JP4332496B2

JP4332496B2 - Ｐｍｅａおよびｐｍｐａ環生成合成

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Publication number: JP4332496B2
Application number: JP2004503655A
Authority: JP
Inventors: ジョゼフ・ジェイ・コプチョ; ケイ・ラジャ・レディ; マイケル・シー・マテリッチ; ビーマラオ・ジー・ウガルカー
Original assignee: Metabasis Therapeutics Inc
Current assignee: Metabasis Therapeutics Inc
Priority date: 2002-05-13
Filing date: 2003-05-12
Publication date: 2009-09-16
Anticipated expiration: 2023-05-12
Also published as: EP1504014A2; US20030225277A1; EP1504014B1; IL164810A; CA2485597C; US20070203339A1; WO2003095665A2; AU2003235501A1; NZ536327A; IL164810A0; US7193081B2; CA2485597A1; WO2003095665A3; EP1504014A4; JP2005525422A

Description

（発明の分野）
本発明は、ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡの置換されている６員環状１−アリール−１，３−プロパニルエステル類の合成の製法を目的とする。より詳細には、本発明は、シス立体化学を有するＰＭＥＡおよびＰＭＰＡのハロゲン置換環状−１−フェニル−１，３−プロパニルエステル類の合成の製法に関する。

（発明の背景）
以下の本発明の背景の記載は、本発明の理解を助けるために提供するものであるが、本発明の先行技術であると認めるものでも、またはそれを記載するものでもない。すべての刊行物は、引用によりそのまま包含される。

９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニン（ＰＭＥＡ）、（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニン（ＰＭＰＡ）および関連するアナログ（U.S. 4,808,716; U.S. 5,142,051）は、抗ウィルス活性、例えばＢ型肝炎およびＨＩＶ（De Clercqら, Antiviral Res. 8: 261-7(1987); Balzariniら, Biochem Biophys. Res. Commun. 219(2): 337-41(1996)）に対する活性を示すホスホン酸である。ＰＭＥＡのジピバロイルオキシメチレンエステル（「ビスＰＯＭＰＭＥＡ」）は、Ｂ型肝炎の処置のための臨床試験に用いられる（Benhamouら, Lancet 358(9283): 718-23 (2001)）。さらに、これらの化合物はまた、抗癌活性を示すことがいくつかの研究により示されている（Muronoら, Cancer Res., 61(21): 7875-7 (2001)）。

ホスホン酸類およびそれらの塩を含む化合物は、生理学的ｐＨにて帯電性が高く、それゆえ低い経口バイオアベイラビリティー、低い細胞透過性および制限された組織分布（例えばＣＮＳ）を示すことが多い。さらに、これらの酸はまた、一般に、薬物としてのそれらの使用を妨害するいくつかの他の性質、例えば急速な腎クリアランスに起因する短い血漿半減期ならびに毒性（例えば、腎臓、胃腸など）を伴う（例えば、Bijsterboschら, Antimicrob Agents Chemother. 42(5): 1146-50 (1998)）。環状ホスホネートエステルもまた、ＰＭＥＡおよび関連するアナログのために記載されている。これらの環状エステルについての番号付けを以下に示す：

ＰＭＥＡの無置換環状１’，３’−プロパニルエステルは製造されたが、インビボ活性を示さなかった。EP 0 481214 B1は、ＰＭＥＡの環状プロドラッグの例（ここに、１’および３’位は無置換である）を開示する。発明者による応用およびその後の刊行物（Starrettら, J. Med. Chem. 37:1857-1864 (1994)）はさらに、化合物の研究成果、すなわちこれらの化合物が経口バイオアベイラビリティーおよび生物学的活性をまったく示さなかったことを開示する。それらの化合物は低いｐＨにて不安定であることが示され、例えば環状２’，２’−ジフルオロ−１’，３’−プロパンエステルは、開環モノエステルの急速な生成を伴い、加水分解に対し不安定であることが報告されている。

（発明の要約）
本発明は、シス異性体について増強されたｄ．ｅ．を有するＰＭＥＡおよびＰＭＰＡの環状１−アリール−１，３プロパニルホスホネート環状エステルの合成のための新規な製法を目的とする。ある側面において、該製法は、シス異性体をカップリング法により増強する。別の側面において、このシス異性体のための製法は、工程の温度により増強される。さらなる側面において、反応体の添加順序は、シス異性体の産生を増強した。さらなる側面は、酸の付加および塩の結晶化を通した、所望のシス異性体のさらなる富化（enrichment）である。該製法の別の側面は、結晶化溶媒により起こるシス異性体の増強である。

別の側面において、本発明は、Ｖが結合している部分にてＳ立体化学を有する、実質的に鏡像異性的に純粋なシス環状エステルを製造する方法を目的とする。

本発明の一つの側面は、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は、９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは、フルオロ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される化合物を製造する方法であって、
キラル１−フェニルプロパン−１，３−ジオール（ここに、フェニルは置換されていることもあってよい）をＭＰＯＣｌ_２またはそのＮ−６置換アナログとカップリングさせる方法に関する。

さらに、所望の異性体の単離および精製を可能にする方法および塩形態を記載する。

（定義）
本発明に従い、本明細書にて用いる次の用語は、特に明記されなければ、次の意味に定義する。

用語「ヘキサン」は、約９５％ヘキサン、メチルシクロプロパンおよびメチルペンタンを含む商業的に入手可能なＨＰＬＣ試薬液を意味する。
用語「ジアルキル」は、２つのアルキル基を含む化合物を意味する。用語「アルキル」は、直鎖、分枝鎖および環状基を含む、飽和脂肪族基を意味する。適切なアルキル基としては、メチル、エチル、イソプロピルおよびシクロプロピルが挙げられる。

用語「置換されていることもある」または「置換されている」は、低級アルキル、低級アリールおよびハロゲンから独立して選択される、１〜２つの置換基で置換されているアリール基を含む。好ましくは、これらの置換基はハロゲンからなる群から選択される。
用語「シス」立体化学は、６員環上のＶ基とＭ基の位置関係を意味する。以下の式は、シス立体化学を示す。

別のシス立体化学は、ＶとＭが平面の上方に向けられるであろう。以下の式は、このシス立体化学を示す。

用語「Ｎ６−置換」は、プリン環系の６位にて結合したアミンにおける置換を意味する。Ｎ６−は、一般にジアルキルアミノメチレン基（ここに、Ｒ^１基としては、Ｃ１〜Ｃ４非環式アルキル、Ｃ５〜Ｃ６環状アルキル、ベンジル、フェネチルが挙げられるがこれらに限定されず、またはＲ^１基は一緒になってピペリジン、モルホリンおよびピロリジンを形成する）で置換されている。

用語「ジアルキルアミノメチレンイミン」は、次の構造：

［式中、Ｒ^１基としては、Ｃ１〜Ｃ４非環式アルキル、Ｃ５〜Ｃ６環状アルキル、ベンジル、フェネチルが挙げられるがこれらに限定されず、またはＲ^１基は一緒になってピペリジン、モルホリンおよびピロリジンを形成する］
で示される官能基または置換基を意味する。

用語「鏡像体過剰率（％ｅｅ）」は、光学純度を意味する。これは次式：
（［Ｒ］−［Ｓ］）／（［Ｒ］＋［Ｓ］）ｘ１００＝％Ｒ−％Ｓ
（式中、［Ｒ］はＲ異性体の量であり、［Ｓ］はＳ異性体の量である）
を用いることにより得られる。この式は、Ｒが主要な異性体であるとき％ｅｅを提供する。

用語「ｄ．ｅ．」は、ジアステレオマー過剰率を意味する。これは次式：
（［シス］−［トランス］）／（［シス］＋［トランス］）ｘ１００＝％［シス］−％［トランス］
を用いることにより得られる。

用語「ジアステレオ異性体」は、同じ置換基を有し、同じ型の化学反応を受ける、二つ以上の不斉中心を有する化合物を意味し、該ジアステレオ異性体は、異なる物理的性質を有し、空間内の異なる相対位置を占める置換基を有し、異なる生物学的特性を有してもよい。

用語「ラセミ」は、等量の同化合物の右旋性体および左旋性体からなり、光学的に活性でない化合物または混合物を意味する。
用語「鏡像異性体」は、分子構造が互いに鏡像関係にある、一対の化合物のいずれかを意味する。

用語「酸解離定数」（Ｋ_ａ）は、酸のイオン化のための平衡定数を意味し、例えばＨＡが弱酸のための式であるとき：
Ｋ_ａ＝（［Ｈ^＋］［Ａ⁻］／［ＨＡ］）
である。
用語「ハロゲン」は、塩素、臭素またはフッ素を意味する。

本明細書にて用いる用語「プロドラッグ」は、生体系に投与されるとき、生物学的に活性な化合物を、自発的化学反応、酵素触媒化学反応および／または代謝化学反応、あるいはそれぞれの組合せの結果として生成する任意のＭ化合物を意味する。標準的なプロドラッグは、官能基、例えばＨＯ−、ＨＳ−、ＨＯＯＣ−、Ｒ_２Ｎ−に結合した基を用い、インビボにて開裂する薬物と関連して形成される。標準的なプロドラッグとしては、基がアルキル、アリール、アラルキル、アシルオキシアルキル、アルコキシカルボニルオキシアルキルであるカルボン酸エステル、ならびに結合している基がアシル基、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、リン酸基または硫酸基であるヒドロキシル、チオールおよびアミンのエステルが挙げられるが、これらに限定されない。例示した基は、典型的なものであり、網羅したものではなく、当業者は、他の知られている種々のプロドラッグを製造することができる。そのような式Ｉの化合物のプロドラッグは、本発明の範囲に含まれる。プロドラッグは、ある形態の化学的変換を受けて、生物学的に活性である、または生物学的に活性な化合物の前駆体である化合物を産生するはずである。場合によって、プロドラッグは、通常、薬物自体より低いが生物学的に活性であり、薬物の有効性または安全性を、改善された経口バイオアベイラビリティー、薬力学的半減期などを通して改善するために提供する。生物学的に活性な化合物としては、例えば抗癌剤および抗ウィルス薬が挙げられる。

用語「環状１’，３’−プロパンエステル」、「環状１，３−プロパンエステル」、「環状１’，３’−プロパニルエステル」および「環状１，３−プロパニルエステル」は、次式：

を意味する。
用語「増強する」は、特定の性質を増大または改善することを意味する。
用語「富化する（enriching）」は、反応により産生される特定の異性体の量を増大することを意味する。

用語「製薬的に許容される塩」としては、本発明化合物と、動物に安全に投与されることが許容される、有機または無機の酸または塩基の組合せに由来する式Ｉの化合物の塩が挙げられる。適切な酸としては、酢酸、アジピン酸、ベンゼンスルホン酸、（＋）−７，７−ジメチル−２−オキソビシクロ［２．２．１］ヘプタン−１−メタンスルホン酸、クエン酸、１，２−エタンジスルホン酸、ドデシルスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸（glucoheptonic acid）、グルコン酸、グルコロン酸（glucoronic acid）、馬尿酸、塩酸ヘミエタノール酸（hydrochloride hemiethanolic acid）、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、臭化メチル酸（methylbromide acid）、メチル硫酸、２−ナフタレンスルホン酸、硝酸、オレイン酸、４，４’−メチレンビス［３−ヒドロキシ−２−ナフタレンカルボン酸］、リン酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、スルホサリチル酸、タンニン酸、酒石酸、テレフタル酸およびｐ−トルエンスルホン酸が挙げられる。

本明細書および特許請求の範囲では次のよく知られている化学薬品を記載している。略語および一般的名称も示す。
ＣＨ_２Ｃｌ_２；ジクロロメタンまたは塩化メチレン
ＤＣＭ；ジクロロメタン
（−）−ＤＩＰ−Ｃｌ；（−）−β−クロロジイソピノカンフェニルボラン
ＤＭＡＰ；４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ；ジメチルホルムアミド
ＨＣｌ；塩酸
ＫＩ；ヨウ化カリウム
ＭｇＳＯ_４；硫酸マグネシウム
ＭＴＢＥ；ｔ−ブチルメチルエーテル
ＮａＣｌ；塩化ナトリウム
ＮａＯＨ；水酸化ナトリウム
ＰｙＢＯＰ；ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＥＡ；トリエチルアミン
ＴＨＦ；テトラヒドロフラン
ＴＭＳＣｌ；クロロトリメチルシラン
ビスＰＯＭＰＭＥＡ；ビス（ピバロイルオキシメチル）−９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニン（アデフォビル・ジピボキシル）

本明細書および特許請求の範囲では次のよく知られている薬物を記載している。略語および一般的名称も示す。
ＰＭＥＡ；９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニン（アデフォビル）
（Ｒ）−ＰＭＰＡ；（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニン（テノフォビル）

（本発明の詳細な記載）
本発明は、ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡの環状１−アリール−１，３−プロパニルエステル類の合成のための製法が、得られる生成物の立体化学を決定したという発見を目的とする。本発明の製法により合成される化合物は、ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡの環状エステルのシス立体化学を目的とする。本発明のある側面において、環状１−アリール−１，３−プロパニルエステル類においてＣ１’として同定されるメチン炭素における立体化学を、対応するキラル１−アリール−１，３−プロパンジオールの合成を通し、例えば中間体ケト酸のキラル還元を経由して構築した。

別の側面において、環状ホスホネート環のリンにおけるキラリティーはジオールとの反応中に構築されたことを見出した。シスジアステレオ異性体の生成は、反応温度ならびにキラルジオールおよび保護されている親ホスホン酸ジクロリデートの反応混合物への添加順序に依存した。

本発明のさらなる側面は、以下の構造において６と標識された炭素に結合している窒素の保護である。

所望のシス異性体の濃度（ここに、シスは環状ホスホネート環のリン−炭素結合と炭素−アリール結合間の幾何学的関係を意味する）は、酸塩の選択的結晶化を経由したさらなる単離により増強され、これは本発明のさらなる側面である。さらにさらなる増強は、酸付加塩の再結晶化を通して達成された。

所望の立体化学を伴ったＰＭＥＡまたはＰＭＰＡの環状１−アリール−１，３−プロパニルエステル類の合成のための製法は、アデニンおよびハロゲン置換されている塩化ベンゾイルから出発する一連の収斂型合成を経由する。最終的に得られる化合物は、２つの立体中心、（１）立体異性構造においてＣ１’として同定されるメチン炭素および（２）環状ホスホネート環のリンを含んだ。炭素Ｃ１’における立体化学は、中間体ケト酸のキラル還元から得られ、リンキラリティーは、親ホスホン酸とキラルジオールのジアステレオ選択的カップリングの結果であった。所望のシス異性体（ここに、シスは環状ホスホネート環のリン−炭素結合と炭素−フェニル結合間の異性体関係を意味する）を、酸塩の選択的結晶化を経由して単離した。

（本発明により製造される化合物）
本発明により製造される化合物は、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は、９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは、Ｆ、ＣｌおよびＢｒからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される、ＰＭＥＡおよびアナログの置換されている６員環状１，３−プロパンジエステルプロドラッグ、およびその製薬的に許容される塩である。

本発明の別の側面は、式ＩＩ：

［式中、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は、９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは、Ｆ、ＣｌおよびＢｒからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される化合物、およびその製薬的に許容される塩の製造である。
別の側面は、メタンスルホン酸またはコハク酸と形成される化合物の塩を目的とする。
別の側面は、メタンスルホン酸と形成される塩を目的とする。

本発明の別の側面は、式ＩＩ：

［式中、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は、９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは、３−クロロフェニルである］
で示される化合物、およびその製薬的に許容される塩の製造である。
別の側面は、メタンスルホン酸と形成されるそのような化合物の塩を目的とする。

本発明の別の側面は、式ＩＩ：

［式中、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は、９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは、２−ブロモフェニルである］
で示される化合物、およびその製薬的に許容される塩である。
別の側面は、メタンスルホン酸と形成されるそのような化合物の塩を目的とする。

１．１−（アリール）−プロパン−１，３−ジオール類の合成：
１，３−ジオールを製造する種々の合成方法が知られている。これらの適切な方法は次のような２つの型に分けられる：１）１−（アリール）−プロパン−１，３−ジオールの合成、２）キラル１−（アリール）−プロパン−１，３−ジオールの合成。

１．１ラセミ１−（アリール）−プロパン−１，３−ジオールの合成：
１，３−ジヒドロキシ化合物は、文献中のよく知られているいくつかの方法により合成することができる。置換されている芳香族アルデヒドを用い、酢酸アルキルのリチウムエノレートの付加後のエステル還元（経路Ａ）を経由してラセミ１−（アリール）プロパン−１，３−ジオールを合成する（Turner, J. Org. Chem. 55:4744 (1990)）。あるいは、１−ヒドロキシプロパン−３−アールへのアリールグリニヤ（Grignard）付加はまた、１−（アリール置換）プロパン−１，３−ジオールを与える（経路Ｂ）。この方法は、種々の置換されているハロゲン化アリールの１−（アリール置換）−１，３−プロパンジオールへの変換を可能とするだろう（Coppiら, J. Org. Chem. 53:911 (1988)）。ハロゲン化アリールを用いて１−置換プロパンジオールをまた、１，３−ジオキサ−４−エンのヘック（Heck）カップリング後の還元および加水分解により合成することができる（Sakamotoら, Tetrahedron Lett. 33:6845 (1992)）。ピリジル、キノリン、イソキノリンプロパン−３−オール誘導体は、Ｎ−オキシド形成後の無水酢酸条件下における転位（経路Ｃ）により、１−置換−１，３−ジオールに酸化することができる（Yamamotoら, Tetrahedron 37:1871 (1981)）。種々の芳香族アルデヒドはまた、ビニルグリニヤ付加後のヒドロホウ素化反応（経路Ｄ）により１−置換−１，３−ジオールに変換することができる。

１．２キラル１−（アリール）−プロパン−１，３−ジオールの合成：
第二級アルコールの化学または酵素試薬を経由したキラル分割についての種々の知られている方法は、ジオール鏡像異性体の製造のために利用することができる（Haradaら, Tetrahedron Lett. 28:4843 (1987)）。置換されている３−アリール−３−オキソプロピオン酸またはエステルの遷移金属触媒水素化は、光学的に純粋なベータヒドロキシ酸またはエステルのＲまたはＳ異性体を製造する効率的な方法である（Comprehensive Asymmetric Catalysis, Jacobsen, E. N., Pfaltz, A., Yamamoto, H. (Eds), Springer, (1999); Asymmetric Catalysis in Organic Synthesis, Noyori, R., John Wiley, (1994)）。これらのベータヒドロキシ酸またはエステル生成物は、さらに還元され、必要とするキラル１−（アリール）−プロパン−１，３−ジオールを与えることができる（経路Ａ）。高圧水素化または水素転移反応のためのβ−ケト酸またはエステル基質は、種々の方法、例えば塩基存在下におけるアセトフェノンの炭酸ジメチルとの縮合により製造してもよく（Chuら, J. Het. Chem. 22:1033 (1985)）、エステル縮合により製造してもよく（Turnerら, J. Org. Chem. 54:4229 (1989)）、またはハロゲン化アリールから製造してもよい（Kobayashiら, Tetrahedron Lett. 27:4745 (1986)）。あるいは、鏡像異性的に純粋な１，３−ジオールは、β−ヒドロキシエチルアリールケトン誘導体またはβ−ケト酸誘導体のキラルボラン還元（経路Ｂ）により得ることができる（Ramachandranら, Tetrahedron Lett. 38:761 (1997)）。別の方法において、商業的に入手可能な桂皮アルコールは、触媒的不斉エポキシ化条件下、エポキシアルコールに変換してもよい。これらのエポキシアルコールは、Ｒｅｄ−Ａｌにより還元され、鏡像異性的に純粋な１，３−ジオールを生じる（経路Ｃ）（Gaoら, J. Org. Chem. 53:4081 (1980)）。アルドール縮合は、芳香族アルデヒドから出発するキラル１，３−酸化されている官能基の合成（経路Ｄ）のための別に記載されている方法である（Mukaiyama, Org. React. 28:203 (1982)）。

本発明の目的のために、中間体ケト酸は、式Ａのハロゲン置換されている塩化ベンゾイル（ここに、塩化ベンゾイルは場合により、フェニル環上の任意の位置にて１〜２つのハロゲンにより置換されていてもよい）から製造する。好ましい態様において、Ｒ^２がハロゲンであるならば、Ｒ^３は水素でなければならず、Ｒ^３がハロゲンであるならば、Ｒ^２は水素でなければならない。ある態様において、式Ａは塩化３−クロロベンゾイルであり、別の態様において、式Ａは塩化２−ブロモベンゾイルである。Ｃ１’は、本発明により製造される最終化合物におけるメチン炭素立体中心である炭素を特定する。

式Ａの化合物を、酢酸トリメチルシリルおよびリチウムジイソプロピルアミド（ジイソプロピルアミンとｎ−ブチルリチウムの反応により系中にて生成する）と反応させ、オキソ−プロパン酸を得る。ヒドロキシプロパン酸は、オキソ−プロパン酸から、（−）−ＤＩＰ−Ｃｌとの反応を経由して合成され、次いでヒドロキシプロパン酸は、次式Ｂ：

で示されるキラル１，３−ジオールに還元される。
炭素Ｃ１’におけるキラル中心は、本製法工程にて構築されており、鏡像異性体比は、残りの工程を通して保持された。

２．０ＰＭＥＡの合成：
ＰＭＥＡおよび（Ｒ）−ＰＭＰＡならびにそれらのアナログの種々の製造は、文献（Arimilliら, WO 99/04774; Schultzeら, Tetrahedron Letters 1998, 39, 1853-1856; Bischofbergerら, U.S. 5,514,798, U.S. 5,686,629; Holyら, U.S. 4,659,825, U.S. 4,808,716, U.S. 5,130,427, U.S.5,142,051）に記載されており、当業者に知られている。これらの手順は、本明細書における使用のために改変され、その改変は、早期の文献に記載の時間のかかる単離および精製工程の両者を排除することが予想外に判明した。本発明の目的のために、ホスホン酸のジエチルエステルの単離は、次の工程に進行するために必要としなかった。エステルは本製法において精製せずに脱保護することができることを見出した。

典型的な方法において、アデニンは、置換されている、または無置換の炭酸エチレンおよび塩基と反応し、ＴｓＯＣＨ_２Ｐ（Ｏ）ＯＥｔ_２でさらにアルキル化された９−ヒドロキシエチルアデニンを生成する。最終工程は、ジエチルエステルの加水分解を伴い、ＰＭＥＡ、（Ｒ）−ＰＭＰＡまたはそれらのアナログを生成した。

３．Ｎ６−保護ＰＭＥＡ−ジクロリデートの合成：
別の工程において、ＰＭＥＡの塩素化は、塩化オキサリルおよびＮ，Ｎ−ジエチルホルムアミドを用いて達成され、Ｎ６保護ＰＭＥＡ−ジクロリデートを与える。塩素化工程において用いるＮ，Ｎ−ジアルキルホルムアミドは、ヴィルスマイヤー（Vilsmeyer）塩素化剤を形成するだけでなく、６位にてＮＨ_２基を保護する。保護されているクロリデート中間体は、生成物の総収率およびジアステレオマー比を改善する好ましい溶解性を有することを見出した。他の保護基、例えばアシル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニルおよびアラルキルオキシカルボニルの使用はまた、ジクロリデートの溶解性および予期される生成物のジアステレオマー比をを増強する。

４．ホスホン酸ジクロリデートとキラルジオールのカップリング：
保護されている親ホスホン酸ジクロリデートとキラルジオールの塩基存在下でのカップリングは、ジクロロメタンに可溶な保護されている中間体をより低温にて生じた。

４．１シスプロドラッグ塩の結晶化：
カップリングしたホスホン酸およびキラルジオールの、穏やかな酸性条件下でのＮ６位の脱保護および得られた生成物のメタンスルホン酸を用いた結晶化により、シスプロドラッグをメシレート塩（式Ｃ）として９２〜９３％の化学純度で生成した。トランス異性体が主要な不純物であり、アルコール、例えばメタノールからの最終物質の第二の結晶化により、９６％以上のジアステレオマー純度を得た。

例えば、硫酸、硝酸、塩酸、リン酸、スルホン酸、酒石酸、クエン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、乳酸、シュウ酸などを含むが、これらに限定されない他の酸の使用により、生成物のより良い回収および異性体比を生じさせることができる。ＰＭＥＡのために記載されたプロトコルはまた、他のＰＭＥまたはＰＭＰ誘導体に適用可能である。

４．２メシル酸９−｛２−［２，４−シス−（Ｓ）−（＋）−４−（ハロフェニル）−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル］メトキシエチル｝アデニンの合成：
メシル酸９−｛２−［２，４−シス−（Ｓ）−（＋）−４−（ハロフェニル）−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル］メトキシエチル｝アデニン（式Ｃ）は、アデニンおよび塩化ハロベンゾイルから出発する８工程の一連の収斂型合成により製造した。最終的に得られた化合物（式Ｃ）は、２つの立体中心を含んだ：（１）メチン炭素（Ｃ１’）、および（２）環状ホスホネート環のリン。炭素（Ｃ１’）における立体化学は、中間体ケト酸のキラル還元から生じ、リンのキラリティーは、親ホスホン酸とキラルジオールのジアステレオ選択的カップリングの結果であった。所望のシス異性体（ここに、シスは環状ホスホネート環のリン−炭素結合と炭素−フェニル結合間の異性体関係を意味する）を、メタンスルホン酸塩の選択的結晶化により単離した。

キラルジオールおよび親ホスホン酸の出発物質を、改変された手順を用いて合成した。キラルジオールを塩化３−クロロベンゾイルから一連の３工程により合成し、親ホスホン酸をアデニンから一連の４工程により合成した。

最終の所望の（シス）立体異性体生成物を、親ホスホン酸とキラルジオールをカップリングさせ、最終立体異性体生成物を産生する新規カップリング工程を経由し高純度で得る。

ＰＭＥＡをラセミジオールと、脱水剤、例えばＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドおよびＤＭＦ／ピリジン溶媒系中のＰｙＢＯＰを用いて反応させた先のカップリングの試みは、完全なカップリングを達成するために、温度上昇（少なくとも１００℃）を必要とすることが判明した。これらの反応は、比較的少量のジアステレオマー過剰率（５〜１０％の所望のシス異性体）で進行した。予想外で驚いたことに、反応温度を低下させたときにｄ．ｅ．が改善したことは注目された。本発明のこの側面は、ＰＭＥＡをより反応性の高い化学種であるジクロリデートとして活性化する試みを生じた。ＰＭＥＡのジクロリデートをより低温にてジオールと反応させることは、発明者の望みであった。ＰＭＥＡのジクロリデートは、標準的塩素化条件を用いて容易に製造される。ジクロリデートとの低温でのカップリング反応は、ジクロリデートの低い溶解性により複雑化した。それゆえ、発明者はジクロリデートの溶解性に役立つようにＮ６の保護基を模索した。ある好ましい保護基は、Ｎ−（ジアルキルアミノメチレンイミン）であった。

Ｎ−（ジアルキルアミノメチレンイミン）−保護ＰＭＥＡジクロリデートの形成は、ジアルキルホルムアミド、例えばジメチルホルムアミド、ジエチルホルムアミド、ジブチルホルムアミド、Ｎ−ホルミルピペリジンまたはＮ−ホルミルモルホリンの存在下、還流ジクロロメタン中でのＰＭＥＡの塩化オキサリルとの処理により達成した。

５．０ジクロリデートの添加順序および温度の効果：
より高次のホルムアミド（ジエチルおよびより高次）は、ジクロリデートにさらに脂肪親和性を与えた。この脂肪親和性は、ジクロリデートをジクロロメタン（ＤＣＭ）においてより溶解性が向上することを見出した。過剰のトリエチルアミン（ＴＥＡ）の存在下でのラセミジオールのジクロリデート中間体への添加は、反応を完了させたが、反応物は適度なｄ．ｅ．しか有さないことが判明した。好ましい態様において、試薬を逆の順序（すなわち、ジクロリデートをジオール／塩基混合物に加えた）にて加えたとき、改善されたｄ．ｅ．を得た（シス：トランス＝７１：２９）。驚いたことに発明者は、添加順序および低温がシス異性体を支持するｄ．ｅ．を富化する方法を生じることを見出した。結果を第１表に示す（エントリー１〜３参照）。

第１表
温度および添加順序の効果

第１表はまた、より良いシス−トランス比がカップリング反応の温度を低下させることにより達成されることを示す。エントリー（１〜３）を参照。

ジオールに加えられるジクロリデートの予想外の利点により、ジクロリデートは移動のための溶液中にとどまることが好ましい。保護基のＲがメチルであるとき、得られるジクロリデートはスラリーのままであった。驚いたことに、わずかに過剰のピリジン（１．１当量）を加えることにより、ジクロリデートスラリーは溶解したことを見出した。これは、１当量のＨＣｌの中和およびジクロリデート塩酸塩と比較して得られる遊離塩基ジクロリデートのより高い溶解性に起因することができる。

得られる粗製の反応混合物は、水／ジクロロメタン分液処理を受け、単離したカップリング混合物を、酢酸のエタノール中での還流により処理し、窒素脱保護を達成した。

５．１シス異性体の塩形成および溶媒：
一連のカップリング／脱保護をキラルジオール（ＳまたはＲ）で行ったとき、同じｄ．ｅ．が観察され（５０％）、シス鏡像異性体はシスラセミ体のように反応溶液から結晶化しないことを発見した。驚いたことに、７５：２５シス：トランス混合物のいくつかの塩の形成は、所望のシスジアステレオマーの結晶化を生じた。使用したいくつかの塩ならびに固体およびろ液で見られたｄ．ｅ．のリストを第２表に記載する。
第２表
シス異性体の塩および結晶化溶媒

７５：２５シス：トランス混合物のメタンスルホン酸塩は、所望のシスジアステレオマー（９３：７）の最も高い富化を与えたことを見出した。脱保護は、弱酸、例えばエタノールのようなアルコール溶媒中の酢酸と還流することにより行った。次いでメタンスルホン酸を、脱保護が完了した後、反応溶液に加えた。この段階において、メタンスルホン酸は、所望のシスジアステレオマーを選択的に結晶化したことを見出した。粗製のメシル酸塩は、典型的に５〜７％のトランス異性体しか含まず、最終再結晶化を行い、トランスレベルをさらに１〜３％軽減した。第３表は、いくつかの試行した再結晶化溶媒を記載する。

以下に記載の溶媒に溶解した４％のトランス異性体を含むサンプルを用い、シス異性体を富化した。
第３表
最終再結晶化溶媒

^＊用いた容積はサンプルのグラム当たりである。

本発明にて使用する化合物およびそれらの製造は、これらの化合物を製造するいくつかの工程を例示する実施例によりさらに理解することができる。しかし、これらの実施例は、本発明を具体的に限定するものと解釈されるべきではなく、現在既知であるか、または後に開発される化合物のバリエーションは、本明細書中で特許請求されている本発明の範囲内であるものとする。

実施例１：３−（３−クロロフェニル）−３−オキソ−プロパン酸（１）の製造
三ツ口丸底フラスコ１２Ｌにメカニカルスターラーおよび滴下漏斗２Ｌを備え付けた。フラスコに窒素を流し、ジイソプロピルアミン６３６ｍＬおよびＴＨＦ１．８０Ｌを充填した。撹拌した内容物を−２０℃まで冷却した。ｎ−ブチルリチウム１．８１Ｌ（２．５Ｍヘキサン溶液）を撹拌しながらゆっくり加え、温度を−２０〜−２８℃で維持した。添加完了（３０分）後、滴下漏斗をヘキサン３０ｍＬですすぎ、次いで撹拌した溶液を−６２℃まで冷却した。酢酸トリメチルシリル３００ｇを撹拌し、温度を＜−６０℃で維持しながらゆっくり加えた。添加完了（約３０分）後、溶液を−６０℃にて１５分間撹拌した。塩化３−クロロベンゾイル２９５ｍＬを撹拌し、温度を＜−６０℃で維持しながらゆっくり加えた。添加完了（約６５分）後、冷却バスを取り除き、反応溶液を０℃まで徐々に昇温しながら、約１．２５時間撹拌した。反応フラスコを氷浴で冷却した後、水１．８Ｌを撹拌した溶液に加えた。反応混合物を１０分間撹拌した後、ｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）１．０Ｌで希釈した。より低い方の水相を分離し、メカニカルスターラーを備え付けた丸底フラスコに移し替えた。ＭＴＢＥ１．８Ｌを加え、撹拌した混合物を＜１０℃まで氷浴中にて冷却した。濃ＨＣｌ溶液３００ｍＬ（１２Ｍ溶液）を加え、混合物を激しく撹拌した。層を分離し、水相をさらに濃ＨＣｌ３０ｍＬで酸性化し、ＭＴＢＥ１．０Ｌで再び抽出した。集めたＭＴＢＥ抽出物を約１０％ＮａＣｌ溶液１Ｌで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４７０ｇ）し、ろ過し、減圧濃縮し、黄色固体８２７ｇを得た。粗製の固体をヘキサン２．２Ｌ中にてスラリー化し、メカニカルスターラーを備え付けた丸底フラスコに移し替えた。混合物を＜１０℃にて１時間撹拌した後、ろ過し、ヘキサン４ｘ１００ｍＬで洗浄し、乾燥（-30 in. Hg, 常温, 14時間）し、一定質量を得た。この実施例および以下のすべての実施例のための^１Ｈ−ＮＭＲ分析は、VARIAN GEMINI-200MHz分光計で行った。サンプルを指示溶媒中に溶解し、ケミカルシフトを残留溶媒に関連づける。
回収量＝３０９ｇ
淡黄色粉状物１（６８．６％）
¹H-NMR(アセトン−ｄ_６): δ= 4.1 (s, 2H), 7.5-8.1 (m, 4H)

実施例２：（Ｓ）−３−（３−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロパン酸（２）の製造

１２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーおよび滴下漏斗１Ｌを備え付けた。フラスコに窒素を流し、３−（３−クロロフェニル）−３−オキソ−プロパン酸１（２７５．５ｇ）およびジクロロメタン２．２Ｌを充填した。熱電対プローブを反応スラリーに浸し、撹拌した内容物を−２０℃まで冷却した。トリエチルアミン２１１ｍＬを５分にわたって撹拌したスラリーに加え、すべての固体を溶解した。（−）−Ｂ−クロロジイソピノカンフェイルボラン１．０４Ｌ（１．６０Ｍ）のジクロロメタン溶液を滴下漏斗に充填した後、温度−２０〜−２５℃を維持しながら、ゆっくり撹拌しながら加えた。添加完了（約３５分）後、溶液を氷浴温後（２〜３℃）まで昇温し、撹拌した。約４時間撹拌した後、製造過程のＮＭＲ分析は、出発物質１が＜４％であることを示した。

残留出発物質１は、次のようにプロトンＮＭＲにより測定した：反応混合物の０．５ｍＬサンプルを取り出し、水０．５ｍＬおよび３ＭＮａＯＨ溶液０．５ｍＬでクエンチした。クエンチした混合物を撹拌し、層を分離した。水相を２ＭＨＣｌ１ｍＬで酸性化し、酢酸エチル１ｍＬで抽出した。有機相を分離し、ろ過し、ＭｇＳＯ_４のプラグを通してろ過し、窒素を流しながら濃縮した。残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、窒素を流しながら溶媒を留去した。この残渣をアセトン−ｄ_６に溶解し、^１Ｈ−ＮＭＲ（アセトン−ｄ_６）により分析した。

濁った橙色反応混合物に水１．２Ｌ、次いで３ＭＮａＯＨ溶液１．４４Ｌを加えた。混合物を５分間激しく撹拌した後、分液漏斗に移した。層を分離し、塩基性の水相を酢酸エチル１Ｌで洗浄した。水相を濃塩酸３００ｍＬで酸性化し、酢酸エチル（それぞれ１．３Ｌで２回）で抽出した。二つの酸性の酢酸エチル抽出物を集め、約１０％ＮａＣｌ溶液６００ｍＬで洗浄し、ＭｇＳＯ_４１３０ｇで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、黄色油状物３２８ｇを得た。油状物は放置すると結晶化した。得られた固体を酢酸エチル１８０ｍＬ中にてスラリー化し、メカニカルスターラーを備えた２Ｌ三ツ口丸底フラスコに移した。撹拌した酢酸エチル混合物を＜１０℃（氷浴）まで冷却した後、ヘキサン８００ｍＬで希釈した。得られた混合物を氷浴温度にて４時間撹拌した後、ろ過した。集めた固体を４：１ヘキサン：酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Hg -30インチ, 常温, 12時間）し、一定質量を得た。
回収量=白色粉状物２０７．５ｇ
白色粉状物２（７４．５％）
¹H-NMR(アセトン-d₆): δ= 2.7 (d, J=6Hz, 2H), 4.7 (d, J=4Hz, 1H), 5.1-5.2 (m, 1H), 7.2-7.5 (m, 4H).

実施例３：（Ｓ）−（−）−１−（３−クロロフェニル）−１，３−プロパンジオール（３）の製造
１２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、滴下漏斗２Ｌおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに窒素を流し、（Ｓ）−３−（３−クロロフェニル）−３−ヒドロキシプロパン酸２（２０６．７ｇ）およびＴＨＦ８５０ｍＬを充填し、撹拌した溶液を５℃まで（氷浴）冷却した。１Ｍボラン／ＴＨＦ溶液２．１４Ｌを滴下漏斗に充填した後、温度を＜１０℃に維持しながらゆっくり撹拌した。添加完了（約１時間）後、冷却バスを取り除き、溶液を常温にて１時間撹拌した。反応溶液を水６００ｍＬ、次いで３ＭＮａＯＨ溶液８５０ｍＬでゆっくりと注意深くクエンチした。観察される温度を約４０℃まで上昇させながら混合物を１０分間撹拌した後、混合物を分液漏斗に移した。層を分離し、水相を酢酸エチル６００ｍＬで再び抽出した。集めた有機相を約１０％ＮａＣｌ溶液５００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４，３２２ｇ）し、ろ過し、減圧濃縮し、淡黄色油状物１８９．０ｇ（１０１％）を得た。油状物の予備分析は、^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）であった。

油状物を減圧蒸留により精製し、125-155℃／0.15mmHgにおけるフラクションを集めた。
回収量=１８０．９ｇ
無色油状物３（９４．０％）
¹H-NMR (CDCl₃): δ= 2.9-3.1 (m, 2H), 2.5 (bs, 2H), 3.9 (t, J=5Hz, 2H), 4.9(dd, J=7.4, 4.8 Hz, 1H), 7.2-7.4 (m, 4H).

ｅｅ決定のための手順
キラルＨＰＬＣ分析のために、ジオール３を次のようにジアセテートに誘導体化した：
得られたジオール３（５．０ｍｇ，０．０２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２．０ｍＬに溶解した。無水酢酸１５μＬ（０．１５ｍｍｏｌ）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン１３ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を常温にて１５分間撹拌した。反応溶液を１ＭＨＣｌ溶液３ｍＬでクエンチし、より低い有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４に通し、窒素雰囲気下濃縮した。残渣をメタノール１ｍＬに溶解し、キラルＨＰＬＣにより分析した。
驚いたことに、ジオール３のｅｅは、＞９８％であると決定された。
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Pirkle covalent (S,S) Whelk-O 10/100 krom FEC, 250 X 4.6 mm; 移動相= 70:30, メタノール：水, アイソクラティック; 流速= 1.5 mL/分; 注入容積= 10μL 220nmにおけるＵＶ検出
保持時間：Ｓ−ジオール (ジアセテート) = 12.1分, Ｒ−ジオール (ジアセテート) = 8.6分.

実施例４：ジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（４）の製造
１２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、サーモメーターおよび加熱用マントル（heating mantle）を備え付けた。フラスコに窒素を流し、ジエチルホスファイト５５４ｇ、パラホルムアルデヒド１４２ｇ、トルエン２Ｌおよびトリエチルアミン５３ｍＬを充填した。混合物を８５〜９０℃にて２時間撹拌した後、１時間還流した。得られた黄色溶液を４℃まで氷浴中にて冷却し、塩化ｐ−トルエンスルホニル７１８ｇを加えた。冷却器を滴下漏斗と置き換え、温度を＜１０℃に維持し、撹拌しながらトリエチルアミン７５０ｍＬをゆっくり加えた。添加完了（４５分）後、得られた混合物を常温にて１４時間撹拌した。混合物をろ過し、フィルターケーキ（filtercake）をトルエン（２ｘ２５０ｍＬ）で洗浄した。集めたろ液および洗浄物を水（２ｘ１Ｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４，２００ｇ）し、珪藻土（Celite 521, CAS 61790-53-2）に通してろ過し、減圧濃縮した。
回収量=１００４ｇ
濁った黄色油状物４（７７．６％）
¹H-NMR (CDCl₃). Δ= 1.3 (t, J=8H, m, 3H), 2.4(s, 3H), 4.0-4.2 (m, 4H), 7.2 (d, J=8Hz, 2H), 7.8 (d, J=8Hz, 2H).

実施例５：９−（２−ヒドロキシエチル）アデニン（５）の製造
１２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、サーモメーターおよび加熱用マントルを備え付けた。フラスコに窒素を流し、アデニン５０４ｇ、炭酸エチレン３４３ｇ、ＤＭＦ３．７Ｌおよび水酸化ナトリウム７．８０ｇを充填した。撹拌した混合物を加熱還流（還流に達するまで約８０分間、ポット温度＝１４５℃）した後、２時間還流した。加熱用マントルを取り除き、黄色溶液を１００℃以下まで冷却した。次いで得られた混合物を５℃まで氷浴中にて冷却し、トルエン３．８Ｌで希釈した。得られた混合物を＜１０℃にて２時間撹拌した後、ろ過した。集めた固体をトルエン（２ｘ０．５）および冷エタノール１．５Ｌで洗浄した後、乾燥（-30 in. Hg, 50℃, 14時間）し、一定質量を得た。
固体５をＨＰＬＣおよび^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）により分析した。
ＮＰＬＣ条件：
シリカカラム（粒子サイズ，１０ミクロン）（Phenomenex Bondclone）10 C18カラム, 300 X 3.9 mm; 移動相: 溶媒A= ２０ｍＭリン酸カリウム, pH 6.2; 溶媒B= アセトニトリル; 濃度勾配: 0-60%B / 15分,60-0%B / 2分, 0%B / 3分; 270nmにおけるＵＶ検出
保持時間: 生成物= 6.5分, ３−位置異性体（一時的）= 5.6分
回収量=６２４ｇ
淡黄色固体５（９３．３％）
¹H-NMR (DMSO-d₆): δ= 3.6-3.8 (m, 2H), 4.1 (t, J=6Hz, 2H), 5.0 (bs, 1H), 7.2(bs, 2H), 8.05(s, 1H), 8.10(s, 1H).

実施例６：９−（２−ジエチルホスホニルメトキシエチル）アデニン（６）の製造
５Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに窒素を流し、９−（２−ヒドロキシエチル）アデニン５（４６４ｇ）およびＤＭＦ１．４０Ｌを充填した。撹拌したスラリーを氷浴中にて１０℃まで冷却し、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド４３６ｇを一度に加え、それにより温度は２９℃まで上昇した。氷浴を取り除き、わずかに濁った溶液を得ながら混合物を常温にて１時間撹拌した。反応フラスコに滴下漏斗２Ｌを備え付け、撹拌した内容物を５℃まで冷却（氷浴）した。ジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート１１３０ｇをＤＭＦ７００ｍＬ中の溶液として温度を＜１０℃に維持し、撹拌しながら、ゆっくり加えた。添加完了（２時間）後、冷却バスを取り除き、混合物を常温にて１時間撹拌した。ＨＰＬＣを用い、反応の完了を決定した。反応混合物０．０５ｍＬを取り出し、得られた物質を２０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ６．２）１０ｍＬに溶解することにより混合物をサンプリングした。
ＨＰＬＣ条件：
シリカカラム（粒子サイズ，１０ミクロン）（Phenomenex Bondclone）10 C18カラム, 300 X 3.9 mm; 移動相: 溶媒A= ２０ｍＭリン酸カリウム，pH 6.2, 溶媒B= アセトニトリル; 濃度勾配: 0-60%B / 15分, 60-0%B / 2分, 0%B / 3分; 270nmにおけるＵＶ検出; 注入容積= 10μL.
保持時間: 生成物６= 9.2分, 出発物質５= 6.5分

撹拌した混合物を１０℃まで冷却し、８０％酢酸２５０ｍＬをゆっくり加えた。添加完了（約１５分）後、混合物を常温にて３０分間撹拌し、温度を徐々に３０℃まで上昇させた。溶媒を減圧留去（R-152ロータリーエバポレーター, 5mmHg）し、橙色泥状物２１１５ｇを得た。得られた物質を次の工程に精製せずに用いた。

実施例７：９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニン（７）の製造
１２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーを備え付けた。フラスコに粗製の９−（２−ジエチルホスホニルメトキシエチル）アデニン６をアセトニトリル４．０Ｌ中のスラリーとして充填した。混合物を常温にて３０分間撹拌した後、ろ過した。フィルターケーキをアセトニトリル（２ｘ０．５Ｌ）で洗浄し、集めたろ液および洗液を直接次のように用いた。

２２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、サーモメーター、冷却器および加熱用マントルを備え付けた。フラスコに窒素を流し、９−（２−ジエチルホスホニルメトキシエチル）アデニン６溶液（２．５９ｍｏｌ）、クロロトリメチルシラン１．３１５Ｌおよびヨウ化カリウム１．７１９ｋｇを充填した。ＫＩの添加後、３５℃まで温度を徐々に上昇させた。次いで撹拌した混合物を５５℃まで加熱し、５０〜５５℃にて１時間撹拌した。混合物を徐々に３８℃まで冷却しながらさらに３時間撹拌した。ＨＰＬＣを用い、反応の完了を決定した。
ＨＰＬＣ条件：
シリカカラム（粒子サイズ，１０ミクロン）（Phenomenex Bondclone）10 C18, 300 X 3.9 mmカラム; 移動相: 溶媒A = ２０ｍＭリン酸カリウム, pH 6.2, 溶媒B = アセトニトリル; 濃度勾配: 0-60 %B / 15分, 60-0 %B / 2分, 0 %B / 3分; 270nmにおけるＵＶ検出
保持時間: 生成物７= 5.2分, 出発物質６= 9.2分

反応フラスコに、滴下漏斗２Ｌを備え付け、温度を３２〜４４℃まで上昇させながら３．５ＭＮａＯＨ溶液４Ｌをゆっくり加えた。二つの液相系を５ガロンの固定した分液漏斗に移し、層を分離した。塩基性水相を酢酸エチル２Ｌで抽出した後、メカニカルスターラーおよび滴下漏斗１Ｌを備えた１２Ｌ三ツ口フラスコに移した。標準的実験ｐＨメーターにより決定し、ｐＨが３．０となるまで撹拌しながら濃ＨＣｌをゆっくり加えた。得られた黄色溶液を常温にて１２時間撹拌した。沈殿物を形成した。撹拌した混合物を氷浴中にて７℃まで冷却し、ｐＨを３．０に濃ＨＣｌを用いて再調整した。混合物を氷浴温度にて５時間撹拌した後、ろ過した。ろ過に約４時間かかった。集めた固体をアセトンで洗浄し、ろ過漏斗上にて空気乾燥した。

５Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーおよび滴下漏斗２５０ｍＬを備え付けた。フラスコに粗製の固体および１Ｍ水酸化ナトリウム溶液１．２５Ｌを充填した。すべての固体が溶解（１５分）するまで混合物を撹拌した。濃ＨＣｌ溶液をｐＨが３．０になるまで撹拌した溶液にゆっくり加えた。得られた混合物を常温にて４時間撹拌した後、ろ過した。集めた固体を水（２ｘ２５０ｍＬ）およびアセトン２００ｍＬで洗浄し、乾燥（-30 in. Hg, 60℃, 14時間）し、一定質量を得た。
回収量=２９２ｇ
灰白色固体４１．３％
¹H-NMR (D₂O); δ= 3.25 (d, J=8Hz, 2H), 3.70 (t, J=4Hz, 2H), 4.10 (t, J=4Hz, 2H), 4.60 (s, 4H), 7.80 (s, 1H), 7.90 (s, 1H).

実施例８：メタンスルホン酸９−｛２−［２，４−シス−（Ｓ）−（＋）−４−（３−クロロフェニル）−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル］メトキシエチル｝アデニン（９）の製造
実施例８．１：ジクロリデート（８）の形成

２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、滴下漏斗１２５ｍＬおよび加熱用マントルを備え付けた。フラスコに窒素を流し、ＰＭＥＡ７（５０．０ｇ）、ジクロロメタン６５０ｍＬおよびＮ，Ｎ−ジエチルホルムアミド２２．５ｍＬを充填した。塩化オキサリル５８．０ｍＬを滴下漏斗に充填し、撹拌した反応混合物にゆっくり加えた。激しい気体発生が起こり、窒素吸入口を取り除き、気体が逃げるのを促進した。添加完了（１５分）後、滴下漏斗を取り除き、激しく撹拌した混合物を還流温度にて２時間加熱した。溶液はこの工程の間スラリーのままであった。反応混合物をわずかに冷却し、さらに塩化オキサリル１．０ｍＬおよびＮ，Ｎ−ジエチルホルムアミド０．４ｍｌを加えた。Ｎ，Ｎ−ジエチルホルムアミドの添加により気体が激しく発生した。すべての固体が溶解する（さらに２．５時間、総反応時間は約４．５時間であった）まで、得られた混合物を還流温度にて加熱した。反応溶液のＨＰＬＣ分析は、８３領域％にて生成物８を示した。反応をジクロリデートの形成についてモニターした。反応混合物のサンプル（約５０μＬ）を取り出し、トリエチルアミン１滴を含む無水メタノール１ｍＬでクエンチした。得られたメチルホスホネートをＮＰＬＣにより分析した。
ＨＰＬＣ条件：
YMC-Pack R＆D, R-33-5 S-5 120A, 250 X 4.6 mm; 移動相: 溶媒A= ２０ｍＭリン酸カリウム, pH 6.2; 溶媒B= アセトニトリル; 濃度勾配: 10-60%B/ 15分, 60-10%B/ 2分, 10%B/ 3分; 1.4 mL/分; 注入容積= 10μL; 270nmにおけるＵＶ検出
保持時間: ジメチルホスホネート１１= 8.5分, モノメチルホスホネート１２= 5.8分

反応溶液をわずかに冷却し、冷却器をサーモメーター、冷却器およびコレクションフラスコ２５０ｍＬを備えた蒸留ヘッド（distillation head）に置き換えた。反応溶液を加熱還流し、蒸留物２５０ｍＬを集めた。ポット溶液をジクロロメタン２５０ｍＬで希釈し、さらに蒸留物２５０ｍＬを集めた。蒸留ヘッドを取り除き、反応フラスコを窒素雰囲気下に置いた。溶液をジクロロメタン１００ｍＬで希釈し、氷浴温度まで冷却した。反応溶液のＨＰＬＣ分析は８９領域％にて生成物を示した。
ＨＰＬＣ条件：
YMC-Pack R＆D, R-33-5 S-5 120A, 250 X 4.6 mm; 移動相: 溶媒A= ２０ｍＭリン酸カリウム, pH 6.2; 溶媒B= アセトニトリル; 濃度勾配: 10-60%B/ 15分, 60-10%B/ 2分, 10%B/ 3分; 1.4 mL/分; 注入容積= 10μL; 270nmにおけるＵＶ検出
保持時間: 生成物８= 8.5分, 出発物質７= 5.9分

ピリジン１８ｍＬを撹拌した溶液にゆっくりと加えた。添加完了（５分）後、得られた淡橙色溶液を使用するまで（３０分）氷浴温度にて保存した。

実施例８．２：カップリング反応
２Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラーおよび滴下漏斗１Ｌを備え付けた。フラスコに窒素を流し、（Ｓ）−（−）−（３−クロロフェニル）−１，３−プロパンジオール３（３４．１ｇ）をジクロロメタン５００ｍＬおよびトリエチルアミン１２５ｍｌの溶液として充填した。熱電対プローブを反応溶液に浸し、撹拌した内容物を−７１℃（ドライアイス／イソプロパノール）まで冷却した。ジクロリデート溶液８を滴下漏斗に充填した後、温度を＜−６７℃に維持し、撹拌しながらゆっくり加えた。添加完了（１．２５時間）後、冷却バスを取り除き、撹拌した混合物を０℃まで３０分にわたり昇温した。反応混合物を水５５０ｍＬで洗浄し、層を分離した。ジクロロメタン相を酢酸エチル５００ｍＬで希釈し、５％ＮａＣｌ溶液６００ｍＬで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ_４，５０ｇ）し、珪藻土（Celite 521）に通してろ過し、減圧濃縮し、暗赤色泥状物１０８ｇを得た。サンプルをメタノールに溶解した。
ＨＰＬＣ条件：
YMC-Pack R＆D, R-33-5 S-5 120A, 250 X 4.6 mm; 移動相: 溶媒A = ２０ｍＭリン酸カリウム, pH 6.2; 溶媒B = アセトニトリル; 濃度勾配: 10-60%B/ 15分, 60-10%B/ 2分, 10%B/ 3分; 1.4 mL/分; 注入容積= 10μL; 270nmにおけるＵＶ検出
保持時間: シス１３= 12.5分, トランス１４= 13.0分

得られた物質をエタノール５００ｍＬに溶解し、マグネティックスターラー、冷却器および加熱用マントルを備えた２Ｌ丸底フラスコに移した。酢酸５５ｍＬを加え、赤色溶液を還流温度にて８時間加熱した。ＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。サンプルをメタノールに溶解した。
ＨＰＬＣ条件：
YMC-Pack R＆D, R-33-5 S-5 120A, 250 X 4.6 mm; 移動相: 溶媒A = ２０ｍＭリン酸カリウム, pH 6.2; 溶媒B = アセトニトリル; 濃度勾配: 10-60%B/ 15分, 60-10%B/ 2分, 10%B/ 3分; 1.4 mL/分; 注入容積= 10μL; 270nmにおけるＵＶ検出. 6.
保持時間: シス１５= 9.5分, トランス１６= 9.8分

実施例８．３：メタンスルホン酸９−｛２−［２，４−シス−（Ｓ）−（＋）−４−（３−クロロフェニル）−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル］メトキシエチル｝アデニン（９）の結晶化
メタンスルホン酸２１．５ｍＬを加え、１５分後、沈殿物を形成した。混合物をエタノール４００ｍＬで希釈し、すべての固体が溶解する（ポット温度＝７０℃）まで加熱した。溶液を撹拌しながら冷却し、沈殿物を４６℃にて形成した。得られた混合物を常温まで冷却しながら２時間撹拌した後、氷浴温度にて２．５時間撹拌した。混合物をろ過し、集めた固体をエタノール（２ｘ１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（-30 in. Hg, 55℃, 14時間）し、一定質量を得た。
回収量＝白色粉状物９（４９．４ｇ，５１．９％）
得られた固体は６．５領域％のトランスジアステレオマーを含んだ。
キラルＨＰＬＣ: Pirkle covalent (S,S) Whelk-O 1 10/100 krom FEC 250 X 4.6 mm; 移動相= 55:45, メタノール：０．１％酢酸／水; アイソクラティック; 1.0 mL/分; 注入容積= 10μL; 260nmにおけるＵＶ検出; サンプル調製=水中2.0mg/mL. 保持時間: シス−（Ｒ）５= 24.6分, トランス−（Ｒ）６= 27.5分, シス−（Ｓ）７= 18.0分
¹H-NMR (D₂O) を用い、成分の構造を確かめた。

実施例８．４：メタンスルホン酸９−｛２−［２，４−シス−（Ｓ）−（＋）−４−（３−クロロフェニル）−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル］メトキシエチル｝アデニン（９）の再結晶
３Ｌ三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、加熱用マントルおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに２回分の粗製のメシレート塩９およびエタノール１．４Ｌを充填した。すべての固体が溶解するまで（約１０分）、撹拌した混合物を加熱還流（ポット温度は７８℃）した。撹拌した混合物を徐々に常温まで１．５時間にわたり冷却（沈殿物は５６℃にて形成した）した。混合物を常温にてさらに２時間撹拌した後、ろ過した。集めた固体をエタノール（２ｘ１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（-30 in Hg, 65℃, 60時間）し、一定質量を得た。
色: 灰白色粒状固体
純度= ９７％（ＨＰＬＣ）
光学純度（キラルＨＰＬＣ）＞９９．５％
M.P.(℃): 186.5-188
比旋光度 (MeOH, 25℃, 589 nm): +16.429
組成: C, 41.58; H, 4.56; N, 13.37 [理論値: C, 41.50; H, 4.53; N, 13.35]
¹H NMR (D₂O): δ= 1.30-1.60 (m, 1H), 1.80-1.95 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 3.70-3.90 (m, 4H),4.10-4.50 (m, 2H), 4.60 (s, 3H), 5.15-5.40 (m, 1H), 6.70-6.80 (m, 2H), 7.00-7.10 (m, 2H), 8.00 (s, 1H), 8.10 (s, 1H).

実施例９：塩交換を経由した塩酸塩の形成
本発明において、ホスホン酸系プロドラッグのシュウ酸塩もまた形成される。このプロドラッグの塩形態は製薬的に許容される他の塩と交換することができる。シュウ酸塩は、より高いｐＫａ、酸解離定数を有する酸を含む溶液に溶解する。

三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、加熱用マントルおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに粗製のシュウ酸塩およびエタノール（重量で５〜１０％溶液）を充填した。すべての固体が溶解するまで、撹拌した混合物を加熱還流（ポット温度は７８℃）した。溶液をＨＣｌにより酸性にし、撹拌した混合物を徐々に常温まで冷却した（温度を冷却すると沈殿物を形成した）。混合物を常温にて撹拌した後、ろ過した。集めた塩酸塩からなる固体をエタノールで洗浄し、バキュームオーブン中（オーブン温度＝６５℃）にて乾燥し、一定質量を得た。

実施例１０：塩交換を経由した硫酸塩の形成
三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、加熱用マントルおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに粗製のメシレート塩９およびエタノール（重量で５〜１０％溶液）を充填した。すべての固体が溶解するまで撹拌した混合物を加熱還流（ポット温度は７８℃）した。溶液を硫酸で酸性にし、撹拌した混合物を徐々に常温まで冷却した（温度を下げると沈殿物を形成した）。混合物を常温にて撹拌した後、所望の生成物をろ過した。集めた硫酸塩からなる固体をエタノールで洗浄し、バキュームオーブン中（オーブン温度＝６５℃）にて乾燥し、一定質量を得た。

実施例１１：遊離塩基反応を経由した硫酸塩の形成
三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、加熱用マントルおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに粗製のメシレート塩９および炭酸水素ナトリウム溶液を充填した。すべての固体が溶解するまで撹拌した混合物を加熱した。溶液を硫酸で酸性にし、撹拌した混合物を徐々に常温まで冷却した（温度を下げると沈殿を形成した）。混合物を常温にて撹拌した後、ろ過した。集めた硫酸塩からなる固体をエタノールで洗浄し、バキュームオーブン中（オーブン温度＝６５℃）にて乾燥し、一定質量を得た。

実施例１２：アニオン性樹脂反応を経由したマレイン酸塩の形成
三ツ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、冷却器、加熱用マントルおよびサーモメーターを備え付けた。フラスコに粗製のメシレート塩９を充填した。すべての固体が溶解するまで撹拌した混合物を加熱した。メシレート塩９を含む混合物をアニオン性樹脂に通した。式１の化合物の遊離塩基を含む得られた溶液をマレイン酸で酸性にし、撹拌した混合物を徐々に常温まで冷却した（温度を下げると沈殿物を形成した）。混合物を常温にて撹拌した後、ろ過した。集めたマレイン酸塩からなる固体をエタノールで洗浄し、バキュームオーブン中（オーブン温度＝６５℃）にて乾燥し、一定質量を得た。

Claims

（ａ）キラル１−アリールプロパン−１，３−ジオール（ここに、アリールはフルオロ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである）をＭＰＯＣｌ_２またはそのＮ−６置換アナログとカップリングさせることを特徴とする、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖはフルオロ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される化合物を製造する方法。
シス異性体が少なくとも５０％のジアステレオマー過剰率を有する、請求項１記載の方法。
酸を加えて式Ｉの化合物の酸付加塩を形成させる工程をさらに含む、請求項２記載の方法。
上記酸が塩酸、臭化水素酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、硝酸、リン酸、コハク酸、硫酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項３記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項３記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸である、請求項５記載の方法。
上記酸付加塩を結晶化させる工程をさらに含む、請求項３記載の方法。
上記酸付加塩を結晶化させるための溶媒がメタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、トルエンおよびそれらの混液からなる群から選択される、請求項７記載の方法。
（ａ）式Ｉの化合物の第一の酸付加塩を該第一の酸より高い酸解離定数を有する第二の酸と反応させる工程、および
（ｂ）式Ｉの化合物の所望の第二の酸付加塩を結晶化させる工程
をさらに含む、請求項３記載の方法。
（ａ）式Ｉの化合物の第一の酸付加塩を中和する工程、
（ｂ）式Ｉの化合物の遊離塩基を得る工程、
（ｃ）製薬的に許容される酸を加える工程、および
（ｄ）式Ｉの化合物の所望の第二の酸付加塩を結晶化させる工程
をさらに含む、請求項３記載の方法。
（ａ）アニオン性樹脂を用い、式Ｉの化合物の第一の酸付加塩の遊離塩基を得る工程、
（ｂ）製薬的に許容される酸を加える工程、および
（ｃ）式Ｉの化合物の所望の第二の酸付加塩を結晶化させる工程
をさらに含む、請求項３記載の方法。
カップリング工程のための反応溶液が−５０℃またはそれ以下である、請求項１記載の方法。
上記反応溶液が−７０℃またはそれ以下である、請求項１２記載の方法。
上記ＭＰＯＣｌ_２を上記キラル１−フェニルプロパン−１，３−ジオールに加える、請求項１記載の方法。
−５０℃またはそれ以下の反応溶液温度にて上記ＭＰＯＣｌ_２を上記キラル１−フェニルプロパン−１，３−ジオールに加える、請求項１記載の方法。
塩基を反応溶液に加える工程をさらに含む、請求項１記載の方法。
ＭＰＯＣｌ_２がＮ−６置換基を有し、ジアルキルアミノメチレンイミンを形成する、請求項１記載の方法。
ジクロリデートを形成させる反応の一部として、上記Ｎ−６置換基を生成させる、請求項１７記載の方法。
上記ジアルキルアミノメチレンイミンがジメチルアミノメチレンイミン、ジエチルアミノメチレンイミン、ジプロピルアミノメチレンイミン、ジブチルアミノメチレンイミン、Ｎ−ピペリジノメチレンイミンおよびＮ−モルホリノメチレンイミンからなる群から選択される、請求項１７記載の方法。
式Ｉの化合物が式ＩＩ：

で示される立体化学を有する、請求項１記載の方法。
カップリング工程のための温度が−５０℃またはそれ以下である、請求項２０記載の方法。
（ａ）キラル１−（３−クロロフェニル）プロパン−１，３−ジオールをＭＰＯＣｌ_２またはそのＮ−６置換アナログとカップリングさせることを特徴とする、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは３−クロロフェニルである］
で示される化合物を製造する方法。
シス異性体が少なくとも５０％のジアステレオマー過剰率を有する、請求項２２記載の方法。
酸を加えて式Ｉの酸付加塩を形成させる工程をさらに含む、請求項２３記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項２４記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸である、請求項２５記載の方法。
カップリング工程のための反応溶液が−５０℃またはそれ以下である、請求項２２記載の方法。
上記反応溶液が−７０℃またはそれ以下である、請求項２７記載の方法。
上記ＭＰＯＣｌ_２を上記キラル１−（３−クロロフェニル）プロパン−１，３−ジオールに加える、請求項２２記載の方法。
式Ｉの化合物が式ＩＩ：

で示される立体化学を有する、請求項２２記載の方法。
カップリング工程のための温度が−５０℃またはそれ以下である、請求項３０記載の方法。
酸を加えて式ＩＩの化合物の酸付加塩を形成させる工程をさらに含む、請求項３０記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項３２記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸である、請求項３３記載の方法。
上記酸付加塩を、メタノール、エタノール、イソプロパノール、トルエン、アセトンおよびそれらの混液からなる群から選択される溶媒から結晶化させる工程をさらに含む、請求項２４記載の方法。
ＭＰＯＣｌ_２がＮ−６置換基を有し、ジアルキルアミノメチレンイミンを形成する、請求項２２記載の方法。
ジクロリデートを形成させる反応の一部として、Ｎ−６置換基を生成させる、請求項３６記載の方法。
ジアルキルアミノメチレンイミンがジメチルアミノメチレンイミン、ジエチルアミノメチレンイミン、ジプロピルアミノメチレンイミン、ジブチルアミノメチレンイミン、Ｎ−ピペリジノメチレンイミンおよびＮ−モルホリノメチレンイミンからなる群から選択される、請求項３６記載の方法。
（ａ）キラル１−（２−ブロモフェニル）プロパン−１，３−ジオールをＭＰＯＣｌ_２またはそのＮ−６置換アナログとカップリングさせることを特徴とする、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは２−ブロモフェニルである］
で示される化合物を製造する方法。
シス異性体が少なくとも５０％のジアステレオマー過剰率を有する、請求項３９記載の方法。
酸を加えて式Ｉの酸付加塩を形成させる工程をさらに含む、請求項４０記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項４１記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸である、請求項４２記載の方法。
カップリング工程のための反応溶液が−５０℃またはそれ以下である、請求項３９記載の方法。
上記反応溶液が−７０℃またはそれ以下である、請求項４４記載の方法。
上記ＭＰＯＣｌ_２を上記キラル１−（２−ブロモフェニル）プロパン−１，３−ジオールに加える、請求項３９記載の方法。
式Ｉの化合物が式ＩＩ：

で示される立体化学を有する、請求項３９記載の方法。
カップリング工程のための温度が−５０℃またはそれ以下である、請求項４０記載の方法。
酸を加えて式ＩＩの化合物の酸付加塩を形成させる工程をさらに含む、請求項４７記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項４９記載の方法。
上記酸がメタンスルホン酸である、請求項５０記載の方法。
上記酸付加塩を、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、トルエンおよびそれらの混液からなる群から選択される溶媒から結晶化させる工程をさらに含む、請求項４１記載の方法。
ＭＰＯＣｌ_２がＮ−６置換基を有し、ジアルキルアミノメチレンイミンを形成する、請求項３９記載の方法。
ジクロリデートを形成させる反応の一部として、Ｎ−６置換基を生成させる、請求項５３記載の方法。
ジアルキルアミノメチレンイミンがジメチルアミノメチレンイミン、ジエチルアミノメチレンイミン、ジプロピルアミノメチレンイミン、ジブチルアミノメチレンイミン、Ｎ−ピペリジノメチレンイミンおよびＮ−モルホリノメチレンイミンからなる群から選択される、請求項５３記載の方法。
（ａ）上記式Ｉの化合物の第一の酸付加塩を第一の酸より高い酸解離定数を有する第二の酸と反応させ、そして
（ｂ）所望の化合物の第二の酸塩を結晶化させることを特徴とする、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖはフルオロ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される化合物の酸付加塩を変換する方法。
上記第二の酸が塩酸、臭化水素酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、硝酸、リン酸、コハク酸、硫酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項５６記載の方法。
上記第二の酸がメタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項５６記載の方法。
上記第二の酸がメタンスルホン酸である、請求項５８記載の方法。
（ａ）上記式Ｉの化合物の第一の酸付加塩を中和し、
（ｂ）式Ｉの化合物の遊離塩基を得、
（ｃ）製薬的に許容される酸を加え、そして
（ｄ）所望の化合物の第二の酸付加塩を結晶化させることを特徴とする、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は、９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖは、フルオロ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される化合物の第一の酸付加塩を変換する方法。
酸が上記製薬的に許容される塩酸、臭化水素酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、硝酸、リン酸、コハク酸、硫酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項６０記載の方法。
（ａ）アニオン性樹脂を用い、式Ｉの化合物の遊離塩基を得、
（ｂ）製薬的に許容される酸を加え、そして
（ｃ）式Ｉの化合物の所望の第二の酸付加塩を結晶化させることを特徴とする、式Ｉ：

［式中、
ＭおよびＶは、互いにシスにあり、
ＭＰＯ_３Ｈ_２は９−（２−ホスホニルメトキシエチル）アデニンおよび（Ｒ）−９−（２−ホスホニルメトキシプロピル）アデニンからなる群から選択されるホスホン酸であり、
Ｖはフルオロ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜２つの置換基で置換されていることもあるフェニルである］
で示される化合物の第一の酸付加塩を変換する方法。
上記製薬的に許容される酸が塩酸、臭化水素酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、硝酸、リン酸、コハク酸、硫酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項６２記載の方法。