FI105275B - Hepatiitti C-viruksen vastaisia monoklonaalisia vasta-aineita - Google Patents
Hepatiitti C-viruksen vastaisia monoklonaalisia vasta-aineita Download PDFInfo
- Publication number
- FI105275B FI105275B FI924641A FI924641A FI105275B FI 105275 B FI105275 B FI 105275B FI 924641 A FI924641 A FI 924641A FI 924641 A FI924641 A FI 924641A FI 105275 B FI105275 B FI 105275B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- hcv
- hepatitis
- cell line
- virus
- antibodies
- Prior art date
Links
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 title claims abstract description 44
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 5
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 claims description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 abstract description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 16
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 16
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 14
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 12
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 11
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 3
- 108700039791 Hepatitis C virus nucleocapsid Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 208000029570 hepatitis D virus infection Diseases 0.000 description 2
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 206010011831 Cytomegalovirus infection Diseases 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 206010015108 Epstein-Barr virus infection Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 208000005331 Hepatitis D Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 108010015780 Viral Core Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000012817 gel-diffusion technique Methods 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010820 immunofluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000013115 immunohistochemical detection Methods 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229940043517 specific immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1081—Togaviridae, e.g. flavivirus, rubella virus, hog cholera virus
- C07K16/109—Hepatitis C virus; Hepatitis G virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2474/00—Immunochemical assays or immunoassays characterised by detection mode or means of detection
- G01N2474/20—Immunohistochemistry assay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/975—Kit
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
105275
Hepatiitti C -viruksen vastaisia monoklonaalisia vasta-aineita
Keksintö koskee hybridoomasolulinjaa, joka tuottaa Λ 5 sitoutumisspesifisyyden hepatiitti C -viruksen (HCV) ydin- proteiinissa olevia epitooppeja kohtaan omaavaa monoklo-naalista vasta-ainetta, ja myös hybridoomasolulinjan tuottamaa monoklonaalista vasta-ainetta.
Keksintö koskee myös menetelmää HCV:n osoittamisek-10 si näytteestä ja koetarvikkeita mainitun osoittamismene-telmän suorittamista varten.
HCV on hiljattain tunnistettu yhdeksi NANB-hepatii-tin (ei A- eikä B-) aiheuttajista. Se voidaan erottaa muista virukseen liittyvien maksasairauksien muodoista 15 mukaan lukien se, jonka aiheuttavat tunnetut hepatiitti-virukset, toisin sanoen hepatiitti A -virus (HAV), hepatiitti B -virus (HBV) ja deltahepatiittivirus (HDV), sekä hepatiitti, jonka aiheuttaa sytomegalovirus (CMV) tai Epstein-Barrin virus (EBV). Ei A- eikä B-hepatiitti on 20 ensimmäiseksi identifioitu henkilöillä, joille on suoritettu verensiirto. Siirtyminen ihmiseltä simpanssille ja sarjakulkeutuminen simpansseilla osoittivat, että ei A- * ' eikä B-hepatiitti johtuu henkilöstä toiseen siirtyvästä tartunnanaiheuttajasta tai -aiheuttajista.
* 25 Epidemiologiset todisteet viittaavat siihen, että ··· on olemassa kolme ei A- eikä B-hepatiittityyppiä: vesitse · · · :\j leviävä epideeminen tyyppi; vereen tai neulaan liittyvä • · tyyppi ja hajatapauksina esiintyvä (yhteisöstä saatu) f tyyppi. Kuitenkin taudinaiheuttajien, jotka voivat aiheut- ... 3 0 taa ei A- eikä B-hepatiitin, lukumäärä on vielä tuntema- * * . ton.
• · ·;·’ Ei A- eikä B-hepatiitin kliininen diagnoosi ja ·. ; j | identifiointi on suoritettu pääasiallisesti sulkemalla pois muita viruksiin liittyviä merkkiaineita. Menetelmiin, • Il 35 joita on käytetty oletettujen ei A- eikä B-hepatiittianti- • * f • · · • · 105275 2 geenien ja -vasta-aineiden osoittamiseen, kuuluvat agar-geelidiffuusio, vastaimmunoelektroforeesi, immunofluore-senssimikroskopia, immunoelektronimikroskopia, radioimmu-noanalyysi ja entsyymiin liitetty immunosorbentti -analyy-5 si. Kuitenkaan mikään näistä analyyseistä ei ole osoittautunut riittävän herkäksi, spesifiseksi eikä toistettavaksi käytettäväksi diagnostisena kokeena ei A- eikä B-hepatii-tin määrittämistä varten. Viime aikoina on kehitetty serologisia testejä HCV-infektiota varten ja niitä on kaupal-10 lisesti saatavissa. Kuitenkin sellaisen spesifisen ja herkän menetelmän kehittämiseksi, joka mahdollistaisi luotettavan diagnoosin tekemisen infektion eri vaiheissa, on hyvin tärkeää, että voidaan osoittaa HCV sen sijaan että osoitetaan HCV:ta vastaan suunnattuja vasta-aineita kuten 15 tehdään nykyisten kaupallisesti saatavissa olevien testien avulla.
On itsestään selvää, että oletetusti HCV:11a infektoidun potilaan varhainen diagnoosi on erittäin tärkeä, koska sen seurauksena sairaudesta kärsivän potilaan hoito 20 voi alkaa mahdollisimman aikaisin.
Ennen tätä keksintöä ei ollut vakuuttavaa näyttöä HCV:tä vastaan tuotetuista monoklonaalisista vasta-aineis- i
MM
' ' ta. Trepo, C. et.ai. kuvaavat NANB-(HCV) ydinantigeenin < sekä polyklonaalisia anti-NANBc-vasta-aineita sisältävän 25 antiseerumin (J. Med. Virol. 8 (1981), ss. 31 - 47). EP- #;j· 3 63 025 kuvaa NANB-hepatiittivirusantigeenipeptidin syn- :*·,· teesin, jota peptidiä käytetään immunogeeninä tuotettaessa • · spesifisiä monoklonaalisia NANB-vasta-aineita. EP-445 801 kuvaa sen synteettisen peptidin sekvenssin, jota vastaan ... 30 tämän keksinnön monoklonaalinen vasta-aine on tuotettu.
• i • » ’.V, Julkaisussa FI-911 528 kuvataan peptidejä, jotka reagoivat • · •y* NANBH:ia vastaisten vasta-aineiden kanssa.
: Vaikka sellaiset patenttihakemukset kuin EP 318 216 ja EP 388 232 väittävät, että alan ammattimies kykenee « « « 35 helposti valmistamaan HCV:n vastaisia monoklonaalisia vas- • » « » « · i · • · • · · 3 105275 ta-aineita, sen vuoden aikana, joka on kulunut näiden julkaisujen jälkeen, kukaan ei vielä ole esitellyt HCV:n vastaisten monoklonaalisten vasta-aineiden tuottamista. Tämä johtuu luultavasti viruksen kolmiulotteista rakennetta t 5 koskevien tietojen puuttumisesta. Kukaan alan ammattimies ei tähän mennessä ole tuntenut käytettävissä olevia epi-tooppeja vasta-aineiden sitomiseksi.
Tämän keksinnön mukaiset monoklonaaliset vasta-aineet tarjoavat sen vuoksi uuden keinon HCV-infektion diag-10 noosia varten.
Edullisessa suoritusmuodossa tämä keksintö tarjoaa hepatiitti C -viruksen ydinproteiinissa olevalle epitoo-pille spesifisen monoklonaalisen vasta-aineen, jolloin monoklonaalinen vasta-aine on tuotettu hybridoomasolulin-15 jasta, joka on aikaansaatu fuusioimalla myeloomasolu sellaisen imusolun kanssa, joka on peräisin HCV-ydinpeptidillä aikaisemmin rokotetulta hiireltä.
Tämän edullisen suoritusmuodon lisäksi eräs osa keksintöä on monoklonaalinen vasta-aine, joka on suunnattu 20 HCV-ydinpeptidiä (A1327), jolla on aminohapposekvenssi (yhden kirjaimen koodi) RTQQRKTKRSTNRRR, tai sen fragmentteja ja peptidin ja sen fragmenttien analogeja vas- • » · ·
taan. Monoklonaalista vasta-ainetta, jonka koodi on HCV-OT
...T 1F2, tuottaa hybridoomasolulinja. Mainittu hybridoomasolu- 25 linja on talletettu kokoelmaan the European Collection of *:* Animal Cell Cultures (ECACC) , Porton Down, Iso-Britannia, ···· ' ' :*·.· numerolla: 91101711 17.10.1991 Budapestin sopimuksen, • m 1977, ehdoilla ja olosuhteisiin.
• · · ^
Keksintö käsittää myös menetelmän HCV:n osoittami-30 seksi näytteestä saattamalla näyte kosketuksiin yllä kuva- « · ^ !!! tun monoklonaalisen vasta-aineen kanssa, minkä jälkeen muodostuneiden immuunikompleksien läsnäolo osoitetaan ja 5 — tämän perusteella ratkaistaan HCV:n läsnäolo näytteessä.
; Koetarvikkeet käytettäviksi immunoanalyysissä ovat myös r i i « « « • · · 105275 4 osa keksintöä. Tällaiset koetarvikkeet sisältävät vähintään keksinnön mukaisen monoklonaalisen vasta-aineen.
Keksinnön mukaisia monoklonaalisia vasta-aineita tuottavan hybridoomasolulinjan valmistus voi tapahtua esi-5 merkiksi Kohlerin ja Milsteinin tekniikan avulla. Siten voidaan aikaansaada solufuusio, kuolemattomia vasta-ainetta tuottavia solulinjoja, vaikka myös muita tekniikkoja on käytettävissä kuten B-imusolujen suora transformaatio kasvaimia synnyttävällä DNA:11a tai transfektio Epstein-Bar-10 rin viruksella. Edullisin menetelmä on Kohlerin ja Milsteinin tekniikka.
Kohlerille ja Milsteinille annetaan yleensä kunnia sellaisten tekniikkojen suunnittelemisesta, jotka johtivat menestyksekkäästi ensimmäisten monoklonaalista vasta-ai-15 netta tuottavien hybridoomien muodostumiseen (G. Kohler ja C. Milstein, Nature 256 (1975) 495 - 497; Eur. J. Immunol.
6 (1976) 511 - 519). Fuusioimalla vasta-ainetta muodos tavia soluja (pernan imusoluja) myeloomasolujen kanssa (luuytimen primaaristen kasvainten pahanlaatuisia soluja) 20 he aikaansaivat yhdestä ainoasta fuusioidusta solusekamuo-dosta (jota kutsutaan hybridoomaksi tai klooniksi), joka oli perinyt eräitä ominaisuuksia sekä imusoluilta että « « · · myeloomasolulinjoilta, syntyneen hybridisolulinjan. Kuten imusolut (jotka oli otettu eläimiltä, jotka oli käsitelty 25 käyttäen lampaan punasoluja antigeeninä) hybridoomat erit- #>*:· tivät yhtä ainoaa immunoglobuliinityyppiä, joka oli spesi- :*·.· finen kyseiselle antigeenille; lisäksi hybridisoluilla • · kuten myeloomasoluilla oli kyky rajoittamattomaan solunjakautumiseen. Näiden kahden ominaisuuden yhdistelmä tarjosi w·.. 30 selviä etuja verrattuna tavanomaisiin antiseerumeihin. Sen • sijaan että rokotetuilta eläimiltä saadut antiseerumit • · *;· ovat polyklonaalisten vasta-aineiden vaihtelevia seoksia, ? joita ei koskaan voida tuottaa uudelleen identtisesti, monoklonaaliset vasta-aineet ovat yhtä ainoaa tyyppiä ole-35 via erittäin spesifisiä immunoglobuliineja. Hybridooman I i « « «Il i
t I I
5 105275 erittämä yksi ainoa immunoglobuliinityyppi on spesifinen yhdelle ja ainoastaan yhdelle antigeenideterminantille eli epitoopille antigeenissä, joka on monia antigeenideter-minantteja omaava monimutkainen molekyyli. Esimerkiksi jos 7 5 antigeeni on proteiini, antigeenideterminantti voi olla yksi monista peptidisekvensseistä (yleensä pituudeltaan 6 - 7 aminohappoa; M.Z. Atassi, Molec. Cell. Biochem. 32 (1980) 21 - 43) koko proteiinimolekyylissä. Siten yhtä ainoaa antigeeniä vastaan aikaansaadut monoklonaaliset 10 vasta-aineet voivat olla keskenään erilaisia riippuen determinantista, joka aiheutti niiden muodostumisen; mutta kullakin tietyllä kloonilla kaikki sen tuottamat vasta-aineet ovat identtisiä. Lisäksi hybridoomasolulinjaa on helppo lisätä ja se tuottaa monoklonaalisia vasta-aineita 15 erittäin suurena pitoisuutena.
Sen jälkeen kun on immunoitu hiiriä synteettisellä, rekombinantti- tai luonnollisella HCV-ydinantigeenillä, edullisesti peptidillä A1327 kuten aikaisemmin on mainittu, yllä mainittua hybridoomatekniikkaa käyttäen näyttää 20 mahdolliselta aikaansaada hybridoomasolulinja, joka tuot taa hepatiitti C -virusydinproteiinissa olevalle epitoopille spesifistä monoklonaalista vasta-ainetta.
t » « · ’ * Eräs osa keksintöä on myös kysymyksessä olevien monoklonaalisten vasta-aineiden "humaanistaminen". Tek-!t|fi 25 nilkkoja "humaanistettujen" monoklonaalisten vasta-ainei- ·;· den aikaansaamiseksi tunnetaan alalla.
9 9#· ;*·,· Mainitun peptidin valmistus suoritetaan soveltamal- • 9 la jotakin tunnetuista orgaanisen kemian menetelmistä pep- 9 tidisynteesiä varten tai yhdistelmä-DNA-tekniikkojen avul-#... 30 la. Tähän jälkimmäiseen menetelmään sisältyy halutun pep- * 9 - tidin valmistus siten, että ilmennetään rekombinanttipoly- 9 a ···’ nukelotidia, jossa on kysymyksessä olevan peptidin koodaa- = : va polynukleotidisekvenssi, isäntänä toimivassa sopivassa :mikro-organismissa.
»tl • I » III I 4
I I
• « · 105275 6
Orgaanisen kemian peptidisynteesimenetelmien katsotaan käsittävän vaadittujen aminohapojen kytkemisen kon-densaatioreaktion avulla, joko homogeenisessa faasissa tai niin kutsutun kiinteän faasin avulla.
5 Kuten jo aikaisemmin on mainittu, kysymyksessä ole va peptidi voidaan samoin valmistaa yhdistelmä-DNA-tek-niikkojen avulla. Tämä mahdollisuus on tärkeä erityisesti kun peptidi yhdistetään toistuvaan sekvenssiin ("tandem"-järjestelmään) tai kun peptidi voidaan valmistaa (paljon 10 suuremman) proteiinin tai polypeptidin osana. Tätä tarkoitusta varten käytetään yhdistelmä-DNA:n osana polynukleo-tidia, joka koodaa peptidin.
Keksinnön mukaiset monoklonaaliset vasta-aineet ovat erittäin sopivia käytettäviksi niin kutsutuissa immu-15 noanalyyseissä HCV:n tai HCV-fragmenttien osoittamiseksi koenäytteestä. Riippuen monoklonaalisten vasta-aineiden laadusta ja lisäominaisuuksista tapahtuva immunokemialli-nen reaktio on niin kutsuttu voileipäreaktio, agglutinaa-tioreaktio, kilpailureaktio tai inhibitioreaktio.
20 Suoritettaessa esimerkiksi voileipäreaktio HCV: n osoittamiseksi koenäytteestä käytettävät koetarvikkeet sisältävät keksinnön mukaisen monoklonaalisen vasta-ai- • « · · ' ’ neen, jolla on päällystetty kiinteä kantaja, esimerkiksi « mikrokoekuopan sisäseinä, ja joko merkityn monoklonaalisen * 25 vasta-aineen tai sen fragmentin konjugaattina.
»·· Kantajia, joita voidaan käyttää, ovat esimerkiksi «··· •*.#i mikrokoekuopan tai kyvetin sisäseinä, putki tai kapillaa- • · ri, kalvo, suodatin, koeliuska tai hiukkasen kuten esimer- • · « kiksi lateksihiukkasen pinta, punasolu, värisooli, metal- 30 lisooli tai metal liyhdiste soolihiukkasena, kantajapro- ·*·* teiini kuten BSA tai KLH.
• · ·;·* Merkitsemisaineita, joita voidaan käyttää, ovat muun muassa radioaktiivinen isotooppi, fluoresoiva yh-diste, entsyymi, värisooli, metallisooli tai metalliyh-35 diste tai muu sooli soolihiukkasena.
* · « » « « 4 < 4 t 7 105275
Kuten jo on mainittu, keksinnön mukaiset monoklonaaliset vasta-aineet ovat hyvin sopivia diagnoosissa. Monoklonaalisia vasta-aineita voidaan myös käyttää anti-idiotyyppivasta-aineiden aikaansaamiseen. Tekniikkoja an-ϊ 5 ti-idiotyyppivasta-aineiden aikaansaamiseksi tunnetaan alalla.
Anti-idiotyyppivasta-aineet saattavat olla hyödyllisiä ei A- eikä B-hepatiitin ehkäisemistä ja/tai hoitoa varten samoin kuin myös HCV-antigeenien tärkeiden epitoop-10 pialueiden selvittämistä varten.
Esimerkki
Monoklonaalisen vasta-aineen HCV-OT 1F2, joka on talletettu kokoelmaan ECACC, Porton Down, Iso-Britannia, nro GB 9 110 1711, valmistus on kuvattu aikaisemmin tässä 15 patenttihakemuksessa.
Pyrkimyksenä osoittaa HCV-antigeeni tutkittiin mo-noklonaalisten vasta-aineiden vasta-ainereaktiokykyä immu-nohistokemiallisen värjäyksen avulla NANB-tartunnanaiheut-tajalla (-aiheuttajilla) infektoidun simpanssin elävästä 20 maksakudoksesta otetussa näytteessä. Tällä simpanssilla ei ollut HBV-, CMV- eikä EBV-infektion serologisia merkkiaineita. HCV-vasta-aineen seerumireaktiivisuuden lisäksi
IMI
HCV-RNA osoitettuna PCR:n avulla käyttäen alukkeita kuten ovat kuvanneet Garson et ai. (Lancet 336 (1990) 1022) oli 25 positiivinen seerumissa ja maksakudoksessa. Maksakudokset ^•j· hankittiin ajankohtana, jolloin maksan entsyymitasot :1·,· (ASAT - ALAT) olivat kohonneita.
Maksakudosnäytteitä hankittiin myös seuraavilta: 10 potilaalta, joilla oli HCV-infektio (kaikki oli-30 vat positiivisia HCV- serologisten merkkiaineiden ja HCV-. RNA:n suhteen) ja ·;·' 4 kontrollipotilaalta, jotka käsittivät: . c 2 potilasta, joilla oli HBV-infektio
1 potilaan, jolla oli PBC
35 1 potilaan, jolla oli autoimmuuni krooninen hepatiitti.
« 1 c « ·
I
I « < 8 105275
Kaikki kontrollipotilaat olivat negatiivisia HCV- serologisten merkkiaineiden ja PCR:n avulla osoitetun HCV-RNA:n suhteen.
Immunohistokemia: 5 Immunohistokemia suoritettiin käyttäen tuoreiden jäädytettyjen materiaalien 4 μτη:η paksuisia kryostaatti-leikkeitä. Endogeeninen peroksidaasiaktiivisuus inhiboitiin pitäen liuoksessa, jossa oli 0,3 % H202 metanolissa, 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa. Leikkeitä inkuboi-10 tiin normaalin sian seerumin kanssa (1/20 7 minuutin ajan) huoneenlämpötilassa. Ylimäärä sian seerumia pyyhittiin pois ja ensimmäinen spesifinen monoklonaalinen IgG (tai kanin antiseerumi tai hiiren antiseerumi) lisättiin 30 minuutin ajaksi huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen kun oli 15 huuhdottu PBS:ssa (3x5 min), näytelaseja inkuboitiiri hiiren immunoglobuliinin vastaisen kanin antiseerumin (tai vuohen antikani-immunoglobuliinin) kanssa 1/20 PBS-NHS (10 %) -liuoksessa 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa.
Sen jälkeen kun oli lisäksi huuhdottu PBSrssa (3x5 min), 20 niitä inkuboitiin piparjuuriperoksidaasi-kanin antipipar-juuriperoksidaasi - liukoisen kompleksin (PAP, Dakopatts) kanssa 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa l/300-laimen- • 1 noksessa. Pesun jaikeen peroksidaasi-immunoreaktiotuotetta ,.!·1 kehitettiin diaminobentsidiini (DAB) -H202-liuoksessa 5 25 minuutin ajan huoneenlämpötilassa (60 mg DAB liuotettiin ··· 100 ml:aan PBS; suodatuksen jälkeen 100 μΐ 30 % H202-liuos- • · · « ta lisättiin). Sen jälkeen kun oli huuhdottu vesijoh- * · tovedessä ja erotettu happamassa alkoholissa, leikkeet kiinnitettiin DPX:ssä.
... 3 0 Tulokset: • r I” Vasta-aineiden alkuseulontaa varten HCV-antigeenin • · ·;·1 maksakudoksessa osoittamisen suhteen käytettiin maksaku- c dosta, joka oli hankittu ei A- eikä B-hepatiitilla infekt- oidulta simpanssilta.
f « · « « 4 « · < I · 9 105275
Testatuista vasta-aineista monoklonaalinen vasta-aine HCV-OT 1F-2 osoittaa "spesifistä" soluiimavärjäystä tässä maksakudoksessa.
Kaikki muut vasta-aineet joko reagoivat "epäspesi-5 fisesti" tai eivät osoita ollenkaan värjäystä. Tutkitun 14 potilaan tulokset on annettu taulukossa 1.
Taulukko 1 HCV-antigeenin immunohistokemiallinen osoittaminen eläväs-10 tä maksakudoksesta otetuista näytteistä käyttäen mono-klonaalista vasta-ainetta HCV-OT 1F-2.
Tulokset 15 positii- negatiivinen vinen 10 potilasta, joilla oli ei A- eikä B-hepatiitti 7 3 2 potilasta, joilla oli 20 hepatiitti B 2 1 potilas, jolla oli PBC 1 , 1 potilas, jolla oli auto- < « « · immuuni krooninen hepatiitti 1 f r ( mi V 25 Kokonaismäärä: 7 7 ··· • · · Tämä tutkimus tarjoaa vakuuttavia todisteita siitä, että monoklonaalinen vasta-aine HCV-OT 1F-2 kykenee osoit- tamaan spesifisesti maksasolujen solulimassa olevan HCV- .···„ 30 antigeenin, huolimatta negatiivisista tuloksista kolmella • · *.···, potilaalla, joilla oli ei A- eikä B-hepatiitti ja joilla T oli positiivisia HCV-infektion serologisia merkkiaineita • ψ ; ja joilla HCV-RNA myös todettiin seerumissa. Negatiivinen tulos näillä kolmella potilaalla voi johtua maksasoluissa 35 läsnä olevan virusantigeenin pienestä pitoisuudesta tai < « 1 t « • · • , • « · 105275 10 tämän analyysin suhteellisen pienestä herkkyydestä antigeenin osoittamisen suhteen. Tämän analyysin immunologinen spesifisyys oli huomattava, sillä reaktiota ei todettu maksakudoksissa, jotka oli saatu hepatiitti B:n ja PBC:n 5 omaavilta potilailta. Reaktio on yhdenmukaisesti positiivinen sen jälkeen kun on suoritettu "immunoabsorptio" normaalin ihmisen maksakudoksen homogenaatin kanssa.
t « · · · * 1 • • I «
IMI
f
I · I
l f » i i r • • · · t··· • · · · · 1 • ·
• M
• · ft • 9 · •
Ml • t • · • · · • · · • ·
»M
Iti • tl
I f I III
| a I « I · •
Claims (6)
1. Hybridoomasolulinja, tunnettu siitä, että se kykenee tuottamaan vasta-aineita, joilla on sama 5 immuunireaktiivisuus hepatiitti C-viruksen (HCV) proteiineja kohtaan kuin ECACC:hen talletetun solulinjan nro. 91101711 tuottamilla vasta-aineilla.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen hybridoomasolulinja, tunnettu siitä, että se on ECACC:hen tallo letettu solulinja nro. 91101711.
3. Vasta-aine, tunnettu siitä, että sillä on sama immuunireaktiivisuus hepatiitti C-viruksen (HCV) proteiineja kohtaan kuin ECACC:hen talletetun solulinjan nro. 91101711 tuottamilla monoklonaalisilla vasta- 15 aineilla.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen vasta-aine, tunnettu siitä, että se on monoklonaalinen vasta-aine, joka on saatavissa ECACC:hen talletetusta solulin-jasta nro. 91101711.
5. Menetelmä hepatiitti C-viruksen (HCV) osoitta miseksi näytteestä, tunnettu siitä, että näyte saatetaan kosketuksiin patenttivaatimuksen 3 tai 4 mukai-sen vasta-aineen kanssa, minkä jälkeen muodostuneiden im-muunikompleksien läsnäolo osoitetaan ja tämän perusteella i r '1 25 ratkaistaan HCV:n läsnäolo. • » · m
*;**, 6. Koetarvikkeet patenttivaatimuksen 5 mukaisen • · · ’· '· menetelmän suorittamiseksi, tunnetut siitä, että • · · · V ‘ ne käsittävät kiinteän faasin, johon ECACCrhen talletetun solulinjan nro. 91101711 tuottamat vasta-aineet on immobi- • * « 30 lisoitu ja välineet kiinteässä faasissa olevien vasta-aineiden ja näytteessä mahdollisesti läsnä olevan HCV:n .’« välillä muodostuneiden mahdollisten immuunikompleksien ,,,c osoittamiseksi sen jälkeen, kun näyte on saatettu koske- r » tuksiin kiinteän faasin kanssa. • 4 f • « • · 105275
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP91202659 | 1991-10-15 | ||
| EP91202659 | 1991-10-15 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI924641A0 FI924641A0 (fi) | 1992-10-14 |
| FI924641A FI924641A (fi) | 1993-04-16 |
| FI105275B true FI105275B (fi) | 2000-07-14 |
Family
ID=8207945
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI924641A FI105275B (fi) | 1991-10-15 | 1992-10-14 | Hepatiitti C-viruksen vastaisia monoklonaalisia vasta-aineita |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5595868A (fi) |
| EP (1) | EP0537856B1 (fi) |
| JP (1) | JP3335387B2 (fi) |
| KR (1) | KR100238559B1 (fi) |
| AT (1) | ATE162553T1 (fi) |
| AU (1) | AU670541B2 (fi) |
| CA (1) | CA2080548C (fi) |
| DE (1) | DE69224134T2 (fi) |
| ES (1) | ES2114547T3 (fi) |
| FI (1) | FI105275B (fi) |
| ZA (1) | ZA927837B (fi) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2049679C (en) * | 1990-08-24 | 2005-06-21 | Sushil G. Devare | Hepatitis c assay utilizing recombinant antigens |
| WO1992008738A1 (en) * | 1990-11-07 | 1992-05-29 | Abbott Laboratories | Monoclonal antibodies to hepatitis c virus and method for using same |
| US5753430A (en) * | 1990-11-07 | 1998-05-19 | Abbott Laboratories | Monoclonal antibodies to hepatitis C virus and method for using same |
| JP3217600B2 (ja) * | 1994-07-12 | 2001-10-09 | 株式会社先端生命科学研究所 | 非ａ非ｂ型肝炎ウイルス関連抗原のイムノアッセイ、それに使用するモノクローナル抗体、およびこの抗体を産生するハイブリドーマ |
| CN1044384C (zh) * | 1994-08-25 | 1999-07-28 | 中国药品生物制品检定所 | 抗丙型肝炎病毒抗原单克隆抗体细胞株建立及其单克隆抗体 |
| US5849800A (en) * | 1997-03-28 | 1998-12-15 | The Penn State Research Foundation | Use of amantadine for treatment of Hepatitis C |
| CA2316130A1 (en) * | 1999-08-19 | 2001-02-19 | Masanori Fukui | Method for detection or determination of hcv core antigens and reagent for detection or determination for use therein |
| US20030232745A1 (en) * | 2001-06-26 | 2003-12-18 | Olson William C. | Uses of DC-sign and DC-Signr for inhibiting hepatitis C virus infection |
| US7022323B2 (en) * | 2001-06-26 | 2006-04-04 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Uses of DC-SIGN and DC-SIGNR for inhibiting hepatitis C virus infection |
| US7049060B2 (en) * | 2001-11-05 | 2006-05-23 | Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. | HCV anti-core monoclonal antibodies |
| US7858752B2 (en) | 2006-12-05 | 2010-12-28 | Abbott Laboratories | Recombinant antibodies against hepatitis C virus and methods of obtaining and using same |
| CA2678888C (en) | 2007-02-21 | 2015-04-14 | University Of Massachusetts | Human antibodies against hepatitis c virus (hcv) and uses thereof |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU220204B (hu) * | 1987-11-18 | 2001-11-28 | Chiron Corp. | HCV polipeptidek és HCV polinukleotidok, ilyen polinukleotidokat tartalmazó vektorok és ezekkel transzformált gazdasejtek, valamint HCV fertőzés kimutatására szolgáló diagnosztikumok és immunvizsgálati készlet |
| US5191064A (en) * | 1988-09-30 | 1993-03-02 | The Research Foundation For Microbial Diseases (Osaka University) | Non-a, non-b hepatitis virus antigen peptide |
| HU225068B1 (en) * | 1989-03-17 | 2006-05-29 | Chiron Corp | Process for producing diagnostics and vaccine of nanbh |
| EP0445801A3 (en) * | 1990-03-08 | 1992-07-01 | Kuraray Co., Ltd. | Peptide and its use |
| JPH0436185A (ja) * | 1990-03-28 | 1992-02-06 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 融合抗原ポリペプチド |
| ZA912040B (en) * | 1990-03-30 | 1991-12-24 | Akzo Nv | Peptides immunochemically reactive with antibodies directed against hepatitis non-a,non-b virus |
-
1992
- 1992-10-12 ZA ZA927837A patent/ZA927837B/xx unknown
- 1992-10-14 AT AT92203144T patent/ATE162553T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-10-14 DE DE69224134T patent/DE69224134T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-14 FI FI924641A patent/FI105275B/fi active
- 1992-10-14 CA CA002080548A patent/CA2080548C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-10-14 EP EP92203144A patent/EP0537856B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-14 ES ES92203144T patent/ES2114547T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-15 KR KR1019920019092A patent/KR100238559B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-10-15 JP JP27712892A patent/JP3335387B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-10-15 AU AU27079/92A patent/AU670541B2/en not_active Ceased
-
1995
- 1995-08-14 US US08/514,982 patent/US5595868A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA927837B (en) | 1994-03-11 |
| CA2080548A1 (en) | 1993-04-16 |
| EP0537856A1 (en) | 1993-04-21 |
| KR930008155A (ko) | 1993-05-21 |
| JPH05260960A (ja) | 1993-10-12 |
| FI924641A (fi) | 1993-04-16 |
| DE69224134T2 (de) | 1998-07-02 |
| JP3335387B2 (ja) | 2002-10-15 |
| AU2707992A (en) | 1993-04-22 |
| AU670541B2 (en) | 1996-07-25 |
| CA2080548C (en) | 2003-07-01 |
| EP0537856B1 (en) | 1998-01-21 |
| KR100238559B1 (ko) | 2000-01-15 |
| US5595868A (en) | 1997-01-21 |
| DE69224134D1 (de) | 1998-02-26 |
| ES2114547T3 (es) | 1998-06-01 |
| FI924641A0 (fi) | 1992-10-14 |
| ATE162553T1 (de) | 1998-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4487829A (en) | Production and use of monoclonal antibodies against adenoviruses | |
| FI105275B (fi) | Hepatiitti C-viruksen vastaisia monoklonaalisia vasta-aineita | |
| JP4118955B2 (ja) | Ｂ型肝炎モノクローナル抗体 | |
| US6623921B2 (en) | Method for measurement of hepatitis C virus | |
| US4910131A (en) | Idiotype and anti-idiotype antibodies useful in virus detection | |
| AU632271B2 (en) | Production of monoclonal antibodies specific for non-a, non-b hepatitis infected liver | |
| JP7454546B2 (ja) | Ｅ型肝炎ウイルスのＯＲＦ２ｉタンパク質に対して特異性を有する抗体及びその診断目的のための使用 | |
| CN112384530B (zh) | 戊型肝炎病毒orf2i蛋白的表位肽 | |
| AU1362792A (en) | Monoclonal antibodies to putative hcv envelope region and methods for using same | |
| AU682335B2 (en) | Monoclonal antibodies and anti-idiotypic antibodies to hepatitis C virus | |
| JP3292728B2 (ja) | Ｃ型肝炎ウイルスに対するモノクローナル抗体およびその使用法 | |
| Dawson et al. | Monoclonal antibodies to hepatitis A virus | |
| Whittaker et al. | Plasma membrane orientation of simian virus 40 T antigen in three transformed cell lines mapped with monoclonal antibodies | |
| US5670310A (en) | Methods and compositions for differential diagnosis of acute and chronic hepatitis c virus infection | |
| WO1986003498A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| EP0409883A1 (en) | MONOCLONAL ANTIBODIES TO ENTEROVIRUSES. | |
| Ben-Porath et al. | Monoclonal antibodies as diagnostic probes in the etiology of hepatitis | |
| EP0186371A2 (en) | Monoclonal antibodies specific to antigens of Hepatitis B virus | |
| JPH0797398A (ja) | Ｃ型肝炎用検査薬およびｃ型肝炎ウイルス抗原ペプチド | |
| JPH04505253A (ja) | 血液中のニューモシスティスカリニ抗原の存在を検出する方法およびシステム | |
| JP2009142269A (ja) | ヒトＩｇＧのＦｃを含有するタンパク質の測定試薬 | |
| DD268162B1 (de) | Verfahren zur herstellung von monoklonalen antikoerpern gegen humanes immunglobulin m (igm) | |
| WO1990000404A1 (en) | Enrichment of antigen-specific polyclonal antibodies through selection of immortal hybrid cells | |
| WO1997006823A1 (en) | Monoclonal antibodies for detecting norwalk virus |