JP2681329B2 - ザントモナス・カンペストリス新菌株及びその用途 - Google Patents
ザントモナス・カンペストリス新菌株及びその用途Info
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- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
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Description
【０００１】本発明は、雑草を駆逐するために有用な微
生物の創製方法により単離された微生物及びその用途に
関する。
生物の創製方法により単離された微生物及びその用途に
関する。
【０００２】
【従来の技術】微生物の有用な用途はこの分野において
周知であり、それに関する多数の文献が発行されてい
る。抗生物質、酵素、エタノール及び他の多数の有用産
物の製造に関する微生物的方法をクレームした多くの特
許が発行されている。微生物はまた、有害廃棄物や漏れ
た石油を浄化し、害虫を殺し、鉱物を回収し、そして植
物に栄養を与えるためにも有用である。ある生物が他の
生物に対して有毒な化合物を産生することは古くから知
られている。ペニシリウムカビによる抗生物質ペニシリ
ンの産生はこの１例である。
周知であり、それに関する多数の文献が発行されてい
る。抗生物質、酵素、エタノール及び他の多数の有用産
物の製造に関する微生物的方法をクレームした多くの特
許が発行されている。微生物はまた、有害廃棄物や漏れ
た石油を浄化し、害虫を殺し、鉱物を回収し、そして植
物に栄養を与えるためにも有用である。ある生物が他の
生物に対して有毒な化合物を産生することは古くから知
られている。ペニシリウムカビによる抗生物質ペニシリ
ンの産生はこの１例である。
【０００３】微生物は、有機化合物を産生し配給するた
めに用いるのに特に魅力的な候補である。なぜなら、そ
れらは極めて効率が高くかつ安全であり得るからであ
る。近年の遺伝子工学は微生物の効率性と相対的安全性
の利用性を大幅に高めた。もっとも、遺伝子操作がなく
ても、微生物は、特定の用途に不可欠な、非常に特異的
な仕事を行うことができる。従って、特定の有用な性質
を有する未知の微生物を検索することは多くの分野で定
常的に行われている。本発明は、このような微生物の発
見に関する。
めに用いるのに特に魅力的な候補である。なぜなら、そ
れらは極めて効率が高くかつ安全であり得るからであ
る。近年の遺伝子工学は微生物の効率性と相対的安全性
の利用性を大幅に高めた。もっとも、遺伝子操作がなく
ても、微生物は、特定の用途に不可欠な、非常に特異的
な仕事を行うことができる。従って、特定の有用な性質
を有する未知の微生物を検索することは多くの分野で定
常的に行われている。本発明は、このような微生物の発
見に関する。
【０００４】雑草は世界中の百姓にとって大きな問題で
ある。雑草は米国において農産物の価値を１０〜１２％
減らしており、最も最近の見積では年間２００億ドルの
損害を与えている（McWhorter, C.G. [1984] Weed Sci.
32:850-855)。
ある。雑草は米国において農産物の価値を１０〜１２％
減らしており、最も最近の見積では年間２００億ドルの
損害を与えている（McWhorter, C.G. [1984] Weed Sci.
32:850-855)。
【０００５】不所望の草は、家主、ゴルフコース及び農
業従事者にとって有意な問題である。これらの草を化学
的に抑制することは環境を汚染する虞があり、所望の農
作物に害を与えることなく不所望の草のみを選択的に殺
す、必要な選択性に欠けることがしばしばである。
業従事者にとって有意な問題である。これらの草を化学
的に抑制することは環境を汚染する虞があり、所望の農
作物に害を与えることなく不所望の草のみを選択的に殺
す、必要な選択性に欠けることがしばしばである。
【０００６】化学的殺生物剤を他の代替的抑制手段に置
き換えることを求める社会的な圧力が複数存在する。こ
の線に沿って活発な研究がなされている１つの領域は、
雑草を攻撃することができる、植物に対する病原体の使
用に関する。このような病原体が存在することは周知で
あり、それらの病原体のいくつかは特許されているが、
生物除草剤を用いた商品は非常に少なく、それらの使用
は限られている。採用されている生物の大部分は真菌病
原体であり細菌病原体に向けられてきた努力よりもはる
かに小さな努力で見出されたものである。このような
「生物除草剤」病原体を発見する方法は、商品化可能な
発見をするには成功率が低い。
き換えることを求める社会的な圧力が複数存在する。こ
の線に沿って活発な研究がなされている１つの領域は、
雑草を攻撃することができる、植物に対する病原体の使
用に関する。このような病原体が存在することは周知で
あり、それらの病原体のいくつかは特許されているが、
生物除草剤を用いた商品は非常に少なく、それらの使用
は限られている。採用されている生物の大部分は真菌病
原体であり細菌病原体に向けられてきた努力よりもはる
かに小さな努力で見出されたものである。このような
「生物除草剤」病原体を発見する方法は、商品化可能な
発見をするには成功率が低い。
【０００７】微生物は多くの態様で植物に付随し得る。
例えば、あるものは腐植を栄養源とし、あるものは病原
的である。しかし、病原体であるものであっても、その
生活環のある相においてのみ存在し、あるいは病徴が顕
著な植物においてのみ存在することがある。ある環境下
において病原的であり得る多くの微生物は、「健康」な
植物上又は植物中に着生または内生している。このよう
な関係は文献に記載されている。
例えば、あるものは腐植を栄養源とし、あるものは病原
的である。しかし、病原体であるものであっても、その
生活環のある相においてのみ存在し、あるいは病徴が顕
著な植物においてのみ存在することがある。ある環境下
において病原的であり得る多くの微生物は、「健康」な
植物上又は植物中に着生または内生している。このよう
な関係は文献に記載されている。
【０００８】いくつかの細菌はある草に感染して、その
草の生育を阻害し又は殺すことが知られている。これら
の感染は、所望の草を維持することにとって重要な問題
として種々の地域において知られている。ゴルフグリー
ンに用いられるトロントコヌカグサの細菌感染は、Robe
rts, D.L. et al., Plant Disease 65, 1014-1015 (198
1); Roberts, D.L. et al., Plant Disease 66, 804-80
6 (1982); Roberts, D.L. et al., Scanning electron
Microscopy IV, 1719-1722 (1983) に記載されている。
この細菌は、Roberts, D.L., Phytopathology 73, 810
及び74、 813 (1984)においてザントモナス・カンペスト
リス（Xanthomonas campestris) であると同定された。
この問題の解決は、抗生物質であるオキシテトラサイク
リン処理により行われた。スズメノカタビラ（Poa annu
a L.) の病気もまたRoberts, D.L., Phytopathology 75
1289 (1985)に記載されている。この病気を引き起こす
生物はＮＲＲＬ Ｂ−１８０１８として寄託され、ここ
ではＭＢ２１８と呼ぶ。１９８２年の論文において、Eg
liとSchmidt は、牧草の立ち枯れ病を引き起こすザント
モナス・カンペストリスの３つの新しい病原株を記載し
た。以前は、このような立ち枯れ病菌は全て、ザントモ
ナス・カンペストリスｐ．ｖ．グラミニス（graminis)
と分類されていた。しかし、収集された多数の単離株を
研究することにより、彼らは、いくつかの単離株が、典
型的なグラミニス病原菌よりも宿主域がはるかに小さい
ことを見出した。これらのうちの一つであるp.v. poae
（ＡＴＣＣ３３８０４；ＭＢ２３８）は、イチゴツナギ
属（Poa)のわずか２、３の種、特にポア・トリバリス
（Poa trivalis) 、すなわちコイチゴツナギにおいて立
ち枯れを引き起こすことが示された。
草の生育を阻害し又は殺すことが知られている。これら
の感染は、所望の草を維持することにとって重要な問題
として種々の地域において知られている。ゴルフグリー
ンに用いられるトロントコヌカグサの細菌感染は、Robe
rts, D.L. et al., Plant Disease 65, 1014-1015 (198
1); Roberts, D.L. et al., Plant Disease 66, 804-80
6 (1982); Roberts, D.L. et al., Scanning electron
Microscopy IV, 1719-1722 (1983) に記載されている。
この細菌は、Roberts, D.L., Phytopathology 73, 810
及び74、 813 (1984)においてザントモナス・カンペスト
リス（Xanthomonas campestris) であると同定された。
この問題の解決は、抗生物質であるオキシテトラサイク
リン処理により行われた。スズメノカタビラ（Poa annu
a L.) の病気もまたRoberts, D.L., Phytopathology 75
1289 (1985)に記載されている。この病気を引き起こす
生物はＮＲＲＬ Ｂ−１８０１８として寄託され、ここ
ではＭＢ２１８と呼ぶ。１９８２年の論文において、Eg
liとSchmidt は、牧草の立ち枯れ病を引き起こすザント
モナス・カンペストリスの３つの新しい病原株を記載し
た。以前は、このような立ち枯れ病菌は全て、ザントモ
ナス・カンペストリスｐ．ｖ．グラミニス（graminis)
と分類されていた。しかし、収集された多数の単離株を
研究することにより、彼らは、いくつかの単離株が、典
型的なグラミニス病原菌よりも宿主域がはるかに小さい
ことを見出した。これらのうちの一つであるp.v. poae
（ＡＴＣＣ３３８０４；ＭＢ２３８）は、イチゴツナギ
属（Poa)のわずか２、３の種、特にポア・トリバリス
（Poa trivalis) 、すなわちコイチゴツナギにおいて立
ち枯れを引き起こすことが示された。
【０００９】本発明の目的は、スズメノカタビラ、ディ
ジタリア属植物、ブロマス属植物等の雑草の抑制に有効
な新規微生物及び該微生物を用いた雑草の抑制方法を提
供することである。
ジタリア属植物、ブロマス属植物等の雑草の抑制に有効
な新規微生物及び該微生物を用いた雑草の抑制方法を提
供することである。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明の新規微生物は、
雑草の抑制に有用な微生物を単離するための新規な方法
を用いて発見された。この方法によると、まず、病徴を
示さない植物から微生物を単離する。次いで該微生物を
増殖させ、より高い濃度でもとの宿主又は他の標的雑草
に適用する。次いで、接種した雑草種に病徴が見られる
か観察し、病徴が見られたならば、病徴を現した植物又
は前記ストック溶液から前記微生物を回収する。この本
発明の方法により発見された有用な雑草病原菌が本明細
書に記載されている。
雑草の抑制に有用な微生物を単離するための新規な方法
を用いて発見された。この方法によると、まず、病徴を
示さない植物から微生物を単離する。次いで該微生物を
増殖させ、より高い濃度でもとの宿主又は他の標的雑草
に適用する。次いで、接種した雑草種に病徴が見られる
か観察し、病徴が見られたならば、病徴を現した植物又
は前記ストック溶液から前記微生物を回収する。この本
発明の方法により発見された有用な雑草病原菌が本明細
書に記載されている。
【００１１】本発明は、雑草でない草を殺さないザント
モナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａ
ｍｐｅｓｔｒｉｓ）病原株を雑草に感染させることによ
る雑草の抑制方法に関する。すなわち、本発明は、スズ
メノカタビラに病原性を示すザントモナス・カンペスト
リスＭＢ２４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５５）微生
物、スズメノカタビラに病原性を示すザントモナス・カ
ンペストリスＭＢ２４９株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５
７）微生物、及びスズメノカタビラに病原性を示すザン
トモナス・カンペストリスＭＢ２７６株（ＮＲＲＬ Ｂ
−１８８６１）微生物を提供する。また、本発明は、上
記本発明の微生物の少なくとも１つ以上から選ばれる微
生物の有効量を適用することから成る、スズメノカタビ
ラの抑制方法を提供する。さらに、本発明は、スズメノ
カタビラに対し、ザントモナス・カンペストリスＭＢ２
４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５５）及び／又は、ザン
トモナス・カンペストリスＭＢ２４９株（ＮＲＲＬ Ｂ
−１８８５７）の微生物の有効量を適用することから成
る、低温環境下における、スズメノカタビラの抑制方法
を提供する。さらに本発明は、上記本発明の微生物の少
なくとも１つ以上から選ばれる微生物と、植物生長調節
剤とを適用することから成る、スズメノカタビラの抑制
方法を提供する。本発明の１つの好ましい具体例におい
ては、病原細菌は、標的雑草の木部に直接接触するとい
う利益受ける。木部への接触は、一般的に標的植物の傷
を要する。本発明の１実施例においては、ザントモナス
・カンペストリス病原株で雑草を処理することにより雑
草が迅速かつ効果的に抑制される。この抑制は、細菌を
適用する前又は後に雑草を切ることによってより容易に
なる。
モナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａ
ｍｐｅｓｔｒｉｓ）病原株を雑草に感染させることによ
る雑草の抑制方法に関する。すなわち、本発明は、スズ
メノカタビラに病原性を示すザントモナス・カンペスト
リスＭＢ２４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５５）微生
物、スズメノカタビラに病原性を示すザントモナス・カ
ンペストリスＭＢ２４９株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５
７）微生物、及びスズメノカタビラに病原性を示すザン
トモナス・カンペストリスＭＢ２７６株（ＮＲＲＬ Ｂ
−１８８６１）微生物を提供する。また、本発明は、上
記本発明の微生物の少なくとも１つ以上から選ばれる微
生物の有効量を適用することから成る、スズメノカタビ
ラの抑制方法を提供する。さらに、本発明は、スズメノ
カタビラに対し、ザントモナス・カンペストリスＭＢ２
４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５５）及び／又は、ザン
トモナス・カンペストリスＭＢ２４９株（ＮＲＲＬ Ｂ
−１８８５７）の微生物の有効量を適用することから成
る、低温環境下における、スズメノカタビラの抑制方法
を提供する。さらに本発明は、上記本発明の微生物の少
なくとも１つ以上から選ばれる微生物と、植物生長調節
剤とを適用することから成る、スズメノカタビラの抑制
方法を提供する。本発明の１つの好ましい具体例におい
ては、病原細菌は、標的雑草の木部に直接接触するとい
う利益受ける。木部への接触は、一般的に標的植物の傷
を要する。本発明の１実施例においては、ザントモナス
・カンペストリス病原株で雑草を処理することにより雑
草が迅速かつ効果的に抑制される。この抑制は、細菌を
適用する前又は後に雑草を切ることによってより容易に
なる。
【００１２】本発明の微生物はまた、種々の毒素をコー
ドする遺伝子で形質転換し、再び植物に適用することも
できる。毒素は、例えば、バチルス・スリンジエンシス
由来のものであることができる。本発明の微生物は植物
においてコロニーを形成することができる能力があるの
で、所望の毒素を分配するために有用である。
ドする遺伝子で形質転換し、再び植物に適用することも
できる。毒素は、例えば、バチルス・スリンジエンシス
由来のものであることができる。本発明の微生物は植物
においてコロニーを形成することができる能力があるの
で、所望の毒素を分配するために有用である。
【００１３】この明細書に記載する方法によって同定さ
れた微生物は、雑草又は他の不所望の植物を抑制するた
めに用いることができる。この研究分野において以前か
ら用いられている方法とは対照的に、本発明の植物病原
体は、病徴を示さない植物から単離された。従って、植
物に天然に共存する微生物を適当な濃度及び適当な条件
下で特定の標的雑草を抑制するために用いることができ
る。この植物病原体によって抑制される標的雑草は、該
病原体が単離された植物と同じ植物であっても異なる植
物であってもよい。
れた微生物は、雑草又は他の不所望の植物を抑制するた
めに用いることができる。この研究分野において以前か
ら用いられている方法とは対照的に、本発明の植物病原
体は、病徴を示さない植物から単離された。従って、植
物に天然に共存する微生物を適当な濃度及び適当な条件
下で特定の標的雑草を抑制するために用いることができ
る。この植物病原体によって抑制される標的雑草は、該
病原体が単離された植物と同じ植物であっても異なる植
物であってもよい。
【００１４】この明細書において、「雑草」とは、望ま
しくない又は人の活動及び福祉を妨げるあらゆる植物を
包含する。「除草剤」（あるいは化学除草剤）とは、植
物を抑制し阻害し又は殺すために、あるいはその正常な
生長過程を激しく中断させるために用いられる化学物質
を意味する。Herbicide Handbook of the Weed Society
of America,第５版（１９８３） , xxi-xxiv 。この明
細書において、「生物除草剤」及び「微生物除草剤」と
いう語は、植物を抑制し阻害し又は殺すために、あるい
はその正常な生長過程を激しく中断させるために用いら
れる生物を意味する。
しくない又は人の活動及び福祉を妨げるあらゆる植物を
包含する。「除草剤」（あるいは化学除草剤）とは、植
物を抑制し阻害し又は殺すために、あるいはその正常な
生長過程を激しく中断させるために用いられる化学物質
を意味する。Herbicide Handbook of the Weed Society
of America,第５版（１９８３） , xxi-xxiv 。この明
細書において、「生物除草剤」及び「微生物除草剤」と
いう語は、植物を抑制し阻害し又は殺すために、あるい
はその正常な生長過程を激しく中断させるために用いら
れる生物を意味する。
【００１５】本発明はさらに、感染可能な量のザントモ
ナス・カンペストリス病原株を雑草に適用し、それによ
って、雑草以外の植物を阻害又は殺すことなく雑草のみ
を選択的に阻害又は殺す、雑草の抑制方法に関する。
ナス・カンペストリス病原株を雑草に適用し、それによ
って、雑草以外の植物を阻害又は殺すことなく雑草のみ
を選択的に阻害又は殺す、雑草の抑制方法に関する。
【００１６】本発明の微生物及び関連する微生物の培養
物は、アメリカ合衆国イリノイ州ペオリア、ノースユニ
バーシティストリート１８１５所在のアグリカルチュラ
ルリサーチ サービス パテント カルチャー コレク
ション（ＮＲＲＬ） ノーザン リージョナル リサー
チ センターにブダペスト条約に基づいて寄託されてい
る。
物は、アメリカ合衆国イリノイ州ペオリア、ノースユニ
バーシティストリート１８１５所在のアグリカルチュラ
ルリサーチ サービス パテント カルチャー コレク
ション（ＮＲＲＬ） ノーザン リージョナル リサー
チ センターにブダペスト条約に基づいて寄託されてい
る。
【００１７】本発明は、農業における雑草を抑制するた
め用いることもできるし、農業以外の分野における雑草
を抑制するためにも用いることができる。例えば、本発
明は、芝生中の雑草を抑制するために用いることがで
き、線路脇の雑草を抑制するための除草剤として用いる
こともできる。
め用いることもできるし、農業以外の分野における雑草
を抑制するためにも用いることができる。例えば、本発
明は、芝生中の雑草を抑制するために用いることがで
き、線路脇の雑草を抑制するための除草剤として用いる
こともできる。
【００１８】本発明の重要な局面は、生物除草剤の活性
を大幅に高める、標的雑草の傷の使用に関する。それ自
体では雑草を抑制することができない雑草の傷は、細菌
の感染を確立し、植物の木部に活性成分が適当に接触す
るために明らかに非常に重要である。従って、本発明の
好ましい具体例では、微生物除草剤は標的雑草の木部に
直接作用する。木部への直接の接触は、例えば雑草の外
層の傷又は他の機械的破壊により容易になる。木部への
接触は、植物表面の外層の完全性を損なうための化学的
手段によっても達成され得る。例えば、種々の酵素を用
いて木部への接触を高めることができる。機械的な傷を
作り出すために、標的植物を切断し、切れ目を入れ、砂
を吹きかけ、又は刈り取る等の処理を行うことができ
る。微生物除草剤は傷を与える前又は後に適用すること
ができる。例えば、微生物除草剤を草刈り機の前又は後
ろで噴霧することができる。微生物除草剤を適用した後
の草刈りは、微生物除草剤が植物の維管束系に接触する
ことを助ける。この具体例の効果は、細菌が傷又は天然
の開口部に移動することを容易にする界面活性剤（珪素
界面活性剤等）により高めることができる。
を大幅に高める、標的雑草の傷の使用に関する。それ自
体では雑草を抑制することができない雑草の傷は、細菌
の感染を確立し、植物の木部に活性成分が適当に接触す
るために明らかに非常に重要である。従って、本発明の
好ましい具体例では、微生物除草剤は標的雑草の木部に
直接作用する。木部への直接の接触は、例えば雑草の外
層の傷又は他の機械的破壊により容易になる。木部への
接触は、植物表面の外層の完全性を損なうための化学的
手段によっても達成され得る。例えば、種々の酵素を用
いて木部への接触を高めることができる。機械的な傷を
作り出すために、標的植物を切断し、切れ目を入れ、砂
を吹きかけ、又は刈り取る等の処理を行うことができ
る。微生物除草剤は傷を与える前又は後に適用すること
ができる。例えば、微生物除草剤を草刈り機の前又は後
ろで噴霧することができる。微生物除草剤を適用した後
の草刈りは、微生物除草剤が植物の維管束系に接触する
ことを助ける。この具体例の効果は、細菌が傷又は天然
の開口部に移動することを容易にする界面活性剤（珪素
界面活性剤等）により高めることができる。
【００１９】
【００２０】
【００２１】ＥｇｌｉとＳｃｈｍｉｄｔ（１９８２）に
よって記載されたｐ．ｖ．ｐｏａｅ（ＡＴＣＣ３３８０
４、ＭＢ２３８）と比較して、この明細書に記載した単
離株はコイチゴツナギに対しては毒性が低いが、スズメ
ノカタビラに対してははるかに病原性が高い。
よって記載されたｐ．ｖ．ｐｏａｅ（ＡＴＣＣ３３８０
４、ＭＢ２３８）と比較して、この明細書に記載した単
離株はコイチゴツナギに対しては毒性が低いが、スズメ
ノカタビラに対してははるかに病原性が高い。
【００２２】ｐｏａｅのような我々の新規な単離株及び
病原株は、広い宿主域を持たないが、ある予期できない
種の全身的な立ち枯れを引き起こす。これらの種のいく
つかは米国において重要な、導入された、有害な雑草で
ある。病原株ｐｏａｅ及びスズメノカタビラ病原体の多
くは、ダウニィ・ブロム（downy brome)（ブロマス・テ
クトラム（Bromus tectorum)）のようなブロマス属の雑
草を有意に抑制することができる。病原株ｐｏａｅのブ
ロマス属植物に対する病原性は以前に報告されていな
い。
病原株は、広い宿主域を持たないが、ある予期できない
種の全身的な立ち枯れを引き起こす。これらの種のいく
つかは米国において重要な、導入された、有害な雑草で
ある。病原株ｐｏａｅ及びスズメノカタビラ病原体の多
くは、ダウニィ・ブロム（downy brome)（ブロマス・テ
クトラム（Bromus tectorum)）のようなブロマス属の雑
草を有意に抑制することができる。病原株ｐｏａｅのブ
ロマス属植物に対する病原性は以前に報告されていな
い。
【００２３】メヒシバ（Digitaria sp.)は、芝生中の有
害な、導入された重要な雑草である。しかし、この宿主
の細菌による立ち枯れは報告されていない。従って、我
々のスズメノカタビラ病原体のいくつか（例えばＭＢ２
７６、ＭＢ２６６、ＭＢ２６９）又は他の単離株が、傷
接種実験においてこの雑草に対して活性を示したことは
驚くべきことである。最良のメヒシバ病原体は、健康な
スズメノカタビラ由来のものであるので、このことは、
本発明の単離方法の利点の他の一例である。
害な、導入された重要な雑草である。しかし、この宿主
の細菌による立ち枯れは報告されていない。従って、我
々のスズメノカタビラ病原体のいくつか（例えばＭＢ２
７６、ＭＢ２６６、ＭＢ２６９）又は他の単離株が、傷
接種実験においてこの雑草に対して活性を示したことは
驚くべきことである。最良のメヒシバ病原体は、健康な
スズメノカタビラ由来のものであるので、このことは、
本発明の単離方法の利点の他の一例である。
【００２４】この明細書に記載する我々の観察に基づ
き、我々は、生態学的地位が病原性ではないが、植物木
部に死に到らしめないコロニーを形成するもの以上であ
る実際に多くの、広範囲の多数の異なる生物が存在する
ことを発見した。これらの細菌は、フィールドにおいて
明白な「病気」をもたらさない。これらの生物を生物抑
制剤として用いることは、宿主植物とのこの共生を人工
的にアンバランスにさせることに基づく。細菌を純粋培
養により非常に多い細胞数にまで増殖させ、新しい傷に
接種すると、病気をもたらす。この生物が自発的に病原
性を現す傾向を示さないことは、これを生物抑制剤とし
て人工的に用いても、意図的に適用した場所を除いて病
気の開始を引き起こす可能性が非常に低いという利点を
もたらす。これらの細菌が天然に存在する状態で「病
気」を引き起こすことが少ないことを考慮すると、これ
らを「植物病原体」と呼ぶよりは「木部内生体」と呼ぶ
方がより適当である。最も重要なことは、これらの生物
は、その生態学的役割が何であるにせよ、目的の雑草を
抑制するために操作されるという有用性を有しているこ
とである。
き、我々は、生態学的地位が病原性ではないが、植物木
部に死に到らしめないコロニーを形成するもの以上であ
る実際に多くの、広範囲の多数の異なる生物が存在する
ことを発見した。これらの細菌は、フィールドにおいて
明白な「病気」をもたらさない。これらの生物を生物抑
制剤として用いることは、宿主植物とのこの共生を人工
的にアンバランスにさせることに基づく。細菌を純粋培
養により非常に多い細胞数にまで増殖させ、新しい傷に
接種すると、病気をもたらす。この生物が自発的に病原
性を現す傾向を示さないことは、これを生物抑制剤とし
て人工的に用いても、意図的に適用した場所を除いて病
気の開始を引き起こす可能性が非常に低いという利点を
もたらす。これらの細菌が天然に存在する状態で「病
気」を引き起こすことが少ないことを考慮すると、これ
らを「植物病原体」と呼ぶよりは「木部内生体」と呼ぶ
方がより適当である。最も重要なことは、これらの生物
は、その生態学的役割が何であるにせよ、目的の雑草を
抑制するために操作されるという有用性を有しているこ
とである。
【００２５】明らかに健康な組織から単離された生物の
場合、その宿主域を推定的に知る根拠はない。ある状況
において病原性であるいくつかの生物が、「病気」を起
こさずにかなり効果的に植物中にコロニーを形成するこ
とができる。従って、もしこれらが１つの宿主から単離
された場合、これらの細菌が、人工的な接種によって抑
制することができる宿主がもし存在するならば、それが
何であるかということを予言することは不可能である。
例えば、ポア・プラテンシス（Poa pratensis)（ナガハ
グサ）にＭＢ２１８のような菌株を接種すると、植物全
体に非常に高レベル（＞１０8 ｃｆｕ／ｃｍ葉組織）の
木部でのコロニー形成が起きる。しかし、その植物は病
徴を示さない。
場合、その宿主域を推定的に知る根拠はない。ある状況
において病原性であるいくつかの生物が、「病気」を起
こさずにかなり効果的に植物中にコロニーを形成するこ
とができる。従って、もしこれらが１つの宿主から単離
された場合、これらの細菌が、人工的な接種によって抑
制することができる宿主がもし存在するならば、それが
何であるかということを予言することは不可能である。
例えば、ポア・プラテンシス（Poa pratensis)（ナガハ
グサ）にＭＢ２１８のような菌株を接種すると、植物全
体に非常に高レベル（＞１０8 ｃｆｕ／ｃｍ葉組織）の
木部でのコロニー形成が起きる。しかし、その植物は病
徴を示さない。
【００２６】この現象は「非宿主」コロニー形成と呼ぶ
ことができるかも知れないが、この命名は単に疾病スペ
クトルに基づく分類系を反映しているのみであり、この
生物の真の生態学的理解に基づいているものではない。
ことができるかも知れないが、この命名は単に疾病スペ
クトルに基づく分類系を反映しているのみであり、この
生物の真の生態学的理解に基づいているものではない。
【００２７】本発明の新規微生物は、標的植物に接種さ
れると、該細菌は植物の全身にコロニーを形成し、最終
的には立ち枯れ及び死に至らしめるので、不所望の植物
を抑制するのに有用である。これらの細菌の使用は、ほ
とんどの所望の草に対しては安全である。なぜなら、こ
れらの細菌は全身的にコロニー形成を行わず、又はコロ
ニー形成が立ち枯れ又は死をもたらすことがないからで
ある。
れると、該細菌は植物の全身にコロニーを形成し、最終
的には立ち枯れ及び死に至らしめるので、不所望の植物
を抑制するのに有用である。これらの細菌の使用は、ほ
とんどの所望の草に対しては安全である。なぜなら、こ
れらの細菌は全身的にコロニー形成を行わず、又はコロ
ニー形成が立ち枯れ又は死をもたらすことがないからで
ある。
【００２８】本発明の細菌は、広範囲の適当な細菌培地
を用いて発酵させることができ、乾燥安定化することが
でき、冷蔵下で保存することができ、ＣＯ2 発射機を除
く広範囲の噴霧装置を用いて標的雑草に適用することが
できる。細菌製剤は、粘土、微結晶セルロース及びセラ
イトのような多くの担体及び不活性物質を含むことがで
きる。製剤はまた、糖、タンパク質及び複合炭水化物の
ような、この分野において周知の保護化合物を含むこと
もできる。上述のように、細菌の適用は、標的植物に機
械的又は化学的に傷を形成することを伴って行うことが
でき、それによって細菌が宿主にコロニーを形成するこ
とが容易になる。
を用いて発酵させることができ、乾燥安定化することが
でき、冷蔵下で保存することができ、ＣＯ2 発射機を除
く広範囲の噴霧装置を用いて標的雑草に適用することが
できる。細菌製剤は、粘土、微結晶セルロース及びセラ
イトのような多くの担体及び不活性物質を含むことがで
きる。製剤はまた、糖、タンパク質及び複合炭水化物の
ような、この分野において周知の保護化合物を含むこと
もできる。上述のように、細菌の適用は、標的植物に機
械的又は化学的に傷を形成することを伴って行うことが
でき、それによって細菌が宿主にコロニーを形成するこ
とが容易になる。
【００２９】本発明のザントモナス・カンペストリス
は、水溶液として又は不活性な担体に担持して適用する
ことができる。溶液及び担体は、好ましくは１グラム
（溶液の場合には１ｍｌ当たり）約１０６ないし１０
１３細胞を有する。もつとも、雑草への感染及びその抑
制が達成される限り、より多数の又はより少数の細胞を
用いることもできる。
は、水溶液として又は不活性な担体に担持して適用する
ことができる。溶液及び担体は、好ましくは１グラム
（溶液の場合には１ｍｌ当たり）約１０６ないし１０
１３細胞を有する。もつとも、雑草への感染及びその抑
制が達成される限り、より多数の又はより少数の細胞を
用いることもできる。
【００３０】好ましくは、ザントモナス・カンペストリ
スは、１グラム又は１ｍｌ当たり少なくとも約１０6 細
胞、通常約１０13細胞を含む濃厚物の形態でユーザーに
出荷される。この濃厚物は凍結乾燥によりさらに細胞濃
度を高めることができ、また保存料と混合することがで
きる。なお、保存料の実際の組成は保存の方法に依存す
る。細胞は凍結又は凍結乾燥できる。細胞を凍結する場
合には、グリセロール又は種々の糖及び新鮮な生育培地
を保存料として用いることができる。５〜５０体積％の
グリセロール又は糖を通常用いることができる。細胞が
凍結乾燥される場合には、栄養培地又は種々の糖を保存
のために用いることができる。一般に、ザントモナス・
カンペストリスは１ｍｌ当たり約１０9 ないし１０11細
胞まで増殖され、次いで遠心または培地を除去すること
によって濃縮される。次いで、菌を凍結、凍結乾燥又は
乾燥させる。上述のように、乾燥した細菌は、粘土、タ
ルクのような無機固形担体又は不活性な有機材料と混合
し、これを雑草にふりかけ、または水と混合して雑草に
噴霧することができる。
スは、１グラム又は１ｍｌ当たり少なくとも約１０6 細
胞、通常約１０13細胞を含む濃厚物の形態でユーザーに
出荷される。この濃厚物は凍結乾燥によりさらに細胞濃
度を高めることができ、また保存料と混合することがで
きる。なお、保存料の実際の組成は保存の方法に依存す
る。細胞は凍結又は凍結乾燥できる。細胞を凍結する場
合には、グリセロール又は種々の糖及び新鮮な生育培地
を保存料として用いることができる。５〜５０体積％の
グリセロール又は糖を通常用いることができる。細胞が
凍結乾燥される場合には、栄養培地又は種々の糖を保存
のために用いることができる。一般に、ザントモナス・
カンペストリスは１ｍｌ当たり約１０9 ないし１０11細
胞まで増殖され、次いで遠心または培地を除去すること
によって濃縮される。次いで、菌を凍結、凍結乾燥又は
乾燥させる。上述のように、乾燥した細菌は、粘土、タ
ルクのような無機固形担体又は不活性な有機材料と混合
し、これを雑草にふりかけ、または水と混合して雑草に
噴霧することができる。
【００３１】ザントモナス・カンペストリス培養物の貯
蔵、増殖及び適用のこれらの全てのバリエーションはこ
の分野において周知である。
蔵、増殖及び適用のこれらの全てのバリエーションはこ
の分野において周知である。
【００３２】以下に、本発明の最良の形態を含む実施例
を記載する。これらの実施例を限定的に解釈してはなら
ない。他に断りがない限り、全てのパーセンテージは重
量基準であり、溶液混合物の比率は体積基準である。
を記載する。これらの実施例を限定的に解釈してはなら
ない。他に断りがない限り、全てのパーセンテージは重
量基準であり、溶液混合物の比率は体積基準である。
【００３３】実施例１：新規微生物の単離 スズメノカタビラ、メヒシバ、オヒシバ及び他の種を包
含する無病徴植物（完全に健康であると思われる植物）
を米国内の田畑及び芝生から採集した。これらの植物の
部分（葉、茎、根）の表面を１０％漂白剤又は７０％エ
タノールで殺菌し、水、食塩水又はリン酸緩衝液中で１
〜２ｍｍの小片に刻んだ。これを静かに撹拌しながら３
０分間インキュベートした。この緩衝液又は水を、非選
択性又は広範囲に選択的な適当な細菌培地上（栄養寒
天、修飾ウィルブリンク寒天（ＭＷＢ）又はシクロヘキ
シミド、５−フルオロウラシル、トブラマイシン及びメ
チルグリーンを含むＭＷＢ（これはプレート上に回収さ
れた他の細菌及び真菌の数を減らすために設計した）に
プレートした。未発見の生物の抗生物質許容量を知るこ
とはできないので、高度に選択的な培地を用いることは
できない。２２〜３８℃で２〜１０日培養後、これらの
植物から個々のコロニーを選び、針で直接接種し、ある
いは、後ではさみ又はクリップを用いて接種を行うため
に固体培地又は液体培地上で増殖させた。
含する無病徴植物（完全に健康であると思われる植物）
を米国内の田畑及び芝生から採集した。これらの植物の
部分（葉、茎、根）の表面を１０％漂白剤又は７０％エ
タノールで殺菌し、水、食塩水又はリン酸緩衝液中で１
〜２ｍｍの小片に刻んだ。これを静かに撹拌しながら３
０分間インキュベートした。この緩衝液又は水を、非選
択性又は広範囲に選択的な適当な細菌培地上（栄養寒
天、修飾ウィルブリンク寒天（ＭＷＢ）又はシクロヘキ
シミド、５−フルオロウラシル、トブラマイシン及びメ
チルグリーンを含むＭＷＢ（これはプレート上に回収さ
れた他の細菌及び真菌の数を減らすために設計した）に
プレートした。未発見の生物の抗生物質許容量を知るこ
とはできないので、高度に選択的な培地を用いることは
できない。２２〜３８℃で２〜１０日培養後、これらの
植物から個々のコロニーを選び、針で直接接種し、ある
いは、後ではさみ又はクリップを用いて接種を行うため
に固体培地又は液体培地上で増殖させた。
【００３４】これらの単離株を純粋培養物として増殖さ
せることに一旦成功すると、それらを、それらが単離さ
れた植物及び関心のある他の種の植物に接種した。所望
の活性が見られた場合には、その微生物を、接種した植
物から回収し又はストック培養物から回収した。
せることに一旦成功すると、それらを、それらが単離さ
れた植物及び関心のある他の種の植物に接種した。所望
の活性が見られた場合には、その微生物を、接種した植
物から回収し又はストック培養物から回収した。
【００３５】要するに、この方法は、健康な草の内部微
生物叢の本質的にランダムな傷接種スクリーニングであ
り、このスクリーニングは供給源となった種及び他の種
について行った。
生物叢の本質的にランダムな傷接種スクリーニングであ
り、このスクリーニングは供給源となった種及び他の種
について行った。
【００３６】上記した方法により発見された生物のリス
トを表１に示す。
トを表１に示す。
【００３７】
【表１】
【００３８】これらの新しい単離株について、この拡大
された収集物の中での有用な変異性を発見するという希
望を持ってさらに研究した。これらの実験は温度許容性
及び宿主域の比較を含む。
された収集物の中での有用な変異性を発見するという希
望を持ってさらに研究した。これらの実験は温度許容性
及び宿主域の比較を含む。
【００３９】実施例２：低温条件における単離株の毒性
の比較 ３つの単離株ザントモナス・カンペストリス（ＭＢ２４
９、ＭＢ２４５及びＭＢ２１８）をそれぞれ別の３つの
フラスコで培養した。培養は２２℃で７２時間行い、次
いでスズメノカタビラの苗に培養した菌を接種した。こ
このフラスコについて、希釈プレートカウンティングに
より細胞数を計測した。表２参照。接種された植物は、
培養室内で昼間の１２時間を８５ oＦ（約２９．４
℃）、６５ oＦ（約１８．３℃）又は５５ oＦ（約１
２．８℃）、夜の１２時間を６５ oＦ（約１８．３
℃）、４５ oＦ（約７．２℃）又は３５ oＦ（約１．７
℃）にしてインキュベートした。雑草の抑制の評価を経
時的に行った。これらの実験の結果を表３に示す。
の比較 ３つの単離株ザントモナス・カンペストリス（ＭＢ２４
９、ＭＢ２４５及びＭＢ２１８）をそれぞれ別の３つの
フラスコで培養した。培養は２２℃で７２時間行い、次
いでスズメノカタビラの苗に培養した菌を接種した。こ
このフラスコについて、希釈プレートカウンティングに
より細胞数を計測した。表２参照。接種された植物は、
培養室内で昼間の１２時間を８５ oＦ（約２９．４
℃）、６５ oＦ（約１８．３℃）又は５５ oＦ（約１
２．８℃）、夜の１２時間を６５ oＦ（約１８．３
℃）、４５ oＦ（約７．２℃）又は３５ oＦ（約１．７
℃）にしてインキュベートした。雑草の抑制の評価を経
時的に行った。これらの実験の結果を表３に示す。
【００４０】表２に示されるように、接種に用いた細菌
の細胞数は非常に近接していた。
の細胞数は非常に近接していた。
【００４１】
【表２】
【００４２】カリフォルニア及びテキサスで採取された
単離株は、低温においてスズメノカタビラをより迅速に
抑制したが、より高い温度下においては同程度の病徴を
示した。
単離株は、低温においてスズメノカタビラをより迅速に
抑制したが、より高い温度下においては同程度の病徴を
示した。
【００４３】
【表３】
【００４４】表１に示す、スズメノカタビラからの単離
株は、徹底した宿主域試験及び生化学的特徴付けにおい
て類似していたが、表１及び表３に示すように、いくつ
かの毒性の差異が見られた。２つの単離株は、低温でス
ズメノカタビラを抑制することができた。低温において
雑草を抑制することができる能力は重要である。なぜな
ら、スズメノカタビラがシードヘッド（seedhead) を生
産する前、そしてスズメノカタビラが芝生中で大きなス
ポットを確立する前の冬季にスズメノカタビラを抑制す
ることが好ましいからである。
株は、徹底した宿主域試験及び生化学的特徴付けにおい
て類似していたが、表１及び表３に示すように、いくつ
かの毒性の差異が見られた。２つの単離株は、低温でス
ズメノカタビラを抑制することができた。低温において
雑草を抑制することができる能力は重要である。なぜな
ら、スズメノカタビラがシードヘッド（seedhead) を生
産する前、そしてスズメノカタビラが芝生中で大きなス
ポットを確立する前の冬季にスズメノカタビラを抑制す
ることが好ましいからである。
【００４５】単離株間で検出された温度応答性の差異
は、これらが異なる菌株に属することを確立するのに十
分大きな差異である。低温条件下において最も強毒性の
菌株はＭＢ２４９及びＭＢ２４５である。我々は、これ
らの菌株のプラスミドを研究したところ、従来報告され
ていたいずれの菌株からも識別可能であった。ＭＢ２１
８株は単一のプラスミド（約３５ｋｂ）を有し、Ｅｃｏ
ＲＩで消化すると３つのバンドが現れる。ＭＢ２４９株
のプラスミドは、ＥｃｏＲＩで消化するとは３つの同様
なバンド及び２つの新しいバンドを示す。ＭＢ２４５株
はプラスミドを含まない。この違いは、これらが異なる
単離株であることを示すために有用である。
は、これらが異なる菌株に属することを確立するのに十
分大きな差異である。低温条件下において最も強毒性の
菌株はＭＢ２４９及びＭＢ２４５である。我々は、これ
らの菌株のプラスミドを研究したところ、従来報告され
ていたいずれの菌株からも識別可能であった。ＭＢ２１
８株は単一のプラスミド（約３５ｋｂ）を有し、Ｅｃｏ
ＲＩで消化すると３つのバンドが現れる。ＭＢ２４９株
のプラスミドは、ＥｃｏＲＩで消化するとは３つの同様
なバンド及び２つの新しいバンドを示す。ＭＢ２４５株
はプラスミドを含まない。この違いは、これらが異なる
単離株であることを示すために有用である。
【００４６】この明細書に記載しクレームする、無病徴
の植物からの微生物の単離を行うことのみによって、低
温毒性に対する単離株間の変異性を示すために十分な数
にまで単離株の数を増やすことができた。
の植物からの微生物の単離を行うことのみによって、低
温毒性に対する単離株間の変異性を示すために十分な数
にまで単離株の数を増やすことができた。
【００４７】実施例３：ザントモナス属単離株の宿主域 種々のザントモナス単離株の肉汁培養物を栄養肉汁培地
又は修飾ウィルブリンク培地で室温で７２時間培養し
た。必要ならばこれらを希釈して、約１０9 ｃｆｕ／ｍ
ｌの細胞濃度を達成した。はさみを細胞懸濁液中に浸漬
し、種々の種の植物の苗を切断するために用いた。な
お、はさみは、異なる単離株を扱う際にはアルコール及
び炎で殺菌した。植物を温室内でインキュベートし、徴
候を観察した。結果を表４及び表５に示す。
又は修飾ウィルブリンク培地で室温で７２時間培養し
た。必要ならばこれらを希釈して、約１０9 ｃｆｕ／ｍ
ｌの細胞濃度を達成した。はさみを細胞懸濁液中に浸漬
し、種々の種の植物の苗を切断するために用いた。な
お、はさみは、異なる単離株を扱う際にはアルコール及
び炎で殺菌した。植物を温室内でインキュベートし、徴
候を観察した。結果を表４及び表５に示す。
【００４８】
【表４】
【００４９】
【表５】 実施例４：低温発酵比較 ザントモナス・カンペストリスの３つの単離株を無菌的
に栄養肉汁に接種し、６℃で、温度制御振盪インキュベ
ーター中で振盪フラスコ中で増殖させた。接種後、間隔
をおいて、細胞の増殖をＳｐｅｃｒｏｎｉｃ−２０分光
光度計を用いて６４０ｎｍの吸光度を測定することによ
ってモニターした。これらの条件下において、ＭＢ２４
５株及びＭＢ２４９株は、ＭＢ２１８株よりも迅速に高
細胞密度を達成した（図１）。より高い温度では、振盪
フラスコ及びファーメンター中において、より迅速に高
細胞密度が達成されることがわかっていた。従って、こ
れらの菌株は、室温以下の温度においてより優れた性質
を示す。
に栄養肉汁に接種し、６℃で、温度制御振盪インキュベ
ーター中で振盪フラスコ中で増殖させた。接種後、間隔
をおいて、細胞の増殖をＳｐｅｃｒｏｎｉｃ−２０分光
光度計を用いて６４０ｎｍの吸光度を測定することによ
ってモニターした。これらの条件下において、ＭＢ２４
５株及びＭＢ２４９株は、ＭＢ２１８株よりも迅速に高
細胞密度を達成した（図１）。より高い温度では、振盪
フラスコ及びファーメンター中において、より迅速に高
細胞密度が達成されることがわかっていた。従って、こ
れらの菌株は、室温以下の温度においてより優れた性質
を示す。
【００５０】実施例５：増大された芝生の安全性 ザントモナス・カンペストリスの単離株を室温で７２時
間、修飾ウィブリンク肉汁中で培養し、種々の範囲の芝
生栽培変種植物に接種した。肉汁中の細胞密度を標準的
な希釈プレート法でモニターし、宿主域試験に対する飽
和接種レベルを確保した。植物を次いで温室中で栽培
し、これらの病原体による感染に特徴的な全身的な立ち
枯れ徴候をモニターした。感受性種（スズメノカタビ
ラ）のポジティブコントロールを個々の試験に含ませ
た。また、試験する全ての草について、公知の病原株を
接種して比較した。ほとんどの所望の芝生は、ザントモ
ナス単離株のいずれに対しても全く感受性を有さなかっ
たが、いくつかの特定の栽培変種は異なる単離株に対し
て異なる感受性を示した。これらの観察のまとめを下記
表６に示す。立ち枯れ徴候を示す苗がたまにある場合に
は、その栽培変種の感受性を「わずか」と記した。２０
〜５０％の苗が立ち枯れ徴候を示す場合には、感受性は
「中程度」と記した。ほとんどの苗が立ち枯れを示す場
合には、感受性は「高い」と記した。
間、修飾ウィブリンク肉汁中で培養し、種々の範囲の芝
生栽培変種植物に接種した。肉汁中の細胞密度を標準的
な希釈プレート法でモニターし、宿主域試験に対する飽
和接種レベルを確保した。植物を次いで温室中で栽培
し、これらの病原体による感染に特徴的な全身的な立ち
枯れ徴候をモニターした。感受性種（スズメノカタビ
ラ）のポジティブコントロールを個々の試験に含ませ
た。また、試験する全ての草について、公知の病原株を
接種して比較した。ほとんどの所望の芝生は、ザントモ
ナス単離株のいずれに対しても全く感受性を有さなかっ
たが、いくつかの特定の栽培変種は異なる単離株に対し
て異なる感受性を示した。これらの観察のまとめを下記
表６に示す。立ち枯れ徴候を示す苗がたまにある場合に
は、その栽培変種の感受性を「わずか」と記した。２０
〜５０％の苗が立ち枯れ徴候を示す場合には、感受性は
「中程度」と記した。ほとんどの苗が立ち枯れを示す場
合には、感受性は「高い」と記した。
【００５１】
【表６】
【００５２】ザントモナス単離株によって引き起こされ
る所望の芝生への障害の率が低いので、これらを用い
て、所望の芝生に害を与えることなく芝生中に混在する
雑草を抑制することができる。従って、本発明の単離株
は、例えば、スズメノカタビラ、ブロマス属植物、ディ
ジタリア（Digitaria)属植物及びPoa annua var. repta
nsの抑制のために芝生に安全に適用することができる。
る所望の芝生への障害の率が低いので、これらを用い
て、所望の芝生に害を与えることなく芝生中に混在する
雑草を抑制することができる。従って、本発明の単離株
は、例えば、スズメノカタビラ、ブロマス属植物、ディ
ジタリア（Digitaria)属植物及びPoa annua var. repta
nsの抑制のために芝生に安全に適用することができる。
【００５３】実施例６：ザントモナス・カンペストリス
単離株と植物生長調節剤メフルイジドの組合せを用い
た、スズメノカタビラのより迅速な抑制 温室で育てた、小さな鉢のスズメノカタビラに２つの異
なるザントモナス菌株の細胞懸濁液を噴霧した。噴霧し
たものは、ＭＢ２４５株（４ｘ１０9 ｃｆｕ／ｍｌ）及
びＭＢ２１８（３ｘ１０9 ｃｆｕ／ｍｌ）をそれぞれ単
独で、又は０．０３％若しくは０．１５％のメフルイジ
ド（mefluidide) （Embark（商標））との組合せであっ
た。対照植物は水又は実験で用いた濃度のメフルイジド
を噴霧した。１エーカーあたり１００ガロンの率で懸濁
液又は溶液を噴霧した際の植物の高さは約６ｃｍであっ
た。噴霧した液体でまだ塗れている状態で、植物を５ｃ
ｍの高さに切断した。植物を次いで培養室に入れ、夜の
１２時間は４５ oＦ（約７．２℃）で、昼の１２時間は
６５ oＦ（約１８．３℃）で栽培した。処理の効果は、
１０日及び１４日後に土壌ラインの上にある草の全鮮重
量を測定することにより定量化した（表７）。重量が減
少したのは、それぞれの処理に応じて、植物生長調整剤
の効果又は細菌の立ち枯れ効果である。
単離株と植物生長調節剤メフルイジドの組合せを用い
た、スズメノカタビラのより迅速な抑制 温室で育てた、小さな鉢のスズメノカタビラに２つの異
なるザントモナス菌株の細胞懸濁液を噴霧した。噴霧し
たものは、ＭＢ２４５株（４ｘ１０9 ｃｆｕ／ｍｌ）及
びＭＢ２１８（３ｘ１０9 ｃｆｕ／ｍｌ）をそれぞれ単
独で、又は０．０３％若しくは０．１５％のメフルイジ
ド（mefluidide) （Embark（商標））との組合せであっ
た。対照植物は水又は実験で用いた濃度のメフルイジド
を噴霧した。１エーカーあたり１００ガロンの率で懸濁
液又は溶液を噴霧した際の植物の高さは約６ｃｍであっ
た。噴霧した液体でまだ塗れている状態で、植物を５ｃ
ｍの高さに切断した。植物を次いで培養室に入れ、夜の
１２時間は４５ oＦ（約７．２℃）で、昼の１２時間は
６５ oＦ（約１８．３℃）で栽培した。処理の効果は、
１０日及び１４日後に土壌ラインの上にある草の全鮮重
量を測定することにより定量化した（表７）。重量が減
少したのは、それぞれの処理に応じて、植物生長調整剤
の効果又は細菌の立ち枯れ効果である。
【００５４】
【表７】
【００５５】これらのデータは、細菌の有利な除草効果
は、植物生長調整剤の使用により促進及び／又は加速さ
れることを示している。種々の生長促進剤が当業者に知
られており、この明細書に記載した教示に従って用いる
ことができる。
は、植物生長調整剤の使用により促進及び／又は加速さ
れることを示している。種々の生長促進剤が当業者に知
られており、この明細書に記載した教示に従って用いる
ことができる。
【００５６】この明細書に記載した実施例及び具体例は
例示の目的のためにのみ示したものであり、種々の修飾
及び変更が特許請求の範囲に記載した本発明の精神及び
範囲内において可能であることが当業者に明らかであ
る。
例示の目的のためにのみ示したものであり、種々の修飾
及び変更が特許請求の範囲に記載した本発明の精神及び
範囲内において可能であることが当業者に明らかであ
る。
【図１】６℃における３つの単離株の増殖を比較した図
である。
である。
フロントページの続き 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ Ｂ−１８８６３ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ Ｂ−１８８６４ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ Ｂ−１８８６５ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ Ｂ−１８８６６ (72)発明者 スティーブン ディー．サヴェイジ アメリカ合衆国 カリフォルニア州 92069 サンマルコス レッドウイング ストリート 1732 (56)参考文献 特開 昭62−278978（ＪＰ，Ａ)
Claims (8)
- 【請求項１】 スズメノカタビラに病原性を示すザント
モナス・カンペストリスＭＢ２４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−
１８８５５）微生物。 - 【請求項２】 スズメノカタビラに病原性を示すザント
モナス・カンペストリスＭＢ２４９株（ＮＲＲＬ Ｂ−
１８８５７）微生物。 - 【請求項３】 スズメノカタビラに病原性を示すザント
モナス・カンペストリスＭＢ２７６株（ＮＲＲＬ Ｂ−
１８８６１）微生物。 - 【請求項４】 スズメノカタビラに対し、ザントモナス
・カンペストリスＭＢ２４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８
５５）、ザントモナス・カンペストリスＭＢ２４９株
（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５７）、ザントモナス・カンペ
ストリスＭＢ２７６株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８６１）の
群の少なくとも１つ以上から選ばれる微生物の有効量を
適用することから成る、スズメノカタビラの抑制方法。 - 【請求項５】 スズメノカタビラに対し、ザントモナス
・カンペストリスＭＢ２４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８
５５）及び／又は、ザントモナス・カンペストリスＭＢ
２４９株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５７）の微生物の有効
量を適用することから成る、低温環境下における、スズ
メノカタビラの抑制方法。 - 【請求項６】 スズメノカタビラに対する微生物の有効
量が、溶液１ｍｌ当たり１０ ６ 個から１０ １３ 個の微生
物の細胞を含む溶液を適用することから成る請求項４又
は５記載のスズメノカタビラの抑制方法。 - 【請求項７】 スズメノカタビラに対し、ザントモナス
・カンペストリスＭＢ２４５株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８
５５）、ザントモナス・カンペストリスＭＢ２４９株
（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８５７）、ザントモナス・カンペ
ストリスＭＢ２７６株（ＮＲＲＬ Ｂ−１８８６１）の
群の少なくとも１つ以上から選ばれる微生物と、植物生
長調節剤とを適用することから成る、スズメノカタビラ
の抑制方法。 - 【請求項８】 前記植物生長調節剤はメフルイジドであ
る請求項７記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US7/753,270 | 1991-08-30 | ||
| US07/753,270 | 1991-08-30 | ||
| US07/753,270 US5192541A (en) | 1991-08-30 | 1991-08-30 | Weed killing xanthomonas campestris |
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|---|---|
| JPH05260954A JPH05260954A (ja) | 1993-10-12 |
| JP2681329B2 true JP2681329B2 (ja) | 1997-11-26 |
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-
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-
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