JP2755351B2 - 抗―凝集ペプチド - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は血小板凝集を抑制する新規なペプチド、該ペ
プチドを含有する医薬組成物、および該ペプチドを使用
する方法に関する。特に、線維素溶解剤と組み合わせて
の本発明のペプチドの使用法に関する。

発明の背景 血栓は凝固カスケード（cascade）を開始する過程の
結果である。それは、フィブリンのポリマー状ネットワ
ークにからんだ血小板の凝集よりなる。この過程は、通
常、組織の損傷の結果として開始し、血管中の血流を遅
くしたり、または阻害する効果を有する。アテローム硬
化斑、血管の炎症（静脈炎）および敗血症のごとき組織
の損傷に直接には関係しない病因も血栓形成を開始させ
る。ある場合においては、血栓の不適当な形成、および
引き続いての血液流量の減少は、発作、肺塞栓症および
心臓病のごとき病的結果を引き起こしかねない。

凝固カスケードは、その終わりから２番目の過程とし
て、フィブリノーゲンを２つの特異的なArg−Gly残基部
で加水分解して２つのより小さい線維素−ペプチドおよ
びフィブリンモノマーを形成させる蛋白分解酵素、トロ
ンビンを生成する多因子よりなる過程である。２つの相
補的結合部位は該線維素−ペプチドの除去によって露出
され、各フィブリンモノマーは２つの他のモノマーに結
合してポリマー状ネットワークを形成できる。また、血
小板もトロンビンによって活性化され、フィブリノーゲ
ンおよびフィブリンモノマーに結合できる。これらの血
小板は、さらに他の凝固アクチベーターを放出すること
によって該過程を増幅する。フィブリンのこのポリマー
化が進行するにつれ、凝集体が血液から沈澱していわゆ
るソフト血餅を形成する。やはりトロンビンによって活
性化される酵素であるフィブリン安定化因子（FSF）は
共有結合架橋の形成を触媒して最終的な固い血餅を形成
する。

血小板は血栓形成において主要な役割を果たす。これ
は、主としてGPIIb-IIIaと呼ばれる血小板受容体複合体
を通じて媒介される。Von Willebrand因子、血漿蛋白、
およびフィブリノーゲンは隣接血小板上のGPIIb-IIIa受
容体に結合し架橋することができ、それにより血小板の
凝集を起こす。フィブロネクチン、ビトロネクチン（vi
tronectin）およびトロンボスポンジン（thrombospondi
n）は、やはりGPIIb-IIIaに結合することが示された蛋
白である。フィブロネクチンは血漿中において、細胞内
マトリックス中の構造蛋白として見い出されている。該
構造蛋白とGPIIa-IIIaと間の結合は血小板が損傷した血
管壁に粘着するように機能する。

フィブロネクチンおよびビトロネクチンは広範囲な細
胞付着機能を促進する一群の構造蛋白の一員である。こ
れらの蛋白、特にフィブロネクチンの細胞付着ドメイン
のアミノ酸配列の解明により、結合を媒介する本質的構
造の一部として配列Arg−Gly−Asp（単一文字アミノ酸
コードで、RGD）が明らかとなった。ルオスラティら（R
uoslahti et al.）、サイエンス（Science）、238、491
−７（1987）参照。ヒト血漿フィブロネクチンから調製
された細胞付着特性を有するポリペプチドが開示されて
いる（ピエシュバシェールら（Pierschbacher et a
l.）、米国特許第4589881号（1986）およびルオスラテ
ィら（Ruoslahti et al.）、WO 84/00540号（198
4））。やはりこの配列を含むより小さいペプチドが、
個体支持体に付着させた場合、正常なラット腎臓（NR
K）細胞に細胞粘着する特性を有し、かつ可溶化形態で
用いた場合、これらの細胞がフィブロネクンに粘着する
のを抑制することが示されている。ルオスラティら（Ru
oslahti et al.）、米国特許第4578079号（1986）およ
びルオスラティら（Ruoslahti et al.）、米国特許第46
14517号（1986）参照。

GPIIb-IIIaのフィブリノーゲン、フィブロネクンおよ
びvon Willebrand因子への結合には血小板の活性化が必
要である。正確な機構は知られていないが、血小板のAD
Pまたはトロンビン刺激が受容体複合体を変化させて結
合を容易とするらしい。この受容体の血小板凝集に対す
る重要性が該受容体をマスクする方法によって示されて
いる。かくして、コラーらは（Coller et al.）（ブラ
ッド（Blood）、66、1456−９（1985））、この複合体
に対する抗体がADPによって誘導されたイヌで血小板凝
集を抑制することを示している。ニーベルステインらは
（Nivelstein et al.）（スロクボウシス・アンド・ヘ
モスタシス（Thromb.and Hemostasis）、58、2133（198
7））、−RGDS−ペプチドがトロンビン誘発凝集および
血小板のフィブロネクチンへの粘着を抑制し、該GPIIb-
IIIa複合体を通じて相互作用する可能性があることを報
告している。ツィマーマンらは（Zimmerman et al.）
（米国特許第4683291号（1987））、フィブロネクチン
の血小板への結合を抑制し、かつ血小板凝集を抑制する
ArgとLysと−RGD−配列とを含有するペプチドを開示し
ている。

現行の抗血栓治療は、プロスタサイクリン同族体、シ
クロオキシゲナーゼ抑制剤、トロンボキサン合成抑制剤
およびトロンボキサン受容体拮抗剤；およびヘパリンの
ごとき抗凝血物質のごとき血小板／表皮細胞アラキドネ
ート−プロスタグランジン系を修飾する剤を使用する。
これらの剤は血小板凝集の２つの識別できる相のうち１
つまたは両方を抑制する。ADP（アデノシン二リン
酸）、コラーゲン、エピネフリンまたはトロンビンのご
とき化学的刺激に対する応答である第１の相は血小板の
最初の活性化を引き起こす。これに続き、血小板自体に
って開始され、トロンボキサンＡ₂（TxA₂）合成および
血小板貯蔵顆粒からのさらなるADPの放出によって特徴
付けられる第２の相がある。これらのメディエーターは
さらに他の血小板を活性化する。

プロスタグランジンＩ₂（PGI₂）とも呼ばれるプロス
タサイクリンは血管壁に沿って並ぶ表皮細胞によって天
然に生じる。PGI₂は血小板cAMPを刺激し、その結果、GP
IIb-IIIa受容体の調節を低下させ、それによりフィブリ
ノーゲン媒介の血小板凝集および無傷血管における血小
板活性化を抑制する。PGI₂および安定なPGI₂同族体は血
小板凝集の第１および第２の相をともに抑制する。しか
しながら、かかる同族体の使用は血圧の望ましくない変
化を伴ってきた。アイケンら（Aiken et al.）、プロス
タグランジンズ（Prostaglandins）、19、629-43（198
0）参照。

シクロキシゲナーゼはPGI₂およびPGH₂のごときプロス
タグランジン類の合成を担う酵素である。PGH₂はトロン
ボキサンシンターゼによってTxA₂まで転化される。シク
ロオキシゲナーゼ抑制剤およびトロンボキサンシンテタ
ーゼ抑制剤はTxA₂の産生を阻止するように作用し、一方
TxA₂拮抗剤はTxA₂受容体を結合させることによってTxA₂
の効果を阻止する。これらの治療のすべては、血小板の
活性化の第２段階にのみ働きかける。シクロオキシゲナ
ーゼ抑制剤は、それらがPGI₂合成を抑制するため、さら
に利点を有し、PGI₂産生の陽性抗−凝集効果をいくぶん
取り除く。シクロオキシゲナーゼ抑制剤の使用は潰瘍誘
発と関係付けられてきた。

ヘパリンは凝固カスケードにおいてプロトロンビンな
らびにある種の他の因子に結合するムコ多糖である。そ
れは、トロンビンによるフィブリノーゲンの活性化を防
止することによって、およびトロンビンによるGPIIb-II
Ia受容体の活性化を防止することにより、その効果を発
揮する。これは、血小板凝集の第１の相のみを抑制し、
コラーゲン、ADPおよびエピネフリンのごとき他の手段
による血小板の活性化に対してほとんど効果を有しな
い。

かくして、シクロオキシゲナーゼ抑制剤、プロスタグ
ランジン同族体およびヘパリンは、すべて、血小板／フ
ィブリノーゲン活性化の第１および第２の相を抑制する
ことによって間接的に血小板凝集を抑制する。従って、
血小板活性化の第１の相から起こるか第２の相から起こ
るかにかかわらず、血小板凝集を直接阻止する選択的な
治療製品に対する要求が存在する。

閉塞された動脈および深静脈血栓症についての最近の
進歩した治療では、血流を回復するかまたは改善するた
めに線維素溶解剤を用いて血栓および塞栓を溶解する。
線維素溶解剤はフィブリンを特異的部位で加水分解し、
それによってフィブリンネットワークをバラバラにする
蛋白分解酵素である。フィブリンをより小さなペプチド
にばらけさすのは、血栓または塞栓を可溶化する効果が
ある。ヒト由来の組織プラスミノーゲンアクチベーター
（tPA）、ウロキナーゼ（UK）およびブロ−ウロキナー
ゼ（pUK）および細菌由来のステレプトキナーゼ（SK）
は本開示の意味の範囲内においては線維素溶解剤とみな
される。それらのin vivo作用は血液中で蛋白分解によ
りプラスミノーゲンを活性化して、自在の線維素溶解剤
であるプラスミンを形成することにある。これらのう
ち、tPAおよびSKは線維素溶解治療に商業的に使用され
ている。しかしながら、かかる治療についてよく起こる
問題は第２の血栓の形成による血管の再閉塞である。

線維素溶解治療は、最も普通には、血栓血管中で流動
を回復するのに使用される。それは、しばしば閉塞の直
接の原因となる血栓の溶解に有用である。しかしなが
ら、線維素溶解治療は血栓の開始を担う因子を全く変え
てしまうものではない。この理由で、ヘパリンのごとき
拮抗凝固剤はしばしば再閉塞を防止するのに使用され
る。事実、動脈にひどり狭窄をもつ患者は、高用量のヘ
パリンの存在下においてさえ、再灌流の後に極端に高い
再血栓症の危険性がある。ゴールドら（Gold et a
l.）、サーキュレーション（Circ.）73、347-52（198
6）参照。加えて、SKおよびtPAの使用は血小板の高凝集
能と関係付けられてきた。オールステインら（Ohlstein
et al.）、スロンボウシス・リサーチ（Thromb.Re
s.）、４、575-85（1987）参照。高用量のtPAでの治療
は全身出血と関係付けることができ、再閉塞を防止する
には推奨できない。従って、線維素溶解治療の後に再血
栓症を防止する方法に対する要求が存在する。

最近、TxA₂拮抗剤が再灌流後の再閉塞を抑制し、およ
び線維素溶解に要するtPAの用量を低下させるいくらか
の希望が示された。米国特許同時継続出願917122号参
照。ヤスダらは（Yasuda et al.）（クリニカル・リサ
ーチ（Clin.Res.）、34、２（1986））、イヌにおい
て、tPAでの血栓崩壊の後、フィブリン豊富血小板血栓
による再閉塞がGPIIb-IIIaに対するネズミ単クローン抗
体によって開始され得ることを証明している。

発明の開示 本発明は、血小板GPIIb-IIIa受容体の結合するペプチ
ドまたはポリペプチドを用いて、血小板凝集および血栓
形成を抑制する方法を提供するものである。この方法に
おいて、活性化された血小板がvon Willebrand因子、フ
ィブロネクチンおよびフィブリノーゲン／フィブリンに
結合する能力が抑制される。このような抗−凝集活性
は、凝集過程の１の刺激の抑制によるのみならず、すべ
ての公知刺激に共通する最終過程に干渉する点で独特で
ある。他の抗−血栓／抗−凝血方法は非類似の手段によ
って作用するので、かかるペプチドまたはポリペプチド
は「抵−線維症剤」と呼ばれて、従来の方法と機構的に
も機質的にも区別される。

本発明の１の態様は式（Ｉ）： Ｘ−（Ａ）_m−Ｂ−Gly−Asp−（Ｃ）_n−Ｙ ［式中、ＡはArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、A
la、Gly、His、Abuまたはそれらのα−Ｒ′置換誘導
体、あるいはPro; ＢはHArg、（Me₂）Arg、（Et₂）ArgまたはArg、HAr
g、（Me₂）Arg、（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体；た
だし、ｍが１の場合、ＢはArgであってもよい ＣはTyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPhe、P
hg、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Thr、Cy
s、（Alk）Cys、Pen、（Alk）Pen、Ala、Val、Nva、Me
t、Leu、Ile、NleまたはNalから選択されるＤまたはＬ
アミノ酸； ＷはハロゲンまたはAlk; ＹはNR₁Ｒ₂またはOR₃； Ｒ₁およびＲ₂は、各々、独立してＨ、Alkまたは（C
H₂）_pPh; Ｒ₃はAlk、（CH₂）_pPhあるいは、ＢがHArg、（Me₂）A
rg、（Et₂）Arg、またはArg、HArg、（Me₂）Argもしく
は（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体である場合はH; ＸはＲ₄Ｒ₅N; Ｒ₄はＨまたはAlk; Ｒ₅はＨ、Alk、HCO、AlkCO、PhCH₂またはPh（CH₂）_qC
O; Ｒ′はAlkまたはPhCH₂； ｑ、ｍおよびｎは０または1;および ｐは０、１、２または３を意味する］ で示される化合物またはその医薬上許容される塩、また
は式（II）： ［式中、Ａ′はArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Ar
g、Ala、Cly、His、Abu、Lysまたはそれらのα−Ｒ′置
換誘導体、あるいはProから選択されるＤ−またはＬ−
アミノ酸； Ｂ′はArg、（HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、Lysま
たはそれらのらα−Ｒ′置換誘導体より選択されるＤ−
またはＬ−アミノ酸； Ｃ′はTyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPh
e、Phg、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Th
r、（Alk）Cys、（Alk）Pen、Ala、Val、Nva、Met、Le
u、Ile、NleまたはNal、あるいはそれらのα−Ｒ′置換
誘導体から選択されるＤまたはＬアミノ酸； ＷはハロゲンまたはAlk; ＹはNR₁Ｒ₂またはOR₃； Ｒ₁およびＲ₂は、各々、独立してＨ、Alkまたは（C
H₂）_pPh; Ｒ₃はAlk、（CH₂）_pPh、あるいはＢがHArg、（Me₂）A
rg、（Et₂）Arg、またはArg、HArg、（Me₂）Argもしく
は（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体である場合はH; ＸはＲ₄Ｒ₅ＮまたはH; Ｒ₄はＨまたはAlk; Ｒ₅はＨ、Alk、HCO、AlkCO、PhCH₂またはPh（CH₂）_qC
O; Ｒ′はAlkまたはPhCH₂； Ｚ₁はCys、PenまたはAPmpのＤ−またはＬ−異性体； Ｚ₂はCys、PenまたはAPmpのＤ−またはＬ−異性体； ｑ、ｍおよびｎは独立して０または1;およびｐは０、
１、２または３を意味する］ で示される化合物またはその医薬上許容される塩であ
る。

また、本発明は、抗−線維症ペプチドおよび医薬上許
容される担体よりなることを特徴とする血小板凝集およ
び血餅形成の抑制用医薬組成物を提供するものである。

さらに、本発明は、有効量の式（Ｉ）または（II）の
抗−線維症ペプチドを体内に投与することを特徴とする
それを必要とする哺乳動物において血栓症または塞栓症
を治療する方法、または血小板凝集または血餅形成を抑
制する方法を提供するものである。

本発明の化合物、ならびに同一機構で作用し得る他の
化合物は血栓崩壊治療の間に再血栓症を防止するのに特
に有用である。従って、もう１つの態様において、本発
明は、有効量の線維素溶解剤および抗−線維症ペプチド
を体内に投与することを特徴とする血栓崩壊後の動物に
おいて動脈または静脈の再閉塞を抑制する方法を提供す
るものである。ストレプトキナーゼ（SK）、ウロキナー
ゼ（UK）、プロ−ウロキナーゼ（pUK）および組織プラ
スミノーゲンアクチベーター（tPA）ならびにそれらの
変異体または突然変異体のごとき公知の線維素溶解物質
を組み合わせると、前記したペプチドは再血栓症を抑制
するのに有用である。加えて、アミノ酸配列−RGD−を
含有するある種の他のペプチドおよびポリペプチド、特
にvon Willebrand因子、ヒト・血漿フィブリノーゲンお
よびヒト・血漿フィブロネクチンのある種のフラグメン
トまたは誘導体は本発明において有用である。

また、本発明は、医薬担体中に線維溶解物質および抗
−線維症ペプチドを含有させてなる哺乳動物の動脈また
は静脈において、血栓崩壊および再灌流を行うための、
および再閉塞を抑制するための医薬組成物を提供するも
のである。

最後に、本発明は、１の容器中に線維素溶解物質、お
よび第２の容器中に抗−線維症ペプチドを含有させてな
る血栓崩壊治療を行う方法で使用するためのキットを提
供するものである。

第１図は、in vitroにて、ペプチドAc−RGDS−NH₂がt
PA促進のヒト血餅溶解に対して影響しないことを示すグ
ラフである。該グラフは４時間における％血餅溶解を組
織プラスミノーゲンアクチベーター（tPA）の濃度増加
の関数として表わす。四角印は制御時間におけるtPA（M
T2N3）−誘発溶解（EC₅₀＝31.5±9.9μg/ml）を表わ
し、丸印はtPAおよび1mM Ac−RGDS−NH₂の存在下での溶
解（EC₅₀31.9±8.6μg/ml）を表わす。

第２図は0.1ml/分の速度での400mM Ac−RGDS−NH₂の
灌流によるin vivoでの血小板凝集の抑制を示すグラフ
である。血小板凝集／血栓形成は血流の減少によって示
す。矢印は灌流の開始および終了を示す。SL（振り離
し）は血栓の機械的除去を示す。最上部の記録（ａ）は
冠状動脈血圧（mmHg）を時間の関数として示し、これは
Ac-RGDS-NH₂の灌流が血圧に影響しないことを示す。中
央の記録（ｂ）は段階状冠血流（ml/分）の変化を時間
の関数として示し、ペプチドの灌流の後の血栓形成の抑
制を示す。下部の記録（ｃ）は平均冠血流（ml/分）を
時間の関数として示し、これはペプチドの灌流の後の血
栓形成の抑制を示す。

第３図は冠血栓症モデルにおける血小板凝集のin viv
o抑制の用量依存性を示すグラフである。該グラフは平
均冠血流を時間の関数として示す。矢印はAc−RGDS−NH
₂の灌流の開始および停止を示す。血栓形成は血流の減
少によって示す。SL（振り離し）は血栓の機械的除去を
示し、Ｘは血栓の自発脱却を示す。最上部の記録は血栓
形成の完全な抑制を示す（灌流速度0.052ml/分における
400mM）。中央の記録は血栓の自発脱却を伴う中程度の
抑制を示す（0.026ml/分灌流における400mM）。最下部
の記録は、血栓の機械的除去を必要とし、完全な阻止に
至る時間が延長される部分的な抑制を示す（0.013ml/分
における400mM）。

ある種のペプチドが血小板の凝集を抑制することが判
明した。かかるペプチドは、フィブロネクチンおよびビ
トロネクチンのごとき広範囲の外因性構造蛋白に結合で
き、GPIIb-IIa複合体によって特徴付けられる血小板上
の受容体と相互作用をすると信じられている。かくし
て、血管の内膜の負傷、破壊または異常は細胞外マトリ
ックスの下層構造蛋白を露出させ、血小板は、恐らくGP
IIb-IIIa受容体を通じて血管壁に結合することを示すこ
とができる。加えて、フィブリノーゲン／フィブリンお
よびvon Willebrand因子は血小板上のGPIIb-IIIa受容体
複合体と相互作用することが示されている。これは、GP
IIb-IIIa受容体の多価結合を介して血小板の凝集を促進
する。血小板受容体とフィブリノーゲン、von Willebra
nd因子およびフィブロネクチンとの間のこれらの粘着相
互作用の干渉はこれらの蛋白の結合部位を模倣すること
によって行われる。フィブロネクチンの活性フラグメン
トの分析はフィブロネクチンの結合部位がアミノ酸配列
Arg-Gly-Asp（RGD）を含むことを示している。さらに、
この配列を含むペプチドは細胞がフィブロネクチンに付
着するのを抑制でき、von Willebrand因子およびフィブ
リノーゲン血小板に結合するのを抑制できることが判明
している。かくして、ある種の蛋白、天然に生じるポリ
ペプチドフラグメントおよびこれらのフラグメントの誘
導体は血小板凝集を抑制できる。単クローン抗体のＦ
（ab′）₂フラグメント（コラーら（Coller et al.）、
ブラッド（Blood）、66、1456−９（（1985））および
ヒト血漿フィブロネクチンのペプチドフラグメント（ル
スラッティら（Rouslahti et al.）、PCT WO84/00540
（1984）およびピエシュバシェールら（Pierschbacher
et al.）、米国特許第4589881号（1986））はGPIIb-III
a受容体に結合できる。

本発明は、血小板GPIIb-IIIa受容体に結合でき、それ
によって血小板凝集を抑制する配列Gly−Aspよりなるペ
プチドを開示する。本発明の１の態様は、ペプチドが血
小板に結合するのを容易とするために、アミノ酸の添加
を適当に選択したり、この配列内のArgを誘導体化また
は再配置することによって該RGDの立体配座を修飾する
ものである。本発明のもう１つの態様はアセチル化また
はアルキル化によりペプチドのアミノ末端を保護し、お
よびアミド、置換アミドまたはエステルとしてカルボキ
シル末端を修飾するものである。これらの修飾は、ペプ
チドの蛋白分解酵素に対する安定性を促進し、細胞粘着
を促進するために（ルスラッティら（Rouslahti et a
l.）、米国特許第4578079号（1986）およびルスラッテ
ィら（Rouslahti et al.）、米国特許第4614517号（198
6））および血小板凝集を抑制するために（ツィマーマ
ンら（Zimmerman et al.）、米国特許第4683291号（198
7））以前用いられてきた化合物からそれらを区別す
る。本発明のある種のペプチドは、それらの代謝安定性
および生物学的活性をともに促進する分子内ジスルフィ
ド結合を含有する。

本発明の化合物は式（Ｉ）および（II）： Ｘ−（Ａ）_m−Ｂ−GLY−Asp−（Ｃ）_n−Ｙ ［式中、ＡはArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、A
la、Gly、His、Abuまたはそれらのα−Ｒ′置換誘導
体、あるいはPro; ＢはHArg、（Me₂）Arg、（Et₂）ArgまたはArg、HAr
g、（Me₂）Arg、（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体；た
だし、ｍが１の場合、ＢはArgであってもよい； ＣはTyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPhe、P
hg、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Thr、Cy
s、（Alk）Cys、Pen、（Alk）Pen、Ala、Val、Nva、Me
t、Leu、Ile、NleまたはNalのＤまたはＬアミノ酸； ＷはハロゲンまたはAlk; ＹはNR₁Ｒ₂またはOR₃； Ｒ₁およびＲ₂は、各々、独立してＨ、Alkまたは（C
H₂）_pPh; Ｒ₃はAlk、（CH₂）_pPhあるいは、ＢがHArg、（Me₂）A
rg、（Et₂）Arg、またはArg、HArg、（Me₂）Argもしく
は（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体である場合はH; ＸはＲ₄Ｒ₅N; Ｒ₄はＨまたはAlk; Ｒ₅はＨまたはAlk、HCO、AlkCO、PhCH₂またはPh（C
H₂）_qCO; Ｒ′はAlkまたはPhCH₂； ｑ、ｍおよびｎは０または1;および ｐは０、１、２または３を意味する］ のトリ−、テトラ−、ペンタ−、ヘキサ−およびヘプタ
ペプチドまたはその医薬上許容される塩である。

適当には、ＡはGlyまたはArgであり、ｍが１である場
合、ｎは適当には０である。

Ｂは適当にはHArgもしくはHArgのα−Ｒ′置換誘導体
である。Ｂは好ましくは、MeArgである。

Ｃは適当にはSer、（Me）Ser、Thr、Tyr、Phe、Valま
たはNalである。ｎが１である場合、ｍは適当には０で
ある。

また、本発明の化合物は式（II）： ［式中、Ａ′はArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、A
la、Gly、His、Abu、Lysまたはそれらのα−Ｒ′置換誘
導体、あるいはProから選択されるＤ−またはＬ−アミ
ノ酸； Ｂ′はArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂Arg、Lysまたは
それらのα−Ｒ′置換誘導体より選択されるＤ−または
Ｌ−アミノ酸； Ｃ′はTyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPh
e、Phg、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Th
r、（Al）Cys、（Alk）Pen、Ala、Val、Nva、Met、Le
u、Ile、NleまたはNal、あるいはそれらのα−Ｒ′置換
誘導体のＤまたはＬアミノ酸； ＷはハロゲンまたはAlk; ＹはNR₁Ｒ₂またはOR₃； Ｒ₁およびＲ₂は、各々、独立してＨ、Alkまたは（C
H₂）_pPh; Ｒ₃は（Alk）、（CH₂）_pPh、あるいはＢがHArg、（Me
₂）Arg、（Et₂）Arg、またはArg、HArg、（Me₂）Argも
しくは（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体である場合はH; ＸはＲ₄Ｒ₅ＮまたはH; Ｒ₄はＨまたはAlk; Ｒ₅はＨ、Alk、HCO、AlkCO、PhCH₂またはPh（CH₂）_qC
O; Ｒ′はAlkまたはPhCH₂； Ｚ₁はCys、PenまたはAPmpのＤ−またはＬ−異性体； Ｚ₂はCys、PenまたはAPmpのＤ−またはＬ−異性体； ｑ、ｍおよびｎは独立して０または1;およびｐは０、
１、２または３を意味する］ のペンタ−、ヘキサまたはヘプタペプチドまたはその医
薬上許容される塩である。

適当には、Ａ′はGlyまたはArgであり、ｍが１である
場合、ｎは好ましくは０である。

Ｂ′は適当にはHArgまたはArgもしくはHArgのα−
Ｒ′置換誘導体である。Ｂは好ましくはMeArgである。

Ｃ′は適当にはSer、（Me）Ser、Thr、Tyr、Pheまた
はNalである。ｎが１である場合、ｍは適当には０であ
る。

Ｚ₂は好ましくはAPmp、CysまたはPenのＬ−異性体で
ある。

好ましくはｍおよびｎはともに０である。

本明細書中で描く式中のＸの意味はペプチドのアミノ
末端を示すことを意図し、それにより約束から区別す
る。ＸがＨである場合、Ｚ₁はデスアミノ酸であること
は明らかであろう。例えば、Ｚ₁がCysであってＸがＨで
ある場合、残基は３−メルカプトプロパン酸であるデス
−アミノシステインに対応する。

本発明の特別の化合物は:N^α−Ac−シクロ（S,S）Cys
−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−（D,
L）APmp−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Ser−
Cys−NH₂； シクロ（S,S）Mpr−Arg−Gly−Asp−Ser−Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Ser
−Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−（M
e）Ser−Cys−NH₂； シクロ（S,S）Mpr−MeArg−Gly−Asp−Ser−Cys−N
H₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Cys
−NH₂； シクロ（S,S）Mpr−MeArg−Gly−Asp−Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Pen−
NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Ｄ−P
en−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Lys−Gly−Asp−Pen−
NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−HArg−Gly−Asp−Pen
−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Pen
−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Pen−
NHEt; Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−Arg−Gly−Asp−P
en−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Tyr
−Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Pen−MeArg−Gly−Asp−Pen
−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Pen−Arg−Gly−Asp−Cys−
NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−Arg−Gly−Asp−S
er−Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Sar−Arg−Gly−Asp−
Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Cys−
NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−（Et₂）−Gly−A
sp−Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−MeArg−Gly−Asp
−Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Tyr−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Val−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Nal−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Arg−Gly−Asp−Phe−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−NH−CH₂−CH₂−Ｃ₆Ｈ₅； Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Phe−NH₂； Ｎ^α−Ac−HArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ser−NHEt; Ｎ^α−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−ホルミル−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂；また
は Gly−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； である。

当該分野で通常用いる命名法を本明細書中でペプチド
を記載するのに用いる。

通常の表示法に従い、アミノ末端は左側にあり、カル
ボキシ末端は右側にある。特に断りのない限り、すべて
のカイラルなアミノ酸（AA）はＬ−絶対立体配置である
とみなされる。PenはＬ−ペニシラミンまたはβ，βジ
メチルシステイン、APmpは２−アミノ−3,3−シクロペ
ンタメチレン−３−メルカプトプロピオン酸、Mpaは３
−メルカプトプロピオン酸、Pmpは3,3−シクロペンタメ
チレン−３−メルカプトプロピオン酸、Mdpは３−メル
カプト−３−メチルブタン酸、HArgはホモアルギニン、
（Me₂）ArgはＮ′,N″−ジメチルアルギニン、（Et₂）A
rgはＮ′,N″−ジエチルアルギニン、Nvaはノルバリ
ン、Nleはノルロイシン、α−MeAspはＮ^α−メチルアス
パラギン酸、Nalはベータ−２−ナフチルアラニン、Phg
はフェニルグリシン、HPheはホモフェニルアラニン、Tr
pはトリプトファン、Abuは２−アミノ酪酸、（Alk）Tyr
はＯ−Ｃ_1-4アルキル−チロシン、（Alk）SerはＯ−Ｃ
_1-4アルキル−セリン、（Alk）ThrはＯ−Ｃ_1-4アルキル
−スレオニン、（Alk）CysはＳ−Ｃ_1-4アルキル−シス
テイン、（Al）PenはＳ−Ｃ_1-4アルキル−ペニシラミ
ン、（４′Ｗ）Pheはフェニル環の４位がＷによって置
換されたフェニルアラニン、Bocはｔ−ブチルオキシカ
ルボニル基、Fmocはフルオレニルメトキシカルボニル
基、Phはフェニル基、Cbzはカルボベンジルオキシ基、B
rZはｏ−ブロモベンジルオキシカルボニル基、Clzはｏ
−クロロベンジルオキシカルボニル基、Bzlはベンジル
基、４−MBzlは４−メチルベンジル基、Acはアセチル、
AlkはＣ_1-4アルキル、Phはフェニル、Chxはシクロヘキ
シル、DCCはジシクロヘキシルカルボジイミド、DMAPは
ジメチルアミノピリジン、HPBTは１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾール、THFはテトラヒドロフラン、DMFはジメチ
ルホルムアミド、HFはフッ化水素酸およびTFAはトリフ
ルオロ酢酸をいう。本明細書中で適用するＣ_1-4アルキ
ルはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル
およびイソブチルを包含させる意図である。

（α−Ｒ′）AAで示すことができる本発明のアミノ酸
のα−Ｒ′置換誘導体は、Ｒ′はAlkまたはベンジルで
あるＲ′によってα−アミノ基がモノ置換されたアミノ
酸を示す。Ｒ′は好ましくはメチルである。各々（α−
Me）Argおよび（α−Me）GlyであるＮ^α−メチルアルギ
ニンおよびＮ^α−メチルグリシンは前の通常の表記法に
従いMeArgおよびSar（サルコシン）とここで示すことも
できる。すべての他のＮ−α−置換アミノ酸はこれらの
表示の中に記号α−をもつ。かくして、Tyr、Ser、Th
r、CysまたはPenのごときメルカプタン、グアニジノま
たはヒドロキシル基についてアルキル化され得るアミノ
酸はこの表示がないことによって区別される。かくし
て、（α−Me）SerはＮ^α−メチルセリンであり、（M
e）SerはＯ−メチルセリンであり、（α−Me,Et）Serは
Ｎ^α−メチル、Ｏ−エチルセリンであって（α−Me,E
t₂）ArgはＮ^α−メチル−Ｎ′,N″−ジエチルアルギニ
ンである。

当該分野で公知の溶液法も好適に用いることができる
が、ペプチドは好ましくはメリーフィールド（Merrifie
ld）（ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサ
イェティ（J.Am.Chem.Soc.）、85、2149、（1964））の
固相法によって調製する。ジ−、トリ−、テトラ−、ま
たはペンタ−ペプチドフラグメントが固相合成によって
調製でき、溶液合成によってカップリングまたはさらに
修飾できるコンバージェント（convergent）合成におけ
るごとく、固相および溶液合成の組合せを用いることも
できる。一般に、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケ
ミストリー（J.Med.Chem.）、29、984（1986）およびジ
ャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（J.Med.
Chem.）、30、2291（1987）においてアリら（Ali et a
l.）によって記載されているペプチド合成法を用いて本
発明のほとんどのペプチドを合成した。

各アミノ酸またはペプチドは、当該分野で公知のごと
く、適当に保護する。例えば、Boc、CbzまたはFmoc基を
アミノ基、特にα−アミノ基の保護に用いることができ
る。該Boc基は一般にα−アミノ基の保護に好ましい。
ベンジル基または適当に置換されたベンジル基はシステ
イン、または他のチオール含有アミノ酸のメルカプト
基；あるいはセリンまたはスレオニンのヒドロキシルを
保護するのに用いる。トシル基をHisのイミダゾリル基
の保護に、およびトシルまたはニトロ基をArgのグアニ
ジノ窒素の保護に用いることができる。適当に置換され
たカルボベンジルオキシ基またはベンジル基はTyr、Ser
またはThrのヒドロキシル基、あるいはリジンのε−ア
ミノ基の保護に用いることができる。フタルアミド基の
リジンのε−アミノ基の保護に用いることもできる。カ
ルボベンジルオキシまたはベンジル保護基の適当な置換
はクロロ、ブロモ、ニトロまたはメチルでのオルトおよ
び／またはパラ置換であり、保護基の反応性を修飾する
のに用いる。システインおよび他の硫黄含有アミノ酸も
チオアルキルまたはチオアリール基でジスルフィドを形
成することによって保護することができる。Boc基を除
き、保護基は、最も便宜には、温和な酸処理によって除
去されないものである。これらの保護基は当該分野で公
知のごとく、接触水素化、液体アンモニア中のナトリウ
ムまたはHF処理によって除去する。

固相法を用いる場合、ペプチドは、ペプチドのカルボ
キシ末端から出発し、ペプチドのアミノ末端に向けて順
次組み立てる。固相合成は、一般に米国特許第4244946
号に記載されているごとく、保護アミノ酸のＣ末端を共
有結合によってベンズヒドリルアミン樹脂（BHA）、メ
チルベンズヒドリルアミン樹脂（MBHA）またはクロロメ
チル樹脂（CMR）のごとき適当な樹脂に付着させること
によって開始される。生成物ペプチドのカルボキシ末端
がカルボキシアミドとなる場合、BHAまたはMBHA支持体
樹脂を用いる。カルボキシアミドまたはエステルを生成
するのに用いることもできるが、生成物ペプチドのカル
ボキシ末端がカルボキシル基となる場合、CMR支持体を
一般に用いる。

第１の保護アミノ酸（AA）が所望の樹脂にカップリン
グされたならば、温和な酸処理によってアミノ基を加水
分解し、第２の保護AAの遊離カルボキシルをこのアミノ
基にカップリングする。中間体を単離することなく、所
望のペプチドが形成されるまで、この工程を引き続いて
行う。次いで、完成されたペプチドを、いずれかの順
で、担持樹脂から非ブロック化（deblock）および／ま
たは切断できる。

水性アルコール中、CMRに支持されたペプチドをアル
カリで処理し、樹脂からペプチドが切断され、カルボン
酸としてのカルボキシ末端アミノ酸が生成する。アルコ
ール性溶媒中、CMRに支持されたペプチドをアンモニア
またはアルキルアミンで処理し、カルボキシ末端にカル
ボキシアミドまたはアルキルカルボキシアミドが生成す
る。

エステルが所望される場合、トリエチルアミンの存在
下でメチル、エチル、プロピル、ブチルまたはベンジル
アルコールのごとき適当なアルコールでCMR樹脂を処理
してペプチドを樹脂から切断し、エステルを直接生成す
ることができる。

本発明のペプチドのエステルはカルボン酸前駆体から
常法によって調製するこもできる。典型的には、酸触媒
の存在下でカルボン酸をアルコールで処理する。別法と
して、カルボン酸を酸ハロゲン化物のごとき活性化され
たアシル中間体に変換し、好ましくは塩基の存在下でア
ルコールで処理する。

アスパラギン酸の側鎖カルボキシル基をエステル化す
ることなくペプチドのＣ−末端エステルを生成する方法
は、少しながらめんどうだが、ペプチド合成分野の当業
者によく知られている。例えば、Ｃ末端アミノ酸、また
はジペプチドのエステルで開始し、溶液相合成を経て適
当に側鎖が保護されたアスパラギン酸残基にカップリン
グする。次いで、側鎖カルボキシル基を選択的に脱保護
し、クロロメチル樹脂（CMR）にカップリングする。ア
ミノ基を遊離し、固相ペプチド合成法を用いる。HFを用
いる続いての樹脂からの切断により、所望の側鎖カルボ
ン酸を生じ、一方、ペプチドのカルボキシ末端はエステ
ルのままである。同様にして、適当に保護されたアミノ
酸またはジペプチドのアルキルアミドで合成配列を開始
する場合、ペプチドの対応するＣ−末端アルキルアミド
が得られる。

かかる工程でエステルおよび置換アミドを生成するに
は、アスパラギン酸の４−カルボキシル基についての適
当な保護基はベンジルエステルおよびハロゲンまたはア
ルキル−置換ベンジルエステルである。アミノ酸がBoc
基で保護されている場合、ベンジルエステル保護基を水
素化によって選択的に除去し、CMR支持体にカップリン
グすることができる。

樹脂への付着に先立ってアスパラギン酸にカップリン
グされるべきアミノ酸（またはジペプチド）に（ヒドロ
キシル、チオールまたはアミノ基についてのごとく）ベ
ンジルまたは置換ベンジル保護基がある場合、アスパラ
ギン酸の側鎖カルボキシルを保護するにｔ−ブチルエス
テルまたは他の酸で化学変化を起こしやすい基が適当で
ある。この場合、アスパラギン酸のアミノ基はフルオレ
ニルメトキシカルボニル基（Fmoc）のごとき塩基で化学
変化を起こしやすい基によって保護する。アスパラギン
酸のアミノ酸（またはジペプチド）への溶液相カップリ
ングの後、温和な酸加水分解によってｔ−ブチルエステ
ルの選択的脱保護が達成され、常法によって側鎖カルボ
キシルを樹脂にカップリングさせる。次いで、引き続い
ての固相ペプチド合成のために、フルオレニルメトキシ
カルボニル基を温和な塩基処理によって除去する。

ペプチドを支持体樹脂から切断する好ましい方法は、
アニソールまたはジメトキシベンゼンのごとき適当なカ
チオンスカベンジャーの存在下で無水HFで樹脂支持ペプ
チドを処理することである。この方法により、チオアル
キル基保護硫黄を除き、すべての保護基が同時に除去さ
れ、ペプチドが樹脂から切断される。このようにしてCM
Rから加水分解されたペプチドはカルボン酸であり、BHA
樹脂から切断されるものはカルボキシアミドとして得ら
れる。

ペプチドの末端アミノ基の修飾は当該分野で一般に公
知のごとくアルキル化またはアセチル化によって達成さ
れる。これらの修飾はペプチドへの取り込み前にアミノ
酸に対して行うことができるか、または合成され、末端
アミノ基が遊離された後であるが保護基が除去される前
のペプチドに対して行うことができる。

典型的には、アセチル化は第三級アミンの存在下で対
応するアルキル酸のアシルハロゲン化物または無水物を
用い、遊離アミノ基に対して行う。モノ−アルキル化
は、最も便宜には、水素化シアノホウ素ナトリウムもし
くはカリウムのごとき温和な還元剤の存在下で適当な脂
肪族アルデヒドまたはケトンでアミノ基を還元的にアル
キル化することによって行う。ジアルキル化は、塩基の
存在下で、過剰のアルキルハロゲン化物でアミノ基を処
理することによって行うことができる。

ペプチドの溶液合成は、アミド結合を形成するのに用
いる通常の方法を用いて行う。典型的には、所望によ
り、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（HOBT）および
ジメチルアミノピリジン（DMAP）のごとき触媒の存在下
で、N,N′ジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）のご
とき適当なカルボジイミドカップリング剤を用い、遊離
カルボキシル基を有する保護Boc−アミノ酸を遊離する
アミノ基を有する保護アミノ酸にカップリングする。保
護Boc−アミノ酸の遊離カルボキシルの活性化したエス
テル、無水物または酸ハロゲン化物の形成、および所望
により、塩基の存在下での保護アミノ酸の遊離アミンと
の引き続いての反応のような他の方法も適当である。例
えば、Ｎ−メチルモルホリン、DMAPまたはトリアルキル
アミンのごとき塩基の存在下、塩化メチレンまたはテト
ラヒドロフラン（THF）のごとき無水溶媒中で保護Boc−
アミノ酸またはペプチドをクロロギ酸イソブチルで処理
して「活性化された無水物」を得、これを引き続いて第
２の保護アミノ酸またはペプチドの遊離アミンと反応さ
せる。これらの方法によって形成されたペプチドは、通
常の方法を用い、アミノまたはカルボキシ末端におい
て、選択的に脱保護され、同様の方法を用いて他のペプ
チドまたはアミノ酸にカップリングさせることができ
る。

Arg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、Ala、Gly、Hi
s、Abu、Tyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPh
e、Phe、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Th
r、Cys、（Alk）Cys、Pen、（Alk）Pen、Ala、Val、Nv
a、Met、Leu、Ile、NleおよびNalの誘導体を包含する本
発明のアミノ酸のα−Ｒ′置換誘導体は化学技術で通常
の方法によって調製される。Ｒ′置換基は前記で定義し
たごときAlk、またはベンジルであり得る。これらの誘
導体を調製する代表的な方法は米国特許第4687758号；
チォンら（Cheung et al.）、カナディアン・ジャーナ
ル・オブ・ケミストリー（Can.J.Chem.）、55、906（19
77）；フライディンガーら（Freidinger et al.）、ジ
ャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Org.
Chem.）、48、77（1982）；およびシューマンら（Shuma
n et al.）、ペプタイズ（Peptides）：プロシーディン
グズ・オブ・ザ・セブンス・アメリカン・ペプタイド・
シンポジウム（Proceedings of the 7th American Pept
ide Symposium）、リッチ・デイ（Rich D.）、グロス・
イー（Gross E.）編、ピエス・ケミカル・カンパニー
（Pierce Chemical Co.）、ロッフォード、イリノイ
州、617（1981）に開示されている。典型的には、水素
化ナトリウムまたは水素化カリウムのごとき塩基の存在
下で、Cbz−またはBoc−アミノ酸のDMF/THF中溶液をヨ
ウ化メチルもしくはエチルのごとき適当なアルキルハロ
ゲン化物と縮合させる。所望により、水素化カリウムと
ともに18−クラウン−６のごときクラウンエーテルを添
加して該反応を容易とすることもできる。一般的には、
この方法および続く方法においては、アミノ酸がヒドロ
キシル、メルカプタン、アミノ、グアニジノ、インドリ
ルまたはイミダゾリル基のごとき官能基をもつ場合、こ
れらの基を前記したごとくに保護する。かくして、０℃
にて、Boc−Tyr（Bzl）をTHF/DMF溶液中の水素化ナトリ
ウムもしくはヨウ化メチルで処理し、室温で24時間攪拌
してBoc−（α−Me）Tyr（Bzl）を得る。

別法として、水素化シアノホウ素ナトリウムのごとき
還元剤の存在下で、アミノ酸の遊離アミンをアセトアル
デヒドまたはベンズアルデヒドのごとき適当なアルデヒ
ドと反応させてモノ−アルキル化する。この方法は、α
−ベンジルアミノ酸を調製するのに特に有用である。ま
た、α−ベンジル化アミノ酸を中間体として用いてα−
メチルアミノ酸を調製することもできる。例えば、1.）
メタノール溶液中でArg（Tos）をベンズアルデヒドおよ
び水素化シアノホウ素ナトリウムと反応させて（α−Bz
l）Arg（Tos）を得、2.）ベンジル化生成物をホルムア
ルデヒド／ギ酸溶液で還元して（α−Bzl,α−Me）Arg
（Tos）を得；次いで3.）接触水素化（氷酢酸/HC中の５
％Pd/C）によってベンジル基を遊離してMeArg（Tos）を
得ることによる３工程にてα−メチルアルギニンを調製
する。

Fmoc−またはCbz−アミノ酸から調製したオキサゾリ
ジノンの還元によってアミノ酸のα−Ｒ′置換誘導体を
調製することもできる。典型的には、トルエン溶液中、
トルエンスルホン酸の存在下で、アセトアルデヒドまた
はベンズアルデヒドのごとき適当なアルデヒドともにFm
oc−またはCbz−アミノ酸を加熱する。クロロホルム溶
液中でのトリエチルシランおよびTFAを用いてこのオキ
サゾリジノンの還元により、Cbz−またはFmoc−α置換
アミノ酸が直接に得られる。当業者ならば、ホルムアル
デヒドを用いる場合、オキサゾリジノンは２位が置換さ
れず、α−メチルアミノ酸が生成することを認識するで
あろう。

本発明の化合物の好ましい群は式（II）で示されるも
のである。これらの化合物は、ジスルフィド結合に参加
して環状構造を形成するチオール基を有する２つのアミ
ノ酸をもつ。かかる構造は、前記したごとく所望により
保護されていてもよいいずれの化学的反応性中心を有す
る対応する線状ペプチド（III）： ［式中、Ａ′、Ｂ′、Asp、Ｃ′、Ｚ₁、Ｚ₂、ｍ、ｎ、
ｐ、ｑ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、Ｒ′、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄および
Ｒ₅は前記で定義したに同じ］ から製造する。Ｔ¹およびＴ²はチオアルキル、チオアリ
ール基、置換ベンジル基または水素のごとき置換可能な
基である。適当な置換可能な基の例は水素、チオエチ
ル、ベンジルおよび４−メチルベンジル基である。

ジスルフィド結合の形成は２つの一般的な方法のうち
いずれか１つで達成できる。線状ペプチドの硫黄含有ア
ミノ酸がモノメルカプタンの形成が可能なように異なっ
て保護されている場合、第２の硫黄含有アミノ酸の保護
基の塩基触媒求核置換反応によって環化を行うことがで
きる。置換可能な保護基として特に有用な基はチオアル
キルまたはチオアリール基である。この方法の例は、チ
オエチル基による１の硫黄含有アミノ酸の保護、および
置換ベンジル基による第２の保護である。HFによるかか
るペプチドの脱保護により、ベンジル基が１のアミノ酸
から除去され、一方、第２のものはエチルジスルフィド
として保護されたままである。pH約７〜８にて希薄溶液
中のこのメルカプト／ジスルフィドを攪拌して、チオエ
チル基の置換および線状ペプチドの環化が行われる。

式（III）の対応する線状ペプチドが完全に脱保護さ
れ、ジメルカプタンとして生成すると、ジメルカプタン
をジスルフィドに変換できる当該分野で公知のいずれの
酸化剤も用いることができる。かかる剤の例はアルカリ
金属のフェリシアニド、特にカリウムまたはナトリウム
のフェリシアニド、酸素ガス、ジョードメタンまたはヨ
ウ素である。反応は、高希薄下、約０ないし40℃の温度
で、水性メタノールまたは水のごとき適当な不活性溶媒
中で行う。pHは、通常、約７ないし約８に維持する。環
化は、まだ指示体樹脂に付着したペプチドまたは他の官
能基がまだ保護されているペプチドに対して行うことが
できるが、脱保護した遊離ペプチドに対して行うのが好
ましい。

ペプチドの酸付加塩は、親化合物および塩酸、臭化水
素酸、硫酸、リン酸、酢酸、マレイン酸、コハク酸また
はメタンスルホン酸のごとき過剰の酸から、適当な溶媒
中、標準的な方法で調製される。酢酸塩形が特に有用で
ある。ある種の化合物は許容され得る内塩または双生イ
オンを形成する。カチオン塩は、適当なカチオンを含有
する水酸化物、炭酸塩またはアルコキシドのごとき過剰
のアルカリ性剤で親化合物を処理することによって調製
される。Na⁺、Ｋ⁺、Ca⁺⁺およびNH₄ ⁺のごときカチオンは
医薬上許容される塩に含まれるカチオンの例である。

本発明は式（Ｉ）または（II）のペプチドおよび医薬
上許容される担体よりなることを特徴とする抗−線維症
組成物を提供するものである。前記したごとく調製した
ペプチドおよび他のペプチドまたはフィブロネクチン、
フィブリノーゲンまたはvon Willebrand因子のポリリペ
プチド誘導体の医薬組成物は非経口投与用として溶液ま
た凍結乾燥粉として処方できる。粉末は、使用に先立
ち、適当な希釈剤または他の医薬上許容される担体の添
加によって復元できる。液体処方は一般に緩衝液、等張
液、水性溶液である。適当な希釈剤の例は、生理食塩
水、標準的な５％デキストロースの水または酢酸ナトリ
ウムもしくはアンモニウム緩衝液中溶液である。かかる
処方は非経口投与には特に適当であるが、経口投与にも
用いることができるか、あるいは吹入用に計量用量の吸
入器または噴霧器中に含有させることができる。ポリビ
ニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、ア
カシア、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化
ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムのごとき賦形剤を
添加するのが望ましい。

別法として、これらのペプチドは経口投与用にカプセ
ル化し、錠剤化し、またはエマルジョンまたはシロップ
に調製することができる。医薬上許容される個体または
液体担体を添加して組成物を増強または安定化するか、
あるいは組成物の調製を容易とすることができる。固体
担体はスターチ、ラクトース、硫酸カルシウム二水和
物、白土、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン
酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天またはゼラチン
を包含する。液体担体はシロップ、落花生油、オリーブ
油、食塩水または水を包含する。また、担体にはグリセ
リルモノステアレートまたはグリセリルジステアレート
のごとき持続放出性物質を単独またはワックスとともに
含ませることもできる。個体担体の量は変更できるが、
好ましくは用量単位当たり約20mgないし約1gである。医
薬製剤は、錠剤形態の場合、粉砕、混合、顆粒化、およ
び要すれば打錠；またはハードゼラチンカプセル形態の
場合、粉砕、混合および充填を含む通常の製剤技術によ
って製造される。液体担体を用いる場合、製剤はシロッ
プ、エリキシル剤エマルジョンまたは水性もしくは非−
水性懸濁液の形態とする。かかる液体処方は直接に経口
投与するか、またはソフトゼラチンカプセルに充填でき
る。

バッカル投与には、本発明のペプチドをカカオバタ
ー、グリセリン、ゼラチンまたはポリエチレングリコー
ルのごとき賦形剤と組み合せ、坐薬に成形することもで
きる。

また、本発明は、有効量の抗線維症ペプチドおよび医
薬上許容される担体よりなることを特徴とするそれを必
要とする哺乳動物、特にヒトにおいて血小板凝集および
血餅形成を抑制する方法を提供するものである。かかる
治療の適応症は心筋梗塞、深静脈血栓症、肺塞栓症、解
剖アヌリズム（anurysm）、発作および他の梗塞関連障
害を包含する。散在性脈管内凝固（DIC）、敗血症、外
科的または感染性ショック、術後および分娩後外傷、心
肺バイパス外科手術、不適合血液輸血、常位胎盤早期剥
離、血栓性血小板減少性紫斑病（TTP）、ヘビ毒および
免疫病のごとき高凝集性の慢性または急性状態がかかる
治療に適用できる。抗線維症ペプチドは、血漿中の薬剤
濃度が血小板凝集を抑制するのに十分となるように経口
または非経口いずれかで患者に投与する。該ペプチドを
含有する医薬組成物は患者の症状に応じて約0.2ないし
約50mg/kgの間の用量で投与する。急性治療について
は、非経口投与が好ましい。高凝集性の継続的状態につ
いては、筋肉内ボーラス注射でも十分であるが、水また
は生理食塩水中の５％デキストロース中のペプチドを静
脈内注入するのが最も効果的である。

血小板凝集性の慢性であるが非臨界的な状態について
は、カプセル剤または錠剤の経口投与あるいはボーラス
筋肉内注射が適当である。ペプチドは約0.4ないし約50m
g/kgのレベルにて毎日１〜４回投与して１日に合計約0.
4ないし約200mg/kg/日を達成する。

さらに、本発明は、有効量の抗線維症ペプチドおよび
線維素溶解剤をそれを必要とする哺乳動物体内に投与す
ることを特徴とする線維素溶解治療後の動脈もしくは静
脈の再閉塞を抑制する方法を提供するものである。線維
素溶解治療で抗線維症ペプチドを投与すると再閉塞を完
全に防止するか、または再閉塞までの時間を延長するこ
とが判明した。線維素溶解治療後の血管の再閉塞を抑制
する方法で用いる場合、本発明は、前記したペプチドの
みならず、アミノ酸配列−RGD−を有し、かつGPIIb-III
a受容体に結合できる他のペプチド、ポリペプチドなら
びにペプチドのフラグメントまたは誘導体を含むことを
意図する。かかる抗線維症化合物の例はフィブロネクチ
ン、フィブリノーゲンおよびvon Willebrand因子の誘導
体およびフラグメントである。これらのペプチド／ポリ
ペプチドは、組換えDNA法あるいは個体状態ペプチド合
成または通常の溶液合成または溶液合成によって当該分
野で公知のごとくに製造できる。フィブロネクチンのフ
ラグメントの調製法は開示されている（ルオスラッティ
ら（Ruoslahti et al.）、WO 84/00540;ピエスシュバシ
ェールら（Pierschbacher wt al.）、米国特許第458988
1号；およびルオスラッティら（Ruoslahti et al.）、
米国特許第4661111号）。このようにして製造されたペ
プチドはさらに、アミデート化、エステル化、アルキル
化、アセチル化または他の天然もしくは非天然アミノ酸
へのカップリングによって誘導体化できる。このように
して製造されたペプチド／ポリペプチドは非経口または
経口投与について前記したごとくに処方できる。

本発明の意味で用いる場合、線維素溶解剤なる語は、
天然または合成品を問わず、フィブリン血塊の溶解を直
接または間接に引き起こすいずれの化合物も意味するこ
とを意図する。プラスミノーゲンアクチベーターは線維
素溶解剤のよく知られた群である。有用なプラスミノー
ゲンアクチベーターは、例えば、ウロキナーゼ（UK）、
プロ−ウロキナーゼ（pUK）、ストレプトキナーゼ（S
K）、組織プラスミノーゲンアクチベーター（tPA）およ
び１またはそれ以上のアミノ酸が添加され、欠失されま
たは置換されているか、あるいは１のプラスミノーゲン
アクチベーター、例えばtPAの活性部位をもう１つのプ
ラスミノーゲンアクチベーターのフィブリン結合ドメイ
ン、例えばウロキナーゼからのクリングル（Kringle）
領域と、または抗−フィブリンIgGのFabフラグメントの
ごときもう１つのフィブリン結合分子と組み合わせる等
によって１もしくはそれ以上のまたは機能性のドメイン
が添加され、欠失されまたは変更されている変異体のご
とく、プラスミノーゲンアクチベーター活性を保持して
いるその突然変異体または変異体を包含する。他の例示
的変異体は１またはそれ以上のグリコシル化部位が変更
されているtPA分子を包含する。プラスミノーゲンアク
チベーターのうち好ましいものは、一次アミノ酸配列
が、プラスミノーゲンアクチベーターの血清半減期を増
加させるように成長因子ドメインにおいて変更されてい
るtPAの変異体である。tPA成長因子変異体は、例えば、
ロビンソンら（Robinson et al.）、EP−Ａ−297589号
およびブラウネら（Browne et al.）、EP−Ａ−240334
号によって記載され、スミスクライン・ベックマン・コ
ーポレーション（Smith Kline Beckman Corporation）
ファイル番号SKB14422を有する、ブリティッシュ・バイ
オテクノロジー・リミテッド（British Biotecnology L
td.）が1988年６月24日に出願した英国特許出願に記載
されている。線維素溶解剤は天然源から単離できるが、
通常、伝統的な方法または遺伝子工学によって製造され
る。

tPA、SK、UKおよびpUKの有用な処方は、例えば、米国
同時継続特許出願890432号、西独特許出願3032606号、
欧州特許出願83103629.8号および米国特許第4568543号
に開示されている。典型的には、線維素溶解剤はpH3.5
〜5.5の酢酸ナトリウムもしくはアンモニウムまたはア
ジピン酸塩緩衝のごとき水性溶液、緩衝溶液、等張溶液
に処方できる。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒド
ロキシセルロース、アカシア、ポリエチレン、グリコー
ル、マンニトールおよび塩化ナトリウムのごとき賦形剤
をさらに添加することもできる。かかる組成物は凍結乾
燥できる。

医薬組成物は同一容器中に抗−線維症および線維素溶
解剤の両方で処方してもよいが、異なる容器中の処方が
好ましい。両剤を溶液形態とする場合、同時投与用の注
入／注射系に、またはタンデム配置にそれらを含有させ
ることができる。

かかる治療の適応症は心筋梗塞、深静脈血栓症、肺塞
栓症、発作および他の梗塞関連障害を包含する。抗−線
維症剤はtPAまたは他の線維素溶解剤の非経口投与に先
立ち、それと同時に、またはそれより後に投与する。治
療後再閉塞を最大限に抑制するには、再灌流が確立され
た後、抗−線維症剤での治療を十分な時間継続するのが
望ましい。tPA、SK、UKまたはpUKの効果的な用量は0.5
ないし5mg/kgであり、抗−線維症ペプチドの効果的な用
量は約0.1ないし25mg/kgである。

該抑制剤および線維症溶解剤を同時にまたは異時に行
う便利な投与のためには、箱、カートンまたは他の容器
のごとき単一の容器中に、各々が前記したごとき非経口
投与用の有効量の抑制剤および前記したごとき非経口投
与用の有効量のtPA、または他の線維素溶解剤を有する
個々のビン、バッグ、バイアルまたは他の容器を含めて
なるキットを調製する。かかるキットは、例えば、所望
により凍結乾燥栓としてもよい別々のまたは同一の容器
中の両医薬剤、および復元用溶液の容器よりなる得る。
この変形は、使用に先立って混合できる単一の容器の２
つのヤンバー中の復元用溶液および凍結乾燥栓を包含す
る。かかる構成により、線維素溶解剤および抗−線維症
ペプチドは２個の容器中のように別々にパックし、ある
いは粉末として一緒に凍結乾燥し、単一の容器中に入れ
ることができる。

両剤を溶液形態とする場合、それらは同時投与用の注
入／注射系に、あるいはタンデム配置で含有させること
ができる。例えば、血小板凝集抑制剤は静脈内注射形
態、あるいは第２の注入バッグ中の線維素溶解剤へチュ
ーブを介して直列に接続した注入バッグとすることがで
きる。かかる系を用い、患者は抗−線維症性抑制剤の最
初のボーラス−タイプの注射または注入、続いての線維
素溶解剤の注入を摂取することができる。

ペプチドの薬理学的活性は以下の試験によって評価し
た。

予め形成したヒト血餅の線維素溶解治療−溶解との相互
作用 ヒト血餅溶解アッセイを用いて抗−線維症ペプチドが
tPA誘発線維素溶解に与えるin vitro効果を評価する。
米国赤十字からの古いクエン酸塩加ヒト血漿を1300Xgに
て20分間回転して残存する血液細胞を除去する。血漿、
¹²⁵Ｉ−フィブリノーゲン、塩化カルシウムおよびトロ
ンビンよりなる溶液を6mm組織培養平板に添加し、37℃
にて15〜18時間インキュベートする。翌朝、各ウエルを
すすいで血餅を放出させる。血餅を、ヘパリンおよびア
ルブミンを含有するトリス緩衝生理食塩水で２回洗浄す
る。次いで、各血餅を該血餅を調製するのに用いたのと
同一の血漿1.0mlに添加する。tPAを７ないし250ng/ml
（終濃度）の濃度範囲にわたって試験管に添加する。ゆ
っくり回転しつつ試験管を37℃にて４時間イキュベート
する。該４時間の最後に、25μｌ分を取り出し、計数し
て該血餅から放出された¹²⁵Ｉを測定する。すべての試
料を三連で試験する。

この試験の結果を第１図のグラフに示す。これより、
ペプチドAc−RGDS−Ｎ₂はtPA誘発血餅溶解とは何等相互
作用がないことが示される。

血小板凝集の抑制のin vivo証明 血栓形成のin vivo抑制は、アイケンら（Aiken et a
l.）、プロスタグランジンズ（Prostaglandins）、19、
629-43（1980）に記載されている方法により、麻酔イヌ
へのペプチドの注入の全身的、血行力学効果を記録する
ことによって示される。略言すれば、小さなレクサン
（Lexan）（商品名）シリンダーを機械的に損傷させた
左回旋冠動脈あたりに置いて80-90％の固定した部分的
閉塞を生じさせた。これらの条件下で、血小板は露出さ
れた内皮下コラーゲンに粘着し、閉塞部位で凝集する。
凝集は、血栓が閉塞された血管の内腔から機械的に移動
し、冠血流が回復するまでの２〜３分間にわたる血流の
漸次の減少として評価する。実験の制御時間を通じて、
この家庭を２〜３分毎に反復する。

Ac−RGDS−NH₂を用いるかかる実験の結果を第２図
（ａ−ｃ）に示す。かくして、最上部の記録（ａ）は動
脈血圧（mmHg）を測定し、中央の記録（ｂ）は段階状冠
血流（ml/分）を記録し、最下部の記録（ｃ）は平均冠
血流を測定する。制御時間の間、流動は血餅が振り離さ
れる（SL）まで減少する（記録（ｂ）および（ｃ））。
矢印はAc−RGDS−NH₂の冠灌流の開始を示す（0.1ml/mm
にて400mm）。この灌流の結果、灌流が停止（第２の矢
印）されるまで血栓形成は完全に抑制される。灌流の停
止の結果、血栓形成が起こるに従って流動が減少する。

抗凝集活性の用量依存性は、抗−線維症ペプチドの灌
流速度を変化させた場合に平均冠血流（ml/mm）に与え
る効果を観察することによって示される。これをAc−RG
DS−NH₂について第３図（ａ−ｃ）に示す。最上部の記
録（ａ）は血栓形成の完全な抑制を示す（0.052ml/分に
おける400mM）。中央の記録（ｂ）は、血栓が振り離さ
れる（SL）に要する完全な阻止に至る時間が延長された
部分的抑制を示す（0.26ml/分における400mM）。最下部
の記録（ｃ）は血栓が振り離される（SL）に要する完全
な阻止に至る延長された時間を伴う部分的抑制を示す
（400mM、.013ml/分）。ここでも、灌流の開始および停
止は矢印で示す。

血小板凝集の抑制 まだ実験に使用されたことがない成長した雑種イヌか
ら血液を収集した（凝集を防止するためにクエン酸塩を
添加する）。血小板豊富血漿、PRPは室温で150xgにて10
分間遠心することによって調製した。かくして得た細胞
ペレットをCa²⁺なしのタイロード緩衝液（pH6.5）中で
２回洗浄し、1.8mM Ca²⁺を含有するタイロード緩衝液
（pH7.4）中に3x10⁵細胞/mlで再懸濁した。血小板凝集
のすべてのアッセイにおいて作用物質に先立つ３分前に
ペプチドを添加した。最終作用物質濃度は0.1ユニット/
mlトロンビンおよび２μM ADP（シグマ（Sigma））であ
った。凝集はクロノーロッグ・ルミー（Chrono-Log Lum
i）血小板凝集計でモニターした。作用物質添加の５分
後の光透過度を用いて、式 ％凝集＝［（90−CR）÷（90−10）］X100 に従ってパーセント凝集を計算した。ここに、CRはチャ
ートの読み、90はベースラインであって10はPRPブラン
クの読みである。IC₅₀は［凝集の％抑制］対［ペプチド
の濃度］をプロットすることによって決定した。200μ
Ｍでペプチドをアッセイに付し、連続的に２倍づつ希釈
して適当な用量応答曲線を得た。

血漿プロテアーゼに対するペプチドの安定性を評価す
るために、作用物質の添加に先立ってPRP中でペプチド
を（３分ではなく）３時間インキュベートした。

以下の表１は本発明のペプチドが血小板凝集に与える
活性を例示するものである。

次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する
が、これらに限定されるものではない。

実施例 実施例中、すべての温度は℃であり、アミノ酸分析は
ダイオネックス・オートイオン100（Dionex・aution 10
0）にて実施した。ペプチド含量についての分析はアミ
ノ酸分析に基づいている。質量スペクトルは、高速原子
衝撃を利用するVG Zab質量分析器にて測定した。薄層ク
ロマトグラフィーには、EMシリカゲル薄層（0.25mm）プ
レートを用いた。ODSは、オクタデシルシリルのシリカ
ゲルクロマトグラフィー担体をいう。溶出液成分を示す
のに用いられている略語は、B:ブタノール、A:酢酸、W:
水、E:酢酸エチル、IP:イソプロパノール、P:ピペリジ
ンおよびCA:クロロ酢酸を意味する。HPLCは、イソクラ
ティック（isocratic）または連続グラジエント法のい
ずれかにおいて、CRIB記録インテグレーターを備えたベ
ックマン344グラジエントクロマトグラフィー系（Beckm
an 344 tradient chromatography system）にて実施し
た。ペプチドの純度が示されている場合、それはHPLCク
ロマトグラムの積分値に基づいている。MeArgは、アリ
ら（Ali et al.）、米国特許第4687758号（1987）に開
示されている方法により調製した。

実施例１ Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Ser−
Cys−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
MeArg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Ser（Bzl）−Cys
（４−MBZl）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて自
動ベックマン990MP合成装置を用い、４−メチルベンズ
ヒドリルアミン樹脂上、固相法により合成した。すべて
のアミノ酸は、そのアミノ基がｔ−ブチルオキシカルボ
ニルで保護されており、アリら、ジャーナル・オブ・メ
ディシナル・ケミストリー（J.Med.Chem.）、29、984
（1986）およびジャーナル・オブ・メディシナル・ケミ
ストリー、30、2291（1987）により示されている方法に
おいて、N,N−ジシクロヘキシルカルボジイミド/1−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール（DCC/HOBt）を用い、連続
的にカップリングした。最終アミノ酸がカップリングし
た後、該ペプチドを、ジメチルホルムアミド中、無水酢
酸（10当量）とジイソプロピルエチルアミン（10当量）
の混合物を用いてアセチル化を行った。アニソール3.0m
lの存在下、０℃にて60分間、無水HF30mlを用い、側鎖
保護基の脱保護を行うと共に該ペプチドを樹脂から切断
した。真空下、HFを蒸発させた後、残渣を無水エーテル
で洗浄し、粗製ペプチドを50％酢酸で抽出し、脱イオン
水で2lに希釈した。該水溶液のpHを濃水酸化アンモニウ
ム溶液で7.5に調整した。わずかなアルカリ性条件下に
て、システインから４−MBzl基を除去することにより生
成した遊離チオールが、別のシステインのメルカプトエ
チル保護基の求核置換をもたらし、該ペプチドの分子内
環化がもたらされた。窒素またはアルゴンのような不活
性ガスを該溶液を通して吹き込み、生成したエチルメル
カプタンを排除した。環化プロセスは、24〜48時間以内
に起こる。ついで、該反応溶液を、予め水で平衡にした
オクタデシルシラン（ODS）逆相クロマトグラフィーカ
ラムに通した。該ペプチドを15％アセトニトリル/H₂Ｏ
−0.1％TFA溶液で溶出し、678.6mg（98％粗製収率）の
化合物を得た。該ペプチドを中圧ODS逆相カラムを用
い、５％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFA溶液で溶出す
るクロマトグラフィーにより精製した。表記ペプチドは
２フラクションで溶出され、98％以上の純度にて222.3m
gの化合物を得た。

物理データー M.F.:C₂₄Ｈ₄₀Ｎ₁₀Ｏ₁₀Ｓ₂ M.W.:692.231 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺693.5、（Ｍ−Ｈ）^-692.0 AAA:Asp（1.07）、Ser（1.00）、Gly（1.00）、Cys（2.
37） ペプチド含量:67.7％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.42 （B:A:W:P、15:3:8:10）、Ｒ_f＝0.36 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー（Altex Ult
rasphere ）ODS、4.5mm×25cm、220nmにて検出 イソクラティック抽出:2％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1
％TFA、Ｋ′＝0.2 段階的グラジエント溶出:H₂Ｏ−0.1％TFAで平衡した
カラムを使用、５％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFA;5
分、50％;20分、Ｋ′＝1.5 前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Thr（B
zl）を用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly
−Asp−Thr−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Ｄ−
（Me）Cysを用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg
−Gly−Asp−Ｄ−（Me）Cys−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Valを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp
−Val−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Nvaを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp
−Nva−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Phgを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp
−Phg−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−HPheを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp
−HPhe−Cys−NH₂を産生する。

実施例２ Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−（D,L）
APmp−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys−（SEt）
−Arg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−APmp（４−MBzl）−
MBHAを、0.5ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方
法にて調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチド
を、中圧ODS逆相カラムを用い、15％アセトニトリル/H₂
Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィー
により精製した。表記化合物が３フラクションにて溶出
し、96％以上の純度にて表記化合物150.9mg（収率45.8
％）を得た。

物理データー M.F.:C₂₅Ｈ₄₁Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:659.4 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺660 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.00）、Arg（0.91） ペプチド含量:60.6％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.67 （B:A:W:P、15:3:8:10）、Ｒ_f＝0.5 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック抽出:10％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.
1％TFA、Ｋ′＝3.24 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;12〜50％Ａ、Ｋ′＝1.97 前記配列中、Boc−Arg（Tos）の代わりにBos−MeArg
（Tos）を用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−
Gly−Asp（D,L）−APmp−NH₂を産生する。

実施例３ Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Ser−Cy
s−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys−（SEt）
−Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Ser（Bzl）−Cys
（４−MBzL）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実
施例１と同じ方法にて合成し、切断し、環化した。該化
合物を冷凍乾燥し、530mg（収率78％）を得た。該ペプ
チドを、中圧ODS逆相カラムを用い、１％アセトニトリ
ル/H₂Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラ
フィーにより精製した。この操作により、90％純度の表
記化合物61mgを得た。

物理データー M.F.:C₂₃Ｈ₃₈Ｎ₁₀Ｏ₁₀Ｓ₂ M.W.:678.75 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺679 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.98）、Gly（0.97）、Arg（0.
90）、Cys（1.75） ペプチド含量:86.3％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.32 （B:W:IP:CA、6:5:2:1.5:0.3）、Ｒ_f＝0.06 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム（Vydac 218TP OD
S）、4.6mm×25cm、220nmにて検出 グラジエント:A;アセトニトリル、 B;H₂Ｏ−0.1％TFA、 35分間;0.50％、Ｋ′＝6.4 前記配列中、Ser（Bzl）の代わりにBoc−Tyr（Brz）
を用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp
−Tyr−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Pheを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−P
he−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Metを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−M
et−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Nleを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−N
le−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Nalを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−N
al−Cys−NH₂を産生する。

前記配列中、Boc−Ser（Bzl）の代わりにBoc−Ileを
用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−I
le−Cys−NH₂を産生する。

実施例４ シクロ（S,S）Mpr−Arg−Gly−Asp−Ser−Cys−NH₂の調
製 保護ペプチド−樹脂中間体、Mpr（４−MBzl）−Arg
（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Ser（Bzl）−Cys（SEt）
−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ
方法にて調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチ
ドを、中圧ODS逆相カラムを用い、3.5％アセトニトリル
/H₂Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフ
ィーにより精製した。この操作により、96％純度の表記
化合物489mg（収率79％）を得た。

物理データー： M.F.:C₂₁Ｈ₃₅Ｎ₉Ｏ₉Ｓ₂ M.W.:621.208 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺622.1;（Ｍ−Ｈ）^-620.7 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.97）、Gly（1.00）、Cys（0.
57）、Arg（1.03） ペプチド含量:73.88％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.42 （B:A:W:P、15:3:8:10）、Ｒ_f＝0.41 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアーODS、4.5mm
×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:4％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝3.6 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;3〜50％Ａ、Ｋ′＝3.3 実施例５ Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Ser−
Pen−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
MeArg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Ser（Bzl）−Pen
（４−MBzl）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実
施例１と同じ方法にて調製し、切断し、環化し、単離
し、化合物542mg（収率75％）を得た。該ペプチドを、
中圧ODS逆相カラムを用い、６％アセトニトリル/H₂Ｏ−
0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによ
り精製し、94％純度の表記化合物47.5mgを得た。

物理データー： M.F.:C₂₆Ｈ₄₄Ｎ₁₀Ｏ₁₀Ｓ₂ M.W.:720.27 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺721.3 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.96）、Gly（1.00）、MeArg
（0.89） ペプチド含量:78.12％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.42 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.41 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:6％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝5.66 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝3.19 実施例６ Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−MeSer
−Cys−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
MeArg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−（α−Me）Ser（Bz
l）−Cys（４−MBzl）−MBHAを、0.5ミリモルのスケー
ルにて実施例１と同じ方法にて調製し、切断し、環化
し、単離した。該ペプチドを、10％アセトニトリル/H₂
Ｏ−0.1％TFAを用い、逆相ODSカラムから溶出し、化合
物47mgを得た。さらに、該化合物を220nmで検出するア
ルテックス・ウルトラスフェアー ODS、５μ、10mm×2
5cmのカラム上、5.5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFA
のイソクラティック条件を用い、調製HPLCにより精製
し、96％以上の純度の化合物10.6mgを得た。

物理データー： M.F.:C₂₆Ｈ₄₂Ｎ₁₀Ｏ₁₀Ｓ₂ M.W.:706.237 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺707.5 （Ｍ−Ｈ）^-709.5 AAA:Asp（1.06）、Gly（1.00） ペプチド含量:55.85％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.41 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.49 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:4.5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％
TFA、Ｋ′＝8.95 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝5.97 実施例７ シクロ（S,S）Mpr−MeArg−Gly−Asp−Ser−Cys−NH₂の
調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Mpr（４−MBzl）−MeArg
（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Ser（０−Bzl））−Cys
（SEt）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１
と同じ方法にて調製し、切断し、環化し、単離した。該
ペプチドを、５％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用
い、カラムから溶出し、表記化合物256.5mg（収率40
％）を得た。該化合物を溶出液として0.2M酢酸を用い、
セファデックス（Sephadex ）Ｇ−15ゲル濾過により精
製した。さらに、220nmで検出するアルテックス・ウル
トラスフェアー ODS、５μ、10mm×25cmのカラム上、
A:アセトニトリル、B:H₂Ｏ−0.1％TFA、10分間;5〜30％
のグラジエント条件を用いる調製HPLCにより精製し、98
％以上の純度の表記化合物を得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₇Ｎ₉Ｏ₉Ｓ₂ M.W.:635.22 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺636.2 AAA:Asp（1.06）、Ser（0.84）、Gly（1.00）、Cys（1.
48） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.39 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.49 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝5.93 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝7.86 実施例８ Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Cys−
NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（４−MBz
l）−MeArg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Cys（SEt）−M
BHAを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法
にて調製し、切断し、環化し、単離した。該化合物を、
５％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、ODS逆相カ
ラムから溶出し、表記ペプチド780mgを得た。該ペプチ
ドを溶出液として0.2M酢酸を用い、セファデックス Ｇ
−15ゲル濾過により精製した。さらに、該化合物を220n
mで検出するアルテックス・ウルトラスフェアー ODSカ
ラム、５μ、10mm×25cm上、５％アセトニトリル/H₂Ｏ
−0.1％TFAのイソクラティック条件を用い、調製HPLCに
より精製し、98％以上の純度の表記化合物を得た。

物理データー： M.F.:C₁₂Ｈ₃₅Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:605.21 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺606.2 （Ｍ−Ｈ）^-604 AAA:Asp（1.06）、Gly（1.13）、Cys（2.04） ペプチド含量:77.33％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.43 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.56 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝4.76 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝7.18 実施例９ シクロ（S,S）Mpr−MeArg−Gly−Asp−Pen−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Mpr（４−MBzl）−MeArg
（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Pen（４−MBzl）−MBHA
を、1.0nmolのスケールにて実施例１と同じ方法にて調
製し、切断し、単離した。該ペプチドを0.01MK₃Fe（C
N）₆溶液を用い環化した。該ペプチドを、10％アセトニ
トリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、ODS逆相カラム上にてク
ロマトグラフィーに付し、表記化合物365mg（収率63
％）を得た。さらに、溶出液として0.2M酢酸を用い、セ
ファデックス Ｇ−15ゲル濾過により精製し、96％以上
の純度の表記化合物を得た。

物理データー： M.F.:C₂₁Ｈ₃₆Ｎ₈Ｏ₇Ｓ₂ M.W.:576.22 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺577.2 （Ｍ−Ｈ）^-575.3 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.15）、Mpr＋Pen（1.55） ペプチド含量:65.77％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.58 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.5 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:10％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FA、Ｋ′＝6.11 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝10.93 実施例10 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Pen−NH
₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Pen（４−MBzl）−MBH
Aを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法に
て調製し、切断し、環化し、単離し、化合物400mg（収
率65％）を得た。該ペプチドを、B:A:W、4:1:5でのセフ
ァデックス Ｇ−25の分配クロマトグラフィーにより精
製し、97％以上の純度の表記化合物を得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₇Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:619.711 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺620.2 （Ｍ−Ｈ）^-618.7 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.01）、Cys（1.00）、Arg（0.
67） ペプチド含量:95.6％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.37 （B:W:I:C、65:20:15:3）、Ｒ_f＝0.097 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:6％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝2.2 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝3.7 実施例11 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Pen
−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Ｄ−Pen（４−MBzl）
−MBHAを、1.5ミリモルのスケールにて実施例１と同じ
方法にて調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチ
ドを中圧ODS逆相カラムを用い、15％メタノール/H₂Ｏ−
0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによ
り精製した。この操作により、96％以上の純度の表記化
合物50mg（収率5.4％）を得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₇Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:619.711 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺620.2 （Ｍ−Ｈ）^-618.8 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.03）、Arg（0.88） ペプチド含量:54％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.42 （B:W:I:C、65:20:15:3）、Ｒ_f＝0.11 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝2.7 グラジエント:A;アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFA、15
分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝3.3 実施例12 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Lys−Gly−Asp−Pen−NH
₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Lys−（Clz）−Gly−Asp（OBzl）−Pen（４−MBzl）−M
BHZを、2.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法
にて調製し、切断し、環化し、単離した。該粗製ペプチ
ドをアンバーライト （Amberlite）XAD−２カラムに通
し、50％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAにより溶出し
た。中圧ODS逆相カラムを用い、５％アセトニトリル/H₂
Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィー
により精製した。この操作により、97％以上の純度の表
記化合物180mg（収率15％）を得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₇Ｎ₇Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:591.698 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺592.3 （Ｍ−Ｈ）^-591 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.13）、Lys（1.09）、Cys（2.
25） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.38 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:3％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝3.5 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝2.9 実施例13 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−HArg−Gly−Asp−Pen−N
H₂の調製 pHを11に調整した2.5M NaOH溶液中、硫酸水素Ｏ−メ
チルイソ尿素290mg（1.7ミリモル）の溶液に、ペプチ
ド、Ｎ^α−Ac−Cys−Lys−Gly−Asp−Pen−NH₂100mg
（0.17ミリモル）を加えた。室温にて一夜放置した後、
該反応混合物をアンバーライト XAD−２カラムに通
し、50％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAで溶出した。
中圧ODS逆相カラムを用い、10％アセトニトリル/H₂Ｏ−
0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによ
り精製し、95％純度の表記ペプチド40mg（収率37％）を
得た。

物理データー： M.F.:C₂₃Ｈ₃₉Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:633.74 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺634.2 （Ｍ−Ｈ）^-632.3 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.16）、Cys（2.45） ペプチド含量:68.9％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.44 （B:W:I:C、65:20:15:3）、Ｒ_f＝0.19 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.5mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:4％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝2.0 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝3.2 実施例14 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Pen−
NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
MeArg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Pen（４−MBzl）−M
BHAを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法
にて調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチド
を、中圧ODS逆相カラムを用い、５％アセトニトリル/H₂
Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィー
により精製し、95％純度の表記化合物209mg（収率35
％）を得た。

物理データー： M.F.:C₂₃Ｈ₃₉Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:633.738 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺634.7 AAA:Asp（1.00）、Gly（0.98）、Cys（1.06） ペプチド含量:66％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.62 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.39 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝2.39 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;5〜50％Ａ、Ｋ′＝4.16 実施例15 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ser−NHEtの調製 ａ） Bos−Ser（Bzl）−NHEtの調製 THF50ml中、Bos−Ser（Bzl）6.0g（20.3ミリモル）お
よびＮ−メチルモルホリン2.3ml（20.9ミリモル）の溶
液に、−15℃にてクロロギ酸イソブチル2.7ml（20.8ミ
リモル）を加えた。該溶液を２〜３分間撹拌し、ガス状
エチルアミンを該混合物に通して吹き込んだ。該混合物
を−15℃にて30分間撹拌した。ついで濾過し、濾液を濃
縮乾固した。得られた残渣を酢酸エチル100mlに溶か
し、1MHCl（２×50ml）、水（50ml）、10％Na₂CO₃（２
×50ml）およびブライン（50ml）で連続的に洗浄した。
有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、濃縮
して白色粉末6.0gを得た。その構造をNMRデーターによ
り確認した。

ｂ） Boc−Asp（OBzl）−Ser（Bzl）−NHEtの調製 実施例15（ａ）の化合物のBoc保護基を、室温にて40
分間、無水TFA（10ml/g）により脱保護した。TFAを除去
し、残りのTFAを重量から測定した。実施例12（ａ）の
操作に従い、Boc−Asp（OBzl）5.82g（18ミリモル）、B
oc−Ser（Bzl）NHEt10.4g（18ミリモル）、Ｎ−メチル
モルホリン8ml（73ミリモル）およびクロロギ酸イソブ
チル2.4ml（18ミリモル）から、表記ペプチドを調製
し、ガラス状物質8.81gを得た。該構造をNMRにより確認
した。

ｃ） Boc−Asp−Ser（Bzl）−NHEtの調製 酢酸エチル100mlおよびメタノール25ml中、実施例15
（ｂ）の化合物4.0gの溶液に、５％Pd/BaSO₄2.0gを加
え、該混合物を、水素45psi下にて30分間、パール混合
器（Parr shaker）にて水素添加した。混合物を濾過
し、濾液を白色ガラス状物質3.18gに濃縮した。該構造
をNMRにより確認した。

ｄ） Boc−Asp（Ｏ−ベンジル−樹脂）−Ser（Bzl）−
NHEtの調製 実施例15（ｃ）の化合物1.31g（３ミリモル）を、塩
化メチレン中、４−ピロリジノピリジン0.15g（１ミリ
モル）およびDCC620mg（３ミリモル）を用い、ヒドロキ
シメチル樹脂（１％架橋、1g、１ミリモル）にカップリ
ングさせた。

ｅ） Ac−Arg−Gly−Asp−Ser−NHEtの調製 ペプチド−樹脂中間体、Ac−Arg−Gly−Asp（OBzl−
樹脂）−Ser（Bzl）−NHEtを、Boc−GlyおよびBoc−Arg
（Tos）を連続的にカップリングさせることにより実施
例15（ｄ）の化合物から調製し、実施例１に記載のよう
に樹脂から切断し、脱保護した。該ペプチドを、逆相OD
Sシリカララムを用い、５％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1
％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより
精製し、95％以上の純度の表記化合物173mgを得た。

物理データー： M.F.:C₁₉Ｈ₃₄Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:502.53 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺503.0 AAA:Asp（1.08）、Gly（1.00）、Ser（1.02）、Arg（1.
07） ペプチド含量:76.36％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.38 （B:W:IP:CA、6.5:2:1.5:0.3）、Ｒ_f＝0.08 2.HPLC:バイダック218TP ODS、4.6mm×25cm、220nmにて
検出 イソクラティック:5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝0.4 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、10分間;0〜10％Ａ、Ｋ′＝3.5 エチルアミンの代わりにジ−ｎ−ブチルアミンを用
い、同一操作に従って、Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ｎ
（Ｃ₄Ｈ₉）₂を得る。

実施例16 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Pen−NH
Etの調製 ａ） Boc−Pen（４−MBzl）−NHEtの調製 表記保護アミノ酸を、Boc−Pen（４−MBzl）を用い、
実施例15（ａ）と同一の方法において調製した。

ｂ） Fmoc−Asp（Ｏ−tBut）−Pen（４−MBzl）−NHEt
の調製 表記化合物を実施例15（ｂ）の操作に従って調製し
た。

ｃ） Fmoc−Asp（Ｏ−ベンジル−樹脂）−Pen（４−MB
zl）−NHEtの調製 実施例16（ｂ）の化合物のBoc保護基を、室温にて40
分間、無水TFAと共に撹拌することにより脱保護した。
該TFAを除去し、残りのTFAを重量により測定した。得ら
れた残渣をEtOAc/ヘキサンから再結晶し、TFA塩1.88g
（2.5ミリモル）を得た。ついで、塩化メチレン中、４
−ピロリジノピリジン（触媒量）およびDCC（2.5ミリモ
ル）を用い、ヒドロキシメチル樹脂（１％架橋、1.82
g、1.0ミリモル）にカップリングさせた。

ｄ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−P
en−NHEtの調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Arg（Tos）−Gly−Asp（Ｏ−Bzl−樹脂）−Pen−NHEt
を、Boc−Gly、Boc−Arg（Tos）、Boc−Cys（SEt）と連
続的に結合させ、DMF中、20％ピペリジンによりFmoc基
を脱保護した後、アセチル化することにより、実施例16
（ｃ）の化合物から調製した。ついで、該化合物を実施
例１と同じように切断し、環化し、単離した。該ペプチ
ドを中圧ODS逆相カラムを用い、15％アセトニトリル/H₂
Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィー
により精製し、97％純度のペプチド307mg（収率48％）
を得た。

物理データー： M.F.:C₂₄Ｈ₄₁Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:647.77 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺648.3; （Ｍ−Ｈ）^-646.7 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.04）、Arg（1.03） ペプチド含量:69.5％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.53 （B:W:I:C、65:20:15:3）、Ｒ_f＝0.16 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.5mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:9％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝1.6 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝3.9 実施例17 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−Arg−Gly−Asp−Pen
−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Ｄ−Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Pen（４−MBzl）
−MBHAを、1.00ミリモルのスケールにて実施例１と同じ
方法にて調製し、切断し、環化し、単離した。中圧ODS
逆相カラムを用い、６％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
Aで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製
し、95％純度の表記化合物300mg（収率50％）を得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₇Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:619.73 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺620.4 （Ｍ−Ｈ）^-619 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.03）、Cys（2.42）、Arg（1.
01） ペプチド含量:71.1％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.31 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.54 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:6％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝5.2 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;5〜50％Ａ、Ｋ′＝3.9 実施例18 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Tyr−
Cys−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
MeArg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Tyr（BrZ）−Cys
（４−MBzl）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実
施例１と同じ方法にて調製し、切断し、環化し、単離し
た。該ペプチドを、中圧ODS逆相カラムを用い、11％ア
セトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュク
ロマトグラフィーにより精製し、表記化合物350mg（収
率45％）を得た。さらに、該化合物を溶出液として0.2M
酢酸を用いるセファデックス Ｇ−15ゲル濾過により精
製し、95％純度の表記ペプチドを得た。

物理データー： M.F.:C₃₀Ｈ₄₄Ｎ₁₀Ｏ₁₀Ｓ₂ M.W.:768.27 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺769.3 （Ｍ−Ｈ）^-767.8 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.00）、Cys（1.91）、Tyr（1.
02） ペプチド含量:82.75％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.65 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.78 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:9％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝6.4 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;5〜50％Ａ、Ｋ′＝5.5 実施例19 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Pen−MeArg−Gly−Asp−Pen−
NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Pen（４−MBz
l）−MeArg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Pen（４−MBz
l）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同
じ方法にて調製し、切断し、単離した。該ペプチドを0.
01％Ｋ₃Fe（CN）₆溶液を用いて環化した。該ペプチド
を、10％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、ODS逆
相カラムから溶出し、表記化合物395mg（収率60％）を
得た。さらに、溶出液として0.2M酢酸を用いるセファデ
ックス Ｇ−15ゲル濾過により精製し、95％純度の表記
ペプチドを得た。

物理データー： M.F.:C₂₅Ｈ₄₃Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:661.27 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺662.3 （Ｍ−Ｈ）^-660.1 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.03） ペプチド含量:43.7％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.6 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.56 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:10％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FA、Ｋ′＝4.4 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;1〜50％Ａ、Ｋ′＝6.8 実施例20 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Pen−Arg−Gly−Asp−Cys−NH
₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Pen（４−MBz
l）−Arg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Cys（SEt）−MBH
Aを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法に
て調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチドを５
％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、ODS逆相カラ
ムから溶出し、表記化合物400mg（収率65％）を得た。
さらに、溶出液として0.2M酢酸を用いるセファデックス
Ｇ−15ゲル濾過により精製し、95％純度の表記ペプチ
ドを得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₇Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:619.22 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺620.2 （Ｍ−Ｈ）^-618.9 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.07）、Arg（0.85） ペプチド含量:62.4％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.61 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.69 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:3％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝8.4 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;1〜50％Ａ、Ｋ′＝5.8 実施例21 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−Arg−Gly−Asp−Ser
−Cys−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Ｄ−Arg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Ser（Bzl）−Cys
（４−MBzl）−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実
施例１と同じ方法にて調製し、切断し、環化し、単離し
た。該ペプチドを、５％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
Aを用い、カラムから溶出し、表記化合物370mg（収率55
％）を得た。さらに、溶出液として0.2M酢酸を用い、セ
ファデックス Ｇ−15ゲル濾過により精製し、95％純度
の表記ペプチドを得た。

物理データー： M.F.:C₂₃Ｈ₃₈Ｎ₁₀Ｏ₁₀Ｓ₂ M.W.:678.22 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺679.2 （Ｍ−Ｈ）^-677.2 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.13）、Ser（0.86）、Cys（2.
02）、Arg（1.21） ペプチド含量:45.5％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.47 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.62 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:3％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝3.6 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;1〜50％Ａ、Ｋ′＝5.3 実施例22 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Sar−Arg−Gly−Asp−Pe
n−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Sar−Arg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Pen（４−MBzl）
−MBHAを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ
方法にて調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチ
ドを７％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、カラ
ムから溶出し、表記化合物600mg（収率87％）を得た。
さらに、溶出液として0.2M酢酸を用いるセファデックス
Ｇ−15ゲル濾過により精製し、95％純度の表記ペプチ
ドを得た。

物理データー： M.F.:C₂₅Ｈ₄₃Ｎ₁₀Ｏ₉Ｓ₂ M.W.:690.26 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺691.2 （Ｍ−Ｈ）^-689 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.14）、Arg（1.04） ペプチド含量:78.8％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.53 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.67 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:3％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝4.2 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;1〜50％Ａ、Ｋ′＝6.5 実施例23 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Cys−NH
₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Arg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Cys（４−MBzl）−MBH
Aを、1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法に
て調製し、切断し、環化し、単離した。該ペプチドを３
％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、OSD逆相カラ
ムから溶出し、表記化合物280mg（収率47％）を得た。
さらに、溶出液として0.2M酢酸を用いるセファデックス
Ｇ−15ゲル濾過により精製し、95％純度の表記ペプチ
ドを得た。

クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.49 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.45 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:3％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝2.7 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;1〜50％Ａ、Ｋ′＝5.0 実施例24 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−（Et₂）Arg−Gly−Asp−
Pen−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（Et）−
（Et₂）Arg−Gly−Asp（OChx）−Pen−MBHAを、1.0ミリ
モルのスケールにて実施例１と同じ方法にて調製し、切
断し、環化し、単離した。該ペプチドを、９％アセトニ
トリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、カラムから溶出し、表
記ペプチド590mg（収率87％）を得た。さらに、溶出液
として0.2M酢酸を用い、セファデックス Ｇ−15ゲル濾
過により精製し、95％純度の表記ペプチドを得た。

物理データー： M.F.:C₂₆Ｈ₄₅Ｎ₉Ｏ₈Ｓ₂ M.W.:675.82 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺676.4 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.12） ペプチド含量:51.77％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.45 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.64 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.6m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:9％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝3.2 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;5〜50％Ａ、Ｋ′＝4.2 実施例25 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−MeArg−Gly−Asp−P
en−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Ｄ−MeArg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Pen−MBHAを、
1.0ミリモルのスケールにて実施例１と同じ方法にて調
製し、切断し、環化し、単離した。米国特許第4687758
号記載のように、Ｌ−異性体として同一方法にて、Boc
−Ｄ−MeArg（Tos）を調製した。該ペプチドを、７％ア
セトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAを用い、カラムから溶出
し、表記ペプチド450mg（収率71％）を得た。さらに、
溶出液として0.2M酢酸を用いるセファデックス Ｇ−15
ゲル濾過により精製し、表記ペプチドを得た。

実施例26 Ｎ^α−Ac−Ｎ^α−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−MeArg（Tos）
−Gly−Asp（OBzl）−Ser（Bzl）−BHAを、実施例１に
記載されているように、0.5ミリモルのスケールでの固
相法にて調製した。HFで切断し、無水エーテルで洗浄し
た後、該ペプチドを、氷酢酸で抽出し、冷凍乾燥して7
5.8mg（収率31％）を得た。溶出液として0.2M酢酸を用
いるセファデックス Ｇ−15ゲル濾過により精製した。
表記化合物が３フラクションにて溶出し、96％以上の純
度の表記ペプチド60.6mgを得た。

物理データー： M.F.:C₁₈Ｈ₃₂Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:488.501 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺489.5 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.48）、Gly（1.09） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.25 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.31 実施例27 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（Tos）−
Gly−Asp（OBzl）−BHAを、0.5ミリモルのスケールにて
実施例26と同じ方法にて調製し、切断し、単離した。該
ペプチドを、B:A:W（4:1:5）を用いる向流分配（CCD）
により精製した。240トランスファーが４フラクション
において80.8mg得られた。

物理データー： M.F.:C₁₇Ｈ₃₀Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:474.474 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺475 AAA:Asp（0.99）、Ser（0.24）、Gly（1.03）、Arg（1.
00） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.2 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.49 実施例28 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Tyr−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（Tos）−
Gly−Asp（OBzl）−Tyr（BrZ）−BHAを、0.5ミリモルの
スケールにて実施例27と同じ方法にて調製し、切断し、
単離した。該ペプチドを、溶出液として0.2M酢酸を用い
るセファデックス Ｇ−15ゲル濾過により精製した。こ
の操作により、表記ペプチド142.1mgを得た。

物理データー： M.F.:C₂₃Ｈ₂₄Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:550.57 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺551 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.02）、Tyr（1.00）、Arg（0.
90） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.41 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.4 実施例29 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（NO₂）−
Gly−Asp（OBzl）−BHAを、0.5ミリモルのスケールにて
実施例27と同じ方法にて調製し、切断し、単離した。該
ペプチドを、B:A:W（4:1:5）を用いるCCDにより精製
し、４フラクションにて化合物98.6mgを得た。さらに、
該ペプチドを溶出液として0.2M酢酸を用いるセファデッ
クス Ｇ−15ゲル濾過により精製し、数フラクションに
て表記ペプチド65.7mgを得た。

物理データー： M.F.:C₁₄Ｈ₂₅Ｎ₇Ｏ₆ M.W.:387.389 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺388 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.13）、Arg（0.93） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.2 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.44 実施例30 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（Tos）−
Gly−Asp（OBzl）−Ｄ−Ser（Bzl）−BHAを、1.0ミリモ
ルのスケールにて実施例27と同じ方法にて調製し、切断
し、単離した。中圧ODS逆相カラムを用い、0.5％アセト
ニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマ
トグラフィーにより精製した。この操作により95％純度
の表記ペプチド337mgを得た。

物理データー： M.F.:C₁₇Ｈ₃₀Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:474.474 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺475.3 （Ｍ−Ｈ）^-473.5 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.99）、Gly（0.96）、Arg（1.
01） ペプチド含量:44.8％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.3 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、30分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝3.4 実施例31 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Val−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（Tos）−
Gly−Asp（OBzl）−Val−BHAを、1.0ミリモルのスケー
ルにて実施例27と同じ方法にて調製し、切断し、単離し
た。中圧ODS逆相カラムを用い、15％メタノール/H₂Ｏ−
0.1％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによ
り精製した。この操作により、95％以上の純度の表記ペ
プチド125mgを得た。

物理データー： M.F.:C₁₉Ｈ₃₄Ｎ₈Ｏ₇ M.W.:486.528 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺487.3 （Ｍ−Ｈ）^-485.9 AAA:Asp（1.00）、Gly（0.99）、Val（1.06）、Arg（0.
96） ペプチド含量:79.6％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.43 （B:W:IP:CA、6.5:2:1.5:0.3）、Ｒ_f＝0.11 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:5％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝1.3 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;6〜50％、Ｋ′＝0.84 実施例32 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Nal−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（Tos）−
Gly−Asp（OBzl）−Nal−MBHAを、1.0ミリモルのスケー
ルにて実施例27と同じ方法にて調製し、切断し、単離し
た。中圧ODS逆相カラムを用い、40％メタノール/H₂Ｏ−
0.1％TFAで溶出するクロマトグラフィーにより精製し
た。この操作により、98％以上の純度の表記ペプチド57
mgを得た。

物理データー： M.F.:C₂₇Ｈ₃₆Ｎ₈Ｏ₇ M.W.:584.632 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺585.3 （Ｍ−Ｈ）^-583.9 AAA:Asp（1.00）、Gly（0.99）、ArgおよびNalは存在す
るが、共溶出する ペプチド含量:81.3％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.60 （B:W:IP:CA、6.5:2:1.5:0.3）、Ｒ_f＝0.23 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:18％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FA、Ｋ′＝1.2 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;15〜50％Ａ、Ｋ′＝2.1 この操作において、Boc−Nalの代わりにBoc−（Me）T
hrを用い、Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp（Me）Thr−NH₂を
得る。

この操作において、Boc−Nalの代わりにBoc−Nvaを用
い、Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Nva−NH₂を得る。

この操作において、Boc−Nalの代わりにBoc−Nlaを用
い、Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Nle−NH₂を得る。

実施例33 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−Phe−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Arg（Tos）−
Arg（Tos）−Gly−Asp（OChx）−Phe−BHAを、1.0ミリ
モルのスケールにて実施例27と同じ方法にて調製し、切
断し、単離した。中圧ODS逆相カラムを用い、８％アセ
トニトリル/H₂Ｏ−0.1％TFAで溶出するフラッシュクロ
マトグラフィーにより精製した。この操作により、98％
純度の表記ペプチド303.4mgを得た。

物理データー： M.F.:C₂₉Ｈ₄₆Ｎ₁₂Ｏ₈ M.W.:690.356 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺691 （Ｍ−Ｈ）^-690 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.00）、Phe（0.91）、Arg（1.
89） ペプチド含量:56.3％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.4 （B:A:W:P、15:3:8:10）、Ｒ_f＝0.4 2.HPLC:ウルトラスフェアー^RODS、4.6mm×25cm、220nm
にて検出 イソクラティック:10％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FA、Ｋ′＝2.78 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;10〜50％Ａ、Ｋ′＝2.8 前記合成配列における付加した第５残基のBoc−Arg
（Tos）の代わりにBoc−HArg（Tos）を、第１残基のBoc
−Pheの代わりにBoc−（４′−Me）Pheを用い、Ｎ^α−A
c−HArg−Arg−Gly−Asp（４′−Me）Phe−NH₂を得る。

前記合成配列における樹脂に付加した第５残基におい
て、Boc−（Et₂）Argを、第１残基のBoc−Pheの代わり
にBoc−His（Tos）を用い、Ｎ^α−Ac−（Et₂）Arg−Arg
−Gly−Asp−His−NH₂を得る。

前記合成配列における付加した第５残基のBoc−Arg
（Tos）の代わりにBoc−Alaを、第１残基のBoc−Pheの
代わりにBoc−Ileを用い、Ｎ^α−Ac−Ala−Arg−Gly−A
sp−Ile−NH₂を得る。

実施例34 Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−NH−CH₂−CH₂−Ｃ₆Ｈ₅の調
製 ａ） Boc−Asp（OBzl）−NH−（CH₂）₂Ｃ₆Ｈ₅の調製 アルゴン雰囲気下、無水THF50ml中、Boc−Asp（OBz
l）5.0g（15.5ミリモル）およびＮ−メチルモルホリン1
5.5ミリモルの撹拌溶液に、−15℃にてクロロギ酸イソ
ブチル15.5ミリモルを加えた。２〜３分後、無水THF15m
l中、フェネチルアミン2.0ml（15.5ミリモル）を添加し
た。該混合物を−15℃にて15分間保持し、室温にて加温
した。さらに２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、
濾液を真空下、濃縮乾固した。得られた残渣を酢酸エチ
ル100mlに溶かし、1M塩酸（２×50ml）、水50ml、10％
炭酸ナトリウム（２×50ml）およびブライン50mlで連続
的に洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾
過し、濃縮して無定形白色固体5.59g（収率85％）を得
た。

ｂ） Boc−Gly−Asp（OBzl）−NH−（CH₂）₂Ｃ₆Ｈ₅の
調製 実施例12（ａ）の化合物４。18g（12.8ミリモル）のB
oc−保護基を、室温にて30分間、無水TFA（10ml/g）で
処理することにより除去した。TFAを真空除去し、TFA残
部を重量により測定した。Boc−Gly2.24g（12.8ミリモ
ル）を、12（ａ）の操作に従い、遊離アミンにカップリ
ングさせた。シリカカラムを用い、酢酸エチル−ヘキサ
ン（3:1）の混合物で溶出するクロマトグラフィーによ
り精製し、淡黄色ガラス状物質3.35g（収率54％）を得
た。

ｃ） Boc−Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−NH−（C
H₂）₂Ｃ₆Ｈ₅の調製 実施例12（ｂ）の化合物2.61g（6.8ミリモル）のBoc
−保護基を除去し、得られたジペプチドを実施例12
（ｂ）の方法によりBoc−Arg（Tos）3.4g（6.8ミリモ
ル）にカップリングさせた。シリカカラムを用い、酢酸
エチル−イソプロパノール（1:1）の混合物で溶出する
フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、白色ガラ
ス状物質3.41g（収率63％）を得た。

ｄ） Ac−Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−NH−（C
H₂）₂Ｃ₆Ｈ₅の調製 実施例12（ｃ）の化合物を、実施例12（ｂ）における
記載ように脱保護した。該遊離塩基2.92g（4.2ミリモ
ル）および無水酢酸2.0ml（21.2ミリモル）を、DMF30ml
に溶かし、ジイソプロピルエチルアミン0.73ml（4.2ミ
リモル）で処理した。反応混合物を30分間撹拌し、真空
下、濃縮乾固した。この残渣を、シリカカラムを用い、
酢酸エチル−イソプロパノール（1:1）の混合物で溶出
するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、白色
ガラス状物質2.94g（収率95％）を得た。

ｅ） Ac−Arg−Gly−Asp−NH−（CH₂）₂Ｃ₆Ｈ₅の調製 実施例12（ｄ）の保護ペプチド2.5gおよびアニソール
2.5mlを、０℃にて30分間、無水HF25mlで処理した。HF
を蒸発させた後、該ペプチド−アニソール混合物を、1M
酢酸（３×50ml）で処理し、水溶液を無水エーテル（３
×100ml）で洗浄した。水性抽出物を凍結乾燥し、1.52g
を得た。ODSカラムを用い、40％メタノール/H₂Ｏ−0.1
％TFAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより
精製した。この操作により、97％純度の表記ペプチド32
6mgを得た。

物理データー： M.F.:C₂₂Ｈ₃₃Ｎ₇Ｏ₆ M.W.:491.547 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺492.1 （Ｍ−Ｈ）^-490.6 AAA:Asp（0.51）、Gly（0.99）、Arg（1.00） ペプチド含量:81.2％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.58 （B:W:IP:CA、6.5:2:1.5:0.3）、Ｒ_f＝0.17 2.HPLC:バイダック218TP ODSカラム、4.6mm×25cm、220
nmにて検出 イソクラティック:12％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FA、Ｋ′＝2.3 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;10〜50％Ａ、Ｋ′＝2.2 フェネチルアミンの代わりにアニリンを用い、同じ操
作に従って、Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−NHC₆Ｈ₅を得
た。

実施例35 Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Phe−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−MeArg（Tos）
−Gly−Asp−Phe−MHAを、実施例26と同じ方法にて調製
し、樹脂から切断し、単離し、精製し、表記ペプチドを
得た。

物理データー： M.F.:C₂₄Ｈ₃₆Ｎ₈Ｏ₇ M.W.:548.270 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺549.2 （Ｍ−Ｈ）^-547.8 AAA:Asp（1.00）、Gly（1.00）、Phe（1.05）、MeArg
（1.18） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.52 （B:A:W:P、15:3:8:10）、Ｒ_f＝0.46 2.HPLC:ウルトラスフェアー ODS、4.6mm×25cm、220nm
にて検出 イソクラティック:10％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FA、Ｋ′＝3.43 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;10〜50％Ａ、Ｋ′＝3.6 実施例36 Ｎ^α−Ac−HArg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Lys（Clz）−
Gly−Asp（OBzl）−Ser（Bzl）−BHAを、実施例26と同
じ方法にて調製し、樹脂から切断し、単離し、Ｎ^α−Ac
−Lys−Gly−Asp−Ser−NH₂を得た。炭酸塩緩衝液2ml
（pH10.5）に溶かした該ペプチド100mg（0.197ミリモ
ル）の溶液に、0.1MNaOH1ml（4M NaOHでpH11に調整）に
溶かした硫酸水素Ｏ−メチルイソ尿素0.34g（1.97ミリ
モル）の溶液を加えた。室温にて一夜放置した後、反応
物を２回クロマトグラフィー（水に膨張させたセファデ
ックス Ｇ−10、0.1M水性酢酸で溶出）に付し、精製し
たペプチドを冷凍乾燥し、表記ペプチド48mgを得た。

物理データー： M.F.:C₁₈Ｈ₃₂Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:488.50 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺489.2 （Ｍ−Ｈ）^-487.7 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.97）、Gly（0.99）、Cys（0.
21）、HArg（0.88） クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.33 （B:W:IP:CA、6.5:2:1.5:0.3）、Ｒ_f＝0.04 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nmにて検出 イソクラティック:3％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝0.8 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、15分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝2.1 実施例37 Ｎ^α−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、MeArg（Tos）−Gly−Asp
（OBzl）−Ser（Bzl）−BHAを、アセチル化工程を省略
する以外、実施例26と同じ方法にて調製し、樹脂から切
断した。該遊離ペプチドを、実施例26と同じ方法にて精
製し、表記ペプチドを得た。

物理データー： M.F.:C₁₆Ｈ₃₀Ｎ₈Ｏ₇ M.W.:446.22 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺447.2 （Ｍ−Ｈ）^-445.6 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.95）、Gly（1.00）、MeArg
（1.00） ペプチド含量:76.74％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.26 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.31 2.HPLC:ウルトラスフェアー ODS、4.6mm×25cm、220nm
にて検出 イソクラティック:H₂Ｏ−0.1％TFA、Ｋ′＝0.66 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝0.64 実施例38 Ｎ^α−ホルミル−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド中間体、MeArg（Tos）−Gly−Asp（OBz
l）−Ser（Bzl）−BHAを、0.5ミリモルのスケールにて
常法にて調製した。末端アミノ基をHFで脱保護した後、
樹脂−担持ペプチドを、ギ酸（98％、7ml）中、無水酢
酸1mlの混合物で処理した。樹脂から連続切断し、表記
ペプチドを得た。

物理データー： M.F.:C₁₇Ｈ₃₀Ｎ₈Ｏ₈ M.W.:474.219 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.97）、Gly（0.98） ペプチド含量:78.15％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.37 （B:A:W:P、15:5:10:10）、Ｒ_f＝0.34 2.HPLC:ウルトラスフェアー ODS、4.6mm×25cm、220nm
にて検出 イソクラティック:1％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝2.02、2.69（シス／トランスＮ−ホルミル異
性体） グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝2.17 実施例39 Gly−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Boc−Gly−MeArg（Tos）
−Asp（OChx）−Ser（Bzl）−BHAを、実施例26のように
調製し、樹脂から切断した。該遊離ペプチドを、中圧OD
S逆相カラムを用い、１％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％T
FAで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製
した。この操作により、４フラクションにて95％以上の
純度の化合物406mg（収率80％）を得た。

物理データー： M.F.:C₁₈Ｈ₃₃Ｎ₉Ｏ₈ M.W.:503.245 FAB:（Ｍ＋Ｈ）⁺504 （Ｍ−Ｈ）^-502 AAA:Asp（1.00）、Ser（0.94）、Gly（1.96）、Ｎ−MeA
rg（0.98） ペプチド含量:69.97％ クロマトグラフィーデーター： 1.TLC:（B:A:W:E、1:1:1:1）、Ｒ_f＝0.29 2.HPLC:アルテックス・ウルトラスフェアー ODS、4.5m
m×25cm、220nMにて検出 イソクラティック:1％アセトニトリル/H₂Ｏ−0.1％TF
A、Ｋ′＝1.07 グラジエント:A;アセトニトリル、B;H₂Ｏ−0.1％TF
A、20分間;0〜50％Ａ、Ｋ′＝2.35 実施例40 Ala−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ala−MeArg（Tos）−Gly
−Asp（OBzl）−Ser（Bzl）−BHAを、アセチル化工程を
省略する以外、実施例26と同じ方法にて調製する。線状
ペプチドを常法にてHFを用いて樹脂から切断し、表記ペ
プチドを得る。

実施例41 Ｎ^α−Ac−Ala−Arg−Gly−Asp−OCH₃の調製 Boc−Asp−OMeを、セシウム塩法を用いてクロロメチ
ル樹脂にカップリングさせ、アスパラギン酸がその側鎖
カルボキシル基を介して樹脂に結合したBoc−Asp（Ｏ−
ベンジル樹脂）−OMeを得る。各３当量の保護アミノ酸
（Boc−Gly、Boc−Arg（Tos）およびBoc−Ala）をジメ
チルホルムアミドに溶かし、等モル量のジシクロヘキシ
ルカルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾ
ールを用いて連続的にカップリングさせた。カップリン
グ度を、一部、定性ニンヒドリン（ninhydrin）分析法
により測定し、要すれば、カップリングを繰り返す。Bo
c基を、トリフルオロ酢酸／塩化メチレン（1:1）の混合
物で処理して除去し、塩化メチレンで洗浄した後、５％
ジイソプロピルエチルアミン／塩化メチレンを用いて遊
離アミンを生成する。最終カップリングおよびBoc基の
除去の後、該ペプチド／樹脂をジメチルホルムアミドお
よび塩化メチレンで洗浄し、乾燥する。該ペプチドを無
水酢酸（10当量）およびジイソプロピルエチルアミン
（10当量）の混合物を用いてアセチル化する。該ペプチ
ドを脱保護し、０℃にて１時間、アニソールの存在下、
HFで処理することによって樹脂から切断する。HFを０℃
にて蒸発させることにより除去し、残渣をジエチルエー
テル（４×、廃棄）で洗浄し、逆相HPLCにより精製し、
表記化合物を得る。

実施例42 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Abu−Arg−Gly−Asp−Pe
n−NH₂の調製 保護ペプチド−樹脂中間体、Ｎ^α−Ac−Cys（SEt）−
Abu−Arg（Tos）−Gly−Asp（OBzl）−Pen（４−MBzl）
−MBHAを、実施例３と同じ方法にて調製し、切断し、環
化し、単離した。該ペプチドを中圧ODS逆相カラムを用
いるフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、表記
化合物を得る。

前記合成配列中、第５残基のBoc−Abuの代わりにBoc
−（Et₂）Argを用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−
（Et₂）Arg−Arg−Gly−Asp−Pen−NH₂を得る。

前記合成配列中、第５残基のBoc−Abuの代わりにBoc
−（α−Me）Alaを用い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys
−（α−Me）Ala−Arg−Gly−Asp−Pen−NH₂を得る。

実施例43 Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Cys−
OCH₃の調製 ａ） Ｈ₂Ｎ−Asp（Ｏ−ベンジル樹脂）−Cys（４−MeB
zl）−OCH₃の調製 Ｈ₂Ｎ−Cys（４−MBzl）−OMeを、３当量の１−HOBT
および３当量のジシクロヘキシルカルボジイアミドを用
い、DMF中、３当量のFmoc−Asp（４−tBuO）とカップリ
ングさせる。３時間後、DMFを真空下にて蒸発させ、残
渣を酢酸エチルでトリチュレートし、濾過した。濾液を
５％水性炭酸水素ナトリウムおよび水で洗浄する。有機
層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を真空
下にて除去する。さらに、保護ジペプチドをシリカゲル
クロマトグラフィーにより精製する。

Fmoc−Asp（４−tBuO）−Cys（４−MBzl）−OMeを、
０℃にて１時間、50％TFA/塩化メチレンで処理し、溶媒
を真空下にて蒸発させる。残渣を塩化メチレンに再度溶
かし、水で３回洗浄し、有機層をMgSO₄上で簡単に乾燥
させる。濾過し、溶媒を蒸発させて、Fmoc−Asp−Cys
（４−MBzl）−OMeを得る。

ジペプチドの遊離カルボン酸を、ギシンら（Gisin et
al.）、Helv.Chim.Acta、56、1476（1973）により示さ
れているセシウム塩法を用い、クロロメチル樹脂にカッ
プリングさせる。樹脂担持ジペプチドを、DMF中、20％
ピペリジンで処理する（３×10分）。該樹脂をDMFで３
回洗浄し、表記樹脂担持ジペプチドを得る。

ｂ） Ｎ^α−アセチル−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly
−Asp−Cys−OCH₃の調製 実施例43（ａ）にて産生した樹脂担持ジペプチドを、
Boc−Gly、Boc−MeArg（Tos）およびBoc−Cys（SEt）に
連続的にカップリングさせ、アセチル化し、実施例１の
操作を用いて樹脂から切断し、環化する。表記ペプチド
を逆相HPLCを用いて精製する。

Ｈ₂Ｎ−Cys（４−MBzl）−OEtで出発し、前記合成配
列中、（α−Me）HArg（Tos）で置き換えられる以外
は、同一操作を用いて、Ｎ^α−アセチル−シクロ（S,
S）Cys−（α−Me）HArg−Gly−Asp−Cys−OEtを得る。

実施例44 Ｎ^α−アセチル−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp
−Cys−NHEtの調製 ａ） Ｈ₂Ｎ−Cys（４−MBzl）−NHEtの調製 Boc−Cys（４−MBzl）−OCH₃をメタノールに溶かし、
０℃に冷却し、１倍容量のエチルアミン（予め０℃に冷
却）を加える。反応混合物を気密に栓を閉め、室温にて
８日間撹拌する。反応物を再度10℃に冷却し、ガス抜き
を行い、溶媒を真空下にて除去する。残渣を塩化メチレ
ンに溶かし、１倍容量のTFAで処理し、室温にて１時間
撹拌する。表記エチルアミドをシリカゲルクロマトグラ
フィーにより精製する。

Ｈ₂Ｎ−Asp（Ｏ−ベンジル樹脂）−Cys（４−MBzl）−N
HEtの調製 ｂ） 実施例43（ａ）の操作におけるＨ₂Ｎ−（４−MBz
l）Cys−OMeの代わり実施例44（ａ）のエチルアミドを
用い、Fmoc−Asp（４−tBuO）にカップリングさせ、ク
ロロメチル樹脂に連結させ、遊離アミンを遊離させ、表
記化合物を得る。

Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Cys−
NHEtの調製 ｃ） 実施例44（ｂ）の樹脂担持ペプチドを、Boc−Gl
y、Boc−MeArg（Tos）およびBoc−Cys（SEt）と連続的
にカップリングさせ、アセチル化し、実施例１の操作を
用いて樹脂から切断し、環化する。表記ペンタペプチド
を逆相HPLCを用いて精製する。

エチルアミンの代わりにイソプロピルアミンを用い、
Boc−Pen（４−MBzl）−OCH₃で操作を開始する以外、同
一操作に従い、Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−G
ly−Asp−Pen−NHC₃Ｈ₇を得る。

実施例45 実施例26または33の合成配列において、適当な保護アミ
ノ酸を代わりに用い、以下の線状ペプチド： ａ） Ｎ^α−Ac−Pro−Arg−Gly−Asp−NH₂； ｂ） Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Nle−NH₂； ｃ） Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Met−NH₂； ｄ） Ｎ^α−Ac−HArg−Gly−Asp−Leu−NH₂； ｅ） Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Trp−NH₂； ｆ） Ｎ^α−Ac−MeArg−Arg−Gly−Asp−Thr−NH₂； ｇ） Ｎ^α−Ac−Ala−MeArg−Gly−Asp（Me）Ser−N
H₂； ｈ） Ｎ^α−Ac−Arg（Et₂）Arg−Gly−Asp−Ala−N
H₂； ｉ） Ｎ^α−Ac−Abu−MeArg−Gly−Asp−Ｄ−Phe−N
H₂； ｊ） Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Ｄ（Et）Tyr−NH₂ ｋ） Ｎ^α−Ac−Arg−Gly−Asp−HPhe−NH₂； および ｌ） Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−（Me）Cys−NH₂を
得る。

実施例46 実施例１または実施例42に従い、前記合成配列において
適当な保護アミノ酸を代わりに用いて、以下の環状ペプ
チド： ａ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−MeArg−Gly−As
p−Cys−NH₂； ｂ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−HArg−Gly−Asp
−Cys−NH₂； ｃ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−D,L−APmp−MeArg−G
ly−Asp−Pen−NH₂； ｄ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−MeArg−Arg−Gl
y−Asp−Cys−NH₂； ｅ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Pen−Pro−Arg−Gly
−Asp−Cys−NH₂； ｆ） シクロ（S,S）−Mpa−Arg（Et₂）Arg−Gly−Asp
−（４′−Cl）Phe−D,L−APmp−NH₂； ｇ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Pen−Ala−MeArg−Gl
y−Asp−Trp−Cys−NH₂； ｈ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−HArg−Arg−Gly
−Asp−Ala−Cys−NH₂； ｉ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−MeArg−Gly−As
p（Me）Thr−Cys−NH₂； ｊ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−HArg−Gly−Asp
（Et）Tyr−D,L−APmp−NH₂； ｋ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−D,L−APmp−Arg−Gly
−Asp−Leu−Cys−NH₂； ｌ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−Arg−Gly−Asp
−His−Pen−NH₂；および ｍ） シクロ（S,S）−Mpa−Arg−Gly−Asp−（Me）Ser
−Cys−NH₂を得る。

実施例47 シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Pen−NH₂の調整 アセチル化工程を省略する以外、実施例14の方法に従
い、表記化合物を調整する。

実施例48 Ｎ^α−PhCO−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Pen
−NH₂の調整 実施例47の化合物0.5ミリモルを塩化メチレン中にて
撹拌し、０℃にてトリエチルアミン１ミリモルで処理す
る。塩化ベンゾイル0.6ミリモルを加え、反応物を室温
に加温する。３時間後、反応物を氷水および塩化メチレ
ンで希釈する。有機層を分離し、水および５％炭酸水素
ナトリウムで洗浄し、MgSO₄上で乾燥する。溶媒を蒸発
させ、残渣を中圧ODS逆相カラム上にてクロマトグラフ
ィーに付し、表記化合物を得る。

フェニルアセチルクロリドを代わりに用いる以外、同
一操作に従い、Ｎ^α−PhCH₂CO−シクロ（S,S）Cys−MeA
rg−Gly−Asp−Pen−NH₂を得る。

実施例49 シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Pen−OHの調製 実施例15（ｃ）の操作に従い、Boc−Pen（４−MBzl）
を、塩化メチレン中、４−ピロリジノピリジン0.15g
（１ミリモル）およびDCC620mg（３ミリモル）を用い、
ヒドロキシメチル樹脂（１％架橋、1g、１ミリモル）に
カップリングさせる。実施例１の操作に従い、Boc−Asp
（OBzl）、Boc−Gly、Boc−MeArg（Tos）およびBoc−Cy
s（SEt）をカップリングさせ、アセチル化し、HFで処理
し、環化し、表記化合物を得る。

実施例50 前記において詳細に記載した合成方法を用い、以下の化
合物： ａ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−（α−Et）HArg
−Gly−Asp−Cys−NH₂； ｂ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−（α−Bzl）Arg−
Gly−Asp−Pen−NH₂； ｃ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）D,L−APmp−MeArg−Gly
−Asp−Trp−Cys−NH₂； ｄ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Pen−Ｄ−HArg−Gly
−Asp−Ｄ−Tyr−Cys−NH₂； ｅ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Pen−Ｄ−（α−Et）
Arg−Gly−Asp−（Et）Ser−Cys−NH₂； ｆ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−Ｄ−MeArg−Gly
−Asp−Ｄ−Phe−Cys−NH₂； ｇ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−Ｄ−（α−Et）
Arg−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Cys−NH₂； ｈ） シクロ（S,S）−Mpr−Ｄ−（α−Me）His−Arg−
Gly−Asp−Cys−NH₂； ｉ） シクロ（S,S）−Pmp−Ｄ−Ala−MeArg−Gly−Asp
−Pen−NH₂； ｊ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Pen−（α−Me,Et₂）
Arg−MeArg−Gly−Asp−Cys−NH₂； ｋ） Ｎ^α−HCO−シクロ（S,S）−Cys−（α−Me）Ala
−Arg−Gly−Asp−（Me）Pen−Cys−NH₂； ｌ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−（Me₂）Arg−Me
Arg−Gly−Asp−Cys−NH₂； ｍ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Cys−（α−Et）Gly
−HArg−Gly−Asp−Ｄ−Cys−NH₂； ｎ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Ｄ−Cys−His−（α
−Me）HArg−Gly−Asp−Cys−NH₂；および ｏ） Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）−Ｄ−Pen−（α−Me）
Abu−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Pen−NH₂を得る。

実施例51 前記において詳細に記載した合成方法を用い、以下の
化合物： ａ） Ｎ^α−Ac−His−MeArg−Gly−Asp−Ｄ−Ala−N
H₂； ｂ） Ｎ^α−Ac−（Me₂）Arg−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Tyr
−NH₂； ｃ） Ｎ^α−Ac−（α−Me,Me₂）Arg−Gly−Asp−Nal−
NH₂； ｄ） Ｎ^α−Ac−（α−Me）HArg−Gly−Asp−（Et）Pe
n−NH₂； ｅ） Ｎ^α−Ac−（α−Bzl）Arg−Gly−Asp−Ｄ−Thr
−NH₂；および ｆ） Ｎ^α−PhCO−MeArg−Gly−Asp−Ｄ−Leu−NH₂を
産生する。

実施例52 非経口投与単位組成物 滅菌乾燥粉末として実施例１または実施例２のペプチ
ド50mgを含有する調製物を、以下のように調製する： 該ペプチド20mgを蒸留水15mlに溶かす。該溶液を滅菌
条件下、多用量アンプル25mlに濾過充填し、冷凍乾燥す
る。該粉末を、静脈内または筋肉内注射用に、水中５％
デキストロース（D5W）20mlを加えることにより再組成
する。投与量は昼夜容量から求める。つづいて、計量し
た容量の該投与単位を、さらなる容量の注射用D5Wに添
加することにより希釈を行っても、また計量した投与量
を、IV点滴注入または他の注射−注入系用の瓶または袋
のような薬剤分散用の別の手段に加えてもよい。

実施例53 経口投与単位組成物 経口投与用カプセルは、ペプチド50mgを、ラクトース
75mgおよびステアリン酸マグネシウム5mgと混合し、粉
砕することにより調製する。得られた粉末をスクリーン
に付し、ハードゼラチンカプセルに充填する。

実施例54 経口投与単位組成物 経口投与用錠剤は、シュークロース20mg、硫酸カルシ
ウム二水和物150mgおよびペプチドを、10％ゼラチン溶
液と混合し、顆粒化することにより調製する。該湿式顆
粒をスクリーンに付し、乾燥し、澱粉10mg、タルク5mg
およびステアリン酸3mgと混合し、錠剤に圧縮する。

【図面の簡単な説明】

第１図は組織プラスミノーゲン（tPA）の濃度と％血餅
溶解との関係を示すグラフであり、■印はtPA−誘発溶
解、●印はtPAおよび1mM Ac−RGDS−NH₂の存在下での溶
解を示す。 第２図ａ）〜ｃ）は0.1ml/分の速度での400mM Ac−RGDS
−NH₂の灌流によるin vitroでの抑制を示し、第２図
ａ）は冠状動脈血圧（mmHg）と時間との関係を示すグラ
フであり、第２図ｂ）は段階状冠血流（ml/分）と時間
との関係を示すグラフであり、第２図ｃ）は平均冠血流
（ml/分）と時間との関係を示すグラフである。 第３図ａ）〜ｃ）は冠血栓症モデルにおける血小板凝集
のin vivo抑制の用量依存性を示すグラフであり、第３
図ａ）は灌流速度0.052ml/分における平均血流（ml/
分）の時間変化を示すグラフであり、第３図ｂ）は灌流
速度0.026ml/分における平均血流（ml/分）の時間変化
を示すグラフであり、第３図ｃ）は灌流速度0.013ml/分
における平均血流（ml/分）の時間変化を示すグラフで
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ロナルド・ジョン・シェブスキ アメリカ合衆国ペンシルバニア州18073、 ペンスバーグ、ゲリービレ・パイク231 エイ番 (56)参考文献 特開 平１−190699（ＪＰ，Ａ)

Claims (25)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式（Ｉ）： Ｘ−（Ａ）_m−Ｂ−Gly−Asp−（Ｃ）_n−Ｙ （Ｉ） ［式中、ＡはArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、Al
   a、Gly、His、Abuまたはそれらのα−Ｒ′置換誘導体、
   あるいはPro; ＢはHArg、（Me₂）Arg、（Et₂）ArgまたはArg、HArg、
   （Me₂）Arg、（Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体；ただ
   し、ｍが１の場合、ＢはArgであってもよい； ＣはTyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPhe、Ph
   g、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Thr、Cy
   s、（Alk）Cys、Pen、（Alk）Pen、Ala、Val、Nva、Me
   t、Leu、Ile、NleまたはNalから選択されるＤまたはＬ
   アミノ酸； ＷはハロゲンまたはAlk; ＹはNR₁Ｒ₂またはOR₃； Ｒ₁およびＲ₂は、各々、独立してＨ、Alkまたは（CH₂）
   _pPh; Ｒ₃はAlk、（CH₂）_pPhあるいは、ＢがHArg、（Me₂）Ar
   g、（Et₂）Arg、またはArg、HArg、（Me₂）Argもしくは
   （Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体である場合はH; ＸはＲ₄Ｒ₅N; Ｒ₄はＨまたはAlk; Ｒ₅はＨ、Alk、HCO、AlkCO、PhCH₂またはPh（CH₂）_qCO; Ｒ′はAlkまたはPhCH₂； ｑ、ｍおよびｎは０または1;および ｐは０、１、２または３を意味する］ で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
2. 【請求項２】ＣがSer、（Me）Ser、Thr、Tyr、Phe、Nal
   またはValである請求項（１）記載の化合物。
3. 【請求項３】式（II）： ［式中、Ａ′はArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、A
   la、Gly、His、Abu、Lysまたはそれらのα−Ｒ′置換誘
   導体、あるいはProから選択されるＤ−またはＬ−アミ
   ノ酸； Ｂ′はArg、HArg、（Me₂）Arg、（Et₂）Arg、Lysまたは
   それらのα−Ｒ′置換誘導体より選択されるＤ−または
   Ｌ−アミノ酸； Ｃ′はTyr、（Alk）Tyr、Phe、（４′Ｗ）Phe、HPhe、P
   hg、Trp、His、Ser、（Alk）Ser、Thr、（Alk）Thr、
   （Alk）Cys、（Alk）Pen、Ala、Val、Nva、Met、Leu、I
   le、NleまたはNal、あるいはそれらのα−Ｒ′置換誘導
   体； ＷはハロゲンまたはAlk; ＹはNR₁Ｒ₂またはOR₃； Ｒ₁およびＲ₂は、各々、独立してＨ、Alkまたは（CH₂）
   _pPh; Ｒ₃はAlk、（CH₂）_pPhあるいは、ＢがHArg、（Me₂）Ar
   g、（Et₂）Arg、またはArg、HArg、（Me₂）Argもしくは
   （Et₂）Argのα−Ｒ′置換誘導体である場合はH; ＸはＲ₄Ｒ₅H; Ｒ₄はＨまたはAlk; Ｒ₅はＨ、Alk、HCO、AlkCO、PhCH₂またはPh（CH₂）_qCO; Ｒ′はAlkまたはPhCH₂； Ｚ₁はCys、PenまたはAPmpのＳ−またはＬ−異性体； Ｚ₂はCys、PenまたはAPmpのＤ−またはＬ−異性体； ｑ、ｍおよびｎは独立して０または1;およびｐは０、
   １、２または３を意味する］ で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
4. 【請求項４】Ｃ′はSer、（Me）Ser、Thr、Tyr、Pheま
   たはNalである請求項（３）記載の化合物。
5. 【請求項５】ＡまたはＡ′がArgまたはGlyである請求項
   （１）〜（４）いずれか１つに記載の化合物。
6. 【請求項６】ＢまたはＢ′がHArgまたはArgもしくはHAr
   gのα−Ｒ′置換誘導体であってｍまたはｎが０である
   請求項（１）〜（５）いずれか１つに記載の化合物。
7. 【請求項７】ｍおよびｎがともに０である請求項（３）
   記載の化合物。
8. 【請求項８】ＢまたはＢ′がMeArgである請求項（１）
   〜（７）いずれか１つに記載の化合物。
9. 【請求項９】Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Phe−NH₂； Ｎ^α−Ac−HArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−ホルミル−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂；または Gly−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂； である請求項（１）記載の化合物。
10. 【請求項１０】Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−G
    ly−Asp−Ser−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−（D,L）
    APmp−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Ser−Cy
    s−NH₂； シクロ（S,S）Mpr−Arg−Gly−Asp−Ser−Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Ser−
    Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−（M
    e）Ser−Cys−NH₂； シクロ（S,S）Mpr−MeArg−Gly−Asp−Ser−Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Cys−
    NH₂； シクロ（S,S）Mpr−MeArg−Gly−Asp−Pen−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Pen−NH
    ₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Ｄ−Pen
    −NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Lys−Gly−Asp−Pen−NH
    ₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−HArg−Gly−Asp−Pen−N
    H₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Pen−
    NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Pen−NH
    Et; Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−Arg−Gly−Asp−Pen
    −NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−Gly−Asp−Tyr−
    Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Pen−MeArg−Gly−Asp−Pen−
    NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Pen−Arg−Gly−Asp−Cys−NH
    ₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−Arg−Gly−Asp−Ser
    −Cys−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Sar−Arg−Gly−Asp−Pe
    n−NH₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg−Gly−Asp−Cys−NH
    ₂； Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Arg（Et₂−Gly−Asp−Pe
    n−NH₂；または Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Ｄ−MeArg−Gly−Asp−P
    en−NH₂である請求項（３）記載の化合物。
11. 【請求項１１】Ｎ^α−Ac−MeArg−Gly−Asp−Ser−NH₂
    である請求項（９）記載の化合物。
12. 【請求項１２】Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−Sar−Arg
    −Gly−Asp−Pen−NH₂である請求項（10）記載の化合
    物。
13. 【請求項１３】Ｎ^α−Ac−シクロ（S,S）Cys−MeArg−G
    ly−Asp−Pen−NH₂である請求項（10）記載の化合物。
14. 【請求項１４】医薬に用いる請求項（１）〜（13）いず
    れか１つに記載の化合物。
15. 【請求項１５】請求項（１）〜（13）いずれか１つに記
    載の化合物と医薬上許容される担体とよりなることを特
    徴とする血小板凝集を阻害するための医薬組成物。
16. 【請求項１６】請求項（１）〜（13）いずれか１つに記
    載の化合物と医薬上許容される担体とよりなることを特
    徴とする心筋梗塞治療用医薬組成物。
17. 【請求項１７】請求項（１）〜（13）いずれか１つに記
    載の化合物と医薬上許容される担体とよりなることを特
    徴とする深静脈血栓症治療用医薬組成物。
18. 【請求項１８】請求項（１）〜（13）いずれか１つに記
    載の化合物と医薬上許容される担体とよりなることを特
    徴とする肺塞栓症塞治療用医薬組成物。
19. 【請求項１９】請求項（１）〜（13）いずれか１つに記
    載の化合物と医薬上許容される担体とよりなることを特
    徴とする梗塞関連障害治療用医薬組成物。
20. 【請求項２０】ａ） 保護されたアミノ酸をカップリン
    グして式： Ｘ−（Ａ）_m−Ｂ−Gly−Asp−（Ｃ）_n−［Ｙ″］［式
    中、Ｘ、Ａ、Ｂ、Ｃ、ｍおよびｎは請求項（１）で定義
    したに同じ；および［Ｙ″］はクロロメチル、ベンズヒ
    ドリルアミンまたはメチルベンズヒドリルアミン樹脂、
    または請求項（１）で定義したに同じＹを意味する］ の適当に保護された化合物を得； ｂ） いずれの保護基も除去し、次いで、要すれば、該
    ペプチドを樹脂から切断し；次いで ｃ） 所望により、その医薬上許容される塩を成形して
    もよいことを特徴とする請求項（１）記載の式（Ｉ）の
    化合物またはその医薬上許容される塩の製法。
21. 【請求項２１】ａ）、i.式： ［式中、Ｘ、Ｚ₁、Ａ′、Ｂ′、Ｚ₂、Ｙ、ｍおよびｎは
    請求項（３）で定義したに同じ； Ｔ¹およびＴ²はＨまたは置換可能な基；および［Ｙ″］
    はクロロメチル、ベンズヒドリルアミンまたはメチルベ
    ンズヒドリルアミン樹脂、または請求項（３）で定義し
    たに同じＹを意味する］ で示される所望により保護されていてもよい化合物を環
    化し； ii.いずれの保護基も除去し、次いで、要すれば、該ペ
    プチドを樹脂から切断し；次いで iii.所望により、その医薬上許容される塩を形成しても
    よいか；あるいは ｂ） 式： ［式中、Ｘ、Ｚ₁、Ａ′、Ｂ′、Ｃ′、Ｚ₂、［Ｙ″］、
    ｍおよびｎは前記で定義したに同じ］ で示される所望により保護されていてもよい化合物を酸
    化的に環化し； ii.いずれの保護基も除去し、次いで、要すれば、該ペ
    プチドを樹脂から切断し；次いで iii.所望により、その医薬上許容される塩を形成しても
    よいことを特徴とする請求項（３）記載の式（II）の化
    合物またはその医薬上許容される塩の製法。
22. 【請求項２２】式： Ｘ−（Ａ）_m−Ｂ−Gly−Asp−（Ｃ）_n−［Ｙ′］［式
    中、Ｘ、Ａ、Ｂ、Ｃ、ｍおよびｎは請求項（１）で定義
    したに同じ；および［Ｙ′］はクロロメチル、ベンズヒ
    ドリルアミンまたはメチルベンズヒドリルアミン樹脂を
    意味する］ で示される化合物。
23. 【請求項２３】式： ［式中、Ｘ、Ｚ₁、Ａ′、Ｂ′、Ｃ′、ｍおよびｎは請
    求項（３）で定義したに同じ;T¹およびＴ²は置換可能な
    基またはH;および［Ｙ″］はクロロメチル、ベンズヒド
    リルアミンまたはメチルベンズヒドリルアミン樹脂、ま
    たは請求項（３）で定義したに同じＹを意味する］ で示される化合物。
24. 【請求項２４】請求項（１）〜（13）いずれか１つに記
    載の化合物、線維素溶解剤および医薬上許容される担体
    よりなることを特徴とする血栓を崩壊し、再閉塞を阻害
    するための医薬組成物。
25. 【請求項２５】該線維素溶解剤がストレプトキナーゼ、
    ウロキナーゼ、プロ−ウロキナーゼ、tPAあるいはそれ
    らの突然変異体または誘導体である請求項（24）記載の
    医薬組成物。