JP3863129B2 - モナスクスプルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体、および血圧低下活性を有する発酵産物を調製する際のその使用 - Google Patents
モナスクスプルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体、および血圧低下活性を有する発酵産物を調製する際のその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3863129B2 JP3863129B2 JP2003288306A JP2003288306A JP3863129B2 JP 3863129 B2 JP3863129 B2 JP 3863129B2 JP 2003288306 A JP2003288306 A JP 2003288306A JP 2003288306 A JP2003288306 A JP 2003288306A JP 3863129 B2 JP3863129 B2 JP 3863129B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fermentation product
- citrinin
- monascus
- ppm
- blood pressure
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims description 57
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims description 57
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 title claims description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims description 26
- 244000113306 Monascus purpureus Species 0.000 title claims description 25
- 235000002322 Monascus purpureus Nutrition 0.000 title claims description 25
- 229940057059 monascus purpureus Drugs 0.000 title claims description 24
- CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N antimycin Chemical compound OC1=C(C(O)=O)C(=O)C(C)=C2[C@H](C)[C@@H](C)OC=C21 CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N 0.000 claims description 37
- CQIUKKVOEOPUDV-UHFFFAOYSA-N citrinine Natural products OC1=C(C(O)=O)C(=O)C(C)=C2C(C)C(C)OC=C21 CQIUKKVOEOPUDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 claims description 32
- 241000228347 Monascus <ascomycete fungus> Species 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 17
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000002778 food additive Substances 0.000 claims description 11
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims description 10
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 9
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 41
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 4
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 3
- 229940127088 antihypertensive drug Drugs 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 2
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-O NADP(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-O 0.000 description 1
- 240000000571 Nopalea cochenillifera Species 0.000 description 1
- 235000007189 Oryza longistaminata Nutrition 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- HWXBTNAVRSUOJR-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxyglutaric acid Natural products OC(=O)C(O)CCC(O)=O HWXBTNAVRSUOJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009533 alpha-ketoglutaric acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002921 anti-spasmodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N cyclopentene-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CCCC1 PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 108010055793 gabase Proteins 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002636 mycotoxin Substances 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 description 1
- 229940100486 rice starch Drugs 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体；および血圧低下活性を有する発酵産物を調製する際のその使用を提供する。
近年、心血管疾患（例えば、高血圧症）は、主要な死亡原因の１つになっており、そしてこれらの疾患を有する集団は、毎年増加している。高血圧症は、慢性疾患であるので、患者は、抗高血圧薬を長期にわたって取らなければならない。日本の統計データに従って、抗高血圧薬の市場は、年間５００億円で安定し、そして、血圧制御に関する健康食品の市場は、１９９７年の１４億円から、１９９９年の７２億円へと増加した。従って、血圧低下活性を有する薬物および食品の需要は、世界中で毎年増加している。
歴史的に、モナスクス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ）属は、伝統的な中国の医薬および食品の調製の際に広く使用され、そして中国において食品添加物として使用されてきた。特許文献１は、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属およびモナスクス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ）属由来の代謝産物が、高血圧症の症候群を改善し得ることを開示している。Ｋｏｈａｍａら（非特許文献１）は、発酵液体中のγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）およびアセチルコリン（Ａｃｈ）が、血圧を低下させる効果を有することを見出した。特許文献２は、血圧低下活性を有する物質を回収するための方法を開示する。特許文献３は、血圧低下活性を有する物質の生成を増加させる際の、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）についての改善された培養培地を提供する。特許文献４は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）から調製された、血圧低下活性を有する食品（これは、ＧＡＢＡおよびグルコサミンを含む）を開示する。特許文献５は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）を使用して、レッドライス（ｒｅｄ ｒｉｃｅ）を発酵することによって調製される、一酸化窒素供与組成物（これは、血管拡張および血圧低下に対して、効果を有する）を開示する。
Ｂｌａｎｃら（非特許文献２）は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）が、シトリニン（ｃｉｔｒｉｎｉｎ）と称される真菌毒素を生成することを見出しており、このことが、モナスクス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ）産物の安全性に対するかなりの注意を喚起した。特許文献６は、赤色色素の生成において、シトリニンの量を減少させる（１ｐｐｍ未満）ための変異方法を開示している。しかし、血圧低下活性は、この文献には開示されなかった。
モナスクス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ）属の微生物は、血圧低下のための物質を生成するために広く使用されているが、その産物は、多量のシトリニンを含有する。従って、発酵産物の安全性については、関心が持たれている。
特開昭６１−１９７５２４号 特開昭６２−２９８５９８号 特開平３−０９００３１号 特開２０００−２７９１６３号 ＷＯ ０１／３１０４８ Ａ１ 特開平７−２７４９７８号 Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ、３５、（１９８７）、２４８４−２４８９ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｏｒｂｉｏｌｏｇｙ；２７、（１９９５）、２０１−２１３
本発明の課題は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の新規変異体を使用して、少量のシトリニンを含有する、血圧低下活性を有する発酵産物を生成することである。
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体を提供し、この変異体は、コメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含む培地中で培養した場合に、１．０ｐｐｍ未満の量のシトリニンと共に、０．０３ｍｇ／ｍｌに達するＧＡＢＡ濃度で発酵産物を生成する。
１つの実施形態において、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） ＣＣＲＣ ３１４９９の変異体が提供される。
１つの実施形態において、アメリカンタイプカルチャーコレクションに受託番号ＰＴＡ−４４８６で寄託されたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２と同一の特徴を有するか、またはアメリカンタイプカルチャーコレクションに受託番号ＰＴＡ−４４８５で寄託されたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０１０３３と同一の特徴を有する変異体が提供される。
１つの実施形態において、アメリカンタイプカルチャーコレクションに受託番号ＰＴＡ−４４８６で寄託されたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２である変異体が提供される。
１つの実施形態において、アメリカンタイプカルチャーコレクションに受託番号ＰＴＡ−４４８５で寄託されたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０１０３３である変異体が提供される。
別の局面において、本発明は、発酵産物を生成するための方法を提供し、この方法は、上記変異体を適切な条件下で培養することによって特徴付けられ、この発酵産物は、ＧＡＢＡを含み、そしてこの発酵産物に含まれるシトリニンの量は、１．０ｐｐｍ未満である。
１つの実施形態において、上記発酵産物が、血圧低下活性を有する方法が提供される。
１つの実施形態において、上記変異体が、固体培地または液体培地において培養される方法が提供される。
１つの実施形態において、上記培地のｐＨ値が、３〜９の間である方法が提供される。
１つの実施形態において、上記培地のｐＨ値が、５〜７の間である方法が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物中のシトリニンの量が、０．５ｐｐｍ未満である方法が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物中のシトリニンの量が、０．１５ｐｐｍ未満である方法が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物が、薬学的組成物の活性成分または食品添加物として使用され得る方法が提供される。
１つの実施形態において、上記方法は、血圧低下活性を有する前記成分を精製して、精製された成分を得る精製工程をさらに包含する。
別の局面において、本発明は、上記変異体によって生成される発酵産物によって調製され、該発酵産物中のシトリニンの量が、１．０ｐｐｍ未満である、薬学的組成物を提供する。
１つの実施形態において、血圧を低下させる際の使用のための薬学的組成物が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物中のシトリニンの量が、０．５ｐｐｍ未満である薬学的組成物が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物中のシトリニンの量が、０．１５ｐｐｍ未満である薬学的組成物が提供される。
１つの実施形態において、上記方法によって生成される発酵産物によって調製される薬学的組成物が提供される。
１つの実施形態において、さらに精製された発酵産物により調製される薬学的組成物が提供される。
別の局面において、本発明は、上記変異体によって生成される発酵産物によって調製される食品添加物を提供し、この発酵産物中のシトリニンの量が、１．０ｐｐｍ未満である、食品添加物。
１つの実施形態において、血圧低下活性を有する食品添加物が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物中のシトリニンの量が、０．５ｐｐｍ未満である食品添加物が提供される。
１つの実施形態において、上記発酵産物中のシトリニンの量が、０．１５ｐｐｍ未満である食品添加物が提供される。
１つの実施形態において、上記方法によって生成される発酵産物によって調製される食品添加物が提供される。
１つの実施形態において、さらに精製された発酵産物により調製される食品添加物が提供される。
（発明の要旨）
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の新規変異体を提供し、この変異体は、任意のさらなる処理工程なしに、安価な天然原材料を含む固体または液体の培地中で、血圧低下活性を有する発酵産物を生成し、そしてこの産物は、少量のシトリニンを含有する。
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の新規変異体を提供し、この変異体は、任意のさらなる処理工程なしに、安価な天然原材料を含む固体または液体の培地中で、血圧低下活性を有する発酵産物を生成し、そしてこの産物は、少量のシトリニンを含有する。
本発明はまた、本発明の新規変異体を使用することによって、血圧低下活性を有する発酵産物を生成するための方法を提供する。
本発明はさらに、本発明の新規変異体により生成される発酵産物によって調製される、薬学的組成物および食品添加物を提供する。
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体に関し、この変異体は、非常に少量のシトリニンと共に、血圧低下活性を有する発酵産物の調製において有用である。
本発明はまた、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体を使用して、血圧低下活性を有する発酵産物を調製するためのプロセス、および血圧を低下させる際のこの発酵産物の使用を提供する。
本発明によれば、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の新規変異体を使用して、少量のシトリニンを含有する、血圧低下活性を有する発酵産物を生成する方法が提供される。
（発明の詳細な説明）
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）を変異させ、そしてそれらをスクリーニングすることによって得られたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体を提供する。この変異体は、６０ｇ／ｌのコメ粉末、３０ｇ／ｌのダイズ粉末およびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含む培養培地中でインキュベートされ、発酵産物中のＧＡＢＡの量が０．０３ｍｇ／ｍｌまでの場合に、シトリニンの量が１ｐｐｍ未満、好ましくは０．５ｐｐｍ未満、そして最も好ましくは０．１５ｐｐｍ未満である。
本発明は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）を変異させ、そしてそれらをスクリーニングすることによって得られたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体を提供する。この変異体は、６０ｇ／ｌのコメ粉末、３０ｇ／ｌのダイズ粉末およびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含む培養培地中でインキュベートされ、発酵産物中のＧＡＢＡの量が０．０３ｍｇ／ｍｌまでの場合に、シトリニンの量が１ｐｐｍ未満、好ましくは０．５ｐｐｍ未満、そして最も好ましくは０．１５ｐｐｍ未満である。
本発明によれば、全ての既知のＧＡＢＡ生成モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）株が、以下の変異体を調製するための親株として使用され得る：例えば、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） ＣＣＲＣ ３１４９７（ＡＴＣＣ １６３７５、ＣＢＳ ２８０．３４およびＩＦＯ ４４８９とも称される）、ＣＣＲＣ ３１４９８（ＡＴＣＣ １６３５８、ＣＢＳ ２８１．３４およびＩＦＯ ４４８６とも称される）、ＣＣＲＣ ３１４９９（モナスクス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ） ａｎｋａ、ＡＴＣＣ １６３６０、ＣＢＳ ２８３．３４、ＩＦＯ ４４７８およびＫＦＣＣ １１８３２とも称される）、ＣＣＲＣ ３１５０１（ＡＴＣＣ １６３６２、ＣＢＳ ２８５．３４およびＩＦＯ ４４８５とも称される）、ＣＣＲＣ ３１５０４ （ＡＴＣＣ １６３６７、ＣＢＳ ２８８．３４およびＩＦＯ ４４８４とも称される）、ＣＣＲＣ ３１５４１（ＡＴＣＣ １６３７９およびＩＦＯ ５９６５とも称される）またはＣＣＲＣ ３１５４２（ＡＴＣＣ １６３６５、ＣＢＳ １０９．０７およびＩＦＯ ４１５３とも称される）。これらは、全て、Ｆｏｏｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＦＩＲＤＩ）、Ｈｓｉｎ−Ｃｈｕ、Ｔａｉｗａｎから入手可能である。
本発明によれば、「変異体」とは、遺伝子組成が、その親株と比較して、少なくとも１ヌクレオチド異なる株をいい、そしてこの変異体ヌクレオチド配列は、細胞の生理学を変化させ得る。本発明の変異体は、親株のランダム変異誘発（例えば、化学的変異原、トランスポゾンもしくは照射によるか、または親株の遺伝子のヌクレオチド配列の１以上のヌクレオチドを、置換、欠失もしくは挿入するための組換え核酸技術を使用する）を含む、多数の方法によって生成され得る（Ｓａｍｂｒｏｏｋ、Ｊ．Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ、Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ Ｎ．Ｙ．；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｒ．Ｍ．ら（１９９５）、Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ｎ．Ｙ．）。次いで、親株よりも、生成されるＧＡＢＡの量がより高く、かつ生成されるシトリニンがより低い変異体を、スクリーニングおよび単離し得る。
本発明の好ましい実施形態によれば、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体は、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２およびＭ０１０３３と同一の特性を有する。モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）株Ｍ０２０およびＭ０１０３３は、Ｆｏｏｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｔａｉｗａｎによって、２００２年２月２０日に、それぞれ、受託番号ＣＣＲＣ ９３００５２およびＣＣＲＣ９３００５３で寄託され、そしてまた、ブダペスト条約に従って、２００２年６月２１日に、それぞれ、受託番号ＰＴＡ−４４８６およびＰＴＡ−４４８５でアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ、１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ ２０１１０−２２０９、ＵＳＡ）に寄託された。
本発明によれば、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体を使用することによる、発酵産物の生成のための方法は、固体または液体の培養培地における発酵によって、実行され得る。
本発明によれば、全ての公知の炭素供給源および窒素供給源が、培養培地に添加され得る。天然材料が、本発明の好ましい実施形態であり、ここで、炭素供給源としては、コメ粉末、トウモロコシデンプン、コメデンプン、コムギデンプン、グルコース、マルトース、スクロース、グリセロールおよびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されず；そして窒素供給源としては、ダイズ粉末、ダイズ胚乳、消化胚乳、酵母抽出物、コーンスティープリカー、グルタミン酸、塩化アンモニウム、硝酸カリウム、およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の好ましい生成方法によれば、培養培地のｐＨ値は、３〜９であり、好ましくは５〜７である。
本発明によれば、この変異体によって生成される発酵産物は、血圧低下活性を有する物質（例えば、ＧＡＢＡ、グルコサミンおよびアセチルコリン）を含む。ＧＡＢＡは、中枢神経系において神経伝達を阻害する主な物質であり、関連のレセプターとしては、ＧＡＢＡＡおよびＧＡＢＡＢが挙げられる。動物研究において、ＧＡＢＡＡの活性化は、血圧低下活性、鎮痙活性および抗不安活性の生理学的現象に関連することが見出された。また、ＧＡＢＡが高血圧症を処置する活性を有する場合、多くの抗高血圧薬の血圧低下活性は、ＧＡＢＡの量を制御することによって達成される。従って、ＧＡＢＡの量は、血圧低下活性の重要な指標である。
本発明によれば、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）によって生成される発酵産物中のシトリニンの量は、１ｐｐｍ未満、好ましくは０．５ｐｐｍ未満、そして最も好ましくは０．１５ｐｐｍ未満である。
本発明によれば、血圧低下活性を有する発酵産物は、薬学的組成物の活性成分または食品添加物として直接使用され得る。発酵産物中の血圧低下活性を有する物質は、種々の従来技術（例えば、Ｋｏｈａｍａら（Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ、３５、（１９８７）、２４８４−２４８９）およびＪＰ ６２２９８５９８によって開示される精製方法および抽出方法）によってさらに精製され得る。
以下の実施例は、例示のために使用され、本発明を限定するためではない。
（一般的分析方法）
（１）ＧＡＢＡの定量的分析
この株の発酵液０．６ｍｌと０．６ｍｌ ＬａＣｌ３との混合物を、湯浴中にて６０℃で３０分間インキュベートした。この混合物を遠心分離し、そして０．１ｍｌの上清を、水８５０μｌ中の５０μｌのＫＯＨ（１Ｍ）と５分間反応させた。この反応産物を遠心分離し、そして上清を保存した。
（１）ＧＡＢＡの定量的分析
この株の発酵液０．６ｍｌと０．６ｍｌ ＬａＣｌ３との混合物を、湯浴中にて６０℃で３０分間インキュベートした。この混合物を遠心分離し、そして０．１ｍｌの上清を、水８５０μｌ中の５０μｌのＫＯＨ（１Ｍ）と５分間反応させた。この反応産物を遠心分離し、そして上清を保存した。
保存した上清サンプル（５５０μｌ）を、１５０μｌのＮＡＤＰ（４ｍＭ）、２００μｌのリン酸緩衝溶液（ｐＨ８．６）および５０μｌのＧＡＢＡＳＥ（２単位／ｍｌ）と混合した。混合サンプルのＯＤ３４０の吸光度を、分光光度計で直ぐに測定し、そして記録した。この混合物に、５０μｌのα−ケトグルタル酸を添加して、６０分間反応させ、ＯＤ３４０の吸光度を再び測定した。反応の前および後で測定した２つのＯＤ３４０値間の差異を計算した。この差異を、ＧＡＢＡ標準値と比較して、発酵液体サンプル中のＧＡＢＡの濃度を計算した。
（２）シトリニンの定量的分析
以下のＨＰＬＣ分析手順を使用して、この株の発酵液中のシトリニンの量を決定した。７ｍｌの発酵液を、３．５のｐＨに調整し、次いで１時間インキュベートした。３ｍｌの酢酸エチルをこの液体に添加し、そして３０分後に、酢酸エチル層を回収した。添加工程および酢酸エチル回収工程を、２回繰り返し、次いで、回収した溶液を乾燥した。
以下のＨＰＬＣ分析手順を使用して、この株の発酵液中のシトリニンの量を決定した。７ｍｌの発酵液を、３．５のｐＨに調整し、次いで１時間インキュベートした。３ｍｌの酢酸エチルをこの液体に添加し、そして３０分後に、酢酸エチル層を回収した。添加工程および酢酸エチル回収工程を、２回繰り返し、次いで、回収した溶液を乾燥した。
乾燥サンプルを、１ｍｌのメタノール中に溶解し、次いで、０．２μｍの孔サイズを有する膜を通過させた。１０μｌの濾液を、以下の条件下でＨＰＬＣ分析について適用した：
シトリニン濃度を、標準（Ｓｉｇｍａ）の値と、検出したサンプルの値を比較することによって計算した。
（本発明の変異体の変異誘発およびスクリーニング）
モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）株ＣＣＲＣ３１４９９を、ＰＤＡ（ジャガイモ由来の浸剤（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）２０％、Ｂａｃｔｏ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ ２％および寒天２％）の傾斜培地上に接種し、そして３０℃で７日間インキュベートした。この胞子を、滅菌水で洗浄して除いた。この収集した胞子懸濁物（１ｍｌ当たり、１×１０７を超える胞子を含む）に、ＵＶ光を２分間照射した。連続希釈後、希釈した胞子懸濁サンプルを、ＰＤＡプレート上に広げ、そして３０℃で２〜３日インキュベートした。次いで、コロニーを、コメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含む培地中に接種して、変異体の安定性を試験し、そして生成されたＧＡＢＡおよびシトリニンの量を決定した。
モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）株ＣＣＲＣ３１４９９を、ＰＤＡ（ジャガイモ由来の浸剤（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）２０％、Ｂａｃｔｏ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ ２％および寒天２％）の傾斜培地上に接種し、そして３０℃で７日間インキュベートした。この胞子を、滅菌水で洗浄して除いた。この収集した胞子懸濁物（１ｍｌ当たり、１×１０７を超える胞子を含む）に、ＵＶ光を２分間照射した。連続希釈後、希釈した胞子懸濁サンプルを、ＰＤＡプレート上に広げ、そして３０℃で２〜３日インキュベートした。次いで、コロニーを、コメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含む培地中に接種して、変異体の安定性を試験し、そして生成されたＧＡＢＡおよびシトリニンの量を決定した。
安定な変異体を単離し、そしてモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２と命名した。この変異体をＰＤＡ傾斜培地上に接種し、そして３０℃で７日間インキュベートした。胞子を、滅菌水で洗浄して除いた。この胞子懸濁物（５×１０５胞子）を、コメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含有する培地の５０ｍｌを含む２５０ｍｌのフラスコに移し、そして１５０ｒｐｍで攪拌しながら、３０℃で５〜７日間インキュベートした。この変異体によって生成された発酵液を回収し、そしてＧＡＢＡおよびシトリニンの量を決定した。この結果は、ＧＡＢＡおよびシトリニンの量が、それぞれ、０．０３９ｍｇ／ｍｌおよび０．１５ｐｐｍ未満であったことを示す。同じ条件下で、親株モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） ＣＣＲＣ ３１４９９により生成された発酵液中のＧＡＢＡおよびシトリニンの量は、それぞれ、０．０３１ｍｇ／ｍｌおよび２．１ｐｐｍであった。
上記の変異誘発方法により、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２を、再び変異させ、そして別の変異体（モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０１０３３と称される）を単離した。小麦粉８０ｇ／ｌ、酵母抽出物１０ｇ／ｌおよびグルタミン酸１０ｇ／ｌを含有する培地中でこの変異体によって生成される発酵液において、ＧＡＢＡおよびシトリニンの量は、それぞれ、２．０７ｍｇ／ｌおよび０．１５ｐｐｍ未満であった。同じ条件下で、モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２によって生成された発酵液中のＧＡＢＡおよびシトリニンの量は、それぞれ、０．８３４ｍｇ／ｍｌおよび０．１５ｐｐｍ未満であった。
モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２の形態学的特徴を以下に示す：
（ＣＹＡ培地（スクロース３０ｇ／ｌ、ＮａＮＯ３ ３ｇ／ｌ、Ｋ２ＨＰＯ４ １．０ｇ／ｌ、ＭｇＳＯ４ ０．５ｇ／ｌ、ＫＣｌ ０．５ｇ／ｌ、ＦｅＳＯ４ ０．０１ｇ／ｌ、酵母抽出物 １ｇ／ｌおよび寒天 １５ｇ／ｌを含有する））
７日間の培養後、コロニーは、黄みがかったオレンジ色を呈し、そして１１ｍｍ〜１４ｍｍの直径を有し、そして気菌糸の色は、白色であった。
（ＣＹＡ培地（スクロース３０ｇ／ｌ、ＮａＮＯ３ ３ｇ／ｌ、Ｋ２ＨＰＯ４ １．０ｇ／ｌ、ＭｇＳＯ４ ０．５ｇ／ｌ、ＫＣｌ ０．５ｇ／ｌ、ＦｅＳＯ４ ０．０１ｇ／ｌ、酵母抽出物 １ｇ／ｌおよび寒天 １５ｇ／ｌを含有する））
７日間の培養後、コロニーは、黄みがかったオレンジ色を呈し、そして１１ｍｍ〜１４ｍｍの直径を有し、そして気菌糸の色は、白色であった。
１０日間の培養後、コロニーは、黄みがかったオレンジ色を呈し、そして３０ｍｍ〜３２ｍｍの直径を有し、そして気菌糸の色は、白色であった。
分生子柄の柄は、無色であり、そして不規則な分枝を有した。
分生子柄は、滑らかな洋ナシ型の形状であった。各分生子柄の直径は、３〜４×９．５〜１２．５μｍであり、そして壁の厚さは、２μｍであった。
ＣＹＡ培地中での２１日間の培養後、子嚢果は見出されなかった。
（ＭＥＡ培地（マルトース抽出物２０ｇ／ｌ、ペプトン １ｇ／ｌ、グルコース ２０ｇ／ｌおよび寒天 １５ ｇ／ｌを含有する））
７日間の培養後、コロニーは、赤みがかったオレンジ色を呈し、そして２８〜３０ｍｍの直径を有した。
７日間の培養後、コロニーは、赤みがかったオレンジ色を呈し、そして２８〜３０ｍｍの直径を有した。
１０日間の培養後、コロニーは、赤みがかったオレンジ色を呈し、そして３４〜３７ｍｍの直径を有した。
分生子柄の柄は、赤色であり、そして不規則な分枝を有した。
ＭＥＡ培地での２１日間の培養後、子嚢果は完全には成熟しておらず、そしてこの子嚢果は、卵型の形状（４．５〜５×５〜６μｍ）であった。
モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０１０３３の形態学的特徴を、以下に示す：
（ＣＹＡ培地（スクロース ３０ｇ／ｌ、ＮａＮＯ３ ３ｇ／ｌ、Ｋ２ＨＰＯ４ １．０ｇ／ｌ、ＭｇＳＯ４ ０．５ｇ／ｌ、ＫＣｌ ０．５ｇ／ｌ、ＦｅＳＯ４ ０．０１ｇ／ｌ、酵母抽出物 １ｇ／ｌおよび寒天 １５ ｇ／ｌを含有する））
７日間の培養後、コロニーは、黄みがかったオレンジ色を呈し、そして１３ｍｍ〜１４ｍｍの直径を有し、そして気菌糸は、短く、小さく、そして非常に少ししか見出されなかった。
（ＣＹＡ培地（スクロース ３０ｇ／ｌ、ＮａＮＯ３ ３ｇ／ｌ、Ｋ２ＨＰＯ４ １．０ｇ／ｌ、ＭｇＳＯ４ ０．５ｇ／ｌ、ＫＣｌ ０．５ｇ／ｌ、ＦｅＳＯ４ ０．０１ｇ／ｌ、酵母抽出物 １ｇ／ｌおよび寒天 １５ ｇ／ｌを含有する））
７日間の培養後、コロニーは、黄みがかったオレンジ色を呈し、そして１３ｍｍ〜１４ｍｍの直径を有し、そして気菌糸は、短く、小さく、そして非常に少ししか見出されなかった。
１０日間の培養後、コロニーは、黄みがかったオレンジ色を呈し、そして１７ｍｍ〜１８ｍｍの直径を有し、そして気菌糸は、短く、小さく、そして非常に少ししか見出されなかった。
分生子柄の柄は、無色であり、「Ｚ」型の不規則な分枝を有し、そして壁は滑らかであった。
分生子柄は、洋ナシ型または楕円型であり、そして６〜１２×８．５〜１３μｍの直径を有した。
子嚢果の直径は、３０〜３５μｍであった。この子嚢果は、４．５〜５×５．５〜６μｍの直径を有する卵型の形状であった。
（ＭＥＡ培地（マルトース抽出物 ２０ｇ／ｌ、ペプトン １ｇ／ｌ、グルコース ２０ｇ／ｌおよび寒天 １５ｇ／ｌを含有する））
７日間の培養後、コロニーは、赤みがかったオレンジ色を呈し、そして２９〜３０ｍｍの直径を有し、そして気菌糸は、短く、小さく、そして非常に少ししか見出されなかった。
７日間の培養後、コロニーは、赤みがかったオレンジ色を呈し、そして２９〜３０ｍｍの直径を有し、そして気菌糸は、短く、小さく、そして非常に少ししか見出されなかった。
１０日間の培養後、コロニーは、赤みがかったオレンジ色を呈し、そして４１〜４２ｍｍの直径を有し、そして気菌糸は、短く、小さく、そして非常に少ししか見出されなかった。
分生子柄の柄は、無色であり、不規則な分枝を有した。
ＭＥＡ培地での２１日間の培養後、子嚢果は、完全には成熟していなかった。
モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異株Ｍ０２２、Ｍ０１０３３と親株ＣＣＲＣ ３１４９９との間の比較を、表１に示す。
ａＣＹＡ培地中で培養した。
ｂコメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含有する培養培地で培養した。
ｃ小麦粉８０ｇ／ｌ、酵母抽出物１０ｇ／ｌおよびグルタミン酸１０ｇ／ｌを含有する培地中で培養した。
ｂコメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含有する培養培地で培養した。
ｃ小麦粉８０ｇ／ｌ、酵母抽出物１０ｇ／ｌおよびグルタミン酸１０ｇ／ｌを含有する培地中で培養した。
（ＧＡＢＡの生成のためのｐＨ値）
実施例２に記載される方法に従って、異なるｐＨ値の下で、コメ粉末８０ｇ／ｌ、酵母抽出物１０ｇ／ｌおよびグルタミン酸１０ｇ／ｌを含有する培地中で培養した変異株の発酵液サンプルのＧＡＢＡおよびシトリニンの量を分析した。結果を表２に示し、これは、異なるｐＨ条件下で培養した変異株モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２およびＭ０１０３３が、非常に少量（０．１５ｐｐｍ未満）のシトリニンと共に、多量のＧＡＢＡを生成できたことを実証する。
実施例２に記載される方法に従って、異なるｐＨ値の下で、コメ粉末８０ｇ／ｌ、酵母抽出物１０ｇ／ｌおよびグルタミン酸１０ｇ／ｌを含有する培地中で培養した変異株の発酵液サンプルのＧＡＢＡおよびシトリニンの量を分析した。結果を表２に示し、これは、異なるｐＨ条件下で培養した変異株モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２およびＭ０１０３３が、非常に少量（０．１５ｐｐｍ未満）のシトリニンと共に、多量のＧＡＢＡを生成できたことを実証する。
「−」：サンプルを分析していない。
ａＧＡＢＡの単位は、ｍｇ／ｍｌである。
＊全てのサンプル中のシトリニンの量は、検出可能な値（０．１５ｐｐｍ）よりも低かった。
ａＧＡＢＡの単位は、ｍｇ／ｍｌである。
＊全てのサンプル中のシトリニンの量は、検出可能な値（０．１５ｐｐｍ）よりも低かった。
Claims (11)
- モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体であって、コメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ／ｌを含む培地中で培養した場合に、１．０ｐｐｍ未満の量のシトリニンと共に、０．０３ｍｇ／ｍｌに達するＧＡＢＡ濃度で発酵産物を生成する、変異体であって、アメリカンタイプカルチャーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）に受託番号ＰＴＡ−４４８６で寄託されたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０２２である、変異体。
- モナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）の変異体であって、コメ粉末６０ｇ／ｌ、ダイズ粉末３０ｇ／ｌおよびＭｇＳＯ ４ ・７Ｈ ２ Ｏ ５ｇ／ｌを含む培地中で培養した場合に、１．０ｐｐｍ未満の量のシトリニンと共に、０．０３ｍｇ／ｍｌに達するＧＡＢＡ濃度で発酵産物を生成する、変異体であって、アメリカンタイプカルチャーコレクションに受託番号ＰＴＡ−４４８５で寄託されたモナスクス プルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ） Ｍ０１０３３である、変異体。
- 発酵産物を生成するための方法であって、該方法は、請求項１または２に記載の変異体を適切な条件下で培養することによって特徴付けられ、該発酵産物は、ＧＡＢＡを含み、そして該発酵産物に含まれるシトリニンの量は、１．０ｐｐｍ未満である、方法。
- 前記発酵産物が、血圧低下活性を有する、請求項３に記載の方法。
- 前記変異体が、固体培地または液体培地において培養される、請求項３に記載の方法。
- 前記培地のｐＨ値が、３〜９の間である、請求項５に記載の方法。
- 前記培地のｐＨ値が、５〜７の間である、請求項６に記載の方法。
- 前記発酵産物中のシトリニンの量が、０．５ｐｐｍ未満である、請求項３に記載の方法。
- 前記発酵産物中のシトリニンの量が、０．１５ｐｐｍ未満である、請求項８に記載の方法。
- 前記発酵産物が、薬学的組成物の活性成分または食品添加物として使用され得る、請求項４に記載の方法。
- 血圧低下活性を有する前記成分を精製して、精製された成分を得る精製工程をさらに包含する、請求項４に記載の方法。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW091118398A TWI262949B (en) | 2002-08-15 | 2002-08-15 | Monascus purpureus mutants and their use in preparing fermentation products having hypotensive activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2004073199A JP2004073199A (ja) | 2004-03-11 |
| JP3863129B2 true JP3863129B2 (ja) | 2006-12-27 |
Family
ID=31989687
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2003288306A Expired - Lifetime JP3863129B2 (ja) | 2002-08-15 | 2003-08-06 | モナスクスプルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体、および血圧低下活性を有する発酵産物を調製する際のその使用 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7067304B2 (ja) |
| JP (1) | JP3863129B2 (ja) |
| TW (1) | TWI262949B (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060210584A1 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Chiu Siu W | Method for preparing citrinin-free Monascus biomass and use of citrinin-free Monascus biomass |
| KR100710497B1 (ko) * | 2005-05-18 | 2007-04-23 | 고려대학교 산학협력단 | 홍국균을 이용한 ｇａｂａ 생산방법 |
| CN110408545B (zh) * | 2019-03-21 | 2021-05-07 | 广东天益生物科技有限公司 | 一种紫红曲菌种及由其制备红曲粉的方法和制品 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55150898A (en) * | 1979-05-11 | 1980-11-25 | Sankyo Co Ltd | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
| JPS61197524A (ja) | 1985-02-15 | 1986-09-01 | Gunze Ltd | 高血圧改善剤 |
| JPS62298598A (ja) | 1986-06-16 | 1987-12-25 | Gunze Ltd | モナスカス属糸状菌培養物の新規降圧画分 |
| JP2590423B2 (ja) * | 1994-02-01 | 1997-03-12 | 農林水産省中国農業試験場長 | γ−アミノ酪酸を富化した食品素材 |
| JPH07274978A (ja) | 1994-04-13 | 1995-10-24 | Bio Kosumosu:Kk | 紅麹色素の製造方法 |
| JP4363692B2 (ja) | 1999-03-30 | 2009-11-11 | グンゼ株式会社 | 血圧降下成分を多く含む紅麹の製造方法 |
| KR20010038797A (ko) | 1999-10-27 | 2001-05-15 | 김길환 | 홍국을 이용한 일산화질소 생성제 조성물 및 이를 이용한 약품 조성물 |
| TWI240000B (en) * | 2000-09-29 | 2005-09-21 | Food Industry Res & Dev Inst | Monascus prupureus mutant and its use in preparing yellow pigment |
-
2002
- 2002-08-15 TW TW091118398A patent/TWI262949B/zh not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-07-29 US US10/629,198 patent/US7067304B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-08-06 JP JP2003288306A patent/JP3863129B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20040047842A1 (en) | 2004-03-11 |
| US7067304B2 (en) | 2006-06-27 |
| TWI262949B (en) | 2006-10-01 |
| JP2004073199A (ja) | 2004-03-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11618889B2 (en) | Saccharomyces cerevisiae kwon P-1, 2, 3 which produce aldehyde dehydrogenase and glutathione | |
| El-Sayed et al. | Screening, morphological and molecular characterization of fungi producing cystathionine γ-lyase | |
| CN107955792B (zh) | 一种洛伐他汀高产红曲菌及其高通量筛选方法 | |
| JP2020031580A (ja) | β−グルカン高産生菌株、β−グルカンの製造方法、及びβ−グルカン高産生菌株のスクリーニング方法 | |
| JP3618702B2 (ja) | Ｍｏｎａｓｃｕｓｐｕｒｐｕｒｅｕｓ変異体、および黄色色素の調製におけるその使用 | |
| US20160051596A1 (en) | Novel acetobacter and gluconacetobacter strains and their metabolites for use in inhibiting xanthine oxidase | |
| KR101809447B1 (ko) | 류코노스톡 메센테로이드 drc1506 균주 및 이의 용도 | |
| CN111000204A (zh) | 一种提高虾酱品质的发酵方法 | |
| JP3863129B2 (ja) | モナスクスプルプレウス（Ｍｏｎａｓｃｕｓｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）変異体、および血圧低下活性を有する発酵産物を調製する際のその使用 | |
| Parker et al. | Mutants of yeast with altered oxidative energy metabolism: selection and genetic characterization | |
| Osaro-Matthew et al. | Screening of actinomycetes from turmeric (Curcuma longa L.) and ginger (Zingiber officinale) rhizosphere for antifungal activity | |
| JP5904522B2 (ja) | アザ糖を生産する微生物 | |
| JP5551354B2 (ja) | 糖アルコールの製造方法 | |
| Nguyen et al. | Cultural characteristics and cordycepin production of some Cordyceps militaris strains under artificial cultivation conditions | |
| CN111286500B (zh) | 一种等离子体作用结合氧限制生产辅酶q10的方法 | |
| KR102359343B1 (ko) | 사카로마이세스 세레비지애 srcm102595 균주를 이용한 막걸리의 제조방법 | |
| JP4434927B2 (ja) | γ−アミノ酪酸含有食品の製造方法、及びγ−アミノ酪酸高生成能を有する酵母 | |
| Chayawat et al. | Pigments and anti-cholesterol agent production by Monascus kaoliang KB9 and its color mutants in rice solid cultures | |
| Ghezelbash et al. | Study of polyols production by Yarrowia lipolytica in batch culture and optimization of growth condition for maximum production | |
| CN100384981C (zh) | 红曲霉突变株及其于制备具降血压活性发酵产物之用途 | |
| KR20150128365A (ko) | 신규한 스타터 균주 및 이를 이용한 사워도우 | |
| KR20200107287A (ko) | 신규 사카로마이세스 세레비지에 nw-3 균주 및 그 용도 | |
| TWI822167B (zh) | 烏龍茶醱酵物、其製造方法、含此之食品組成物及其用於製備具抗氧化及抑制血管張力素轉化酶功效之食品組成物的用途 | |
| CN114214240B (zh) | 一株筑波链霉菌诱变菌株及其在联产他克莫司与双烯他克莫司中的应用 | |
| CN115369054B (zh) | 一种豆粕水解物及其制备与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060614 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060822 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20060913 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20060927 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 3863129 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091006 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101006 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101006 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111006 Year of fee payment: 5 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121006 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131006 Year of fee payment: 7 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |