KR20200107287A - 신규 사카로마이세스 세레비지에 nw-3 균주 및 그 용도 - Google Patents

신규 사카로마이세스 세레비지에 nw-3 균주 및 그 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 글루타치온을 고발현하는 새롭게 분리 동정한 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 (기탁번호: KFCC 11806P) 및 이를 이용한 글루타치온 생산방법에 관한 것으로, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 기존 보고된 균주보다 높은 농도의 글루타치온 생산 활성을 나타내며, 특히 상기 균주는 비교적 간단한 배지 조성 및 배양 조건에서도 높은 농도의 글루타치온 생산 활성을 나타내므로, 저비용으로 고농도의 글루타치온을 생산하여 오로지 수입에 의존하고 있는 글루타치온의 수요를 대체할 수 있다.

Description

신규 사카로마이세스 세레비지에 NW-3 균주 및 그 용도{NOVEL SACCHAROMYCES CEREVISIAE NW-3 AND USES THEREOF}
본 발명은 신규 균주인 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 (기탁번호: KFCC 11806P) 및 이의 용도에 관한 것이다. 보다 상세하게는 글루타치온을 고발현하는 새롭게 분리 동정한 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 (기탁번호: KFCC 11806P) 및 이를 이용한 글루타치온 생산방법에 관한 것이다.
글루타치온(glutathione, GSH)은 글루탐산(glutamate), 시스테인(cysteine), 글라이신(glycine) 세 가지 아미노산으로 구성된 트리펩타이드(L-γ-glutamyl-L-cysteinylglycine)이며, 티올기(-SH)를 가지고 있는 세포 내 수용성 항산화제 역할을 할 뿐만 아니라 여러 가지 항산화 효소들(예; 글루타치온 퍼록시다아제 등)의 보조인자 역할을 하는 중요한 물질이다(Kidd, P.M., Alt. Met. Rev. 1997, 2, 155-176).
글루타치온은 대부분의 생물에 존재하며, 사람의 경우 조직에 따라 차이가 있지만 세포 내에서 0.1-10 mM의 농도로 존재하고, 간에서 가장 많은 농도로 존재하며(10 mM 까지), 그 외, 비장, 신장 등에서도 많은 농도로 존재한다. 글루타치온의 항산화 활성은 이 물질이 가지고 있는 티올기의 강력한 전자 제공 능력 때문이며, 환원형(GSH) 및 산화형(GS-SG)으로 존재할 수 있으며, 환원형의 시스테인의 티올기가 전자를 제공하여 자신은 다른 환원형 글루타치온과 반응하여 산화형인 이황화 글루타치온(GS-SG)을 형성하면서 항산화 기능을 나타낸다(GSH + GSH GS-SG). 세포 내에서 산화형 글루타치온은 GSH 환원효소에 의해 다시 환원형으로 재생되어 항산화 활성을 얻게 된다.
건강한 세포 및 조직에서는 총 글루타치온 풀(pool) 가운데 항산화 활성을 갖는 환원형 글루타치온이 약 90% 이상을 차지하고 산화형 글루타치온이 10% 미만으로 존재하는데 산화형 글루타치온과 환원형 글루타치온의 비가 증가하면 산화적 스트레스 상태가 높음을 의미한다.
이러한 글루타치온은 1929년 Hopkins가 처음으로 효모로부터 분리하여 보고하였으며 그 후 많은 연구자 들에 의하여 글루타치온의 기능성이 밝혀졌다.
생체 내 존재하는 글루타치온은 활성산소를 제거하는 항산화 작용, 체내에 들어온 독성물질을 체외로 배출시키는 해독작용, 멜라닌 색소 합성을 저해하는 미백 효과 그 외 심혈관 질환이나 백혈구의 생산, 알코올성 지방간의 치료에도 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 따라서 글루타치온의 용도는 식품 첨가물, 제약의 원료 및 화장품 등에 널리 사용되고 있다.
이러한 용도의 다양성에 따라 글루타치온의 수요가 급증하고 있으나 국내에서는 생산이 안 되어 전량 외국의 수입에 의존하고 있는 실정이다.
따라서 수입 대체 효과와 나아가서는 수출의 목적으로 고 생산성 효모를 분리하고 고 농도 글루타치온 함유 제품을 제조하기 위하여 고 농도 생산성의 균주를 분리하고 발효에 의한 글루타치온 생산성을 검토하였다.
한국공개특허 제10-2011-0041341호
본 발명자들은 글루타치온 고발현 미생물 제제를 개발하고자 노력한 결과, 발효 식품으로부터 본 발명의 신규 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주를 발견하였으며, 상기 균주를 한국미생물보존센터에 기탁하고(기탁번호 KFCC 11806P), 본 발명의 균주는 현재까지 국내에서 보고된 균주보다 높은 농도의 글루타치온 생산 활성이 있다는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 기술적 과제를 달성하고자, 본 발명은 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주(기탁번호 KFCC 11806P)를 제공한다.
본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주(기탁번호 KFCC 11806P)는 전통주에서 분리한 균주로, 서열번호 1로 표시되는 18s rRNA 염기서열을 포함하고, 기존에 알려진 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주에 비하여 글루타치온을 고생산하는 특징을 가진다.
[서열목록 1]
Figure pat00001
본 발명의 균주는 형태학적, 생화학적 및 유전학적 특성을 조사하여 최종 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주로 동정하고, 한국미생물보존센터에 2018년 11월15일자로 기탁하였다(기탁번호 KFCC 11806P).
본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 분리 배지인 YM 배지에서 36시간 배양시(온도 30℃) 240 ug/ml의 글루타치온을 생산하였으며, 72시간 이후에는 300 ug/ml 이상의 글루타치온 생산 능력을 가지는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 20 내지 30℃의 온도에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 하며, 바람직하게는 20 내지 27℃이다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 pH 3 내지 7에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 하며, 바람직하게는 pH 4 내지 6이다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 포도당, 유당, 과당, 당밀, 맥아당 및 설탕으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 탄소원을 포함하는 배지에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 하며, 바람직하게 상기 배지는 포도당, 설탕, 과당 및 맥아당 중 어느 하나 이상의 탄소원을 포함한다. 상기 탄소원은 총 배지에 대하여 0.1 내지 5%(w/v)이며, 바람직하게는 0.5 내지 2.5%(w/v), 더욱 바람직하게는 1.0 내지 2.0%(w/v)가 첨가된다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 유기 질소원으로 소고기 추출물(beef extract), 효모 추출물(yeast extract), 펩톤(peptone), 맥아 추출물(malt extract), 트립톤(tryptone), 콩가루(soybean meal), 옥수수 침출액(corn steep liquor); 무기 질소원으로는 NaNO2, KNO3, NH4Cl, (NH4)2SO4, (NH4)2HPO4 및 urea로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질소원을 포함하는 배지에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 하며, 바람직하게 상기 배지는 소고기 추출물(beef extract), 효모 추출물(yeast extract) 및 맥아 추출물(malt extract) 중 어느 하나 이상의 질소원을 포함한다. 상기 질소원은 총 배지에 대하여 0.1 내지 5%(w/v)이며, 바람직하게는 0.5 내지 2.5%(w/v), 더욱 바람직하게는 0.5 내지 1.5%(w/v)가 첨가된다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 황산구리(CuSO4), 황산마그네슘(MgSO4), 염화나트륨(NaCl), 염화칼륨(KCl), 인산일수소칼륨(K2HPO4), 인산이수소칼륨(KH2PO4), 황산칼륨(K2SO4), 황산 아연(ZnSO4), 염화칼슘(CaCl2) 및 염화철(FeCl2(Ⅱ))로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 무기염류를 포함하는 배지에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 니코틴산(nicotinic acid), 비오틴(biotin), 이노시톨(inositol), 티아민 하이드로클로라이드(thiamine HCl), 폴산(folic acid) 및 아스코르브산(ascorbic acid)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 생육인자(growth factor)를 포함하는 배지에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 글라이신(glycine), 글루탐산(glutamic acid) 및 시스테인(cysteine)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 글루타치온 합성 전구체를 포함하는 배지에서 글루타치온을 고발현하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 실시 예에 따르면, 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주를 배지에서 배양하여 균체(biomass) 또는 배양액을 수득하는 단계;및 상기 균체 또는 배양액에서 글루타치온을 추출하는 단계를 포함하는 글루타치온 생산방법을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시 예에 따르면, 본 발명의 미생물 균주를 배양하고 배양액으로부터 글루타치온을 회수한다. 글루타치온은 당업계에 공지된 다양한 방법으로 회수할 수 있다.
글루타치온은 세포 내 물질이므로 배양물 또는 균주로부터 글루타치온을 분리하기 전에 균주를 용균시키는 것이 좋다. 균주의 용균은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 방법 예를 들어, 용균용 완충용액, 소니케이터, 열 처리 및 후렌치 프레서 등에 의해 실시할 수 있다.
본 발명의 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주 또는 이의 배양물로부터 글루타치온을 분리하는 방법은 이에 제한되는 것은 아니지만, 예를 들어 원심분리, 여과, 추출, 분무 건조, 증발 또는 침전을 포함한 전통적인 방법에 의하여 분리할 수 있다. 더 나아가, 크로마토그래피(예, 이온 교환, 친화성, 소수성 및 크기별 배제), 전기영동, SDS-PAGE를 포함하여 일반에 공지된 다양한 방법을 통해서 분리 가능하다.
본 발명의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주는 기존 보고된 균주보다 높은 농도의 글루타치온 생산 활성을 나타내며, 특히 상기 균주는 비교적 간단한 배지 조성 및 배양 조건에서도 높은 농도의 글루타치온 생산 활성을 나타내므로, 저비용으로 고농도의 글루타치온을 생산하여 오로지 수입에 의존하고 있는 글루타치온의 수요를 대체할 수 있다.
도 1은 Saccharomyces cerevisiae NW-3의 유전학적 위치를 나타내는 계통수 그림이다.
도 2는 Saccharomyces cerevisiae NW-3을 30℃의 온도에서 84시간 동안 YM 배지에서 배양하면서 12시간 간격으로 글루타치온 생산량과 건조 균체량를 조사한 그래프이다.
이하, 실시예 및 실험예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐 어떠한 의미로든 본 발명의 범위가 이들 예로 한정되는 것은 아니다.
실험예
1. 균주의 분리
효모 균주를 분리하기 위하여 분리원으로는 전통주, 와인, 김치, 메주 등을사용하였으며, 각각의 시료를 생리 식염수(NaCl 0.85%)에 희석하여 YM(효모 추출물 3.0g, 맥아 추출물 3.0g, 펩톤 5.0g, 포도당 10.0g) 고체 배지에서 도말한 후 30℃에서 72시간 배양하여 생육된 콜로니를 분리하였다.
2. 글루타치온 생산 능력이 향상된 균주의 분리
글루타치온 생산 균주의 분리는 분리된 균주를 YM 액체 배지에 접종하여 30℃에서 84시간 배양한 다음 Glutathione assay kit(Sigma Co.)를 이용하여 생산성이 가장 높은 균주를 선별하였다. 이 분리 균주를 NW-3으로 명명하고 동정을 행한 결과 Saccharomyces cerevisiae로 동정되었다(도 1). 본 발명자는 상기 균주를 Saccharomyces cerevisiae NW-3로 명명하고, 한국미생물보존센터에 2018년 11월15일자로 기탁하였다(기탁번호 KFCC 11806P).
3. 글루타치온 정량
획득한 균주를 YM 액체배지에 각각 접종한 후 30℃에서 72시간 진탕 배양하고, 상기 배양액을 7,000xg에서 15분간 원심분리하여 상등액을 제거하고 회수된 균체에 동일량의 증류수를 가하여 열처리로 세포벽을 파괴시킨 것을 시료로 하여 Owens와 Belcher(C. W. I. Owens and R. V. Belcher, "A colorimetric micro-method for the determination of glutathione," Biochem. J., 94, pp. 705-711 (1965))의 방법으로 글루타치온 생산능을 측정하였다. 본 발명 균주의 일반적인 계대 배양은 YM 배지를 사용하였다.
Owens와 Belcher의 방법에 따라 0.2M Phosphate buffer(pH 7.1) 2.5mL, 1.0 mM EDTA 0.8mL, 0.6 mM DTNB 0.03 mL, glutathione reductase(5 unit)와 시료 0.2mL을 혼합한 후 412nm에서 흡광도를 측정하였다. NADPH용액 첨가 전후의 흡광도 차이를 구하여 작성된 표준곡선으로부터 glutathione 함량을 정량하였다.
4. 건조 균체량(D.C.W.)의 측정
건조 균체량 측정을 위하여 균주를 YM 액체배지에 접종하고 30℃에서 72시간 진탕 배양한 후 배양액을 7,000xg에서 15분간 원심분리 하였다. 분리된 균체는 증류수로 1회 세척하고 80℃에서 24시간 항량이 될 때까지 건조한 후 각각 균체의 무게를 달리하여 취하고 증류수에 현탁시킨 후 spectrophotometer를 사용하여 660nm에서 흡광도를 측정한 표준곡선으로부터 배양액의 건조 균체량을 측정하였다.(W. C. Shin, D. S. KIM, J. H. Yu and J. H. Yu, "Isolation, identification and culture condition of microorganism producing glutathione" Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol., 21, pp. 1-5 (1993))
실시예
1. 종균배양
발효를 위한 종균 배양은 분리 균주를 YM 액체 배지에 접종하여 30℃에서 72시간 배양한 것을 사용하였고 0.1%를 접종하여 배양하였다.
2. 분리 균주의 글루타치온 생산량 측정
Saccharomyces cerevisiae NW-3을 이용하여 분리 배지인 YM 배지를 이용하여 30℃에서 84시간 동안 배양하면서 12시간 간격으로 글루타치온 생산량과 건조 균체량를 조사하여 도 1에 그래프로 나타내었다. 도 2를 참고하면 본 발명의 Saccharomyces cerevisiae NW-3 균주는 36시간 배양시 240 ug/ml의 글루타치온을 생산하였으며, 72시간 이후에는 300 ug/ml 이상의 글루타치온을 생산하였으며, 이때 건조 균체량은 7.2mg/ml이었다.
3. 배양 온도에 따른 글루타치온 생산량 측정
본 발명자는 온도에 따른 글루타치온 생산량을 확인하기 위하여 Saccharomyces cerevisiae NW-3을 20ml YM 액체배지에서 온도를 20℃, 25℃, 30℃, 35℃, 40℃로 달리하여 72시간 배양하고, 각각의 온도에 따른 글루타치온 생산량 및 건조 균체량을 측정하여 그 결과를 [표 1]에 나타내었다.
시료 배양 온도(℃) Glutathione(ug/ml) D.C.W.(mg/ml)
20 257 5.76
25 350 6.08
30 304 5.63
35 123 5.56
40 43 4.42
[표 1]을 참조하면, 글루타치온 생산량은 25℃에서 350ug/ml로 가장 높았으며 건조 균체량은 6.08mg/ml이었다. 그 다음으로 30℃에서 304ug/ml로 높은 생산량을 나타내는 것을 확인할 수 있었으며, 배양 온도가 35℃를 넘어가면 글루타치온 생산량이 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과로부터 Saccharomyces cerevisiae NW-3 균주의 글루타치온 최적 생산을 위해서는 20 내지 30℃의 온도가 적당하며, 본 명세서에 기재하지 않았으나, 본 발명자는 배양 온도가 33℃를 넘어가면 글루타치온의 생산량이 급격히 감소(200ug/ml 이하)하는 것을 확인하였으며, 따라서 글루타치온 최적의 생산을 위해서는 20 내지 33℃가 바람직하며, 가장 바람직하게는 25 내지 30℃이다.
4. 배양 pH에 따른 글루타치온 생산량 측정
본 발명자는 pH에 따른 글루타치온 생산량을 확인하기 위하여 YM 액체배지에서 pH를 3에서 8까지 조절한 다음 Saccharomyces cerevisiae NW-3을 접종하여 25℃에서 72시간 배양한 후 글루타치온 생산량 및 건조 균체량을 측정하여 그 결과를 [표 2]에 나타내었다.
시료 배양 pH Glutathione(ug/ml) D.C.W.(mg/ml)
3 320 4.24
4 337 4.88
5 350 5.92
6 317 5.01
7 313 5.28
8 153 4.7
[표 2]를 참조하면, 글루타치온과 건조 균체량을 측정한 결과 pH 5에서 350ug/ml의 가장 높은 글루타치온 생산량을 나타내었고 그때 건조 균체량은 5.92mg/ml이었다. 그 다음으로는 pH 4에서 337ug/ml의 글루타치온 생산량을 나타내었고 pH가 증가할수록 글루타치온 생산량이 감소하였다.
상기 결과로부터 Saccharomyces cerevisiae NW-3 균주의 글루타치온 최적 생산을 위해서는 pH 4 내지 7이 적당하며, 본 명세서에 기재하지 않았으나, 본 발명자는 pH 5.5를 전후로 하여 글루타치온의 생산량이 감소하는 것을 확인하였으며, 따라서 글루타치온 최적의 생산을 위해서는 pH 4 내지 5.5가 가장 바람직하다.
5. 탄소원에 따른 글루타치온 생산량 측정
본 발명자는 탄소원에 따른 글루타치온 생산량을 확인하기 위하여 Saccharomyces cerevisiae NW-3을 포도당, 유당, 과당, 당밀, 맥아당 및 설탕을 첨가한 YM 액체배지에서 배양하고, 탄소원에 따른 글루타치온 생산량 및 건조 균체량을 측정하여 그 결과를 [표 3]에 나타내었다.
이때, 전체 YM 배지 20ml에 탄소원은 0.2g(1.0%) 첨가하였으며 배양 온도는 25℃, pH 5에서 72시간 배양하였다(표 3).
탄소원 Glutathione(ug/ml) D.C.W.(mg/ml)
포도당 340 5.71
유당 164 6.16
과당 303 6.57
당밀 154 6.21
맥아당 302 5.53
설탕 303 1.27
[표 3]을 참조하면, 배양한 결과 포도당, 설탕, 과당 및 맥아당을 첨가한 경우에 높은 글루타치온 생산량을 확인할 수 있었으며, 그 중 포도당이 340ug/ml으로 가장 높은 글루타치온 생산량을 나타내었고, 그때 건조 균체량은 5.71mg/ml이었다.
본 발명자는 가장 높은 글루타치온 생산량을 나타내는 탄소원(포도당)을 선택하여 그 첨가량을 각각 0.1g(0.5%), 0.2g(1.0%), 0.3g(1.5%), 0.4g(2.0%), 0.5g(2.5%)로 달리하고 위와 같은 조건에서 Saccharomyces cerevisiae NW-3의 글루타치온 생산량 및 건조 균체량을 측정하여 그 결과를 [표 4]에 나타내었다.
탄소원 Glutathione(ug/ml) D.C.W.(mg/ml)
0g (0%) 126 1.82
0.1g (0.5%) 338 3.95
0.2g (1.0%) 400 5.71
0.3g (1.5%) 440 6.3
0.4g (2.0%) 394 6.49
0.5g (2.5%) 365 6.64
[표 4]를 참조하면, 0.3g(1.5%)의 포도당을 첨가한 경우에 최고의 글루타치온 생산량을 나타내었으며, 오히려 포도당의 첨가량이 증가하는 경우에 글루타치온의 생산량이 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과로부터 Saccharomyces cerevisiae NW-3 균주의 글루타치온 최적 생산을 위해서 탄소원으로는 포도당, 설탕, 과당 및 맥아당 등으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 사용하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 포도당을 탄소원으로 사용하는 것이 글루타치온 생산량을 향상시킬 수 있다. 포도당의 경우 첨가량은 전체 배지에 대하여 0.5 내지 2.5% 사용하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 1.0 내지 2.0% 사용한다.
6. 질소원에 따른 글루타치온 생산량 측정
본 발명자는 질소원에 따른 글루타치온 생산량을 확인하기 위하여 Saccharomyces cerevisiae NW-3을 탄소원으로 포도당(1.5%)을 사용하고, 유기 질소원으로 소고기 추출물(beef extract), 효모 추출물(yeast extract), 펩톤(peptone), 맥아 추출물(malt extract), 트립톤(tryptone), 콩가루(soybean meal), 옥수수 침출액(corn steep liquor); 무기 질소원으로는 NaNO2, KNO3, NH4Cl, (NH4)2SO4, (NH4)2HPO4, urea를 각각 첨가한 탄소원 기본 배지에서 배양하고, 질소원에 따른 글루타치온 생산량 및 건조 균체량을 측정하여 그 결과를 [표 5]에 나타내었다.
이때, 탄소원 기본 배지(포도당 1.5%) 20ml에 상기 질소원 0.2g(1.0%)을 첨가한 배지에서 배양하였으며, 온도는 25℃, pH 5에서 72시간 배양하였다.
질소원 Glutathione(ug/ml) D.C.W.(mg/ml)
beef extract 220 5.24
yeast extract 245 6.85
malt extract 151 3.97
peptone 48 5.22
tryptone 24 5.93
soybean meal 23 7.34
corn steep liquor 24 12.66
[표 5]를 참조하면, yeast extract, beef extract, malt extract의 순으로 우수한 글루타치온 생산량을 나타내었으며, 무기 질소원의 첨가는 글루타치온 생산량에 거의 영향을 미치지 않았다. 상기 질소원 중 yeast extract가 245ug/ml으로 가장 높은 글루타치온 생산량을 나타내었다.
<110> NATURAL WAY <120> NOVEL SACCHAROMYCES CEREVISIAE NW-3 AND USES THEREOF <130> P19-0040 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1701 <212> DNA <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 1 agtataagca atttatacag tgaaactgcg aatggctcat taaatcagtt atcgtttatt 60 tgatagttcc tttactacat ggtataactg tggtaattct agagctaata catgcttaaa 120 atctcgaccc tttggaagag atgtatttat tagataaaaa atcaatgtct tcggactctt 180 tgatgattca taataacttt tcgaatcgca tggccttgtg ctggcgatgg ttcattcaaa 240 tttctgccct atcaactttc gatggtagga tagtggccta ccatggtttc aacgggtaac 300 ggggaataag ggttcgattc cggagaggga gcctgagaaa cggctaccac atccaaggaa 360 ggcagcaggc gcgcaaatta cccaatccta attcagggag gtagtgacaa taaataacga 420 tacagggccc attcgggtct tgtaattgga atgagtacaa tgtaaatacc ttaacgagga 480 acaattggag ggcaagtctg gtgccagcag ccgcggtaat tccagctcca atagcgtata 540 ttaaagttgt tgcagttaaa aagctcgtag ttgaactttg ggcccggttg gccggtccga 600 ttttttcgtg tactggattt ccaacggggc ctttccttct ggctaacctt gagtccttgt 660 ggctcttggc gaaccaggac ttttactttg aaaaaattag agtgttcaaa gcaggcgtat 720 tgctcgaata tattagcatg gaataataga ataggacgtt tggttctatt ttgttggttt 780 ctaggaccat cgtaatgatt aatagggacg gtcgggggca tcagtattca attgtcagag 840 gtgaaattct tggatttatt gaagactaac tactgcgaaa gcatttgcca aggacgtttt 900 cattaatcaa gaacgaaagt taggggatcg aagatgatca gataccgtcg tagtcttaac 960 cataaactat gccgactagg gatcgggtgg tgttttttta atgacccact cggcacctta 1020 cgagaaatca aagtctttgg gttctggggg gagtatggtc gcaaggctga aacttaaagg 1080 aattgacgga agggcaccac caggagtgga gcctgcggct taatttgact caacacgggg 1140 aaactcacca ggtccagaca caataaggat tgacagattg agagctcttt cttgattttg 1200 tgggtggtgg tgcatggccg ttcttagttg gtggagtgat ttgtctgctt aattgcgata 1260 acgaacgaga ccttaaccta ctaaatagtg gtgctagcat ttgctggtta tccacttctt 1320 agagggacta tcggtttcaa gccgatggaa gtttgaggca ataacaggtc tgtgatgccc 1380 ttagacgttc tgggccgcac gcgcgctaca ctgacggagc cagcgagtct aaccttggcc 1440 gagaggtctt ggtaatcttg tgaaactccg tcgtgctggg gatagagcat tgtaattatt 1500 gctcttcaac gaggaattcc tagtaagcgc aagtcatcag cttgcgttga ttacgtccct 1560 gccctttgta cacaccgccc gtcgctagta ccgattgaat ggcttagtga ggcctcagga 1620 tctgcttaga gaagggggca actccatctc agagcggaga atttggacaa acttggtcat 1680 tagagaacta aaagtctctg g 1701

Claims (9)

  1. 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) NW-3 균주(기탁번호 KFCC 11806P).
  2. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 서열번호 1로 표시되는 18S rRNA 염기서열을 갖는 균주.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 글루타치온(glutathione)을 고발현하는 균주.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 20 내지 30℃의 온도에서 글루타치온(glutathione)을 고발현하는 균주.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 4 내지 7의 pH에서 글루타치온(glutathione)을 고발현하는 균주.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 포도당, 설탕, 과당 및 맥아당으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 탄소원을 포함하는 배지에서 글루타치온(glutathione)을 고발현하는 균주.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 탄소원은 전체 배지에 대하여 0.5 내지 2.5% 농도로 포함되는 것인, 균주.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 소고기 추출물(beef extract), 효모 추출물(yeast extract) 및 맥아 추출물(malt extract)로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질소원을 포함하는 배지에서 글루타치온(glutathione)을 고발현하는 균주.
  9. 제1항 내지 제8항에 따른 균주를 배지에서 배양하여 균체(biomass) 또는 배양액을 수득하는 단계;및
    상기 균체 또는 배양액에서 글루타치온을 추출하는 단계를 포함하는, 글루타치온 생산방법.
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