JP4602668B2 - 活性剤を送達するためのフェノキシアミン化合物および組成物 - Google Patents

活性剤を送達するためのフェノキシアミン化合物および組成物 Download PDF

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Description

本出願は、2001年11月13日出願の米国仮出願番号60/350,488、および2002年2月15日出願の米国仮出願番号60/357,288の優先権を享受するものであり、それらの両方を参照として本明細書の一部とする。
本発明は、生物学的または化学的活性剤などの活性剤を標的に送達するためのフェノキシアミン化合物に関する。これらの化合物は、経口、結腸内、肺、および他の経路によって動物に投与するための活性剤との非共有結合混合物を形成するのによく適している。そのような組成物を調製および投与する方法も開示される。
活性剤を送達するための従来の方法は、多くの場合、生物学的、化学的、および物理的バリアによって厳しく制限される。典型的にそれらのバリアは、送達が生じる環境、送達される標的の環境、および/または標的自体によって課せられる。生物学的および化学的活性剤は、そのようなバリアに対して特に脆弱である。
生物学的および化学的に活性な薬剤および治療剤の動物への送達において、バリアは身体によって課せられる。物理的バリアの例は、ある種の活性剤に対して比較的不透過性であるが、循環系などの標的に到達する前に通過しなければならない皮膚、脂質二重層、および種々の器官の膜である。化学的バリアには、胃腸(GI)管におけるpH変動、および分解酵素が含まれるが、これに限定されるものではない。
これらのバリアは、経口送達系の設計において特に重要である。多くの生物学的または化学的活性剤の経口送達は、生物学的、化学的、および物理的バリアがなければ動物に投与するための最適な経路となるであろう。典型的に経口投与に供することのできない多数の薬剤には、カルシトニンおよびインスリンなどの生物学的または化学的に活性なペプチド;多糖類、および特にヘパリンを含むムコ多糖類（これに限定されるものではない）;ヘパリノイド;抗生物質;ならびに他の有機物質が挙げられる。これらの薬剤は、酸加水分解、酵素などによって胃腸管において急速に無効となるか、破壊される可能性がある。さらに、高分子薬剤の大きさおよび構造が吸収を妨げる可能性がある。
脆弱な薬剤を経口投与するための従来の方法は、腸管壁の透過性を人為的に増大するアジュバント(たとえば、レゾルシノール、ならびにポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびn-ヘキサデシルポリエチレンエーテルなどの非イオン性界面活性剤)の同時投与、ならびに酵素による分解を阻害する酵素インヒビター(たとえば、膵臓トリプシンインヒビター、フルオロリン酸ジイソプロピル(DFF)、およびトラジロール)の同時投与に依存していた。リポソームもインスリンおよびヘパリンの薬剤送達系として記載されている。しかしながら、(1)それらの系は毒性量のアジュバントまたはインヒビターを必要とする、(2)適切な低分子量の積載物、すなわち活性剤が利用できない、(3)系が良好でない安定性、および不充分な保存寿命を示す、(4)系の製造が困難である、(5)系が活性剤(積載物)を保護できない、(6)系が活性剤を不利に改変する、あるいは(7)系が活性剤の吸収を許容または促進しないため、そのような薬剤送達系の広範囲にわたる使用は妨げられている。
薬剤を送達するために、プロテイノイドミクロスフェアが用いられてきた。たとえば、米国特許第5,401,516号、第5,443,841号、およびRe.35,862を参照されたい。さらに、薬剤を送達するために、ある種の変性アミノ酸が用いられてきた。たとえば、米国特許第5,629,020号、第5,643,957号、第5,766,633号、第5,776,888号、および第5,866,536号を参照されたい。
より最近では、ポリマー送達剤を提供するために、結合基を介してポリマーを変性アミノ酸またはその誘導体にコンジュゲートしている。この変性ポリマーは任意のポリマーであってよいが、好ましいポリマーには、ポリエチレングリコール(PEG)、およびその誘導体が含まれるが、これに限定されるものではない。たとえば、国際特許公開WO 00/40203を参照されたい。
国際特許公開WO 01/32130およびWO 01/32596は、活性剤を送達するための特定のフェニルアミンカルボン酸化合物およびフェノキシカルボン酸化合物を開示している。国際公開WO 00/50386もアミン送達剤を開示している。
米国仮出願番号60/350,488 米国仮出願番号60/357,288 米国特許第5,401,516号 米国特許第5,443,841号 米国特許Re.35,862 米国特許第5,629,020号 米国特許第5,643,957号 米国特許第5,766,633号 米国特許第5,776,888号 米国特許第5,866,536号 国際特許公開WO 00/40203 国際特許公開WO 01/32130 国際特許公開WO 01/32596 国際公開WO 00/50386 米国特許第5,861,379号 米国特許第6,020,311号 Physicians' Desk Reference(第54版、2000、Medical Economics Company Inc.、Montvale、NJ)
しかしながら、容易に調製され、種々の経路によって広範な活性剤を送達することのできる、単純で安価な送達系が依然として求められている。
本発明は、活性剤の送達を容易にする化合物および組成物を提供する。本発明の送達剤化合物には、下記の式：
Figure 0004602668
[式中、
(a)R1、R2、R3、およびR4は、独立してH、-OH、ハロゲン、C1-C4アルキル、C1-C4アルケニル、C1-C4アルコキシ、-C(O)R8、-NO2、-NR9R10、または-N+R9R10R11(Y-)であり；
R8は、水素、-OH、C1-C6アルキル、ハロゲンまたは-OHで置換されたC1-C4アルキル、非置換あるいはハロゲンまたは-OHで置換されているC2-C4アルケニル、または-NR14R15であり；
R9、R10、およびR11は、独立して水素、酸素、非置換あるいはハロゲンまたは-OHで置換されているC1-C4アルキル、非置換あるいはハロゲンまたは-OHで置換されているC2-C4アルケニルであり；
Yは、ハロゲン化物、水酸化物、スルファート、ニトラート、フォスファート、アルコキシ、ペルクロラート、テトラフルオロボラート、カルボキシラート、メシラート、フメラート、マロナート、スクシナート、タートラート、アセタート、グルコナート、マレアートであり；
R5は、H、-OH、-NO2、ハロゲン、CF3、-NR14R15、-N+R14R15R16(Y-)、アミド、C1-C12アルコキシ、C1-C12アルキル、C2-C12アルケニル、カルバマート、カルボナート、ウレア、または-C(O)R 22であり；R5は、場合により、ハロゲン、-OH、-SH、または-COOHで置換されており；R5は、場合により、O、N、S、または-C(O)-で中断されており；
R14、R15、およびR16は、独立してH、またはC1-C10アルキルであり；
R22は、H、C1-C6アルキル、-OH、-NR14R15であり；
R6は、置換または非置換C1-C16アルキレン、C2-C16アルケニレン、C2-C16アルキニレン、C5-C16アリーレン、(C1-C16アルキル)アリーレン、またはアリール(C1-C16アルキレン)であり；R6は、場合により、C1-C7アルキルまたはC1-C7シクロアルキルで置換されており；
R7は、-NR18R19、または-N+R18R19R20Y-であり；
R18およびR19は、独立して水素、酸素、ヒドロキシ、置換または非置換C1-C16アルキル、置換または非置換C2-C16アルケニル、置換または非置換C2-C16アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換アルキルカルボニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルキル)カルボニル)、置換または非置換アリールカルボニル、置換または非置換アルカンスルフィニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルカン)スルフィニル)、置換または非置換アリールスルフィニル、置換または非置換アルカンスルホニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルカン)スルホニル)、置換または非置換アリールスルホニル、置換または非置換アルコキシカルボニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルコキシ)カルボニル)、あるいは置換または非置換アリールオキシカルボニル、あるいは置換または非置換C5-C7複素環(すなわち5、6、または7員複素環)であって、ここで、置換基は、ハロゲンまたは-OHであってもよく；
R20は、独立して水素、置換または非置換C1-C16アルキル、置換または非置換C2-C16アルケニル、置換または非置換C2-C16アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換アルキルカルボニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルキル)カルボニル)、置換または非置換アリールカルボニル、置換または非置換アルカンスルフィニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルカン)スルフィニル)、置換または非置換アリールスルフィニル、置換または非置換アルカンスルホニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルカン)スルホニル)、置換または非置換アリールスルホニル、置換または非置換アルコキシカルボニル(たとえば置換または非置換(C1-6アルコキシ)カルボニル)、あるいは置換または非置換アリールオキシカルボニルである；
あるいは
(b)R1-R16、およびR20は、上記で定義したとおりであり；
R18およびR19は、結合して、場合によりオキソ基で中断され、非置換あるいはC1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、アリール、アリールオキシ、または炭素環で置換されている5、6、または7員複素環を形成する]
を有するもの、またはその塩が含まれる。
好ましい一実施態様によれば、R7は、モルホリノ、モルホリニウム塩、またはジエタノールアミノである。
他の好ましい実施態様によれば、R6は、C1-C16アルキレンであり、R7は、モルホリノ、またはモルホリニウム塩である。好ましくは、R6は、C4-C12アルキレン、たとえば非置換C4-C12アルキレンなどである。より好ましくは、R6は、C4-C10、C4-C8、またはC6-C8アルキレン、たとえば非置換C4-C10、C4-C8、またはC6-C8アルキレンなどである。一実施態様によれば、R1-R5の1つは、ヒドロキシであり、たとえばR1は、ヒドロキシであり得る。
一実施態様によれば、R6が、C1-C10アルキレンであるとき、R2およびR4の多くとも1つがハロゲンである。他の実施態様によれば、R6は、C8-C16、C9-C16、C10-C16、またはC11-C16アルキレンである。たとえば、R6は、C8、C9、C10、C11、またはC12アルキレン(たとえばノルマルC8-C12アルキレン)であってもよい。さらに他の実施態様によれば、R1およびR5の多くとも1つはアルキルである。
好ましい一実施態様において、R1=-OHであり、R2=R3=R4=R5=Hまたはハロゲンである。
他の好ましい実施態様において、R2=-OHであり、R1=R3=R4=R5=Hまたはハロゲンである。
他の好ましい実施態様において、R3=-OHであり、R1=R2=R4=R5=Hまたはハロゲンである。
他の好ましい実施態様において、ハロゲンは、F、Cl、またはBrであり、より好ましくは、F、またはClであり、より好ましくはClである。
他の好ましい実施態様において、R6は、C1-C16アルキレン、(C1-C16アルキル)アリーレン、またはアリール(C1-C16アルキレン)である。より好ましくは、R6は、C1-C12アルキレン、より好ましくはC3-C10アルキレン、より好ましくはC4-C10またはC4-C8アルキレン、より好ましくはC6-C8アルキレンである。より好ましくは、R6は、非置換である。
他の好ましい実施態様において、R7=-NR18R19であり、R18およびR19は、独立して-OHで置換されたC1-C4アルキル(たとえばメチル、エチル、プロピル、またはブチル)である。他の好ましい実施態様において、R7=-NR18R19であり、R18およびR19は、結合して、オキソ基で置換された6員複素環を形成する。
好ましい一実施態様によれば、R1は、水素であり；R2、R3、およびR4は、独立して水素、ハロゲン、-OH、または-OCH3であり；R5は、水素、-OH、または-C(O)CH3であり；R6は、C1-C12アルキレンであり；R7は、NR18R19であって、R18およびR19は、結合して、5、6、または7員複素環を形成する。
他の好ましい実施態様によれば、R3、R4、およびR5の1つはヒドロキシであり、その他は、独立してハロゲンまたは水素であり；R1およびR2は、独立してハロゲンまたは水素であり；R6は、C1-C16アルキレンであり；R7は、NR18R19であって、R18およびR19は、結合して、5、6、または7員複素環を形成する。R6は、好ましくはC6-C16、C6-C10、C8-C16、C10-C16、またはC4-C8アルキレン、たとえば非置換C6-C16、C6-C10、C8-C16、C10-C16、またはC4-C8アルキレンである。好ましくは、R18およびR19は、モルホリノまたはイミダゾールを形成する。
他の好ましい実施態様において、R1は、水素であり；R2、R3、およびR4は、独立して水素、ハロゲン、-OH、または-OCH3であり；R5は、水素、-OH、または-C(O)CH3であり；R6は、C1-C12アルキレンであり；R7は、N+R18R19R20(Y-)であって、R18およびR19は、ヒドロキシ置換C1-C16アルキルであり、R20は、Hである。
他の好ましい実施態様において、R1は、水素であり；R2、R3、およびR4は、独立して水素、ハロゲン、-OH、または-OCH3であり；R5は、水素、-OH、または-C(O)CH3であり；R6は、C1-C12アルキレンであり；R7は、N+R18R19R20(Y-)であって、R18およびR19は、ヒドロキシ置換C1-C16アルキルであり、R20は、Hである。
他の好ましい実施態様において、R1、R2、R4、R5は、独立してハロゲンまたは水素であり；R3は、-OHまたは-OCH3であり；R7は、N+R18R19R20(Y-)であって、R18およびR19は、ヒドロキシ置換C1-C16アルキルであり、R20は、Hである。
好ましい一実施態様によれば、R1は、水素であり；R2、R3、およびR4は、独立して水素、ハロゲン、-OH、または-OCH3であり；R5は、水素、-OH、または-C(O)CH3であり；R6は、C1-C6アルキレンまたはアリール置換C1-C12アルキルであり；R7は、-NR18R19であり、R18およびR19は、結合して、5、6、または7員複素環を形成するか、あるいはN+R18R19R20(Y-)であり、R18およびR19は、ヒドロキシ置換C1-C16アルキルであり、R20は、Hである。
他の好ましい実施態様において、この化合物のクエン酸塩が用いられる。
好ましい送達剤化合物には、以下の式を有するもの、およびそれらの塩が含まれるが、これらに限定されるものではない。
Figure 0004602668
Figure 0004602668
Figure 0004602668
Figure 0004602668
好ましい化合物は、化合物1のメシル酸塩である。
これらの送達剤化合物の混合物も用いることができる。本発明のモルホリン送達剤は、当該技術分野で知られている方法によって、同様に送達剤であるモルホリニウム塩に転換することができる。
本発明はさらに、少なくとも1種の上式の送達剤化合物、および少なくとも1種の活性剤を含む組成物を提供する。これらの組成物は、送達剤化合物を用いない活性剤の投与に比べて増大または改善された活性剤の生体利用性で、選択された生体系に活性剤を送達する。
さらに、前記組成物を含む投与量単位形態が提供される。投与量単位は、液体、あるいは錠剤、カプセル、または粉剤もしくはサシェを含む粒剤などの固体であってもよい。
また、他の実施態様は、少なくとも1種の上式の送達剤化合物および活性剤を含む組成物を動物に投与することによって、動物、特にその活性剤を必要とする動物に活性剤を投与する方法である。好ましい投与経路には、経口および結腸内経路が含まれる。
また、他の実施態様は、本発明の組成物を投与することによって、動物において、疾患を治療する、または所望の生理的効果を得る方法である。
他の実施態様は、少なくとも1種の上式の送達剤化合物、および少なくとも1種の活性剤を混合することによって、本発明の組成物を調製する方法である。
送達剤化合物
本明細書において用いられる「アルキル」、「アルケニル」、および「アルキニル」という用語には、それぞれ直鎖および分枝鎖アルキル、アルケニル、およびアルキニル置換基が含まれる。
前記送達剤化合物は、その遊離塩基または塩の形態であってもよい。適切な塩には、有機および無機塩、たとえばアンモニウム、酢酸塩、クエン酸塩、ハロゲン化物(好ましくは塩酸塩)、水酸化物、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、アルコキシ、過塩素酸塩、テトラフルオロホウ酸塩、カルボン酸塩、メシル酸塩、フメル酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、グルコン酸塩、およびマレイン酸塩が含まれるが、これらに限定されるものではない。好ましい塩には、クエン酸塩およびメシル酸塩が含まれるが、これらに限定されるものではない。これらの塩は、エタノール溶媒和物を含む溶媒和物、および水和物であってもよい。
本発明の送達剤化合物の塩は、当該技術分野で知られている方法によって調製することができる。たとえば、クエン酸塩およびメシル酸塩は、エタノール、トルエン、およびクエン酸中で調製することができる。
一般的に、本発明のアミン化合物（すなわち上記の式中でR7が-NR18R19であるもの）は、適切なフェノールを(1)適切なジハロゲン化アルキル鎖、または(2) 適切な脱離基、たとえばメタンスルホン酸エステルなどに(たとえばメタンスルホニルクロリドとの反応によって)転換することができる適切なハロアルキルアルコール、と反応させること、活性脱離基（後に、場合により、トリエチルアミンなどの塩基の存在下、適切なアミンと反応させる）とのエーテル化合物を作製すること、によって調製することができる。対応する塩を得るためには、前記アミン化合物を、適切な酸と反応させ、すなわちクエン酸塩を製造するためには、アミンをクエン酸、好ましくは過剰なクエン酸と反応させる。上記の式中でR7が-NR18R19R20(R18、R19、R20は水素ではない)である対応する第四級アンモニウム塩を得るためには、アミン化合物のアミン部分を、当該技術分野で知られている方法によってアルキル化する。
前記送達剤化合物は、再結晶によって、あるいは単独またはタンデムに連結した1つ以上の固体クロマトグラフィー支持体での分画によって精製することができる。適切な再結晶溶媒系には、エタノール、水、ヘプタン、酢酸エチル、アセトニトリル、アセトン、メタノール、およびテトラヒドロフラン(THF)、ならびにそれらの混合物が含まれるが、これに限定されるものではない。分画は、移動相としてメタノール/n-プロパノール混合物を用いているアルミナなどの適切なクロマトグラフィー支持体；移動相としてトリフルオロ酢酸/アセトニトリル混合物を用いている逆相クロマトグラフィー；および移動相として水または適切なバッファーを用いているイオン交換クロマトグラフィー、で実施できる。アニオン交換クロマトグラフィーを実施する際、好ましくは0-500mMの塩化ナトリウム勾配が用いられる。
前記送達剤は、NHC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)、-OOC-、-COO-、-NHC(O)O-、-OC(O)NH-、-CH2NH、-NHCH2-、-CH2NHC(O)O-、-OC(O)NHCH2-、-CH2NHCOCH2O-、-OCH2C(O)NHCH2-、-NHC(O)CH2O-、-OCH2C(O)NH-、-NH-、-O-、および炭素-炭素結合からなるグループから選択された結合基によって送達剤にコンジュゲートしたポリマーを含有することができるが、ただしポリマー送達剤は、ポリペプチドまたはポリアミノ酸でない。前記ポリマーは、交互コポリマー、ブロックコポリマー、およびランダムコポリマーを含むが、これに限定されるものではなく、哺乳動物での使用に安全な任意のポリマーであることができる。好ましいポリマーには、ポリエチレン；ポリアクリラート類；ポリメタクリラート類；ポリ(オキシエチレン)；ポリ(プロピレン)；ポリプロピレングリコール；ポリエチレングリコール(PEG)；およびそれらの誘導体、ならびにそれらの組合せが含まれるが、これに限定されるものではない。前記ポリマーの分子量は、典型的に約100から約200,000ダルトンの範囲である。ポリマーの分子量は、好ましくは約200から約10,000ダルトンの範囲である。一実施態様において、ポリマーの分子量は、約200から約600ダルトンの範囲であり、より好ましくは約300から約550ダルトンの範囲である。
活性剤
本発明での使用に適した活性剤には、殺虫剤、薬剤、および治療剤を含む生物学的活性剤および化学的活性剤が含まれるが、これに限定されるものではない。適切な活性剤には、酸加水分解、酵素などによって胃腸管において有効性が低下する、無効となる、あるいは破壊されるものが含まれる。さらに適切な活性剤には、経口で投与されたとき、大きさ、構造、または電荷などの生理化学的特性が吸収を妨げる、または阻害する高分子剤が含まれる。
たとえば、本発明での使用に適した生物学的または化学的活性剤には、タンパク質;ポリペプチド;ペプチド;ホルモン;多糖類、および特にムコ多糖類の混合物;炭水化物;脂質;小極性有機分子(すなわち、500ダルトン以下の分子量を有する極性有機分子);他の有機化合物;ならびに特にそれだけでは胃腸粘膜を通過できず(または投与量の少量のみが通過する)、および/または胃腸管において酸および酵素による化学的開裂を受け易い化合物;またはそれらの任意の組合せが含まれるが、これに限定されるものではない。
さらなる例には、それらの合成、天然、または組換え供給源を含む以下のもの；ヒト成長ホルモン(hGH)、組換えヒト成長ホルモン(rhGH)、ウシ成長ホルモン、およびブタ成長ホルモン;成長ホルモン放出ホルモンを含む成長ホルモン;成長ホルモン放出因子、α(たとえばインターフェロンアルファコン-1(InterMune,Inc.of Brisbane、CAからInfergen(登録商標)として入手可能)、β、およびγを含むインターフェロン;インターロイキン-1;インターロイキン-2;亜鉛、ナトリウム、カルシウム、およびアンモニウムを含むカウンターイオンを場合により有する、ブタ、ウシ、ヒト、およびヒト組換えを含むインスリン;IGF-1を含むインスリン様成長因子;未分画ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン、コンドロイチン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、および超低分子量ヘパリンを含むヘパリン;サケ、ウナギ、ブタ、およびヒトを含むカルシトニン;エリスロポイエチン;心房性ナトリウム利尿因子;抗原;モノクローナル抗体;ソマトスタチン;プロテアーゼインヒビター;アドレノコルチコトロピン;ゴナドトロピン放出ホルモン;オキシトシン;黄体形成ホルモン放出ホルモン;卵胞刺激ホルモン;グルコセレブロシダーゼ;トロンボポイエチン;フィルグラスチム;プロスタグランジン;シクロスポリン;バソプレシン;クロモリンナトリウム(クロモグリク酸ナトリウムまたは二ナトリウム);バンコマイシン;デスフェリオキサミン(DFO);アレンドロネート、チルドロネート、エチドロネート、クロドロネート、パミドロネート、オルパドロネート、およびインカドロネートを含むビスホスホネート;そのフラグメントを含む副甲状腺ホルモン(PTH);BIBN-4096BS、および他のカルシトニン遺伝子関連タンパク質アンタゴニストなどの抗片頭痛剤;グルカゴン様ペプチド1(GLP-1);抗生物質、抗細菌、および抗真菌剤を含む抗菌剤;ビタミン;これらの化合物のアナログ、フラグメント、模倣剤、またはポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体;あるいはそれらの任意の組合せが含まれるが、これに限定されるものではない。抗生物質の非限定的な例には、グラム陽性作用性、殺菌性、リポペプチド、および環状ペプチド抗生物質、ダプトマイシンなど、ならびにそれらのアナログが含まれる。
送達系
本発明の組成物は、1種以上の本発明の送達剤化合物、および1種以上の活性剤を含む。一実施態様において、1種以上の送達剤化合物、またはそれらの化合物の塩、あるいはそれらの化合物または塩が1つ以上のそれらの単位を形成するポリアミノ酸またはペプチドを、投与前に活性剤と混合して投与組成物を形成することによって、送達剤として用いることができる。
前記投与組成物は、液体の形態であってもよい。溶液媒質は、水(たとえば、サケカルシトニン、副甲状腺ホルモン、およびエリスロポイエチンの場合)、25%プロピレングリコール水溶液(たとえば、ヘパリンの場合)、およびリン酸バッファー(たとえば、rhGHの場合)であってもよい。他の投与ビヒクルには、ポリエチレングリコールが含まれる。投与溶液は、投与直前に送達剤化合物の溶液を活性剤の溶液と混合することによって調製できる。あるいは、送達剤化合物(または活性剤)の溶液を固体形態の活性剤(または送達剤化合物)と混合することができる。送達剤化合物および活性剤は、乾燥粉末として混合することもできる。送達剤化合物および活性剤は、製造工程中に混合することもできる。
投与溶液は、リン酸バッファー塩、クエン酸、グリコール、または他の分散剤などの添加剤を場合により含むことができる。安定化添加剤は、好ましくは約0.1から20%(w/v)の範囲の濃度で、溶液中に混合することができる。
投与組成物は、あるいは錠剤、カプセル、または粉剤もしくはサシェなどの粒剤などの固体の形態であってもよい。固体投与量形態は、固体形態の化合物を固体形態の活性剤と混合することによって調製できる。あるいは、固体は凍結乾燥(凍結乾燥法)、析出、結晶化、および固体分散などの当該技術分野で知られている方法によって、化合物と活性剤の溶液から得ることができる。
本発明の投与組成物は、1種以上の酵素インヒビターを含むこともできる。そのような酵素インヒビターには、アクチノニンまたはエピアクチノニンなどの化合物、およびそれらの誘導体が含まれるが、これに限定されるものではない。他の酵素インヒビターには、アプロチニン(Trasylol)およびボーマン-バークインヒビターが含まれるが、これに限定されるものではない。
本発明の投与組成物において用いられる活性剤の量は、標的適応症に対する特定の活性剤の目的を達成するのに有効な量である。組成物における活性剤の量は典型的に、薬理学的、生物学的、治療的、または化学的に有効な量である。しかしながら、組成物が投与量単位形態で用いられるとき、投与量単位形態が複数の送達剤化合物/活性剤組成物を含有する可能性があり、あるいは分割された薬理学的、生物学的、治療的、または化学的有効量を含有する可能性があるため、量は前記有効な量より少ない量であり得る。そのとき全有効量は、合計して活性剤の有効量を含有する累積単位で投与され得る。
用いられる活性剤の全量は、当業者に知られている方法によって求めることができる。しかしながら、本発明の組成物は活性剤を単独で含有する組成物より効率的に活性剤を送達する可能性があるので、従来の投与量単位形態または送達系において用いられるものより少量の生物学的または化学的活性剤を対象に投与し、依然として同じ血中濃度および/または治療効果を得ることができる。
ここに開示される送達剤化合物は、血液-脳バリアの通過はもちろん、特に経口、鼻腔内、舌下、十二指腸内、皮下、口腔内、結腸内、直腸、膣、粘膜、肺、経皮、皮内、非経口、静脈内、筋肉内、および眼系において、生物学的および化学的活性剤の送達を容易にする。
投与量単位形態はさらに、賦形剤、希釈剤、崩壊剤、潤沢剤、可塑剤、着色剤、香味剤、風味マスキング剤、糖、甘味料、塩、および水、1,2-プロパンジオール、エタノール、オリーブ油、またはそれらの任意の組合せを含む（これに限定されるものではない）投与ビヒクルのいずれか1種または組合せを含むことができる。
本発明の化合物および組成物は、ニワトリなどの鳥類;ネズミ類、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、霊長類、特にヒトなどの哺乳動物;および昆虫を含む任意の動物（これに限定されるものではない）に、生物学的または化学的活性剤を投与するのに有用である。
前記系は、化学的または生物学的活性剤を送達するのに特に有利である。送達剤を用いなければ、活性剤がその標的域(すなわち、送達組成物の活性剤が放出される領域)に到達する前におよびそれらが投与される動物の体内で、遭遇する条件によって破壊されるか、有効性が低下したであろう。特に、本発明の化合物および組成物は、活性剤、特に通常は経口で送達できない活性剤、または改善された送達が所望である活性剤を経口で投与するのに有用である。
前記化合物および活性剤を含む組成物は、選択された生体系に、送達剤を用いない活性剤の投与に比較して増大または改善された生体利用性で活性剤を送達するのに有用である。送達は、ある期間にわたってより多くの活性剤送達することによって、または特定の期間に活性剤を送達する(より迅速な送達、または遅延送達など)、または特定の時間に、もしくはある期間にわたって活性剤を送達する(持続送達など)ことにおいて、改善され得る。
本発明の他の実施態様は、本発明の組成物を投与することによって、動物において、以下の表に挙げたような疾患を治療または予防する方法、あるいは所望の生理的効果を達成する方法である。好ましくは、目的とする疾患を治療または予防するのに、あるいは目的とする生理的効果を得るのに有効な量の組成物を投与する。活性剤に関する特定の適応症は、参照として本明細書の一部とするPhysicians' Desk Reference(第54版、2000、Medical Economics Company Inc.、Montvale、NJ)に見出すことができる。以下の表の活性剤には、それらのアナログ、フラグメント、模倣剤、およびポリエチレングリコール修飾誘導体が含まれる。
Figure 0004602668
たとえば、本発明の一実施態様は、インスリンおよび少なくとも1種の本発明の送達剤化合物を投与することによって、糖尿病を罹患している、または罹患しやすい患者を治療する方法である。
投与に続いて、組成物または投与量単位形態に存在する活性剤は、血液循環に取り込まれる。その薬剤の生体利用性は、たとえばヘパリンによって引き起こされる血液凝固時間の増加、またはカルシトニンによって引き起こされる血中カルシウム濃度の減少のような、血液中の既知の薬理活性を測定することによって容易に評価することができる。あるいは、活性剤自体の血中濃度を直接測定することができる。
以下の実施例は、限定することなく本発明を例示する。すべての部分は、別段の指示のない限り、重量によって示される。
以下に挙げた化合物に関するプロトン核磁気共鳴(1H NMR)分析は、別段の指示のない限り、溶媒としてジメチルスルホキシド(DMSO-d6)を用いて、300MHzのBrukerスペクトロメータで行った。
液体クロマトグラフ/マススペクトロメトリー(LC-MS)分析は、以下のパラメータを有するAgilent TechnologiesのLC/MSD1100(シングル四重極)を用いて行った。
移動相A： 50:950:5 アセトニトリル:水:酢酸(v/v/v)
移動相B： 950:50:5 アセトニトリル:水:酢酸(v/v/v)
勾配溶離： 0-100%Bの直線勾配4分；注入当たりの合計時間は11分
注入量： 5ul
カラム： ZORBAX Rapid Resolution Cartridge、SB-C18、2.1×30mm、3.5um
粒径、カタログ#873700-902
カラム温度： 40℃
244nmにおいてUV検出
MSDパラメータ：
ソース： API-ES、正極性
スキャンパラメータ：
質量範囲： 125.00-600.00
フラグメンタ： 60V
ゲイン： 1.0EMV
閾値： 150
スプレーチャンバ：
ガス温度： 350deg.D
乾燥ガス： 12.0 l/分
ネブライザ圧； 40psig
VCap 4000V 正/負
化合物の調製
1a 化合物1のクエン酸塩の調製:(4-(8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチル)モルホリン)シトラート
2-ベンジルオキシフェノール27.5ml(31.4g、157mmol)、1,8-ジブロモオクタン80.0ml(118.82g、434mmol)、およびエタノール100mlの溶液を炭酸カリウム23.18g(168mmol)で処理し、5.5時間加熱還流した。冷却した反応混合物を25℃で20時間攪拌し、濾過し、濃縮した。残渣を2:1のヘキサン/酢酸エチル100mlで希釈し、活性炭(charcoal)で脱色した。この溶液を濃縮した。この残渣を、圧力0.5mm、98℃でのクーゲルロール蒸留によって精製して、過剰二臭化物を除去した。
上記で単離した臭化物59.0g(151mmol)をテトラヒドロフラン100mlに溶解し、モルホリン28.0ml(28.0g、321mmol)で処理した。この溶液を、4.5時間加熱還流した。生じたスラリーを25℃に冷却し、25℃で20時間攪拌し、2Nの水酸化ナトリウム水溶液80mlで処理した。この混合物を、2:1のヘキサン/酢酸エチル80mlで希釈した。層を分離した。有機相を、水(3回×30ml)および食塩水(1回×30ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、活性炭で脱色し、濃縮した。
上記で単離したベンジルエーテル59.9gを、エタノール80mlおよび酢酸エチル20mlに溶解し、10%カーボン担持パラジウム0.55gで処理し、水素58psig下でParrシェーカに入れた。20時間かけて水素約20psigを消費した。触媒を、セライトパッドでの濾過によって除去した。濾液を濃縮し、20時間真空下に置いた。
上記で単離した4-8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチルモルホリン(37.63g、122.4mmol、NMRによる純度が約80%)をトルエン50mlに溶解し、エタノールおよびクエン酸21.17gの加温溶液に添加した。さらにトルエン30mlを添加した。この溶液を、-4℃の凍結装置に入れた。形成した固体を濾過によって単離し、42.9gの4-8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチルモルホリウムシトラートを得た。融点84-6℃。カールフィッシャー:水0.55%；燃焼分析(水):C%:57.39(理論値)、57.63(実測値);H%:7.49(理論値)、7.55(実測値);N%:2.79(理論値)、2.64(実測値)；1H NMR分析: (d6-DMSO):δ8.4、bs、5H;δ6.9、dd、1H;δ6.7、m、3H;δ3.9、t、2H;δ3.7、t、4H;δ2.8、bt、4H;δ2.7、t、2H;δ2.6、q、4H;δ1.7、p、2H;δ1.5、p、2H;δ1.4、p、2H;δ1.3、m、6H。
1b 化合物1のメシル酸塩の調製:(4-(8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチル)モルホリン)メシラート
上記で単離したN-8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチルモルホリン(13.3g、43.3mmol、NMRによる純度が約80%)をテトラヒドロフラン40mlに溶解し、メタンスルホン酸2.30ml(3.41g、35.4mmol)で処理した。すぐに固体が生じ、濾過によって単離して、メシル酸塩として8.02gの化合物1を得た。融点137-9℃。燃焼分析:C%:56.55(理論値)、56.50(実測値);H%:8.24(理論値)、8.23(実測値);N%:3.47(理論値)、3.39(実測値);S%:7.94(理論値)、7.79(実測値)。1H NMR分析: (d6-DMSO):δ9.6、bs、1H;δ8.8、bs、1H;δ6.9、dd、1H;δ6.7、m、3H;δ3.9、t、4H;δ3.7、t、2H;δ3.4、t、2H;δ3.0、bt、4H;δ2.4、s、3H;δ1.7、m、4H;δ1.4、p、2H;δ1.3、m、6H。
1c 化合物3の調製:7-(4-(2ヒドロキシフェノキシ)ヘプチルモルホリニウムシトラート：
アルキル化剤として1,7-ジブロモへキサンを用いて、化合物1と同じ方法で製造することができる。2.25gの化合物3を単離した。融点120-3℃。燃焼分析:C%:56.90(理論値)、56.92(実測値);H%:7.27(理論値)、7.24(実測値);N%:2.88(理論値)、2.61(実測値);1H NMR分析: (d6-DMSO):δ8.6、bs、5 H;δ6.9、dd、1H;δ6.7、m、3H;δ3.9、t、2H;δ3.7、t、4H;δ2.8、bt、4H;δ2.7、t、2H;δ2.6、q、4H;δ1.7、p、2H;δ1.5、p、2H;δ1.2-1.4、m、6H。
1d 化合物2のクエン酸塩の調製:8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチルジエタノールアミン)シトラート
2-ベンジルオキシフェノール27.5ml(31.4g、157mmol)、1,8-ジブロモオクタン80.0ml(118.82g、434mmol)、およびエタノール100mlの溶液を炭酸カリウム23.18g(168mmol)で処理し、5.5時間にわたり加熱還流した。冷却した反応混合物を25℃で20時間攪拌し、濾過し、濃縮した。残渣を、2:1のヘキサン/酢酸エチル100mlで希釈し、活性炭で脱色した。その溶液を濃縮した。この残渣を、圧力0.5mm、98℃でのクーゲルロール蒸留によって精製して、過剰二臭化物を除去した。
上記で単離した臭化物(4.32g、11.0mmol)およびジエタノールアミン2.80ml(3.07g、29.2mmol)をテトラヒドロフラン30mlに溶解し、トリエチルアミン5mlで処理した。この溶液を、3日間にわたり加熱還流した。生じたスラリーを25℃に冷却し、25℃で20時間攪拌し、2Nの水酸化ナトリウム水溶液20mlで処理した。この混合物を酢酸エチル20mlで希釈した。層を分離した。有機相を、水(3回×30ml)および食塩水(1回×30ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
上記で単離したベンジルエーテル3.98gを、エタノール20mlおよび酢酸エチル20mlに溶解し、10%カーボン担持パラジウム0.22gで処理し、水素58psig下でParrシェーカに入れた。20時間かけて、水素約20psigを消費した。触媒をセライトパッドでの濾過によって除去した。濾液を濃縮し、20時間真空下に置いた。
上記で単離した8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチルジエタノールアミン(3.06g、9.40mmol)を、メチルt-ブチルエーテル10mlおよびエタノール2mlに溶解した。この溶液を、クエン酸1.82gおよびエタノール8mlの加温溶液に添加した。さらにメチルt-ブチルエーテル5mlを添加した。その溶液を-4℃の凍結装置に入れた。形成した固体を濾過によって単離し、2.16gの8-(2-ヒドロキシフェノキシ)オクチルジエタノールアンモニウムシトラートを得た。融点<25℃。カールフィッシャー:水0.1.71%。燃焼分析(水):C%:54.74(理論値)、55.28(実測値);H%:7.66(理論値)、8.16(実測値);N%:2.66(理論値)、2.54(実測値)。
1e 化合物4のクエン酸塩の調製:4-(6-(4-ヒドロキシフェノキシ)ヘキシル)モルホリン)シトラート
4-ベンジルオキシフェノール9.97g(49.8mmol)、1,6-ジブロモヘキサン22.2ml(34.9g、143mmol)、およびエタノール100mlの溶液を炭酸カリウム7.67g(55.5mmol)で処理し、5.5時間加熱還流した。反応混合物を、25℃に冷却した。25℃で固化した反応混合物を酢酸エチルおよびエタノールで希釈し、濾過し、多量の酢酸エチルで洗い流した。濾液を回収し、濃縮して、固体を形成した。この固体を濾過によって単離した。
上記で単離した臭化物4.20g(11.6mmol)を、テトラヒドロフラン30mlに溶解し、モルホリン2.20ml(2.20g、25.3mmol)で処理した。この溶液を、4.5時間加熱還流した。生じたスラリーを25℃に冷却し、25℃で20時間攪拌し、2Nの水酸化ナトリウム水溶液20mlで処理した。この混合物を、2:1のヘキサン/酢酸エチル20mlで希釈した。層を分離した。有機相を、水(3回×30ml)および食塩水(1回×30ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、活性炭で脱色し、濃縮した。
上記で単離したベンジルエーテル4.27gを、エタノール25mlおよび酢酸エチル20mlに溶解し、10%カーボン担持パラジウム0.32gで処理し、水素58psig下でParrシェーカに入れた。20時間かけて水素約20psigを消費した。触媒を、セライトパッドでの濾過によって除去した。濾液を濃縮し、20時間真空下に置いた。
上記で単離した4-6-(4-ヒドロキシフェノキシ)ヘキシルモルホリン(3.05g、10.9mmol)を、加熱しながら、エタノール60ml、酢酸エチル20ml、およびアセトン20mlに溶解した。この溶液を、クエン酸2.10gおよびエタノールの加温溶液に添加した。この混合物をメチルt-ブチルエーテル50mlで希釈し、-4℃の冷凍庫に入れた。形成した固体を濾過によって単離し、2.16gの4-6-(4-ヒドロキシフェノキシ)ヘキシルモルホリニウムシトラートを得た。融点125-7℃。カールフィッシャー:水0.45%。燃焼分析(水):C%:55.79(理論値)、55.47(実測値);H%:7.07(理論値)、7.03(実測値);N%:2.96(理論値)、2.92(実測値)。
1f 化合物5のクエン酸塩の調製:4-(6-(2-ヒドロキシフェノキシ)ヘキシル)モルホリニウムシトラート
アルキル化剤として1,6-ジブロモへキサンを用いたことを除いて、調製は化合物1のクエン酸塩と同じとする。10.11gの化合物5を単離した。融点76-80℃。燃焼分析:C%:55.70(理論値)、56.11(実測値);H%:7.08(理論値)、7.22(実測値);N%:2.95(理論値)、2.86(実測値)；1H NMR分析: (d6-DMSO):δ8.6、bs、5 H;δ6.9、dd、1H;δ6.7、m、3H;δ3.9、t、2H;δ3.7、t、4H;δ2.8、bt、4H;δ2.7、t、2H;δ2.6、q、4H;δ1.7、p、2H;δ1.5、p、2H;δ1.4、p、2H;δ1.3、p、2H。
1g 化合物6の調製:8-(4-ヒドロキシフェノキシ)オクタンアミン
2-ブタノン200ml中の4-ベンジルオキシフェノール(10.23g、51.2mmol)およびエチル8-ブロモオクタノアート(12.80g、51.0mmol)の混合物を炭酸カリウム13.8g(100mmol)で処理し、16時間加熱還流した。冷却した反応混合物を濾過した。濾液を酢酸エチル100mlと混合し、2NのNaOH、水、1NのHCl、および食塩水で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒をロータリエバポレータによって除去して、生成物として白色固体を得た。
上記で得たエステル18.53g(50.1mmol)を、無水テトラヒドロフラン200mlに溶解した。水素化アルミニウムリチウム(1.9g、50mmol)を、粉末漏斗(powder funnel)を通してゆっくり添加した。この混合物を室温で2時間攪拌し、その後、氷浴で冷却した。水(2ml)、続いて15%NaOH6ml、さらに水2mlをゆっくり添加した。その混合物を一晩攪拌し、その後、濾過した。濾液を濃縮して、16.3gの生成物を得た。
上記で得たアルコール16.3g(49.7mmol)を、塩化メチレン200mlとN,N-ジメチルアセトアミド10mlの混合物に溶解した。トリエチルアミン(7.30g、72.3mmol)を添加した。生じた混合物を氷浴で冷却し、その後、塩化メタンスルホニル(7.39g、64.5mmol)を添加した。次いで、この混合物を室温に温め、20時間攪拌した。次いで、この混合物を、水、1NのHCl、水、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および食塩水で順に洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去して、21.25gの生成物を得た。
上記で得たメシル酸塩(20.50g、50.5mmol)を、N,N-ジメチルアセトアミド100mlに溶解し、アジ化ナトリウム(5.01g、77.1mmol)で処理した。混合物を120℃で3時間加熱し、その後、室温に冷却した。次いで、この混合物を水200mlに注入し、形成した多量の固体を真空濾過によって回収した(17.25g)。
上記で得たアジ化物(16.64g、47.1mmol)を、イソプロパノール200に溶解し、ギ酸アンモニウム(11.87g、188.4mmol)で処理した。混合物を60℃に加熱し、その後、炭素上パラジウム(10重量%、1.0g)を、粉末漏斗を通してゆっくり添加した。反応物を60℃で1時間攪拌し、その後、室温に冷却した。溶媒をロータリエバポレーションによって除去して、13.09gの固体を得た。その固体を、エタノール-水から再結晶して、8.90gの8-(4-ヒドロキシフェノキシ)オクタンアミンの純生成物を得た。融点115-7℃。C%:70.85(理論値)、70.53(実測値);H%:9.77(理論値)、9.92(実測値);N%:5.90(理論値)、5.67(実測値)。1H NMR分析: (d6-DMSO):δ6.7、AB、4H;δ3.8、t、2H;δ3.5、bt、3H;δ2.5、t、2H;δ1.6、p、2H;δ1.3、br、10H。
1h 化合物7のクエン酸塩の調製:4-(4-(2-ヒドロキシフェノキシ)ブチル)モルホリニウムシトラート
アルキル化剤として1,4-ジブロモブタンを用いたことを除いて、調製は化合物1のクエン酸塩と同じとする。6.32gの化合物7を単離した。融点97-9℃。燃焼分析:C%:54.17(理論値)、54.11(実測値);H%:6.59(理論値)、6.61(実測値);N%:3.16(理論値)、3.08(実測値)；1H NMR分析: (d6-DMSO):δ6.9、dd、1H;δ6.7、m、3H;δ4.0、t、2H; δ3.7、t、4H;δ2.8、bt、4H;δ2.7、t、2H;δ2.6、q、4H;δ1.7、m、4H。
1i 化合物8の塩酸塩の調製:6-(2-アセチルフェノキシ)-1-ジメチルアミノへキサンヒドロクロリド
テトラヒドロフラン(THF)70ml中の2-ヒドロキシアセトフェノン9.32g(68.5mmol)、6-ジメチルアミノ-1-ヘキサノール11.3ml(9.94g、68.5mmol)、およびトリフェニルホスフィン18.00g(68.6mmol)の溶液を調製した。THF30ml中のアゾジカルボン酸ジイソプロピル(DIAD)13.5ml(13.86g、68.6mmol)の溶液を、約30分かけて上記の溶液に添加した。反応混合物を周囲温度で20時間攪拌し、酢酸エチル100mlで希釈し、1%塩酸水溶液50mlで5回および10%塩酸水溶液30mlで2回抽出した。混合した水性抽出物を、10Nの水酸化ナトリウムを添加することによってpH9.5とし、酢酸エチル50mlで3回抽出した。混合した有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮した。生じたスラリーを酢酸エチル10mlで希釈し、グラスウールでの濾過によって固体を除去した。有機相を減圧下で濃縮し、冷凍した。生じた固体を、10%塩酸水溶液約40mlで希釈し、濾過によって不溶性画分を除去した。その溶液を、1Nの水酸化ナトリウムでpH9とし、酢酸エチル30mlで4回および水30mlで1回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮し、-5℃で保存した。生じた固体をヘキサン中で攪拌し、濾過によって不溶性画分を除去した。気体塩酸を濾液にバブリングさせた。生じた固体のヘキサンをデカントし、固体を酢酸エチル中で約20時間攪拌した。これらの固体を濾過によって回収し、黄白色の粉末として6-(2-アセチルフェノキシ)-1-ジメチルアミノへキサンヒドロクロリド5.77g(28.1%)を得た。融点138-141℃。燃焼分析:C%:64.09(理論値)、63.80(実測値);H%:8.74(理論値)、8.60(実測値);N%:4.67(理論値)、4.76(実測値);Cl%:11.82(理論値)、11.63(実測値)。1H NMR分析 (d6-DMSO) :δ10.8、bs、1H;δ7.6、dd、1H;δ7.5、dt、1H;δ7.1、d、1H;δ7.0、dt、1H;δ4.1、t、2H;δ3.0、m、2H;δ2.7、d、6H;δ2.5、s、3H;δ1.8、m、2H;δ1.7、m、2H;δ1.5、m、2H、δ1.4、m、2H。
1j 化合物9の調製
2-ベンジルオキシフェノールおよび1,7-ジブロモヘプタンから、上記と同じ方法で、7-ブロモヘプチル2-ベンジルオキシフェニルエーテルを調製することができる。2-イソプロピルイミダゾール16.49g(149.7mmol)、7-ブロモヘプチル2-ベンジルオキシフェニル28.80g(76.33ml)、トリエチルアミン11.2ml、およびジオキサン150mlの懸濁液を80℃に加熱し、すべての固体を液体とした。5時間攪拌後、反応混合物を25℃に冷却し、メチルt-ブチルエーテル50nmlで希釈し、濾過した。濾液を2:1のメチルt-ブチルエーテルおよびヘキサンで希釈し、水(3回×60ml)および食塩水(1回×40ml)で洗浄した。有機相(上相)を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
上記で単離した粗製ベンジルエーテル31.0gをエタノールに溶解し、-4℃に冷却した。形成した固体を単離し、廃棄した。濾液を半分の容量(150ml)まで濃縮し、10%カーボン担持パラジウム0.50gで処理し、水素53psig下でParrシェーカに入れた。40時間かけて、水素約4psigを消費した。触媒をセライトパッドでの濾過によって除去した。濾液を濃縮した。2日後、形成した固体をトルエンに取り、濾別し、エタノール/トルエンから再結晶した。この固体を、66℃、0.1mmでのクーゲルロール蒸留に供し、2-イソプロピルイミダゾール不純物を除去した。冷却によって、5.89gの(2-ヒドロキシフェノキシ)-ヘプチル-2-イソプロピルイミダゾールを単離した。融点93-4℃。カールフィッシャー:水1.66%。燃焼分析(水):C%:70.92(理論値)、70.20(実測値);H%:8.96(理論値)、8.80(実測値);N%:8.71(理論値)、8.52(実測値)。MS(M+1)317。1H NMR分析: (d6-DMSO):δ8.8、bs、1H;δ7.05、d、1H;δ6.9、dd、1H;δ6.8、d、1H;δ6.7、m、3H;δ3.9、m、4H;δ3.05、hept、1H;δ1.7、m、4H;δ1.3-1.5、m、6H;δ1.2、d、6H。
1k 化合物10の調製
アルキル化剤として1,6-ジブロモへキサン、および2-メチル-イミダゾールを用い、化合物9と同じ手順でその化合物を製造することができる。合計2.11gの化合物10を単離した。融点103-4℃。燃焼分析:C%:70.04(理論値)、70.24(実測値);H%:8.08(理論値)、8.29(実測値);N%:10.21(理論値)、9.97(実測値)；1H NMR分析: (d6-DMSO) :δ8.8、bs、1H;δ7.0、d、1H;δ6.9、dd、1H;δ6.8、m、3H;δ6.7、d、1H;δ3.9、t、2H;δ3.85、t、2H;δ1.7、m、4H;δ1.45、p、2H;δ1.3、p、2H。
1l 化合物11の調製
8-ブロモ-1-オクタノール10.0g(47.8mmol)、モルホリン10.41g(120mmol)、およびテトラヒドロフランの溶液を、3時間加熱還流した。冷却した反応混合物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で処理し、酢酸エチルで抽出した。有機相を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、10.50gの4-(8-ヒドロキシオクチル)モルホリンを得た。
粗4-(8-ヒドロキシオクチル)モルホリン(2.0g、9.3mmol)を塩化メチレンに溶解し、トリエチルアミン(7.3g、72mmol)10mlで処理した。氷浴で冷却した後、混合物を塩化メタンスルホニル1.28g(11.2mmol)で処理し、1時間攪拌し、25℃に加温した。2時間攪拌後、反応混合物を炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮して、2.4gの粗メシル酸塩を得た。
粗8-モルホリノオクチルメシラート2.40g(8.2mmol)、2-ヒドロキシ-5-クロロ-4-メチルアセトフェノン1.82g(9.8mmol)、およびジメチルホルムアミド30mlの溶液を、炭酸カリウム2.26g(16.4mmol)およびヨウ化ナトリウム0.62g(4.1mmol)で処理した。この反応混合物を加熱した。エチルエーテル中1.0Mの塩化水素でワークアップおよび処理した後、2.67gの5-クロロ-4-メチル-2-(8-モルホリン-4-イルオクチルオキシ)アセトフェノンヒドロクロリドを単離した。融点75-6℃。カールフィッシャー:水4.89%；燃焼分析:C%:57.34(理論値)、56.42(実測値);H%:8.11(理論値)、8.3(実測値);N%:3.18(理論値)、3.81(実測値);Cl%:16.12(理論値)、16.72(実測値)；1H NMR分析: (d6-DMSO) :δ11.0、bs、1H;δ7.55、s、1H;δ7.2、s、1H;δ4.1、t、2H;δ3.9、m、2H;δ3.8、t、2H;δ3.0、m、4H;δ2.5、s、3H;δ2.5、m、2H;δ2.4、s、3H;δ1.8、p、2H;δ1.7、m、2H;δ1.45、m、2H;δ1.3、m、6H。
2A インスリンの経口送達
送達剤化合物およびヒト亜鉛インスリン(最小量26IU/mg、Calbiochem-Novabiochem Corp、La Jolla、CAから入手可能)の経口投与(PO)組成物を、脱イオン水中で調製した。典型的に、送達剤化合物500mgを水1.5mlに添加した。溶液をボルテックスし、次いで加熱し(約37℃)、超音波処理した。NaOHまたはHClを用いて、pHを約7から8.5に調整した。必要であれば追加のNaOHを加えて均一な溶解性を得て、pHを再び約7から8.5に調整した。次いで水を加えて全容量を約2.4mlとし、ボルテックスした。インスリンストック溶液(15mg/ml、インスリン0.5409gおよび脱イオン水18mlから製造し、濃HCl40ml、10NのNaOH25ml、および1NのNaOH50mlを用いてHClおよびNaOHでpH8.15に調整し、透明な溶液を得た)から約1.25mgのインスリンをその溶液に加え、逆さにして混合した。この溶液はすぐに投与プロトコルに用いることができ、あるいは投与前に1時間37℃の水浴に入れることもできる。最終送達剤化合物投与量、インスリン投与量、および容量投与量を以下の表1に示す。
典型的な投与および試料採取プロトコルは以下のとおりであった。体重約200-250gの雄のSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投与の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)を投与し、必要に応じて再投与し麻酔状態を維持した。動物5頭の1つの投与群に、投与溶液の1種を投与した。経口投与のために、11cmのRusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させた。カテーテルを通して溶液をくみ上げ、シリンジに投与溶液を充填し、次いでそれを拭いて乾燥させた。チュービングを切歯から1cm残して、カテーテルを食道に入れた。シリンジプランジャを押して、投与溶液を投与した。
典型的に、15、30、60、120、および180分の時点で、尾の動脈から血液試料を連続して採取した。ベースラインからのグルコースレベルのパーセント変化を表1に示す。
Figure 0004602668
以下の変更を加えて、前述の手順を繰り返した。
体重200から250gのラットではなく、体重250から300gの雄のSprague-Dawleyラットを用いた。すべての動物をワイヤケージに保管した。すべての動物を、実験前少なくとも30分、実験が行われた部屋に置いた。動物へのストレスを低減するために、すべての大きな騒音および声を回避した。
血液試料中のグルコースレベルを求めるために用いた試験片は、必要に応じてのみ光に暴露した。すべての試験片は、使用中を除いて、密閉したバイアルに個々に保管した。
コントロールを行うときには、コントロール溶液を激しく振盪し、最初の液滴を廃棄し、ボトル先端をキムワイプで拭い、1滴を試験片に塗布した。
Farmer's Wife Techniqueによって、t=0、15、30、45、および60分で、血液試料を採取した。それぞれのラットの尾を、先端で切断した(尾約2mm)。動物の尾からの血液の最初の液滴は、血液グルコースの読み取りを行うのには用いなかった。それぞれのラットの尾の先端からの新鮮な血液の液滴を、試験片の先端に置いた。
ベースライン後、完全に意識(conscience)のある間に、動物に経口投与を行った。麻酔は与えなかった。
2B ビオチン化リボヌクレアーゼA(bRNアーゼA)の経口送達
送達剤化合物およびbRNアーゼA(Sigma(Milwaukee、WI)：ウシ膵臓由来のリボヌクレアーゼA Type XII-A)の経口強制(PO)投与用の脱イオン水溶液を混合によって調製する。送達剤化合物の溶液を作成する。この送達剤化合物溶液をリン酸バッファー中で調製し、攪拌する。必要であれば、送達剤化合物が完全に溶解するまで、適切な規定度のNaOHを少しずつ添加することによって、混合物のpHを上方に調整する。溶解した送達剤化合物最終pHは、7.5から9.5の間である。9容量の送達剤化合物溶液を1容量のbRNアーゼAストック溶液(リン酸緩衝生理食塩水(PBS)中bRNアーゼA20mg)と混合することによって、最終投与溶液を調製する。最終濃度は、送達剤化合物150mg/ml、bRNアーゼA2mg/mlである。
投与および試料採取プロトコルは以下のとおりである。体重約200-250gの雄のSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投与の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)を投与し、必要に応じて再投与し麻酔状態を維持する。動物5頭の1つの投与群に、以下の方法で投与溶液の1種を投与する。11cmのRusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させる。カテーテルを通して溶液をくみ上げ、シリンジに投与溶液を充填し、次いでそれを拭き取る。チュービングを切歯から1cm残して、カテーテルを食道に入れる。シリンジプランジャを押して、投与溶液を投与する。15、30、45、60、および90分に、尾の動脈から血液試料を連続して採取する。血清bRNアーゼA濃度を以下に記載するように変更したイムノアッセイによって定量する。
リボヌクレアーゼAのビオチン化
各RNアーゼA分子を1つのビオチン分子で標識するために、活性化ビオチンの比率をビオチン3モル/RNアーゼA1モルに維持する。代表的なビオチン化反応において、RNアーゼA500mgを50mMのNaHCO3、pH7.6、20mlに溶解した。EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC Biotin(Pierce Chemical Company、Rockford、IL)57.08gを溶液に添加、溶解し、氷上に2時間放置する。次いで反応混合物を、4℃で一晩、4lのPBSに対して透析する(10000MW分画透析膜(Pierce、Rockford、Illinois)。反応混合物を新しいPBS4l中に入れ、さらに4時間透析する。透析したbRNアーゼAを透析膜から除去し、PBSを用いて最終容量25mlに希釈(bRNアーゼA最終濃度20mg/ml)、4℃で保存する。
経口投与したbRNアーゼAの血清濃度のアッセイ
一般に、種々の時点で採取されたラット血清の100μl分を、96ウェルReacti-Bindストレプタビジンコートポリスチレンプレート(Pierce)の適切なウェルに入れる。2時間のインキュベーション期間後、プレートを洗浄し、次いでポリクローナルウサギ抗RNアーゼA(Chemicon、Pittsburgh、PA)と共にインキュベートする。洗浄後、プレートをアルカリホスファターゼにコンジュゲートしたポリクローナルヤギ抗ウサギIgG(chemicon、Pittsburg、PA)で2時間インキュベートする。インキュベーション後、プレートを洗浄し、パラニトロフェニルホスファート(アルカリホスファターゼの基質)(Pierce、Rockford、Illinois)を添加することによって最初に捕捉したbRNアーゼAの量を検出する。本来のラット血清に循環するbRNアーゼAの量は、15の2倍希釈液における1000-0.1ng/mlにわたるbRNアーゼAの標準曲線との比較によって定量する。最大値±標準偏差を以下の表2に示す。
Figure 0004602668
2c BIBN4096BSの経口送達
送達化合物およびカルシトニン遺伝子関連ペプチドアンタゴニスト、1-ピペリジンカルボキシアミド、N-[2-[[5-アミノ-1-[[4-(4-ピリジニル)-1-ピペラジニル)カルボニル]ペンチル]アミノ]-1-[(3,5-ジブロモ-4-ヒドロキシフェニル)メチル]-2-オキソエチル]-4(1,4-ジヒドロ-2-オキソ-3(2H0-キナゾリニル)-.[R-(R*,S*)]-(BIBN4096BS)の経口強制(PO)投与水溶液を調製した。典型的に、送達剤化合物の溶液を水中で調製し、攪拌した。送達剤化合物をBIBN4096BSストック溶液と混合し、所望の容量(通常は1.0ml)に希釈することによって最終投与溶液を調製した。必要であれば、溶解した送達剤化合物の最終pHが7.0未満になるまで適切な規定度の塩酸水溶液を少しずつ添加することによって、混合物のpHを調節した。投与当たりの最終化合物量は、全容量1ml/kg中、BIBN4096BS 25mg/kgおよび送達剤化合物200mg/kgであった。
典型的な投与および試料採取プロトコルは以下のとおりであった。体重約200-250gの雄のSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投与の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)を投与した。ラット5頭の1つの投与群に、投与溶液の1種を投与した。経口強制(PO)投与のために、11cmのRusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させた。カテーテルを通して溶液をくみ上げ、シリンジに投与溶液を充填し、次いでそれを拭いて乾燥させた。チュービングを切歯から1cm残して、カテーテルを食道に入れた。シリンジプランジャを押して、溶液を投与した。典型的に、経口の0、15、30、45、および60分の時点で、尾の動脈から血液試料を連続して採取した。血漿BIBN4096BS濃度は、液体クロマトグラフィー/マススペクトロメトリ/UV検出を用いるマススペクトロメトリアッセイ法を用いて定量した。このアッセイの標準範囲は5-2000ng/mlであった。以前の研究は、約10ng/mlの基準値を示している。最大値を以下の表3に示す。
Figure 0004602668
2d ダプトマイシンの経口送達
2d ダプトマイシン 経口/結腸内送達
送達剤化合物およびダプトマイシン(Cubist Pharmaceuticals、Cambridge、MA)を含有する投与溶液を、0.9%生理食塩水中で調製した。化合物の溶液は、化合物のナトリウム塩を用いて、または遊離酸をそのナトリウム塩に転換することによって製造した。送達剤化合物の遊離酸は、1当量の水酸化ナトリウムでナトリウム塩に転換した。この混合物をボルテックスし、音波破砕機に置いた(約37℃)。HClまたはNaOH水溶液を用いて、pHを約7.0-7.5に調整した。必要であれば追加のNaOHを加えて均一な溶解性を得て、pHを再び調整した。混合物をボルテックスし、必要であれば音波破砕も用いて、均一な溶液を生成した。送達剤化合物溶液を、ストック溶液(0.9%生理食塩水中ダプトマイシン200mg/mlであり、必要であればNaOHまたはHClでpHを6.0-7.0に調整)のダプトマイシンと混合した。ストック溶液は、ホイルに包み凍結保存(-20℃)し、次いで使用前に解凍し、約25℃に徐々に加温した。送達剤-ダプトマイシン混合物を、低速でボルテックスして、均一な溶液を生成した。NaOH水溶液を用いて、pHを約7.0-7.5に調整した。次いで、その溶液を、0.9%生理食塩水を用いて目的の容量(通常2.0ml)まで希釈し、濃縮し、使用までホイルに包んで保存した。最終送達剤化合物およびダプトマイシン投与量、ならびに容量投与量を以下の表4に示す。
典型的な投与および試料採取のプロトコルは以下のとおりとした。体重200〜250gの雄のSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投与の15分前にケタミン(44mg/kg)およびソラジン(thorazine)(1.5mg/kg)で麻酔し、必要に応じて再投与し麻酔状態を維持した。動物5匹からなる1つの投与群に、投与溶液の1種を投与した。経口強制(PO)投与のために、11cmのRusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させた。カテーテルで溶液をくみ上げ、シリンジに投与溶液を充填し、次いでそれを拭いて乾燥させた。チュービングを切歯から1cm残して、カテーテルを食道に入れた。シリンジプランジャを押して、溶液を投与した。結腸内(IC)投与のために、7.5cmの8 fr Ruschカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させた。投与カテーテルを、チューブが見えなくなるまで、肛門から結腸に挿入した。シリンジプランジャを押して、投与溶液をゆっくり結腸に押し出した。
ヘパリン処理ラット血液試料を、腹側尾動脈から、典型的には投与0.25、0.5、0.75、1.0、2.0、および4.0時間後に採取し、氷上で保存した。その後、血液試料を、4℃で4分間、11,500rpmで回転(遠心分離)し、（浮遊した）血漿を得て、それを-70℃で保存した。血漿ダプトマイシン濃度を、分析中試料を4℃に保持しながら、定組成(isocratic)逆相HPLCによって測定した。ブランク血漿での研究は、ベースライン値0を示している。
各群の動物の結果を、それぞれの時点について平均し、それらの平均の最大値(すなわち、ピークダプトマイシン濃度、Cmax)を、以下の表4に示す。
Figure 0004602668
2e ヒト成長ホルモン放出因子アナログ(トランス-3-ヘンキセノイルhGRF NH2)の経口送達
送達剤化合物およびGRF類似体g(Theratechnologies、Quebec、Canadaから入手可能、米国特許第5,861,379号および米国特許第6,020,311号)の経口投与(PO)組成物を、脱イオン水中で調製した。典型的には、送達剤化合物500mgを水1.5mlに添加した。得られた溶液を攪拌し、1当量の塩化水素を添加することによって、送達剤化合物の遊離塩基を塩に転換した。その溶液をボルテックスし、次いで加熱し(約37℃)、音波破砕した。NaOHまたはHClを用いて、pHを約7から8.5に調整した。必要であれば、追加のNaOHまたはHClを加えて均一な溶解性を得て、pHを再び約7から8.5に調整した。次いで、水を加えて全容量を約2.4mlとし、ボルテックスした。GRF類似体のストック溶液(50mg/ml、GRF類似体100mgおよび脱イオン水2mlから製造し、HClでpH4.0に調整)約25mgをその溶液に添加し、逆さにして混合した。その溶液はすぐに投与プロトコルに用いたか、あるいは投与前に1時間37℃の水浴に入れた。
典型的な投与および試料採取プロトコルは以下のとおりであった。体重約200〜250gの雄のSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投与の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)を投与し、必要に応じて再投与し麻酔状態を維持した。動物5匹からなる1つの投与群に、投与溶液の1種を投与した。経口投与のために、11cmのRusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させた。カテーテルで溶液をくみ上げ、シリンジに投与溶液を充填し、次いでそれを拭いて乾燥させた。チュービングを切歯から1cm残して、カテーテルを食道に入れた。シリンジプランジャを押して、投与溶液を投与した。
典型的には0、15、30、60、および120分の時点で、尾の動脈から血液試料を連続して採取した。血漿GRF類似体レベルはRIAによって求めた(第1抗体Peninsula Labs、RIN 8061；第2抗体Linco Research Labs、5060-10)。血漿GRF類似体濃度(pg/ml)を、各投与群の5匹の各動物について各時点で測定した。各時点の5つの値を平均し、血漿GRF類似体濃度対時間として結果をプロットした。最大値(ピーク)を以下の表6に示す。
Figure 0004602668
2f インターフェロン-経口送達
送達剤化合物およびインターフェロンアルファコン-1(IFN)(InterMune,Inc.、Brisbane、CAからInfergen(登録商標)として入手可能)の投与溶液を、脱イオン水中で調製した。送達剤化合物の遊離酸は、1当量の水酸化ナトリウムでナトリウム塩に転換した。典型的には、送達剤化合物の溶液を水中で調製し、ナトリウム塩を製造するとき、1当量の水酸化ナトリウム(1.0N)を加え、攪拌した。この混合物をボルテックスし、音波破砕機に置いた(約37℃)。NaOH水溶液を用いて、pHを約7.0から8.5に調整した。その混合物をボルテックスし、必要であれば音波破砕および加熱も用いて、均一な懸濁液または溶液を生成した。必要であれば追加のNaOHを加えて均一な溶解性を得て、pHを約7.0から8.5に再び調整した。その送達剤化合物溶液を、IFNストック溶液(リン酸緩衝化食塩水中約22.0から27.5mg/ml)と混合し、目的の容量(通常3.0ml)まで希釈した。最終送達剤化合物およびIFN投与量、ならびに容量投与量を以下の表6に示す。
典型的な投与および試料採取のプロトコルは以下のとおりとした。体重200〜250gの雄のSprague-Dawleyラットを24時間絶食させ、投与の15分前にケタミン(44mg/kg)およびクロルプロマジン(1.5mg/kg)を投与し、必要に応じて再投与し麻酔状態を維持した。動物5匹からなる1つの投与群に、投与溶液の1種を投与した。11cmのRusch 8 Frenchカテーテルを、ピペットチップを備えた1mlシリンジに適合させた。カテーテルで溶液をくみ上げ、シリンジに投与溶液を充填し、次いでそれを拭いて乾燥させた。チュービングを切歯から1cm残して、カテーテルを食道に入れた。シリンジプランジャを押して、投与溶液を投与した。
典型的には0、15、30、45、60、および90分の時点で、尾動脈から血液試料を連続して採取した。血清IFN濃度は、ヒトIFN-α用のCytoscreen Immunoassay Kit(Biosource International、Camarillo、CAのカタログ#KHC4012)を用いて定量した。以前の研究は、約0のベースライン値を示している。各群の動物の結果を、それぞれの時点に関して平均した。それらの平均の最大値(すなわち、平均ピーク血清IFN濃度)を、以下の表6に示す。
Figure 0004602668
上述の特許、出願、試験法、および文献は、それらの全体を参照として本明細書の一部とする。
上述の詳細な説明に照らして、当業者には本発明の多くの変形が示唆されるであろう。そのような自明の変形例はすべて、添付の請求の範囲の完全に意図された範囲内である。

Claims (15)

  1. 以下の化合物Aの式：
    Figure 0004602668
    [式中、
    R1、R2、R3、およびR4は、独立してHまたは-OHであり；
    R5は、-OHであり；
    R6は、C 1 -C 7 アルキルもしくはC 1 -C 7 シクロアルキルで置換されたC 1 -C 16 アルキレンまたは非置換C1-C16アルキレンであり；
    R7は、-NR18R19であり；
    R18およびR19は、水素もしくはヒドロキシ置換C1-C16 アルキルであり、または、R18およびR19は、結合して、結合している窒素原子とともに、非置換もしくはC1-C6アルキルで置換されているモルホリノ、モルホリニウム塩もしくはイミダゾール環を形成する]
    を有する化合物またはその塩。
  2. 以下の化合物Aの式：
    Figure 0004602668
    [式中、
    R3 = -OHであり；
    R1 = R2 = R4 = R5 = Hまたはハロゲンであり；
    R6は、C 1 -C 7 アルキルもしくはC 1 -C 7 シクロアルキルで置換されたC 1 -C 16 アルキレンまたは非置換C1-C16アルキレンであり；
    R7は、-NR18R19であり；
    R18およびR19は、水素もしくはヒドロキシ置換C1-C16アルキルであり、または、R18およびR19は、結合して、結合している窒素原子とともに、非置換もしくはC 1 -C 6 アルキルで置換されているモルホリノ、モルホリニウム塩もしくはイミダゾール環を形成する]
    を有する化合物またはその塩。
  3. R18およびR19が、モルホリノまたはイミダゾールを形成する請求項1または2に記載の化合物。
  4. 以下の化合物1-7、9および10からなる群から選択される化合物。
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
    Figure 0004602668
  5. (A)タンパク質、ポリペプチド、ペプチドおよびBIBN−4096BS（1-ピペリジンカルボキサミド、N-[2-[[5-アミノ-1-[[4-(4-ピリジニル)-1-ピペラジニル]カルボニル]ペンチル]アミノ]-1-[(3,5-ジブロモ-4-ヒドロキシフェニル)メチル]-2-オキソエチル]-4(1,4-ジヒドロ-2-オキソ-3(2H)-キナゾリニル)-,[R-(R*,S*)]-)からなる群から選択される生物学的活性剤、ならびに
    (B)請求項2に記載の化合物、ならびに、以下の化合物Aの式：
    Figure 0004602668
    [式中、
    R1、R2、R3、およびR4は、独立してHまたは-OHであり；
    R5は、-OHまたは-C(O)R 22であり；
    R22は、C1-C6アルキルであり；
    R6は、C 1 -C 7 アルキルもしくはC 1 -C 7 シクロアルキルで置換されたC 1 -C 16 アルキレンまたは非置換C1-C16アルキレンであり；
    R7は、-NR18R19であり；
    R18およびR19は、水素もしくはヒドロキシ置換C1-C16 アルキルであり、または、R18およびR19は、結合して、結合している窒素原子とともに、非置換もしくはC1-C6アルキルで置換されているモルホリノ、モルホリニウム塩もしくはイミダゾール環を形成する]
    を有する化合物またはその塩、からなる群から選択される少なくとも1種の化合物
    を含む組成物。
  6. 前記生物学的活性剤が、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン、組換えヒト成長ホルモン(rhGH)、ウシ成長ホルモン、ブタ成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン放出因子、インターフェロン、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-1、インターロイキン-2、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様成長因子(IGF)、IGF-1、カルシトニン、サケカルシトニン、ウナギカルシトニン、ヒトカルシトニン；エリスロポイエチン(EPO)、心房性ナトリウム利尿因子、モノクローナル抗体、ソマトスタチン、アドレノコルチコトロピン、ゴナドトロピン放出ホルモン、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスチム、シクロスポリン、バソプレシン、副甲状腺ホルモン(PTH);からなる群から選択される請求項5に記載の組成物。
  7. 生物学的活性剤が、インスリン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、エリスロポイエチン、成長ホルモン、またはそれらの組合せを含む請求項5に記載の組成物。
  8. 前記生物学的活性剤がインスリンを含む請求項5に記載の組成物。
  9. (A)(a)タンパク質、ポリペプチド、ペプチドおよびBIBN-4096BS（1-ピペリジンカルボキサミド、N-[2-[[5-アミノ-1-[[4-(4-ピリジニル)-1-ピペラジニル]カルボニル]ペンチル]アミノ]-1-[(3,5-ジブロモ-4-ヒドロキシフェニル)メチル]-2-オキソエチル]-4(1,4-ジヒドロ-2-オキソ-3(2H)-キナゾリニル)-,[R-(R*,S*)]-)からなる群から選択される生物学的活性剤、ならびに
    (b)請求項2に記載の化合物、ならびに、以下の化合物Aの式：
    Figure 0004602668
    [式中、
    R1、R2、R3、およびR4は、独立してHまたは-OHであり；
    R5は、-OHまたは-C(O)R 22であり；
    R22は、C1-C6アルキルであり；
    R6は、C 1 -C 7 アルキルもしくはC 1 -C 7 シクロアルキルで置換されたC 1 -C 16 アルキレンまたは非置換C1-C16アルキレンであり；
    R7は、-NR18R19であり；
    R18およびR19は、水素もしくはヒドロキシ置換C1-C16 アルキルであり、または、R18およびR19は、結合して、結合している窒素原子とともに、非置換もしくはC1-C6アルキルで置換されているモルホリノ、モルホリニウム塩もしくはイミダゾール環を形成する]
    を有する化合物またはその塩、からなる群から選択される少なくとも1つの化合物を含む組成物、ならびに
    (B)(a)賦形剤、
    (b)希釈剤、
    (c)崩壊剤、
    (d)潤沢剤、
    (e)可塑剤、または
    (f)着色剤、
    を含む投与量単位形態の投与組成物。
  10. 前記生物学的活性剤が、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン、組換えヒト成長ホルモン(rhGH)、ウシ成長ホルモン、ブタ成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン放出因子、インターフェロン、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-1、インターロイキン-2、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、ヒト組換えインスリン、インスリン様成長因子（IGF）、IGF-1、カルシトニン、サケカルシトニン、ウナギカルシトニン、ヒトカルシトニン、エリスロポイエチン(EPO)、心房性ナトリウム利尿因子、モノクローナル抗体、ソマトスタチン、アドレノコルチコトロピン、ゴナドトロピン放出ホルモン、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポイエチン、フィルグラスチム、シクロスポリン、バソプレシン、副甲状腺ホルモン（PTH）;からなる群から選択される請求項9に記載の投与組成物。
  11. 前記生物学的活性剤が、インスリン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、エリスロポイエチン、ヒト成長ホルモン、またはそれらの組合せを含む請求項9に記載の投与組成物。
  12. 前記活性剤がインスリンを含む請求項9に記載の投与組成物。
  13. 液体、固体、錠剤、カプセルまたは粉末の形態である請求項9に記載の投与組成物。
  14. 水、1,2-プロパンジオール、エタノールからなる群から選択される液体である投与ビヒクルを更に含む請求項9に記載の投与組成物。
  15. (A)タンパク質、ポリペプチド、ペプチドおよびBIBN−4096BS（1-ピペリジンカルボキサミド、N-[2-[[5-アミノ-1-[[4-(4-ピリジニル)-1-ピペラジニル]カルボニル]ペンチル]アミノ]-1-[(3,5-ジブロモ-4-ヒドロキシフェニル)メチル]-2-オキソエチル]-4(1,4-ジヒドロ-2-オキソ-3(2H)-キナゾリニル)-,[R-(R*,S*)]-)からなる群から選択される少なくとも1種の生物学的活性剤、ならびに
    (B)請求項2に記載の化合物、ならびに、以下の化合物Aの式：
    Figure 0004602668
    [式中、
    R1、R2、R3、およびR4は、独立してHまたは-OHであり；
    R5は、-OHまたは-C(O)R 22であり；
    R22は、C1-C6アルキルであり；
    R6は、C 1 -C 7 アルキルもしくはC 1 -C 7 シクロアルキルで置換されたC 1 -C 16 アルキレンまたは非置換C1-C16アルキレンであり；
    R7は、-NR18R19であり；
    R18およびR19は、水素もしくはヒドロキシ置換C1-C16 アルキルであり、または、R18およびR19は、結合して、結合している窒素原子とともに、非置換もしくはC1-C6アルキルで置換されているモルホリノ、モルホリニウム塩もしくはイミダゾール環を形成する]
    を有する化合物またはその塩、からなる群から選択される少なくとも1種の化合物を
    (C)投与ビヒクルの存在下または非存在下で、
    混合することを含む、組成物を調製する方法。
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