JP4540967B2 - Ｎｍｆ産生促進剤 - Google Patents

Description

本発明は、新規なＮＭＦ産生促進剤、保水能力改善用皮膚外用剤およびカユミ改善用皮膚外用剤に関する。

ネンジュモは、藍藻の一種で、紫外線遮蔽能、抗菌作用、抗カビ作用、抗アレルギー作用そしてテストステロン−５α−リダクターゼ阻害作用が知られている（特許文献１〜５）。海ブドウは、海藻の一種で、ヒアルロニダーゼ阻害作用や育毛作用が知られている（特許文献６、７）。しかし、ＮＭＦ産生促進効果、肌の保水能力改善効果およびカユミ改善効果は知られていない。

特開昭６０−１３７０９ 特開平６−１１６１５９ 特開平７−２４２６８９ 特開平１０−２６５３９９ 特開２００２−６８９４３ 特開平９−６７２６６ 特開２００１−５５３１４

角質層の保湿性に重要な役割を果たしているのがＮＭＦであることは古くから知られており、これまでＮＭＦ成分は保湿剤の開発に応用されてきた。近年、ＮＭＦの主体をなすアミノ酸は、ケラトヒアリン顆粒の主成分であるフィラグリンというタンパク質の分解により産生されることが明らかとなり、ＮＭＦの産生を高めるためにはケラチノサイトにおけるプロフィラグリンやフィラグリンの生成促進が重要であると考えられるようになった。しかし、ケラチノサイトにおいてプロフィラグリンやフィラグリンを生成促進する、すなわち、ＮＭＦの産生を高める効果が十分なものは見つかっていない。

上記実情に鑑み、本発明者らは、表皮ケラチノサイトのＮＭＦ産生を促進するＮＭＦ産生促進剤を見出すべく誠意研究を行った結果、ネンジュモおよび海ブドウの抽出物がその目的に合致することを見出し、さらには、肌の保水能力改善効果およびカユミ改善効果についても見出すことによって本発明を完成した。

すなわち、本発明は、ネンジュモの抽出物および／または海ブドウの抽出物を含有することを特徴とするＮＭＦ産生促進剤、保水能力改善用皮膚外用剤およびカユミ改善用皮膚外用剤に関するものである。

本発明で用いられるネンジュモは、藍藻綱ネンジュモ科ネンジュモ属の陸上藻で、ハッサイ(学名：Ｎｏｓｔｏｃ ｃｏｍｍｕｎｅ Ｖａｕｃｈ． ｖａｒ． ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｅ)やイシクラゲ(学名：Ｎｏｓｔｏｃ ｃｏｍｍｕｎｅ Ｖａｕｃｈ．)などが挙げられる。近年、循環器系疾患や癌などの成人病の予防・治療などに効果があるとして注目されている。また、髪菜として中国料理に利用されているので、市販品を利用することができる。本発明で用いられる海ブドウは、イワヅタ科イワヅタ属の海藻で、クビレヅタ（学名：Ｃａｕｌｅｒｐａ ｌｅｎｔｉｌｌｉｆｅｒａ）、スリコギヅタ（学名：Ｃ．ｒａｃｅｍｏｓａ Ｗ．ｖ．Ｂｏｓｓｅ ｖａｒ．ｌａｅｔｅｖｉｒｅｎｓ Ｗ．ｖ．Ｂｏｓｓｅ）、フサイワヅタ（学名：Ｃ．ｏｋａｍｕｒａｉ Ｗ．ｖ．Ｂｏｓｓｅ）、ヘライワヅタ（学名：Ｃ．ｂｒａｃｈｙｐｕｓ Ｈａｒｖ．）などが挙げられる。その利用においては、天然品を採取して利用することも可能であるし、市販品を利用することもできる。

本発明で使用するネンジュモおよび海ブドウの抽出物とは、例えば、市販されている髪菜やクビレヅタを細断し抽出することができる。その調製方法は特に限定されず、例えば加熱抽出したものであってもよいし、常温抽出されたものであってもよい。

抽出する溶媒としては、例えば、水、低級１価アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、１−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノールなど）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなど）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトンなど）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチルなど）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィンなど）、エーテル類（エチルエーテル、プロピルエーテルなど）が挙げられる。好ましくは、水、低級１価アルコールおよび液状多価アルコールがよく、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコールおよびプロピレングリコールがよい。また二酸化炭素などを用いた超臨界抽出も用いることができる。これらの溶媒は１種でも２種以上を混合して用いてもよい。

これらの抽出物は、抽出した溶媒のまま用いてもよく、必要に応じて、濃縮、希釈、ろ過などの処理をして用いてもよい。さらには、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥などの処理を行い、乾燥物として用いてもよい。

本発明のネンジュモの抽出物および／または海ブドウの抽出物を含有することを特徴とするＮＭＦ産生促進剤は、表皮ケラチノサイトのＮＭＦ産生を促進する作用を有するので、肌の保水能力改善やカユミ改善にも有用である。

本発明に関わるＮＭＦ産生促進剤を上記の目的で用いるには、通常全身的または局所的に投与される。投与方法としては、経口投与または経皮投与などが挙げられる。投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間などにより異なるが、通常成人１人当たり１回に１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは２０ｍｇ〜２００ｍｇの範囲で１日１回から数回投与される。もちろん前記したように、投与量は種々の条件で変動するので、上記投与範囲より少ない量で十分な場合もあるし、また、範囲を超えて投与する必要のある場合もある。

本発明のＮＭＦ産生促進剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、希釈剤を用いることもできる。希釈剤としては固体、液体、半固体でも良く、例えば、次のものが挙げられる。すなわち、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤などである。具体的には、乳糖、ショ糖、ソルビット、マンニット、澱粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、セルロースまたはその誘導体、アミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン、パラフィン、高級アルコールなどである。

本発明における保水能力改善用皮膚外用剤およびカユミ改善用皮膚外用剤の代表的な製剤としては、クリーム、乳液、ローション、ヘアトニック、スプレー、パック、溶液剤、軟膏、乳剤、懸濁剤のような塗布剤などが挙げられる。これらの製剤には、有効成分以外に、水、エタノールのような低級アルコール、セタノールのような高級アルコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールのような多価アルコール、ヒドロキシプロピルセルロースのようなセルロース類、動物性および植物性の油脂およびロウ、ワセリンのような炭化水素、シリコン、界面活性剤、酸化亜鉛などを配合することができる。

本発明に用いるネンジュモの抽出物および／または海ブドウの抽出物の配合量は、本発明の保水能力改善用皮膚外用剤あるいはカユミ改善用皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上、好ましくは０．００１〜９０重量％の配合が良い。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。

本発明のネンジュモおよび海ブドウの抽出物は優れたケラチノサイトＮＭＦ産生促進効果を示す。また、本発明の保水能力改善用皮膚外用剤およびカユミ改善用皮膚外用剤は肌の保水能力の優れた改善効果およびカユミ改善効果を示した。

次に、本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例および実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、％とは重量％を示す。

製造例１ ネンジュモ熱水抽出物
ネンジュモ（髪菜）の細断品１００ｇに、精製水１ｋｇを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、凍結乾燥してネンジュモ熱水抽出物を１０ｇ得た。

製造例２ ネンジュモ５０％１，３−ＢＧ抽出物
ネンジュモ（髪菜）の細断品１００ｇに、精製水５００ｇと１，３−ブチレングリコール５００ｇを加え、室温で２週間抽出した。抽出後、ろ過し、ネンジュモの５０％１，３−ＢＧ抽出物を９５０ｇ得た。

製造例３ ネンジュモエタノール抽出物
ネンジュモ（髪菜）１００ｇに、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液を１ｋｇを加え、室温で２週間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、ペースト状の抽出物を５ｇ得た。

製造例４ 海ブドウ熱水抽出物
クビレヅタを精製水に浸漬して脱塩した後、その１００ｇに精製水１ｋｇを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、凍結乾燥して海ブドウ熱水抽出物を０．５ｇ得た。

製造例５ 海ブドウ５０％１，３−ＢＧ抽出物
クビレヅタを精製水に浸漬して脱塩した後、その１００ｇに、精製水４００ｇと１，３−ブチレングリコール５００ｇを加え、室温で２週間抽出した。抽出後、ろ過し、海ブドウの５０％１，３−ＢＧ抽出物を９５０ｇ得た。

製造例６ 海ブドウエタノール抽出物
クビレヅタの乾燥品１００ｇに、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液を１ｋｇを加え、室温で２週間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、ペースト状の抽出物を１０ｇ得た。

処方例１ ローション
処方 配合量
１．ネンジュモ熱水抽出物（製造例１） ０．１部
２．１，３−ブチレングリコール ８．０
３．グリセリン ２．０
４．キサンタンガム ０．０２
５．クエン酸 ０．０１
６．クエン酸ナトリウム ０．１
７．エタノール ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．） ０．１
１０．香料 ０．１
１１．精製水 ８４．４７
［製造方法］成分１〜６および１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合しろ過して製品とする。

比較例１ 従来のローション
処方例１においてネンジュモ熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来のローションとした。

処方例２ クリーム
処方 配合量
１．ネンジュモ熱水抽出物（製造例１） ０．０５部
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．１，３−ブチレングリコール ８．５
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１４．精製水 ６８．１
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

処方例３ 乳液
処方 配合量
１．ネンジュモエタノール抽出物（製造例３） ０．５部
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水 ７２．７
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

処方例４ ヘアトニック
処方 配合量
１．エタノール ６０．０部
２．ネンジュモ５０％１，３−ＢＧ抽出物（製造例２） ２．０
３．グリセリン ２．０
４．精製水 ３６．０
［製造方法］ネンジュモの抽出物をエタノールに溶解し、グリセリン、精製水を加え、十分かく拌混合し、製品とする。

処方例５ パック
処方 配合量
１．ネンジュモ熱水抽出物（製造例１） ０．１部
２．ポリビニルアルコール １２．０
３．エタノール ５．０
４．１，３−ブチレングリコール ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
６．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．） ０．５
７．クエン酸 ０．１
８．クエン酸ナトリウム ０．３
９．香料 ０．１
１０．精製水 ７３．７
［製造方法］成分１〜１０を均一に溶解し製品とする。

処方例６ ローション
処方 配合量
１．海ブドウ熱水抽出物（製造例４） ０．１部
２．１，３−ブチレングリコール ８．０
３．グリセリン ２．０
４．キサンタンガム ０．０２
５．クエン酸 ０．０１
６．クエン酸ナトリウム ０．１
７．エタノール ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．） ０．１
１０．香料 ０．１
１１．精製水 ８４．４７
［製造方法］成分１〜６および１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合しろ過して製品とする。

処方例７ クリーム
処方 配合量
１．海ブドウ熱水抽出物（製造例４） ０．０５部
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．１，３−ブチレングリコール ８．５
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１４．精製水 ６８．１
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

処方例８ 乳液
処方 配合量
１．海ブドウエタノール抽出物（製造例６） ０．５部
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水 ７２．７
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

処方例９ ヘアトニック
処方 配合量
１．エタノール ６０．０部
２．海ブドウ５０％１，３−ＢＧ抽出物（製造例５） ２．０
３．グリセリン ２．０
４．精製水 ３６．０
［製造方法］海ブドウの抽出物をエタノールに溶解し、グリセリン、精製水を加え、十分かく拌混合し、製品とする。

処方例１０ パック
処方 配合量
１．海ブドウ熱水抽出物（製造例４） ０．１部
２．ポリビニルアルコール １２．０
３．エタノール ５．０
４．１，３−ブチレングリコール ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
６．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．） ０．５
７．クエン酸 ０．１
８．クエン酸ナトリウム ０．３
９．香料 ０．１
１０．精製水 ７３．７
［製造方法］成分１〜１０を均一に溶解し製品とする。

次に本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。

ケラチノサイトのＮＭＦ産生促進試験
培養ケラチノサイトのＮＭＦ産生の指標となるプロフィラグリンｍＲＮＡ発現を下記の条件にて測定した。

プロフィラグリンｍＲＮＡ発現に及ぼす影響の評価法
マウスケラチノサイト由来Ｐａｍ２１２細胞を１０％ ＦＣＳを含むＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ培地にて３７℃、５％ＣＯ_２条件下で培養した。コンフルエントな状態なったところで０．０１ｍｇ／ｍｌ濃度の試料を添加したＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ培地にてさらに２４時間培養した後、総ＲＮＡの抽出を行った。（ｎ＝３）総ＲＮＡの抽出にはＩＳＯＧＥＮ（ニッポンジーン）を用いた。Ｐａｍ２１２細胞から抽出した総ＲＮＡを基にＲＴ−ＰＣＲ法によりプロフィラグリンｍＲＮＡ発現量の測定を行った。ＲＴ−ＰＣＲ法にはＴａＫａＲａ ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ （ＡＭＶ） Ｖｅｒ．２．１を用い、プロフィラグリン用のｐｒｉｍｅｒとしては５’ＧＡＡＴＣＣＡＴＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＡＧＣＡＣＣＴＴＧ ３’および５’ＧＧＴＡＴＧＴＣＣＡＡＴＧＴＧＡＴＴＧＣＡＣＧＡ−
ＴＴＧ３’を用いた。また、内部標準としてはＧＡＰＤＨを用いた。その他の操作は定められた方法にしたがい、ＰＣＲ反応液をアガロースゲル電気泳動に供し、プロフィラグリンおよびＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現をバンドとして確認した。これらのバンドをポラロイドカメラにて撮影してデンシトグラフを用いて定量化し、プロフィラグリンｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現量に対する割合として求めた。

ＮＭＦ産生促進率（％）＝Ｂ／Ａ×１００

Ａ：抽出物未添加の場合のプロフィラグリン／ＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現量
Ｂ：抽出物添加の場合のプロフィラグリン／ＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現量

使用試験
処方例１および処方例６のローションと比較例１の従来のローションを用いて、各々肌の保水能力の低下や肌のカユミに悩む女性３０人（３０〜４５才）を対象に２ヶ月間の使用試験を行った。使用後、保水能力および肌のカユミについてのアンケート調査を行った。アンケートの評価基準は、有効なものを「優」、やや有効なものを「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを「不可」として評価した。

これらの結果を表２および表３に示した。処方例１のネンジュモの抽出物を含有することを特徴とするローション、および処方例６の海ブドウの抽出物を含有することを特徴とするローションは、優れた肌の保水能力改善およびカユミ改善効果を示した。なお、試験期間中皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。

処方例２および処方例７のクリーム、処方例３および処方例８の乳液の使用試験を行ったところ、いずれも安全で優れた肌の保水能力改善およびカユミ改善効果を示した。また、処方例４および処方例９のヘアトニックについても頭皮の乾燥しやすい性質が改善され、フケやカユミなども減少した。

本発明は、ＮＭＦ産生促進剤および肌の保水能力改善やカユミ改善効果を有する皮膚外用剤を提供する。

Claims (1)

1. 髪菜（培養によって得られる微細藻類を除く）の抽出物からなるプロフィラグリン産生促進剤。