JP2818277B2 - パルミトレイン酸の製造方法 - Google Patents
パルミトレイン酸の製造方法Info
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は薬理、生理作用を持つパルミトレイン酸を酵
母菌体を利用して高効率で安定して製造することができ
るパルミトレイン酸の製造方法に関するものである。
母菌体を利用して高効率で安定して製造することができ
るパルミトレイン酸の製造方法に関するものである。
（従来の技術） パルミトレイン酸には高血圧性疾患における血管障害
を保護する作用等の薬理、生理作用があるため、従来か
ら酵母菌体を利用してパルミトレイン酸を製造する方法
が研究されている。
を保護する作用等の薬理、生理作用があるため、従来か
ら酵母菌体を利用してパルミトレイン酸を製造する方法
が研究されている。
例えば、特開昭62−257391号公報や特開昭63−287491
号公報には、サッカロミセス・セレビシエのようなパル
ミトレイン酸生産能を持つ酵母をエタノールを炭素源と
して好気的に培養することにより、パルミトレイン酸の
生産量を増加させる方法などが開示されている。
号公報には、サッカロミセス・セレビシエのようなパル
ミトレイン酸生産能を持つ酵母をエタノールを炭素源と
して好気的に培養することにより、パルミトレイン酸の
生産量を増加させる方法などが開示されている。
ところがこのような従来の方法は主に酵母菌体のパル
ミトレイン酸の含有率を増加させることを目的としたも
のであって、酵母菌体量を増加させることについての配
慮がなされていないので、培養液当たりのパルミトレイ
ン酸含有率の大幅な増加を図ることはできなかった。つ
まり、従来の方法ではC/N比（培地中の炭素源のカーボ
ン量とペプトン、エキス類に含まれる窒素の比）を大き
くしパルミトレイン酸含有率を増加させようとするた
め、Ｎ量が少なくなり酵母菌体量は増えない。パルミト
レイン酸の生産では培養液あたりのパルミトレイン酸含
有率が多いほどよく、培養液あたりのパルミトレイン酸
の含有率は酵母菌体と酵母菌体内のパルミトレイン酸含
有率に影響をうける。このことからこの２点の増加を図
ることが培養液中のパルミトレイン酸含有率の増加に必
要である。
ミトレイン酸の含有率を増加させることを目的としたも
のであって、酵母菌体量を増加させることについての配
慮がなされていないので、培養液当たりのパルミトレイ
ン酸含有率の大幅な増加を図ることはできなかった。つ
まり、従来の方法ではC/N比（培地中の炭素源のカーボ
ン量とペプトン、エキス類に含まれる窒素の比）を大き
くしパルミトレイン酸含有率を増加させようとするた
め、Ｎ量が少なくなり酵母菌体量は増えない。パルミト
レイン酸の生産では培養液あたりのパルミトレイン酸含
有率が多いほどよく、培養液あたりのパルミトレイン酸
の含有率は酵母菌体と酵母菌体内のパルミトレイン酸含
有率に影響をうける。このことからこの２点の増加を図
ることが培養液中のパルミトレイン酸含有率の増加に必
要である。
（発明が解決しようとする課題） 本発明はこのような従来の問題点を解決して、培養液
当たりのパルミトレイン酸含有率を大幅に増加させるこ
とができるパルミトレイン酸の製造方法に関するもので
ある。
当たりのパルミトレイン酸含有率を大幅に増加させるこ
とができるパルミトレイン酸の製造方法に関するもので
ある。
（課題を解決するための手段） 上記の課題を解決するためになされた第１の発明は、
パルミトレイン酸を含有する酵母菌体であるサッカロミ
セス・セレビシエAKU4109を、ペプトンを0.01〜１％
と、イーストエキス、マルトエキス、ビーフエキス、ミ
ートエキス、レバーエキスのうちの２種以上を0.006〜
0.6％と、炭素源とを含有する天然培地を用いて発酵さ
せて成育させることによって、得られる培養液中の前記
酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率を増加させた後、
その酵母菌体よりパルミトレイン酸を得ることを特徴と
するものである。
パルミトレイン酸を含有する酵母菌体であるサッカロミ
セス・セレビシエAKU4109を、ペプトンを0.01〜１％
と、イーストエキス、マルトエキス、ビーフエキス、ミ
ートエキス、レバーエキスのうちの２種以上を0.006〜
0.6％と、炭素源とを含有する天然培地を用いて発酵さ
せて成育させることによって、得られる培養液中の前記
酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率を増加させた後、
その酵母菌体よりパルミトレイン酸を得ることを特徴と
するものである。
また第２の発明は、上記の方法によりバッチ発酵を行
わせた後に、C/N比が25以上の培地を流加して酵母菌体
量及び酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率の増加を図
ることを特徴とするものである。
わせた後に、C/N比が25以上の培地を流加して酵母菌体
量及び酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率の増加を図
ることを特徴とするものである。
更に第３の発明は、第２の発明において膜濾過装置を
備えた発酵装置によりパルミトレイン酸を含有する培養
液を濾過して天然培地を除去し、酵母菌体をリターンし
つつ前記C/N比が25以上の培地を流加することを特徴と
するものである。
備えた発酵装置によりパルミトレイン酸を含有する培養
液を濾過して天然培地を除去し、酵母菌体をリターンし
つつ前記C/N比が25以上の培地を流加することを特徴と
するものである。
特に、酵母菌体の中でもSaccharomyces cerevisiae A
KU4109は、酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率が多い
のでこの酵母菌体を用いることは非常に効果的である。
KU4109は、酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率が多い
のでこの酵母菌体を用いることは非常に効果的である。
以下に各発明について順次詳細に説明する。
（第１の発明の説明） 本願発明では、酵母菌体の一種であるサッカロミセス
・セレビシエAKU4109を天然培地を用いて発酵するので
あるが、第１の発明はこの天然培地の組成に特徴があ
る。すなわち、第１の発明ではペプトン（ポリペプト
ン）を0.01〜１％と、イーストエキス、マルトエキス、
ビーフエキス、ミートエキス、レバーエキスのうちの２
種以上を0.006〜0.6％と、炭素源とを必須的に含有する
天然培地が用いられる。
・セレビシエAKU4109を天然培地を用いて発酵するので
あるが、第１の発明はこの天然培地の組成に特徴があ
る。すなわち、第１の発明ではペプトン（ポリペプト
ン）を0.01〜１％と、イーストエキス、マルトエキス、
ビーフエキス、ミートエキス、レバーエキスのうちの２
種以上を0.006〜0.6％と、炭素源とを必須的に含有する
天然培地が用いられる。
ここでペプトン（ポリペプトン）は培地の構成成分と
して従来から用いられているが、本願発明ではその濃度
を0.01〜１％とかなり高めに設定する。本願発明はこれ
により培養液中の酵母菌体量を増加させるもので、濃度
が0.01％未満であると酵母菌体量増加の効果が不十分で
あり、逆に１％を越えても却って酵母菌体内のパルミト
レイン酸含有率が顕著に低下する。
して従来から用いられているが、本願発明ではその濃度
を0.01〜１％とかなり高めに設定する。本願発明はこれ
により培養液中の酵母菌体量を増加させるもので、濃度
が0.01％未満であると酵母菌体量増加の効果が不十分で
あり、逆に１％を越えても却って酵母菌体内のパルミト
レイン酸含有率が顕著に低下する。
イーストエキス、マルトエキス、ビーフエキス、ミー
トエキス、レバーエキス等のエキス類も酵母菌体量を高
めるための栄養分となるものであるが、本発明において
は従来とは異なり、これらのグループから選択されたエ
キス類の２種以上を合計量で0.006〜0.6％含有させる。
このように２種以上のエキス類を培地中に従来よりも多
量に含有させることにより酵母菌体量を増加させること
ができるが、その合計量が0.006％未満であるとその効
果が不十分であり、0.6％を越えるとやはり酵母菌体内
のパルミトレイン酸含有率が顕著に低下する。
トエキス、レバーエキス等のエキス類も酵母菌体量を高
めるための栄養分となるものであるが、本発明において
は従来とは異なり、これらのグループから選択されたエ
キス類の２種以上を合計量で0.006〜0.6％含有させる。
このように２種以上のエキス類を培地中に従来よりも多
量に含有させることにより酵母菌体量を増加させること
ができるが、その合計量が0.006％未満であるとその効
果が不十分であり、0.6％を越えるとやはり酵母菌体内
のパルミトレイン酸含有率が顕著に低下する。
炭素源としてはグルコース、マルトース等の糖類や、
脂肪酸、ノルマルアルカンを用いることができる。
脂肪酸、ノルマルアルカンを用いることができる。
このように第１の発明ではペプトン及びエキス類の濃
度を高めた天然培地が使用され、これによって酵母菌体
内のパルミトレイン酸含有率とともに、酵母菌体量をも
増加させることができ、その結果として培養液当たりの
パルミトレイン酸の含有率を増加させることができる。
発酵方法は通常はバッチ発酵で行われるが連続発酵でも
可能である。
度を高めた天然培地が使用され、これによって酵母菌体
内のパルミトレイン酸含有率とともに、酵母菌体量をも
増加させることができ、その結果として培養液当たりの
パルミトレイン酸の含有率を増加させることができる。
発酵方法は通常はバッチ発酵で行われるが連続発酵でも
可能である。
（第１の発明の実施例） Saccharomyces cerevisiae AKU4109を下記の組成の天
然培地２に入った４容ジャーファーメンターに植菌
し、通気撹拌しながら30℃にて120時間バッチ培養し
た。pHの変動に対しては水酸化ナトリウム又は塩酸の添
加によりpH8.0に保った。
然培地２に入った４容ジャーファーメンターに植菌
し、通気撹拌しながら30℃にて120時間バッチ培養し
た。pHの変動に対しては水酸化ナトリウム又は塩酸の添
加によりpH8.0に保った。
培地組成 ポリペプトン 5（g/） イーストエキス 3（g/） マルトエキス 3（g/） グルコース 30（g/） アデカノール 0.15（g/） 培養液から酵母菌体を水洗分離し、110℃に一晩放置
し乾燥菌体を得た。この乾燥菌体に20倍量のクロロホル
ム−メタノール混合物（2:1）を添加し、常温にて４時
間処理し抽出を繰り返した。この結果得られた培養液中
の乾燥菌体量は21g/となり、乾燥菌体重量当たりのパ
ルミトレイン酸含有率は10％であり培養液あたりのパル
ミトレイン酸量は2.1g/であった。この数値は例えば
「油化学」Vol.31 No.7 P.431〜437（1982）に紹介され
ている従来の酵母菌体量14g/も大きい値であり、培養
液あたりのパルミトレイン酸量1.2g/よりも大きい値
であった。
し乾燥菌体を得た。この乾燥菌体に20倍量のクロロホル
ム−メタノール混合物（2:1）を添加し、常温にて４時
間処理し抽出を繰り返した。この結果得られた培養液中
の乾燥菌体量は21g/となり、乾燥菌体重量当たりのパ
ルミトレイン酸含有率は10％であり培養液あたりのパル
ミトレイン酸量は2.1g/であった。この数値は例えば
「油化学」Vol.31 No.7 P.431〜437（1982）に紹介され
ている従来の酵母菌体量14g/も大きい値であり、培養
液あたりのパルミトレイン酸量1.2g/よりも大きい値
であった。
（第２の発明の説明） 第２の発明では、上記した第１の発明の方法によりバ
ッチ発酵を行わせた後に、培地を流加して酵母菌体量及
びパルミトレイン酸含有率の増加を図る。これは菌体の
生育が定常期に入り、増殖があまり行われなくなったと
きにC/N比が25以上の培地を供給することによって酵母
菌体量の増加及びパルミトレイン酸含有率の増加を図る
ものである。流加する培地はC/N比を25以上としたもの
や、Ｃ源のみを供給するもの等とし、これにより酵母菌
体量を増加させて、更に酵母菌体内のパルミトレイン酸
含有率を増加させて培養液当たりのパルミトレイン酸含
有率を飛躍的に増加させる。
ッチ発酵を行わせた後に、培地を流加して酵母菌体量及
びパルミトレイン酸含有率の増加を図る。これは菌体の
生育が定常期に入り、増殖があまり行われなくなったと
きにC/N比が25以上の培地を供給することによって酵母
菌体量の増加及びパルミトレイン酸含有率の増加を図る
ものである。流加する培地はC/N比を25以上としたもの
や、Ｃ源のみを供給するもの等とし、これにより酵母菌
体量を増加させて、更に酵母菌体内のパルミトレイン酸
含有率を増加させて培養液当たりのパルミトレイン酸含
有率を飛躍的に増加させる。
（第２の発明の実施例） Saccharomyces cerevisiae AKU4109を第１図に示すよ
うに第１の発明の実施例と同じ天然培地２の入った５
容のジャーファーメンター（１）に植菌し、通気撹拌
しながら30℃にてバッチ培養した。pHの変動に対しては
NaOH又は塩酸の添加によりpH8.0に保った。
うに第１の発明の実施例と同じ天然培地２の入った５
容のジャーファーメンター（１）に植菌し、通気撹拌
しながら30℃にてバッチ培養した。pHの変動に対しては
NaOH又は塩酸の添加によりpH8.0に保った。
菌体の生育が定常期に入ったところで、新たに添加用
培地容器（２）から培地を流加し始める。流加する培地
の組成は以下に示すようにC/N比を100とした培地であ
り、溶存酸素計（３）を用いてD0（溶存酸素濃度）値が
2.5±0.6ppmになるように制御しつつ添加する。
培地容器（２）から培地を流加し始める。流加する培地
の組成は以下に示すようにC/N比を100とした培地であ
り、溶存酸素計（３）を用いてD0（溶存酸素濃度）値が
2.5±0.6ppmになるように制御しつつ添加する。
流加用の培地組成 ペプトン 1（g/） イーストエキス 0.6（g/） マルトエキス 0.6（g/） グルコース 43（g/） このようにして培養を続けた結果、酵母菌体重量40g/
、乾燥菌体重量あたりのパルミトレイン酸の含有率が
12.1％となり、第１の発明に比較して含有率、生育量と
もに多くなった。
、乾燥菌体重量あたりのパルミトレイン酸の含有率が
12.1％となり、第１の発明に比較して含有率、生育量と
もに多くなった。
（第３の発明の説明） 第３の発明では、第２図に示すように膜濾過装置
（４）を備えた発酵装置によりパルミトレイン酸を含有
する酵母菌体であるサッカロミセス・セレビシエAKU410
9を培養する。このような装置を使用すれば、酵母菌体
の生育が定常期に入ったときに酵母菌体の流出を膜濾過
装置（４）により防ぎながら培地のみをパルミトレイン
酸の含有率増加に最適な培地に全て交換することがで
き、培地を流加する第２の発明による場合よりも更に酵
母菌体量の増加と菌体内のパルミトレイン酸の含有率を
増加させることができる。
（４）を備えた発酵装置によりパルミトレイン酸を含有
する酵母菌体であるサッカロミセス・セレビシエAKU410
9を培養する。このような装置を使用すれば、酵母菌体
の生育が定常期に入ったときに酵母菌体の流出を膜濾過
装置（４）により防ぎながら培地のみをパルミトレイン
酸の含有率増加に最適な培地に全て交換することがで
き、培地を流加する第２の発明による場合よりも更に酵
母菌体量の増加と菌体内のパルミトレイン酸の含有率を
増加させることができる。
（第３の発明の実施例） Saccharomyces cerevisiae AKU4109を第２図に示すよ
うに第２の発明の実施例と同じ方法でバッチ培養した。
うに第２の発明の実施例と同じ方法でバッチ培養した。
菌体の生育が定常期に入ったところでの孔径0.2μｍ
のセラミック膜の膜濾過装置（４）によって培養液を濾
過しつつ、第２の発明の実施例と同一の流加用の培地を
添加した。添加速度を１/hとし流加用の培地を５添
加し、酵母菌体をジャーファーメンター（１）内に保持
したままで培地の全量入れ換えを行った。このときのジ
ャーファーメンター（１）内のpHは8.0、D0は2.5ppm以
上になるように調整した。
のセラミック膜の膜濾過装置（４）によって培養液を濾
過しつつ、第２の発明の実施例と同一の流加用の培地を
添加した。添加速度を１/hとし流加用の培地を５添
加し、酵母菌体をジャーファーメンター（１）内に保持
したままで培地の全量入れ換えを行った。このときのジ
ャーファーメンター（１）内のpHは8.0、D0は2.5ppm以
上になるように調整した。
培地を入れ換えて80時間経過後に乾燥菌体重量が43.1
g/、乾燥菌体重量あたりのパルミトレイン酸の含有率
が16.5％となり、第２の発明に比較して菌体内のパルミ
トレイン酸の含有率、酵母菌体量ともに更に増加した。
g/、乾燥菌体重量あたりのパルミトレイン酸の含有率
が16.5％となり、第２の発明に比較して菌体内のパルミ
トレイン酸の含有率、酵母菌体量ともに更に増加した。
（他の酵母との比較） 本発明では、使用する酵母をサッカロミセス・セレビ
シエAKU4109とする。本株は従来用いられている酵母よ
り次の比較例に示すように酵母菌体内のパルミトレイン
酸含有率が高くなっている。このためこの酵母菌株を用
いれば効果的にパルミトレイン酸の生産を行うことがで
きる。
シエAKU4109とする。本株は従来用いられている酵母よ
り次の比較例に示すように酵母菌体内のパルミトレイン
酸含有率が高くなっている。このためこの酵母菌株を用
いれば効果的にパルミトレイン酸の生産を行うことがで
きる。
（比較例） Saccharomyces cerevisiae AKU4109を、実施例１と同
様な方法で培養を行った。また比較の対象としては特開
昭62−296885にて用いられたSaccharomyces cerevisiae
for Baker'sを用いた。
様な方法で培養を行った。また比較の対象としては特開
昭62−296885にて用いられたSaccharomyces cerevisiae
for Baker'sを用いた。
（発明の効果） 以上に説明したように、本発明によれば培地の組成を
酵母菌体の生育に適したものとし、また培地の流加を適
切に行うことにより酵母菌体量と酵母菌体内のパルミト
レイン酸の含有率とを共に増加させ、培養液当たりのパ
ルミトレイン酸含有率を従来法による場合に比較して大
幅に増加させることができる。
酵母菌体の生育に適したものとし、また培地の流加を適
切に行うことにより酵母菌体量と酵母菌体内のパルミト
レイン酸の含有率とを共に増加させ、培養液当たりのパ
ルミトレイン酸含有率を従来法による場合に比較して大
幅に増加させることができる。
よって本発明は従来の問題点を一掃したパルミトレイ
ン酸の製造方法として、産業の発展に寄与するところは
極めて大きいものがある。
ン酸の製造方法として、産業の発展に寄与するところは
極めて大きいものがある。
第１図は第２の発明を説明する概略的な正面図、第２図
は第３の発明を説明する概略的な正面図である。 （１）：ジャーファーメンター、（２）：添加用培地容
器、（３）：溶存酸素計、（４）：膜濾過装置
は第３の発明を説明する概略的な正面図である。 （１）：ジャーファーメンター、（２）：添加用培地容
器、（３）：溶存酸素計、（４）：膜濾過装置
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12P 7/64 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (3)
- 【請求項１】パルミトレイン酸を含有する酵母菌体であ
るサッカロミセス・セレビシエAKU4109を、ペプトンを
0.01〜１％と、イーストエキス、マルトエキス、ビーフ
エキス、ミートエキス、レバーエキスのうちの２種以上
を0.006〜0.6％と、炭素源とを含有する天然培地を用い
て発酵させて成育させることによって、得られる培養液
中の前記酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率を増加さ
せた後、その酵母菌体よりパルミトレイン酸を得ること
を特徴とするパルミトレイン酸の製造方法。 - 【請求項２】請求項１の方法によりバッチ発酵を行わせ
た後に、C/N比が25以上の培地を流加して酵母菌体量及
び酵母菌体内のパルミトレイン酸含有率の増加を図るこ
とを特徴とするパルミトレイン酸の製造方法。 - 【請求項３】膜濾過装置を備えた発酵装置によりパルミ
トレイン酸を含有する培養液を濾過して天然培地を除去
し、酵母菌体をリターンしつつ前記C/N比が25以上の培
地を流加することを特徴とする請求項２記載のパルミト
レイン酸の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2227853A JP2818277B2 (ja) | 1990-08-28 | 1990-08-28 | パルミトレイン酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2227853A JP2818277B2 (ja) | 1990-08-28 | 1990-08-28 | パルミトレイン酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04108394A JPH04108394A (ja) | 1992-04-09 |
| JP2818277B2 true JP2818277B2 (ja) | 1998-10-30 |
Family
ID=16867397
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2227853A Expired - Fee Related JP2818277B2 (ja) | 1990-08-28 | 1990-08-28 | パルミトレイン酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2818277B2 (ja) |
-
1990
- 1990-08-28 JP JP2227853A patent/JP2818277B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04108394A (ja) | 1992-04-09 |
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