリウム ４．４質量部
塩化カリウム １．８５質量部
硫酸マグネシウム ４質量部
コンドロイチン硫酸 ０．１質量部
チアミン ０．０１質量部
ビタミンＥアセテート ０．６質量部
ニコチン酸アミド ０．０４質量部
糖転移ヘスペリジン（東洋精糖株式会社販売、商品
名「αＧヘスペリジンＰＳ」） ０．０２質量部
上記配合組成からなる配合物を調製した。この配合物２５質量部を精製水１５０質量部に均一に分散・溶解させ、２００ｇずつ褐色ガラス瓶に封入した。

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強に使用することのできる健康補助飲料である。また、本品は、コラーゲン産生増強作用を持続させる上に、栄養源が補足されており、しかも、これらの成分に由来する異味や異臭の低減された美味しい飲料で、美容や健康などの目的で有利に利用できる。なお、本品は、ヒトのみならず、家畜、ペットなどの動物のための経口摂取又は経管投与用組成物としても有利に利用できる。また、本品は糖転移ヘスペリジンを含んでいるので、血中脂質や血中コレステロールなどの血中脂質の低減のために用いられる旨を標榜することも随意である。

＜健康補助食品＞
粉末マルチトール ２５質量部
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事
販売、商品名「トレハ」） ６７質量部
滑沢剤 ３質量部
グルコサミン ２．５質量部
コンドロイチン硫酸ナトリウム １．５質量部
ヒアルロン酸 １質量部
上記配合処方に基づき、これらの成分を均質になるまで攪拌混合し、常法により、０．５ｇずつ打錠して、錠剤を調製した。

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強に使用することのできる健康補助食品である。また、本品は、コラーゲン産生増強作用を持続させる上に、グルコサミン、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸を含有しているので、特に、骨組織の強化作用、関節の強化作用に優れている。本品は、グルコサミン、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸由来の異味や異臭も抑制された美味しい健康食品で、美容や健康などの目的でも有利に利用できる。なお、本品は、ヒトのみならず、家畜、ペットなどの動物のための経口摂取又は経管投与用組成物としても有利に利用できる。

＜健康補助食品＞
精製マルトース（株式会社林原商事販売、商品名
「サンマルトＳ」） ２５質量部
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事
販売、商品名「トレハ」） ５４．２質量部
滑沢剤 ５質量部
牡蠣殻カルシウム ２質量部
ヒアルロン酸 ０．２質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社
林原商事販売、商品名「アスコフレッシユ」） １０質量部
糖転移ルチン（東洋精糖株式会社販売、商品名
「αＧルチンＰ」） ０．５質量部
酸味料（有機酸類） 適 量
レモン及びライムのフレーバー 適 量
全量を１００質量部とし、これらの成分を均質になるまで攪拌混合し、常法により、０．５ｇずつ打錠して、錠剤を調製した。

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強に使用することのできる健康補助食品である。また、本品は、コラーゲン産生増強作用を持続させる上に、ヒアルロン酸を含有しているので、特に、肌の弛みの改善作用、骨組織の強化作用、関節の強化作用や関節痛の改善効果に優れている。本品は、美味しい健康食品で、美容や健康などの目的でも有利に利用できる。なお、本品は、ヒトのみならず、家畜、ペットなどの動物のための経口摂取又は経管投与用組成物としても有利に利用できる。

＜アイスクリーム＞
生クリーム（油脂含量約４６質量％） １８質量部
脱脂粉乳 ７質量部
全乳 ５１質量部
砂糖 １３質量部
プルラン ２質量部
グアガム １質量部
上記配合の組成の混合物を溶解し、７０℃で３０分間保持して殺菌した後、ホモゲナイザーで乳化分散させ、次いで、３乃至４℃にまで急冷し、これに、さらに、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップ（株式会社林原商事販売、商品名「ハローデックス」）５質量部を加えて混合し、一夜熟成した後、フリーザーで凍結させてアイスクリームを得た。

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強用に使用することができる。本品は、皮膚に潤いを与え、皮膚の老化防止に奏効するアイスクリームである。

＜フルーツゼリー＞
砂糖 １４質量部
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事
販売、商品名「トレハ」） ４質量部
ゼラチン ２．５質量部
グレープフルーツジュース ３４質量部
水 ４５．５質量部
上記配合組成に基づき、砂糖、α，α−トレハロース、ゼラチン、水を加えて、９５℃に加熱し溶解後、グレープフルーツジュースを加えて混合し、さらに、８０℃で３０分殺菌を行った後、冷却して、フルーツゼリーを調製した。

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強用に使用することができる。本品は適度な甘味となめらかなテクスチャーを示す、皮膚の老化を防止し、美容と健康の維持・増進に奏効するフルーツゼリーである。

＜茶飲料＞
液体飲料用にブレンドした緑茶５０ｇを、６５℃のイオン交換水１５００ｇで５分間抽出し、続いて濾紙で濾過することにより茶葉を除去して、１３２０ｇの緑茶抽出液（ｐＨ６．０）を得た。この緑茶抽出液を希釈して飲用濃度となるようにイオン交換水で約５倍に希釈し、Ｌ-アスコルビン酸３００ｐｐｍとなるように添加した後、炭酸水素ナトリウムでｐＨ６．０に調整し、調合液を得た。この調合液に、含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事販売、商品名「トレハ」）を０．７５％、糖転移ヘスペリジン（株式会社林原製造、糖転移ヘスペリジン純度９５％以上）を１％となるように、それぞれ添加した。これらの調合液を耐熱性透明ガラス容器に３００ｇずつ充填・密封し、レトルト殺菌処理（１２１℃、７分間）を行って緑茶飲料とした。

本品は、コラーゲン産生増強のために用いられる旨の表示を付してコラーゲン産生増強用に使用することができる。本品は、皮膚の老化を防止し、美容と健康の維持・増進に奏効する茶飲料である。また、本品は、糖転移ヘスペリジンを含んでいるので、血中中性脂肪や血中コレステロールなどの血中脂質の低減ために用いられる旨を標榜することも随意である。

＜皮膚外用クリーム＞
下記に述べる配合物Ａに、配合物Ｂを常法に従って添加・混合し、３０℃以下にまで冷却した後に、水酸化カリウムで、ｐＨを弱酸性に調製し、ホモゲナイザーにより乳化して、皮膚外用クリームを製造した。
＜配合物Ａ＞
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン ２質量部
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン ５質量部
ベヘニン酸エイコサニル １質量部
流動パラフィン １．９質量部
トリオクタン酸トリメチロールプロパン １０質量部
＜配合物Ｂ＞
１，３−ブチレングリコール ４質量部
α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究
所販売、試薬級） ３質量部
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」） １質量部
乳酸ナトリウム液 １０質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原
生物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」） ２質量部
アマモエキス ０．５質量部
ダイズエキス ０．５質量部
アロエベラエキス ０．５質量部
パラオキシ安息香酸メチル ０．１質量部
コンドロイチン硫酸ナトリウム ０．１質量部
甘草エキス ０．５質量部
精製水 ６２．４質量部
なお、本クリームは、さらに、必要に応じて、水酸化カリウムを加えて弱アルカリ性のクリームとしてもよい。

本品は、皮膚のコラーゲン産生を増強、持続させるので、皮膚の弛みが改善され、コジワ・シワにも有効で、老化の防止効果に優れている。また、本品は、優れた保湿性を示すので、基礎化粧品として有用である。

＜ローション＞
以下に示す配合処方に基づき、常法により、ローションを調製した。
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」） １０質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原
生物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」） ２質量部
グリチルリチン酸ジカリウム ０．０５質量部
エタノール １０質量部
１，３−ブチレングリコール ５質量部
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研
究所販売、商品名「アルファグルコシルヘス
ペリジン」） １質量部
藍草水抽出エキス １質量部
アデノシンモノフォスフェイト ０．５質量部
コエンザイムＱ１０ ０．５質量部
ヒアルロン酸ナトリウム ０．１質量部
感光素２０１号 ０．００５質量部
ポリオキシエチレン（６０）硬化ひまし油 １質量部
精製水を適量加えて、全量を１００質量部とする。

本ローションは、皮膚のコラーゲン産生を増強、持続させるので、皮膚のみずみずしさを保ち、弛みが改善され、コジワ・シワにも有効で、老化の防止効果に優れ、また、藍草水抽出エキス及びグリチルリチン酸ジカリウムが優れた抗炎症作用や美白作用を示すので、基礎化粧品、美白化粧品として有用である。

＜ローション＞
下記に述べる配合物Ａを精製水に溶解して水溶液を調製する。配合物Ｂを秤量して、加熱溶解し、これに配合物Ｃを加えてゲルを生成させたものを、配合物Ａの水溶液に加えて均一になるまで攪拌し、常法により、ローションを調製した。
＜配合物Ａ＞
１，３−ブチレングリコール ５質量部
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」） ３質量部
スクレオチウムガム液（１％β−グルカン含有液） ３質量部
クエン酸 ０．０１質量部
クエン酸ナトリム ０．０４質量部
パラオキシ安息香酸プロピル ０．２質量部
精製水 ８５．６５質量部
＜配合物Ｂ＞
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル ０．０４質量部
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル ０．２４質量部
イソステアリルアルコール ０．１２質量部
スクワラン ０．１８質量部
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ０．６９質量部
ジイソステアリン酸ポリグリセリル ０．４６質量部
パラオキシ安息香酸プロピル ０．１質量部
グリセリン １．１３質量部
＜配合物Ｃ＞
精製水 ０．１４質量部

本品は、少量の油分を安定に配合したマイクロエマルションで、皮膚のコラーゲン産生を増強、持続させる作用を有しているので、皮膚のみずみずしさを保ち、弛みが改善され、コジワ・シワにも有効で、老化の防止効果に優れている。また、本品は、水溶性多糖類のスクレログルカンを含有していることから、α，α−トレハロースの糖質誘導体を含有する皮膚外用剤の使用感がさらに向上しており、持続性のあるしっとり感が得られ、保湿生にも優れている。

＜エッセンス＞
下記に述べる配合物Ａを秤量し、加温し溶解させる。これに、配合物Ｂを秤量して加温し溶解したものを加えて、乳化し、ホモミキサーを用いて室温まで攪拌冷却して、常法によりエッセンスを調製した。
＜配合物Ａ＞
大豆リゾリン脂質液（２５％） １質量部
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」） ４質量部
１，３−ブチレングリコール ５質量部
スクレログルカン液（１％） １０質量部
クインズシードエキス（２％） １０質量部
パラオキシ安息香酸メチル ０．２質量部
精製水 ５４．９質量部
＜配合物Ｂ＞
モノステアリン酸ソルビタン ０．５質量部
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン １質量部
セタノール １質量部
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル ０．３質量部
Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸ジ（フィトステ
リル−２−オクチルドデシル） ０．５質量部
スクワラン ６質量部
パルミチン酸オクチル ２質量部
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル ２質量部
パラオキシ安息香酸プロピル ０．１質量部
メチルポリシロキサン ０．５質量部

本品は、皮膚のコラーゲン産生を増強、持続させる作用を有しているので、皮膚のみずみずしさを保ち、弛みが改善され、コジワ・シワにも有効で、老化の防止効果に優れている。また、本品は、スクレログルカンやクインズシードエキスなどの水溶性多糖類を含有していることから、α，α−トレハロースの糖質誘導体を含有する皮膚外用剤の使用感がさらに向上しており、持続性のあるしっとり感が得られ、保湿生にも優れている。

＜Ｄ相調製物＞
下記に述べる配合物Ａを加熱溶解し、これに、配合物Ｂ加熱溶解したものを均質になるよう攪拌溶解し、さらに、精製水をゆっくり加えながら攪拌・混合し、室温まで冷却して、常法により、Ｄ相調製物を調製した。
＜配合物Ａ＞
ステアリン酸ポリグリセリル−１０ １．７５質量部
ミリスチン酸ポリグリセリル−１０ ５．２質量部
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」） １６．４質量部
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物
化学研究所販売、化粧品用） １質量部
グリセリン ８．７質量部
メチルパラベン ０．１３質量部
＜配合物Ｂ＞
トリオクタノイン ５２．２２質量部
トコフェロール ０．０５質量部
プロピルバラベン ０．０５質量部
精製水を加えて全量を１００質量部とする。

本品は、皮膚のコラーゲン産生を増強、持続させるので、皮膚のみずみずしさを保ち、弛みが改善され、コジワ・シワにも有効なので、基礎化粧品に有利に使用できる。また、本品は、α，α−トレハロースの糖質誘導体を使用しているので、表面張力が低下し、従来の多価アルコールを使用したＤ相調製物に比べて、微細で、かつ、その状態が安定な乳化液滴状となるという特徴を有しており、クレンジンクジェル、化粧水、クリーム、入浴剤などへ配合して使用できる。

＜パック剤（ゼリー状ピールオフタイプ）＞
下記に述べる配合処方を用いて、常法によりパック剤を調製した。
ポリビニルアルコール ７質量部
プルラン ７質量部
１，３ブチレングリコール ３質量部
グリセロール １５質量部
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」） １２質量部
エタノール ８質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原
生物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」） １質量部
ＰＯＥオレイルアルコールエーテル ０．５質量部
海洋深層水 ０．５質量部
香料 適量
緩衝剤 適量
精製水 １５質量部

本品は、皮膚のコラーゲン産生を増強、持続させるので、皮膚のみずみずしさを保ち、弛みが改善され、コジワ・シワにも有効で、老化の防止効果、保湿効果に優れている。また、本品は、使用感に優れ、しかも、半乾燥後、或いは、乾燥後の皮膚からの拭き取りや剥離が容易で、皮膚表面や毛穴の清浄効果にも優れている。

＜歯磨き＞
以下に示す構成処方に基づき、常法により歯磨きを調製した。本品は、α，α−トレハロース及びその糖質誘導体を含有しているので、歯茎の細胞のコラーゲン産生を増強できることから、老化や歯肉炎などによる歯茎の減少を抑制することができ、しかも、泡立ちがよく、すっきりした洗浄後感で、歯垢もきれいに除去することのできる歯磨きである。また、本品は、α，α−トレハロース及びα，α−トレハロースの糖質誘導体が、虫歯菌（ストレプトコッカス ミュータンス）のグルカノトランスフェラーゼによるショ糖からの付着性不溶性グルカンの生成を効果的に抑制することから、抗う触性にも優れている。
β−グリチルレチン酸 ０．４質量部
塩化セチルピリジウム ０．２質量部
酢酸トコフェロール ０．１質量部
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生
物化学研究所販売、化粧品用） ６質量部
濃グリセリン １０質量部
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式
会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナー
レ」） ９質量部
精製水 ２３．５質量部
エタノール ３質量部
プロポリスエキス １質量部
藍草水抽出エキス １質量部
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原
生物化学研究所販売、試薬級） ２質量部
ヒアルロン酸ナトリウム ０．１質量部
カラギーナン ０．３質量部
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．３質量部
第２リン酸カルシウム ２０質量部
ハイドロキシアパタイト ３．５質量部
炭酸カルシウム １質量部
酸化チタン ０．４質量部
無水ケイ酸 ０．１質量部
ラウリル硫酸ナトリウム １質量部
ラウロイルサルコシンナトリウム ０．５質量部

＜腹膜透析液＞
α−マルトシルα，α−トレハロース含有シラップ（株式会社林原生物化学研究所製造、純度９８．５％、固形分含量７５％）６ｇ、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原生物化学研究所製造、純度９９．５％、）２．１ｇ、塩化ナトリウム
０．５６７ｇ、乳酸ナトリウム ３．９２ｇ、塩化カルシウム ０．２９４ｇ、塩化マグネシウム ０．１０３ｇを蒸留水に溶解し、水酸化ナトリウム ０．２９４ｇを用いてｐＨを約７．５に調整した後、蒸留水で全量を１０００ｍｌとした。上記の溶液を０．２μｍのメンブランフィルターで濾過後、ポリ塩化ビニル樹脂（ＰＶＣ）製バッグに充填し、１２１℃で２０分間、高圧蒸気滅菌を行った。なお、本品の調製には、微生物及びパイロジェンを予め除去した原料を使用した。また、本品は、上記乳酸ナトリウムに換えて、他の緩衝剤（重炭酸ナトリウム等）を使用しても良い。

本品は、腹腔内の臓器や腹腔壁のコラーゲンの産生を増強し、腹腔内の組織や臓器を強化することができる腹膜透析液である。また、本品は、保存安定性もよく、生体適合性に優れており、血液透析用の透析液、傷口や臓器の洗浄液、腹腔内や胸腔内の灌流液、組織や臓器の保存液などとしても利用することができる。

以上説明したように、本発明は、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を含んでなるコラーゲン産生増強剤が、ヒトを含む動物に対して、顕著なＬ−アスコルビン酸類によるコラーゲン産生を効果的に増強する作用を示すという全く独自の知見に基づくものである。また、当該コラーゲン産生増強剤は、重篤な副作用の懸念がなく、ヒトを含む動物類が簡便かつ快適に、皮膚の老化防止、美容と健康の維持・増進のために利用することができる。また、以上のような特長を有する本発明のコラーゲン産生増強剤は、他の成分と配合することにより、食品、飲料、特別用途食品、保健機能食品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、ペットフード、雑貨などの各種組成物として利用することも有利に実施できる。本発明は、斯くも顕著な作用効果を奏する発明であり、斯界に多大の貢献をする、誠に意義のある発明である。

Claims (2)

1. 有効成分としてα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体、ヒアルロン酸ナトリウム及びコンドロイチン硫酸、並びに、アデノシンモノフォスフェイト及び／又はコエンザイムＱ１０を含んでなる、皮膚の弛み、シワ及びコジワの改善剤。
2. α，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体の１質量部に対し、ヒアルロン酸ナトリウムを０．１質量部以上、コンドロイチン硫酸を０．１質量部以上、アデノシンモノフォスフェイト及び／又はコエンザイムＱ１０を合計で０．２質量部以上含んでなる請求項１記載の皮膚の弛み、シワ及びコジワの改善剤。