JP5057646B2 - チロシナーゼ活性抑制剤、及び皮膚外用剤 - Google Patents
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Description
<ヒト表皮メラニン細胞チロシナーゼ活性阻害評価>
クラボウ社製正常ヒト表皮メラニン細胞を1ウェル当り3.0×104個となるように96ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはクラボウ社製Medium154Sを用いた。24時間後Medium154Sによって各濃度に調整したサンプル液に交換しさらに48時間培養した。次に1重量%Triton−X含有リン酸緩衝液75μLに交換し細胞を完全に溶解させ内50μLを粗酵素液として使用した。粗酵素液に基質となる50μLの0.05重量%L−ドーパ含有リン酸緩衝液を加え37℃で2時間静置した。マイクロプレートリーダーにて基質添加直後と反応終了時の405nmの吸光度を測定し生成されたドーパメラニン量は両測定値の差を次式に導入して求めた。
生成されたドーパメラニン量={(反応後405nm値−反応前405nm値)−2.166}÷5.238
又、PIERCE社製BCA Protein Assay Kitにて各ウェルのタンパク量を測定し単位タンパク量当りのドーパメラニン生成量を求めた。コントロールとして試料を添加しなかった場合のドーパメラニン生成量を100とした相対値を表1に示す。
(1) トリ2-エチルヘキサン酸グリセリル 7.8(重量%)
(2) ジステアリン酸ポリグリセリル 2.4
(3) 水素添加大豆リン脂質 0.4
(4) バチルアルコール 0.1
(5) 精製水 100とする残部
(6) グリセリン 7.5
(7) キサンタンガム 0.4
(8) ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム 0.2
(9) 1,3−ブチレングリコール 2.5
(10) パラオキシ安息香酸メチル 0.1
(11) エタノール 4.0
(12) 香料 0.1
(13)表2に示すチロシナーゼ活性抑制剤 表2に示す量
製法:(1)〜(4)の油相成分を混合、溶解して75℃に加熱する。一方、(5)〜(10)の水相成分を混合,溶解して75℃に加熱する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化する。撹拌しながら冷却し、40℃で(11)〜(13)を添加して、混合、均質化する。
(1) 1,3−ブチレングリコール 10.00(重量%)
(2) パラオキシ安息香酸メチル 0.10
(3) ショ糖ステアリン酸エステル 0.35
(4) N−ステアロイル−L−グルタミン酸ナトリウム 0.35
(5) カルボキシビニルポリマー(1重量%水溶液) 2.00
(6) アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム塩 0.50
(7) クエン酸ナトリウム 0.50
(8) 精製水 100とする残部
(9) スクワラン 3.00
(10) ミリスチン酸オクチルドデシル 3.00
(11) 親油型モノステアリン酸グリセリン 3.00
(12) ミツロウ 1.00
(13) ステアリン酸 1.00
(14) ベヘニルアルコール 2.50
(15) パーム硬化油 2.00
(16) ホホバ油 0.10
(17) グリチルレチン酸ステアリル 0.05
(18) エタノール 3.00
(19) アルデヒドC−14 0.01
(20) イソプロピルキノリン 0.01
(21) β−ナフチルメチルエーテル 0.01
(22) アルデヒドC−16 0.01
(23) 香料 0.05
製法:(1)〜(8)の水性成分、及び(9)〜(17)の油性成分をそれぞれ75℃に加熱混合均一化する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化する。撹拌しながら冷却し、40℃で(18)〜(23)を添加して、混合,均質化する。
(1) スクワラン 6.00(重量%)
(2) メチルフェニルポリシロキサン 4.00
(3) 水素添加パーム核油 0.50
(4) モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン(20E.O.) 1.50
(5) モノステアリン酸ソルビタン 1.00
(6) グリセリン 10.00
(7) パラオキシ安息香酸メチル 0.10
(8) 1重量%カルボキシビニルポリマー水溶液 15.00
(9) 10重量%L−アルギニン水溶液 1.00
(10) クマリン 0.10
(11) 桂皮酸メチル 0.10
(12) ヌートカトン 0.10
(13) メチルアトラレート 0.10
(14) 精製水 100とする残部
製法:(1)〜(5)の油相成分、及び(6)〜(8)を(14)に加えた水相成分をそれぞれ80℃に加熱混合均一化する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して均一に攪拌する。次いで、(9)を加え、ホモジナイザーにより均一に乳化した後、冷却し、45℃にて(10)〜(13)を加えて混合均一化する。
(1) 精製水 100とする残部
(2) グリチルリチン酸ジカリウム 0.05
(3) ポリエチレングリコール(4000) 1.00
(4) トリメチルグリシン 1.00
(5) 紅藻抽出物 1.50
(6) アスコルビン酸リン酸エステルナトリウム塩 2.00
(7) 水酸化ナトリウム(10重量%水溶液) 2.20
(8) クエン酸ナトリウム 0.30
(9) ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム(40重量%水溶液)0.20
(10)ギ酸フェニルエチル 0.01
(11)ジヒドロジャスモン酸メチル 0.0005
(12)ジメチルベンジルカルビノール 0.0001
(13)エタノール 5.00
(14)ポリオキシエチレン(60E.O.)硬化ヒマシ油 0.02
(15)香料 0.01
(16)パラオキシ安息香酸メチル 0.05
製法:(1)〜(16)を混合し、均一化する。
Claims (2)
- アルデヒドC−16、イソプロピルキノリン、β―ナフチルメチルエーテル、ギ酸フェニルエチル、ジメチルベンジルカルビノール、及びメチルアトラレートから選択される1種もしくは2種以上の化合物を含有するチロシナーゼ活性抑制剤。
- 請求項1に記載のチロシナーゼ活性抑制剤を美白有効成分として含有する美白剤。
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