JP4633421B2 - 育毛剤及び頭皮化粧料 - Google Patents
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Description
前記テストステロン−5αリダクターゼ阻害作用を有する生薬としては、例えば、Choerospondias属植物の抽出物(特許文献1参照)、マジトの抽出物及びカチュア抽出物(特許文献2参照)、五斂子の抽出物(特許文献3参照)、紅豆杉、鳥欖、幌傘楓、及び穿心蓮から選択されるいずれかの抽出物(特許文献4参照)、などが提案されている。
また、本発明は、第二に、タデ科タデ属のミズヒキの抽出物を含有する優れた育毛作用を有する育毛剤を配合してなる頭髪化粧料を提供することを目的とする。
<1> タデ科タデ属のミズヒキの抽出物を含有することを特徴とする育毛剤である。
<2> テストステロン5α−リダクターゼ阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用及び毛乳頭細胞増殖作用から選択される少なくともいずれかを有する前記<1>に記載の育毛剤である。
<3> 前記<1>から<2>のいずれかに記載のミズヒキ抽出物を有効成分として含有することを特徴とする頭皮化粧料である。
また、本発明の育毛剤は、使用感と安全性に優れているので頭髪化粧料に配合するのに好適なものである。
本発明の育毛剤は、タデ科タデ属のミズヒキの抽出物を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
前記ミズヒキは、秋の野草として生け花や鑑賞用に用いられたり、中国では打撲骨折、吐血、腹痛、下痢、月経不順などに用いられることはあるが、ミズヒキの抽出物がテストステロン5α−リダクターゼ阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用及び毛乳頭細胞増殖作用の少なくともいずれかを有し、育毛剤として有効に用いられることは、これまで全く知られておらず、これらのことは、本発明者らの新知見である。
前記抽出溶媒として使用し得る水としては、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
なお、前記水と親水性有機溶媒との混合溶媒を使用する場合には、低級アルコールの場合は水10質量部に対して1〜90質量部、低級脂肪族ケトンの場合は水10質量部に対して1〜40質量部添加することが好ましい。多価アルコールの場合は水10質量部に対して1〜90質量部添加することが好ましい。
本発明の頭皮化粧料は、本発明の前記育毛剤を含有してなり、更に必要に応じて適宜選択したその他の成分を含有してなる。
前記育毛剤に含まれるミズヒキの抽出物は優れた育毛作用を有するとともに、使用感や安全性に優れているため、頭髪化粧料に配合するのに好適である。このようにミズヒキの抽出物を頭髪化粧料に配合することによって、頭髪化粧料に優れた育毛作用を付与することができる。
前記その他の成分としては、育毛作用の妨げにならない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択した成分が挙げられ、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料、などが挙げられる。これらの成分は、前記ミズヒキ抽出物と共に併用した場合、相乗的に作用して、通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
−ミズヒキの水抽出物の製造−
ミズヒキの地上部の乾燥物を細切りしたもの200gに水2Lを加え、還流抽出器で80℃にて2時間加熱抽出し、熱時濾過した。残渣について更に同様の抽出処理を行った。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、更に乾燥して、ミズヒキの水抽出物を得た。抽出物の収率は表1に示すとおりであった。
−ミズヒキの50質量%エタノール抽出物の製造−
ミズヒキの地上部の乾燥物を細切りしたもの200gに50質量%エタノール2Lを加え、還流抽出器で80℃にて2時間加熱抽出し、熱時濾過した。残渣について更に同様の抽出処理を行った。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、更に乾燥して、ミズヒキの50質量%エタノール抽出物を得た。抽出物の収率は表1に示すとおりであった。
−ミズヒキの80質量%エタノール抽出物の製造−
ミズヒキの地上部の乾燥物を細切りしたもの200gに80質量%エタノール2Lを加え、還流抽出器で80℃にて2時間加熱抽出し、熱時濾過した。残渣について更に同様の抽出処理を行った。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、更に乾燥して、ミズヒキの80質量%エタノール抽出物を得た。抽出物の収率は表1に示すとおりであった。
−テストステロン5α−リダクターゼ阻害作用試験−
製造例1〜3で得られた各抽出物について、下記の試験法によりテストステロン5α−リダクターゼ阻害作用を試験した。
まず、蓋付V底試験管にて、プロピレングリコールで調製した4.2mg/mLのテストステロン20μL、及び1mg/mLのNADPH含有5mmol/mLのTris−HCl緩衝液(pH7.13)825μLを混合した。これに、エタノール、50%エタノール、又は精製水で調製した被験試料80μL、及びS−9 75μLを加え再び混合し、37℃にて30分反応させた後、塩化メチレン1mLを加えて反応を停止した。これを遠心(1600×g、10分)し、塩化メチレン層を下記の条件でガスクロマトグラフィー分析した。同様の方法で空試験を行った。
予め、3α−アンドロスタンジオール、ジヒドロテストステロン(DHT)、及びテストステロンの標準品の塩化メチレン溶液を同様にガスクロマトグラフィー分析し、これら3化合物の精秤量とピーク面積よりピーク面積あたりの化合物量を算出しておき、S−9による反応後の3α−アンドロスタンジオール、ジヒドロテストステロン(DHT)及びテストステロンそれぞれのピーク面積あたりの濃度を求めた(数式1)。その後、数式2に従って、被験試料の変換率を求めた。この変換率を基に、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用を数式3に従って求めた。
濃度(%)=(被験試料のピーク面積×標準品濃度)/標準品のピーク面積
変換率(%)=(A+B)/(A+B+C)
ただし、前記数式2中、Aは3α−アンドロスタンジオールの濃度を表す。Bはジヒドロテストステロン(DHT)の濃度を表す。Cはテストステロンの濃度を表す。
テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害率(%)=(1−E/D)×100
ただし、前記数式3中、Dは空試験での変換率を表す。Eは被験試料添加での変換率を表す。
使用機器:Shimadzu GC−7A
カラム:DB−1701(直径:0.53mm×30m、膜厚:1.0μm)
カラム温度/注入温度:240℃/300℃
検出器:FID
キャリアガス:窒素ガス
−アンドロゲン受容体結合阻害作用試験−
製造例1〜3で得られた抽出物について、下記の試験法によりアンドロゲン受容体結合阻害作用を試験した。
まず、マウス自然発生乳がん(シオノギ癌、SC115)よりクローニングされたSC−3細胞を2%DCC−FBS、及び10−8mol/Lテストステロン含有MEM(MEM/2)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を1.0×105cells/mLの濃度に2%DCC−FBS含有MEM(MEM/2)で希釈し、96wellプレートに1well当たり100μLずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、培地を抜き、10−9mol/LDHTを含む0.5%BSA含有Ham F12+MEM(HMB)に溶解した被験試料を100μL添加し、48時間培養した。その後、終濃度0.4g/mLで2%DCC−FBS含有MEM/2に溶解したMTTを各wellに100μL添加した。2時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを2−プロパノール200μLで抽出した。抽出後、波長570nmにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長650nmにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。空試験として、HMBのみで培養した細胞を、陽性対照として10−9mol/L DHTのみを含有したHMBで培養した細胞を用い、同様の方法で試験を行って補正した。
これらの結果から、下記数式4により、アンドロゲンレセプター拮抗率を算出した。
アンドロゲンレセプター拮抗率(%)=[1−(C−D)/(A−B)]×100
ただし、前記数式4中、Aは、DHT添加、被験試料無添加での570〜650nmにおける吸光度を表す。Bは、DHT無添加、被験試料無添加での570〜650nmにおける吸光度を表す。Cは、DHT添加、被験試料添加での570〜650nmにおける吸光度を表す。Dは、DHT無添加、被験試料添加での570〜650nmにおける吸光度を表す。
−毛乳頭細胞増殖作用試験−
製造例1〜3で得られた各抽出物について、下記の試験法により毛乳頭細胞増殖作用を試験した。
まず、正常ヒト頭髪毛乳頭細胞を2%FCS及び増殖添加剤を含有した毛乳頭細胞増殖培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を10%FBS含有ダルベッコMEMを用いて1.0×104cells/mLの濃度に希釈した後、コラーゲンコートした96wellプレートに1well当り200μL播種し、3日間培養した。培養後、培地を抜き、無血清DMEMに溶解した被験試料を各wellに200μL添加し、更に4日間培養した。毛乳頭細胞増殖作用はMTTアッセイを用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度0.4mg/mLで無血清のDMEMに溶解したMTTを各wellに100μL添加した。2時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを2−プロパノール100μLで抽出した。抽出後、波長570nmにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長650nmにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。
これらの結果から、下記数式5により、毛乳頭細胞増殖率を求めた。試料溶液の濃度25μg/mLの時の結果を表4に示す。
毛乳頭細胞増殖率(%)=(A/B)×100
ただし、前記数式5中、Aは被験試料添加時の吸光度を表す。Bは被験試料無添加時の吸光度を表す。
下記組成の養毛ヘアトニックを常法により製造した。
塩酸ピリドキシン 0.1g
レゾルシン 0.01g
D−パントテニルアルコール 0.1g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1g
l−メントール 0.05g
1,3−ブチレングリコール 4.0g
ニンジンエキス 0.5g
エタノール 25.0g
ミズヒキ水抽出物(製造例1) 0.2g
香料 適量
精製水 残部
合計 100.0g
下記組成の育毛シャンプーを常法により製造した。
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム 10.0g
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン 10.0g
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム 20.0g
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 4.0g
プロピレングリコール 2.0g
防腐剤(パラオキシ安息香酸メチル) 0.15g
香料 適量
ミズヒキ50質量%エタノール抽出物(製造例2) 0.1g
精製水 残部
合計 100.0g
下記組成の育毛シャンプーを常法により製造した。
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム 10.0g
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン 10.0g
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム 20.0g
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 4.0g
プロピレングリコール 2.0g
防腐剤(パラオキシ安息香酸メチル) 0.15g
香料 適量
ミズヒキ80質量%エタノール抽出物(製造例3) 0.1g
精製水 残部
合計 100.0g
Claims (3)
- タデ科タデ属のミズヒキの抽出物を含有し、前記ミズヒキの抽出物の原料として、地上部を用いることを特徴とする育毛剤。
- テストステロン5α−リダクターゼ阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用及び毛乳頭細胞増殖作用から選択される少なくともいずれかを有する請求項1に記載の育毛剤。
- 請求項1から2のいずれかに記載のミズヒキ抽出物を有効成分として含有することを特徴とする頭皮化粧料。
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