JP3085895B2 - エキセロヒルム・モノセラスに属する新規な菌株及びその用途 - Google Patents
エキセロヒルム・モノセラスに属する新規な菌株及びその用途Info
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- JP3085895B2 JP3085895B2 JP07301684A JP30168495A JP3085895B2 JP 3085895 B2 JP3085895 B2 JP 3085895B2 JP 07301684 A JP07301684 A JP 07301684A JP 30168495 A JP30168495 A JP 30168495A JP 3085895 B2 JP3085895 B2 JP 3085895B2
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- monoceras
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- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
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- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
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- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、エキセロヒルム・
モノセラス（Exserohilum monoceras）に属する新規菌
株、並びにそれを用いた雑草防除剤及び雑草防除方法に
関する。
モノセラス（Exserohilum monoceras）に属する新規菌
株、並びにそれを用いた雑草防除剤及び雑草防除方法に
関する。
【０００２】
【従来の技術】安定した食料生産のため、農耕地では農
薬の使用が不可欠となっている。しかし、自然界に存在
しない化学物質を含む化学合成農薬を長期間大量に農耕
地に散布するため、様々な弊害が現れている。最も重要
な問題は農薬による直接的な人畜への影響と生態系の破
壊である。近年、化学農薬の雑草、害虫、病原菌に対す
る特異性が飛躍的に向上してきたため、人畜に対する影
響は低減されてきたが、農薬散布時等の高濃度の薬剤に
接触する機会には十分な注意が必要であることに変わり
はない。さらに、化学農薬は対象雑草、害虫、病原菌に
対する選択性が必ずしも高くないので、生態系を乱すこ
とが多い。
薬の使用が不可欠となっている。しかし、自然界に存在
しない化学物質を含む化学合成農薬を長期間大量に農耕
地に散布するため、様々な弊害が現れている。最も重要
な問題は農薬による直接的な人畜への影響と生態系の破
壊である。近年、化学農薬の雑草、害虫、病原菌に対す
る特異性が飛躍的に向上してきたため、人畜に対する影
響は低減されてきたが、農薬散布時等の高濃度の薬剤に
接触する機会には十分な注意が必要であることに変わり
はない。さらに、化学農薬は対象雑草、害虫、病原菌に
対する選択性が必ずしも高くないので、生態系を乱すこ
とが多い。
【０００３】以上の問題を解決するため、対象外生物種
に全く影響を及ぼさない環境保全型の農薬の開発が望ま
れてきた。雑草病原微生物を用いる除草剤はそのひとつ
である。雑草病原微生物は雑草中に普遍に存在するもの
であり、これを利用した微生物除草剤は、人畜、魚介
類、昆虫等の小動物に危害を与えることが少なく、植物
に薬害を起こす可能性が低いことが知られている。ま
た、微生物除草剤は目的とする雑草に対する特異性が高
いので、選択性が高く、生態系を乱す可能性が低いと考
えられる。現在、商品化されている微生物除草剤には、
Phytophthora palmivoraを用いたStranglervine（がが
いも科）の除草剤ＤｅＶｉｎｅ、Colletotrichum gloeo
sporioides f.sp. aeschynomeneを用いたNorthern join
tvetch （クサネムの近縁種）の除草剤Ｃｏｌｌｅｇ
ｏ、そしてColletotrichum gloeosporioides f.sp. mal
vaeを用いたround-leaved mallow（マルバゼニアオイ）
の除草剤ＢｉｏＭａｌがある。
に全く影響を及ぼさない環境保全型の農薬の開発が望ま
れてきた。雑草病原微生物を用いる除草剤はそのひとつ
である。雑草病原微生物は雑草中に普遍に存在するもの
であり、これを利用した微生物除草剤は、人畜、魚介
類、昆虫等の小動物に危害を与えることが少なく、植物
に薬害を起こす可能性が低いことが知られている。ま
た、微生物除草剤は目的とする雑草に対する特異性が高
いので、選択性が高く、生態系を乱す可能性が低いと考
えられる。現在、商品化されている微生物除草剤には、
Phytophthora palmivoraを用いたStranglervine（がが
いも科）の除草剤ＤｅＶｉｎｅ、Colletotrichum gloeo
sporioides f.sp. aeschynomeneを用いたNorthern join
tvetch （クサネムの近縁種）の除草剤Ｃｏｌｌｅｇ
ｏ、そしてColletotrichum gloeosporioides f.sp. mal
vaeを用いたround-leaved mallow（マルバゼニアオイ）
の除草剤ＢｉｏＭａｌがある。
【０００４】水田において、最も重要な雑草であるノビ
エに対する微生物除草剤にはCochliobolus lunatus（ア
ナモルフ：Curvularia lunata）〔Weed Research(198
7), 27, 43-47、特開平5-284963号公報〕、あるいはUst
ilago trichophora〔WO93/05656〕、Drechslera monoce
ras（Exserohilum monocerasの異名）〔特開平3-219883
号公報、特開平4-226905号公報、特開平4-360678号公
報、特開平4-370090号公報、特開平6-277042号公報、特
開平6-329513号公報、特開平6-247822号公報〕を用いる
防除剤が公知である。
エに対する微生物除草剤にはCochliobolus lunatus（ア
ナモルフ：Curvularia lunata）〔Weed Research(198
7), 27, 43-47、特開平5-284963号公報〕、あるいはUst
ilago trichophora〔WO93/05656〕、Drechslera monoce
ras（Exserohilum monocerasの異名）〔特開平3-219883
号公報、特開平4-226905号公報、特開平4-360678号公
報、特開平4-370090号公報、特開平6-277042号公報、特
開平6-329513号公報、特開平6-247822号公報〕を用いる
防除剤が公知である。
【０００５】しかし、Cochliobolus lunatusは、十分な
効果を出すために１８時間以上の露点時間が必要であ
り、Ustilago trichophoraは、十分な効果が現れるまで
に薬剤散布後４から５週間必要であり、Drechslera mon
ocerasは、胞子生産量が低いという問題をそれぞれ有し
ている。このため、上記した微生物を利用した防除剤は
いずれも未だ実用化されていない。
効果を出すために１８時間以上の露点時間が必要であ
り、Ustilago trichophoraは、十分な効果が現れるまで
に薬剤散布後４から５週間必要であり、Drechslera mon
ocerasは、胞子生産量が低いという問題をそれぞれ有し
ている。このため、上記した微生物を利用した防除剤は
いずれも未だ実用化されていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、十分な除草
効果を示し、かつ胞子生産能の高い微生物を提供するこ
とを目的とする。
効果を示し、かつ胞子生産能の高い微生物を提供するこ
とを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、ノビエに
病原性を有する菌株の中から、除草効果が高い菌株の選
抜を行ったところ、除草効果が高いことに加え、胞子生
産能も高い一群の菌株を見出した。さらに、それらの菌
体内エステラーゼザイモグラムパターンを調べたとこ
ろ、それら一群の菌株はいずれも同様な染色パターンを
示し、また、その染色パターンは、公知の菌株のどの染
色パターンとも類似しないという知見を得た。以上のよ
うな知見に基づき、本発明者等は、以下の発明を完成し
た。
病原性を有する菌株の中から、除草効果が高い菌株の選
抜を行ったところ、除草効果が高いことに加え、胞子生
産能も高い一群の菌株を見出した。さらに、それらの菌
体内エステラーゼザイモグラムパターンを調べたとこ
ろ、それら一群の菌株はいずれも同様な染色パターンを
示し、また、その染色パターンは、公知の菌株のどの染
色パターンとも類似しないという知見を得た。以上のよ
うな知見に基づき、本発明者等は、以下の発明を完成し
た。
【０００８】即ち、本発明は、図１に示すエステラーゼ
ザイモグラムパターンを示すエキセロヒルム・モノセラ
スに属する菌株である。また、本発明は、上記記載の菌
株を有効成分として含有することを特徴とする雑草防除
剤である。さらに、本発明は、上記記載の雑草防除剤を
用いた雑草防除方法である。
ザイモグラムパターンを示すエキセロヒルム・モノセラ
スに属する菌株である。また、本発明は、上記記載の菌
株を有効成分として含有することを特徴とする雑草防除
剤である。さらに、本発明は、上記記載の雑草防除剤を
用いた雑草防除方法である。
【０００９】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の
菌株は、罹病ノビエ中より分離されたものであり、その
菌学的性質は以下の通りである。好気性菌であり、ジャ
ガイモ蔗糖寒天培地上において、集落は濃暗灰色あるい
は黒色である。また、白色あるいは灰色の気中菌糸がみ
られることもある。分生胞子は暗色、多胞で２〜８内外
の隔壁があり、紡錘形で中央部の幅が最も広く、両側に
向かって細くなる。また、基端部にヘソ（hilum ）が突
出している。分生胞子の大きさは４０〜１５０×１０〜
２５μｍ内外である。
菌株は、罹病ノビエ中より分離されたものであり、その
菌学的性質は以下の通りである。好気性菌であり、ジャ
ガイモ蔗糖寒天培地上において、集落は濃暗灰色あるい
は黒色である。また、白色あるいは灰色の気中菌糸がみ
られることもある。分生胞子は暗色、多胞で２〜８内外
の隔壁があり、紡錘形で中央部の幅が最も広く、両側に
向かって細くなる。また、基端部にヘソ（hilum ）が突
出している。分生胞子の大きさは４０〜１５０×１０〜
２５μｍ内外である。
【００１０】上記結果をA.SIVANESAN 著の「GRAMINICOL
OUS SPECIES OF BIPOLARIS, CURVULARIA, DRECHSLERA,
EXSEROHILUM AND THEIR TELEOMORPHS 」(Mycological P
apers, No.158, p-261, Nov.1987）のp201-237で調査し
た結果、集落の形状、分生胞子の形態が同一である等の
理由により、上記菌株をエキセロヒルム・モノセラス
（Exserohilum monoceras）と同定した。
OUS SPECIES OF BIPOLARIS, CURVULARIA, DRECHSLERA,
EXSEROHILUM AND THEIR TELEOMORPHS 」(Mycological P
apers, No.158, p-261, Nov.1987）のp201-237で調査し
た結果、集落の形状、分生胞子の形態が同一である等の
理由により、上記菌株をエキセロヒルム・モノセラス
（Exserohilum monoceras）と同定した。
【００１１】なお、エキセロヒルム属という属名は、A.
SIVANESAN の分類に従うものである。また、LUTTRELL
（Revue de Mycologie 41 巻, 271-279, 1977 年）とAL
CORN（Mycotaxon 8 巻 411-414, 1978年）もこの分類法
を支持している。一方、Ellis（Dematioceous Hyphomyc
etes, CMI,Kew,608,1971 年）は、エキセロヒルム属と
ビポラリス属（Bipolaris ）をドレクスレラ属（Drechs
lera）に含めドレクスレラ属だけを採用している。しか
し、近年 Ellis以外の研究者でエキセロヒルム属とビポ
ラリス属を認めない者はいないので、エキセロヒルム属
を採用することが適当であると考えられる。また、エキ
セロヒルム属の完全世代はセトスファエリア属（Setosp
haeria）であることが知られているので、セトスファエ
リア属と分類される微生物についても本発明の技術的範
囲に含まれる。
SIVANESAN の分類に従うものである。また、LUTTRELL
（Revue de Mycologie 41 巻, 271-279, 1977 年）とAL
CORN（Mycotaxon 8 巻 411-414, 1978年）もこの分類法
を支持している。一方、Ellis（Dematioceous Hyphomyc
etes, CMI,Kew,608,1971 年）は、エキセロヒルム属と
ビポラリス属（Bipolaris ）をドレクスレラ属（Drechs
lera）に含めドレクスレラ属だけを採用している。しか
し、近年 Ellis以外の研究者でエキセロヒルム属とビポ
ラリス属を認めない者はいないので、エキセロヒルム属
を採用することが適当であると考えられる。また、エキ
セロヒルム属の完全世代はセトスファエリア属（Setosp
haeria）であることが知られているので、セトスファエ
リア属と分類される微生物についても本発明の技術的範
囲に含まれる。
【００１２】本発明の菌株を具体的に示すと、ＪＴＢ−
０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、ＪＴＢ−８
０３、ＪＴＢ−８０８を挙げることができる。ＪＴＢ−
０１２はFERM BP-5271（寄託日平成７年１０月２７
日）、ＪＴＢ−０１３はFERM BP-5272（寄託日平成７年
１０月２７日）、ＪＴＢ−７９９はFERM BP-5273（寄託
日平成７年１０月２７日）、ＪＴＢ−８０３はFERM BP-
5274（寄託日平成７年１０月２７日）、ＪＴＢ−８０８
はFERM BP-5275（寄託日平成７年１０月２７日）という
受託番号で工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託さ
れている。
０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、ＪＴＢ−８
０３、ＪＴＢ−８０８を挙げることができる。ＪＴＢ−
０１２はFERM BP-5271（寄託日平成７年１０月２７
日）、ＪＴＢ−０１３はFERM BP-5272（寄託日平成７年
１０月２７日）、ＪＴＢ−７９９はFERM BP-5273（寄託
日平成７年１０月２７日）、ＪＴＢ−８０３はFERM BP-
5274（寄託日平成７年１０月２７日）、ＪＴＢ−８０８
はFERM BP-5275（寄託日平成７年１０月２７日）という
受託番号で工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託さ
れている。
【００１３】図２に示すように、これらの菌株は、公知
のエキセロヒルム・モノセラスに属する菌株であるIFO9
800 、IMI125854 、IMI125855 、ATCC24641 、ATCC5834
6 とは異なるエステラーゼザイモグラムパターンを示
す。本菌株の培養には、特別な方法を用いる必要はな
く、公知のエキセロヒルム・モノセラスに属する菌株と
同様の方法で培養することができる。培地としては資化
可能な炭素源、窒素源、無機物及び必要な生育促進物質
を適当に含有する培地であれば、合成培地、天然培地の
いずれも用いることができる。具体的な培地としては、
オートミール蔗糖寒天培地、オートミール寒天培地、ジ
ャガイモ蔗糖寒天培地、Ｖ−８ジュース寒天培地、ツア
ペック−ドックス寒天培地等を例示することができる。
培養に際しては、温度を１５〜３０℃、好ましくは２０
〜２５℃、ｐＨを３〜９、好ましくは５〜８に維持する
ことが望ましい。以上のような条件で７〜１４日程度培
養すると、培地表面に十分な量の胞子が形成される。
のエキセロヒルム・モノセラスに属する菌株であるIFO9
800 、IMI125854 、IMI125855 、ATCC24641 、ATCC5834
6 とは異なるエステラーゼザイモグラムパターンを示
す。本菌株の培養には、特別な方法を用いる必要はな
く、公知のエキセロヒルム・モノセラスに属する菌株と
同様の方法で培養することができる。培地としては資化
可能な炭素源、窒素源、無機物及び必要な生育促進物質
を適当に含有する培地であれば、合成培地、天然培地の
いずれも用いることができる。具体的な培地としては、
オートミール蔗糖寒天培地、オートミール寒天培地、ジ
ャガイモ蔗糖寒天培地、Ｖ−８ジュース寒天培地、ツア
ペック−ドックス寒天培地等を例示することができる。
培養に際しては、温度を１５〜３０℃、好ましくは２０
〜２５℃、ｐＨを３〜９、好ましくは５〜８に維持する
ことが望ましい。以上のような条件で７〜１４日程度培
養すると、培地表面に十分な量の胞子が形成される。
【００１４】本発明の雑草防除剤は、上記の胞子を有効
成分とし、これに界面活性剤等を加えて調製する。胞子
濃度は、除草効果を奏する範囲で任意に定めることがで
きるが、１０2 〜１０6 胞子／ｍｌ、好ましくは１０3
〜１０5 胞子／ｍｌとするのが適当である。本発明の雑
草防除剤を実際の圃場に散布する場合は１０アールあた
り胞子量が１０9 〜１０10個になるように散布するのが
好ましい。
成分とし、これに界面活性剤等を加えて調製する。胞子
濃度は、除草効果を奏する範囲で任意に定めることがで
きるが、１０2 〜１０6 胞子／ｍｌ、好ましくは１０3
〜１０5 胞子／ｍｌとするのが適当である。本発明の雑
草防除剤を実際の圃場に散布する場合は１０アールあた
り胞子量が１０9 〜１０10個になるように散布するのが
好ましい。
【００１５】本発明の雑草防除剤は、主にノビエを対象
とするが、これに限定されるわけではない。
とするが、これに限定されるわけではない。
【００１６】
【００１７】
〔実施例１〕ノビエ防除効果試験 日本全国から罹病したノビエを採集した後、常法に従
い、切り出した病斑部分を２５℃の湿室下でインキュベ
ートすることによって、分生胞子を形成させた。この分
生胞子を柄付き針で取り、馬鈴薯蔗糖寒天培地上に置床
することによって、単胞子分離を行った。それぞれの菌
株をオートミール蔗糖寒天培地に接種し、２５℃で、１
４日間の培養を行い、分生胞子を形成させた。この後、
０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０水溶液中に、胞子を懸濁させ
た後、５ｍｌ当たり１０3、１０4、及び１０5胞子にな
るように調製した。
い、切り出した病斑部分を２５℃の湿室下でインキュベ
ートすることによって、分生胞子を形成させた。この分
生胞子を柄付き針で取り、馬鈴薯蔗糖寒天培地上に置床
することによって、単胞子分離を行った。それぞれの菌
株をオートミール蔗糖寒天培地に接種し、２５℃で、１
４日間の培養を行い、分生胞子を形成させた。この後、
０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０水溶液中に、胞子を懸濁させ
た後、５ｍｌ当たり１０3、１０4、及び１０5胞子にな
るように調製した。
【００１８】一方、１００００分の１アールのポットに
ノビエ（１ポット当たり２０個体）を１．５葉期まで生
育させた後、水深約５ｃｍまで湛水した。上記胞子懸濁
液を各ポット当たり５ｍｌ滴下処理を行い、３週間温室
内に静置した後、防除効果を調査した。なお、ノビエ除
草効果は、以下に示すように、評価した。 防除効果＝〔１−（生存個体数／２０）〕×１００ 表１．菌株とノビエ防除効果 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 菌株名 防除効果 ────────────────────── １０3 １０4 １０5 ─────────────────────────────────── ＪＴＢ−０１２ ３８ ９５ １００ ＪＴＢ−０１３ ３５ ７０ ９５ ＪＴＢ−７９９ ４７ １００ １００ ＪＴＢ−８０３ ３５ １００ １００ ＪＴＢ−８０８ ３２ １００ １００ ＩＭＩ−１２５８５５ ０ ２ ２５ 無処理 ０ ───────────────────────────────────
ノビエ（１ポット当たり２０個体）を１．５葉期まで生
育させた後、水深約５ｃｍまで湛水した。上記胞子懸濁
液を各ポット当たり５ｍｌ滴下処理を行い、３週間温室
内に静置した後、防除効果を調査した。なお、ノビエ除
草効果は、以下に示すように、評価した。 防除効果＝〔１−（生存個体数／２０）〕×１００ 表１．菌株とノビエ防除効果 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 菌株名 防除効果 ────────────────────── １０3 １０4 １０5 ─────────────────────────────────── ＪＴＢ−０１２ ３８ ９５ １００ ＪＴＢ−０１３ ３５ ７０ ９５ ＪＴＢ−７９９ ４７ １００ １００ ＪＴＢ−８０３ ３５ １００ １００ ＪＴＢ−８０８ ３２ １００ １００ ＩＭＩ−１２５８５５ ０ ２ ２５ 無処理 ０ ───────────────────────────────────
【００１９】〔実施例２〕分生胞子生産能試験 それぞれの菌株をオートミール蔗糖寒天培地に接種し、
２５℃で、１４日間静置培養した。その後、培地上の分
生胞子を０．１％Ｔｗｅｅｎ２０に懸濁することによっ
て回収した。分生胞子生産量を表２に示した。 表２．菌株と分生胞子生産能 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 菌株名 分生胞子生産量／ｃｍ2 ─────────────────────────────────── ＪＴＢ−０１２ ４．４×１０5 ＪＴＢ−０１３ ４．５×１０5 ＪＴＢ−７９９ ７．５×１０5 ＪＴＢ−８０３ ８．６×１０5 ＪＴＢ−８０８ ６．６×１０5 ＩＦＯ−９８００ ＜２．４×１０3 ＩＭＩ−１２５８５４ ＜２．４×１０3 ＩＭＩ−１２５８５５ ４．０×１０4 ＡＴＣＣ−２４６４１ ＜２．４×１０3 ＡＴＣＣ−５８３４６ ＜２．４×１０3 ─────────────────────────────────── ＪＴＢ−０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、Ｊ
ＴＢ−８０３、ＪＴＢ−８０８からなる該菌株群の分生
胞子生産量は、４．４×１０5胞子／ｃｍ2以上であっ
た。一方、公知菌株で最も分生胞子生産能が高い菌株は
ＩＭＩ−１２５８５５であり、その分生胞子生産量は
４．０×１０4胞子／ｃｍ2であった。その他の公知菌株
の分生胞子生産量は、全て検出限界以下であった。この
ことから、該菌株群は公知菌株より分生胞子生産量が１
０倍以上高いことが明らかとなった。
２５℃で、１４日間静置培養した。その後、培地上の分
生胞子を０．１％Ｔｗｅｅｎ２０に懸濁することによっ
て回収した。分生胞子生産量を表２に示した。 表２．菌株と分生胞子生産能 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 菌株名 分生胞子生産量／ｃｍ2 ─────────────────────────────────── ＪＴＢ−０１２ ４．４×１０5 ＪＴＢ−０１３ ４．５×１０5 ＪＴＢ−７９９ ７．５×１０5 ＪＴＢ−８０３ ８．６×１０5 ＪＴＢ−８０８ ６．６×１０5 ＩＦＯ−９８００ ＜２．４×１０3 ＩＭＩ−１２５８５４ ＜２．４×１０3 ＩＭＩ−１２５８５５ ４．０×１０4 ＡＴＣＣ−２４６４１ ＜２．４×１０3 ＡＴＣＣ−５８３４６ ＜２．４×１０3 ─────────────────────────────────── ＪＴＢ−０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、Ｊ
ＴＢ−８０３、ＪＴＢ−８０８からなる該菌株群の分生
胞子生産量は、４．４×１０5胞子／ｃｍ2以上であっ
た。一方、公知菌株で最も分生胞子生産能が高い菌株は
ＩＭＩ−１２５８５５であり、その分生胞子生産量は
４．０×１０4胞子／ｃｍ2であった。その他の公知菌株
の分生胞子生産量は、全て検出限界以下であった。この
ことから、該菌株群は公知菌株より分生胞子生産量が１
０倍以上高いことが明らかとなった。
【００２０】〔実施例３〕エステラーゼザイモグラムの
解析 ＪＴＢ−０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、Ｊ
ＴＢ−８０３、ＪＴＢ−８０８、ＩＦＯ−９８００、Ｉ
ＭＩ−１２５８５４、ＩＭＩ−１２５８５５、ＡＴＣＣ
−２４６４１、ＡＴＣＣ−５８３４６の１０菌株を試料
に用いた。各菌株の粗酵素液の調製は、特開平６−３２
９５１３号公報の方法に従った。
解析 ＪＴＢ−０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、Ｊ
ＴＢ−８０３、ＪＴＢ−８０８、ＩＦＯ−９８００、Ｉ
ＭＩ−１２５８５４、ＩＭＩ−１２５８５５、ＡＴＣＣ
−２４６４１、ＡＴＣＣ−５８３４６の１０菌株を試料
に用いた。各菌株の粗酵素液の調製は、特開平６−３２
９５１３号公報の方法に従った。
【００２１】各菌株をジャガイモ蔗糖培地中、２５℃、
暗所で７−１０日静置培養し、菌体マットを形成させ
た。得られた菌体マットを蒸留水で数回洗浄し、−８０
℃で凍結した後、凍結乾燥した。５０ｍＭトリス−塩酸
バッファー（ｐＨ７．４）中で菌体を破砕した後、ろ紙
でろ過し、ろ液を１００００ｒｐｍで遠心分離して、そ
の上清をサンプルとして用いた。サンプル中のタンパク
濃度はLowry の方法で定量した。ラージスラブゲル電気
泳動層でアクリルアミドゲル（濃縮ゲル：４．５％、分
離ゲル１０％）を用いて、１サンプル当たり約５０μｇ
のタンパク量を３０ｍＡで２時間電気泳動した。
暗所で７−１０日静置培養し、菌体マットを形成させ
た。得られた菌体マットを蒸留水で数回洗浄し、−８０
℃で凍結した後、凍結乾燥した。５０ｍＭトリス−塩酸
バッファー（ｐＨ７．４）中で菌体を破砕した後、ろ紙
でろ過し、ろ液を１００００ｒｐｍで遠心分離して、そ
の上清をサンプルとして用いた。サンプル中のタンパク
濃度はLowry の方法で定量した。ラージスラブゲル電気
泳動層でアクリルアミドゲル（濃縮ゲル：４．５％、分
離ゲル１０％）を用いて、１サンプル当たり約５０μｇ
のタンパク量を３０ｍＡで２時間電気泳動した。
【００２２】電気泳動後、エステラーゼの活性染色を行
った。４ｍｌの５０％アセトン水溶液に４０ｍｇのα−
ナフチル酢酸を溶解させた後、２００ｍｇのfast viole
t Bsaltと２００ｍｌの５０ｍＭトリス−塩酸バッファ
ーを加えて、染色液とした。この染色液中にゲルを浸
し、静かに振盪して３０分間染色を行った。この後、蒸
留水でゲルを洗浄し、各バンドの移動度を測定した。
った。４ｍｌの５０％アセトン水溶液に４０ｍｇのα−
ナフチル酢酸を溶解させた後、２００ｍｇのfast viole
t Bsaltと２００ｍｌの５０ｍＭトリス−塩酸バッファ
ーを加えて、染色液とした。この染色液中にゲルを浸
し、静かに振盪して３０分間染色を行った。この後、蒸
留水でゲルを洗浄し、各バンドの移動度を測定した。
【００２３】この結果、図１及び図２に示すように、Ｊ
ＴＢ−０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、ＪＴ
Ｂ−８０３、ＪＴＢ−８０８のエステラーゼザイモグラ
ムパターンは全て同一であったことから、ＪＴＢ−０１
２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、ＪＴＢ−８０
３、ＪＴＢ−８０８は同一の菌株群であることが明らか
である。また、本菌株群は公知菌株であるＩＦＯ−９８
００、ＩＭＩ−１２５８５４、ＩＭＩ−１２５８５５、
ＡＴＣＣ−２４６４１、ＡＴＣＣ−５８３４６及び特開
平６−３２９５１３に示されるDrechsrela monoceras v
ar. microsporusのエステラーゼザイモグラムパターン
と異なることから、本菌株群は公知菌株と異なる新規な
菌株であることが明らかとなった。
ＴＢ−０１２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、ＪＴ
Ｂ−８０３、ＪＴＢ−８０８のエステラーゼザイモグラ
ムパターンは全て同一であったことから、ＪＴＢ−０１
２、ＪＴＢ−０１３、ＪＴＢ−７９９、ＪＴＢ−８０
３、ＪＴＢ−８０８は同一の菌株群であることが明らか
である。また、本菌株群は公知菌株であるＩＦＯ−９８
００、ＩＭＩ−１２５８５４、ＩＭＩ−１２５８５５、
ＡＴＣＣ−２４６４１、ＡＴＣＣ−５８３４６及び特開
平６−３２９５１３に示されるDrechsrela monoceras v
ar. microsporusのエステラーゼザイモグラムパターン
と異なることから、本菌株群は公知菌株と異なる新規な
菌株であることが明らかとなった。
【００２４】〔製剤例〕 製剤例１（液剤） エキセロヒルム・モノセラスＪＴＢ−０１３株の分生胞
子（２×109 個）、Ｔｗｅｅｎ80（４ｇ）を滅菌水20Ｌ
に加えて混合し、液剤を調製した。 製剤例２（水和剤） マルトース９％、クレイ１％、水９０％混合液１ｍｌ当
たり分生胞子（ＪＴＢ−８０３株）１０7 個を懸濁し
た。これを風乾した後、乾燥物を混合粉砕し、水和剤を
調整した。
子（２×109 個）、Ｔｗｅｅｎ80（４ｇ）を滅菌水20Ｌ
に加えて混合し、液剤を調製した。 製剤例２（水和剤） マルトース９％、クレイ１％、水９０％混合液１ｍｌ当
たり分生胞子（ＪＴＢ−８０３株）１０7 個を懸濁し
た。これを風乾した後、乾燥物を混合粉砕し、水和剤を
調整した。
【００２５】製剤例３（水和剤） ラクトース９％、ゼオライト１％、水９０％混合液を１
ｍｌ当たり分生胞子（ＪＴＢ−０１２株）１０7 個を懸
濁した。これを風乾した後、乾燥物を混合粉砕し、水和
剤を調整した。
ｍｌ当たり分生胞子（ＪＴＢ−０１２株）１０7 個を懸
濁した。これを風乾した後、乾燥物を混合粉砕し、水和
剤を調整した。
【００２６】製剤例４（水和剤） 珪藻土１５％、カオリン７７％、ポリオキシエチレンア
ルキルフェニルエーテル８％混合液１ｇ当たり分生胞子
（ＪＴＢ−８０８株）１０7 個を懸濁した。これを風乾
した後、乾燥物を混合粉砕し、水和剤を調整した。 製剤例５（水和剤） 珪藻土３３％、カルボキシメチルセルロース０．３３
％、水 ６６．６７％混合液１ｍｌ当たり分生胞子（Ｊ
ＴＢ−７９９株）１０7 個を懸濁した。これを風乾した
後、乾燥物を混合粉砕し、水和剤を調整した。
ルキルフェニルエーテル８％混合液１ｇ当たり分生胞子
（ＪＴＢ−８０８株）１０7 個を懸濁した。これを風乾
した後、乾燥物を混合粉砕し、水和剤を調整した。 製剤例５（水和剤） 珪藻土３３％、カルボキシメチルセルロース０．３３
％、水 ６６．６７％混合液１ｍｌ当たり分生胞子（Ｊ
ＴＢ−７９９株）１０7 個を懸濁した。これを風乾した
後、乾燥物を混合粉砕し、水和剤を調整した。
【００２７】製剤例６（粉剤） ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン１４％、
ホワイトカーボン１２％、クレー７４％の混合物１ｇあ
たり分生胞子（ＪＴＢ−０１２株）１０7 個を混合し
た。これを乾燥後、均一に粉砕することによって、粉剤
を調整した。
ホワイトカーボン１２％、クレー７４％の混合物１ｇあ
たり分生胞子（ＪＴＢ−０１２株）１０7 個を混合し
た。これを乾燥後、均一に粉砕することによって、粉剤
を調整した。
【００２８】製剤例７（粒剤） β−シクロデキストリン１５％、デンプン２％、ベント
ナイト１８％、炭酸カルシウム３６％、水２９％の混合
物１ｇ当たり分生胞子（ＪＴＢ−８０８株）１０7 個を
加えて練った後、造粒機で造粒し、乾燥することによっ
て、粒剤を調整した。
ナイト１８％、炭酸カルシウム３６％、水２９％の混合
物１ｇ当たり分生胞子（ＪＴＢ−８０８株）１０7 個を
加えて練った後、造粒機で造粒し、乾燥することによっ
て、粒剤を調整した。
【００２９】製剤例８（乳剤） ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテルリン酸アン
モニウム１８％、ポリオキシエチレンノニルフェニルエ
ーテル６％、リン酸トリエチル２９％、リン酸トリブチ
ル４７％の混合物１ｇ当たり分生胞子（ＪＴＢ−７９９
株）１０7 個を加えて均一に懸濁し、乳剤を調整した。
モニウム１８％、ポリオキシエチレンノニルフェニルエ
ーテル６％、リン酸トリエチル２９％、リン酸トリブチ
ル４７％の混合物１ｇ当たり分生胞子（ＪＴＢ−７９９
株）１０7 個を加えて均一に懸濁し、乳剤を調整した。
【００３０】製剤例９（油剤） スピンドルオイル９５％、ひまし油４％、シリコーンオ
イル１％の混合液１ｍｌ中に分生胞子（ＪＴＢ−８０３
株）１０7 個を懸濁し、油剤を調整した。
イル１％の混合液１ｍｌ中に分生胞子（ＪＴＢ−８０３
株）１０7 個を懸濁し、油剤を調整した。
【００３１】製剤例１０（ドライフロアブル剤） アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム１２％、ポリエ
チレングリコールエーテル８８％の組成物１ｍｌ中に分
生胞子（ＪＴＢ−０１３株）１０7 個を懸濁し、ドライ
フロアブル剤を調整した。 製剤例１１（カプセル剤） アルギン酸ナトリウム０．７％、カオリン５％、グリセ
リン１５％、水７９．３％混合液１ｍｌ中に分生胞子
（ＪＴＢ−８０３株）１０7 個を懸濁し、０．２モル酢
酸カルシウム溶液中に滴下してカプセル状生成物を得
た。これを細断した後、篩にかけ、風乾しカプセル剤を
調製した。
チレングリコールエーテル８８％の組成物１ｍｌ中に分
生胞子（ＪＴＢ−０１３株）１０7 個を懸濁し、ドライ
フロアブル剤を調整した。 製剤例１１（カプセル剤） アルギン酸ナトリウム０．７％、カオリン５％、グリセ
リン１５％、水７９．３％混合液１ｍｌ中に分生胞子
（ＪＴＢ−８０３株）１０7 個を懸濁し、０．２モル酢
酸カルシウム溶液中に滴下してカプセル状生成物を得
た。これを細断した後、篩にかけ、風乾しカプセル剤を
調製した。
【００３２】製剤例１２（カプセル剤） アルギン酸ナトリウム０．７％、珪藻土５％、グリセリ
ン１５％、水７９．３％混合液１ｍｌ中に分生胞子（Ｊ
ＴＢ−０１３株）１０7 個を懸濁し、０．２モル塩化カ
ルシウム溶液中に滴下してカプセル状生成物を得た。こ
れを細断した後、篩にかけ、風乾しカプセル剤を調製し
た。
ン１５％、水７９．３％混合液１ｍｌ中に分生胞子（Ｊ
ＴＢ−０１３株）１０7 個を懸濁し、０．２モル塩化カ
ルシウム溶液中に滴下してカプセル状生成物を得た。こ
れを細断した後、篩にかけ、風乾しカプセル剤を調製し
た。
【００３３】
【発明の効果】本発明は、エキセロヒルム・モノセラス
に属する新規な菌株を提供する。この菌株は、従来のエ
キセロヒルム・モノセラスに属する菌株に比べ、除草効
果及び胞子生産能が高く、微生物除草剤の成分として好
適な性質を有している。
に属する新規な菌株を提供する。この菌株は、従来のエ
キセロヒルム・モノセラスに属する菌株に比べ、除草効
果及び胞子生産能が高く、微生物除草剤の成分として好
適な性質を有している。
【図１】本発明の新規菌株のエステラーゼザイモグラム
を示す図である。
を示す図である。
【図２】本発明の新規菌株及び公知菌株のエステラーゼ
ザイモグラムを示す図である。
ザイモグラムを示す図である。
フロントページの続き (72)発明者 稗田 忠治 神奈川県横浜市青葉区梅が丘６−２ 日 本たばこ産業株式会社 植物開発研究所 横浜センター内 (72)発明者 郷原 雅敏 神奈川県横浜市青葉区梅が丘６−２ 日 本たばこ産業株式会社 植物開発研究所 横浜センター内 (56)参考文献 特開 平６−329513（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 1/14 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (6)
- 【請求項１】 凍結乾燥した菌体を50mMトリス−塩酸バ
ッファー（pH 7.4）中で破砕し、その破砕液から分離し
た上清をポリアクリルアミドゲル（濃縮ゲル：4.5%、分
離ゲル10%）を用いて30mMで２時間電気泳動した後、エ
ステラーゼ活性染色をして得られるエステラーゼザイモ
グラムパターンが、図１に示されるパターンであるエキ
セロヒルム・モノセラスに属する菌株。 - 【請求項２】 エキセロヒルム・モノセラスＪＴＢ−０
１２、エキセロヒルム・モノセラスＪＴＢ−０１３、エ
キセロヒルム・モノセラスＪＴＢ−７９９、エキセロヒ
ルム・モノセラスＪＴＢ−８０３、又はエキセロヒルム
・モノセラスＪＴＢ−８０８である請求項１記載の菌
株。 - 【請求項３】 請求項１又は２記載の菌株を有効成分と
して含有することを特徴とする雑草防除剤。 - 【請求項４】 雑草がノビエであることを特徴とする請
求項３記載の雑草防除剤。 - 【請求項５】 請求項３記載の雑草防除剤を用いた雑草
防除方法。 - 【請求項６】 雑草がノビエであることを特徴とする請
求項５記載の雑草防除方法。
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07301684A JP3085895B2 (ja) | 1995-11-20 | 1995-11-20 | エキセロヒルム・モノセラスに属する新規な菌株及びその用途 |
| BR9607247A BR9607247A (pt) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | Nova cepa pertencendo a exsaerohilum monoceras e usos da mesma |
| US08/875,079 US6313069B1 (en) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | Strain belonging to Exserohilum monoceras, and uses thereof |
| EP96938500A EP0811681A4 (en) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | NEW STRAIN OF THE EXSEROHILUM MONOCERAS SPECIES AND USES THEREOF |
| PCT/JP1996/003384 WO1997019166A1 (fr) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | Nouvelle souche de l'espece des exserohilum monoceras et ses utilisations |
| CN96192337A CN1177375A (zh) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | Exserohilum monoceras的新菌株及其用途 |
| KR1019970704777A KR100251230B1 (ko) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | 엑세로힐름 모노세라스 속에 속하는 신규 균주 및 그 용도 |
| AU75884/96A AU709814B2 (en) | 1995-11-20 | 1996-11-19 | Novel strain belonging to exserohilum monoceras and uses thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07301684A JP3085895B2 (ja) | 1995-11-20 | 1995-11-20 | エキセロヒルム・モノセラスに属する新規な菌株及びその用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09140373A JPH09140373A (ja) | 1997-06-03 |
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Family
ID=17899900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07301684A Expired - Lifetime JP3085895B2 (ja) | 1995-11-20 | 1995-11-20 | エキセロヒルム・モノセラスに属する新規な菌株及びその用途 |
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|---|---|
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| EP (1) | EP0811681A4 (ja) |
| JP (1) | JP3085895B2 (ja) |
| KR (1) | KR100251230B1 (ja) |
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| AU (1) | AU709814B2 (ja) |
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| MX2021004967A (es) | 2018-11-02 | 2021-07-15 | Nihon Nohyaku Co Ltd | Composicion para el control de organismos nocivos y metodo para su uso. |
| CN109735457B (zh) * | 2019-02-21 | 2020-04-14 | 华南农业大学 | 一株诱变尖角突脐孢菌及其在防治稗草中的应用 |
| CN112266877B (zh) * | 2020-07-20 | 2023-03-28 | 华南农业大学 | 一株诱变嘴突凸脐蠕孢菌及其在防治千金子中的应用 |
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|---|---|---|---|---|
| GB1283925A (en) | 1968-10-29 | 1972-08-02 | Ici Ltd | Fungicidal benzopyran-5-one derivative |
| US4808207A (en) | 1985-06-21 | 1989-02-28 | The University Of Vermont And State Agricultural College | Synergistic herbicidal compositions comprising microbial herbicides and plant growth regulators |
| US4775405A (en) | 1985-06-21 | 1988-10-04 | Mycogen Corporation | Synergistic herbicidal compositions comprising colletotrichum truncatum and chemical herbicides |
| JP2614101B2 (ja) | 1988-01-16 | 1997-05-28 | 栃木県 | 新規微生物及びそれを用いた植物病害防除方法 |
| US5332573A (en) * | 1988-11-21 | 1994-07-26 | Mitsui Toatsu Chemicals Inc. | Strains of Drechslera ssp for controlling grass |
| JP2962748B2 (ja) * | 1988-11-21 | 1999-10-12 | 三井化学株式会社 | ドレックスレラ属菌又はその代謝産物を含有する雑草防除剤及びそれらによる雑草防除法 |
| JPH04226905A (ja) * | 1990-06-13 | 1992-08-17 | Mitsui Toatsu Chem Inc | ドレックスレラ属菌と化学除草剤を含有する雑草防除組成物 |
| JP3079752B2 (ja) | 1991-02-05 | 2000-08-21 | 日本曹達株式会社 | イネ病害の防除方法 |
| JP3073263B2 (ja) * | 1991-06-06 | 2000-08-07 | 三井化学株式会社 | ドレックスレラ属の新菌株及びそれらを含有する雑草防除剤 |
| JPH04370090A (ja) * | 1991-06-17 | 1992-12-22 | Mitsui Toatsu Chem Inc | ドレックスレラ属の新菌株及びそれを含有する雑草防除剤 |
| AU650817B2 (en) | 1992-05-28 | 1994-06-30 | Mitsui Chemicals, Inc. | Furobenzopyran derivatives, process for preparation of same and herbicides containing same as active components |
| JPH06247822A (ja) * | 1992-12-28 | 1994-09-06 | Japan Tobacco Inc | 生菌含有製剤及びその製造方法 |
| US5434121A (en) | 1993-03-25 | 1995-07-18 | Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated | Variety of Drechslera monoceras, weed control compositions containing the same as an effective ingredient and weed control methods using the same |
| JPH06329513A (ja) * | 1993-03-25 | 1994-11-29 | Mitsui Toatsu Chem Inc | ドレックスレラ・モノセラスの変種、該変種を有効成分として含む雑草防除剤及び該変種を用いる雑草防除方法 |
| JPH06277042A (ja) * | 1993-03-25 | 1994-10-04 | Mitsui Toatsu Chem Inc | ドレックスレラ属の新菌株及びそれを含有する雑草防除剤並びに雑草防除組成物 |
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| JPH0840816A (ja) | 1994-07-29 | 1996-02-13 | Japan Tobacco Inc | 微生物含有除草剤及びその施用方法 |
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1995
- 1995-11-20 JP JP07301684A patent/JP3085895B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
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