JP2990040B2 - 皮膚の老化の抑止用の化粧料 - Google Patents
皮膚の老化の抑止用の化粧料Info
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Description
化粧料及びその使用法に関する。
のために、皮膚の老化が、特に皮膚の機械的性質の低
下、特にしわの出現に伴なう弾性及び緊張性の喪失に反
映されることは知られている。この現象は特に、弾性組
織における不利な変化、特に弾性繊維の数及び直径の減
少を伴なって起こる。皮膚の老化はまた、皮膚の脆性の
必然的増加とともに、皮膚の全構成要素がまばらになる
ことを伴なう。繊維芽細胞の稀薄化及びその活力の低下
は、皮膚老化過程において重要な部分を演ずると考えら
れる。
て、気体の交換が皮膚の表面で行われることもまた知ら
れている。皮膚呼吸として知られるこの現象は年齢とと
もに減少し、この減少は、表皮の活力の低減の結果であ
ると考えられる。
な皮膚の老化を抑止してこれを防止する化粧料として、
新規な物質を利用することに関する。
体を生成しない(non−fruiting)繊維状
(filamentous)細菌の抽出物が、それを皮
膚に塗布すると皮膚老化を低減し、及び/又は遅延でき
ることが見出された。これらの抽出物はまた、メラニン
形成細胞への刺激効果を有し、それを頭皮に塗布する
と、皮膚の老化の一つの結果として考えることができる
頭髪の白髪化を低減及び/又は遅延できる。
現は、実際の抽出物、及び細菌培養後に得られるバイオ
マスの両方を包含する。所望されるならば、これらのバ
イオマスは少なくとも部分的に脱水され、及び/又は粉
砕されてもよい。本発明は、バイオマス全体と同一の皮
膚老化防止性を有するバイオマスの分画(fracti
on)よりなる抽出物を活性成分として含む化粧料も包
含する。本発明に従って用いられる細菌抽出物はまた、
バイオマスから得られる化学的誘導体、例えばアシル化
誘導体も含んでいる。本発明で用いる細菌抽出物は、
“Bergey’s Manual of Syste
matic Bacteriology,Vol.3
Section23,9th ed.,1989”の分
類に従って定義されたような、非光合成性で果実体を生
成しない繊維性細菌から選ばれた細菌の抽出物である。
ベギアトア目(order Beggiatoale
s)に、特に、例えば“Arch.Microbio
l.(1984)137,139〜144”で与えられ
た定義に従った、各種のベギアトア・アルバ菌株(Be
ggiatoa alba)のようなベギアトア属(g
enus Beggiatoa)に属する細菌が挙げら
れるであろう。ベギアトア・アルバのこの定義は、“B
ergey’s Manual,8th ed.”中の
旧名、ベギアトア・アラクノイデア(B.arachn
oidea)、ベギアトア・ギガンテア(B.giga
ntea)、ベギアトア・レプトミフォルミス(B.l
eptomiformis)、ベギアトア・ミニマ
(B.minima)及びベギアトア・ミラビリス
(B.mirabilis)と対応することは留意すべ
きである。
るが、しばしばそれと区別するのが困難なビトレオシラ
属(genus Vitreoscilla)に属する
細菌が挙げられ、またフレキシトリックス属(genu
s Flexithrix)及びロイコトリックス属
(genus Leucothrix)に属する細菌も
挙げることができる。上記に示され、そのいくつかは既
に述べられてきた細菌は、一般に水中生息地を有し、海
水中又は温泉中に見出だすことができる。
オシラ・ベギアトア(V.beggiatoides)
(ATCC43181)、−ベギアトア・アルバ(AT
CC 33555)、−フレキシトリックス・ドロテア
エ(F.dorotheae)(ATCC2316
3)、−ロイコトリックス・ムコール(L.muco
r)(ATCC 25107)を挙げることができる。
本発明の細菌抽出物を調製するために、公知の方法によ
って前記細菌を培養し、次いで得られたバイオマス(b
iomass)を分離することが可能である。一つの好
ましい培養方法は、フランス国特許第2,693,65
4号に記載されているものである。
知方法、例えば濾過、或いはデン粉下地層を有するシリ
ンダー上で乾燥し剥離する方法、又は遠心分離及び/又
は凍結乾燥によって分離及び採取することができる。例
えば減圧下、80℃での事前の濃縮は、この分離を向上
することができる。細菌性抽出物は、誘導体の形で、例
えば少なくとも部分的にアシル化された誘導体の形で使
用できる。アシル化は、無水カルボン酸を用いて、又は
対応する塩化アシルを用いて行われる。例えば無水酢酸
又は塩化アセチルを用いることができる。アシル化反応
は、細菌バイオマス中に存在する第1及び第2アミン基
の少なくともいくらかがアシル化されるように行われ
る。アシル化剤の比率及びアシル化反応の条件は、標準
の方法(例えば電位差法による)に従ってアシル化反応
の前及び後に、第1及び第2アミン基を分析することに
よって決定される。
菌抽出物が、組成物の重量に対して細菌性抽出物の乾燥
重量で0.01〜2%、特に0.01〜1%の比率で配
合される。これらの組成物は、例えば水、有機溶媒、油
を含む脂肪性物質、及びそれらの混合物、特にエマルジ
ョンのような適当な媒体中に分散物の形で細菌抽出物を
含有する。
ン、油性アルコール・ローション、ゲル、液体コンシス
テンシーのエマルジョン、クリーム、固形のスティッ
ク、又はリピド(lipids)中空粒子分散液(ve
sicle dispersions)の形であっても
よい。これらの組成物は通常の方法に従って調製でき
る。それらは、特に今述べられた形の一つで存在できる
成分及び媒体を含む。それらは、例えば紫外線吸収物
質、水和剤、フリーラジカル阻止剤、保湿剤、及び金属
イオン封鎖剤のようなその他の活性成分もさらに含むこ
とができる。それらはまた、保存剤、香料及び酸化防止
剤のような普通に用いられる成分も含むことができる。
を用いたリピド中空粒子分散液の形で組成物を調製する
ために、その調製方法は、公知の方法、例えば、“J.
Mol.Biol.13,238(1965)のBan
gham等による論文、又はフランス国特許第2,31
5,991号及び第2,416,008号で述べられた
ような、水性媒体中に分散される小球を形成するよう
に、水性溶液中でリピドを膨潤させることによって行う
ことができる。これらのリピド中空粒子分散液を調製す
る他の方法は、INSERM社版“John Libb
ery Eurotext,1987,6〜18頁”の
「細胞生物学及び薬理学におけるリポソーム」(Les
liposomesen biologie cel
lulaire et pharmacologie)
と題する論文に述べられている。
うな細菌抽出物が、特に上に定義されたような組成物の
形の細菌抽出物が、皮膚又は頭皮に塗布されることを特
徴とする、皮膚の老化を抑止する化粧処理方法に関す
る。上記の組成物は、通常の方法で皮膚及び/又は頭皮
に塗布できる。以下の実施例は、本発明を限定なしに説
明する。
の選択、適応及び培養 細菌の培養方法は、フランス国特許第2,693,65
4号の実施例1で述べられたように行われた。培養で得
られたバイオマスは遠心分離によって採取した。その遠
心分離は、5000×g以上の加速度に達することがで
きる、20℃に冷却された工業用遠心分離機内で行われ
た。こうして得られたバイオマスは、加熱(例えば12
1℃のオートクレーブ中で20分間)、乾燥、凍結乾
燥、又は凍結によって安定化できた。
の乾燥された細菌バイオマスに添加した。得られた混合
物を、4℃で2時間攪拌し、次いで、それに117ml
の無水酢酸を添加した。次いで、凍結乾燥した。アセチ
ル化前と後に、過塩素酸を用いるポテンシオメトリーに
よって第1アミン及び第2アミンを分析することによ
り、出発物質の第1及び第2アミンの基の約60%がア
セチル化されたことが観察された。同様なやり方で、ア
セチル化された細菌抽出物が、ベギアトア・アルバ(A
TCC 33555)培養から誘導された細菌バイオマ
スを出発物質として用いて調製された。
ン、保存剤及び水を含む水相を80℃に加熱し、カルボ
マー940をその中に分散し、次いでこれを、トリエタ
ノールアミンで中和した。80℃に加熱され均質化され
た脂肪相を、強い撹拌下に前記の水相内に導入した。実
施例1の凍結乾燥物を10gの水の中に分散し、40℃
でクリーム内に撹拌しながら導入した。得られた混合物
は室温まで冷却した。このクリームは、日に1回又は2
回、顔及び首の皮膚に塗布された。十分な期間の使用
後、特に一層若く見える皮膚が得られた。
類似の方法で調製された。顔の皮膚に塗布されたとき、
このミルクは、太陽にさらされる人々に特に見られる皮
膚老化を促進する影響を低減した。
である。 a)ゲル このゲルは、 −5%の活性物質を含む実施例1の凍結懸濁物 1.0% −カルボマー940 0.5% −トリエタノール・アミン 0.5% −ポリエチレン・グリコール 3.0% −保存剤 0.3% −エタノール 28 % −水 全体で100%になる量 の組成を有する。このゲルを毎日塗布することがが勧め
られる。
ル−水混合物中に、実施例2によって得られた凍結乾燥
されたアセチル化誘導体0.5%を含有する。
工程に従って調製した。 −実施例2の凍結乾燥されたアセチル化誘導体 0.125% −以下の成分を含む自己乳化性基剤 20.000% ・鉱油 ・薬局方ワセリン ・臭ろう ・オレイン酸グリセリン ・液体ラノリン −薬局方液体ワセリン 5.000% −グリセリン 5.000% −ステアリン酸アルミニウム 0.500% −EDTA二カリウム 0.050% −硫酸マグネシウム 0.700% −保存剤(メチル・及びプロピル・パラ−ヒドロキシベンゾエート) 0.200% −イミダゾリジニル尿素(保存剤) 0.300% −酸化防止剤 0.050% −香料 0.300% −水 全体で100%になる量。
験に従って行われた。3週間にわたって、密封包帯(浸
透を容易にするため)中では感作性の供試物質又は供試
品の繰返し塗布は、その供試品が感作性であるならば、
特異な抗体の形成を誘導させる。2週間の休止期間後
に、供試品を再塗布した(トリガー試験)。感作があっ
たならばアレルギー性反応が現れる。
リームを用いて、50人のボランティアに次のやり方で
行なわれた。供試材料供試品を、商品名「ロイコテスト
(Leukotest)」という密封包帯の下に塗布し
た。密封包帯には、供試品を染み込ませる圧縮綿が、合
成繊維シートによって低アレルギー性接着物から隔てて
設けられ、皮膚反応を試験表面に厳密に限定できるセロ
ファンの環を綿の表面に設けてある。
貼付した。貼付は、誘導段階の間、ボランティアの左肩
の同じ場所に繰返された。したがって理論的に皮膚の同
じ区域が、連続3週間、週に3回隔日に、密封包帯の下
に保持された0.1mlの供試品で48時間処理された
ことになる。貼付は、不耐性の兆候が観察されるとす
ぐ、トリガー試験まで中断された。2週間の休止期間
後、最後の供試品塗布が、各ボランティアの誘導に用い
られた最初の場所(左肩)、及び右肩に定められた新し
い場所の両方に行われ、密封包帯はその場所に24時間
保持された。
パッチの除去後に直ちに繰返された。炎症性反応の場合
には、供試品の塗布は、対象の被験者についてはトリガ
ー試験まで中断せねばならなかった。
で24時間後、及び48時間後に行った。これらの検査
によって、下記の点の所見が得られる。 −皮膚の同じ場所に最初の9回の貼付中には、供試品の
蓄積による不耐性の何らかの兆候、 −トリガー貼付後は、アレルギー反応を示す何らかの現
象。
した。
ンテージを考慮した一般基準、 −観察された反応の種類及びそれらの度合を考慮したさ
らに特殊な基準。
かったりする紅斑に限定された反応の出現を特徴とする
刺激力の大きさ、 −トリガー段階の間にさらに詳細に観察される、一般に
かゆみ、浮腫及び/又は湿疹に伴なう紅斑性反応によっ
て現される感作力の大きさ。
y) 貼付のクロノロジイは、以下のとおりである。 D 0−48時間の第1回のパッチ貼付 D 2−結果の読取りと第2回のパッチ貼付 D 4−結果の読取りと第3回のパッチ貼付 D 7−結果の読取りと第4回のパッチ貼付 D 9−結果の読取りと第5回のパッチ貼付 D11−結果の読取りと第6回のパッチ貼付 D14−結果の読取りと第7回のパッチ貼付 D16−結果の読取りと第8回のパッチ貼付 D18−結果の読取りと第9回のパッチ貼付 D21−結果の読取り D35−24時間のパッチ下での供試品の最終貼付 D36−パッチ除去1/2時間後の結果の読取り D37−パッチ除去24時間後の結果の読取り D38−パッチ除去48時間後の結果の読取り。
かった。 トリガー試験 50人のボランティアの中から、皮膚反応は検出されな
かった。これらの結果は、保存剤等については感作性物
質の影響を相乗的に強める危険がよく知られている、ク
リーム中の保存剤及び香料の存在を考慮に入れると特に
顕著なものであった。
究 試験の原理は、所定の時間内に休息中の被験者におい
て、表皮障壁を横切って通る酸素と二酸化炭素の流れを
測定することからなる。このため、円筒形で円形断面の
シリコーン樹脂製のセルを、注入成形によりつくった。
セルは、その開放端部のところで前腕の皮膚に押付けら
れ、弾性ひもを用いて適所に保持された。
結乾燥物を含む)を、2mg/cm2の量で塗布した。
こうして正しい位置に置かれたセル内に捕捉された空気
の量は約8.8cm3であり、こうして閉込められた空
気と接する皮膚の表面積は12.6cm2であった。時
間ゼロでは、二つのセルは同時に研究すべき場所に取付
け、すなわち一方は皮膚の対照区に、他方は皮膚の処理
区に取付けられた。
用いて10分毎にセルから抜出された。変形可能なセル
の性質は、抜出された空気の量にかかわらず、その内部
に一定圧力を保持することを可能にさせる。抜出された
空気は、ガス・クロマトグラフィーによって分析され
た。試験は、20〜54の年齢(平均年齢38)の16
人に行われた。処理されていない対照区と比較して、処
理区について皮膚を横切る二酸化炭素の流れの27%の
平均増加、及び酸素の流れの21%の増加が観察され
た。
効果 繊維芽細胞を、ウエル当たり7500個の細胞の割合
で、完全な栄養培地内で培養した。供試品は実施例2の
ものである。各種濃度の培養細胞に供試品を添加し、次
いでいろいろな培養期間後に細胞数を計数した。例えば
72時間後に、50μg/mlの供試品で処理された細
胞の数は、対照ウエル中の細胞の数に対して30%増加
したことが観察された。
の源)を活性化することが知られているインターロイキ
ン(interleukin)−1βを、ELISA技
術によって分析した。1回分150μg/mlの投与量
で処理された細胞の場合には、34.5pg/mlの濃
度のインターロイキン−1βが見出された(対照区で
は:5.5pg/mlである)。さらに、培養培地(供
試品で処理された培地と処理されない対照培地)中のエ
ラスターゼ型活性が調査されたが、認められなかった。
ものであった。すい臓エラスターゼ(Sigma社:8
3U/mg,タンパク質:15mg/ml)の活性が、
供試品の存在及び不存在において測定された。そのため
に、タンパク質0.15mg/mlに希釈されたエラス
ターゼを、トリエタノールアミン溶液(トリトン(Tr
iton)X100)に追加された供試品に添加した。
エラスターゼ活性の38%の減少が観察された。供試品
が半分に希釈されたとき、エラスターゼ活性の減少は31
%であった。
への塗布試験 供試品は、0.05%の活性成分濃度のクリームの形状
で塗布された。このクリームは、実施例3に記載された
処方を有する。皮膚1cm2当たり2mgの供試品が、
顔及び前腕の皮膚に1日1回塗布された。塗布は2週間
続いた。処理は17人のボランティアに行われた。
性 Ur/Ue)は、“Bioeng.Skin 1:
13〜23(1985)”でRigal及びLeveq
ueによって述べられた器具により、“J.Inves
t.Dermatol. 93:353〜357(19
89)”でC.Escoffier等によって述べられ
た方法に従って測定された。測定は、測定プローブを接
着剤を用いて皮膚に貼付することによって、前腕の皮膚
でなされた。
に行われた。伸縮性については、23%の増加が2週間
後に記録された(4週間で30%)。緊張性について
は、同じ時点で増加は40%であった(4週間で43
%)。これは、塗布された供試品が、処理の2週間後で
も注目すべきやり方で、表皮の生化学的性質、特に弾性
を高めることを示している。
は、実物と凹凸が逆のレプリカ(“烏の足跡”と呼ばれ
るまぶたに近い区域のしわのシリコーン樹脂型)を、各
しわの後ろに投影される影を生じさせる斜めの光線を用
いて照らすことからなる。これらの影は、“J.of
the Soc. of Cosmet.Chem.
34,177〜190(1983)”でCorcuff
等によって、及び“Acta Stereologic
a 2(1)85〜88(1983)”でCorcuf
fによって述べられた方法に従って、写像分析により数
量化された。
定できる。しわの表面区域が、4週間後に著しく縮小さ
れたことが見出だされた。同時に、1〜9mmの長さの
しわの数の減少が注目され、同様に長さ1mm以下のし
わの平均長さの減少も注目された。
ster社から入手できる、目盛付きダイアルを備えた
挟み道具を用いた“皮膚の折り目測定”として知られた
方法(参照: Dykes等,Arch,Dermato
l.Res,256〜261,1976)で評価され
た。挟み道具の二つの顎の間に挟まれた皮膚の厚さは、
ダイアルで直接読取られた。処理してから2週間後に2
%の、4週間後に3.5%の顕著な増加が観察された。
Claims (10)
- 【請求項1】 少なくとも1種類の非光合成性で果実体
を生成せず、ベギアトア目並びにビトレオシラ属に属す
る繊維状細菌の抽出物を活性成分として含有することを
特徴とする皮膚の老化の抑止用の化粧料。 - 【請求項2】 前記細菌が、ベギアトア目に属するもの
であることを特徴とする請求項1記載の化粧料。 - 【請求項3】 前記細菌が、ベギアトア属、ビトレオシ
ラ属、フレキシトリックス属又はロイコトリックス属に
属することを特徴とする請求項1記載の化粧料。 - 【請求項4】 前記細菌が、ベギアトア・アルバ菌株か
ら選ばれることを特徴とする請求項1から3のいずれか
1項に記載の化粧料。 - 【請求項5】 前記細菌の抽出物が、細菌の培養後に得
られる細菌バイオマスからなり、前記バイオマスが、少
なくとも部分的に脱水され、又は真空乾燥され、及び/
又は粉砕されることを特徴とする請求項1から4のいず
れか1項に記載の化粧料。 - 【請求項6】 前記抽出物が、アシル化誘導体の形であ
ることを特徴とする請求項1から4のいずれか1項に記
載の化粧料。 - 【請求項7】 前記細菌抽出物が、組成物全重量に対し
て乾燥した細菌抽出物を0.01〜2重量%の割合で含
む組成物の形で塗布されることを特徴とする請求項1か
ら6のいずれか1項に記載の化粧料。 - 【請求項8】 少なくとも1種類の非光合成性で果実体
を生成しない繊維状細菌の抽出物が、皮膚又は頭皮に塗
布されることを特徴とする皮膚の老化を抑止するための
化粧処理方法。 - 【請求項9】 前記細菌が、請求項2から4のいずれか
1項に定義されたようなものであることを特徴とする請
求項8記載の方法。 - 【請求項10】 前記抽出物が、請求項5又は6のいず
れかに記載された形状で塗布されることを特徴とする請
求項8又は9記載の方法。
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