JP4768439B2 - 変異誘発による抗体のFcRn結合親和力又は血清半減期の改変 - Google Patents
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Description
Ghetie et al.,は、マウスIgG1 Fc-ヒンジフラグメント内で位置252、位置254及び位置256を無作為に変異誘発させた。1つの突然変異体は、野生型のものと比べて、マウスのFcRnについての3.5倍高い親和力と2つのマウス系統においてそれぞれ約23%又は65%長い半減期を示した(Ghetie et al.,Nat. Biotechnol.15:637-640(1997))。
Martin et al.,は、他の数多くのものの中でも特に位置250、314及び428を含めて、FcRnに対する結合を増大させるためヒトIgG Fc内の一定数の位置における変異誘発を提案した。しかしながら、Martin et al.により提案された突然変異体のいずれも、FcRnに対する結合のために構築又はテストされていない(Martin et al., Mol. Cell 7:867-877(2001))。
Homick et al, は、キメラヒトIgG1抗体のFc領域内の位置253での単一アミノ酸置換が、マウス体内のクリアランスを加速し、中実腫瘍の免疫シンチグラフィを改善することを示した(Hormick et al., J. Nucl. Med.41:355-362(2000))。
米国特許第5,530,101;5,585,089;5.693,761;5,693,762;及び6,180,370号は、免疫グロブリンのヒト型化を開示している。
米国特許出願第20020098193A1号及びPCT公報WO97/34621号は、Fcヒンジ領域内に少なくとも1つのアミノ酸置換を有し、IgGとの関係において増大した血清半減期をもつ突然変異体IgG分子を開示している。しかしながら、位置250、314又は428における突然変異についていかなる実験上の裏づけも提供されていない。
PCT公報WO98/05787号は、その誘発された毒性を減少させるべくBR96抗体の位置310〜331においてアミノ酸を欠失又は置換させることを開示しているが、改変されたFcRnに対する結合を結果としてもたらすアミノ酸修飾を開示していない。
特定の実施形態においては、本発明は、FcRnレセプタとのヒンジ-Fcドメインの相互作用に直接的又は間接的に関与するものとして構造研究によって同定された位置におけるアミノ酸残基の変化により、そのin vivo半減期が延長(又は短縮)されている。修飾されたIgGクラス抗体に関する。
本発明の修飾は修飾された抗体(又はその他の分子)の生物学的利用能(例えば粘膜表面又はその他の標的組織)を改変(すなわち増大又は減少)させることもできるということを指摘しておくべきである。
本発明はさらに、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250が、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、リジン、フェルニアラニン、プロリン、トリプトファン又はチロシンで置換されている、又は重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、又はバリンで置換されている、未修飾抗体と比べて減少したFcRn結合親和力及び/又は減少した血清半減期をもつ修飾された抗体を提供している。
(a) アミノ酸残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸が、未修飾抗体の中に存在するものとは異なるアミノ酸で置換されていおり、かくしてFcRn結合親和力及び/又は血清半減期の改変を引き起こす、免疫グロブリン重鎖の定常領域を少なくともコードするDNAに操作可能な形でリンクされた適切なプロモータを含んで成る発現ベクター(好ましく複製可能な発現ベクター)を調製する段階;
(b) 宿主細胞を前記ベクターで形質転換する段階;及び
(c) 前記修飾された抗体を産生するべく前記形質転換済み宿主細胞を培養する段階、
を含んで成る、未修飾抗体と比べた場合に改変されたFcRnに対する結合親和力及び/又は改変された血清半減期を有するIgGクラスの修飾された抗体を生産する方法をも提供する。
好ましい変形実施形態においては、本発明のアミノ酸修飾は同様に、治療又は診断用抗体の血清半減期を減少させるためにも使用可能である。かかる治療又は診断用抗体は、当該技術分野において周知であり、本発明の以下の記述において列挙されている。
本発明をより完全に理解できるように、いくつかの定義を記す。
本明細書で用いられている「免疫グロブリン」及び「抗体」という語は、免疫グロブリン遺伝子により実質的にコードされる1又は複数のポリペプチドから成るタンパク質を意味する。認識された免疫グロブリン 遺伝子には、カッパ、ラムダ、アルファ、ガンマ(γ1、γ2、γ3、γ4)、デルタ、イプシロン及びミュー定常領域遺伝子ならびに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が含まれる。全長免疫グロブリン「軽鎖」(約25kd又は214個のアミノ酸)は、NH2-末端にあるカッパ又はラムダ可変領域(約110のアミノ酸)及びCOOH末端にあるカッパ又はラムダ定常領域遺伝子によってコードされる。全長免疫グロブリン「重鎖」(約50Kd又は446のアミノ酸)は、重鎖可変領域遺伝子(約116のアミノ酸)及び例えば(約330のアミノ酸をコードする)ガンマといったその他の上述の定常領域遺伝子の1つによってコードされる。
in vitro検出検定及びそのためのヒトにおける修飾された抗体のin vivo使用を含めた、本発明の数多くの好ましい使用において、本発明に従って修飾された(すなわち突然変異を受けた)キメラ、霊長類化、ヒト型化又はヒト抗体を使用することが好ましい可能性がある。
本明細書で使用される「改変する」という語は、「増大」又は「減少」させることを意味する。
本発明は、アミノ酸残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸が未修飾抗体の中に存在するものと異なるアミノ酸残基と置換される、IgGクラスの修飾された抗体を提供する。
各位置について、置換するアミノ酸は、未修飾抗体のその位置に存在するものとは異なるあらゆるアミノ酸残基であり得る。
本明細書に開示されているのは、位置250、314及び428が強調された状態の、OST577-IgG1(配列番号3)の重鎖定常領域のアミノ酸配列である(図3C)。
1) 重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250が、グルタミン酸で置換され、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンで置換される。
2) 重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250がグルタミンで置換され、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンで置換される。
3) 重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250がグルタミンで置換され、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンで置換される。
T250E/M428F(配列番号75)又はT250Q/M428L(配列番号76)の二重アミノ酸置換を有する修飾されたIgG1の重鎖定常領域のアミノ酸配列は図3Cに開示されている。
位置250及び428に記述された二重アミノ酸置換を伴う修飾された抗体は、未修飾抗体のものに比べてFcRnに対する非常に高い結合親和力を表示する。
本発明の好ましい実施形態においては、修飾された抗体のFcRn結合親和力及び/又は血清半減期は、少なくとも約30%、50%、80%、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、15倍、20倍、25倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍又は100倍増大する。
本発明の好ましい実施形態においては、前記修飾された抗体のFcRn結合親和力及び/又は血清半減期は、少なくとも約30%、40%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%、97%、98%又は99%だけ減少させられる。
本発明は同様に、配列番号10〜76のうちのいずれか1つのアミノ酸配列を含むポリペプチドをも内含している。好ましい実施形態においては、これらのポリペプチドは、突然変異を受けたIgG1、IgG2又はIgG2M3定常領域である。
本発明は、改変されたFcRn結合親和力及び/又は血清半減期をもつタンパク質特に抗体を産生する方法を提供している。好ましくは、本発明は、本明細書に開示されている位置のうちの1又は複数のものにおいて一定の与えられたIgGクラスの抗体を修飾するための方法を提供している。これは化学的に達成することもできるし、或いは又、任意の既知の産生方法を用いた組換え型産生及び無作為又は部位特異的変異誘発により達成することもできる。
置換は、位置250、314又は428で単独で行なうこともでき、又、位置250と428といったようにそれらの任意の組合せで行なうこともできる。
(a) 免疫グロブリン重鎖の定常領域を少なくともコードするDNAに操作可能な形でリンクされた適切なプロモータを含んで成り、かつアミノ酸残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸が、未修飾抗体の中に存在するものとは異なるアミノ酸で置換されかくして血清半減期の改変をひき起こす複製可能な発現ベクターを調製する段階;
(b) 宿主細胞を前記ベクターで形質転換する段階;及び
(c) 前記修飾された抗体を産生するべく前記形質転換済み宿主細胞を培養する段階、
を含んで成る。
未修飾抗体全体をコードするDNAが変異誘発のための出発DNAとして用いられる場合、修飾された抗体全体は、本明細書に記述されている方法のステップ(a)、(b)及び(c)を実施することによって産生可能である。相補的軽鎖を生成するための前記方法のステップ(a)とステップ(b)の間のステップは必要でなくなる。
本発明の修飾された抗体を産生するために用いられる宿主細胞は、当該技術分野において既知のさまざまな培地内で培養可能である。
本明細書で記述されている修飾された抗体は、細胞内で、周縁質空間内で産生され得、そうでなければ培地内に直接分泌され得る。好ましくは、本発明における修飾された抗体は、培地内に分泌される。修飾された抗体を産生する宿主細胞培養の培地は、収集され、遠心分離により細胞残屑が回転させられる。上清は収集されて、タンパク質発現検定に付される(例中のさらなる詳細を参照のこと)。
修飾された抗体は、未修飾抗体に比べ適切な抗原結合を保持しているべきである。従って、ELISAといったような免疫学の技術分野において既知の手順により、適正な抗体-抗原結合がテストされる。修飾された抗体が未修飾抗体のものに類似した構造的特性を有することを確認するために、付加的な実験を実施することができる。これらの実験には、SDS-PAGE、SEC、ELISA及びプロテインA結合検定が含まれるが、それらに制限されるわけではない。結合に異なる残基が関与するもののプロテインAは、FcRnといったようなCH2-CH3接合部の同じ領域に結合することから、プロテインA結合検定が好まれる。
修飾された抗体がpH依存的にFcRnに結合するということを確認するために、直接結合検定も実施されるべきである。特に、FcRnに対する修飾された抗体の結合親和力は、pH6.0とpH8.0の両方でテストされる(例中のさらなる詳細を参照のこと)。一般に、pH6.0での結合親和力は、pH8.0でのものを上回るはずである。
本発明は、本明細書で記述されている突然変異を伴う、修飾された抗体をコードするポリヌクレオチド分子、又は定常領域、Fc領域又はCH2-CH3領域といったような修飾された抗体の装飾済みの部分的又は完全な重鎖をコードするポリヌクレオチド分子を提供している。
本発明は、本明細書に記述されている通りの前記核酸分子を含む前記ベクターを含有する宿主細胞を内含している。本明細書に記述されている修飾された抗体の発現のための適切な宿主細胞は、Escherichia coliといったような原核生物又は酵母、植物、昆虫及び哺乳動物を含む真核多細胞生物から誘導される。
本発明は、本明細書で記述されている修飾された抗体及び薬学的に受容可能な担体を含む組成物を提供している。非経口投与用の組成物は、一般に、受容可能な担体好ましくは水性担体中に溶解された抗体又はそのカクテルの溶液を含む。例えば水、緩衝水、0.4%の塩水、0.3%のグリシンなどのさまざまな水性担体を使用することができる。これらの溶液は、無菌で一般に粒状物質を含まない。組成物は、例えば酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウムといったpH調整及び緩衝剤、毒性調整剤などのような生理学的条件を近似するのに必要とされるような薬学的に受容可能な補助物質を含有することができる。これらの処方中の抗体の濃度は、非常に広範に、すなわち約0.01%未満、通常は少なくとも約0.1重量%未満から5重量%に至るまで変動することができ、主として選択された特定の投与様式に従った粘度及び流体体積に基づいて選択される。
本発明における修飾された抗体は、さまざまな非治療目的で使用可能である。これらは、親和力精製剤として使用できる。これらは又、特定の細胞、組織又は血清中の問題の抗原の発現を検出することといったような、診断検定においても有用であり得る。診断向け利用分野においては、該抗体は標準的に、放射性同位元素、螢光標識及びさまざまな酵素基質標識を含めた検出可能な部分で標識されることになる。抗体は同様に、競合結合検定、直接及び間接サンドイッチ検定及び免疫沈降検定といったような既知のあらゆる検定方法においても利用可能である。抗体は同様に、in vivo診断検定のためにも使用可能である。一般に、抗体は、免疫シンチグラフィを用いて抗原又はそれを発現する細胞の場所を特定できるような形で、放射性核種で標識される。
本明細書中に記述されている抗体により治療可能な癌には、乳癌、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、消化管癌、膵臓癌、グリア芽種、子宮頸癌、卵巣癌、膀胱癌、肝臓癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、陰門癌、甲状腺癌、肝癌及びさまざまなタイプの頭部及び頸部癌が含まれるがこれに制限されるわけではない。
当該抗体を含む組成物は、非経口皮下投与、腹腔内投与、肺内投与、及び鼻腔内投与そして局所的免疫抑制治療用として所望の場合には、病変内投与を含むあらゆる適切な手段で投与される。非経口輸液には、筋内、静脈内、動脈内、腹腔内又は皮下投与が含まれる。さらに、抗体は、特に下降する抗体用量でのパルス輸液によって適切に投与される。
以下の例は、制限としてではなく例示を目的として提供されるものである。全ての引用の開示は、本明細書に明示的に参考として包含されている。
この例は、本発明において使用される抗体発現ベクターについて記述している。
pVg2.D.TtのM3変異体の1誘導体(Core et al., J. Immunol. 159:3613〜3621(1997))である重鎖発現プラスミドpVAg2M3-OST577の成分は、以下の通りである。図5Aに示されているように、EcoRI部位から時計回り方向に進んで、重鎖単位は、EcoRI-XbaIフラグメントとしてのヒトサイトメガロウイルス(hCMV)主要前初期(IE)プロモータ及びエンハンサ(Boshart et al., Cell41;521-530(1985))で始まる。hCMV領域の後には、シグナル配列、Jセグメント及びスプライス供与体配列を含むXbaIフラグメントとしてのOST577VH領域が続いている。
この例は、本発明において使用されるプラスミドについて記述している。
OST577 重鎖及び軽鎖cDNAは、ヒトモノクローナル抗HBV抗体を発現するトリオーマ細胞系統からPCRによりその全体がクローニングされた(Ehrich et al.前掲書)。重鎖及び軽鎖可変領域は、Co et al. 前出に概略説明されているように、シグナル配列、V、(D)、及びJセグメント、スプライスドナー配列及び対応するイントロンの一部分を含む、両方の端部でXbaIによりフランキングされたミニエクソンへとPCRにより変換された。pVg2.D.TtのM3変異体の誘導体である(Cole et al., 前掲書)発現ベクターpVAg2M3-OST577(図5A参照)は、OST577-VHミニエクソンで、OKT3-VHミニエクソンを含有するXbaIフラグメントを置換することによって構築された。
この例は、ヒトγ2M3重鎖遺伝子のFc領域の変異誘発について記述している。
分子モデリング:
ラットFc/FcRn複合体の低解像度結晶構造に基づいて、ヒトFc/FcRn複合体の初期モデルが生成された(Burmeister et al., Nature 372:379-383(1994);RCSBタンパク質データバンクコードIFRT)。まず第1に複合体のラットβ2mは、その配位と同じ配位をヒト組織適合抗原HLA-A2の高解像度結晶構造から取られたヒトβ2mに重ね合わせることによって置換された(Saper et al. J. Mol. Biol. 219:277-319(1991));RCSPコード3HLA)。その後、ラットFcRnのアルファ鎖は、複合体内のラットアルファ鎖と同じ配位でヒトFcRnの高解像度結晶構造から取られたヒトアルファ鎖を重ね合わせることで置換された(West and Bjorkman, Biochemistry 29:9698-9708(2000);RCSBコード(1EXU)。
以下モデル3と呼ぶ第3のモデルが、ヘテロ2量体ラットFc/FcRn複合体の高解像度結晶構造(Martin et al., Mol. Cell 7:867-877(2001);RCSBコード1/1A)に基づいて、上述の通りに生成された。
(Kabat et al.,前掲書のEU指標に従って番号づけされた)OST577-IgG2M3 重鎖の位置250、314及び428で無作為アミノ酸置換を生成するために、オーバーラップ・エクステンションポリメラーゼ連鎖反応(PCR)方法(Higuchi, 前掲書)を使用した。位置250で無作為突然変異体を生成するためには、M=A又はC、及びN=A、C、G又はTであるものとして変異誘発プライマJY24(5′-GAC CTC AGG GGT CCG GGA GAT CAT GAG MNN GTC CTT GG-3′)(配列番号77)及びJY25(5′-CTC ATG ATC TCC CGG ACC CCT GAG GTC-3′)(配列番号78)が使用された。オーバーラップ・エクステンションPCRの第1ラウンドでは、左側フラグメントのために外部プライマmsc g2-1(5′-CCA GCT CTG TCC CAC ACC G-3′)(配列番号79)及びJY24が用いられ、右側フラグメントのためには外部プライマkco8′(5′-GCC AGG ATC CGA CCC ACT-3′)(配列番号80)及びJY25が用いられた。
PCR反応は、GeneAmp(商標)PCR System9600(Applied Biosystems(商標)、Foster City, CA)中でまず5分間94℃で、次に5秒間94℃、5秒間55℃及び60秒間72℃のサイクル25回でインキュベートしその後7分間72℃でインキュベートすることによって、メーカーの推奨事項に従ってExpandTM高忠実度PCRシステム(Roche Diagnostics Corporation, Indianapolis, IN)を用いて行なわれた。PCR産物を、低融点アガロースゲル上で走らせ、ゲルから切除し、70℃で融解させた。
改変された血清半減期をもつものと予想されることになる新生児Fcレセプタ(FcRn)に対するより高い又はより低い親和力をもつヒトIgG 突然変異体を単離するために、(Kabat et al.前掲書のEU指標に従って番号付けされる)ヒトγ2M3重鎖の位置250、314及び428において、無作為アミノ酸置換が生成された。これら3つの位置は、ラットFc/FcRn複合体のX線結晶構造(Burmeister et al. 前掲書から演繹された、ヒトIgG2M3Fc及びヒトFcRnの複合体のコンピュータモデリング(例の冒頭で記述したモデル1、2及び3を参照)に基づいて選択された。位置250、314及び428にある野生型アミノ酸はFc/FcRn界面近くにあるが、これらの残基は、FcとFcRnの間のpH依存性相互作用に直接寄与すると思われない。
この例は、ヒトγ1重鎖遺伝子のFc領域の変異誘発について記述する。
変異誘発:
(Kabat et al, 前掲書のEU指標に従って番号づけされた)OST577-IgG1重鎖の位置250及び428でアミノ酸置換を生成するために、オーバーラップ・エクステンションPCR方法(Higuchi, 前掲書中)を使用した。T250E突然変異体を生成するためには、変異誘発プライマJX076(5′-AAC CCA AGG ACG AAC TCA TGA TCT CCC G-3′)(配列番号101)及びJX077(5′-GGA GAT CAT GAG TTC GTC CTT GGG TTT TG-3′)(配列番号102)が使用された。オーバーラップ・エクステンションPCRの第1ラウンドでは、左側フラグメントのために外部プライマJX080(5′-CCT CAG CTC GGA CAC CTT CTC-3′)(配列番号103)及びJX077が使用され、右側フラグメントのためには外部プライマNT244(5′-GCC TCC CTC ATG CCA CTC A-3′(配列番号104)及びJX076が使用された。
改変された血清半減期をもつものと予想されることになる新生児Fcレセプタ(FcRn)に対する改変された親和力をもつヒトIgG 突然変異体を同定するために、(Kabat et al.前掲書のEU指標に従って番号付けされる)ヒトγ1重鎖の位置250及び428において、複数のアミノ酸置換が生成された。これら2つの位置は、FcRnに対する増大した又は減少した結合を結果としてもらしたヒトγ2M3重鎖内のこれらの位置における突然変異の同定に基づいて選択された。位置250及び428にある野生型アミノ酸はFc/FcRn界面近くにあるが、これらの残基は、FcとFcRnの間のpH依存性相互作用に直接寄与すると思われない。従って、これらの位置におけるアミノ酸置換は、pH依存性結合を維持する一方で、FcRnに対するFcの親和力を増大(又は減少)させ得る。ヒトγ2M3 重鎖との関連において増大した結合を示した単一及び二重の両方の突然変異体が、単一突然変異体T250E、T250Q、M428F及びM428Lそして二重突然変異体T250E/M428F及びT250Q/M428Lを含めたヒトγ1重鎖の中で評価された。ヒトγ2M3重鎖(T250D)との関連において減少した結合を示した単一突然変異体が同様にヒトγ1重鎖の中で評価された。
この例は、突然変異体IgG2M3及びIgG1抗体の特徴づけについて記述している。
細胞培養:
ヒト腎細胞系統293-H(Life Technologies(商標), Rockville, MD)を、7.5%CO2のインキュベータ内で37℃で、以下293培地と呼ぶ10%のウシ胎児血清(FBS)(HyClone(商標), Logan, UT)、0.1mMのMEM可欠アミノ酸(InvitrogenTM)及び2mMのL-グルタミン(InvitrogenTM)を含有するDMEM(Bio WhittakerTM,Walkersville, MD)内に維持した。一過性トランスフェクションの後のモノクローナル抗体の発現及び精製について、293-H細胞を、以下低-IgG293培地と呼ぶ10%の低-IgG FBS(HyClone(商標))、0.1mMのMEM可欠アミノ酸及び2mMのL-グルタミンの中でインキュベートさせた。マウス骨髄腫細胞系統Sp2/0(米国標準培養収集機関、Manassus, VA)を、10%のFBS及び2mMのL-グルタミンを含有するDMEM中に維持した。安定したトランスフェクション後のモノクローナル抗体の精製のために、Sp2/0 細胞をハイブリドーマ-SFM(HSFM)(Life Technologies(商標))での成長に適合させた。
293-H細胞を、適切な軽鎖プラスミド及び適切な野生型の重鎖プラスミド、又は位置250、314又は428に単一又は二重アミノ酸置換を含むさまざまな突然変異を受けた重鎖プラスミドのうちの1つで一過性に同時トランスフェクションさせた。小規模一過性トランスフェクションのためには、1回のトランスフェクションにつき約1×106個の細胞を6ウェル平板内で3mlの293培地の中で平板固定し、一晩集密状態になるまで成長させた。翌日、2μgの軽鎖プラスミドと2μgの野生型又は突然変異を受けた重鎖プラスミドを0.25mlのHSFMと組合わせた。
小規模一過性トランスフェクションからの上清を最高1200rpmで5分間遠心分離することで収獲し、0.22μmのMillex(商標)-GVマイクロフィルタ(Millipore(商標) Corporation, Bedford, MA)を用いて無菌ろ過した。標本を、3000rpmでの遠心分離により、6mlのVivaspin(商標)濃縮器(50,000MWCO)(Vivascience(商標)AG,Hannover, Germany)を用いて約6倍、0.5mlまで濃縮した。濃縮したタンパク質を5mlのPBS、pH6.0中に再懸濁させ、上述のとおり0.5mlの体積まで濃縮した。以下に記述したELISA方法を用いて、各標本中の抗体濃度を測定した。
Sp2/0 細胞を適切な軽鎖プラスミド及び適切な野生型の、重鎖プラスミド又は位置250又は428に単一又は二重アミノ酸置換を含むさまざまな突然変異を受けた重鎖プラスミドのうちの1つで、安定した形でトランスフェクションさせた。約1×107個の細胞を10mlのPBSで洗浄し、1mlのPBS中で再懸濁させた。約25〜30μgの軽鎖プラスミド及び50〜60μgの重鎖プラスミドをFspIで線形化し、細胞に付加した。細胞とDNAを穏やかに混合し、氷上でGene Pulser Cuvelte(Bio-Rad(商標) Laboratories, Hercules, CA)に移した。0.360kV、25μFに設定したGene Pulser II(Bio Rad(商標) Laboratories)を用いて、細胞を電気穿孔させ、10〜20分間氷に戻した。細胞を40mlのDMEM、10%のFBS、2mMのL-グルタミンの中で希釈させ、100μl/ウェルで4枚の96ウェル平板内に同定した。
培養上清中に存在するOST577又はHulD10抗体の量を定量するために、ELISAを実施した。ImmulonTM4平板(DYNEX(商標) Technologies, Inc., Chantilly, VA)を4℃で一晩、pH9.4の100μl/ウェルの0.2Mの炭酸塩/重炭酸塩緩衝液中の1.0μg/mlのヤギF(ab′)2 抗ヒトIgGガンマ鎖抗体(BioSource International, Camarillo, CA)又はAffiniPureTMヤギ抗ヒトIgG Fcy フラグメント特異的抗体(Jackson Immuno Research Laboratories, Inc. West Grove, PA)でコーティングした。翌日、平板をELISA Wash Buffer(EWB)(PBS、0.1% Tween20)で洗浄し、室温で20〜30分間、300μl/ウェルのTBS中のSuper Block(商標) Blocking Bufferで遮断させた。平板をEWBで洗浄し、適切に希釈させた試験標本を各ウェルに添加した。精製したOST577又はHulD10抗体を適宜、0.2μg/mlから始めて100μl/ウェルのELISA Buffer(EB)(PBS、1%のウシ血清アルブミン、0.1%のTween20)中で2倍に段階希釈した。
一過性トランスフェクションからの培養上清を遠心分離によって収獲し、無菌ろ過した。ろ過した上清のpHを、pH7.0の1Mのクエン酸ナトリウム1/50体積を添加することで調整した。上清を、pH7.0で、150mMのNaCl、20mMのクエン酸ナトリウムで予め平衡化された1mlのHiTrap(商標) Protein A HPカラム(Amersham BiosciencesTM Corporation, Piscataway, NJ)上に走らせた。カラムを同じ緩衝液で洗浄し、結合した抗体を、pH3.5の20mMのクエン酸ナトリウムで溶出させた。1/50体積のpH6.5の1.5Mのクエン酸ナトリウムを添加して中和させた後、プールした抗体画分を、pH6.0の120mM NaCl、20mMクエン酸ナトリウムで予め平衡化された5mlのHiTrap(商標) Desaltingカラム(Amersham BiosciencesTM Corporation)上に走らせた。流入物を収集し、OD280>0.1の画分をプールし、2mlのVivaspin(商標) 濃縮器(50,000ダルトンMWCO)(Vivascience(商標) AG)を用いて最高0.5〜1.0mg/mlまで濃縮した。その後、0.2μmのMillex(商標)-GVマイクロフィルター(Millipore(商標) Corporation)を用いて、標本をろ過滅菌した。精製された抗体の濃度は、280nmでの吸収度(1mg/ml=1.4A280)を測定することによって、UV分光法によって決定された。
NuPAGE(商標)Novex4-12% Bis-Tris gels (InvitrogenTM)上に還元又は非還元条件で5μgの精製済み抗体標本を走らせ、メーカーの推奨事項に従ってSimply BlueTMSafeStain Kit(InvitrogenTM)を用いて染色した。
IgG2M3Fc及びIgG1Fc突然変異体は、それぞれ、OST577の軽鎖及び重鎖可変領域(Ehrlich et al.,前掲書中)、ヒトラムダ-2の軽鎖定常領域(Hieter et al.(1981)、前掲書中)及びヒトガンマ-2 突然変異体3(IgG2M3)(Cole et al., 前掲書中)及びIgG(Ellison et al.,前掲書中)の重鎖定常領域を含む抗-HBV抗体として発現された。IgG2M3変異体は、CH2領域(V234A及びG237A)内に2つのアミノ酸置換を含み、ヒトFcyレセプタに対する極めて低い残留結合を示す(Cole et al.,前掲書中)。IgG2M3Fc及びIgG1Fc突然変異体は、同様に、それぞれ、HulD10の軽鎖及び重鎖可変領域(Kostelny et al.(2001)前掲書中)、ヒトカッパの軽鎖定常領域(Hieter et al.(1980)前掲書中)及びヒトIgG2M3(Cole et al., 前掲書中)及びIgG1(Ellison et al., 前掲書中)の重鎖定常領域を含む抗-HLA-DRβ鎖対立遺伝子抗体としても発現された。
この例は、突然変異体IgG2M3及びIgG1抗体の競合結合分析について記述している。
細胞培養:
マウス骨髄腫細胞系統NS0(European Collection of Animal Cell Cultures, Salisbury, Wiltshire, UK)を10%のFBSを含むDMEM中に維持した。表面上で組換え型でGPIリンクしたヒト又はアカゲザルFcRnを発現するNS0トランスフェクタントを、マイコフェノール酸(MPA)選択培地(DMEM、10% FBS、1xHT Media Supplement Hybri-Max(商標) (Sigma(商標))、250μg/mlのキサンチン(Sigma(商標))、1μg/mlのマイコフェノール酸(Life Technologies(商標))及び2mML-グルタミン)又は2×MPA選択培地の中で維持した。
NS0細胞をpDL208で安定した形でトランスフェクションした。約1×107個の細胞を1回洗浄し、1mlの単純DMEM中に再懸濁させ、Gene PulserTM Cuvette(Bio-Rad(商標) Laboratories)に移し、氷上で10分間インキュベートした。40μgのプラスミドpDL208をFspIで線形化し、氷上で細胞と穏やかに混合し、次に1.5kV、3μFに設定したGene PulserTMII(Bio-Rad(商標) Laboratories)を用いて2回パルス処理することにより細胞を電気穿孔し、10分間氷上に戻した。細胞を20mlのDMEM、10%のFBS中で希釈させ、100μl/ウェルで2枚の96ウェル平板内に固定した。培地を48時間後にMPA選択培地と交換した。見かけ上単一のコロニーを含んでいるウェルからのマイコフェノール酸耐性NS0トランスフェクタントを、MPA選択培地内で膨張させ、約3週間後にFACSTMによりスクリーニングした。
NS0細胞を、pDL410で安定した形でトランスフェクションさせた。約6×105個の細胞を上述の通り電気穿孔によりトランスフェクションさせた。アカゲザルFcFnアルファ鎖を交差反応する、試験1回につき100ngのマウス抗ヒトFcRnアルファ鎖抗体(Protein Design LabsTM, Inc.)で染色し、ヤギ抗マウスカッパFITC接合型抗体(Southern Biotechnology Associates, Inc.)で検出することによって、上述の通りにFACSTMによりトランスフェクタントを同定した。後続する結合検定では、NS0RhFcRn、クローン-3と呼称される細胞系統が使用された。
細胞系統NS0 HuFcRn(memb)、クローン7-3上のヒトFcRnに対する結合についての単一点競合結合検定において、濃縮したOST577-IgG2M3上清を試験した。試験一回につき約2×105個の細胞を、pH8.0のFACS Binding Buffer(FBB)(0.5%のBSA、0.1%のNaN3を含有するPBS)中で1回、pH6.0のFBB中で1回洗浄し、pH6.0のFBB中の予め混合されたビオチニル化したOST577-IgG2M3抗体(8.3μg/ml)及び(8.3μg/mlの競合抗体を含む)濃縮上清120μlの中に再懸濁させた。
各々の精製済みOST577-IgG2M3抗体の希釈系列を、細胞系統NS0 HuFuRn(memb)、クローン7-3上のヒトFcRnに対する結合について、ビオチニル化されたHuEP5C7-IgG2M3抗体(He et al., J.Immunol. 160;1029-1035(1998))に対して競合させた。初期スクリーニング実験については、試験1回あたり約2×105個の細胞を、pH6.0のFSB中で1回洗浄し、pH6.0のFSB中の予め混合されたビオチニル化HuEP5C7-IgG2M3抗体(10μg/ml)及びOST577-IgG2M3競合抗体(208μg/mlから0.102μg/mlまでの2倍の系列希釈)100μl中に再懸濁させた。
その表面上でヒトFcRnを安定した形で発現するトランスフェクションを受けたNS0細胞系統を用いて、野生型OST577-IgG2M3又はOST577-IgG1抗体及びそのさまざまな突然変異体のFcRnに対する相対的結合を決定した。上述の通り、濃縮した上清を、単一点競合検定に従ってヒトFcRnに対する結合についてテストし、精製された抗体を、競合結合検定におけるFcRn結合についてテストした。増大する濃度の標識されていない競合抗体を、pH6.0のFSB又はFBBの中で飽和濃度の標識されたIgG2M3又はIgG1抗体の存在下で、細胞と共にインキュベートさせた。
この例は、FcRn結合におけるIgG2M3及びIgG1突然変異体の特性の確認について記述している。
直接的結合検定:
pH6.0のFBB中でトランスフェクションを受けていないNS0細胞に対する、又は細胞系統NS0HuFcRn(memb)、クローン7-3上のヒトFcRnに対する結合について、精製済みOST577-IgG2M3抗体をテストした。pH8.0のFBB中で、試験1回につき約2×105個の細胞を一回洗浄し、pH6.0のFBB中で一回洗浄し、次にpH6.0のFBB中で11μg/mlの濃度で100μlの抗体中に再懸濁させた。
37℃で細胞系統NS0 HuFcRn(memb)、クローン7-3上でヒトFcRnに対する結合について、ビオチニル化されたOST577-IgG2M3抗体に対し、各々の精製済みOST577-IgG2M3抗体の希釈系列を競合させた。試験1回あたり約2×105個の細胞を、pH8.0のFBB中で一回、pH6.0のFBBの中で1回洗浄し、次に、pH6.0のFBB中の予め混合されたビオチニル化OST577-IgG2M3抗体(10μg/ml)及びOST577-IgG2M3競合抗体(208μg/mlから0.102μg/mlまでの2倍系列希釈)100μl中に再懸濁させた。
精製済みOST577-IgG2M3及びOST577-IgG1突然変異体抗体をヒトFcRnに対する結合についてそれぞれの野生型抗体に対し比較し、次にNS0 HuFcRn(memb)、クローン7-3を用いた1点結合及び放出検定においてさまざまなpH値で放出させた。試験1回あたり約2×105個の細胞を、pH8.0のFBB中で1回、pH6.0のFBB中で1回洗浄し、次にpH6.0のFBB中の精製済み抗体(10μg/ml)100μlの中に再懸濁させた。細胞を1時間氷上でインキュベートさせ、pH6.0、6.5、7.0、7.5又は8.0のFBB中で2回洗浄し、適切なpHのFBB中で1.25μg/mlまで希釈させたヤギF(ab')2抗ヒトIgG FITC接合型抗体(Southern Biotechnology Associates, Inc)25μlの中に再懸濁させた。暗所で氷上にて30分間インキュベートした後、細胞を適切なpHのFBB中で2回洗浄し、1%のホルムアルデヒド中に再懸濁させた。FACS Caliburフローサイトメーター(BD(商標) Bioscience)を用いてFACSTMによりFcRnに対する抗体結合について標本を分析した。各突然変異体の平均チャンネル螢光(MCF)を、Excel (Microsoft(商標) Corporation)を用いてプロットした。
ヒトFcRnに対する野生型OST577-IgG2M3又はOST577-IgG1抗体の結合特性は、その表面上でヒトFcRnを安定した形で発現するトランスフェクションを受けたNS0細胞系統を用いて確認された。突然変異体抗体の結合が、一部のその他のレセプタを介して又は未知のメカニズムにより発生するのではなくトランスフェクションを受けたNS0細胞系統上のヒトFcRnに特異的なものであったことを確認するため、ヒトFcRnを安定した形で発現するトランスフェクションを受けたNS0細胞系統に対比して、トランスフェクションを受けていないNS0細胞に対する結合について、抗体をテストした。上述の通り、細胞をpH6.0のFBB中の未飽和濃度の抗体と共にインキュベートさせ、FACSTMにより結合を分析した。図13に示されているように、結果は、親NS0細胞系統に対する見かけ上の結合が全く存在せず、抗体がヒトFcRnを介して、トランスフェクションを受けていない細胞に対し特異的に結合することを示唆していた、ということを表わしていた。
この例は、IgG2M3及びIgG1突然変異体の付加的な特性の確認について記述している。
細胞培養:
ヒトバーキットリンパ腫細胞系統Raji(米国標準培養収集機関)を、10%のFBS(HyClone(商標))及び1%ペニシリン-ストレプトマイシン(Life Technologies(商標))を含有するL-グルタミンを伴うRPMI1640(Bio WhittakerTM)の中に維持した。
OST577野生型及び突然変異体抗体の抗原結合活性を、競合結合ELISAにおいて確認した。ImmulonTM2平板(DYNEX(商標) Technologies)を、組換え型B型肝炎表面抗原(HBsAg)1.0μg/ml(Advanced Immuno Chemical, Inc., Long Beach, CA)で4℃で一晩コーティングした。翌日、平板をEWBで洗浄し、室温で30分間、TBS中のSuperBlock(商標) Blocking Buffer(Pierce Chemical Company)300μl/ウェルで遮断した。平板をEWBで洗浄し、各ウェルに対し100μlのEB中の予め混合されたビオチニル化577-IgG2M3抗体(0.25μg/ml)及び競合物質OST577-IgG2M3抗体(33μg/mlから0.033μg/mlまでの2倍系列希釈)、又は予め混合されたビオチニル化OST577-IgG1抗体(0.25μg/ml)及び競合物質OST577-IgG1抗体(67μg/mlから0.067μg/mlまでの系列希釈)を各ウェルに添加した。
公表された方法(Shields et al. 前掲書中)に従ってエフェクタとしてヒト末梢血単核細胞(PBMC)そして標的としてRaji細胞を用いて乳酸脱水素酵素(LDH)放出を測定することにより、HulD10野生型及び突然変異体抗体の抗体依存性細胞媒介性細胞障害(ADCC)活性を確認した。Ficoll-Paque(商標) Plus勾配(Amersham BiosciencesTM Corporation)を用いて新鮮全血からPBMCを調製し、検定培地中8×106個/mlの細胞密度で再懸濁させた(RPMI1640、1%BSA)。Raji 細胞を検定培地中で3回洗浄し、検定培地中0.4×106個/mlの細胞密度で再懸濁させた。HulD10野生型及び突然変異体抗体を、検定培地中で4μg/ml、0.25μg/ml、及び0.016μg/mlまで希釈した。
野生型及び突然変異体OST577及びHulD10抗体のそれぞれの抗原に対する抗原結合特性は、適切な結合検定を用いて確認された。上述の通り、HBsAgに対するOST577抗体の結合は、競合ELISAにおいて決定された。図16Aに示されているように、HBsAgに対する野生型及び突然変異体 OST577-IgG2M3抗体の結合は、基本的に同一であった。同様に図16Bに示されているように、HBsAgに対する野生型及び突然変異体 OST577-IgG1抗体の結合は、基本的に同一であった。
この例は、in vitro及びin vivoの血清半減期検定について記述している。
In vivoでのFcRnに対するより高い(又はより低い)親和力をもつヒトIgG抗体が、それぞれin vivoでより長い(又はより短かい)血清半減期を有するものと予想されている。FcRnに対するヒトIgG 突然変異体の親和力は、適切なバイオセンサーチップに接合された可溶性FcRnを用いた表面プラズモン共鳴(SPR)といったようなさまざまな方法によってか、又はトランスフェクションを受けた細胞の表面上で発現されたFcRnを用いた競合結合実験を実施することによって、in vivoで測定可能である。in vitro親和力実験において使用されるFcRnは、マウス、アカゲザル又はヒト由来であり得る。所望の特性をもつヒトIgG 突然変異体の血清半減期は、体重1kgあたり0.1〜10mgの抗体といった範囲の抗体用量を適切な実験動物(例えばマウス又はサル)又はヒトに注射し、次に抗体の予想血清半減期にまたがるさまざまな時間的間隔で血清標本を抜き取り、ELISAといったような適切な技術によって無傷のIgGの存在について標本を検定することで、in vivoで測定可能である。
カリフォルニア大学デービス校のカリフォルニア国立霊長類研究センター(CNPRC)において、「OST577の3つの変異体の薬学動態比較」という題の非GLP薬物動態研究が実施された。12匹の雄のマカクアカゲザルを体重で任意抽出し、3つの研究グループのうちの1つに割当てた。各研究グループを構成する4匹の動物は各々、15分間にわたり1mg/kgの割合でOST577の野生型又は2つの変異体のうちの1つの単一回静脈内用量投与を受けた。OST抗体は、野生型OST577-IgG2M3、単一突然変異 M428Lを含むOST577-IgG2M3の1変異体及び、二重突然変異 T250Q/M428Lを含むOST577-IgG2M3の1変異体であった。3つの抗体全てを、Sp2/0 細胞のトランスフェクションにより発現させ、例5に記述されている通りに精製した。
アカゲザル血清標本中のOST577-IgG2M3の濃度を、条件付き検定を用いてELISAにより決定した。プールされた正常なアカゲザル血清(PNRS)をCNPRCから得た。較正物質、陽性血清対照を調製するため及びアカゲザル血清標本の予備希釈のために同じPNRSロットを使用した。3000、1500、750、375、187.5、93.75、46.88、23.44及び0ng/mlでPNRS中でOST577-IgG2M3の標準希釈により較正物質を調製し、2時間室温で平衡化し、-20℃でアリコートの形で凍結させた。低い陽性血清対照については0.2μg/mlで、中位の陽性血清対照については0.4μg/ml、高い陽性血清対照については0.8μg/mlでOST577-IgG2M3でPNRSをスパイクすることによって、陽性血清対照を調製し、室温で2時間平衡化し、-20℃でアリコートの形で凍結させた。各々の動物からの投薬前血清標本を、陰性血清対照として使用した。
血清抗体濃度データはWinNonlin(商標) Enterprise Edition, バージョン3.2(Pharsight(商標) Corporation, Mountain View, CA)を用いて、2区画モデルと適合させられた。このモデルは、第1次分配及び第1次除去速度を仮定し、データをうまく適合させる。モデリングされたデータ(一次薬物動態パラメータの各グループの幾何平均に基づいてシミュレートされたもの)ならびに観察された平均血清抗体濃度(μg/ml)及び4匹の動物の各グループについての標準偏差を、GraphPad Prism(商標), バージョン3.02(GraphPadTM Software, Inc.)を用いて時間(輸液後の日数)の関数としてプロットした。図19に示されているように、データは、OST577-IgG2M3のM428L及びT250Q/M428L変異体の平均血清抗体濃度が全ての時点で野生型OST577-IgG2M3より高いレベルで維持されたことを表わしている。
この例は、IgG3及びIgG4抗体の突然変異体に対する例6及び7の中で記述されたさまざまな結合分析の適用について記述している。
野生型OST577-IgG3又はOST577-IgG4抗体の相対的結合及びFcRn結合に対するそのさまざまな突然変異体の効果は、その表面上でヒト又はアカゲザルFcRnを安定した形で発現するトランスフェクションを受けたNS0細胞系統を用いて決定される。細胞培養及びヒト及びアカゲザルFcRn細胞系統生成は、例6に記されている通りに実施される。精製済みOST577-IgG3又はOST577-IgG4抗体は、例6に記述されたプロトコルに従った競合結合検定においてFcRn結合についてテストされる。図6にIgG2M3及びIgG1について記述されているように、上述の結合検定を使用して、IgG3又はIgG4内でのFc領域突然変異がこれらの抗体のFcRn結合親和力に対して及ぼす効果を観察することができる。
この例は、IgG1、IgG3及びIgG4抗体の突然変異体に対する例9に記述されたin vitro及びin vivo 血清半減期検定の適用について記述している。
例9に記述された通りの「アカゲザル薬物動態研究」のプロトコルは、in vivo 血清半減期及びさまざまな薬物動態パラメータに対する突然変異体の効果を確認する目的で、IgG1、IgG3及びIgG4の突然変異体に対し実施される。
本発明は、現在好まれる実施形態を基準にして記述されてきたが、本発明の精神から逸脱することなくさまざまな修正を加えることができるということを理解すべきである。
全ての刊行物、特許、特許出願及びウェブサイトは、あたかも各々の個々の刊行物、特許、特許出願及びウェブサイトが特異的に及び個別にその全体が参考として内含されているのと同じレベルで、その全体が参考として本明細書に内含されるものである。
Claims (20)
- IgG分子の重鎖定常領域又はそのFcRn−結合部分を含んでなるクラスIgGの抗体又は融合タンパク質であって、当該抗体はFcRn結合親和力及び/又は血清半減期を増加させるために修飾されており、当該FcRn結合親和力及び/又は血清半減期を増加させるための修飾が、EUナンバリングでアミノ酸残基250がグルタミンであり且つEUナンバリングでアミノ酸残基428がロイシンであることから成り、修飾されていない抗体又は融合タンパク質に比べて増加したFcRn結合親和力及び/又は増加した血清半減期を有する抗体又は融合タンパク質。
- 前記IgG分子がヒトIgG1、IgG2、IgG2M3、IgG3又はIgG4分子である、請求項1に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 前記IgG分子がヒトIgG1又はIgG2M3分子である、請求項1に記載の抗体又は融合タンパク質。
- キメラ抗体、霊長類型化抗体又はヒト型化抗体である、請求項1に記載の抗体又は融合タンパク質。
- ヒト抗体である、請求項1に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 重鎖定常領域がEUナンバリングでアミノ酸残基250におけるグルタミン及びEUナンバリングでアミノ酸残基428におけるロイシンを含んでなる点を除き、天然のクラスIgG抗体の定常領域と同じ定常領域を有する抗体又は融合タンパク質であって、天然抗体との関係において増加したFcRn結合親和力及び/又は増加した血清半減期を有する、当該抗体又は融合タンパク質。
- 前記天然のIgGクラス抗体が、ヒトIgG1、IgG2、IgG3又はIgG4分子の重鎖定常領域を含んで成る、請求項6に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 前記天然のIgGクラス抗体が、ヒトIgG1分子の重鎖定常領域を含んで成る、請求項7に記載の抗体。
- 前記天然のIgGクラス抗体が、キメラ抗体、霊長類型化抗体又はヒト型化抗体である、請求項6に記載の抗体又は融合タンパク質。
- ヒト抗体である、請求項6に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 請求項1又は6に記載の抗体又は融合タンパク質の重鎖定常領域ポリペプチド又は重鎖Fc領域ポリペプチド。
- IgGクラスの抗体又は融合タンパク質のFcRn結合親和力及び/又は血清半減期を増加させる方法であって、重鎖定常領域において、EUナンバリングでアミノ酸残基250をグルタミンにより置換すること及びEUナンバリングでアミノ酸残基428をロイシンにより置換することを特徴とする方法。
- 未修飾抗体又は融合タンパク質と比べて、増加したFcRn結合親和力及び/又は増加した血清半減期を有するIgGクラスの抗体又は融合タンパク質を生産する方法において、
(a)EUナンバリングでアミノ酸残基250がグルタミンにより置換されておりそしてEUナンバリングでアミノ酸残基428がロイシンにより置換されている免疫グロブリン重鎖の少なくとも定常領域をコードするDNAに作用可能に連結された適切なプロモータを含んで成る発現ベクターを調製する段階;
(b)宿主細胞を前記ベクターで形質転換する段階;及び
(c)前記修飾された抗体又は融合タンパク質を産生するべく前記形質転換済み宿主細胞を培養する段階、
を含んで成る方法。 - 相補的免疫グロブリン軽鎖をコードするDNAに対し作用可能に連結されたプロモータを含む第2の発現ベクターを調製する段階及びさらに前記第2の発現ベクターで前記宿主細胞を形質転換させる段階、をさらに含んで成る、請求項13に記載の方法。
- 前記抗体又は融合タンパク質が、治療用又は予防用抗体又は融合タンパク質である、請求項1〜10のいずれか1項に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 前記抗体又は融合タンパク質が、治療用又は予防用抗体又は融合タンパク質である、請求項12〜14のいずれか1項に記載の方法。
- アミノ酸残基250におけるグルタミン及びアミノ酸残基428におけるロイシンにより、ダクリツマブ(daclizumab)から修飾されている、請求項15に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 前記の抗体又は融合タンパク質が、抗体又は融合タンパク質アミノ酸残基250におけるグルタミン及びアミノ酸残基428におけるロイシンにより、ダクリツマブ(daclizumab)から修飾されている、請求項16に記載の方法。
- アミノ酸残基250におけるグルタミン及びアミノ酸残基428におけるロイシンにより、次の抗体:パリビズマブ(palivizumab)、トラスツズマブ(trastuzumab)、インフリキシマブ(infliximab)、アブシキシマブ(abciximab)、ベバシズマブ(bevacizumab)、セツキシマブ(cetuximab)、アレムチズマブ(alemtuzumab)、リツキシマブ(rituximab)、エファリズマブ(efalizumab)、ビシリズマブ(visilizumab)、アダリムマブ(adalimumab)、ナタリズマブ(natalizumab)又はバシリキシマブ(basiliximab)から修飾されている、請求項15に記載の抗体又は融合タンパク質。
- 前記の抗体又は融合タンパク質が、アミノ酸残基250におけるグルタミン及びアミノ酸残基428におけるロイシンにより、次の抗体:パリビズマブ(palivizumab)、トラスツズマブ(trastuzumab)、インフリキシマブ(infliximab)、アブシキシマブ(abciximab)、ベバシズマブ(bevacizumab)、セツキシマブ(cetuximab)、アレムチズマブ(alemtuzumab)、リツキシマブ(rituximab)、エファリズマブ(efalizumab)、ビシリズマブ(visilizumab)、アダリムマブ(adalimumab)、ナタリズマブ(natalizumab)又はバシリキシマブ(basiliximab)から修飾されている、請求項16に記載の方法。
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CA2597924C (en) | 2005-02-15 | 2018-10-02 | Duke University | Anti-cd19 antibodies and uses in oncology |
US8163881B2 (en) | 2005-05-31 | 2012-04-24 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Immunoglobulin molecules with improved characteristics |
EP1899477A4 (en) | 2005-07-01 | 2010-01-20 | Medimmune Inc | INTEGRATED APPROACH FOR GENERATING MULTIDOMAIN PROTEIN THERAPEUTIC APPLICATIONS |
EP1931709B1 (en) | 2005-10-03 | 2016-12-07 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized fc receptor binding properties |
CA2625998C (en) | 2005-10-06 | 2015-12-01 | Xencor, Inc. | Optimized anti-cd30 antibodies |
JP2009511067A (ja) | 2005-10-14 | 2009-03-19 | メディミューン,エルエルシー | 抗体ライブラリーの細胞提示 |
EP2650306A1 (en) | 2006-03-06 | 2013-10-16 | Aeres Biomedical Limited | Humanized Anti-CD22 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease |
JP5624276B2 (ja) | 2006-03-31 | 2014-11-12 | 中外製薬株式会社 | 抗体の血中動態を制御する方法 |
WO2008022152A2 (en) | 2006-08-14 | 2008-02-21 | Xencor, Inc. | Optimized antibodies that target cd19 |
WO2008032833A1 (fr) * | 2006-09-14 | 2008-03-20 | Medical & Biological Laboratories Co., Ltd. | Anticorps présentant une activité adcc accrue et son procédé de production |
AU2007299843B2 (en) | 2006-09-18 | 2012-03-08 | Xencor, Inc | Optimized antibodies that target HM1.24 |
US20080279851A1 (en) | 2007-05-07 | 2008-11-13 | Medlmmune, Llc | Anti-icos antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease |
EP3392273A1 (en) | 2007-05-30 | 2018-10-24 | Xencor, Inc. | Methods and compositions for inhibiting cd32b expressing cells |
WO2008145140A2 (en) * | 2007-05-31 | 2008-12-04 | Genmab A/S | Transgenic animals producing monovalent human antibodies and antibodies obtainable from these animals |
EP1997830A1 (en) | 2007-06-01 | 2008-12-03 | AIMM Therapeutics B.V. | RSV specific binding molecules and means for producing them |
JP2010535032A (ja) | 2007-07-31 | 2010-11-18 | メディミューン,エルエルシー | 多重特異性エピトープ結合性タンパク質およびその用途 |
PE20120259A1 (es) | 2007-08-09 | 2012-04-04 | Boehringer Ingelheim Int | Anticuerpos anti-cd37 |
JP5334319B2 (ja) | 2007-09-26 | 2013-11-06 | 中外製薬株式会社 | Cdrのアミノ酸置換により抗体の等電点を改変する方法 |
KR102225009B1 (ko) | 2007-09-26 | 2021-03-08 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 항체 정상영역 개변체 |
RU2010116756A (ru) | 2007-09-28 | 2011-11-10 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся (Jp) | Антитело против глипикана-3 с улучшенными кинетическими показателями в плазме |
DK2245064T3 (da) | 2007-12-21 | 2014-10-27 | Medimmune Ltd | BINDINGSELEMENTER TIL INTERLEUKIN-4-RECEPTOR-ALFA (IL-4Ralfa) |
SI2235059T1 (sl) * | 2007-12-26 | 2015-06-30 | Xencor, Inc. | Fc variante s spremenjeno vezjo na fcrn |
CN102083460A (zh) | 2008-01-18 | 2011-06-01 | 米迪缪尼有限公司 | 用于位点特异性偶联的半胱氨酸工程化抗体 |
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TWI440469B (zh) | 2008-09-26 | 2014-06-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Improved antibody molecules |
EP2358392B1 (en) | 2008-11-12 | 2019-01-09 | MedImmune, LLC | Antibody formulation |
WO2010068722A1 (en) | 2008-12-12 | 2010-06-17 | Medimmune, Llc | Crystals and structure of a human igg fc variant with enhanced fcrn binding |
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AU2010222818B2 (en) | 2009-03-09 | 2015-05-14 | Bioatla, Llc | Mirac proteins |
RU2565809C2 (ru) * | 2009-03-19 | 2015-10-20 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Фармацевтический состав, содержащий молекулы антител с улучшенными свойствами |
AR076650A1 (es) * | 2009-05-04 | 2011-06-29 | Pangenetics 110 B V | Anticuerpos contra el factor de crecimiento nervioso (ngf) con una estabilidad in vivo mejorada |
US20120213705A1 (en) | 2009-06-22 | 2012-08-23 | Medimmune, Llc | ENGINEERED Fc REGIONS FOR SITE-SPECIFIC CONJUGATION |
US20120263701A1 (en) | 2009-08-24 | 2012-10-18 | Volker Schellenberger | Coagulation factor vii compositions and methods of making and using same |
WO2011028952A1 (en) | 2009-09-02 | 2011-03-10 | Xencor, Inc. | Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens |
US8568726B2 (en) | 2009-10-06 | 2013-10-29 | Medimmune Limited | RSV specific binding molecule |
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US8362210B2 (en) | 2010-01-19 | 2013-01-29 | Xencor, Inc. | Antibody variants with enhanced complement activity |
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WO2011122916A2 (ko) | 2010-04-01 | 2011-10-06 | 한국생명공학연구원 | Trail 센서타이저 타겟 유전자인 tip41의 발현 또는 활성 억제제를 함유하는 trail 민감성 증진용 조성물 |
DK2591099T3 (da) | 2010-07-09 | 2021-02-15 | Bioverativ Therapeutics Inc | Kimære koagulationsfaktorer |
WO2012032080A1 (en) | 2010-09-07 | 2012-03-15 | F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges.M.B.H | Stabilised human fc |
UA112062C2 (uk) | 2010-10-04 | 2016-07-25 | Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх | Cd33-зв'язувальний агент |
EP2647706B1 (en) | 2010-11-30 | 2023-05-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly |
EP2679681B2 (en) | 2011-02-25 | 2023-11-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | FcgammaRIIB-specific FC antibody |
ES2692268T3 (es) | 2011-03-29 | 2018-12-03 | Roche Glycart Ag | Variantes de Fc de anticuerpo |
EP2698431B1 (en) | 2011-03-30 | 2020-09-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Retention of antigen-binding molecules in blood plasma and method for modifying immunogenicity |
ES2876421T3 (es) | 2011-04-13 | 2021-11-12 | Bristol Myers Squibb Co | Proteínas de fusión Fc que comprenden enlazadores o disposiciones nuevos |
KR102596953B1 (ko) | 2011-04-29 | 2023-11-02 | 유니버시티 오브 워싱톤 스루 이츠 센터 포 커머셜리제이션 | 치료적 뉴클레아제 조성물 및 방법 |
WO2012162561A2 (en) | 2011-05-24 | 2012-11-29 | Zyngenia, Inc. | Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses |
EP2717898B1 (en) | 2011-06-10 | 2018-12-19 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Pro-coagulant compounds and methods of use thereof |
US9738707B2 (en) | 2011-07-15 | 2017-08-22 | Biogen Ma Inc. | Heterodimeric Fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto |
GB201112429D0 (en) | 2011-07-19 | 2011-08-31 | Glaxo Group Ltd | Antigen-binding proteins with increased FcRn binding |
UY34317A (es) | 2011-09-12 | 2013-02-28 | Genzyme Corp | Anticuerpo antireceptor de célula T (alfa)/ß |
US20130108641A1 (en) | 2011-09-14 | 2013-05-02 | Sanofi | Anti-gitr antibodies |
TW201817744A (zh) | 2011-09-30 | 2018-05-16 | 日商中外製藥股份有限公司 | 具有促進抗原清除之FcRn結合域的治療性抗原結合分子 |
WO2013047748A1 (ja) | 2011-09-30 | 2013-04-04 | 中外製薬株式会社 | 複数の生理活性を有する抗原の消失を促進する抗原結合分子 |
RS55822B1 (sr) | 2011-09-30 | 2017-08-31 | Dana-Farber Cancer Institute Inc | Terapijski peptidi |
US20140335089A1 (en) | 2011-09-30 | 2014-11-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule for promoting elimination of antigens |
WO2013081143A1 (ja) | 2011-11-30 | 2013-06-06 | 中外製薬株式会社 | 免疫複合体を形成する細胞内への運搬体(キャリア)を含む医薬 |
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CA3111357A1 (en) | 2011-12-23 | 2013-06-27 | Pfizer Inc. | Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor |
KR102212098B1 (ko) | 2012-01-12 | 2021-02-03 | 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. | 키메라 인자 viii 폴리펩티드들과 이의 용도 |
SG11201404885RA (en) | 2012-02-15 | 2014-09-26 | Amunix Operating Inc | Factor viii compositions and methods of making and using same |
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CN107266564A (zh) | 2012-02-24 | 2017-10-20 | 中外制药株式会社 | 经由FcγIIB促进抗原消除的抗原结合分子 |
SG10201702396QA (en) | 2012-03-28 | 2017-04-27 | Sanofi Sa | Antibodies to bradykinin b1 receptor ligands |
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MX2014013637A (es) | 2012-05-07 | 2015-02-05 | Sanofi Sa | Metodos para prevencion de la formacion de biopelicula. |
WO2013175276A1 (en) | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Argen-X B.V | Il-6 binding molecules |
CA2875247A1 (en) | 2012-06-08 | 2013-12-12 | Biogen Idec Ma Inc. | Chimeric clotting factors |
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EP2870250B2 (en) | 2012-07-06 | 2022-06-29 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Cell line expressing single chain factor viii polypeptides and uses thereof |
SG11201500045RA (en) | 2012-07-11 | 2015-02-27 | Amunix Operating Inc | Factor viii complex with xten and von willebrand factor protein, and uses thereof |
AU2013288641B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-07-06 | Roche Glycart Ag | Bispecific anti-VEGF/anti-ANG-2 antibodies and their use in the treatment of ocular vascular diseases |
CN116574185A (zh) | 2012-07-25 | 2023-08-11 | 塞尔德克斯医疗公司 | 抗kit抗体及其用途 |
BR112015001955A2 (pt) | 2012-08-24 | 2017-11-07 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | variante de região fc específica de fcgamariib |
HRP20230623T1 (hr) | 2012-09-12 | 2023-09-29 | Genzyme Corporation | Polipeptidi koji sadrže fc domenu s promijenjenom glikozilacijom i smanjenom efektorskom funkcijom |
US9790268B2 (en) | 2012-09-12 | 2017-10-17 | Genzyme Corporation | Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function |
BR112015017619A2 (pt) | 2013-01-24 | 2017-11-21 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | formulação líquida, uso de uma formulação, e, kit |
EP3617220B1 (en) | 2013-02-12 | 2021-03-24 | Bristol-Myers Squibb Company | High ph protein refolding methods |
WO2014126871A1 (en) | 2013-02-12 | 2014-08-21 | Bristol-Myers Squibb Company | Tangential flow filtration based protein refolding methods |
DK3889173T3 (da) | 2013-02-15 | 2023-10-09 | Bioverativ Therapeutics Inc | Optimeret faktor viii-gen |
EP4063389A3 (en) | 2013-03-11 | 2022-12-28 | Genzyme Corporation | Site-specific antibody-drug conjugation through glycoengineering |
US10150800B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-12-11 | Zyngenia, Inc. | EGFR-binding modular recognition domains |
EP2968498A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-09-07 | Biogen Ma Inc | PREPARATIONS CONTAINING FACTOR IX POLYPEPTIDE |
US10745483B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-08-18 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Therapeutic peptides |
WO2014163101A1 (ja) | 2013-04-02 | 2014-10-09 | 中外製薬株式会社 | Fc領域改変体 |
JP2016528167A (ja) | 2013-04-29 | 2016-09-15 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | ヒトFcRn結合改変抗体及び使用方法 |
EP3875106A1 (en) | 2013-08-08 | 2021-09-08 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Purification of chimeric fviii molecules |
EA033403B1 (ru) | 2013-08-13 | 2019-10-31 | Sanofi Sa | Антитела к ингибитору активатора плазминогена 1 (pai-1) и пути их применения |
TW201734054A (zh) | 2013-08-13 | 2017-10-01 | 賽諾菲公司 | 胞漿素原活化素抑制劑-1(pai-1)之抗體及其用途 |
US10548953B2 (en) | 2013-08-14 | 2020-02-04 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Factor VIII-XTEN fusions and uses thereof |
EP3903599A1 (en) | 2013-09-25 | 2021-11-03 | Bioverativ Therapeutics Inc. | On-column viral inactivation methods |
WO2015046467A1 (ja) | 2013-09-27 | 2015-04-02 | 中外製薬株式会社 | ポリペプチド異種多量体の製造方法 |
WO2015066550A1 (en) | 2013-10-31 | 2015-05-07 | Resolve Therapeutics, Llc | Therapeutic nuclease-albumin fusions and methods |
US10584147B2 (en) | 2013-11-08 | 2020-03-10 | Biovertiv Therapeutics Inc. | Procoagulant fusion compound |
KR20220142539A (ko) | 2013-12-04 | 2022-10-21 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 화합물의 농도에 따라 항원 결합능이 변화되는 항원 결합 분자 및 그의 라이브러리 |
MX371187B (es) | 2013-12-06 | 2020-01-22 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Péptidos terapéuticos. |
DE202014010499U1 (de) | 2013-12-17 | 2015-10-20 | Kymab Limited | Targeting von humaner PCSK9 zur Cholesterinbehandlung |
US8986691B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-24 | Kymab Limited | Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA |
US8980273B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-17 | Kymab Limited | Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA |
US10316073B2 (en) | 2013-12-24 | 2019-06-11 | Argenx Bvba | FCRN antagonists and methods of use |
BR112016015512B1 (pt) | 2014-01-10 | 2023-12-19 | Bioverativ Therapeutics Inc | Proteína quimérica, composição farmacêutica e seus usos |
BR112016014969A2 (pt) | 2014-01-15 | 2018-01-23 | Hoffmann La Roche | polipeptídeo, formulação farmacêutica e uso de um polipeptídeo |
AU2015229009B2 (en) | 2014-03-14 | 2019-08-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Vaccine compositions and methods for restoring NKG2D pathway function against cancers |
US10995148B2 (en) | 2014-03-19 | 2021-05-04 | Genzyme Corporation | Site-specific glycoengineering of targeting moieties |
CN113150163A (zh) | 2014-03-21 | 2021-07-23 | X博迪公司 | 双特异性抗原结合多肽 |
WO2015187835A2 (en) | 2014-06-06 | 2015-12-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof |
EP3160478A4 (en) | 2014-06-30 | 2018-05-16 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Optimized factor ix gene |
WO2016023916A1 (en) | 2014-08-12 | 2016-02-18 | Kymab Limited | Treatment of disease using ligand binding to targets of interest |
PE20170702A1 (es) | 2014-09-26 | 2017-06-24 | Bayer Pharma AG | Derivados estabilizados de adrenomedulina y uso de los mismos |
MA40764A (fr) | 2014-09-26 | 2017-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité |
ES2838680T3 (es) | 2014-10-09 | 2021-07-02 | Genzyme Corp | Conjugados de anticuerpo-fármaco glucomodificados |
EA201700181A1 (ru) | 2014-10-14 | 2017-09-29 | Галозим, Инк. | Композиции аденозиндеаминазы-2 (ада-2), их варианты и способы использования |
AR102522A1 (es) | 2014-11-06 | 2017-03-08 | Hoffmann La Roche | Variantes de región fc con propiedades modificadas de unión a fcrn y proteína a |
WO2016071701A1 (en) | 2014-11-07 | 2016-05-12 | Kymab Limited | Treatment of disease using ligand binding to targets of interest |
SI3221346T1 (sl) | 2014-11-21 | 2020-11-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Protitelesa vsebujoča modificirana težko konstantna območja |
BR112017010110A2 (pt) | 2014-11-21 | 2018-01-30 | Bristol-Myers Squibb Company | anticorpos contra cd73 e usos do mesmo |
UY36471A (es) | 2014-12-23 | 2016-06-30 | Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware | Anticuerpos contra el inmunorreceptor (tigit) de linfocitos t con dominios ig y motivos de inhibición del inmunorreceptor basados en tirosina (itim) |
MX2017008978A (es) | 2015-02-05 | 2017-10-25 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos que comprenden un dominio de union al antigeno dependiente de la concentracion ionica, variantes de la region fc, antiocuerpor de union a interleucina 8 (il-8) y usos de los mismos. |
EP4269440A3 (en) | 2015-02-27 | 2024-02-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Composition for treating il-6-related diseases |
IL295425A (en) | 2015-03-09 | 2022-10-01 | argenx BV | Methods for lowering the amount of fc-containing substances in the serum by using fcrn antibodies |
PE20180926A1 (es) | 2015-05-29 | 2018-06-08 | Bristol Myers Squibb Co | Anticuerpos contra el miembro 4 de la superfamilia del receptor del factor de necrosis tumoral (ox40) y sus usos |
WO2017019729A1 (en) | 2015-07-27 | 2017-02-02 | The General Hospital Corporation | Antibody derivatives with conditionally enabled effector function |
AU2016301303B2 (en) | 2015-08-03 | 2021-10-07 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Factor IX fusion proteins and methods of making and using same |
US20190022092A1 (en) | 2015-09-15 | 2019-01-24 | Acerta Pharma B.V. | Therapeutic Combinations of a BTK Inhibitor and a GITR Binding Molecule, a 4-1BB Agonist, or an OX40 Agonist |
CA3005855A1 (en) | 2015-11-19 | 2017-05-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof |
SG10201913278PA (en) | 2016-02-01 | 2020-02-27 | Bioverativ Therapeutics Inc | Optimized factor viii genes |
AU2017228470A1 (en) | 2016-03-04 | 2018-08-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination therapy with anti-CD73 antibodies |
JP2019518713A (ja) | 2016-03-16 | 2019-07-04 | メリマック ファーマシューティカルズ インコーポレーティッド | 癌療法のための改変trail |
KR102417687B1 (ko) | 2016-05-09 | 2022-07-07 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | Tl1a 항체 및 그의 용도 |
HUE064454T2 (hu) | 2016-06-08 | 2024-03-28 | Xencor Inc | IgG4-gyel kapcsolatos betegségek kezelése CD32B-vel keresztkötõ, CD-19 elleni ellenanyagokkal |
AU2017290389A1 (en) | 2016-07-01 | 2019-02-14 | Resolve Therapeutics, Llc | Optimized binuclease fusions and methods |
JP7027401B2 (ja) | 2016-07-14 | 2022-03-01 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | Tim3に対する抗体およびその使用 |
US11053308B2 (en) | 2016-08-05 | 2021-07-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for treating IL-8-related diseases |
WO2018044970A1 (en) | 2016-08-31 | 2018-03-08 | University Of Rochester | Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus k envelope (herv-k) and uses thereof |
SG10201607778XA (en) | 2016-09-16 | 2018-04-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use |
TWI788307B (zh) | 2016-10-31 | 2023-01-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞 |
EP3545002A2 (en) | 2016-11-23 | 2019-10-02 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Mono- and bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x |
CN110520150A (zh) | 2016-12-02 | 2019-11-29 | 比奥维拉迪维治疗股份有限公司 | 使用嵌合凝血因子治疗血友病性关节病的方法 |
EP3548063A1 (en) | 2016-12-02 | 2019-10-09 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Methods of inducing immune tolerance to clotting factors |
WO2018104893A1 (en) | 2016-12-06 | 2018-06-14 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Alpha4-beta7 antibodies with incrased fcrn binding and/or half-life |
WO2018129029A1 (en) | 2017-01-04 | 2018-07-12 | Immunogen, Inc. | Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof |
CA3049165A1 (en) | 2017-01-06 | 2018-07-12 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tumor infiltrating lymphocytes with potassium channel agonists and therapeutic uses thereof |
US20200121719A1 (en) | 2017-01-06 | 2020-04-23 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with tumor necrosis factor receptor superfamily (tnfrsf) agonists and therapeutic combinations of tils and tnfrsf agonists |
WO2018151821A1 (en) | 2017-02-17 | 2018-08-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies to alpha-synuclein and uses thereof |
WO2018185284A1 (en) | 2017-04-07 | 2018-10-11 | Miltenyi Biotec Gmbh | POLYPEPTIDES WITH MUTANT HUMAN IgG4 |
US11851486B2 (en) | 2017-05-02 | 2023-12-26 | National Center Of Neurology And Psychiatry | Method for predicting and evaluating therapeutic effect in diseases related to IL-6 and neutrophils |
MX2019013202A (es) | 2017-05-10 | 2020-01-21 | Iovance Biotherapeutics Inc | Expansion de linfocitos de infiltracion de tumor a partir de tumores liquidos y usos terapeuticos de los mismos. |
US11168129B2 (en) | 2017-05-15 | 2021-11-09 | University Of Rochester | Broadly neutralizing anti-influenza human monoclonal antibody and uses thereof |
EP3630833A1 (en) | 2017-05-25 | 2020-04-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies comprising modified heavy constant regions |
MX2020001593A (es) | 2017-08-09 | 2020-07-13 | Bioverativ Therapeutics Inc | Moleculas de acido nucleico y usos de las mismas. |
AU2018321359B2 (en) | 2017-08-22 | 2023-11-30 | Sanabio, Llc | Soluble interferon receptors and uses thereof |
EP3694552A1 (en) | 2017-10-10 | 2020-08-19 | Tilos Therapeutics, Inc. | Anti-lap antibodies and uses thereof |
JP2021503885A (ja) | 2017-11-22 | 2021-02-15 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 末梢血からの末梢血リンパ球(pbl)の拡大培養 |
MA51032A (fr) | 2017-12-08 | 2021-03-17 | Argenx Bvba | Utilisation d'antagonistes de fcrn pour le traitement de la myasthénie grave généralisée |
CA3085765A1 (en) | 2017-12-15 | 2019-06-20 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof |
US20210087267A1 (en) | 2017-12-20 | 2021-03-25 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Liquid formulations of anti-cd200 antibodies |
WO2019126536A1 (en) | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Alexion Pharmaceuticals Inc. | Humanized anti-cd200 antibodies and uses thereof |
KR20200108870A (ko) | 2018-01-12 | 2020-09-21 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | Tim3에 대한 항체 및 그의 용도 |
MX2020008152A (es) | 2018-02-01 | 2020-11-24 | Bioverativ Therapeutics Inc | Uso de vectores lentivirales que expresan el factor viii. |
JP2021512962A (ja) | 2018-02-13 | 2021-05-20 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | アデノシンa2a受容体アンタゴニストによる腫瘍浸潤性リンパ球(til)の拡大培養並びにtil及びアデノシンa2a受容体アンタゴニストの治療的組み合わせ |
CN112119090B (zh) | 2018-03-15 | 2023-01-13 | 中外制药株式会社 | 对寨卡病毒具有交叉反应性的抗登革热病毒抗体及使用方法 |
AU2019239747A1 (en) | 2018-03-21 | 2020-10-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies binding to VISTA at acidic pH |
AU2019236865A1 (en) | 2018-03-23 | 2020-10-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against MICA and/or MICB and uses thereof |
CA3094112A1 (en) | 2018-03-28 | 2019-10-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Interleukin-2/interleukin-2 receptor alpha fusion proteins and methods of use |
KR20200139219A (ko) | 2018-04-02 | 2020-12-11 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 항-trem-1 항체 및 이의 용도 |
JP7402541B2 (ja) | 2018-05-03 | 2023-12-21 | ユニバーシティ オブ ロチェスター | 抗インフルエンザノイラミニダーゼモノクローナル抗体およびその使用 |
KR20210013091A (ko) | 2018-05-16 | 2021-02-03 | 시에스엘 리미티드 | 가용성 보체 수용체 1형 변이체 및 이의 용도 |
SG11202010767SA (en) | 2018-05-18 | 2020-11-27 | Bioverativ Therapeutics Inc | Methods of treating hemophilia a |
EP3805400A4 (en) * | 2018-06-04 | 2022-06-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule showing changed half-life in cytoplasm |
US20210238289A1 (en) | 2018-06-04 | 2021-08-05 | Biogen Ma Inc. | Anti-vla-4 antibodies having reduced effector function |
CN114903978A (zh) | 2018-07-03 | 2022-08-16 | 百时美施贵宝公司 | Fgf-21配制品 |
CN113056483A (zh) | 2018-07-09 | 2021-06-29 | 戊瑞治疗有限公司 | 结合到ilt4的抗体 |
WO2020014306A1 (en) | 2018-07-10 | 2020-01-16 | Immunogen, Inc. | Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof |
CN112638948A (zh) | 2018-07-11 | 2021-04-09 | 戊瑞治疗有限公司 | 在酸性pH下结合至VISTA的抗体 |
WO2020033863A1 (en) | 2018-08-09 | 2020-02-13 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Nucleic acid molecules and uses thereof for non-viral gene therapy |
TW202031273A (zh) | 2018-08-31 | 2020-09-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 抗pd-1抗體難治療性之非小細胞肺癌(nsclc)病患的治療 |
CN113164780A (zh) | 2018-10-10 | 2021-07-23 | 泰洛斯治疗公司 | 抗lap抗体变体及其用途 |
EP3876957A1 (en) | 2018-11-05 | 2021-09-15 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients refractory for anti-pd-1 antibody |
WO2020112781A1 (en) | 2018-11-28 | 2020-06-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies comprising modified heavy constant regions |
WO2020118011A1 (en) | 2018-12-06 | 2020-06-11 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Anti-alk2 antibodies and uses thereof |
US20220089786A1 (en) | 2019-01-04 | 2022-03-24 | Resolve Therapeutics, Llc | Treatment of sjogren's disease with nuclease fusion proteins |
BR112021014106A2 (pt) | 2019-01-22 | 2021-10-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Anticorpos contra subunidade alfa de il-7r e usos dos mesmos |
EP3931310A1 (en) | 2019-03-01 | 2022-01-05 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof |
CN113613676A (zh) | 2019-03-19 | 2021-11-05 | 中外制药株式会社 | 包含对抗原的结合活性因mta而变化的抗原结合结构域的抗原结合分子及用于获得该抗原结合结构域的文库 |
AU2020253455A1 (en) | 2019-04-03 | 2021-11-04 | Genzyme Corporation | Anti-alpha beta TCR binding polypeptides with reduced fragmentation |
GB2589049C (en) | 2019-04-11 | 2024-02-21 | argenx BV | Anti-IgE antibodies |
EP3995508A4 (en) * | 2019-05-14 | 2023-09-27 | Progen Co., Ltd. | NOVEL MODIFIED IMMUNOGLOBULIN FC FUSION PROTEIN AND USE THEREOF |
WO2020245420A1 (en) | 2019-06-07 | 2020-12-10 | Argenx Bvba | PHARMACEUTICAL FORMULATIONS OF FcRn INHIBITORS SUITABLE FOR SUBCUTANEOUS ADMINISTRATION |
CN114174326A (zh) | 2019-06-18 | 2022-03-11 | 拜耳公司 | 长期稳定的肾上腺髓质素类似物及其用途 |
JP2022540904A (ja) | 2019-07-15 | 2022-09-20 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | ヒトtrem-1に対する抗体およびその使用 |
US20220372139A1 (en) | 2019-07-15 | 2022-11-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-trem-1 antibodies and uses thereof |
EP4031575A1 (en) | 2019-09-19 | 2022-07-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies binding to vista at acidic ph |
JP2022549932A (ja) | 2019-09-30 | 2022-11-29 | バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド | レンチウイルスベクター製剤 |
JP2022552720A (ja) * | 2019-10-16 | 2022-12-19 | エルジー・ケム・リミテッド | 新生児Fc受容体結合アフィマー |
CA3164818A1 (en) | 2019-12-18 | 2021-06-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific anti-ccl2 antibodies |
MX2022008320A (es) | 2020-01-08 | 2022-10-21 | argenx BV | Métodos para tratar trastornos de pénfigo. |
EP4100426A1 (en) | 2020-02-06 | 2022-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Il-10 and uses thereof |
AU2021225962A1 (en) | 2020-02-28 | 2022-10-20 | Genzyme Corporation | Modified binding polypeptides for optimized drug conjugation |
US20230107644A1 (en) | 2020-04-01 | 2023-04-06 | University Of Rochester | Monoclonal antibodies against the hemagglutinin (ha) and neuraminidase (na) of influenza h3n2 viruses |
EP4132971A1 (en) | 2020-04-09 | 2023-02-15 | Merck Sharp & Dohme LLC | Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof |
EP3921034A2 (en) | 2020-04-28 | 2021-12-15 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof |
US20230192867A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-06-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies to garp |
KR20230015365A (ko) | 2020-05-22 | 2023-01-31 | 포르미콘 아게 | Ace2 융합 단백질 및 이의 용도 |
CA3165342A1 (en) | 2020-06-29 | 2022-01-06 | James Arthur Posada | Treatment of sjogren's syndrome with nuclease fusion proteins |
WO2022076606A1 (en) | 2020-10-06 | 2022-04-14 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
EP4225330A1 (en) | 2020-10-06 | 2023-08-16 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
KR20230093483A (ko) | 2020-10-29 | 2023-06-27 | 포르미콘 아게 | Ace2 융합 단백질 및 이의 용도 |
JP2023548878A (ja) | 2020-11-04 | 2023-11-21 | ザ ロックフェラー ユニバーシティー | 中和抗sars-cov-2抗体 |
US20240131064A1 (en) | 2020-12-11 | 2024-04-25 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with braf inhibitors and/or mek inhibitors |
JP2024500403A (ja) | 2020-12-17 | 2024-01-09 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 腫瘍浸潤リンパ球によるがんの治療 |
EP4262811A1 (en) | 2020-12-17 | 2023-10-25 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors |
EP4271791A2 (en) | 2020-12-31 | 2023-11-08 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes |
EP4277926A1 (en) | 2021-01-15 | 2023-11-22 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies |
JP2024506557A (ja) | 2021-01-29 | 2024-02-14 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 修飾された腫瘍浸潤リンパ球を作製する方法及び養子細胞療法におけるそれらの使用 |
CA3205815A1 (en) | 2021-03-03 | 2022-09-09 | Alwin REITER | Formulations of ace2 fc fusion proteins |
CA3210755A1 (en) | 2021-03-05 | 2022-09-09 | Kenneth ONIMUS | Tumor storage and cell culture compositions |
WO2022198141A1 (en) | 2021-03-19 | 2022-09-22 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods for tumor infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd69 selection and gene knockout in tils |
CN118019546A (zh) | 2021-03-23 | 2024-05-10 | 艾欧凡斯生物治疗公司 | 肿瘤浸润淋巴细胞的cish基因编辑及其在免疫疗法中的用途 |
US20220313806A1 (en) | 2021-03-25 | 2022-10-06 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods and compositions for t-cell coculture potency assays and use with cell therapy products |
EP4314068A1 (en) | 2021-04-02 | 2024-02-07 | The Regents Of The University Of California | Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof |
BR112023021665A2 (pt) | 2021-04-19 | 2023-12-19 | Iovance Biotherapeutics Inc | Método para tratar um câncer, e, composição |
WO2022235867A2 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-10 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof |
CA3219148A1 (en) | 2021-05-17 | 2022-11-24 | Frederick G. Vogt | Pd-1 gene-edited tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy |
CA3221735A1 (en) | 2021-06-18 | 2022-12-22 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific anti-ccl2 antibodies |
WO2023004074A2 (en) | 2021-07-22 | 2023-01-26 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Method for cryopreservation of solid tumor fragments |
TW202327631A (zh) | 2021-07-28 | 2023-07-16 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 利用腫瘤浸潤性淋巴球療法與kras抑制劑組合治療癌症患者 |
IL311333A (en) | 2021-09-09 | 2024-05-01 | Iovance Biotherapeutics Inc | Processes for the production of TIL products using a strong PD-1 TALEN |
CA3232700A1 (en) | 2021-09-24 | 2023-03-30 | Rafael CUBAS | Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes |
AR127482A1 (es) | 2021-10-27 | 2024-01-31 | Iovance Biotherapeutics Inc | Sistemas y métodos para coordinar la fabricación de células para inmunoterapia específica de paciente |
WO2023086803A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes |
WO2023094507A1 (en) | 2021-11-24 | 2023-06-01 | Formycon Ag | Improved ace2 fusion proteins |
WO2023094571A1 (en) | 2021-11-25 | 2023-06-01 | Formycon Ag | Stabilization of ace2 fusion proteins |
WO2023147399A1 (en) | 2022-01-27 | 2023-08-03 | The Rockefeller University | Broadly neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies targeting the n-terminal domain of the spike protein and methods of use thereof |
WO2023147488A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods |
WO2023147486A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Tumor infiltrating lymphocytes engineered to express payloads |
WO2023196877A1 (en) | 2022-04-06 | 2023-10-12 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
WO2023201369A1 (en) | 2022-04-15 | 2023-10-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment |
WO2023220608A1 (en) | 2022-05-10 | 2023-11-16 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with an il-15r agonist |
WO2023242362A1 (en) | 2022-06-15 | 2023-12-21 | argenx BV | Fcrn/antigen-binding molecules and methods of use |
WO2024011114A1 (en) | 2022-07-06 | 2024-01-11 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes |
US20240132622A1 (en) | 2022-07-22 | 2024-04-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies Binding to Human PAD4 and Uses Thereof |
WO2024030758A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies |
US20240101691A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Sanofi Biotechnology | Humanized anti-il-1r3 antibody and methods of use |
WO2024089609A1 (en) | 2022-10-25 | 2024-05-02 | Ablynx N.V. | Glycoengineered fc variant polypeptides with enhanced effector function |
WO2024098027A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods for tumor infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd103 selection |
WO2024098024A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6277375B1 (en) * | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
WO2002060919A2 (en) * | 2000-12-12 | 2002-08-08 | Medimmune, Inc. | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
AU2658897A (en) | 1996-03-21 | 1997-10-10 | Epimmune, Inc. | Hla-a2.1 binding peptides and their uses |
CA2262405A1 (en) | 1996-08-02 | 1998-02-12 | Bristol-Myers Squibb Company | A method for inhibiting immunoglobulin-induced toxicity resulting from the use of immunoglobulins in therapy and in vivo diagnosis |
HUP0100813A3 (en) * | 1998-02-25 | 2003-08-28 | Lexigen Pharmaceuticals Corp L | Enhancing the circulating half-life of antibody-based fusion proteins |
US6528624B1 (en) | 1998-04-02 | 2003-03-04 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
ES2694002T3 (es) | 1999-01-15 | 2018-12-17 | Genentech, Inc. | Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante |
US7217797B2 (en) * | 2002-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
SI1562972T1 (sl) * | 2002-10-15 | 2010-12-31 | Facet Biotech Corp | ALTERACIJA FcRn VEZANIH AFINITET ALI SERUMSKIH RAZPOLOVNIH DOB ANTITELESC Z MUTAGENEZO |
-
2003
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2010
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6277375B1 (en) * | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
WO2002060919A2 (en) * | 2000-12-12 | 2002-08-08 | Medimmune, Inc. | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011052012A (ja) * | 2002-10-15 | 2011-03-17 | Abbott Biotherapeutics Corp | 変異誘発による抗体のFcRn結合親和力又は血清半減期の改変 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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DE60334141D1 (de) | 2010-10-21 |
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JP2011052012A (ja) | 2011-03-17 |
ATE480562T1 (de) | 2010-09-15 |
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