JP3494592B2 - 腫瘍治療剤 - Google Patents
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Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、腫瘍治療剤に関す
る。さらに詳しくは、本発明は、モノクローナル抗体を
含有する気管支組織または腺構造組織由来の腫瘍の治療
用薬剤に関する。 【０００２】 【従来の技術】ねずみのモノクローナル抗体１７−１Ａ
の殺腫瘍活性は裸のねずみおよびヒトを特徴としてい
る。例えば、デイ．ヘルリン（D. Herlyn)およびエッ
チ. コプロウスキイ(H. Koprowski)の" ＩｇＧ２ａモノ
クローナル抗体のエフェクター細胞との相互作用による
ヒト腫瘍生長の抑制”，プロシーディング オブ ナシ
ョナル アカデミー サイエンス．ＵＳＡ (Proc. Nat
l. Acad. Sci. USA) 79巻 4761-4765頁参照。ＭＡｂ１
７−１Ａの投与が、結腸直腸または膵臓がんの部分的ま
たは完全な退化を生じた多数の事例が、報告されてい
る。エッチ．エフ．シアース（H. F. Sears)等の“胃腸
腺がんをもつ患者に関するモノクローナル抗体免疫療法
の効果”，ジャーナル オブ バイオロジカル レスポ
ンデント モデル（J. Biol. Resp. Mod. ３巻 138-150
頁；エッチ．エフ．シアース等の“胃腸腺がんに対する
ねずみモノクローナル抗体チトチキシック (cytotixic)
のフェースII臨床試験”（1985年) ，キャンサー リサ
ーチ (Canser Res.) 45 巻 5910-5913頁参照。一般に、
抗体は５００μｇ以下の単一投与として投与されてい
る。 【０００３】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、療法
過程に亘り抗体の維持された高プラズマ水準を与え腫瘍
部位に抗体の増進された接近を与える断片的投与量で抗
体を投与するために、気管支組織ならびに甲状腺、乳
腺、汗腺および外分泌および内分泌膵臓を含む種々の腺
構造組織由来の腫瘍の治療用薬剤を提供することにあ
る。 【０００４】 【課題を解決するための手段】本発明の要旨は、 〔１〕 １７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合す
るモノクローナル抗体を含有してなり、非経口的な複数
回投与に適する、胃腸腫瘍以外の気管支組織または腺構
造組織由来の腫瘍の治療用薬剤、 〔２〕 手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者
における胃腸腫瘍以外の気管支組織または腺構造組織由
来の腫瘍の治療において使用される前記〔１〕記載の薬
剤、 〔３〕 １７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合す
るモノクローナル抗体を少なくとも１００ｍｇ含有して
なり、非経口的な複数回投与、２回めの投与またはその
後の投与に適する、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織
由来の腫瘍の治療用薬剤、 〔４〕 １７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合す
るモノクローナル抗体を全用量で少なくとも０．１〜５
ｇ含有してなり、非経口的な複数回投与、２回めの投与
またはその後の投与に適する、胃腸腫瘍以外の１７−１
Ａ陽性組織由来の腫瘍の治療用薬剤、 〔５〕 手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者
における、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由来の腫
瘍の治療において使用される前記〔３〕記載の薬剤、〔６〕 手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者
における、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由来の腫
瘍の治療において使用される前記〔４〕記載の薬剤、 〔７〕 腫瘍が由来する１７−１Ａ陽性組織が気管支組
織または腺構造組織である前記〔３〕記載の薬剤、 およ
び 〔８〕 腫瘍が由来する１７−１Ａ陽性組織が気管支組
織または腺構造組織である前記〔４〕記載の薬剤、に関
する。 【０００５】 【発明の実施の形態】本発明は胃腸腫瘍に関連した抗原
１７−１Ａに対するねずみモノクローナル抗体の複数
回、高投与量を使用する胃腸腫瘍の免疫療法の方法に関
するものである。この方法は胃腸腫瘍に悩む患者に抗原
１７−１Ａに対してねずみモノクローナル抗体を約０．
１〜約５ｇの総全投与量を約１００ｍｇ以上多数回、連
続投与量で投与することからなる。ねずみ抗体の各投与
量は循環する抗体の“連続的”高水準を達成、かつ維持
するため１〜３日間隔に週間隔まで投与できる。２以上
のねずみ抗−１７−１Ａ抗体の混合物が投与できる。多
数回、高投与量療法は化学療法、放射線療法または外科
に対しアジュバント療法として実施できる。 【０００６】高投与量のねずみ抗体療法は患者に十分耐
えられる。更に、処置したヒトに一般に発現する抗−ね
ずみ抗体反応は驚くべきことに反覆投与中にねずみ抗体
のプラズマ半減期を著しく変えることはない。従って、
抗体の高血液水準が、高投与量の連続注射により達成で
き血管内空間から腫瘍床に抗体の移行を増進し、従って
高濃度の治療抗体を作用位置に供給する。 【０００７】本発明は多くの胃腸腫瘍に関連した１７−
１Ａ抗原に対し反覆、高投与量のねずみ抗体による胃腸
腫瘍の療法に関するものである。本治療研究法は多数の
知見に基づいている。多段、高投与量で投与したねずみ
抗−１７−１Ａ抗体は一般に患者に十分耐えられる、多
くの共通側面効果は緩和な胃腸である。然しながら、ア
レルギー反応が若干の患者には反覆療法を制限する。更
に、ヒトの抗−ねずみ抗体反応が、ねずみ抗体により一
般に引き起こされるが、この反応は投与したねずみ抗体
の薬理動力学に著しくは影響しない。これは連続的、高
投与量の抗体が、提供されて抗体の連続的高プラズマ水
準を達成かつ維持できることを示す。抗体の高循環水準
の維持は静脈内区域から腫瘍への抗体の高循環水準の維
持は静脈内区域から腫瘍への抗体の移行を最適にし、従
って、一層効果的な抗−腫瘍作用のため抗体の腫瘍への
接近を増進する。更に、維持された高血液水準により腫
瘍細胞の細胞溶解を伝えた更に有効な抗体従属細胞に対
し作用位置で抗体の延長された高濃度に導かれる。 【０００８】本発明の方法に依れば、１７−１Ａ抗原に
対するねずみ抗体が胃腸腫瘍を有する患者に約０．１〜
５ｇ、好ましくは１〜５ｇの全投与量、および約１００
ｍｇ以上、好ましくは４００ｍｇ〜１ｇの反覆投与量で
投与される。抗体は非経口的に、好ましくは静脈点滴に
より投与される。抗体は一般に生理学的に容認された賦
形薬例えば通常の食塩水中に懸濁して投与される。抗体
の投与量は１〜３日の間隔ないし約１週間の間隔に亘っ
て与えられる。個々の患者に対する投薬量の処方は特に
患者の臨床状態および有害なアレルギー症またはアナフ
ラキー如何による。 【０００９】１７−１Ａに対するねずみの抗体は個々に
または２つ以上のねずみ抗−１７−１Ａ抗体の混合物
（カクテル）で投与できる。好ましくは、１７−１Ａに
対する異なるエピトープ特性を持つ抗−１７−１Ａ抗体
は添加剤または相乗効果的に抗腫瘍活性を増加するため
組合せで使用される。ねずみ抗体は原型の１７−１Ａ抗
体または以下に記載されるＭ７２，Ｍ７４，Ｍ７７およ
びＭ７９抗体の如き１７−１Ａ抗原の類似または異なる
エピトープと認められる他のねずみ抗体から選択でき
る。 【００１０】１７−１Ａ抗原に対するねずみ抗体は１７
−１Ａ抗原が関連する胃腸系の腫瘍の受動的免疫療法に
使用できる。実例は胃腸の腺がん、結腸直腸がんおよび
膵臓がんである。ねずみ抗体の処置は化学療法、放射線
療法および／または外科的処置を含め他の形態の療法に
アジュバントとなる。特に、ねずみ抗体療法は外科的排
除のできないミクロまたは小型転移に向けられるアジュ
バント療法として有用である。 【００１１】 【実施例】以下の実施例は、単に本発明を説明するもの
にすぎず、それにより本発明をなんら限定するものでは
ない。 【００１２】実施例１ 患者への投与 試験を２０人の患者に実施して１７−１Ａの反覆、高投
与量に対する患者の耐性を調査し、反覆投与に関するそ
の薬理動力学を調査し、このねずみの免疫グロブリンに
対するヒトの免疫反応（抗体）の特徴を与えた。 【００１３】患者集団 胃腸の悪性腫瘍をもつ２０人の患者（結腸１７、胃部
２、膵臓部１）を、患者が小中腫瘍の重荷即ち７０％
（カルノフスキー比率）以上の性能状態および客観的に
測定し得る病症の転位症を持つことをベースにして選択
した。研究は個々の患者の腫瘍標本により１７−１Ａ反
応性を証明するために実施した。２０人の患者のうち７
人は従前に化学療法を受けたが、１３／２０は転位症に
対する従前の治療を受けなかった。 【００１４】処置プロトコール 研究はバーミンガムのアラバマ大学、総合がんセンター
の臨床研究単位を実施した。通常の食塩水２５０ｍｌに
希釈した１７−１Ａの全投与量４００ｍｇを利用した全
抗体点滴を生命徴候を注意深くモニターしつつ３０分に
亘り注入した。全ての点滴液は全投与量の点滴液の投与
に先立って、０．７ｍｇの静脈内試験投与量で先行し次
いで３０分のモニターを行った。プロトコールには、累
進的に増加する数の週間点滴を受ける５患者個々の４群
の増加が包含される。即ち１群−５患者−単一点滴；２
群−２点滴による５患者−１日および８日；３群−３点
滴による５患者−１日、８日および１５日；４群−４点
滴による５患者−１日、８日、１５日および２２日。３
群の患者に毒性が示されたため、４点滴を受けた患者は
ないが、これらの５患者は２群に加えられ２点滴の治療
を与えた（１日および８日）。全患者は６週間続けら
れ、それらの最終点滴に続いて１週間尿検査、肝臓およ
び腎臓機能、血液数および臨床評価のモニターを行っ
た。 【００１５】薬理動力学 薬理動力学的分析を第１の５人の患者についてその単一
点滴の時期に実施し（１７−１Ａの先行接触はない）、
２点滴を受けた１０人の患者はその第２点滴の時期に研
究し（１人は１７−１Ａの先行接触）および３群の患者
はその第３点滴の時期に研究した（２人が、１７−１Ａ
の先行接触）。薬理動力学のため、血液試料を点滴以
前、点滴完了に際して直ちにおよび１／２，１，２，
４，１２，２４，４８，７２時間および８６時間に採取
した。ねずみ免疫グロブリン消失の一般的模型を確認す
るために、全薬理動力学研究を受けぬ点滴に関してスポ
ット試料を治療前、治療後１，２４時間および４８時間
に採取した。１７−１Ａのプラズマ水準をうさぎの抗−
マウスガンマグロブリンおよび放射線標識した
（125 Ｉ）親和力精製やぎ抗−マウスＩｇＧ，Ｆ（ａ
ｂ’）2 で被覆したラテックスビーズを利用する固相ラ
ジオメーターサンドイッチ検定を使用して定量した。プ
ラズマ中の１７−１Ａの濃度は通常のプラズマに希釈し
た１７−１Ａの既知濃度の標準曲線と比較した放射線標
識した抗−マウスＩｇＧ，Ｆ（ａｂ’）2 のラテックス
粒子結合量により定量した。この検定の感度は１．０ｎ
ｇ／ｍｌであった。 【００１６】ヒト抗−マウス抗体（ＨＡＭＡ）反応 各血清試料は各患者について各点滴以前および、次いで
週×６採取した。ヒトの抗−１７−１Ａの存在を定量す
るために使用した検定はラテックスビーズ被覆１７−１
Ａ、放射線標識した（ 125Ｉ）１７−１Ａ １μｇ試験
プラズマ１００μｌ（３００〜４００ｃｐｍ／ｎｇの比
活性）の同時培養を使用する“二重抗原”系〔ジ．アジ
ソン (G. Addison) およびシー．ヘール (C. Hale), Ho
rm. metab. Res. ３巻， 59-60頁 (1971年) 〕であっ
た。試料は室温で９０分培養し、ビーズで会合した放射
能を前記のパーコール (Percoll)によるビーズの遠心分
離により定量した〔エー．ロブグリオ (A. Lobuglio)
等, New Engl. J. Med., 309巻459-463頁 (1983年)
〕。プラズマによりビーズに結合した 125Ｉ−１７−
１Ａのｃｐｍは既知の 125Ｉ−１７−１Ａの比活性を使
用してプラズマの１７−１Ａ／ｍｌのｎｇに変換され
た。この検定は明らかに１７−１Ａ（ＩｇＧおよびＩｇ
Ｍ）に対する１以上の結合位置をもついずれの分子をも
検出する。正常な個人およびがん患者の検定結果は１７
−１Ａ接触以前は５±４ｎｇ／ｍｌのプラズマ（ｎ＝５
４）であってこの数値は０〜１６ｎｇ／ｍｌの範囲にあ
った。２０ｎｇ／ｍｌ以上の値が抗体反応として分類さ
れた。 【００１７】１７−１Ａモノクローナル抗体 モノクローナル抗体はセントコー社（Centocor, Inc.)
により通常の食塩水中１０ｍｇ／ｍｌの精製懸濁液とし
て提供された。それは使用前は４℃で保存された。プロ
トコールはセントコールスポサーＩＮＤ（第２１６８
番）で実施された。 【００１８】毒性 １７−１Ａ投与の逆効果を表１に要約した。 【００１９】 【表１】 【００２０】２点滴液を受けた４患者および３点滴液を
受けた３患者を包含する２０患者中１０患者が逆効果が
なかった。最も屡々観察された副作用は胃腸（９／２
０）で吐き気および嘔吐（４患者）または腹痛があった
り無かった下痢（７患者）を伴った。徴候は通常点滴の
１時間以内に始まり、２４時間以内続いた。それらは適
度−中位の厳しさで容易に抗−下痢薬の抗−吐剤により
調整された。胃腸の徴候の頻度が１７−１Ａ点滴の数に
は関係がなかった。１患者が、第２点滴の最中に紅潮お
よび頻拍の１回があったが、これは点滴速度を単に遅く
することにより消失した。この患者は点滴中にも先行点
滴にも他の副作用は無かった。 【００２１】２患者が著しい副作用があった。両患者と
もその第１および第２点滴（１日および８日）に関連し
た吐き気および嘔吐があった。彼等は１５日に１７−１
Ａの試験投薬量に耐え３０分に亘る観察に副作用が無か
った。治療点滴を次に開始したが両者はアナフラキシー
と判断される呼吸困難、頻拍および低血圧を現わした。
両点滴を直ちに停止（与えられた投薬量の１０％以下）
し、患者はコルチコステロイド、エピネフヒリンおよび
抗ヒスタミンによる治療に十分反応した。研究中の患者
は検尿、完全な血液数、腎臓または肝臓機能の異常性を
示さなかった。 【００２２】薬理動力学 各患者について連続プラズマ１７−１Ａ水準を分析しプ
ラズマ消失の１区分のモデルに適合することを見出し
た。曲線によるピークのプラズマ濃度、プラズマ半減期
および面積を表２に要約した。 【００２３】 【表２】 【００２４】アナフラキシー（過敏症反応）を持つ２患
者は１７−１Ａの全第３投薬量を受け入れず、従って、
薬理動力学の研究が無かった。従って、３患者のみが、
１７−１Ａに２先行抗体の接触を持つ群を形成した。結
果は全３群の患者に類似した。第３点滴に関する３患者
の研究は単一または第２点滴による患者の群より１７−
１Ａのやや低い血清濃度およびやや長い平均プラズマ半
減期があった。差異が余り大きくなく、かつ、群が少数
の患者で形成されたため、解釈は限定される。 【００２５】ヒトの抗−マウス抗体（ＨＡＷＡ）反応 治療に先行した患者の血清は 125Ｉ−１７−１Ａの被覆
したビーズを結合する能力は殆どまたは検出できなかっ
た表３に要約した如く、殆ど全ての患者は第１の１７−
１Ａ接触の２５日以内にＨＡＭＡを示した（１７／２
０）。多数（１１／２０）が８日までにＨＡＮＡを持ち
８／１１が１００ｎｇ／ｍｌ以上の値を持ち、２／１１
が１０００ｎｇ／ｍｌ以上の値を持った。ピークの値は
一般に１５日または２２日に示され、値は２９日までお
よび越えて降下した。１７−１Ａに１，２または３回の
接触を受けた患者は表４に示す如くＨＡＭＡ反応により
同程度であった。 【００２６】 【表３】 【００２７】 【表４】 【００２８】過敏症の２患者に興味があった。彼等は８
日に１０５５および２６４ｎｇ／ｍｌ、１５日に１７１
６および３７４５ｎｇ／ｍｌのＨＡＭＡ水準を有した。
彼等は吐き気および嘔吐（１日の点滴に有したものに類
似）を除いて逆作用なしに８日の点滴に耐性を持った
が、１５日にその第３点滴の時期に過敏症反応を呈し
た。副作用のない５人、胃腸徴候の３人、紅潮／頻拍の
１人、および過敏症の２人によってＨＡＭＡ水準が２０
ｎｇ／ｍｌ以上であった（高めた）時１１の点滴全てを
患者に投与した。患者で熱、たんぱく尿または腎臓障害
を示したものはない。 【００２９】また、これらの１１の点滴中９個に適当な
プラズマ試料が、１７−１Ａ抗体のピークのプラズマ濃
度およびプラズマ半減期の定量に利用できたことは興味
深い。これらの値は検出できるＨＡＭＡのない点滴以上
に実質的に差異はなかった。 【００３０】検討 １７−１Ａモノクローナル抗体４００ｍｇの反覆投与の
このＩ／II相の研究は多数の観察を提供している。一般
に、抗体の投与は第１または第２の点滴を受けた患者の
場合十分に許容された。軽い胃腸の症状は明らかに抗体
の点滴に関係があり、著しい臨床上の問題ではなった。
これらの症状の病因は不明であるが、これらは第３の点
滴に比較して患者の第１の点滴中全く屡々生じたためア
レルギー反応に関連するとは考えられない。これらは正
常な胃腸の粘膜に対するこの抗体の結合の能力に関係す
る〔エッチ．シアース（H. Sears) 等， Surg. Res. 31
巻145-150頁 (1981年) 〕。毎週３点滴を受けた患者５
名中２名は過敏症反応があった。潜在的に生命に脅威と
なるアレルギー反応の頻度により我々の試薬の４−投与
予定は阻止され１５日に抗体投与を必要とする処置予定
を中止された。 【００３１】薬理動力学研究は抗体のこの投薬量がかな
り低い投薬量で投与された他のマウスモノクローナル抗
体（放射線標識した）による観察〔エム．プリム (M. P
rimm) 等, J. Nucl. Med. 26巻, 1011-1025 (1985 年)
およびエム．ローゼンブルム(M. Rosenblum) 等, Cance
r Res. 45巻, 2982-2386 頁 (1985年) 〕に近似したプ
ラズマ消失曲線により１００〜２００μｇ／ｍｌのプラ
ズマ濃度を達成できることを示している。このプラズマ
半減期は８日までに１μｇ／ｍｌ以下のプラズマ濃度を
与えた。従って、１７−１Ａの実質的なプラズマ濃度の
維持は週１回より屡々多い投与を必要とする。先行研究
〔エム．プリム等, J. Nucl. Med. 26巻1011-1023頁 (1
985年) およびエス．ラーソン (S. Larson)等, J. Nuc
l. Med.24巻, 123-129 頁 (1983年) 〕はＨＡＭＡ反応
の出現はマウスＩｇの循環水準の烈しい変化に関連する
ことを示唆している。この現象の観察の発明者の不足は
若干意外である。然しながら、本発明者等の測定はプラ
ズマｍｌ当り結合１７−１Ａμｇに関して循環中に１０
０〜２００μｇ／ｍｌの濃度を容易に達成する１７−１
Ａの点滴により表わされることは注目すべきである。本
発明者らは最近発明者らのＨＡＭＡ検定を改良し全循環
ＨＡＭＡの定量を可能にしている。これにより患者の全
循環ＨＡＭＡが、１７−１Ａのこの大循環投薬量のわず
かな少留分に結合することができるか否かが明白にされ
るであろう。 【００３２】発明者らは他者により報告された〔アー
ル．シュロッフ (R. Schroff) 等,Cancer Res. 45 巻,
879-885 頁 (1985) 〕のような抗体点滴に先行して以前
に存在するヒトの抗−マウス抗体の証拠を見出せなかっ
た。発明者らは放射線を標識したモノクローナルマウス
抗−ヒトＦｃ抗体を使用した１７−１Ａ被覆のビーズに
結合したヒト免疫グロブリンを検出した検定を使用しヒ
ト抗−マウス抗体の検定を当初試みた。発明者らはモノ
クローナル抗体点滴に先行して正常な人およびがん患者
が、１７−１Ａ被覆ビーズに非特定的に結合した異なる
量のヒト免疫グロブリンを有することを見出した。この
結合は可溶性抗原により代表的な競争的な抑制を有せず
非−特定的現象でかつ抗体ではないと判断された。対照
として、１７−１Ａ被覆ビーズに結合した後期−予防注
射のプラズマ免疫グロブリンは容易に可溶性抗原により
抑制された。従って、本研究に使用した二重抗原検定方
式は１７−１Ａに対し一層明白に免疫反応を反映するも
のと考えられる。１７−１Ａの１以上の大投薬量の投与
にも拘わらず、このタンパク質に対するヒトの抗体反応
は８日までに屡々探知できる抗体と１５日および２２日
までに得られたかなりの水準の抗体により刺激された。
更に、研究は免疫グロブリンの亜綱および抗−特異型に
関してこの抗体反応を特徴づける途中にある。 【００３３】実施例２ １７−１Ａ抗原の生化学的お
よびエピトープ分析／１７−１Ａに対するモノクローナ
ル抗体の生産 材料および方法 細胞および組織 ヒトの結腸がん細胞系ＤＬＤ−１およびＷｉＤｒはロッ
クフィル，ＭＤのアメリカンタイプ カルチャー コレ
クションから得られた。結腸がん系ＨＴ−２９はジエ．
フォフ博士（J. Fogh), スローン ケッタリング イン
スチテュートフォア キャンサー リーサ, ＮＹ．から
提供を受けた。ヒトの組織は手術除去直後に液体窒素−
冷却イソペンタン中で瞬間冷却した。 【００３４】放射線標識および免疫沈殿 細胞（５×１０7 ）は前述の 125Ｉを使用したラクトパ
ーオキシダーゼ−介在の沃素化により表面−標識した。
ジエ．アール．エル．ピンク（J. R. L. Pink)およびエ
ー．チーグラー (A. Tiegler) (1979 年), Research M
ethods in immunology, アカデミック出版社, ＮＹ。Ｍ
Ａｂｓをタンパク質Ａ−セファロース（シグマ社，セン
トルイス，ｍｏ）に混合した免疫ソルベント (Immunoso
rbents)は標識した細胞リセート (lysates)に４℃で２
時間添加した。混合した材料は試料緩衝液中で沸騰して
溶出し、レムリー (Laemmli)によるＳＤＳ−ポリアクリ
ラミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により分析し
た。U. K. Laemmli, Nature, 227巻, 680-685 頁 (1970
年) 。 【００３５】ＭＡｂの選択 結腸がん組織は単一転位のため肝臓のロボトミーを受け
た５１才の老女性患者より得た。１７−１Ａの陽性の腫
瘍組織を注意深く分離し、ミンチし、均質化し、プラズ
マ膜をトウスター (Touster)らにより記載された (I. C
ell. Biol. 47巻, 604-618 頁 (1970年) 如く精製し
た。(C57BL/6×Balb/c) Ｆ１牝マウスからの脊髄細胞Ｐ
3 ×６３Ａｇ8.653 融解は標準方法〔ガルフル (Galfr
e) ら, Natur, 266巻, 550-552 頁〕を使用してボルデ
テーラ (Bordetella) 百日咳アジュバントと共にタンパ
ク質３ｍｇに相等する結腸がんプラズマ膜製剤の単一
ｉ．ｐ．注射後３日に実施した。融解後細胞はマウス腹
膜マクロファージを含む９６個のミクロタイターのプレ
ート中のＨＡＴ選択媒体（ヒポキサンチン，アミノプテ
リン，チミジン）中に加えた。ハイブリドの上澄液は予
防注射のため採取した肝臓転位を起した冷凍組織部分の
イムノパーオキシダーゼ汚染により選別した。転位の結
腸がん細胞および隣接する肝臓中の胆汁管と反応し肝臓
細胞と反応しない抗体は更に表５に列記した非−悪性上
皮組織のパネルについて試験した。この関係中１７−１
Ａ−類似の着色形態を示す抗体は限定した希釈により少
なくとも２倍のクローンを生じた。 【００３６】 【表５】 【００３７】免疫吸収 免疫沈降物はＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離し、トウビン
(Towbin) ら (Proc.Natl. Acad. Sci. USA, 76巻, 435
0-4354 頁 (1979年) により、ニトロセルロース膜〔シ
ュライヒエル (Schleicher) およびシュル (Schull),
ダッセル, ＦＲＧ〕に電気泳動的に移動され、かつ移動
した抗原は間接的イムノパーオキシダーゼ技術〔ビ．ホ
ルツマン (B. Holzmann)ら, J. Exp. Med, 161巻, 366-
377 頁 (1985年) 〕により視覚化した。 【００３８】流動サイトメーター分析 ＨＴ−２９細胞は氷上で未濃縮、１０×または５０×濃
縮上澄液のＭＡｂｓ，Ｍ７２，Ｍ７４，Ｍ７７またはＭ
７９により予備培養し、次いでビオチン化した１７−１
Ａ抗体（１０μｇ／ｍｌ）およびアビディン−フィコエ
リスリン〔ベクトン−ディキンソン (Becton-Dickinso
n, マウンテンビウ, ＣＡ）〕により培養した。蛍光像
をＥＰＩＣＳ−Ｖ〔クールター エレクトロニクス (Co
ulter Electronics, ハイアリーン, ＦＬ．）〕により
分析した。 【００３９】免疫組織化学 凍結した組織細片を調製し、本質的には他に記載された
間接的免疫パーオキシダーゼ技術により着色した。ゲッ
トリンガー (Gettlinger) ら, Inst. J. Cancer 35巻,
199-205 頁 (1985年) 。簡単に述べると、風乾した細片
（７μｍ）をアセトン中に１０分間固定し、ＭＡｂ（１
０μｇ／ｍｌまたは未希釈上澄液）で３０分間培養し、
ＰＢＳ中で洗浄し、ヒト血清２０％を含有するＰＢＳ中
に希釈したパーオキシダーゼ−共軛うさぎ抗−マウスＩ
ｇ抗血清〔ジアノバ (Dianova),ハンブルク，ＦＲＧ〕
に３０分間接触した。細片はＰＢＳ中で洗浄した後、
０．００１％Ｈ2 Ｏ2 を含有するｐＨ７．４の０．０２
Ｍの緩衝液中の０．００４％３−アミノ−９−エチルカ
ルバゾール中で２０分培養し、続いてマイヤーのヘマル
ム(Hemalum) により逆着色した。 【００４０】結果 １７−１Ａ Ａｇの生化学分析 １７−１Ａ Ａｇの当初の生化学分析は一つのヒト腫瘍
細胞系（ＨＴ−２９） に対してのみ行われるので、発明者らは表面ヨウ素化に
より二つの付加的ヒト結腸がん系に関して示された１７
−１Ａ Ａｇの性質を調査した。ＭＡｂ１７−１Ａによ
る沈殿は３者の細胞系、ＤＬＯ−１，ＷｉＤｒおよびＨ
Ｔ−２９において同一の単一タンパク質バンドを示し、
これは３７ＫＤの見掛の分子量をもってＳＤＳ−ＰＡＧ
Ｅ系に移動した。蛍光圏強度から判断されるように、３
細胞系から沈殿可能の抗原量は全く可変的で、結腸系Ｄ
ＬＤ−１は最高量の放射線標識抗原を与えた。電気泳動
に先行して２−メルカプトエタノールが沈殿に添加され
た還元条件下では３３ＫＤの明白なバンドが、３細胞系
の全てから得られた。更に、約４０ＫＤ成分の主要成分
もまたＨＴ−２９リセート中に時々見出された。このバ
ンドは明らかに不在かまたはＷｉＤｒ細胞から沈殿され
なかった。 【００４１】チュニカマイシン（２μｇ／ｍｌ）による
ＨＴ−２９細胞の２４時間培養は非還元条件で３０Ｋ
Ｄ、還元条件で２６ＫＤの新バンドの出現を与え、１７
−１ＡＡｇが２個の結合したグリコシル化の位置を示し
た。１７−１Ａの糖タンパク質の性質は更にニユラミニ
ダーゼによる１７−１Ａの沈殿の処理により実証され、
これは見掛け分子量の軽微な然も明白な還元を与えた。 【００４２】新ＭＡｂによる１７−１Ａのエピトープ分
析 １７−１Ａ Ａｇに対し向けられた新規の４ＭＡｂｓ
（Ｍ７２，Ｍ７４，Ｍ７７，Ｍ７９）が凍結した組織細
片について１７−１Ａ−類似の反応性に対し結腸がん転
位からの膜製剤により免疫したねずみから発生したハイ
ブリドーマの上澄液を選別することにより得られた。４
抗体の全ては当初の１７−１Ａ抗体に見られる同一分子
量のタンパク質を沈殿する。新規のＭＡｂｓにより確認
された抗原の同一性を確認するため、広範な免疫吸取分
析を実施し、それにより１７−１Ａ免疫沈殿がＳＤＳ−
ＰＡＧＥによる分離後にニトロセルロースに移行し新規
の４試薬により試験した。前文に示した如く、３７ＫＤ
タンパク質に結合した新規の４抗体はアイソタイプの配
合した対照ＭＡｂｓでは得られなかった。新規の４ＭＡ
ｂｓのエピトープ特異性を分析するためクロス−阻害試
験を実施した。流動血球計算分析においてビオチニル化
した１７−１Ａ抗体のＨＴ−２９細胞への結合は完全に
ＭＡｂｓＭ７２およびＭ７４（表６）による腫瘍細胞の
予備培養により阻害された。対象としてＭＡｂｓＭ７７
およびＭ７９は試験した全ての濃度においてビオチニル
化した１７−１Ａ抗体の著しい阻害活性を示さなかっ
た。発明者らは更にエピトープ特異性が抗体のイディオ
タイプに関係があるかどうかを分析した。全ＭＡｂｓは
やぎの１７−１Ａ抗体に対し発生した抗−イディオタイ
プの抗血清〔ウィスター研究所，フィラデルフィアのド
ロシイ ハーリン (DorothyHerlyn) 博士により提供さ
れた〕との反応性を分析した。抗−イディオタイプの抗
血清は交叉−阻害する２ＭＡｂｓ（Ｍ７２およびＭ７
４）と強く反応したが、ＭＡｂｓ Ｍ７７およびＭ７９
とは完全に反応しなかった。これらのデータはＭＡｂｓ
１７−１Ａ，Ｍ７２およびＭ７４は３７ＫＤ糖タンパ
ク質に関して同一または密接に関係したエピトープを認
めれているが、ＭＡｂｓ Ｍ７７およびＭ７９はこの抗
原に対し付加的エピトープを限定することを示してい
る。 【００４３】 【表６】【００４４】１７−１Ａ Ａｇの組織分布 直接免疫パーオキシダーゼ技術を用いることによって、
種々の正常ヒト器官および種々のヒトがん中に１７−１
Ａ Ａｇが同定された。同時に、新しい４つのＭＡｂが
平行組織部位に分析された。結腸組織における１７−１
Ａの発現については、正常な粘膜が試験された１４名の
結腸がん組織と同程度に染色されることが見出された。
また１７−１Ａ Ａｇは小腸の上皮内面、胆嚢、気管お
よび甲状腺、乳腺、汗腺、および外分泌および内分泌膵
臓を含む種々の腺構造上に明らかに検出された。更に、
１７−１Ａ Ａｇは腎臓の細管末端およびヘンレ (Henl
e)のループに、および肝臓の胆管（肝細胞でなく）によ
って発現することが見出された。 【００４５】胃においては、正常粘膜は普通、限定され
た区域に弱い染色が見出された。しかしながら、種々の
程度の小腸化生（胃粘膜中に小島状に存在する）５人の
患者について、これらの領域はＭＡｂ１７−１Ａおよび
４つの新しいＭＡｂによって強力に染色された。１７−
１Ａ Ａｇもまた、試験された９個の胃がんの全てに明
らかに発現された。 【００４６】検討 我々は１７−１Ａ Ａｇが非還元条件下でのＳＤＳ−Ｐ
ＡＧＥにおいて３７ＫＤの見掛分子量であるように移動
する糖タンパクであることを示した。３種の異なる結腸
がん細胞ラインとの比較分析では、非還元条件が用いら
れる場合、１７−１Ａ Ａｇの異種性を示さなかった。
１７−１Ａ沈殿を２−メルカプトエタノールで還元し、
ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる分離では、３３ＫＤのバンドが
表われた。これは試験した全ての細胞ラインについて見
出された。更に、４０ＫＤバンドは、ＤＬＤ−１細胞溶
解物中には主成分の１つとして、またＨＴ−２９細胞溶
解物中により低い水準で表われた。この４０ＫＤバンド
はしたがってＷｉＤｒ細胞からの溶解物には存在しなか
った。ＤＬＤ−１またはＨＴ−２９細胞からの沈殿物を
１回の実験で処理し、還元下または非還元下で並行した
条件で分析した場合、２−メルカプトエタノールの存在
下では３３および４０ＫＤの２つのバンドが、その不存
在下では３７ＫＤの１本のバンドが生じた。したがっ
て、１７−１ＡＡｇの還元では異なる電気泳動の移動度
を有する２種の新しい分子が生じている。分子内ジスル
フィド結合の存在によって、この特異な泳動の状態を説
明できるであろう。 【００４７】別法として、１７−１Ａ Ａｇは、非還元
条件下では同一の泳動挙動を示すタンパクの二量体とし
て実際には存在しているものと考えられる。ＷｉＤｒ溶
解物中に４０ＫＤの分子が存在しないということは、異
なる細胞ライン中のラクトパーオキシダーゼ介在ヨウ素
化に関するこのタンパク質の異なる親和性によって説明
できるであろう。代謝標識および架橋化学を用いる更に
別の分析が、上記の問題を解決するのに必要であろう。
ロス (Ross) 等は、３０ＫＤおよび４０ＫＤサブユニッ
トから成るＭＡｂ ＧＡ７３３によって定義されるがん
関連表面糖タンパクについて最近記述している。彼等
は、１７−１Ａ抗体は同じ抗原を認識するが、ＭＡｂ
ＧＡ７３３と異なる抗原決定基に結合することを示唆し
ている。ここで記述した抗体との直接の比較により、こ
れらの複数の抗原の関連性が明らかになるであろう。 【００４８】我々が得た４種の新規な抗１７−１Ａ Ａ
ｇ ＭＡｂは正常器官および腫瘍において、元の１７−
１Ａ抗体に匹敵する組織反応性を示した。これまでのと
ころ、試験された種々の組織において異なる抗原決定基
発現は見られていない。これらＭＡｂのうち２つ（Ｍ７
２およびＭ７４）は、交差ブロッキング実験によって判
断されるように、ＭＡｂ １７−１Ａ検出されるものと
緊密に関連した決定基を認識する。一方、ＭＡｂ−Ｍ７
７および−Ｍ７９は少なくとも１つの他の抗原決定基を
明らかに定義する。何故ならば、これらビオチニル化１
７−１Ａ抗体の結合を阻害しないからである。興味ある
ことに、これらＭＡｂの抗原決定基特異性はヤギ抗イデ
ィオタイプ抗血清との反応性と相関される。これらＭＡ
ｂは元の１７−１Ａ抗体と関連する生物学的活性を分析
するのに有用であろう。 【００４９】１７−１Ａ Ａｇは非悪性上皮器官内で広
く発現し、かつ１７−１Ａ陽性組織由来の大部分のがん
中にも存在する。正常組織および悪性組織間の発現の量
的差異は、同一患者由来の直結腸がんと正常粘膜の比較
組織化学分析においては証明されなかった。しかしなが
ら、この正常細胞および悪性細胞上のこの上皮性抗原の
構造上の異質性は、この分析では決定できなかった。 【００５０】当業者であれば通常の実験以外を用いるこ
となく、本明細書に記述した具体的態様に対する多くの
均等技術を認識し、または確立できるであろう。そのよ
うな均等物は本発明に含まれるものとする。 【００５１】 【発明の効果】本発明により、気管支組織ならびに甲状
腺、乳腺、汗腺および外分泌および内分泌膵臓を含む種
々の腺構造組織由来の腫瘍の治療用薬剤が提供される。
る。さらに詳しくは、本発明は、モノクローナル抗体を
含有する気管支組織または腺構造組織由来の腫瘍の治療
用薬剤に関する。 【０００２】 【従来の技術】ねずみのモノクローナル抗体１７−１Ａ
の殺腫瘍活性は裸のねずみおよびヒトを特徴としてい
る。例えば、デイ．ヘルリン（D. Herlyn)およびエッ
チ. コプロウスキイ(H. Koprowski)の" ＩｇＧ２ａモノ
クローナル抗体のエフェクター細胞との相互作用による
ヒト腫瘍生長の抑制”，プロシーディング オブ ナシ
ョナル アカデミー サイエンス．ＵＳＡ (Proc. Nat
l. Acad. Sci. USA) 79巻 4761-4765頁参照。ＭＡｂ１
７−１Ａの投与が、結腸直腸または膵臓がんの部分的ま
たは完全な退化を生じた多数の事例が、報告されてい
る。エッチ．エフ．シアース（H. F. Sears)等の“胃腸
腺がんをもつ患者に関するモノクローナル抗体免疫療法
の効果”，ジャーナル オブ バイオロジカル レスポ
ンデント モデル（J. Biol. Resp. Mod. ３巻 138-150
頁；エッチ．エフ．シアース等の“胃腸腺がんに対する
ねずみモノクローナル抗体チトチキシック (cytotixic)
のフェースII臨床試験”（1985年) ，キャンサー リサ
ーチ (Canser Res.) 45 巻 5910-5913頁参照。一般に、
抗体は５００μｇ以下の単一投与として投与されてい
る。 【０００３】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、療法
過程に亘り抗体の維持された高プラズマ水準を与え腫瘍
部位に抗体の増進された接近を与える断片的投与量で抗
体を投与するために、気管支組織ならびに甲状腺、乳
腺、汗腺および外分泌および内分泌膵臓を含む種々の腺
構造組織由来の腫瘍の治療用薬剤を提供することにあ
る。 【０００４】 【課題を解決するための手段】本発明の要旨は、 〔１〕 １７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合す
るモノクローナル抗体を含有してなり、非経口的な複数
回投与に適する、胃腸腫瘍以外の気管支組織または腺構
造組織由来の腫瘍の治療用薬剤、 〔２〕 手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者
における胃腸腫瘍以外の気管支組織または腺構造組織由
来の腫瘍の治療において使用される前記〔１〕記載の薬
剤、 〔３〕 １７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合す
るモノクローナル抗体を少なくとも１００ｍｇ含有して
なり、非経口的な複数回投与、２回めの投与またはその
後の投与に適する、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織
由来の腫瘍の治療用薬剤、 〔４〕 １７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合す
るモノクローナル抗体を全用量で少なくとも０．１〜５
ｇ含有してなり、非経口的な複数回投与、２回めの投与
またはその後の投与に適する、胃腸腫瘍以外の１７−１
Ａ陽性組織由来の腫瘍の治療用薬剤、 〔５〕 手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者
における、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由来の腫
瘍の治療において使用される前記〔３〕記載の薬剤、〔６〕 手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者
における、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由来の腫
瘍の治療において使用される前記〔４〕記載の薬剤、 〔７〕 腫瘍が由来する１７−１Ａ陽性組織が気管支組
織または腺構造組織である前記〔３〕記載の薬剤、 およ
び 〔８〕 腫瘍が由来する１７−１Ａ陽性組織が気管支組
織または腺構造組織である前記〔４〕記載の薬剤、に関
する。 【０００５】 【発明の実施の形態】本発明は胃腸腫瘍に関連した抗原
１７−１Ａに対するねずみモノクローナル抗体の複数
回、高投与量を使用する胃腸腫瘍の免疫療法の方法に関
するものである。この方法は胃腸腫瘍に悩む患者に抗原
１７−１Ａに対してねずみモノクローナル抗体を約０．
１〜約５ｇの総全投与量を約１００ｍｇ以上多数回、連
続投与量で投与することからなる。ねずみ抗体の各投与
量は循環する抗体の“連続的”高水準を達成、かつ維持
するため１〜３日間隔に週間隔まで投与できる。２以上
のねずみ抗−１７−１Ａ抗体の混合物が投与できる。多
数回、高投与量療法は化学療法、放射線療法または外科
に対しアジュバント療法として実施できる。 【０００６】高投与量のねずみ抗体療法は患者に十分耐
えられる。更に、処置したヒトに一般に発現する抗−ね
ずみ抗体反応は驚くべきことに反覆投与中にねずみ抗体
のプラズマ半減期を著しく変えることはない。従って、
抗体の高血液水準が、高投与量の連続注射により達成で
き血管内空間から腫瘍床に抗体の移行を増進し、従って
高濃度の治療抗体を作用位置に供給する。 【０００７】本発明は多くの胃腸腫瘍に関連した１７−
１Ａ抗原に対し反覆、高投与量のねずみ抗体による胃腸
腫瘍の療法に関するものである。本治療研究法は多数の
知見に基づいている。多段、高投与量で投与したねずみ
抗−１７−１Ａ抗体は一般に患者に十分耐えられる、多
くの共通側面効果は緩和な胃腸である。然しながら、ア
レルギー反応が若干の患者には反覆療法を制限する。更
に、ヒトの抗−ねずみ抗体反応が、ねずみ抗体により一
般に引き起こされるが、この反応は投与したねずみ抗体
の薬理動力学に著しくは影響しない。これは連続的、高
投与量の抗体が、提供されて抗体の連続的高プラズマ水
準を達成かつ維持できることを示す。抗体の高循環水準
の維持は静脈内区域から腫瘍への抗体の高循環水準の維
持は静脈内区域から腫瘍への抗体の移行を最適にし、従
って、一層効果的な抗−腫瘍作用のため抗体の腫瘍への
接近を増進する。更に、維持された高血液水準により腫
瘍細胞の細胞溶解を伝えた更に有効な抗体従属細胞に対
し作用位置で抗体の延長された高濃度に導かれる。 【０００８】本発明の方法に依れば、１７−１Ａ抗原に
対するねずみ抗体が胃腸腫瘍を有する患者に約０．１〜
５ｇ、好ましくは１〜５ｇの全投与量、および約１００
ｍｇ以上、好ましくは４００ｍｇ〜１ｇの反覆投与量で
投与される。抗体は非経口的に、好ましくは静脈点滴に
より投与される。抗体は一般に生理学的に容認された賦
形薬例えば通常の食塩水中に懸濁して投与される。抗体
の投与量は１〜３日の間隔ないし約１週間の間隔に亘っ
て与えられる。個々の患者に対する投薬量の処方は特に
患者の臨床状態および有害なアレルギー症またはアナフ
ラキー如何による。 【０００９】１７−１Ａに対するねずみの抗体は個々に
または２つ以上のねずみ抗−１７−１Ａ抗体の混合物
（カクテル）で投与できる。好ましくは、１７−１Ａに
対する異なるエピトープ特性を持つ抗−１７−１Ａ抗体
は添加剤または相乗効果的に抗腫瘍活性を増加するため
組合せで使用される。ねずみ抗体は原型の１７−１Ａ抗
体または以下に記載されるＭ７２，Ｍ７４，Ｍ７７およ
びＭ７９抗体の如き１７−１Ａ抗原の類似または異なる
エピトープと認められる他のねずみ抗体から選択でき
る。 【００１０】１７−１Ａ抗原に対するねずみ抗体は１７
−１Ａ抗原が関連する胃腸系の腫瘍の受動的免疫療法に
使用できる。実例は胃腸の腺がん、結腸直腸がんおよび
膵臓がんである。ねずみ抗体の処置は化学療法、放射線
療法および／または外科的処置を含め他の形態の療法に
アジュバントとなる。特に、ねずみ抗体療法は外科的排
除のできないミクロまたは小型転移に向けられるアジュ
バント療法として有用である。 【００１１】 【実施例】以下の実施例は、単に本発明を説明するもの
にすぎず、それにより本発明をなんら限定するものでは
ない。 【００１２】実施例１ 患者への投与 試験を２０人の患者に実施して１７−１Ａの反覆、高投
与量に対する患者の耐性を調査し、反覆投与に関するそ
の薬理動力学を調査し、このねずみの免疫グロブリンに
対するヒトの免疫反応（抗体）の特徴を与えた。 【００１３】患者集団 胃腸の悪性腫瘍をもつ２０人の患者（結腸１７、胃部
２、膵臓部１）を、患者が小中腫瘍の重荷即ち７０％
（カルノフスキー比率）以上の性能状態および客観的に
測定し得る病症の転位症を持つことをベースにして選択
した。研究は個々の患者の腫瘍標本により１７−１Ａ反
応性を証明するために実施した。２０人の患者のうち７
人は従前に化学療法を受けたが、１３／２０は転位症に
対する従前の治療を受けなかった。 【００１４】処置プロトコール 研究はバーミンガムのアラバマ大学、総合がんセンター
の臨床研究単位を実施した。通常の食塩水２５０ｍｌに
希釈した１７−１Ａの全投与量４００ｍｇを利用した全
抗体点滴を生命徴候を注意深くモニターしつつ３０分に
亘り注入した。全ての点滴液は全投与量の点滴液の投与
に先立って、０．７ｍｇの静脈内試験投与量で先行し次
いで３０分のモニターを行った。プロトコールには、累
進的に増加する数の週間点滴を受ける５患者個々の４群
の増加が包含される。即ち１群−５患者−単一点滴；２
群−２点滴による５患者−１日および８日；３群−３点
滴による５患者−１日、８日および１５日；４群−４点
滴による５患者−１日、８日、１５日および２２日。３
群の患者に毒性が示されたため、４点滴を受けた患者は
ないが、これらの５患者は２群に加えられ２点滴の治療
を与えた（１日および８日）。全患者は６週間続けら
れ、それらの最終点滴に続いて１週間尿検査、肝臓およ
び腎臓機能、血液数および臨床評価のモニターを行っ
た。 【００１５】薬理動力学 薬理動力学的分析を第１の５人の患者についてその単一
点滴の時期に実施し（１７−１Ａの先行接触はない）、
２点滴を受けた１０人の患者はその第２点滴の時期に研
究し（１人は１７−１Ａの先行接触）および３群の患者
はその第３点滴の時期に研究した（２人が、１７−１Ａ
の先行接触）。薬理動力学のため、血液試料を点滴以
前、点滴完了に際して直ちにおよび１／２，１，２，
４，１２，２４，４８，７２時間および８６時間に採取
した。ねずみ免疫グロブリン消失の一般的模型を確認す
るために、全薬理動力学研究を受けぬ点滴に関してスポ
ット試料を治療前、治療後１，２４時間および４８時間
に採取した。１７−１Ａのプラズマ水準をうさぎの抗−
マウスガンマグロブリンおよび放射線標識した
（125 Ｉ）親和力精製やぎ抗−マウスＩｇＧ，Ｆ（ａ
ｂ’）2 で被覆したラテックスビーズを利用する固相ラ
ジオメーターサンドイッチ検定を使用して定量した。プ
ラズマ中の１７−１Ａの濃度は通常のプラズマに希釈し
た１７−１Ａの既知濃度の標準曲線と比較した放射線標
識した抗−マウスＩｇＧ，Ｆ（ａｂ’）2 のラテックス
粒子結合量により定量した。この検定の感度は１．０ｎ
ｇ／ｍｌであった。 【００１６】ヒト抗−マウス抗体（ＨＡＭＡ）反応 各血清試料は各患者について各点滴以前および、次いで
週×６採取した。ヒトの抗−１７−１Ａの存在を定量す
るために使用した検定はラテックスビーズ被覆１７−１
Ａ、放射線標識した（ 125Ｉ）１７−１Ａ １μｇ試験
プラズマ１００μｌ（３００〜４００ｃｐｍ／ｎｇの比
活性）の同時培養を使用する“二重抗原”系〔ジ．アジ
ソン (G. Addison) およびシー．ヘール (C. Hale), Ho
rm. metab. Res. ３巻， 59-60頁 (1971年) 〕であっ
た。試料は室温で９０分培養し、ビーズで会合した放射
能を前記のパーコール (Percoll)によるビーズの遠心分
離により定量した〔エー．ロブグリオ (A. Lobuglio)
等, New Engl. J. Med., 309巻459-463頁 (1983年)
〕。プラズマによりビーズに結合した 125Ｉ−１７−
１Ａのｃｐｍは既知の 125Ｉ−１７−１Ａの比活性を使
用してプラズマの１７−１Ａ／ｍｌのｎｇに変換され
た。この検定は明らかに１７−１Ａ（ＩｇＧおよびＩｇ
Ｍ）に対する１以上の結合位置をもついずれの分子をも
検出する。正常な個人およびがん患者の検定結果は１７
−１Ａ接触以前は５±４ｎｇ／ｍｌのプラズマ（ｎ＝５
４）であってこの数値は０〜１６ｎｇ／ｍｌの範囲にあ
った。２０ｎｇ／ｍｌ以上の値が抗体反応として分類さ
れた。 【００１７】１７−１Ａモノクローナル抗体 モノクローナル抗体はセントコー社（Centocor, Inc.)
により通常の食塩水中１０ｍｇ／ｍｌの精製懸濁液とし
て提供された。それは使用前は４℃で保存された。プロ
トコールはセントコールスポサーＩＮＤ（第２１６８
番）で実施された。 【００１８】毒性 １７−１Ａ投与の逆効果を表１に要約した。 【００１９】 【表１】 【００２０】２点滴液を受けた４患者および３点滴液を
受けた３患者を包含する２０患者中１０患者が逆効果が
なかった。最も屡々観察された副作用は胃腸（９／２
０）で吐き気および嘔吐（４患者）または腹痛があった
り無かった下痢（７患者）を伴った。徴候は通常点滴の
１時間以内に始まり、２４時間以内続いた。それらは適
度−中位の厳しさで容易に抗−下痢薬の抗−吐剤により
調整された。胃腸の徴候の頻度が１７−１Ａ点滴の数に
は関係がなかった。１患者が、第２点滴の最中に紅潮お
よび頻拍の１回があったが、これは点滴速度を単に遅く
することにより消失した。この患者は点滴中にも先行点
滴にも他の副作用は無かった。 【００２１】２患者が著しい副作用があった。両患者と
もその第１および第２点滴（１日および８日）に関連し
た吐き気および嘔吐があった。彼等は１５日に１７−１
Ａの試験投薬量に耐え３０分に亘る観察に副作用が無か
った。治療点滴を次に開始したが両者はアナフラキシー
と判断される呼吸困難、頻拍および低血圧を現わした。
両点滴を直ちに停止（与えられた投薬量の１０％以下）
し、患者はコルチコステロイド、エピネフヒリンおよび
抗ヒスタミンによる治療に十分反応した。研究中の患者
は検尿、完全な血液数、腎臓または肝臓機能の異常性を
示さなかった。 【００２２】薬理動力学 各患者について連続プラズマ１７−１Ａ水準を分析しプ
ラズマ消失の１区分のモデルに適合することを見出し
た。曲線によるピークのプラズマ濃度、プラズマ半減期
および面積を表２に要約した。 【００２３】 【表２】 【００２４】アナフラキシー（過敏症反応）を持つ２患
者は１７−１Ａの全第３投薬量を受け入れず、従って、
薬理動力学の研究が無かった。従って、３患者のみが、
１７−１Ａに２先行抗体の接触を持つ群を形成した。結
果は全３群の患者に類似した。第３点滴に関する３患者
の研究は単一または第２点滴による患者の群より１７−
１Ａのやや低い血清濃度およびやや長い平均プラズマ半
減期があった。差異が余り大きくなく、かつ、群が少数
の患者で形成されたため、解釈は限定される。 【００２５】ヒトの抗−マウス抗体（ＨＡＷＡ）反応 治療に先行した患者の血清は 125Ｉ−１７−１Ａの被覆
したビーズを結合する能力は殆どまたは検出できなかっ
た表３に要約した如く、殆ど全ての患者は第１の１７−
１Ａ接触の２５日以内にＨＡＭＡを示した（１７／２
０）。多数（１１／２０）が８日までにＨＡＮＡを持ち
８／１１が１００ｎｇ／ｍｌ以上の値を持ち、２／１１
が１０００ｎｇ／ｍｌ以上の値を持った。ピークの値は
一般に１５日または２２日に示され、値は２９日までお
よび越えて降下した。１７−１Ａに１，２または３回の
接触を受けた患者は表４に示す如くＨＡＭＡ反応により
同程度であった。 【００２６】 【表３】 【００２７】 【表４】 【００２８】過敏症の２患者に興味があった。彼等は８
日に１０５５および２６４ｎｇ／ｍｌ、１５日に１７１
６および３７４５ｎｇ／ｍｌのＨＡＭＡ水準を有した。
彼等は吐き気および嘔吐（１日の点滴に有したものに類
似）を除いて逆作用なしに８日の点滴に耐性を持った
が、１５日にその第３点滴の時期に過敏症反応を呈し
た。副作用のない５人、胃腸徴候の３人、紅潮／頻拍の
１人、および過敏症の２人によってＨＡＭＡ水準が２０
ｎｇ／ｍｌ以上であった（高めた）時１１の点滴全てを
患者に投与した。患者で熱、たんぱく尿または腎臓障害
を示したものはない。 【００２９】また、これらの１１の点滴中９個に適当な
プラズマ試料が、１７−１Ａ抗体のピークのプラズマ濃
度およびプラズマ半減期の定量に利用できたことは興味
深い。これらの値は検出できるＨＡＭＡのない点滴以上
に実質的に差異はなかった。 【００３０】検討 １７−１Ａモノクローナル抗体４００ｍｇの反覆投与の
このＩ／II相の研究は多数の観察を提供している。一般
に、抗体の投与は第１または第２の点滴を受けた患者の
場合十分に許容された。軽い胃腸の症状は明らかに抗体
の点滴に関係があり、著しい臨床上の問題ではなった。
これらの症状の病因は不明であるが、これらは第３の点
滴に比較して患者の第１の点滴中全く屡々生じたためア
レルギー反応に関連するとは考えられない。これらは正
常な胃腸の粘膜に対するこの抗体の結合の能力に関係す
る〔エッチ．シアース（H. Sears) 等， Surg. Res. 31
巻145-150頁 (1981年) 〕。毎週３点滴を受けた患者５
名中２名は過敏症反応があった。潜在的に生命に脅威と
なるアレルギー反応の頻度により我々の試薬の４−投与
予定は阻止され１５日に抗体投与を必要とする処置予定
を中止された。 【００３１】薬理動力学研究は抗体のこの投薬量がかな
り低い投薬量で投与された他のマウスモノクローナル抗
体（放射線標識した）による観察〔エム．プリム (M. P
rimm) 等, J. Nucl. Med. 26巻, 1011-1025 (1985 年)
およびエム．ローゼンブルム(M. Rosenblum) 等, Cance
r Res. 45巻, 2982-2386 頁 (1985年) 〕に近似したプ
ラズマ消失曲線により１００〜２００μｇ／ｍｌのプラ
ズマ濃度を達成できることを示している。このプラズマ
半減期は８日までに１μｇ／ｍｌ以下のプラズマ濃度を
与えた。従って、１７−１Ａの実質的なプラズマ濃度の
維持は週１回より屡々多い投与を必要とする。先行研究
〔エム．プリム等, J. Nucl. Med. 26巻1011-1023頁 (1
985年) およびエス．ラーソン (S. Larson)等, J. Nuc
l. Med.24巻, 123-129 頁 (1983年) 〕はＨＡＭＡ反応
の出現はマウスＩｇの循環水準の烈しい変化に関連する
ことを示唆している。この現象の観察の発明者の不足は
若干意外である。然しながら、本発明者等の測定はプラ
ズマｍｌ当り結合１７−１Ａμｇに関して循環中に１０
０〜２００μｇ／ｍｌの濃度を容易に達成する１７−１
Ａの点滴により表わされることは注目すべきである。本
発明者らは最近発明者らのＨＡＭＡ検定を改良し全循環
ＨＡＭＡの定量を可能にしている。これにより患者の全
循環ＨＡＭＡが、１７−１Ａのこの大循環投薬量のわず
かな少留分に結合することができるか否かが明白にされ
るであろう。 【００３２】発明者らは他者により報告された〔アー
ル．シュロッフ (R. Schroff) 等,Cancer Res. 45 巻,
879-885 頁 (1985) 〕のような抗体点滴に先行して以前
に存在するヒトの抗−マウス抗体の証拠を見出せなかっ
た。発明者らは放射線を標識したモノクローナルマウス
抗−ヒトＦｃ抗体を使用した１７−１Ａ被覆のビーズに
結合したヒト免疫グロブリンを検出した検定を使用しヒ
ト抗−マウス抗体の検定を当初試みた。発明者らはモノ
クローナル抗体点滴に先行して正常な人およびがん患者
が、１７−１Ａ被覆ビーズに非特定的に結合した異なる
量のヒト免疫グロブリンを有することを見出した。この
結合は可溶性抗原により代表的な競争的な抑制を有せず
非−特定的現象でかつ抗体ではないと判断された。対照
として、１７−１Ａ被覆ビーズに結合した後期−予防注
射のプラズマ免疫グロブリンは容易に可溶性抗原により
抑制された。従って、本研究に使用した二重抗原検定方
式は１７−１Ａに対し一層明白に免疫反応を反映するも
のと考えられる。１７−１Ａの１以上の大投薬量の投与
にも拘わらず、このタンパク質に対するヒトの抗体反応
は８日までに屡々探知できる抗体と１５日および２２日
までに得られたかなりの水準の抗体により刺激された。
更に、研究は免疫グロブリンの亜綱および抗−特異型に
関してこの抗体反応を特徴づける途中にある。 【００３３】実施例２ １７−１Ａ抗原の生化学的お
よびエピトープ分析／１７−１Ａに対するモノクローナ
ル抗体の生産 材料および方法 細胞および組織 ヒトの結腸がん細胞系ＤＬＤ−１およびＷｉＤｒはロッ
クフィル，ＭＤのアメリカンタイプ カルチャー コレ
クションから得られた。結腸がん系ＨＴ−２９はジエ．
フォフ博士（J. Fogh), スローン ケッタリング イン
スチテュートフォア キャンサー リーサ, ＮＹ．から
提供を受けた。ヒトの組織は手術除去直後に液体窒素−
冷却イソペンタン中で瞬間冷却した。 【００３４】放射線標識および免疫沈殿 細胞（５×１０7 ）は前述の 125Ｉを使用したラクトパ
ーオキシダーゼ−介在の沃素化により表面−標識した。
ジエ．アール．エル．ピンク（J. R. L. Pink)およびエ
ー．チーグラー (A. Tiegler) (1979 年), Research M
ethods in immunology, アカデミック出版社, ＮＹ。Ｍ
Ａｂｓをタンパク質Ａ−セファロース（シグマ社，セン
トルイス，ｍｏ）に混合した免疫ソルベント (Immunoso
rbents)は標識した細胞リセート (lysates)に４℃で２
時間添加した。混合した材料は試料緩衝液中で沸騰して
溶出し、レムリー (Laemmli)によるＳＤＳ−ポリアクリ
ラミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により分析し
た。U. K. Laemmli, Nature, 227巻, 680-685 頁 (1970
年) 。 【００３５】ＭＡｂの選択 結腸がん組織は単一転位のため肝臓のロボトミーを受け
た５１才の老女性患者より得た。１７−１Ａの陽性の腫
瘍組織を注意深く分離し、ミンチし、均質化し、プラズ
マ膜をトウスター (Touster)らにより記載された (I. C
ell. Biol. 47巻, 604-618 頁 (1970年) 如く精製し
た。(C57BL/6×Balb/c) Ｆ１牝マウスからの脊髄細胞Ｐ
3 ×６３Ａｇ8.653 融解は標準方法〔ガルフル (Galfr
e) ら, Natur, 266巻, 550-552 頁〕を使用してボルデ
テーラ (Bordetella) 百日咳アジュバントと共にタンパ
ク質３ｍｇに相等する結腸がんプラズマ膜製剤の単一
ｉ．ｐ．注射後３日に実施した。融解後細胞はマウス腹
膜マクロファージを含む９６個のミクロタイターのプレ
ート中のＨＡＴ選択媒体（ヒポキサンチン，アミノプテ
リン，チミジン）中に加えた。ハイブリドの上澄液は予
防注射のため採取した肝臓転位を起した冷凍組織部分の
イムノパーオキシダーゼ汚染により選別した。転位の結
腸がん細胞および隣接する肝臓中の胆汁管と反応し肝臓
細胞と反応しない抗体は更に表５に列記した非−悪性上
皮組織のパネルについて試験した。この関係中１７−１
Ａ−類似の着色形態を示す抗体は限定した希釈により少
なくとも２倍のクローンを生じた。 【００３６】 【表５】 【００３７】免疫吸収 免疫沈降物はＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離し、トウビン
(Towbin) ら (Proc.Natl. Acad. Sci. USA, 76巻, 435
0-4354 頁 (1979年) により、ニトロセルロース膜〔シ
ュライヒエル (Schleicher) およびシュル (Schull),
ダッセル, ＦＲＧ〕に電気泳動的に移動され、かつ移動
した抗原は間接的イムノパーオキシダーゼ技術〔ビ．ホ
ルツマン (B. Holzmann)ら, J. Exp. Med, 161巻, 366-
377 頁 (1985年) 〕により視覚化した。 【００３８】流動サイトメーター分析 ＨＴ−２９細胞は氷上で未濃縮、１０×または５０×濃
縮上澄液のＭＡｂｓ，Ｍ７２，Ｍ７４，Ｍ７７またはＭ
７９により予備培養し、次いでビオチン化した１７−１
Ａ抗体（１０μｇ／ｍｌ）およびアビディン−フィコエ
リスリン〔ベクトン−ディキンソン (Becton-Dickinso
n, マウンテンビウ, ＣＡ）〕により培養した。蛍光像
をＥＰＩＣＳ−Ｖ〔クールター エレクトロニクス (Co
ulter Electronics, ハイアリーン, ＦＬ．）〕により
分析した。 【００３９】免疫組織化学 凍結した組織細片を調製し、本質的には他に記載された
間接的免疫パーオキシダーゼ技術により着色した。ゲッ
トリンガー (Gettlinger) ら, Inst. J. Cancer 35巻,
199-205 頁 (1985年) 。簡単に述べると、風乾した細片
（７μｍ）をアセトン中に１０分間固定し、ＭＡｂ（１
０μｇ／ｍｌまたは未希釈上澄液）で３０分間培養し、
ＰＢＳ中で洗浄し、ヒト血清２０％を含有するＰＢＳ中
に希釈したパーオキシダーゼ−共軛うさぎ抗−マウスＩ
ｇ抗血清〔ジアノバ (Dianova),ハンブルク，ＦＲＧ〕
に３０分間接触した。細片はＰＢＳ中で洗浄した後、
０．００１％Ｈ2 Ｏ2 を含有するｐＨ７．４の０．０２
Ｍの緩衝液中の０．００４％３−アミノ−９−エチルカ
ルバゾール中で２０分培養し、続いてマイヤーのヘマル
ム(Hemalum) により逆着色した。 【００４０】結果 １７−１Ａ Ａｇの生化学分析 １７−１Ａ Ａｇの当初の生化学分析は一つのヒト腫瘍
細胞系（ＨＴ−２９） に対してのみ行われるので、発明者らは表面ヨウ素化に
より二つの付加的ヒト結腸がん系に関して示された１７
−１Ａ Ａｇの性質を調査した。ＭＡｂ１７−１Ａによ
る沈殿は３者の細胞系、ＤＬＯ−１，ＷｉＤｒおよびＨ
Ｔ−２９において同一の単一タンパク質バンドを示し、
これは３７ＫＤの見掛の分子量をもってＳＤＳ−ＰＡＧ
Ｅ系に移動した。蛍光圏強度から判断されるように、３
細胞系から沈殿可能の抗原量は全く可変的で、結腸系Ｄ
ＬＤ−１は最高量の放射線標識抗原を与えた。電気泳動
に先行して２−メルカプトエタノールが沈殿に添加され
た還元条件下では３３ＫＤの明白なバンドが、３細胞系
の全てから得られた。更に、約４０ＫＤ成分の主要成分
もまたＨＴ−２９リセート中に時々見出された。このバ
ンドは明らかに不在かまたはＷｉＤｒ細胞から沈殿され
なかった。 【００４１】チュニカマイシン（２μｇ／ｍｌ）による
ＨＴ−２９細胞の２４時間培養は非還元条件で３０Ｋ
Ｄ、還元条件で２６ＫＤの新バンドの出現を与え、１７
−１ＡＡｇが２個の結合したグリコシル化の位置を示し
た。１７−１Ａの糖タンパク質の性質は更にニユラミニ
ダーゼによる１７−１Ａの沈殿の処理により実証され、
これは見掛け分子量の軽微な然も明白な還元を与えた。 【００４２】新ＭＡｂによる１７−１Ａのエピトープ分
析 １７−１Ａ Ａｇに対し向けられた新規の４ＭＡｂｓ
（Ｍ７２，Ｍ７４，Ｍ７７，Ｍ７９）が凍結した組織細
片について１７−１Ａ−類似の反応性に対し結腸がん転
位からの膜製剤により免疫したねずみから発生したハイ
ブリドーマの上澄液を選別することにより得られた。４
抗体の全ては当初の１７−１Ａ抗体に見られる同一分子
量のタンパク質を沈殿する。新規のＭＡｂｓにより確認
された抗原の同一性を確認するため、広範な免疫吸取分
析を実施し、それにより１７−１Ａ免疫沈殿がＳＤＳ−
ＰＡＧＥによる分離後にニトロセルロースに移行し新規
の４試薬により試験した。前文に示した如く、３７ＫＤ
タンパク質に結合した新規の４抗体はアイソタイプの配
合した対照ＭＡｂｓでは得られなかった。新規の４ＭＡ
ｂｓのエピトープ特異性を分析するためクロス−阻害試
験を実施した。流動血球計算分析においてビオチニル化
した１７−１Ａ抗体のＨＴ−２９細胞への結合は完全に
ＭＡｂｓＭ７２およびＭ７４（表６）による腫瘍細胞の
予備培養により阻害された。対象としてＭＡｂｓＭ７７
およびＭ７９は試験した全ての濃度においてビオチニル
化した１７−１Ａ抗体の著しい阻害活性を示さなかっ
た。発明者らは更にエピトープ特異性が抗体のイディオ
タイプに関係があるかどうかを分析した。全ＭＡｂｓは
やぎの１７−１Ａ抗体に対し発生した抗−イディオタイ
プの抗血清〔ウィスター研究所，フィラデルフィアのド
ロシイ ハーリン (DorothyHerlyn) 博士により提供さ
れた〕との反応性を分析した。抗−イディオタイプの抗
血清は交叉−阻害する２ＭＡｂｓ（Ｍ７２およびＭ７
４）と強く反応したが、ＭＡｂｓ Ｍ７７およびＭ７９
とは完全に反応しなかった。これらのデータはＭＡｂｓ
１７−１Ａ，Ｍ７２およびＭ７４は３７ＫＤ糖タンパ
ク質に関して同一または密接に関係したエピトープを認
めれているが、ＭＡｂｓ Ｍ７７およびＭ７９はこの抗
原に対し付加的エピトープを限定することを示してい
る。 【００４３】 【表６】【００４４】１７−１Ａ Ａｇの組織分布 直接免疫パーオキシダーゼ技術を用いることによって、
種々の正常ヒト器官および種々のヒトがん中に１７−１
Ａ Ａｇが同定された。同時に、新しい４つのＭＡｂが
平行組織部位に分析された。結腸組織における１７−１
Ａの発現については、正常な粘膜が試験された１４名の
結腸がん組織と同程度に染色されることが見出された。
また１７−１Ａ Ａｇは小腸の上皮内面、胆嚢、気管お
よび甲状腺、乳腺、汗腺、および外分泌および内分泌膵
臓を含む種々の腺構造上に明らかに検出された。更に、
１７−１Ａ Ａｇは腎臓の細管末端およびヘンレ (Henl
e)のループに、および肝臓の胆管（肝細胞でなく）によ
って発現することが見出された。 【００４５】胃においては、正常粘膜は普通、限定され
た区域に弱い染色が見出された。しかしながら、種々の
程度の小腸化生（胃粘膜中に小島状に存在する）５人の
患者について、これらの領域はＭＡｂ１７−１Ａおよび
４つの新しいＭＡｂによって強力に染色された。１７−
１Ａ Ａｇもまた、試験された９個の胃がんの全てに明
らかに発現された。 【００４６】検討 我々は１７−１Ａ Ａｇが非還元条件下でのＳＤＳ−Ｐ
ＡＧＥにおいて３７ＫＤの見掛分子量であるように移動
する糖タンパクであることを示した。３種の異なる結腸
がん細胞ラインとの比較分析では、非還元条件が用いら
れる場合、１７−１Ａ Ａｇの異種性を示さなかった。
１７−１Ａ沈殿を２−メルカプトエタノールで還元し、
ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる分離では、３３ＫＤのバンドが
表われた。これは試験した全ての細胞ラインについて見
出された。更に、４０ＫＤバンドは、ＤＬＤ−１細胞溶
解物中には主成分の１つとして、またＨＴ−２９細胞溶
解物中により低い水準で表われた。この４０ＫＤバンド
はしたがってＷｉＤｒ細胞からの溶解物には存在しなか
った。ＤＬＤ−１またはＨＴ−２９細胞からの沈殿物を
１回の実験で処理し、還元下または非還元下で並行した
条件で分析した場合、２−メルカプトエタノールの存在
下では３３および４０ＫＤの２つのバンドが、その不存
在下では３７ＫＤの１本のバンドが生じた。したがっ
て、１７−１ＡＡｇの還元では異なる電気泳動の移動度
を有する２種の新しい分子が生じている。分子内ジスル
フィド結合の存在によって、この特異な泳動の状態を説
明できるであろう。 【００４７】別法として、１７−１Ａ Ａｇは、非還元
条件下では同一の泳動挙動を示すタンパクの二量体とし
て実際には存在しているものと考えられる。ＷｉＤｒ溶
解物中に４０ＫＤの分子が存在しないということは、異
なる細胞ライン中のラクトパーオキシダーゼ介在ヨウ素
化に関するこのタンパク質の異なる親和性によって説明
できるであろう。代謝標識および架橋化学を用いる更に
別の分析が、上記の問題を解決するのに必要であろう。
ロス (Ross) 等は、３０ＫＤおよび４０ＫＤサブユニッ
トから成るＭＡｂ ＧＡ７３３によって定義されるがん
関連表面糖タンパクについて最近記述している。彼等
は、１７−１Ａ抗体は同じ抗原を認識するが、ＭＡｂ
ＧＡ７３３と異なる抗原決定基に結合することを示唆し
ている。ここで記述した抗体との直接の比較により、こ
れらの複数の抗原の関連性が明らかになるであろう。 【００４８】我々が得た４種の新規な抗１７−１Ａ Ａ
ｇ ＭＡｂは正常器官および腫瘍において、元の１７−
１Ａ抗体に匹敵する組織反応性を示した。これまでのと
ころ、試験された種々の組織において異なる抗原決定基
発現は見られていない。これらＭＡｂのうち２つ（Ｍ７
２およびＭ７４）は、交差ブロッキング実験によって判
断されるように、ＭＡｂ １７−１Ａ検出されるものと
緊密に関連した決定基を認識する。一方、ＭＡｂ−Ｍ７
７および−Ｍ７９は少なくとも１つの他の抗原決定基を
明らかに定義する。何故ならば、これらビオチニル化１
７−１Ａ抗体の結合を阻害しないからである。興味ある
ことに、これらＭＡｂの抗原決定基特異性はヤギ抗イデ
ィオタイプ抗血清との反応性と相関される。これらＭＡ
ｂは元の１７−１Ａ抗体と関連する生物学的活性を分析
するのに有用であろう。 【００４９】１７−１Ａ Ａｇは非悪性上皮器官内で広
く発現し、かつ１７−１Ａ陽性組織由来の大部分のがん
中にも存在する。正常組織および悪性組織間の発現の量
的差異は、同一患者由来の直結腸がんと正常粘膜の比較
組織化学分析においては証明されなかった。しかしなが
ら、この正常細胞および悪性細胞上のこの上皮性抗原の
構造上の異質性は、この分析では決定できなかった。 【００５０】当業者であれば通常の実験以外を用いるこ
となく、本明細書に記述した具体的態様に対する多くの
均等技術を認識し、または確立できるであろう。そのよ
うな均等物は本発明に含まれるものとする。 【００５１】 【発明の効果】本発明により、気管支組織ならびに甲状
腺、乳腺、汗腺および外分泌および内分泌膵臓を含む種
々の腺構造組織由来の腫瘍の治療用薬剤が提供される。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 リチャード・エイ・カーラノ
アメリカ合衆国ペンシルバニア州19460,
フェニックスビル，キムバートン・ロー
ド，アールエフディー ナンバー３，ボ
ックス 174
(56)参考文献 Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ
ｉ，ＵＳＡ，1982， Ｖｏｌ．79，ｐ
ｐ．4761−4765
ＣＡＮＣＥＲ ＲＥＳ．，1985， Ｖ
ｏｌ．45，ｐｐ．5910−5913
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓｐ．Ｍｏｄ．,
1984，Ｖｏｌ．３，ｐｐ．138−150
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
A61K 39/395
A61K 35/00
ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ)
ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ)
ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)
ＥＭＢＡＳＥ（ＳＴＮ)
Claims (1)
- (57)【特許請求の範囲】 １．１７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合するモ
ノクローナル抗体を含有してなり、非経口的な複数回投
与に適する、胃腸腫瘍以外の気管支組織または腺構造組
織由来の腫瘍の治療用薬剤。 ２．手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者にお
ける胃腸腫瘍以外の気管支組織または腺構造組織由来の
腫瘍の治療において使用される請求項１記載の薬剤。 ３．１７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合するモ
ノクローナル抗体を少なくとも１００ｍｇ含有してな
り、非経口的な複数回投与、２回めの投与またはその後
の投与に適する、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由
来の腫瘍の治療用薬剤。 ４．１７−１Ａ抗原のエピトープに特異的に結合するモ
ノクローナル抗体を全用量で少なくとも０．１〜５ｇ含
有してなり、非経口的な複数回投与、２回めの投与また
はその後の投与に適する、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽
性組織由来の腫瘍の治療用薬剤。 ５．手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者にお
ける、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由来の腫瘍の
治療において使用される請求項３記載の薬剤。 ６．手術を受けまたは外科的に腫瘍を切除した患者にお
ける、胃腸腫瘍以外の１７−１Ａ陽性組織由来の腫瘍の
治療において使用される請求項４記載の薬剤。 ７．腫瘍が由来する１７−１Ａ陽性組織が気管支組織ま
たは腺構造組織である請求項３記載の薬剤。 ８．腫瘍が由来する１７−１Ａ陽性組織が気管支組織ま
たは腺構造組織である請求項４記載の薬剤。
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