JP3693754B2 - チロシナーゼ活性阻害剤 - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、メラニンの生成を抑制するためのチロシナーゼ活性阻害剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
メラニンは、毛髪や肌の色を決定している色素である。この色素は、皮膚の表皮基底層に存在するメラノサイトにおいて過剰な光や紫外線に反応して生成される。メラニンの生成過程は、チロシンを前駆体として、チロシン→Ｌ−ドーパ→ドーパキノン→ドーパクロム→５，６−ジヒドロキシインドール→インドール−５，６−キノン→メラニンの過程を経て生成される。
【０００３】
この過程において、チロシン→Ｌ−ドーパ→ドーパキノンの過程でチロシナーゼが関与し、以下の過程は自動酸化によってなされる。そのために、メラニン生成抑制物質の検索を行なう際にチロシナーゼの活性阻害を見る方法が採られてきた。チロシナーゼ活性阻害作用を有することは、美白効果の重要な因子であり、ここ十数年来、美白化粧品の主力をなす制御法となっている。
【０００４】
チロシナーゼ活性阻害作用に基づくメラニン生成抑制物質として代表的なものには、アルブチン、コウジ酸、アスコルビン酸などがあり、それぞれの化合物に対する関連特許も多く出願され、実際これらを配合した化粧品が製品化されている。また、カルボン酸の関与するメラニン生成抑制作用については、三島らの報告（特公平２―１９３９１７号公報）があるが、そこに示されているカルボン酸は、炭素数１２乃至２２の不飽和脂肪酸類と酢酸類、乳酸類、ピルビン酸類に関するものであるだけでなく、その作用機構がチロシナーゼの生成を抑制するものである。チロシナーゼ活性阻害剤は、現在、主にその美白効果を期待して研究開発がなされている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
ところが、前記アスコルビン酸は、その還元作用によってチロシナーゼ活性を阻害するが、その作用は十分なものとはいえない。また、アルブチンもチロシナーゼ活性阻害作用を有するが、その効果は不十分なものである。さらに、コウジ酸は、天然物であるだけでなく、チロシナーゼ活性阻害作用も優れているが、味噌や醤油などに色と風味を与えるコウジカビの培養液から単離されたもので、鉄分が存在すると茶褐色に変色したりして品質が低下するおそれがある。このため、天然物由来の物質の中でその品質が良く、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有するものの開発が望まれていた。
【０００６】
この発明は、以上のような従来技術に存在する問題に着目してなされたものである。その目的とするところは、チロシナーゼ活性阻害作用に優れたチロシナーゼ活性阻害剤を提供することにある。その他の目的とするところは、皮膚刺激性がなく自然志向を有するとともに、変色したりするおそれが少ない品質の良いチロシナーゼ活性阻害剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記の目的を達成するために、請求項１に記載の発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、１０−ヒドロキシデカン酸、デカン酸、２−デセン酸、トランス−２−オクテン酸およびオクタン酸からなる炭素数が８または１０のカルボン酸類より選択される１種以上のカルボン酸よりなるものである。
【０００８】
請求項２に記載の発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、前記カルボン酸がローヤルゼリーから抽出されたものである。
【０００９】
従って、請求項１に記載のチロシナーゼ活性阻害剤は特定のカルボン酸よりなり、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を発現し、カルボン酸がチロシンからドーパキノンが生成する過程でチロシナーゼの活性を阻害する。その結果、メラニンの生成が抑制される。
【００１０】
また、請求項２に記載のチロシナーゼ活性阻害剤は、ローヤルゼリー由来のカルボン酸であるが、前記特定のカルボン酸を含有していることから、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有する。しかも、ローヤルゼリーは、医薬品や健康食品としても広く利用されており、ローヤルゼリー由来の化合物は、皮膚刺激性がなく自然志向に合致するものである。
【００１２】
【発明の実施の形態】
以下に、この発明の実施形態について詳述する。
チロシナーゼ活性阻害剤は、１０−ヒドロキシデカン酸、デカン酸、２−デセン酸、トランス−２−オクテン酸およびオクタン酸からなる炭素数が８または１０のカルボン酸類より選択される１種以上のカルボン酸を含有する。これらのカルボン酸は、二重結合、カルボキシル基またはヒドロキシル基を有しており、目的に応じてそれらのうちの１種類を選択して用いたり、２種以上を適宜選択して用いることができる。
【００１３】
このカルボン酸類は、ローヤルゼリーから抽出して得られるローヤルゼリー由来の化合物であることが、天然物より得られる自然志向のものであるため望ましい。すなわち、ローヤルゼリーからの抽出物は、皮膚刺激性がなく、肌への適用性に優れている。これらのチロシナーゼ活性阻害剤は、チロシナーゼの活性を阻害すことによってメラニンの生成を抑制することができるために美白効果を発揮することができる。
【００１４】
ここで、ローヤルゼリーからカルボン酸類を抽出する方法について説明する。まず、生ローヤルゼリーにアルコールを加えて流動性をよくする。次いで、これを限外濾過法や精密濾過法による処理をして得られた濾液を減圧濃縮し、冷却することによってカルボン酸類が結晶として得られる。なお、限外濾過法とは、１〜１０³ ｎｍの孔径を有する多孔性の高分子膜よりなる限外濾過膜を用いて粒子を濾過する方法であり、精密濾過法は、０．０２〜１０μｍ孔径を有する多孔性の高分子膜よりなる精密濾過膜を用いて粒子を濾過する方法である。
【００１５】
次に、美白化粧品は、化粧基材に上記のようなチロシナーゼ活性阻害剤を含有させることにより得られる。化粧基材としては、乳液、化粧水、クリームなどが使用される。チロシナーゼ活性阻害剤の含有量は、１〜２０重量％の範囲が好ましい。１重量％未満ではチロシナーゼの活性を阻害する作用が低く、十分な美白効果が得られず、２０重量％を越えても、そのような効果は向上せず、かえってコストが上昇する。
【００１６】
美白化粧品の形態は、乳液状、クリーム状、粉末状などのいずれであってもよい。このような美白化粧品を肌に塗ることにより、美白化粧品中のチロシナーゼ活性阻害剤が肌に吸収され、肌の表面に生成するメラニンを抑制する。従って、肌を色白に保つことができる。
【００１７】
なお、チロシナーゼの活性は、Ｌ−ドーパを基質とし、酵素反応の結果生成するドーパ−クロムの量を測定し、その分子吸光係数から計算される。すなわち、リン酸緩衝液にチロシナーゼとチロシナーゼ阻害剤を加えて反応させた後、Ｌ−ドーパを加えて反応させる。続いて、５０％酢酸を加えて反応を止め、４７５ｎｍにおける吸光度を測定する。そして、チロシナーゼ阻害剤を加えることによって得られる吸光度の減少量からチロシナーゼ活性阻害の程度を求めることができる。
【００１８】
美白効果の確認は、一般的な化粧用クリームにチロシナーゼ活性阻害剤を加えたパネルテスト、つまり複数のパネラーに化粧品を使用してもらい、その判定結果に基づいて行なわれる。
【００１９】
このようにして得られるチロシナーゼ活性阻害剤によれば、次のような効果が発揮される。
（１）１０−ヒドロキシデカン酸、デカン酸、２−デセン酸、トランス−２−オクテン酸およびオクタン酸からなる炭素数が８または１０の特定のカルボン酸類は、長鎖脂肪族化合物であって、二重結合、カルボキシル基、ヒドロキシル基などを有している。このようなカルボン酸類の特定構造に基づいて、チロシナーゼ活性阻害剤は皮膚に良く吸収され、優れたチロシナーゼ活性阻害作用が発揮される。
（２）ローヤルゼリーから抽出された化合物には、炭素数が８または１０のカルボン酸類が多く含まれており、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有する。
（３）ローヤルゼリーは、働き蜂が産生する天然物であり、そのローヤルゼリーから抽出された化合物は、自然志向に合致し、皮膚に対する刺激性が少ない。
（４）ローヤルゼリー由来のカルボン酸類は、蜂蜜と同様に蜂の産生物に基づくものであり、味噌や醤油に基づくコウジ酸に比べて変色がなく、品質が高い。
（５）前記カルボン酸類は、チロシナーゼ活性阻害作用に優れていることから、メラニンの生成を効果的に抑制でき、それに基づいて優れた美白効果を発揮することができる。
【００２０】
【実施例】
（実施例１）
生ローヤルゼリー１ｋｇに９５重量％エタノール３ｋｇを加えて溶解した後、珪藻土濾過し、さらに孔径５μｍ以下の精密濾過膜を用いて精密濾過し、３．４２ｋｇの濾液を得た。これを減圧濃縮して６３ｇのローヤルゼリー抽出物の結晶を得た。この結晶中には、３０重量％の１０−ヒドロキシデセン酸を初めとするカルボン酸が含まれている。
【００２１】
ローヤルゼリー中に含まれるカルボン酸の構成比を以下の表１に示す。このようにして、炭素数が８または１０のカルボン酸よりなるチロシナーゼ活性阻害剤を得た。
【００２２】
【表１】

【００２３】
（実施例２〜６および比較例１）
次に、実施例２〜６として、表２に示す炭素数が８または１０のカルボン酸よりなるチロシナーゼ活性阻害剤を調製した。
【００２４】
また、比較例１として、従来のアルブチンよりなるチロシナーゼ活性阻害剤を調製した。
（試験例１）
以下に示す試験法により、アルブチン、上記実施例１〜６、参考例１〜４および比較例１の各試料についてそのチロシナーゼ活性阻害作用を確認した。すなわち、０．１０４Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ６．０）２．７ｍｌにチロシナーゼ溶液０．１ｍｌと試料溶液０．１ｍｌを加え、２５℃で５分間インキュベートしたのち、３０ｍＭ Ｌ−ドーパ溶液０．１ｍｌを加え、２５℃で１５分間反応を行なった。
【００２５】
次に、５０％酢酸０．２６ｍｌを加えて酵素反応を止め、４７５ｎｍにおける吸光度を測定し、チロシナーゼ活性を５０％阻害する試料濃度を求めた。その結果を表２に示す。表２中の＋は、阻害するがＩＣ₅₀が求められないことを示し、±は、阻害が僅かであることを示している。
【００２６】
【表２】

【００２７】
表２に示したように、実施例２〜６における炭素数８又は１０のカルボン酸類には程度の差はあるが、比較例１のアルブチンに比べて優れたチロシナーゼ活性阻害効果がある。また、実施例１のローヤルゼリーから抽出されたカルボン酸類にも同様の効果が得られる。
（参考例５）
実施例１より得られたローヤルゼリ抽出物を配合した美白クリームを、以下の処方に従って製造した。なお、合計量が１００重量部となるようにした。
（１）処方
油相 スクワラン ２０重量部
オリーブ油 ４重量部
ローヤルゼリ抽出物 ４重量部
グリセリンモノステアレート ４重量部
水相 キサンタンガム １重量部
香料、防腐剤 適量
精製水 ６５重量部
（２）調製法
まず、油相成分を均一に混合し、７５℃で５分間加熱撹拌する。次いで、この溶液に水相成分（７５℃）を加え、均一になるまで乳化してクリーム状の美白化粧品を得た。
（試験例２）
参考例５で得られたクリームとローヤルゼリーを配合しない基剤クリームを用いて美白効果のテストを行なった。パネラーは２０名の女性で３カ月間連続して使用し、美白効果を確認した。そして、パネラーが色黒、シミ、ソバカスの改善に有効と判断した場合、やや有効と判断した場合および無効と判断した場合の３つに区分した。その結果を表３に示す。
【００２８】
【表３】

【００２９】
表３から明らかなように、参考例５のクリームは、色黒、シミ、ソバカスの改善に優れた美白効果を発揮することが確認された。なお、このテストにおいては、皮膚に好ましくない反応は全く観察されなかった。
【００３０】
さらに、前記実施形態より把握される技術的思想について以下に記載する。
（１） 前記カルボン酸類は、二重結合を有する化合物である請求項１に記載のチロシナーゼ活性阻害剤。
【００３１】
このように構成した場合、カルボン酸の前記特定構造と二重結合との相互作用により、チロシナーゼの活性阻害作用を向上させることができる。
（２） 前記カルボン酸類は、炭素数が１０のカルボン酸より選択される１種以上の化合物である請求項１に記載のチロシナーゼ活性阻害剤。
【００３２】
このように構成した場合、カルボン酸の前記特定構造と所定の炭素数を有する長鎖化合物との相互作用により、チロシナーゼの活性阻害作用を高めることができる。
（３） 前記カルボン酸類は、ヒドロキシル基を有する化合物である請求項１に記載のチロシナーゼ活性阻害剤。
【００３３】
このように構成した場合、カルボン酸の特定構造とヒドロキシル基との相互作用により、チロシナーゼの活性阻害作用を向上させることができる。
（４） 前記カルボン酸類は、生ローヤルゼリーにアルコールを加えた後、濾過処理した濾液を濃縮して得られたものである請求項２に記載のチロシナーゼ活性阻害剤。
【００３４】
このように構成すれば、ローヤルゼリー由来のカルボン酸類を効率良く取得することができる。
（５） 前記濾過処理は、限外濾過法または精密濾過法によるものである上記（４）に記載のチロシナーゼ活性阻害剤。
【００３５】
このように構成した場合、ローヤルゼリー由来のカルボン酸類をより効率良く取得することができる。
【００３６】
【発明の効果】
この発明は、以上のように構成されているため、次のような効果を奏する。
請求項１に記載の発明のチロシナーゼ活性阻害剤によれば、特定構造を有する炭素数が８または１０のカルボン酸類を用いることによって優れたチロシナーゼ活性阻害作用を発揮することができる。
【００３７】
請求項２に記載のチロシナーゼ活性阻害剤によれば、優れたチロシナーゼ活性阻害作用に基づく美白効果を得ることができるとともに、ローヤルゼリーから抽出された化合物を用いることによって、皮膚刺激性を抑制して自然志向に合致し、変色を抑制できるなどの品質を向上させることができる。

Claims (2)

1. １０−ヒドロキシデカン酸、デカン酸、２−デセン酸、トランス−２−オクテン酸およびオクタン酸からなる炭素数が８または１０のカルボン酸類より選択される１種以上のカルボン酸よりなるチロシナーゼ活性阻害剤。
2. 前記カルボン酸がローヤルゼリーから抽出されたものである請求項１に記載のチロシナーゼ活性阻害剤。