JPH06247822A - 生菌含有製剤及びその製造方法 - Google Patents
生菌含有製剤及びその製造方法Info
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- JPH06247822A JPH06247822A JP5271218A JP27121893A JPH06247822A JP H06247822 A JPH06247822 A JP H06247822A JP 5271218 A JP5271218 A JP 5271218A JP 27121893 A JP27121893 A JP 27121893A JP H06247822 A JPH06247822 A JP H06247822A
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- sugar
- cell
- preparation
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- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
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- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 菌体と、糖と、その菌体と糖の混合物に対し
て物性改良作用を有する物性改良物質を含有する菌体含
有液を、乾燥して製剤化する。 【効果】 従来、微生物農薬として利用する際に、活性
が弱くかつ長期保存が難しく活性や耐久性の点で問題が
あり、商業化が困難であるとされていた糸状菌の菌糸等
の微生物の生菌を活性主成分として含有しても、活性や
耐久性に優れ、微生物農薬として利用可能である。
て物性改良作用を有する物性改良物質を含有する菌体含
有液を、乾燥して製剤化する。 【効果】 従来、微生物農薬として利用する際に、活性
が弱くかつ長期保存が難しく活性や耐久性の点で問題が
あり、商業化が困難であるとされていた糸状菌の菌糸等
の微生物の生菌を活性主成分として含有しても、活性や
耐久性に優れ、微生物農薬として利用可能である。
Description
【０００１】
【０００２】本発明は、生菌含有製剤及びその製造方法
に関し、詳細には、生物農薬等に有用な糸状菌等の微生
物の生菌を活性主成分として含有する、生菌含有製剤及
びその製造方法に関する。
に関し、詳細には、生物農薬等に有用な糸状菌等の微生
物の生菌を活性主成分として含有する、生菌含有製剤及
びその製造方法に関する。
【０００３】
【０００４】従来使用されてきた化学農薬は、開発費用
が増大し、新規開発が順調に進まなくなっている。
が増大し、新規開発が順調に進まなくなっている。
【０００５】また、化学農薬の環境に対する影響への懸
念から、生物防除に対する関心が高まっている。
念から、生物防除に対する関心が高まっている。
【０００６】天敵昆虫による害虫の防除は、長い歴史を
持っているが、最近、特に期待を寄せられているのが微
生物を活性主成分とする微生物農薬である。
持っているが、最近、特に期待を寄せられているのが微
生物を活性主成分とする微生物農薬である。
【０００７】微生物のうち糸状菌による例として、アメ
リカにおいてはコレトトリカム グロエオスポリオイデ
ス（Colletotrichum gloeosporioides）によって水田に
発生する雑草ノーザンジョイントベッチ（Aeschynomene
virginica）を防除する例、日本においてはキボシカミ
キリ（Psacothea hilaris）に寄生するボーベリヤ バッ
シアーナ（Beauveria bassiana）によってクワやイチジ
クの害虫を防除する例、フザリウム オキシスポラム（F
usarium oxysporum）によってサツマイモつる割れ病を
防除する例等が知られており、糸状菌を活性主成分とす
る、微生物除草剤、微生物殺虫剤、微生物殺菌剤等の開
発が考えられている。
リカにおいてはコレトトリカム グロエオスポリオイデ
ス（Colletotrichum gloeosporioides）によって水田に
発生する雑草ノーザンジョイントベッチ（Aeschynomene
virginica）を防除する例、日本においてはキボシカミ
キリ（Psacothea hilaris）に寄生するボーベリヤ バッ
シアーナ（Beauveria bassiana）によってクワやイチジ
クの害虫を防除する例、フザリウム オキシスポラム（F
usarium oxysporum）によってサツマイモつる割れ病を
防除する例等が知られており、糸状菌を活性主成分とす
る、微生物除草剤、微生物殺虫剤、微生物殺菌剤等の開
発が考えられている。
【０００８】アメリカでは、液体培養で胞子を生産でき
る糸状菌を活性成分とする微生物農薬として、商品名
「Devine」と「COLLEGO」という微生物除草剤が商業化
され市販されている。
る糸状菌を活性成分とする微生物農薬として、商品名
「Devine」と「COLLEGO」という微生物除草剤が商業化
され市販されている。
【０００９】また、有用微生物含有粒剤の製剤法とし
て、微生物菌体またはその含有物の粉体に、バインダー
物質を加熱溶融させながら、非水系で攪拌造粒する方法
（特開昭６３−６３３７３号公報）等が知られている。
て、微生物菌体またはその含有物の粉体に、バインダー
物質を加熱溶融させながら、非水系で攪拌造粒する方法
（特開昭６３−６３３７３号公報）等が知られている。
【００１０】
【００１１】従来、糸状菌の胞子は、耐久性（保存性）
を持ち、かつ活性単位としても優れ、微生物農薬として
用いるのに適しているが、菌糸は、活性が弱く、長期保
存が難しくて耐久性に問題があるとされていた。
を持ち、かつ活性単位としても優れ、微生物農薬として
用いるのに適しているが、菌糸は、活性が弱く、長期保
存が難しくて耐久性に問題があるとされていた。
【００１２】また、糸状菌は胞子、菌糸、菌核などの様
々な器官を形成するが、糸状菌を最も培養効率の良い大
型タンク内で液体培養によって培養すると、生産される
菌体のほとんどは菌糸であり、胞子を大量に得ることは
困難であった。
々な器官を形成するが、糸状菌を最も培養効率の良い大
型タンク内で液体培養によって培養すると、生産される
菌体のほとんどは菌糸であり、胞子を大量に得ることは
困難であった。
【００１３】そのため、液体培養で大量に菌糸を生産す
る糸状菌の場合は、活性や耐久性の点で微生物農薬のた
めの商業化が困難であるとされていた。
る糸状菌の場合は、活性や耐久性の点で微生物農薬のた
めの商業化が困難であるとされていた。
【００１４】また、特開昭６３−６３３７３号公報に開
示された方法によると、生菌残存率は高いが、生物防除
用の微生物へ適用するには、生菌数が必ずしも活性を維
持することと結びつかないことや、さらに菌糸等を使用
するには活性を高める必要があるが、このような作用が
あるか明らかではないなどの点で、生物防除剤の製剤方
法としては不十分であった。
示された方法によると、生菌残存率は高いが、生物防除
用の微生物へ適用するには、生菌数が必ずしも活性を維
持することと結びつかないことや、さらに菌糸等を使用
するには活性を高める必要があるが、このような作用が
あるか明らかではないなどの点で、生物防除剤の製剤方
法としては不十分であった。
【００１５】従って、従来、微生物農薬として利用する
際に、活性が弱くかつ長期保存が難しく活性や耐久性の
点で問題があり、商業化が困難であるとされていた糸状
菌の菌糸等の微生物の生菌を活性主成分として含有して
も、活性や耐久性に優れ、微生物農薬として利用するこ
とができる、生菌含有製剤及びその製造方法が望まれて
いた。
際に、活性が弱くかつ長期保存が難しく活性や耐久性の
点で問題があり、商業化が困難であるとされていた糸状
菌の菌糸等の微生物の生菌を活性主成分として含有して
も、活性や耐久性に優れ、微生物農薬として利用するこ
とができる、生菌含有製剤及びその製造方法が望まれて
いた。
【００１６】
【００１７】本発明者らは、微生物を常法に従い液体培
地で振とう培養を行ない、洗浄後破砕して菌体を集菌
し、菌体５〜９０％、望ましくは１０〜４０％、糖１〜
５０％、望ましくは５〜１５％、物性改良作用を有する
物性改良物質０．１〜７０％、望ましくは０．５〜５
％、場合によってはさらに窒素源０．１〜３０％、望ま
しくは０．５〜２％濃度の菌体懸濁液を調製し、該菌体
懸濁液を、薄層状に塗布あるいは噴霧した状態で自然乾
燥することにより、長期間の保存が可能でかつ乾燥前よ
り高い活性を持つ微生物を核として含む生菌含有製剤を
製造することができることを見いだし、本発明を完成す
るに至った。
地で振とう培養を行ない、洗浄後破砕して菌体を集菌
し、菌体５〜９０％、望ましくは１０〜４０％、糖１〜
５０％、望ましくは５〜１５％、物性改良作用を有する
物性改良物質０．１〜７０％、望ましくは０．５〜５
％、場合によってはさらに窒素源０．１〜３０％、望ま
しくは０．５〜２％濃度の菌体懸濁液を調製し、該菌体
懸濁液を、薄層状に塗布あるいは噴霧した状態で自然乾
燥することにより、長期間の保存が可能でかつ乾燥前よ
り高い活性を持つ微生物を核として含む生菌含有製剤を
製造することができることを見いだし、本発明を完成す
るに至った。
【００１８】すなわち、本発明の課題を解決するための
手段は、下記のとおりである。
手段は、下記のとおりである。
【００１９】第１に、菌体と、糖と、その菌体と糖の混
合物に対して物性改良作用を有する物性改良物質を含有
する、生菌含有製剤である。
合物に対して物性改良作用を有する物性改良物質を含有
する、生菌含有製剤である。
【００２０】第２に、菌体と、糖と、窒素源と、その菌
体と糖と窒素源の混合物に対して物性改良作用を有する
物性改良物質を含有する、生菌含有製剤である。
体と糖と窒素源の混合物に対して物性改良作用を有する
物性改良物質を含有する、生菌含有製剤である。
【００２１】第３に、菌体と、糖と、その菌体と糖の混
合物に対して物性改良作用を有する物性改良物質を含有
する菌体含有液を、乾燥して製剤化する、生菌含有製剤
の製造方法である。
合物に対して物性改良作用を有する物性改良物質を含有
する菌体含有液を、乾燥して製剤化する、生菌含有製剤
の製造方法である。
【００２２】第４に、菌体と、糖と、窒素源と、その菌
体と糖と窒素源の混合物に対して物性改良作用を有する
物性改良物質を含有する菌体含有液を、乾燥して製剤化
する、生菌含有製剤の製造方法である。
体と糖と窒素源の混合物に対して物性改良作用を有する
物性改良物質を含有する菌体含有液を、乾燥して製剤化
する、生菌含有製剤の製造方法である。
【００２３】第５に、上記第３又は第４記載の菌体含有
液を、塗布または噴霧等によって薄層状にした後、乾燥
することで製剤化する、生菌含有製剤の製造方法であ
る。
液を、塗布または噴霧等によって薄層状にした後、乾燥
することで製剤化する、生菌含有製剤の製造方法であ
る。
【００２４】ここで、菌体と各種混合物に対して物性改
良作用を有する物性改良物質とは、生物学的・化学的に
不活性な物質で、菌体と各種混合物がカラメル状になる
のを防ぐことによって、粉末状に製剤化しやすくする物
質であり、例えば、シリカゲル６０、セライト、クレ
イ、けいそう土およびけいそう土を主成分とするラジオ
ライト、けい酸を主成分とするジークライトなどがあげ
られる。
良作用を有する物性改良物質とは、生物学的・化学的に
不活性な物質で、菌体と各種混合物がカラメル状になる
のを防ぐことによって、粉末状に製剤化しやすくする物
質であり、例えば、シリカゲル６０、セライト、クレ
イ、けいそう土およびけいそう土を主成分とするラジオ
ライト、けい酸を主成分とするジークライトなどがあげ
られる。
【００２５】粉末状に製剤化することによって、計量・
分包が容易になり、さらに懸濁性が良好となり、単位重
量当たりの効果が向上する。
分包が容易になり、さらに懸濁性が良好となり、単位重
量当たりの効果が向上する。
【００２６】微生物の好適例としては、例えばニンビア
（Nimbya）属に属する微生物、エギゼロハイラム（Exse
rohilum）属に属する微生物などがあげられる。
（Nimbya）属に属する微生物、エギゼロハイラム（Exse
rohilum）属に属する微生物などがあげられる。
【００２７】糖としては、例えば、ラクトース、マルト
ース、トレハロースに代表される６員環が２個つながっ
た二糖類などがあげられる。
ース、トレハロースに代表される６員環が２個つながっ
た二糖類などがあげられる。
【００２８】窒素源としては、例えば、ペプトン、肉汁
等が適している。
等が適している。
【００２９】菌体含有液を、薄層状に塗布あるいは噴霧
する素材としては、例えば、ガラス板、テフロン板など
が適している。
する素材としては、例えば、ガラス板、テフロン板など
が適している。
【００３０】
【００３１】以下、実施例をあげて本発明を説明する
が、本発明はこれら実施例によって何ら制限されるもの
ではない。
が、本発明はこれら実施例によって何ら制限されるもの
ではない。
【００３２】以下の実施例では、下記に示す、Ｃ−１０
０培地及びＫ−００４菌（Nimbya scirpicola、ＦＥＲ
Ｍ Ｐ−１１４９５）を用い、クログワイを対象とした
除草剤として用いる生菌含有製剤を、また、Ｃ−１００
培地及びＢ０２６菌（Exserohilum monoceras、ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４２１５）、Ｂ２７６菌（Exserohilum mono
ceras、ＦＥＲＭ ＢＰ−４２２０）を用い、ノビエを
対象とした除草剤として用いる生菌含有製剤を製造し
た。
０培地及びＫ−００４菌（Nimbya scirpicola、ＦＥＲ
Ｍ Ｐ−１１４９５）を用い、クログワイを対象とした
除草剤として用いる生菌含有製剤を、また、Ｃ−１００
培地及びＢ０２６菌（Exserohilum monoceras、ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４２１５）、Ｂ２７６菌（Exserohilum mono
ceras、ＦＥＲＭ ＢＰ−４２２０）を用い、ノビエを
対象とした除草剤として用いる生菌含有製剤を製造し
た。
【００３３】上記Ｃ−１００培地は、グルコース１０
％、イーストエキストラクト０．５％、硝酸ナトリウム
１．５％、リン酸カリウム０．５％、硫酸マグネシウム
０．２５％、塩化カリウム０．２５％、硫酸鉄０．００
５％を含む、ｐＨ６．０の培地である。
％、イーストエキストラクト０．５％、硝酸ナトリウム
１．５％、リン酸カリウム０．５％、硫酸マグネシウム
０．２５％、塩化カリウム０．２５％、硫酸鉄０．００
５％を含む、ｐＨ６．０の培地である。
【００３４】また、Ｋ−００４菌は、水田の難防除雑草
であるクログワイおよびタマガヤツリに、Ｂ０２６菌及
びＢ２７６菌は、水田の主要雑草であるノビエに病原性
を有し、イネ、コムギなどのイネ科植物、ナス、トマト
などのナス科植物、キャベツ、ハクサイなどのアブラナ
科植物、ダイズ、インゲンなどのマメ科植物の生育には
影響を及ぼさないものである。
であるクログワイおよびタマガヤツリに、Ｂ０２６菌及
びＢ２７６菌は、水田の主要雑草であるノビエに病原性
を有し、イネ、コムギなどのイネ科植物、ナス、トマト
などのナス科植物、キャベツ、ハクサイなどのアブラナ
科植物、ダイズ、インゲンなどのマメ科植物の生育には
影響を及ぼさないものである。
【００３５】
【実施例１】
【００３６】Ｃ−１００培地５００ｍｌを１００ｍｌず
つ、５００ｍｌ容三角フラスコに分注し、殺菌後Ｋ−０
０４菌を接種し、２５℃で７日間振とう培養して菌糸が
主体である菌体を得た。
つ、５００ｍｌ容三角フラスコに分注し、殺菌後Ｋ−０
０４菌を接種し、２５℃で７日間振とう培養して菌糸が
主体である菌体を得た。
【００３７】遠心分離により集菌後、蒸留水で２回洗浄
し、ホモジナイザーで菌体を破砕した。
し、ホモジナイザーで菌体を破砕した。
【００３８】さらに遠心分離し、上清を捨て、得られた
破砕菌体に、滅菌水、マルトースおよびクレイを加え、
菌体２０％、マルトース１０％、クレイ１％濃度の菌体
懸濁液を調製した。
破砕菌体に、滅菌水、マルトースおよびクレイを加え、
菌体２０％、マルトース１０％、クレイ１％濃度の菌体
懸濁液を調製した。
【００３９】得られた菌体懸濁液を、薄層クロマトグラ
フィー用スプレンダーを用いてガラス板に塗布し、常圧
・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生菌含有製
剤１を９．６ｇ得た。
フィー用スプレンダーを用いてガラス板に塗布し、常圧
・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生菌含有製
剤１を９．６ｇ得た。
【００４０】
【実施例２】
【００４１】実施例１と同様に、Ｋ−００４菌を５００
ｍｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体
２０％、マルトース１０％、シリカゲル（粒径０．０６
３−０．２００ｍｍ）１％濃度の菌体懸濁液を調製し
た。
ｍｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体
２０％、マルトース１０％、シリカゲル（粒径０．０６
３−０．２００ｍｍ）１％濃度の菌体懸濁液を調製し
た。
【００４２】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤２を９．４ｇ得た。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤２を９．４ｇ得た。
【００４３】
【実施例３】
【００４４】実施例１と同様に、Ｋ−００４菌を５００
ｍｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体
２０％、ラクトース１０％、バクトペプトン（ディフコ
社製）１％、シリカゲル１％濃度の菌体懸濁液を調製し
た。
ｍｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体
２０％、ラクトース１０％、バクトペプトン（ディフコ
社製）１％、シリカゲル１％濃度の菌体懸濁液を調製し
た。
【００４５】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤３を１０．２ｇ得た。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤３を１０．２ｇ得た。
【００４６】
【実施例４】
【００４７】実施例１と同様に、Ｂ０２６菌を５００ｍ
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、ラクトース９％、シリカゲル１％濃度の菌体懸濁
液を調製した。
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、ラクトース９％、シリカゲル１％濃度の菌体懸濁
液を調製した。
【００４８】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤４を１０．３ｇ得た。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤４を１０．３ｇ得た。
【００４９】
【実施例５】
【００５０】実施例１と同様に、Ｂ０２６菌を５００ｍ
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、ラクトース９％、クレイ１％濃度の菌体懸濁液を
調製した。
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、ラクトース９％、クレイ１％濃度の菌体懸濁液を
調製した。
【００５１】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤５を１０．５ｇ得た。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤５を１０．５ｇ得た。
【００５２】
【実施例６】
【００５３】実施例１と同様に、Ｂ２７６菌を５００ｍ
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、ラクトース９％、シリカゲル１％濃度の菌体懸濁
液を調製した。
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、ラクトース９％、シリカゲル１％濃度の菌体懸濁
液を調製した。
【００５４】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤６を１７．８ｇ得た。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤６を１７．８ｇ得た。
【００５５】
【実施例７】
【００５６】実施例１と同様に、Ｂ２７６菌を５００ｍ
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、マルトース９％、クレイ１％濃度の菌体懸濁液を
調製した。
ｌのＣ−１００培地で培養し、洗浄後破砕して、菌体３
５％、マルトース９％、クレイ１％濃度の菌体懸濁液を
調製した。
【００５７】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤７を１７．５ｇ得た。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより、微生物の生
菌含有製剤７を１７．５ｇ得た。
【００５８】
【００５９】次に、上記実施例１〜７で得た生菌含有製
剤１〜７について、経時的な安定性及び活性を、下記に
示すように試験した。
剤１〜７について、経時的な安定性及び活性を、下記に
示すように試験した。
【００６０】
【試験例１】
【００６１】本発明区として、実施例１〜７で得た生菌
含有製剤１〜７を、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月
後、同２ケ月後、同３ケ月後に、生菌生重０．５ｇに相
当する生菌含有製剤中の生菌数を各々測定し、経時的な
安定性を調べた。
含有製剤１〜７を、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月
後、同２ケ月後、同３ケ月後に、生菌生重０．５ｇに相
当する生菌含有製剤中の生菌数を各々測定し、経時的な
安定性を調べた。
【００６２】参考区として、Ｃ−１００培地５００ｍｌ
を１００ｍｌずつ、５００ｍｌ容三角フラスコに分注
し、殺菌後Ｋ−００４菌、Ｂ０２６菌およびＢ２７６菌
を接種し、２５℃で７日間振とう培養して菌糸が主体で
ある菌体を得、遠心分離により集菌後、蒸留水で２回洗
浄し、ホモジナイザーで菌体を破砕して、Ｋ−００４菌
は、菌体２０％、クレイ１％濃度、Ｂ０２６菌及びＢ２
７６菌は、菌体３５％、クレイ１％濃度の菌体懸濁液を
調製した。
を１００ｍｌずつ、５００ｍｌ容三角フラスコに分注
し、殺菌後Ｋ−００４菌、Ｂ０２６菌およびＢ２７６菌
を接種し、２５℃で７日間振とう培養して菌糸が主体で
ある菌体を得、遠心分離により集菌後、蒸留水で２回洗
浄し、ホモジナイザーで菌体を破砕して、Ｋ−００４菌
は、菌体２０％、クレイ１％濃度、Ｂ０２６菌及びＢ２
７６菌は、菌体３５％、クレイ１％濃度の菌体懸濁液を
調製した。
【００６３】得られた菌体懸濁液をテフロン板に噴霧
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより得たＫ−００
４菌の参考製剤１．９ｇ、Ｂ０２６菌の参考製剤４．３
ｇ、Ｂ２７６菌の参考製剤６．８ｇを、本発明区と同様
に、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月後、
同３ケ月後に、生菌生重０．５ｇに相当する生菌含有製
剤中の生菌数を各々測定し、経時的な安定性を調べた。
し、常圧・室温で一晩乾燥することにより得たＫ−００
４菌の参考製剤１．９ｇ、Ｂ０２６菌の参考製剤４．３
ｇ、Ｂ２７６菌の参考製剤６．８ｇを、本発明区と同様
に、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月後、
同３ケ月後に、生菌生重０．５ｇに相当する生菌含有製
剤中の生菌数を各々測定し、経時的な安定性を調べた。
【００６４】対照区として、Ｃ−１００培地５００ｍｌ
を１００ｍｌずつ、５００ｍｌ容三角フラスコに分注
し、殺菌後Ｋ−００４菌、Ｂ０２６菌およびＢ２７６菌
を接種し、２５℃で７日間振とう培養して菌糸が主体で
ある菌体を得、遠心分離により集菌後、蒸留水で２回洗
浄し、ホモジナイザーで菌体を破砕した。
を１００ｍｌずつ、５００ｍｌ容三角フラスコに分注
し、殺菌後Ｋ−００４菌、Ｂ０２６菌およびＢ２７６菌
を接種し、２５℃で７日間振とう培養して菌糸が主体で
ある菌体を得、遠心分離により集菌後、蒸留水で２回洗
浄し、ホモジナイザーで菌体を破砕した。
【００６５】さらに遠心分離し、上清を捨て、Ｋ−００
４菌の破砕菌体２１．３ｇ、Ｂ０２６菌の破砕菌体３
８．８ｇ、Ｂ２７６菌の破砕菌体７０．５ｇを得た。
４菌の破砕菌体２１．３ｇ、Ｂ０２６菌の破砕菌体３
８．８ｇ、Ｂ２７６菌の破砕菌体７０．５ｇを得た。
【００６６】これら破砕菌体を乾燥せずに、本発明区と
同様に、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月
後、同３ケ月後に、０．５ｇ中の生菌数を各々測定し、
経時的な安定性を調べた。
同様に、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月
後、同３ケ月後に、０．５ｇ中の生菌数を各々測定し、
経時的な安定性を調べた。
【００６７】試験は全て、３反復で２回行なった。
【００６８】結果を、表１〜３に示す。
【００６９】なお、生菌数は、調製後の生存菌数を、希
釈平板法で分離して算出し、対数値をとり、対照区の製
造直後の値との比で現わした。
釈平板法で分離して算出し、対数値をとり、対照区の製
造直後の値との比で現わした。
【００７０】
【表１】
【００７１】
【表２】
【００７２】
【表３】
【００７３】Ｋ−００４菌を乾燥せずに保存した対照区
では、生菌が１ケ月後には完全に死滅していた。
では、生菌が１ケ月後には完全に死滅していた。
【００７４】また、参考区では、乾燥することにより菌
の生存率が落ちたが、本発明区では、乾燥による菌の死
滅はなく、さらに３ケ月後でも調製直後と同程度の生菌
数を示した。
の生存率が落ちたが、本発明区では、乾燥による菌の死
滅はなく、さらに３ケ月後でも調製直後と同程度の生菌
数を示した。
【００７５】Ｂ０２６菌及びＢ２７６菌を乾燥せずに保
存した対照区では、２ケ月あるいは３ケ月後に、生菌の
生存率が落ちた。
存した対照区では、２ケ月あるいは３ケ月後に、生菌の
生存率が落ちた。
【００７６】一方、無添加で乾燥した参考区では、乾燥
することにより菌の生存率が若干落ちたが、糖と物性改
良物質を添加して乾燥した本発明区では、乾燥による菌
の死滅はなく、さらに３ケ月後でも調製直後と同程度の
生菌数を示した。
することにより菌の生存率が若干落ちたが、糖と物性改
良物質を添加して乾燥した本発明区では、乾燥による菌
の死滅はなく、さらに３ケ月後でも調製直後と同程度の
生菌数を示した。
【００７７】
【試験例２】
【００７８】本発明区として、実施例１〜７で得た生菌
含有製剤１〜７を、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月
後、同２ケ月後、同３ケ月後に、Ｔｗｅｅｎ８０の０．
１％水溶液１ｍｌ当たり生菌生重０．５ｇ相当量を懸濁
し、各調製液を、Ｋ−００４菌は１／１００００ａ当た
り１ｍｌの割合で、移植２〜３週間後のクログワイ（茎
長１０〜１５ｃｍ）に、Ｂ０２６菌及びＢ２７６菌は１
／１００００ａ当たり２ｍｌの割合で、播種後７〜１２
日後のノビエ（１．２〜１．５葉期）に噴霧接種した。
含有製剤１〜７を、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月
後、同２ケ月後、同３ケ月後に、Ｔｗｅｅｎ８０の０．
１％水溶液１ｍｌ当たり生菌生重０．５ｇ相当量を懸濁
し、各調製液を、Ｋ−００４菌は１／１００００ａ当た
り１ｍｌの割合で、移植２〜３週間後のクログワイ（茎
長１０〜１５ｃｍ）に、Ｂ０２６菌及びＢ２７６菌は１
／１００００ａ当たり２ｍｌの割合で、播種後７〜１２
日後のノビエ（１．２〜１．５葉期）に噴霧接種した。
【００７９】そして、接種後のクログワイを、２５℃の
温室中に２４時間静置した後、２２℃の接種箱に２４時
間置き、再び２５℃の温室に戻して２１日間静置し、発
病率と発病度とを調べた。
温室中に２４時間静置した後、２２℃の接種箱に２４時
間置き、再び２５℃の温室に戻して２１日間静置し、発
病率と発病度とを調べた。
【００８０】ノビエは、接種後すぐに２２℃の接種箱に
２４時間置き、その後２５℃の温室に７日間静置し、発
病面積を調べた。
２４時間置き、その後２５℃の温室に７日間静置し、発
病面積を調べた。
【００８１】また、生菌含有製剤４〜７は、同様に、製
造直後、冷蔵庫に保存し１ヶ月後、同２ヶ月後、同３ヶ
月後に、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の０．０２％水溶液
１ｍｌ当たり生菌生重０．５ｇ相当量を懸濁し、この懸
濁液６ｍｌを１／１００００ａのポットに育った１．５
葉期のノビエに滴下接種した。
造直後、冷蔵庫に保存し１ヶ月後、同２ヶ月後、同３ヶ
月後に、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の０．０２％水溶液
１ｍｌ当たり生菌生重０．５ｇ相当量を懸濁し、この懸
濁液６ｍｌを１／１００００ａのポットに育った１．５
葉期のノビエに滴下接種した。
【００８２】滴下接種は、生育中のノビエの株数を数え
ておき、水深が３ｃｍとなるよう水を入れて、各調製液
を滴下して懸濁する方法で、２５℃の温室に１４日間静
置した後、枯死株率を調べた。
ておき、水深が３ｃｍとなるよう水を入れて、各調製液
を滴下して懸濁する方法で、２５℃の温室に１４日間静
置した後、枯死株率を調べた。
【００８３】参考区として、試験例１で得た各参考製剤
を、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月後、
同３ケ月後に、Ｔｗｅｅｎ８０の０．１％水溶液及びＴ
ｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の０．０２％水溶液１ｍｌ当た
り生菌生重０．５ｇ相当量を懸濁し、各調製液を、本発
明区と同様に、１／１００００ａ当たり１ｍｌ、２ｍｌ
及び６ｍｌの割合で、移植２〜３週間後のクログワイ、
播種７〜１２日後のノビエに噴霧接種及び滴下接種し、
発病率と発病度、発病面積および枯死株率を調べた。
を、製造直後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月後、
同３ケ月後に、Ｔｗｅｅｎ８０の０．１％水溶液及びＴ
ｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の０．０２％水溶液１ｍｌ当た
り生菌生重０．５ｇ相当量を懸濁し、各調製液を、本発
明区と同様に、１／１００００ａ当たり１ｍｌ、２ｍｌ
及び６ｍｌの割合で、移植２〜３週間後のクログワイ、
播種７〜１２日後のノビエに噴霧接種及び滴下接種し、
発病率と発病度、発病面積および枯死株率を調べた。
【００８４】対照区として、試験ごとに試験例１と同様
にして、Ｋ−００４菌の生菌を調製して使用した。
にして、Ｋ−００４菌の生菌を調製して使用した。
【００８５】また、試験例１と同様にして、Ｂ０２６菌
及びＢ２７６菌の生菌を調製し、この生菌を、製造直
後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月後、同３ケ月後
に使用した。
及びＢ２７６菌の生菌を調製し、この生菌を、製造直
後、冷蔵庫に保存し１ケ月後、同２ケ月後、同３ケ月後
に使用した。
【００８６】すなわち、Ｔｗｅｅｎ８０の０．１％水溶
液及びＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の０．０２％水溶液１
ｍｌ当たり生菌０．５ｇを懸濁し、各調製液を、本発明
区と同様に、１／１００００ａ当たり１ｍｌ、２ｍｌ及
び６ｍｌの割合で、移植２〜３週間後のクログワイ、播
種７〜１２日後のノビエに噴霧接種及び滴下接種し、発
病率と発病度、発病面積および枯死株率を調べた。
液及びＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の０．０２％水溶液１
ｍｌ当たり生菌０．５ｇを懸濁し、各調製液を、本発明
区と同様に、１／１００００ａ当たり１ｍｌ、２ｍｌ及
び６ｍｌの割合で、移植２〜３週間後のクログワイ、播
種７〜１２日後のノビエに噴霧接種及び滴下接種し、発
病率と発病度、発病面積および枯死株率を調べた。
【００８７】試験は全て、３〜５反復で２回行った。
【００８８】結果を、表４〜６に示す。
【００８９】Ｋ−００４菌の発病率は、接種した全茎数
に対する発病茎数の割合を計算し、対照区の値との比で
現わした。
に対する発病茎数の割合を計算し、対照区の値との比で
現わした。
【００９０】Ｋ−００４菌の発病度は、接種した茎１本
ごとの罹病指数（発病面積 ０％：０、〜２５％：１、
〜５０％：２、〜７５％：３、〜１００％：４、枯死：
５）をとり、その罹病指数の合計値を接種茎数で割った
数値を、対照区との比で現わした。
ごとの罹病指数（発病面積 ０％：０、〜２５％：１、
〜５０％：２、〜７５％：３、〜１００％：４、枯死：
５）をとり、その罹病指数の合計値を接種茎数で割った
数値を、対照区との比で現わした。
【００９１】Ｂ０２６菌及びＢ２７６菌の発病面積は、
生育中のノビエの葉全体の面積に対する発病部分の面積
割合で現わし、枯死株率とともに、無添加で乾燥しない
対照区の調製直後の値との比で現わした。
生育中のノビエの葉全体の面積に対する発病部分の面積
割合で現わし、枯死株率とともに、無添加で乾燥しない
対照区の調製直後の値との比で現わした。
【００９２】
【表４】
【００９３】
【表５】
【００９４】
【表６】
【００９５】Ｋ−００４菌において、参考区では、発病
率、発病度が対照区より低く、農薬としての活性が低下
しているが、本発明区では、対照区に比べて、クログワ
イに対する発病率、発病度が共に高くなり、農薬として
の活性に優れ、かつ、３ヶ月後でもクログワイに対する
病原力が維持されていた。
率、発病度が対照区より低く、農薬としての活性が低下
しているが、本発明区では、対照区に比べて、クログワ
イに対する発病率、発病度が共に高くなり、農薬として
の活性に優れ、かつ、３ヶ月後でもクログワイに対する
病原力が維持されていた。
【００９６】Ｂ０２６菌、Ｂ２７６菌いずれの場合で
も、対照区では、噴霧接種において、１〜２ケ月の保存
で著しく病原力が低下し、滴下接種においても病原力の
低下が見られた。
も、対照区では、噴霧接種において、１〜２ケ月の保存
で著しく病原力が低下し、滴下接種においても病原力の
低下が見られた。
【００９７】参考区では、Ｂ０２６菌、Ｂ２７６菌とも
に、噴霧接種、滴下接種いずれの場合でも乾燥及び保存
期間中に、若干の病原力の低下があった。
に、噴霧接種、滴下接種いずれの場合でも乾燥及び保存
期間中に、若干の病原力の低下があった。
【００９８】発明区では、Ｂ０２６菌、Ｂ２７６菌とも
に乾燥による病原力の低下はなく、かつ３ケ月の保存後
でも、噴霧接種したノビエに対する病原力は維持され、
滴下接種したノビエに対する病原力もほとんど低下しな
かった。
に乾燥による病原力の低下はなく、かつ３ケ月の保存後
でも、噴霧接種したノビエに対する病原力は維持され、
滴下接種したノビエに対する病原力もほとんど低下しな
かった。
【００９９】
【０１００】本発明の生菌含有製剤及びその製造方法に
よれば、従来、微生物農薬として利用する際に、活性が
弱くかつ長期保存が難しく活性や耐久性の点で問題があ
り、商業化が困難であるとされていた糸状菌の菌糸等の
微生物の生菌を活性主成分として含有しても、活性や耐
久性に優れ、微生物農薬として利用することができる。
よれば、従来、微生物農薬として利用する際に、活性が
弱くかつ長期保存が難しく活性や耐久性の点で問題があ
り、商業化が困難であるとされていた糸状菌の菌糸等の
微生物の生菌を活性主成分として含有しても、活性や耐
久性に優れ、微生物農薬として利用することができる。
【手続補正書】
【提出日】平成５年１１月１７日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２４】ここで、菌体と各種混合物に対して物性改
良作用を有する物性改良物質とは、生物学的・化学的に
不活性な物質で、菌体と各種混合物がカラメル状になる
のを防ぐことによって、粉末状に製剤化しやすくする物
質であり、例えば、シリカゲル６０、セライト、クレ
イ、けいそう土およびけいそう土を主成分とするラジオ
ライト、けい酸を主成分とするＧＳＭ(商品名:Gieclite
良作用を有する物性改良物質とは、生物学的・化学的に
不活性な物質で、菌体と各種混合物がカラメル状になる
のを防ぐことによって、粉末状に製剤化しやすくする物
質であり、例えば、シリカゲル６０、セライト、クレ
イ、けいそう土およびけいそう土を主成分とするラジオ
ライト、けい酸を主成分とするＧＳＭ(商品名:Gieclite
【書類名】 受託番号変更届
【提出日】 平成５年１１月１７日
【旧寄託機関の名称】 通商産業省工業技術院生命工学
工業技術研究所
工業技術研究所
【旧受託番号】 微工研菌寄第１１４９５号（Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−１１４９５
ＥＲＭ Ｐ−１１４９５
【新寄託機関の名称】 通商産業省工業技術院生命工学
工業技術研究所
工業技術研究所
【新受託番号】 ＦＥＲＭ ＢＰ−４４４８
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 塚本 浩史 神奈川県横浜市緑区梅が丘６−２ 日本た ばこ産業株式会社植物開発研究所横浜セン ター内
Claims (5)
- 【請求項１】 菌体と、糖と、その菌体と糖の混合物に
対して物性改良作用を有する物性改良物質を含有する、
生菌含有製剤。 - 【請求項２】 菌体と、糖と、窒素源と、その菌体と糖
と窒素源の混合物に対して物性改良作用を有する物性改
良物質を含有する、生菌含有製剤。 - 【請求項３】 菌体と、糖と、その菌体と糖の混合物に
対して物性改良作用を有する物性改良物質を含有する菌
体含有液を、乾燥して製剤化する、生菌含有製剤の製造
方法。 - 【請求項４】 菌体と、糖と、窒素源と、その菌体と糖
と窒素源の混合物に対して物性改良作用を有する物性改
良物質を含有する菌体含有液を、乾燥して製剤化する、
生菌含有製剤の製造方法。 - 【請求項５】 請求項３又は４記載の菌体含有液を、塗
布または噴霧等によって薄層状にした後、乾燥すること
で製剤化する、生菌含有製剤の製造方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5271218A JPH06247822A (ja) | 1992-12-28 | 1993-10-05 | 生菌含有製剤及びその製造方法 |
| AU52554/93A AU5255493A (en) | 1992-12-28 | 1993-12-21 | Viable cell-containing preparation and the preparation method thereof |
| DE0605221T DE605221T1 (de) | 1992-12-28 | 1993-12-23 | Präparat, welches lebensfähige Zellen enthält und Verfahren zu ihrer Herstellung. |
| EP93310521A EP0605221A1 (en) | 1992-12-28 | 1993-12-23 | Viable cell-containing preparation and the preparation method thereof |
| CA002112438A CA2112438A1 (en) | 1992-12-28 | 1993-12-24 | Viable cell-containing preparation and the preparation method thereof |
| KR1019930029990A KR940013330A (ko) | 1992-12-28 | 1993-12-27 | 생균함유 제제 및 그의 제조 방법 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35883392 | 1992-12-28 | ||
| JP4-358833 | 1992-12-28 | ||
| JP5271218A JPH06247822A (ja) | 1992-12-28 | 1993-10-05 | 生菌含有製剤及びその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06247822A true JPH06247822A (ja) | 1994-09-06 |
Family
ID=26549590
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5271218A Pending JPH06247822A (ja) | 1992-12-28 | 1993-10-05 | 生菌含有製剤及びその製造方法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0605221A1 (ja) |
| JP (1) | JPH06247822A (ja) |
| KR (1) | KR940013330A (ja) |
| AU (1) | AU5255493A (ja) |
| CA (1) | CA2112438A1 (ja) |
| DE (1) | DE605221T1 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996003882A1 (fr) * | 1994-07-29 | 1996-02-15 | Japan Tobacco Inc. | Herbicide contenant des microbes et procede d'utilisation de celui-ci |
| WO1997019166A1 (fr) * | 1995-11-20 | 1997-05-29 | Japan Tobacco Inc. | Nouvelle souche de l'espece des exserohilum monoceras et ses utilisations |
| US7754653B2 (en) | 2000-05-02 | 2010-07-13 | University Of Victoria Innovation And Development Corporation | Method for preparing sprayable formulations of mycelium-based biological control agents produced by solid state fermentation |
| JP2017508784A (ja) * | 2014-01-27 | 2017-03-30 | プラハラジュ ラクスミナ ラヤナＰｒａｈａｒａｊｕ Ｌａｘｍｉｎａ Ｒａｙａｎａ | ホテイアオイの繁殖を抑制する新規の微生物除草剤組成物 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5843428A (en) * | 1993-12-28 | 1998-12-01 | Japan Tobacco Inc. | Disease-controlling agent and disease control method for useful gramineous plants |
| US6066595A (en) * | 1996-11-05 | 2000-05-23 | Mitsui Chemicals, Inc. | Herbicide containing phytopathogenic microorganisms |
| KR100434250B1 (ko) * | 2002-02-16 | 2004-06-04 | 이정열 | 미생물 및 그 배양액을 용해성이 뛰어나고, 토양에서의생존율이 높은 단일 및 복합 미생물제제로 입상의 형태로담체화하는 방법 |
| CN109735457B (zh) * | 2019-02-21 | 2020-04-14 | 华南农业大学 | 一株诱变尖角突脐孢菌及其在防治稗草中的应用 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1090403A (en) * | 1963-06-24 | 1967-11-08 | Nat Res Dev | Biological control of wood rotting fungus in trees |
| FR2202159A1 (en) * | 1972-10-06 | 1974-05-03 | Agronomique Inst Nat Rech | Insecticidal blastospore compsns - with improved viability on drying and storage |
| DE2730205A1 (de) * | 1976-07-14 | 1978-01-19 | Sandoz Ag | Insektizide hilfsmittelzusammensetzung |
| JPH07112428B2 (ja) * | 1984-02-08 | 1995-12-06 | 味の素株式会社 | 糸状菌の培養法 |
| JPS63227507A (ja) * | 1987-03-17 | 1988-09-21 | Ibaraki Pref Gov | フザリウム生菌製剤 |
| WO1990015136A1 (en) * | 1989-06-09 | 1990-12-13 | Biotech International Limited | A method of growing and preserving fungi and bacteria |
| DE69213772T2 (de) * | 1991-01-10 | 1997-04-10 | Thermo Trilogy Corp | Ein Prozess und Verfahren zur Herstellung und Verwendung von insektenpaththogenen Pilzen als Vorbereitung zur Schädlingsbekämpfung |
-
1993
- 1993-10-05 JP JP5271218A patent/JPH06247822A/ja active Pending
- 1993-12-21 AU AU52554/93A patent/AU5255493A/en not_active Abandoned
- 1993-12-23 DE DE0605221T patent/DE605221T1/de active Pending
- 1993-12-23 EP EP93310521A patent/EP0605221A1/en not_active Withdrawn
- 1993-12-24 CA CA002112438A patent/CA2112438A1/en not_active Abandoned
- 1993-12-27 KR KR1019930029990A patent/KR940013330A/ko not_active Application Discontinuation
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| WO1996003882A1 (fr) * | 1994-07-29 | 1996-02-15 | Japan Tobacco Inc. | Herbicide contenant des microbes et procede d'utilisation de celui-ci |
| WO1997019166A1 (fr) * | 1995-11-20 | 1997-05-29 | Japan Tobacco Inc. | Nouvelle souche de l'espece des exserohilum monoceras et ses utilisations |
| US7754653B2 (en) | 2000-05-02 | 2010-07-13 | University Of Victoria Innovation And Development Corporation | Method for preparing sprayable formulations of mycelium-based biological control agents produced by solid state fermentation |
| JP2017508784A (ja) * | 2014-01-27 | 2017-03-30 | プラハラジュ ラクスミナ ラヤナＰｒａｈａｒａｊｕ Ｌａｘｍｉｎａ Ｒａｙａｎａ | ホテイアオイの繁殖を抑制する新規の微生物除草剤組成物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2112438A1 (en) | 1994-06-29 |
| DE605221T1 (de) | 1995-03-16 |
| EP0605221A1 (en) | 1994-07-06 |
| AU5255493A (en) | 1994-07-07 |
| KR940013330A (ko) | 1994-07-15 |
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