JP3335387B2 - Ｃ型肝炎ウイルスに対するモノクローナル抗体 - Google Patents
Ｃ型肝炎ウイルスに対するモノクローナル抗体Info
- Publication number
- JP3335387B2 JP3335387B2 JP27712892A JP27712892A JP3335387B2 JP 3335387 B2 JP3335387 B2 JP 3335387B2 JP 27712892 A JP27712892 A JP 27712892A JP 27712892 A JP27712892 A JP 27712892A JP 3335387 B2 JP3335387 B2 JP 3335387B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hcv
- antibody
- cell line
- hepatitis
- monoclonal antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 title abstract description 4
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 4
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 abstract description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 14
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 13
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 108700039791 Hepatitis C virus nucleocapsid Proteins 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 3
- 241000724709 Hepatitis delta virus Species 0.000 description 2
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 2
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 238000012317 liver biopsy Methods 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010015108 Epstein-Barr virus infection Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 208000037262 Hepatitis delta Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000012303 cytoplasmic staining Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000012817 gel-diffusion technique Methods 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 208000029570 hepatitis D virus infection Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- -1 red blood cells Substances 0.000 description 1
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1081—Togaviridae, e.g. flavivirus, rubella virus, hog cholera virus
- C07K16/109—Hepatitis C virus; Hepatitis G virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2474/00—Immunochemical assays or immunoassays characterised by detection mode or means of detection
- G01N2474/20—Immunohistochemistry assay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/975—Kit
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（Ｈ
ＣＶ）コア蛋白質上のエピトープに対する結合特異性を
有するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細
胞系及びこのハイブリドーマ細胞系により産生されたモ
ノクローナル抗体に関する。
ＣＶ）コア蛋白質上のエピトープに対する結合特異性を
有するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細
胞系及びこのハイブリドーマ細胞系により産生されたモ
ノクローナル抗体に関する。
【０００２】本発明は、サンプル中のＨＣＶの検出方法
及び前記検出方法を実施するための試験キットにも関す
る。
及び前記検出方法を実施するための試験キットにも関す
る。
【０００３】
【従来の技術】近年ＨＣＶは、ＮＡＮＢ（非-Ａ、非-
Ｂ）型肝炎の原因となる因子の１種として識別された。
この肝炎は、公知の肝炎ウイルス即ち、Ａ型肝炎ウイル
ス（ＨＡＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）及びδ型肝
炎ウイルス（ＨＤＶ）に起因する肝臓病並びにサイトメ
ガロウイルス（ＣＭＶ）またはEpstein-Barrウイルス
（ＥＢＶ）により誘発された肝炎を含む、ウイルス関連
の肝臓病の他の形態とは区別され得る。非-Ａ、非-Ｂ型
肝炎は、輸血した個体で最初に識別された。ヒトからチ
ンパンジーへの媒介及びチンパンジーでの連続継代によ
り、非-Ａ、非-Ｂ型肝炎は、媒介し易い感染性因子によ
るという証拠があがった。
Ｂ）型肝炎の原因となる因子の１種として識別された。
この肝炎は、公知の肝炎ウイルス即ち、Ａ型肝炎ウイル
ス（ＨＡＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）及びδ型肝
炎ウイルス（ＨＤＶ）に起因する肝臓病並びにサイトメ
ガロウイルス（ＣＭＶ）またはEpstein-Barrウイルス
（ＥＢＶ）により誘発された肝炎を含む、ウイルス関連
の肝臓病の他の形態とは区別され得る。非-Ａ、非-Ｂ型
肝炎は、輸血した個体で最初に識別された。ヒトからチ
ンパンジーへの媒介及びチンパンジーでの連続継代によ
り、非-Ａ、非-Ｂ型肝炎は、媒介し易い感染性因子によ
るという証拠があがった。
【０００４】疫学的証拠から、３種類の非-Ａ、非-Ｂ型
肝炎：水系感染の流行型；血液または注射針関連型及
び；散発的発生（community acquired）型があることが
示唆された。しかしながら、非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の原因
となり得る因子の数はまだ不明である。
肝炎：水系感染の流行型；血液または注射針関連型及
び；散発的発生（community acquired）型があることが
示唆された。しかしながら、非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の原因
となり得る因子の数はまだ不明である。
【０００５】非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の臨床診断及び識別
は、主に、他のウイルスマーカーを除外することにより
実施してきた。推定上の非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の抗原及び
抗体を検出するために使用される方法の中でも、寒天-
ゲル拡散法、カウンター免疫電気泳動法、蛍光抗体顕微
鏡法、免疫電子顕微鏡法、ラジオイムノアッセイ及び酵
素免疫測定法が挙げられる。しかしながら、これらの分
析法は、いずれも非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の診断試験として
使用するために十分に感度があり、特異的で且つ再現性
があるとは証明されなかった。近年、ＨＣＶ感染に関す
る血清学的試験法が開発され、市販されている。しかし
ながら、感染の種々のフェイズで実施し得る信頼性のあ
る診断が可能な、特異的且つ感度のある方法の開発に関
しては、この現在市販の試験法により実施されるよう
に、ＨＣＶに対する抗体を検出する代わりにＨＣＶの検
出が可能になったことは非常に重要である。
は、主に、他のウイルスマーカーを除外することにより
実施してきた。推定上の非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の抗原及び
抗体を検出するために使用される方法の中でも、寒天-
ゲル拡散法、カウンター免疫電気泳動法、蛍光抗体顕微
鏡法、免疫電子顕微鏡法、ラジオイムノアッセイ及び酵
素免疫測定法が挙げられる。しかしながら、これらの分
析法は、いずれも非-Ａ、非-Ｂ型肝炎の診断試験として
使用するために十分に感度があり、特異的で且つ再現性
があるとは証明されなかった。近年、ＨＣＶ感染に関す
る血清学的試験法が開発され、市販されている。しかし
ながら、感染の種々のフェイズで実施し得る信頼性のあ
る診断が可能な、特異的且つ感度のある方法の開発に関
しては、この現在市販の試験法により実施されるよう
に、ＨＣＶに対する抗体を検出する代わりにＨＣＶの検
出が可能になったことは非常に重要である。
【０００６】病気に感染した患者の治療をできるだけ早
く開始し得るためには、ＨＣＶに感染した推定上の患者
の早期診断が根本的に重要であることは自明である。
く開始し得るためには、ＨＣＶに感染した推定上の患者
の早期診断が根本的に重要であることは自明である。
【０００７】本発明以前には、ＨＣＶに対して産生した
モノクローナル抗体に関する報告はなかった。欧州特許
第318,216号及び同第388,232号などの特許明細書には、
ＨＣＶに対するモノクローナル抗体は当業者により容易
に産生できると記載されているが、この出願後何年たっ
ても、何人もＨＣＶに対するモノクローナル抗体の産生
については未だ開示されていない。これは、このウイル
スの３次元構造の情報が欠如しているためであろう。当
業者は現時点に於いて、抗体を結合するためのエピトー
プの有効性について知らない。
モノクローナル抗体に関する報告はなかった。欧州特許
第318,216号及び同第388,232号などの特許明細書には、
ＨＣＶに対するモノクローナル抗体は当業者により容易
に産生できると記載されているが、この出願後何年たっ
ても、何人もＨＣＶに対するモノクローナル抗体の産生
については未だ開示されていない。これは、このウイル
スの３次元構造の情報が欠如しているためであろう。当
業者は現時点に於いて、抗体を結合するためのエピトー
プの有効性について知らない。
【０００８】従って、本発明のモノクローナル抗体は、
ＨＣＶ感染の診断用の新規手段を提供する。
ＨＣＶ感染の診断用の新規手段を提供する。
【０００９】好ましい実施態様に於いては、本発明は、
モノクローナル抗体がミエローマ細胞と、ＨＣＶコアペ
プチドを予め接種したマウスから誘導したリンパ球との
融合から産生されるハイブリドーマ細胞系から産生され
る、Ｃ型肝炎ウイルスコア蛋白質上のエピトープに対し
特異性を有するモノクローナル抗体を提供する。
モノクローナル抗体がミエローマ細胞と、ＨＣＶコアペ
プチドを予め接種したマウスから誘導したリンパ球との
融合から産生されるハイブリドーマ細胞系から産生され
る、Ｃ型肝炎ウイルスコア蛋白質上のエピトープに対し
特異性を有するモノクローナル抗体を提供する。
【００１０】この好ましい実施態様に加えて、本発明の
一部は、アミノ酸配列（１文字コード）: ＲＴＱＱＲＫＴＫＲＳＴＮＲＲＲ を有するＨＣＶコアペプチド（Ａ1327）に対するモノク
ローナル抗体またはそのフラグメント並びに、そのペプ
チドの類似体及びそのフラグメントに関する。コードＨ
ＣＶ-ＯＴ １Ｆ２を有するモノクローナル抗体は、ハイ
ブリドーマ細胞系により産生される。前記ハイブリドー
マ細胞系は、European Collection of Animal Cell Cul
tures（ECACC）(Porton Down，U.K.)に寄託され、ブタ
ペスト条約（1977）に準拠する受託番号91101711（1991
年10月17日）を受けている。
一部は、アミノ酸配列（１文字コード）: ＲＴＱＱＲＫＴＫＲＳＴＮＲＲＲ を有するＨＣＶコアペプチド（Ａ1327）に対するモノク
ローナル抗体またはそのフラグメント並びに、そのペプ
チドの類似体及びそのフラグメントに関する。コードＨ
ＣＶ-ＯＴ １Ｆ２を有するモノクローナル抗体は、ハイ
ブリドーマ細胞系により産生される。前記ハイブリドー
マ細胞系は、European Collection of Animal Cell Cul
tures（ECACC）(Porton Down，U.K.)に寄託され、ブタ
ペスト条約（1977）に準拠する受託番号91101711（1991
年10月17日）を受けている。
【００１１】本発明は、上記記載のモノクローナル抗体
とサンプルとを接触させ、その後、形成された免疫複合
物の存在を検出し、これからサンプル中のＨＣＶの存在
を決定する、サンプル中のＨＣＶを検出する方法も含
む。イムノアッセイで使用すべき試験キットも本発明の
一部である。このような試験キットは、少なくとも本発
明のモノクローナル抗体を含む。
とサンプルとを接触させ、その後、形成された免疫複合
物の存在を検出し、これからサンプル中のＨＣＶの存在
を決定する、サンプル中のＨＣＶを検出する方法も含
む。イムノアッセイで使用すべき試験キットも本発明の
一部である。このような試験キットは、少なくとも本発
明のモノクローナル抗体を含む。
【００１２】本発明のモノクローナル抗体を産生するハ
イブリドーマ細胞系は、例えばKohler及びMilstein法に
より製造し得る。細胞融合、不死化抗体産生細胞系でも
製造し得るが、他の方法、例えば、腫瘍原性ＤＮＡによ
るＢ-リンパ球の直接形質転換またはEpstein-Barrウイ
ルスによるトランスフェクションも可能である。最も好
ましい方法は、Kohler及びMilstein法である。
イブリドーマ細胞系は、例えばKohler及びMilstein法に
より製造し得る。細胞融合、不死化抗体産生細胞系でも
製造し得るが、他の方法、例えば、腫瘍原性ＤＮＡによ
るＢ-リンパ球の直接形質転換またはEpstein-Barrウイ
ルスによるトランスフェクションも可能である。最も好
ましい方法は、Kohler及びMilstein法である。
【００１３】Kohler及びMilsteinは、一般に、最初のモ
ノクローナル抗体産生ハイブリドーマを成功裏に形成す
る方法を創案したと考えられている（G.Kohler及びC.Mi
lstein，1975，Nature 256：495-497；1976，Eur.J.Imm
unol．6：511-519）。抗体形成細胞（脾臓リンパ球）と
ミエローマ細胞（骨髄性原発腫瘍の悪性細胞）とを融合
することにより、彼らは、リンパ球及びミエローマ細胞
系の両方を継承した特定の特徴を有する単一の融合細胞
ハイブリッド（ハイブリドーマまたはクローンと呼ばれ
る）から産生するハイブリッド細胞系を作製した。（抗
原としてヒツジ赤血球細胞で初回抗原刺激を受けた動物
から採取した）リンパ球と同様に、ハイブイリドーマは
抗体に対し特異的な単一型の免疫グロブリンを分泌し
た。さらに、ミエローマ細胞と同様に、このハイブリッ
ド細胞は、無限の細胞分裂能を有していた。これらの２
つの特徴を組み合わせると、通常の抗血清に勝る別の長
所が得られる。予防接種した動物から誘導した抗血清
は、全く同じに再生し得ないポリクローナル抗体の種々
の混合物であるが、モノクローナル抗体は単一型の特異
性の高い免疫グロブリンである。ハイブリドーマにより
分泌された免疫グロブリンの単一型は、抗原上の一種及
び単一抗原決定基、即ちエピトープ、抗原決定基の多様
性を有する複合分子に特異的である。例えば、抗原が蛋
白質である場合、抗原決定基は蛋白質分子全体内の多く
のペプチド配列（通常、長さ６〜７アミノ酸；M.Z.Atas
si，1980，Molec．Cell．Biochem.32：21-43）の１種で
あり得る。従って、単一抗原に対して産生されたモノク
ローナル抗体は、その形成を誘導した決定基に依存して
互いに異なる。しかし任意の所与のクローンに関して
は、これが産生する抗体は総て同一である。さらにハイ
ブリドーマ細胞系は容易に増殖し、モノクローナル抗体
を非常に高濃度で産生する。
ノクローナル抗体産生ハイブリドーマを成功裏に形成す
る方法を創案したと考えられている（G.Kohler及びC.Mi
lstein，1975，Nature 256：495-497；1976，Eur.J.Imm
unol．6：511-519）。抗体形成細胞（脾臓リンパ球）と
ミエローマ細胞（骨髄性原発腫瘍の悪性細胞）とを融合
することにより、彼らは、リンパ球及びミエローマ細胞
系の両方を継承した特定の特徴を有する単一の融合細胞
ハイブリッド（ハイブリドーマまたはクローンと呼ばれ
る）から産生するハイブリッド細胞系を作製した。（抗
原としてヒツジ赤血球細胞で初回抗原刺激を受けた動物
から採取した）リンパ球と同様に、ハイブイリドーマは
抗体に対し特異的な単一型の免疫グロブリンを分泌し
た。さらに、ミエローマ細胞と同様に、このハイブリッ
ド細胞は、無限の細胞分裂能を有していた。これらの２
つの特徴を組み合わせると、通常の抗血清に勝る別の長
所が得られる。予防接種した動物から誘導した抗血清
は、全く同じに再生し得ないポリクローナル抗体の種々
の混合物であるが、モノクローナル抗体は単一型の特異
性の高い免疫グロブリンである。ハイブリドーマにより
分泌された免疫グロブリンの単一型は、抗原上の一種及
び単一抗原決定基、即ちエピトープ、抗原決定基の多様
性を有する複合分子に特異的である。例えば、抗原が蛋
白質である場合、抗原決定基は蛋白質分子全体内の多く
のペプチド配列（通常、長さ６〜７アミノ酸；M.Z.Atas
si，1980，Molec．Cell．Biochem.32：21-43）の１種で
あり得る。従って、単一抗原に対して産生されたモノク
ローナル抗体は、その形成を誘導した決定基に依存して
互いに異なる。しかし任意の所与のクローンに関して
は、これが産生する抗体は総て同一である。さらにハイ
ブリドーマ細胞系は容易に増殖し、モノクローナル抗体
を非常に高濃度で産生する。
【００１４】上述のハイブリドーマ方法を使用して、合
成、組換体または天然ＨＣＶコア抗原、好ましくは前述
したペプチドＡ1327でマウスを免疫感作した後、Ｃ型肝
炎コア蛋白質上のエピトープに対して特異性を有するモ
ノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞系を得
ることが出来ることが明らかである。
成、組換体または天然ＨＣＶコア抗原、好ましくは前述
したペプチドＡ1327でマウスを免疫感作した後、Ｃ型肝
炎コア蛋白質上のエピトープに対して特異性を有するモ
ノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞系を得
ることが出来ることが明らかである。
【００１５】本発明の一部は、当該モノクローナル抗体
を「人体に適応させること（humanizing）」でもある。
「人体に適応させた（humanized）」モノクローナル抗
体を産生するための方法は、当業者には公知である。
を「人体に適応させること（humanizing）」でもある。
「人体に適応させた（humanized）」モノクローナル抗
体を産生するための方法は、当業者には公知である。
【００１６】記載のペプチドは、ペプチド合成に関する
公知の有機化学方法の１つまたは組換えＤＮＡ方法を使
用して製造する。この後者の方法は、宿主として好適な
微生物中に当該ペプチドをコードするポリヌクレオチド
配列で組換えポリヌクレオチドを発現することにより、
所望のペプチドを合成することを含む。
公知の有機化学方法の１つまたは組換えＤＮＡ方法を使
用して製造する。この後者の方法は、宿主として好適な
微生物中に当該ペプチドをコードするポリヌクレオチド
配列で組換えポリヌクレオチドを発現することにより、
所望のペプチドを合成することを含む。
【００１７】ペプチド合成の有機化学方法は、均一相ま
たは所謂固相を使用して、縮合反応により所望のアミノ
酸を結合させることを含む。
たは所謂固相を使用して、縮合反応により所望のアミノ
酸を結合させることを含む。
【００１８】既に記載の如く、当該ペプチドも同様に組
換えＤＮＡ方法により製造し得る。特にペプチドが繰り
返し配列［縦列をなす（in tandem）］中に含まれてい
る場合、またはペプチドが（より大きい）蛋白質若しく
はポリペプチドの構成成分として製造され得る場合にこ
の可能性は重要である。この目的に関して、組換えＤＮ
Ａの構成成分として、このペプチドをコードするポリヌ
クレオチドを使用する。
換えＤＮＡ方法により製造し得る。特にペプチドが繰り
返し配列［縦列をなす（in tandem）］中に含まれてい
る場合、またはペプチドが（より大きい）蛋白質若しく
はポリペプチドの構成成分として製造され得る場合にこ
の可能性は重要である。この目的に関して、組換えＤＮ
Ａの構成成分として、このペプチドをコードするポリヌ
クレオチドを使用する。
【００１９】本発明のモノクローナル抗体は、試験サン
プル中のＨＣＶまたはＨＣＶ-フラグメントを検出する
ために、所謂イムノアッセイで使用するのが非常に好適
である。モノクローナル抗体の性質及びその他の特徴に
依存して、実施する免疫化学反応は、所謂サンドイッチ
反応、凝集反応、競合反応または阻害反応である。
プル中のＨＣＶまたはＨＣＶ-フラグメントを検出する
ために、所謂イムノアッセイで使用するのが非常に好適
である。モノクローナル抗体の性質及びその他の特徴に
依存して、実施する免疫化学反応は、所謂サンドイッチ
反応、凝集反応、競合反応または阻害反応である。
【００２０】例えば、試験サンプル中のＨＣＶを検出す
るためにサンドイッチ反応を実施する場合、使用すべき
試験キットは、固体支持体（例えばマイクロテストウェ
ルの内壁）に被覆された本発明のモノクローナル抗体及
び、結合体として標識したモノクローナル抗体またはそ
のフラグメントを含む。
るためにサンドイッチ反応を実施する場合、使用すべき
試験キットは、固体支持体（例えばマイクロテストウェ
ルの内壁）に被覆された本発明のモノクローナル抗体及
び、結合体として標識したモノクローナル抗体またはそ
のフラグメントを含む。
【００２１】使用し得る支持体としては、例えば、マイ
クロテストウェルまたはキュベットの内壁、チューブま
たはキャピラリー、膜、フィルター、試験片または粒子
の表面［例えば、ラテックス粒子、赤血球、染料ゾル、
金属ゾル若しくはゾル粒子としての金属化合物、担体蛋
白質（例えば、ＢＳＡ、ＫＬＨなど）］が挙げられる。
クロテストウェルまたはキュベットの内壁、チューブま
たはキャピラリー、膜、フィルター、試験片または粒子
の表面［例えば、ラテックス粒子、赤血球、染料ゾル、
金属ゾル若しくはゾル粒子としての金属化合物、担体蛋
白質（例えば、ＢＳＡ、ＫＬＨなど）］が挙げられる。
【００２２】使用し得る標識物質としては、特に、放射
性同位体、蛍光化合物、酵素、染料ゾル、金属ゾルまた
はゾル粒子としての金属化合物若しくは他のゾルが挙げ
られる。
性同位体、蛍光化合物、酵素、染料ゾル、金属ゾルまた
はゾル粒子としての金属化合物若しくは他のゾルが挙げ
られる。
【００２３】既に記載の本発明のモノクローナル抗体
は、診断で非常に好適であるが、中和するこれらの抗体
は受動免疫療法に非常に有用である。また、モノクロー
ナル抗体は、抗イディオタイプ抗体を産生するためにも
使用し得る。抗イディオタイプ抗体を産生するための方
法は、当業者には公知である。
は、診断で非常に好適であるが、中和するこれらの抗体
は受動免疫療法に非常に有用である。また、モノクロー
ナル抗体は、抗イディオタイプ抗体を産生するためにも
使用し得る。抗イディオタイプ抗体を産生するための方
法は、当業者には公知である。
【００２４】抗イディオタイプ抗体は、非-Ａ、非-Ｂ型
肝炎の予防及び/または治療並びに、ＨＣＶ-抗原の重要
なエピープ領域の解明にも有用である。
肝炎の予防及び/または治療並びに、ＨＣＶ-抗原の重要
なエピープ領域の解明にも有用である。
【００２５】
【実施例】Porton Down U.K.のＥＣＡＣＣにより番号91
101711で寄託されたモノクローナル抗体ＨＣＶ-ＯＴ １
Ｆ２の製造は、本明細書中に既に記載した。
101711で寄託されたモノクローナル抗体ＨＣＶ-ＯＴ １
Ｆ２の製造は、本明細書中に既に記載した。
【００２６】ＨＣＶ抗原を検出するために、ＮＡＮＢ感
染性因子で感染させたチンパンジーの肝臓生検上での免
疫-組織化学染色によりモノクローナル抗体の抗体活性
を測定した。このチンパンジーには、ＨＢＶ、ＣＭＶ及
びＥＢＶ感染の血清学的マーカーはなかった。ＨＣＶ抗
体血清反応性に加えて、Garsonら（Lancet 336，102
2，1990）により記載の如くプライマーを使用するＰＣ
Ｒにより検出したＨＣＶＲＮＡは、血清及び肝臓組織で
陽性であった。肝臓組織は、肝臓酵素（ＡＳＡＴ-ＡＬ
ＡＴ）が高い時に採取した。肝臓生検検体は、ＨＣＶ感
染した患者10人（ＨＣＶ血清学的マーカー及びＨＣＶ-
ＲＮＡに対し全員陽性であった）、及び、ＨＢＶ感染し
た患者２人、ＰＢＣ感染した患者１人、自己免疫性慢性
肝炎の患者１人からなる対照の患者４人からも採取し
た。総ての対照の患者は、ＨＣＶ血清学的マーカー及び
ＰＣＲにより検出されるＨＣＶ-ＲＮＡに対し陰性であ
った。
染性因子で感染させたチンパンジーの肝臓生検上での免
疫-組織化学染色によりモノクローナル抗体の抗体活性
を測定した。このチンパンジーには、ＨＢＶ、ＣＭＶ及
びＥＢＶ感染の血清学的マーカーはなかった。ＨＣＶ抗
体血清反応性に加えて、Garsonら（Lancet 336，102
2，1990）により記載の如くプライマーを使用するＰＣ
Ｒにより検出したＨＣＶＲＮＡは、血清及び肝臓組織で
陽性であった。肝臓組織は、肝臓酵素（ＡＳＡＴ-ＡＬ
ＡＴ）が高い時に採取した。肝臓生検検体は、ＨＣＶ感
染した患者10人（ＨＣＶ血清学的マーカー及びＨＣＶ-
ＲＮＡに対し全員陽性であった）、及び、ＨＢＶ感染し
た患者２人、ＰＢＣ感染した患者１人、自己免疫性慢性
肝炎の患者１人からなる対照の患者４人からも採取し
た。総ての対照の患者は、ＨＣＶ血清学的マーカー及び
ＰＣＲにより検出されるＨＣＶ-ＲＮＡに対し陰性であ
った。
【００２７】免疫組織化学：４μm厚さの低温保持切片
の新鮮な凍結材料で免疫組織化学を実施した。内因性ペ
ルオキシダーゼ活性を、メタノール溶液中0.3%H2O2で室
温で30分間阻害した。切片を正常ブタ血清と室温でイン
キュベートした（1/20で７分間）。過剰のブタ血清を拭
き取り、第１の特異的なモノクローナルＩgＧ（または
ウサギ抗血清若しくはマウス抗血清）を室温で30分間加
えた。ＰＢＳで濯いだ後（３×５分）、スライドを、1/
20 ＰＢＳ-ＮＨＳ（10%）溶液中マウス免疫グロブリン
（またはヤギ抗ウサギ免疫グロブリン）に対するウサギ
抗血清と室温で30分間インキュベートした。さらにＰＢ
Ｓで濯いだ後（３×５分）、これらを西洋ワサビペルオ
キシダーゼ−ウサギ抗西洋ワサビペルオキシダーゼ（Ｐ
ＡＰ，Dakopatts）の溶解性複合物と1/300希釈液中室温
で30分間インキュベートした。洗浄後、ペルオキシダー
ゼ免疫反応生成物をジアミノベンジジン（ＤＡＢ）-H2O
2溶液（ＰＢＳ100mlにＤＡＢ60mgを溶解させ、濾過後、
30%H2O2溶液100μlを添加した）で室温で５分間発色さ
せた。水道水で洗浄後、酸性アルコール中で弁別可能に
し、切片をＤＰＸに固定した。
の新鮮な凍結材料で免疫組織化学を実施した。内因性ペ
ルオキシダーゼ活性を、メタノール溶液中0.3%H2O2で室
温で30分間阻害した。切片を正常ブタ血清と室温でイン
キュベートした（1/20で７分間）。過剰のブタ血清を拭
き取り、第１の特異的なモノクローナルＩgＧ（または
ウサギ抗血清若しくはマウス抗血清）を室温で30分間加
えた。ＰＢＳで濯いだ後（３×５分）、スライドを、1/
20 ＰＢＳ-ＮＨＳ（10%）溶液中マウス免疫グロブリン
（またはヤギ抗ウサギ免疫グロブリン）に対するウサギ
抗血清と室温で30分間インキュベートした。さらにＰＢ
Ｓで濯いだ後（３×５分）、これらを西洋ワサビペルオ
キシダーゼ−ウサギ抗西洋ワサビペルオキシダーゼ（Ｐ
ＡＰ，Dakopatts）の溶解性複合物と1/300希釈液中室温
で30分間インキュベートした。洗浄後、ペルオキシダー
ゼ免疫反応生成物をジアミノベンジジン（ＤＡＢ）-H2O
2溶液（ＰＢＳ100mlにＤＡＢ60mgを溶解させ、濾過後、
30%H2O2溶液100μlを添加した）で室温で５分間発色さ
せた。水道水で洗浄後、酸性アルコール中で弁別可能に
し、切片をＤＰＸに固定した。
【００２８】結果：肝臓組織内のＨＣＶ抗原を検出する
ための抗体を始めにスクリーニングするために、非-
Ａ、非-Ｂ型肝炎に感染したチンパンジーから得られた
肝臓組織を使用した。
ための抗体を始めにスクリーニングするために、非-
Ａ、非-Ｂ型肝炎に感染したチンパンジーから得られた
肝臓組織を使用した。
【００２９】試験した抗体の内、モノクローナル抗体Ｈ
ＣＶ-ＯＴ １Ｆ２は、この肝臓組織上で「特異的」細胞
質染色を示した。他の総ての抗体は、「非特異的」に反
応したかまたは全く染色しなかった。患者14人の結果を
表１にまとめた。
ＣＶ-ＯＴ １Ｆ２は、この肝臓組織上で「特異的」細胞
質染色を示した。他の総ての抗体は、「非特異的」に反
応したかまたは全く染色しなかった。患者14人の結果を
表１にまとめた。
【００３０】
【表１】
【００３１】この研究より、ＨＣＶ感染した陽性の血清
学的マーカーを有する非-Ａ、非-Ｂ型肝炎に罹患し、且
つ血清中にＨＣＶ-ＲＮＡも検出された患者３人で陰性
の結果が出たにも拘わらず、モノクローナル抗体ＨＣＶ
-ＯＴ １Ｆ-２は、肝細胞の細胞質中のＨＣＶ抗原を特
異的に検出できることが明らかである。これらの患者３
人で陰性結果が出たのは、肝細胞中に存在するウイルス
性抗原の濃度が低いか、抗原検出に対する現分析法の感
度が比較的低いことによるのだろう。Ｂ型肝炎及びＰＢ
Ｃに罹患した患者から得られた肝臓組織中で反応は知見
されなかったため、本発明分析法の免疫学的特異性が注
目される。本反応は、正常ヒト肝臓組織のホモジネート
と「免疫吸着」後、一定して陽性である。
学的マーカーを有する非-Ａ、非-Ｂ型肝炎に罹患し、且
つ血清中にＨＣＶ-ＲＮＡも検出された患者３人で陰性
の結果が出たにも拘わらず、モノクローナル抗体ＨＣＶ
-ＯＴ １Ｆ-２は、肝細胞の細胞質中のＨＣＶ抗原を特
異的に検出できることが明らかである。これらの患者３
人で陰性結果が出たのは、肝細胞中に存在するウイルス
性抗原の濃度が低いか、抗原検出に対する現分析法の感
度が比較的低いことによるのだろう。Ｂ型肝炎及びＰＢ
Ｃに罹患した患者から得られた肝臓組織中で反応は知見
されなかったため、本発明分析法の免疫学的特異性が注
目される。本反応は、正常ヒト肝臓組織のホモジネート
と「免疫吸着」後、一定して陽性である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ｃ Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者 テオドルス・アドリアヌス・マリア・オ ーステルラケン オランダ国、5283・イツクス・ハー・ボ ツクステル、デ・ベウクムス・87 (72)発明者 シン・ヒーム・ヤツプ ベルギー国、3221・ニウロード（ヘー・ エー・エム・ホルスビーク）、クラーイ カント・22・アー 審査官 田村 明照 (56)参考文献 国際公開90／11089（ＷＯ，Ａ１) 国際公開91／14705（ＷＯ，Ａ１) 欧州特許出願公開445801（ＥＰ，Ａ １) Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａ ｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．８, ｐ．31−47（1981) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 5/00 C12P 21/08 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)
Claims (6)
- 【請求項１】 ＨＣＶ蛋白に対して、ＥＣＡＣＣ寄託番
号９１１０１７１１として寄託されたセルラインが産生
する抗体と同一の免疫反応性を有する抗体を産生し得る
ハイブリドーマセルライン。 - 【請求項２】 ＥＣＡＣＣ寄託番号９１１０１７１１と
して寄託されたハイブリドーマセルライン。 - 【請求項３】 ＨＣＶ蛋白に対して、ＥＣＡＣＣ寄託番
号９１１０１７１１として寄託されたセルラインが産生
するモノクローナル抗体と同一の免疫反応性を有する抗
体。 - 【請求項４】 請求項２に記載のハイブリドーマセルラ
インから得られるモノクローナル抗体。 - 【請求項５】 請求項３または４に記載の抗体とサンプ
ルとを接触させ、形成される免疫複合体を検出し、ＨＣ
Ｖの存在を決定する、サンプル中のＨＣＶを検出する方
法。 - 【請求項６】 ＥＣＡＣＣ寄託番号９１１０１７１１と
して寄託されたセルラインが産生する抗体が固定化され
た固体相、及びサンプルと固体相との接触後に固体相上
の抗体とサンプル中に存在していてもよいＨＣＶとの間
で形成される免疫複合体を検出する手段を含む、請求項
５に記載の方法を実施するためのテストキット。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP91202659 | 1991-10-15 | ||
| NL91202659.8 | 1991-10-15 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05260960A JPH05260960A (ja) | 1993-10-12 |
| JP3335387B2 true JP3335387B2 (ja) | 2002-10-15 |
Family
ID=8207945
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27712892A Expired - Fee Related JP3335387B2 (ja) | 1991-10-15 | 1992-10-15 | Ｃ型肝炎ウイルスに対するモノクローナル抗体 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5595868A (ja) |
| EP (1) | EP0537856B1 (ja) |
| JP (1) | JP3335387B2 (ja) |
| KR (1) | KR100238559B1 (ja) |
| AT (1) | ATE162553T1 (ja) |
| AU (1) | AU670541B2 (ja) |
| CA (1) | CA2080548C (ja) |
| DE (1) | DE69224134T2 (ja) |
| ES (1) | ES2114547T3 (ja) |
| FI (1) | FI105275B (ja) |
| ZA (1) | ZA927837B (ja) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2049679C (en) * | 1990-08-24 | 2005-06-21 | Sushil G. Devare | Hepatitis c assay utilizing recombinant antigens |
| WO1992008738A1 (en) * | 1990-11-07 | 1992-05-29 | Abbott Laboratories | Monoclonal antibodies to hepatitis c virus and method for using same |
| US5753430A (en) * | 1990-11-07 | 1998-05-19 | Abbott Laboratories | Monoclonal antibodies to hepatitis C virus and method for using same |
| JP3217600B2 (ja) * | 1994-07-12 | 2001-10-09 | 株式会社先端生命科学研究所 | 非ａ非ｂ型肝炎ウイルス関連抗原のイムノアッセイ、それに使用するモノクローナル抗体、およびこの抗体を産生するハイブリドーマ |
| CN1044384C (zh) * | 1994-08-25 | 1999-07-28 | 中国药品生物制品检定所 | 抗丙型肝炎病毒抗原单克隆抗体细胞株建立及其单克隆抗体 |
| US5849800A (en) * | 1997-03-28 | 1998-12-15 | The Penn State Research Foundation | Use of amantadine for treatment of Hepatitis C |
| CA2316130A1 (en) * | 1999-08-19 | 2001-02-19 | Masanori Fukui | Method for detection or determination of hcv core antigens and reagent for detection or determination for use therein |
| US20030232745A1 (en) * | 2001-06-26 | 2003-12-18 | Olson William C. | Uses of DC-sign and DC-Signr for inhibiting hepatitis C virus infection |
| US7022323B2 (en) * | 2001-06-26 | 2006-04-04 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Uses of DC-SIGN and DC-SIGNR for inhibiting hepatitis C virus infection |
| US7049060B2 (en) * | 2001-11-05 | 2006-05-23 | Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. | HCV anti-core monoclonal antibodies |
| US7858752B2 (en) | 2006-12-05 | 2010-12-28 | Abbott Laboratories | Recombinant antibodies against hepatitis C virus and methods of obtaining and using same |
| CA2678888C (en) | 2007-02-21 | 2015-04-14 | University Of Massachusetts | Human antibodies against hepatitis c virus (hcv) and uses thereof |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU220204B (hu) * | 1987-11-18 | 2001-11-28 | Chiron Corp. | HCV polipeptidek és HCV polinukleotidok, ilyen polinukleotidokat tartalmazó vektorok és ezekkel transzformált gazdasejtek, valamint HCV fertőzés kimutatására szolgáló diagnosztikumok és immunvizsgálati készlet |
| US5191064A (en) * | 1988-09-30 | 1993-03-02 | The Research Foundation For Microbial Diseases (Osaka University) | Non-a, non-b hepatitis virus antigen peptide |
| HU225068B1 (en) * | 1989-03-17 | 2006-05-29 | Chiron Corp | Process for producing diagnostics and vaccine of nanbh |
| EP0445801A3 (en) * | 1990-03-08 | 1992-07-01 | Kuraray Co., Ltd. | Peptide and its use |
| JPH0436185A (ja) * | 1990-03-28 | 1992-02-06 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 融合抗原ポリペプチド |
| ZA912040B (en) * | 1990-03-30 | 1991-12-24 | Akzo Nv | Peptides immunochemically reactive with antibodies directed against hepatitis non-a,non-b virus |
-
1992
- 1992-10-12 ZA ZA927837A patent/ZA927837B/xx unknown
- 1992-10-14 AT AT92203144T patent/ATE162553T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-10-14 DE DE69224134T patent/DE69224134T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-14 FI FI924641A patent/FI105275B/fi active
- 1992-10-14 CA CA002080548A patent/CA2080548C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-10-14 EP EP92203144A patent/EP0537856B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-14 ES ES92203144T patent/ES2114547T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-15 KR KR1019920019092A patent/KR100238559B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-10-15 JP JP27712892A patent/JP3335387B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-10-15 AU AU27079/92A patent/AU670541B2/en not_active Ceased
-
1995
- 1995-08-14 US US08/514,982 patent/US5595868A/en not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．８，ｐ．３１−４７（１９８１） |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA927837B (en) | 1994-03-11 |
| CA2080548A1 (en) | 1993-04-16 |
| EP0537856A1 (en) | 1993-04-21 |
| KR930008155A (ko) | 1993-05-21 |
| JPH05260960A (ja) | 1993-10-12 |
| FI924641A (fi) | 1993-04-16 |
| DE69224134T2 (de) | 1998-07-02 |
| AU2707992A (en) | 1993-04-22 |
| AU670541B2 (en) | 1996-07-25 |
| CA2080548C (en) | 2003-07-01 |
| FI105275B (fi) | 2000-07-14 |
| EP0537856B1 (en) | 1998-01-21 |
| KR100238559B1 (ko) | 2000-01-15 |
| US5595868A (en) | 1997-01-21 |
| DE69224134D1 (de) | 1998-02-26 |
| ES2114547T3 (es) | 1998-06-01 |
| FI924641A0 (fi) | 1992-10-14 |
| ATE162553T1 (de) | 1998-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7316905B1 (en) | Method for measurement of hepatitis C virus | |
| AU580738B2 (en) | Polypeptide-induced monoclonal receptors to protein ligands | |
| US5030565A (en) | Polypeptide-induced monoclonal receptors to protein ligands | |
| JPH10123138A (ja) | 癌腫の識別方法 | |
| JP3335387B2 (ja) | Ｃ型肝炎ウイルスに対するモノクローナル抗体 | |
| US8546075B2 (en) | Method of detecting hepatitis C virus | |
| EP0741144B1 (en) | Antiannexin-v monoclonal antibody, process for producing the same, and use therof | |
| JP4118955B2 (ja) | Ｂ型肝炎モノクローナル抗体 | |
| US6623921B2 (en) | Method for measurement of hepatitis C virus | |
| JP3483555B2 (ja) | 推定ｈｃｖエンベロープ領域に対するモノクローナル抗体およびその使用方法 | |
| Tedder et al. | Production of monoclonal antibodies to hepatitis B surface and core antigens, and use in the detection of viral antigens in liver biopsies | |
| CA2419046C (en) | Method for detecting or measuring hbv | |
| JP3292728B2 (ja) | Ｃ型肝炎ウイルスに対するモノクローナル抗体およびその使用法 | |
| JP5261822B2 (ja) | Ｂ型肝炎ウイルスｓ抗原の分析方法 | |
| CA2127797A1 (en) | Monoclonal antibodies and anti-idiotypic antibodies to hepatitis c virus | |
| JPH01144993A (ja) | ＨＢｓ抗原測定のための方法、ハイブリドーマ、モノクローナル抗体および感作血球 | |
| JPH10506382A (ja) | 急性および慢性ｃ型肝炎ウイルス感染の鑑別診断のための方法および組成物 | |
| CA2429140A1 (en) | Antibody against norwalk virus and method of detecting virus by using the antibody | |
| Infantolino et al. | Localization of hepatitis C virus antigen (s) by immunohistochemistry on fixed-embedded liver tissue | |
| JPH06169792A (ja) | 非ａ非ｂ型肝炎ウイルス非構造領域ｎｓ３に対するモノクローナル抗体、これを産生するハイブリドーマ並びに該モノクローナル抗体を用いる該ウイルス抗原の測定及び精製方法 | |
| JPH0797398A (ja) | Ｃ型肝炎用検査薬およびｃ型肝炎ウイルス抗原ペプチド | |
| WO2004038028A2 (en) | Hepatitis x virus antigen |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080802 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080802 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090802 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090802 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100802 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110802 Year of fee payment: 9 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |