JP3579094B2 - ２位に置換基を有するビタミンｄ誘導体 - Google Patents

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、２位に置換基を有するビタミンＤ誘導体に関する。さらに詳しくはカルボキシアルキルカルボニル基を置換基として有するビタミンＤ誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来２位に置換基を有するビタミンＤ誘導体としては、たとえば特公平６−２３１８５号公報記載の２位に置換低級アルコキシ基を有するビタミンＤが知られており、これらの化合物の中には骨粗鬆症治療薬として有望な化合物も存在する。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、従来２位に置換基を有するビタミンＤ誘導体の有効な測定法は存在しなかった。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、一般式（Ｉ）
【化４】

（式中、Ｒ_１，Ｒ_２は、同一または異なって水素原子または−ＣＯ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２Ｈを示し、ｎは１から５の整数を示す。ただしＲ_１，Ｒ_２が同時に水素原子であることはない）で表される化合物が２位に置換基を有するビタミンＤ誘導体の測定において有用な抗体を作成するためのハプテンとして有用であることを見いだし本発明を完成した。
【０００５】
本発明の化合物は特に化合物（１）
【化５】

化合物のハプテンとして有用である。
【０００６】
本発明の化合物のうち一般式（ＩＩ）
【化６】

（式中、ｎは１から５の整数を示す）で表される化合物および、一般式（ＩＩＩ）
【化７】

（式中、ｎは１から５の整数を示す）で表される化合物は、特にハプテンとして有用であり、なかでもｎが３である化合物が特に好ましい。
【０００７】
本発明の化合物のうち一般式（ＩＩＩ）で表される化合物はたとえば以下のようにして合成できる。
【化８】

（式中、Ｒ_３はカルボキシル基またはカルボキシル基に変換し得る基たとえばアルコキシカルボニル基、好ましくは２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を示し、Ａ_１，Ａ_２，Ａ_３はそれぞれ保護基を示し、ｎは１から５の整数を示す。）
【０００８】
すなわち、化合物（１）の２５位以外の水酸基を適当な保護基で保護したのち、Ｒ_３（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＨ（Ｒ_３はカルボキシル基またはカルボキシル基に変換し得る基たとえばアルコキシカルボニル基、好ましくは２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を示し、ｎは１から５の整数を示す）で表される化合物あるいはその酸ハロゲン化物、活性エステル体などの反応性の誘導体を反応させ、化合物（３）を得る。用いられる保護基は本縮合反応に不活性で、保護、脱保護の過程でビタミンＤ骨格に影響を与えないものであればかまわないが、好ましくは置換シリル基、さらに好ましくはｔ−ブチルジメチルシリル基があげられる。化合物（３）を脱保護反応に付すことにより本発明の化合物（ＩＩＩ）が得られる。
【０００９】
また、本発明の化合物のうち一般式（ＩＩ）で表される化合物はたとえば以下のようにして合成できる。
【化９】

（式中、Ｒ_４はカルボキシル基またはカルボキシル基に変換し得る基たとえばアルコキシカルボニル基、好ましくは２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を示し、ｎは１から５の整数を示す。）
【００１０】
すなわち、プロビタミンＤ_３誘導体（化合物（４））にＲ_４（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＨ（Ｒ_４はカルボキシル基またはカルボキシル基に変換し得る基たとえばアルコキシカルボニル基、好ましくは２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を示し、ｎは１から５の整数を示す）で表される化合物あるいはその酸ハロゲン化物、活性エステル体などの反応性の誘導体を反応させ、化合物（５）を得る。得られた化合物（５）を常法により、光照射、熱異性化反応に付すことにより、本発明の化合物（ＩＩ）が得られる。
【００１１】
【実施例】
以下に実施例により本発明をさらに詳細に説明する。
【００１２】
実施例１ 化合物（６）の合成
【化１０】

化合物（１）
【化１１】

６０ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド３ｍｌに溶解し、ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド１６６ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）、イミダゾール１５０ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）を加えてＡｒ雰囲気下、３時間室温で攪拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、水で洗浄。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧留去により得られた残査を分取ＴＬＣ（シリカゲル 酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製し無色油状の化合物（６） ７６ｍｇ（７５％）を得た。
【００１３】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ： ０．０３−０．１０（１８Ｈ，ｍ）， ０．５３（３Ｈ，ｓ）， ０．８７−０．９２（３０Ｈ，ｍ）， １．２１（６Ｈ，ｓ）， ３．２１−３．２９（１Ｈ，ｍ）， ３．６３−３．７８（４Ｈ，ｍ）， ４．０８−４．３０（２Ｈ，ｍ）， ４．９８（１Ｈ，ｓ）， ５．２７（１Ｈ，ｓ）， ６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）， ６．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）
ＵＶ（ＥｔＯＨ）ｎｍ： λｍａｘ ２６４， λｍｉｎ ２２８
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ^−１： ３４３０（ｂｒ）， ２９８０， ２９５０， ２９１０， ２８８０， １４８０， １２７０， １１２０， ８５０， ７９０
ＭＳ（ｍ／ｚ）： ８３２（Ｍ^＋），７３（１００％）
【００１４】
実施例２ 化合物（７）の合成
【化１２】

グルタル酸モノトリクロロエチルエステル １１１ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン３ｍｌに溶解し、トリエチルアミン ６９．５μｌ（０．５０ｍｍｏｌ）、２，４，６−トリクロロベンゾイルクロライド１５４．８μｌ（０．５ｍｍｏｌ）を加えてＡｒ雰囲気下、３時間室温で攪拌した。この反応混合物を 化合物（６）のテトラヒドロフラン ２ｍｌ溶液に室温で滴下し、ジメチルアミノピリジン ５０ｍｇを加えてＡｒ雰囲気下、３時間室温で攪拌した。さらにグルタル酸モノトリクロロエチルエステル １４０ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン ６９．５μｌ（０．５０ｍｍｏｌ）、２，４，６−トリクロロベンゾイルクロライド１５４．８μｌ（０．５ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン ３ｍｌより同様に調整した無水物を加えて１時間４０℃で加熱攪拌後、ジメチルアミノピリジン ２０ｍｇを加え１４時間室温で攪拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、水で洗浄。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧留去により得られた残査を分取ＴＬＣ（シリカゲル 酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製し無色油状の化合物（７） ３０ｍｇを得、原料化合物（６） ５１ｍｇを回収した。（収率 ９７％ 但し原料回収分を除く）
【００１５】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ： ０．０３−０．１０（１８Ｈ，ｍ）， ０．５３（３Ｈ，ｓ）， ０．８７−０．９２（３０Ｈ，ｍ）， １．４３（６Ｈ，ｓ）， ２．３３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）， ２．５３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）， ３．２１−３．２９（１Ｈ，ｍ）， ３．６０−３．７８（４Ｈ，ｍ）， ４．１７−４．２３（２Ｈ，ｍ）， ４．７５（２Ｈ，ｓ）， ４．９８（１Ｈ，ｓ）， ５．２７（１Ｈ，ｓ）， ６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）， ６．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）
ＵＶ（ＥｔＯＨ）ｎｍ： λｍａｘ ２６０， λｍｉｎ ２２３
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ^−１： ２９５０， ２９３０， ２８９０， ２８６０， １７６０， １７３０， １４７０， １３８０， １２５０， １１３０， ９３０， ８４０， ７８０， ７３０
ＭＳ（ｍ／ｚ）： １０８０（Ｍ^＋＋２）， １０７７（Ｍ^＋＋１）
【００１６】
実施例３ 化合物（８）の合成
【化１３】

化合物（７） ３０ｍｇ（０．０２８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン４ｍｌに溶解し、１Ｍ ＮａＨ_２ＰＯ_４ ２ｍｌ、活性化した亜鉛粉末８００ｍｇを加えてＡｒ雰囲気下、激しく３時間室温で攪拌した。亜鉛粉末を１ｇさらに加え２時間攪拌した。反応混合物をろ過後、酢酸エチルを加え、水で洗浄。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧留去により得られた残査を分取ＴＬＣ（シリカゲル ジクロロメタン：エタノール＝１０：１）で精製し無色油状の化合物（８） ２１ｍｇ（８０％）を得た。
【００１７】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ： ０．０４−０．１０（１８Ｈ，ｍ）， ０．５３（３Ｈ，ｓ）， ０．７９−０．８９（３０Ｈ，ｍ）， １．４２（６Ｈ，ｓ）， ２．３１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）， ２．４２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）， ３．１５−３．２２（１Ｈ，ｍ）， ３．５７−３．７２（４Ｈ，ｍ）， ４．１２−４．２０（２Ｈ，ｍ）， ４．９４（１Ｈ，ｓ）， ５．２２（１Ｈ，ｓ）， ５．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ）， ６．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ）
ＵＶ（ＥｔＯＨ）ｎｍ： λｍａｘ ２６２， λｍｉｎ ２２１
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ^−１： ２９６０， ２９５０， ２９００， ２８７０， １７４０， １７２０， １４８０， １２６０， １１１０， ８４０，
７８０
【００１８】
実施例４ 化合物（９）の合成
【化１４】

化合物（８） ５０ｍｇ（０．０５３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン ３ｍｌに溶解し、１Ｍ テトラブチルアンモニウムフルオリド（テトラヒドロフラン溶液） ７９３μｌ（０．７９３ｍｍｏｌ）を加えてＡｒ雰囲気下、１６時間４０℃で加熱攪拌した。反応混合物に、酢酸エチルを加え、水で洗浄。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧留去により得られた残査を分取ＴＬＣ（シリカゲル
ジクロロメタン：エタノール＝１０：１）で精製し無色油状の化合物（９） ２０ｍｇ（６３％）を得た。
【００１９】
^−１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ： ０．５５（３Ｈ，ｓ）， ０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）， １．４２（６Ｈ，ｓ）， ２．３１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）， ２．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）， ３．２３−３．３０（１Ｈ，ｍ）， ３．５７−３．９２（４Ｈ，ｍ）， ４．２１−４．２７（１Ｈ，ｍ）， ４．２７−４．３３（１Ｈ，ｍ）， ５．０８（１Ｈ，ｓ）， ５．４９（１Ｈ，ｓ）， ６．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ）， ６．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ）
ＵＶ（ＥｔＯＨ）ｎｍ： λｍａｘ ２６４， λｍｉｎ ２２８
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｃｍ^−１： ３４５０（ｂｒ）， ２９５０， ２８６０， １７３０， １４７０， １０７０， ９２０， ７６０
ＭＳ（ｍ／ｚ）： ６０４（Ｍ^＋）， ５５（１００％）
【００２０】
実施例５ 化合物（１０）の合成
【化１５】

Ａｒ雰囲気下、−２０℃で化合物（４）
【化１６】

４９０．７ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン５ｍｌ、ピリジン０．５ｍｌの混合液に、化合物（１１）
【化１７】

２８２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）の５ｍｌテトラヒドロフラン溶液を２０分かけて滴下した。同温度で１時間攪拌後、さらに同条件で化合物（１１） １４１ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）の４ｍｌテトラヒドロフラン溶液を滴下し、１時間攪拌した。反応液に酢酸エチル５０ｍｌを加え、氷水２０ｍｌで反応を終了した。分液ロートに移し水層を除いた。有機層は希塩酸、重炭酸水、食塩水、各５０ｍｌで２回ずつずつ洗浄した。無水硫酸ナトリウムで脱水後、濾過し溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１：０〜２：１）で粗精製した。化合物（１０）の粗精製物４４４ｍｇ（収率５９．８％）および原料化合物（４） ９４ｍｇ（回収率１９％）を得た。得られた化合物（１０）の粗精製物はさらにシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝３：１〜２：１）で精製し、化合物（１０） １５６．７ｍｇ（収率２１．３％）を得た。
【００２１】
【図１】
【００２２】
実施例６ 化合物（１２）の合成
【化１８】

化合物（１０） １５０ｍｇ、テトラヒドロフラン２３０ｍｌの混合液に、２００ｍｌバイコールフィルター中、氷冷下、Ａｒ雰囲気下で高圧水銀灯の光を９０秒間照射した。反応液をテトラヒドロフラン５０ｍｌで共洗して３００ｍｌフラスコ中に移しかえ、１５０分間還流した。溶媒を留去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：酢酸エチル＝４：１〜３：１）で精製し、化合物（１２） ３５．０ｍｇ（収率２３．３％）を得た。
【００２３】
【図２】
【００２４】
実施例７ 化合物（１３）の合成
【化１９】

化合物（１２） ３５．０ｍｇのテトラヒドロフラン４．５ｍｌ、水１．８ｍｌ、１Ｍ−ＮａＨ_２ＰＯ_４ ０．９ｍｌの混合液に氷冷下、Ａｒ雰囲気下で亜鉛末９００ｍｇを加えて１時間反応した。反応液を水５０ｍｌ中に展開し、濾過した。濾液に６Ｎ−ＨＣｌ ４ｍｌ、ジクロロメタン５０ｍｌを加え、有機層を分取した。有機層を水３０ｍｌで洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、濃縮乾固し、化合物（１３） ２３．２ｍｇ（収率８０．７％）を得た。
【００２５】
【図３】
【００２６】
ＵＶ（ＭｅＯＨ）ｎｍ： λｍａｘ ２６３．８
ＩＲｃｍ^−１： ３４１３，２９４７，２９２９，２９２６，２８７３，１７３２，１４５８，１３７７，１１９６，１１４９，１１１１，１０７０，９１４
【００２７】
【発明の効果】
本発明の化合物は、２位に置換基を有するビタミンＤ誘導体の測定において有用な抗体を作成するのに有用なハプテンである。本発明の化合物をハプテンとして得られた抗体を用いるエンザイムイムノアッセイ、ラジオイムノアッセイなどの方法により、微量なビタミンＤを測定することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】化合物（１０）のＮＭＲチャートである。
【図２】化合物（１２）のＮＭＲチャートである。
【図３】化合物（１３）のＮＭＲチャートである。

Claims (3)

1. 一般式（Ｉ）
   

   

   （式中、Ｒ_１，Ｒ_２は、同一または異なって水素原子または−ＣＯ（ＣＨ_２）_ｎＣＯ_２Ｈを示し、ｎは１から５の整数を示す。ただしＲ_１，Ｒ_２が同時に水素原子であることはない）で表される化合物。
2. 一般式（ＩＩ）
   

   

   （式中、ｎは１から５の整数を示す）で表される化合物。
3. 一般式（ＩＩＩ）
   

   

   （式中、ｎは１から５の整数を示す）で表される化合物。

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