JP2023166465A - 抗ネクチン－４抗体、それを含むコンジュゲート、及びその適用 - Google Patents

抗ネクチン－４抗体、それを含むコンジュゲート、及びその適用 Download PDF

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Zhen Wang
デンニェン リュウ，
Dengnian Liu
フェン リー，
Fen Li
リャン シャオ，
Liang Xiao
トントン シュエ，
Tongtong Xue
ジュンユー ガー，
Junyou Ge
ジンイー ワン，
Jingyi Wang
ラ リュウ，
Le Liu
チー レン，
Qi Ren
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract

【課題】抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性断片、それを含む抗体コンジュゲート、並びに医薬の製造、特にがんを処置及び／又は予防するための医薬の製造におけるその使用を提供する。【解決手段】ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片であって、特定の３つの重鎖ＣＤＲ配列、若しくはそのバリアント、及び／若しくは特定の３つの軽鎖ＣＤＲ配列、若しくはそのバリアントを含み、該バリアントが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又は付加を有し、ヒト又はマウス免疫グロブリンに由来するフレームワーク領域をさらに含む、抗体又はその抗原結合性断片、並びに該抗体又はその抗原結合性断片を含む抗体コンジュゲートを提供する。【選択図】図１０Ｂ

Description

本出願は、２０２０年９月１６日に出願された、「Ａｎｔｉ－Ｎｅｃｔｉｎ－４ ａｎ
ｔｉｂｏｄｙ，ｃｏｎｊｕｇａｔｅ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｓａｍｅ，ａｎｄ ａｐｐｌ
ｉｃａｔｉｏｎ ｔｈｅｒｅｏｆ」という表題の中国特許出願第２０２０１０９７２３６
５．６号の優先権及び２０２０年１２月３１日に出願された「Ａｎｔｉ－Ｎｅｃｔｉｎ－
４ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ｃｏｎｊｕｇａｔｅ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｓａｍｅ，ａｎｄ
ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｈｅｒｅｏｆ」という表題の中国特許出願第２０２０１１６
２４８２６．７号の優先権を主張するものであり、これらの出願の全内容が参照により本
明細書に組み込まれる。
本発明は、生物医学の分野に属する。特に、本発明は、抗ネクチン－４抗体及びそれを
含むコンジュゲート、並びに、特にネクチン－４関連疾患の処置及び／又は予防における
その適用に関する。
ネクチン－４は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属するＰＶＲＬとしても公知の
ネクチンファミリータンパク質に属し、主にカルシウムイオン非依存性細胞接着結合の媒
介において機能する。ネクチンファミリーは、ネクチン－１、ネクチン－２、ネクチン－
３及びネクチン－４というメンバーを含み、約５１０～５５０アミノ酸のサイズを有し、
３つのＩｇ様ドメイン、膜貫通領域及び細胞内尾部領域によって形成される細胞外セグメ
ントを含む構造であるＩ型膜貫通タンパク質に属する。３つのＩｇ様ドメインはＩｇＶド
メイン１つとＩｇＣドメイン２つを有し、細胞内ドメインのＣ末端はアファディンタンパ
ク質のＰＤＺドメインとの結合に使用されるＧｌｕ／Ａｌａ－Ｘ－Ｔｙｒ－Ｖａｌで構成
される保存的領域を有する。ネクチン－４はこのタンパク質配列を有さないが、それでも
なお細胞内にアファディンタンパク質と結合することができる。
ネクチン－４は、アノイキスを阻害すること、及びＰＩ３Ｋ－ＡＫＴシグナル伝達経路
を活性化することにより、腫瘍細胞の生存及び増殖を促進し得る。ネクチン－４は胃がん
、肝細胞癌、非小細胞肺がん、膀胱がん、乳がん、膵がん、卵巣がん、頭頸部がん及び食
道がんにおいて発現され、非小細胞肺がん、膀胱がん、乳がん及び膵がんでは強力に発現
されることが試験により示されている。腫瘍におけるネクチン－４の高発現は患者の予後
不良と密接に関連する。したがって、ネクチン－４を腫瘍に対する薬物の開発の理想的な
標的として使用することができる。
現在のところ、ネクチン－４を標的とするＡＤＣ薬であるエンホルツマブベドチン（例
えば、ＷＯ２０１２／０４７７２４を参照されたい）が、尿路上皮癌の処置のためにすで
に利用可能である。エンホルツマブベドチンは、抗ネクチン－４完全ヒト抗体とコンジュ
ゲートしたＶＣ－ＭＭＡＥ薬であり、ＤＡＲ値は４である。第ＩＩＩ相臨床試験データか
ら、４名の患者で完全寛解（ＣＲ）が実現され、４１名の患者で部分奏効（ＰＲ）が実現
され、客観的奏効率（ＯＲＲ）は４１％であり、ＯＳ中央値は１３．６カ月に達し、応答
の持続時間の中央値は５．７５カ月であり、無増悪生存期間（ＰＦＳ）の中央値は５．４
カ月であったことが示された。チェックポイント阻害剤による処置群では８９名の患者で
ＯＲＲが４０％であり、チェックポイント阻害剤未処置群では２３名の患者でＯＲＲが４
４％であり、肝臓転移群では３３名の患者でＯＲＲが３９％であった。エンホルツマブベ
ドチンは優れた抗腫瘍有効性を有する。
ネクチン－４は、胎盤において発現され、又、いくつかの正常組織、例えば、皮膚、食
道、乳房、及び膀胱などにおいて弱く～中程度に発現されていた。エンホルツマブベドチ
ンの主要な臨床的毒性作用及び副作用は疲労（５４％）であり、グレード３以上の副作用
は、貧血（８％）、低ナトリウム血症（７％）、尿路感染症（７％）、高血糖（６％）で
あり、４名の患者が呼吸不全、尿路閉塞症、糖尿病性ケトアシドーシス、及び多臓器不全
を含めた重篤な薬物関連副作用を有した。このことから、エンホルツマブベドチンの毒性
作用及び副作用があまりにも重篤であることが示される。
一般的な一態様では、本発明は、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結
合性断片を提供し、該抗体又はその抗原結合性断片が、
（１ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ
：配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号４に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＣｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従っ
て定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若し
くはそのバリアント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアン
ト、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（１ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号１０に記載の配
列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＡｂｍ番号付けシステムに従って定義される以
下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリア
ント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配列番号８
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（１ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配
列番号１１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号１２に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＫａｂａｔ番号付けシステムに従って定
義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくは
そのバリアント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
若しくは
Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号１
１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号６３に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ
３若しくはそのバリアント；及び／又はＫａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される
以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリ
アント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配列番号
８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（１ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号１３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号１４に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号１５に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義
される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号１６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくは
そのバリアント、配列番号１７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント
、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（２ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ
：配列番号２１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号２２
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＣｈｏｔｈｉａ番号付けシステム
に従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそ
のバリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
若しくは
Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号１８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号２２に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＣｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って
定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若し
くはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリア
ント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（２ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号２７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号２８に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＡｂｍ番号付けシステムに従って定義され
る以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはその
バリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配
列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
若しくは
Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号３６に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号２８に記載の配列を含
むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
若しくはそのバリアント；及び／又はＡｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の
３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアン
ト、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配列番号２
６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（２ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配
列番号２９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３０に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含む
ＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＫａｂａｔ番号付けシステムに従って
定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若し
くはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリア
ント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号４
４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３０に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＫａｂａｔ番号付けシステムに従って定義され
る以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはその
バリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配
列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（２ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号３１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３２に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号３３に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義
される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくは
そのバリアント、配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント
、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
若しくは
ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号５４
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３２に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号３３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ
３若しくはそのバリアント；及び／又はＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以
下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリ
アント、配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配列番
号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（３ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ
：配列番号３９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号４０
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＣｈｏｔｈｉａ番号付けシステム
に従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそ
のバリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又
は
（３ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号４５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号４６に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＡｂｍ番号付けシステムに従って定義され
る以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはその
バリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配
列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（３ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配
列番号４７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号４８に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含む
ＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＫａｂａｔ番号付けシステムに従って
定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若し
くはそのバリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリア
ント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
若しくは
Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号４
７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号６４に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＫａｂａｔ番号付けシステムに従って定義され
る以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはその
バリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、配
列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（３ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号４９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号５０に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５１に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／又はＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義
される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号５２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくは
そのバリアント、配列番号５３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント
、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
を含み、
バリアントが、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又
は付加（例えば、１つ、２つ又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有し、置換が
、保存的置換であることが好ましい。
好ましい実施形態では、抗体又はその抗原結合性断片は、ヒト又はマウス免疫グロブリ
ンに由来するフレームワーク領域をさらに含む。
一態様では、本発明は、本発明の抗体又はその抗原結合性断片及び少なくとも１つの治
療剤を含む抗体コンジュゲートを提供する。
さらに別の態様では、本発明は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及びＣＡＲを発現する免
疫エフェクター細胞を提供する。
さらに別の態様では、本発明は、本発明の抗体又はその抗原結合性断片、及び追加的な
生物活性ポリペプチドを含む融合タンパク質にも関する。
本発明は、本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェク
ター細胞、多重特異性抗体又は融合タンパク質、並びに薬学的に許容できる担体及び／又
は賦形剤を含む医薬組成物にも関する。
さらに別の一般的な態様では、本発明は、がんを処置するための医薬の製造における、
本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、多
重特異性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物の使用に関する。
本発明は、がんの処置及び／又は予防における、本発明の抗体又はその抗原結合性断片
、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、多重特異性抗体、融合タンパク質又は医
薬組成物の使用にも関する。
別の一般的な態様では、本発明は、それを必要とする対象においてがんを処置する方法
であって、がんが、ネクチン－４に関連するものである、方法も提供する。当該方法は、
対象に、本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター
細胞、多重特異性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物を治療有効量で投与するステップ
を含む。
がんは、胃がん、肝臓がん、肝細胞癌、膀胱がん、尿路上皮がん、尿道がん、腎盂がん
、尿管がん、肺がん、非小細胞肺がん、乳がん、乳管がん、トリプルネガティブ乳がん、
膵がん、卵巣がん、頭頸部がん、結腸がん、直腸がん及び食道がんから選択されることが
好ましい。
Ａ５４９－ネクチン－４安定細胞株のフローサイトメトリーの結果を示すグラフである。 Ｔ２４－ネクチン－４安定細胞株のフローサイトメトリーの結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４マウス抗体の親和性検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺとヒトネクチン－４タンパク質の間の親和性についてのＥＬＩＳＡによる検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である７４ＨＺとヒトネクチン－４タンパク質の間の親和性についてのＥＬＩＳＡによる検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺとヒトネクチン－４タンパク質の間の親和性についてのＥＬＩＳＡによる検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺとカニクイザルネクチン－４タンパク質の間の親和性についてのＥＬＩＳＡによる検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である７４ＨＺとカニクイザルネクチン－４タンパク質の間の親和性についてのＥＬＩＳＡによる検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺとカニクイザルネクチン－４タンパク質の間の親和性についてのＥＬＩＳＡによる検出の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ、７４ＨＺのＴ４７Ｄ細胞に対する親和性についてのフローサイトメトリーの結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺとＮＣＩ－Ｎ８７細胞の間の親和性についてのフローサイトメトリーの結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ及び７４ＨＺのＴ４７Ｄ細胞におけるエンドサイトーシス活性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ及び７４ＨＺのＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞におけるエンドサイトーシス活性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ及び７４ＨＺのＡ５４９－ネクチン－４細胞におけるエンドサイトーシス活性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺのＴ２４－ネクチン－４細胞におけるエンドサイトーシス活性の検出結果を示すグラフである。 ヒトネクチン－４ドメインを認識する抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ及び７４ＨＺの検出結果を示すグラフである。 ヒトネクチン－４ドメインを認識する抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺの検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ及び７４ＨＺの競合活性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺの競合活性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺの特異性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である７４ＨＺの特異性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体である５６ＨＺの特異性の検出結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び７４ＨＺ－ＴＬ００１によるＡ５４９－ネクチン－４細胞の死滅の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び７４ＨＺ－ＴＬ００１によるＡ５４９細胞の死滅の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１によるＴ２４－ネクチン－４細胞の死滅の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１によるＴ２４細胞の死滅の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び７４ＨＺ－ＴＬ００１によるＴ４７Ｄ細胞の死滅の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び７４ＨＺ－ＴＬ００１によるＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞の死滅の結果を示すグラフである。 抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣである３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１によるＮＣＩ－Ｎ８７細胞の死滅の結果を示すグラフである。 ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの皮下ＮＣＩ－Ｈ３２２Ｍ細胞異種移植腫瘍モデルにおける、マウスの各群の経時的な腫瘍体積の変化を示すグラフである。 ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの皮下ＮＣＩ－Ｈ３２２Ｍ細胞異種移植腫瘍モデルにおける、マウスの各群の経時的な体重の変化を示すグラフである。 ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの皮下ＨｕＰｒｉｍｅ（登録商標）胃がんＢＬ９２００ ＰＤＸモデルにおける、マウスの各群の経時的な腫瘍体積の変化を示すグラフである。 ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの皮下ＨｕＰｒｉｍｅ（登録商標）胃がんＢＬ９２００ ＰＤＸモデルにおける、マウスの各群の経時的な体重の変化を示す。
定義
本発明では、別段の指定がない限り、本明細書で使用される科学技術用語は、当業者に
一般に理解される意味を有する。さらに、本明細書で使用される、タンパク質及び核酸化
学、分子生物学、細胞及び組織培養、微生物学、免疫学に関連する用語及び実験手順は、
対応する分野で広く使用されている用語及び常套的な手順である。同時に、本発明のより
良い理解のために、関連する用語の定義及び説明を以下に提示する。
本明細書で使用される場合、「少なくとも１つ（種）の」又は「１つ（種）又は複数（
種）」は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５
、１６、１７、１８、１９、２０（種）又はそれよりも多くを指し得る。
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という表現又はそれと同等の表現である「含む（ｉ
ｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」及び「有する（ｈａｖｉ
ｎｇ）」などは、オープンエンドであり、追加的な列挙されていない要素、ステップ又は
構成成分は排除されない。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という表現は、
明記されていない要素、ステップ又は構成成分のいずれも排除するものである。「から本
質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という表現は、
明記されている要素、ステップ又は構成成分、それに加えて、特許請求された主題の基本
的な及び新規の特徴に実質的に影響を及ぼさない任意選択の要素、ステップ又は構成成分
に範囲が限定されることを意味する。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という表現は、
「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」及び「
からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という表現を包含することが理解されるべき
である。
「任意選択の」又は「任意選択で」という用語は、その後に記載されている事象又は状
況が発生する場合も発生しない場合もあること、及びこの記載にはその事象又は状況が発
生する場合及びその事象又は状況が発生しない場合が包含されることを意味する。
本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」は、ペプチド結合によって連結した２つ
以上のアミノ酸で形成されるポリマーを指す。「タンパク質」は、１つ又は複数のポリペ
プチドで共有結合又は非共有結合により形成され得る。別段の指定のない限り、「ポリペ
プチド」及び「タンパク質」という用語は、本明細書では互換的に使用される。
本明細書で使用される場合、「抗体」は、少なくとも１つの抗原結合性部位を通じて抗
原エピトープに特異的に結合する免疫グロブリン又はその断片を指す。本明細書では、抗
体の定義は抗原結合性断片を包含する。したがって、「抗体」という用語は、多重特異性
抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト抗体、非ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、単
一ドメイン抗体、及び抗原結合性断片を含む。抗体は、合成抗体（例えば、化学的に又は
生物学的にカップリングすることによって作製された抗体）、酵素により処理された抗体
、又は組換えによって作製された抗体であり得る。本明細書に提示される抗体は、任意の
免疫グロブリン型（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、
任意のクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇ
Ａ２）、又はサブクラス（例えば、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ）を含む。一実施形態では
、本発明の抗体は、マウスモノクローナル抗体である。さらに別の実施形態では、本発明
の抗体は、ヒト化モノクローナル抗体である。
本明細書で使用される場合、「従来の抗体」又は「全長抗体」は、一般には、４つのポ
リペプチド：２つの重鎖（ＨＣ）及び２つの軽鎖（ＬＣ）を含む。各軽鎖は、Ｎ末端から
Ｃ末端までに「軽鎖可変領域（ＶＬ）」及び「軽鎖定常領域（ＣＬ）」を含む。各重鎖は
、Ｎ末端からＣ末端までに「重鎖可変領域（ＶＨ）」及び「重鎖定常領域（ＣＨ）」を含
む。重鎖定常領域は、Ｎ末端からＣ末端までに、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含み得る。
ある特定の免疫グロブリン型（例えば、ＩｇＭ及びＩｇＥ）では、重鎖定常領域は、ＣＨ
４をさらに含み得る。「Ｆｃ」断片は、ＣＨ２及びＣＨ３を含み、Ｆｃ受容体に対する結
合性部位をもたらす断片を指す。「ヒンジ領域」は、免疫グロブリンのＦａｂ断片とＦｃ
断片を接続する、抗体の一部を指す。一部の場合では、ヒンジ領域は、定常領域と膜貫通
ドメインを接続する、Ｔ細胞受容体の一部を指す。本明細書では、キメラ抗原受容体に関
して使用される場合、ヒンジ領域は、任意の機能的等価物を指すこともある。当業者は、
抗体のＶＨ、ＶＬ、ＣＬ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びヒンジ領域の位置を、公知のアル
ゴリズム及びソフトウェアに従って判断することができ、適用可能なアルゴリズム及びソ
フトウェアに関する記載は、例えば、Ｗｉｌｌｉａｍ Ｒ．Ｓｔｒｏｈｌ、Ｌｉｌａ Ｍ
．Ｓｔｒｏｈｌ、（２０１２）、Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ－ｆｕｎｃｔｉ
ｏｎ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ、Ｉｎ Ｗｏｏｄｈｅａｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ
Ｓｅｒｉｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｎｔｉｂｏ
ｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｗｏｏｄｈｅａｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、３７～５６
頁に見いだすことができる。
一般に、ＶＬ及びＶＨは、それぞれ、３つの高度に可変性の「相補性決定領域（ＣＤＲ
）」と４つの比較的保存的な「フレームワーク領域（ＦＲ）」を含み得、これらは、Ｎ末
端からＣ末端まで、ＦＲ１－ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ４の
順に接続している。本明細書では、軽鎖可変領域ＣＤＲ（ＣＤＲＬ）をＣＤＲ－Ｌ１、Ｃ
ＤＲ－Ｌ２及びＣＤＲ－Ｌ３と称することができ、重鎖可変領域ＣＤＲ（ＣＤＲＨ）をＣ
ＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２及びＣＤＲ－Ｈ３と称することができる。ＶＨとＶＬの対で構
成される６つのＣＤＲによって抗原結合性部位の結合特異性が決定され得るが、一部の場
合では、６つ未満（例えば、３つ、４つ、又は５つ）のＣＤＲを含む他の断片（例えば、
単一ドメイン抗体、ナノボディとしても公知）も抗原結合能を有すると一般に考えられる
。当業者は、当技術分野で周知の方法を使用して、例えば、Ｋａｂａｔ、Ａｂｍ又はＣｈ
ｏｔｈｉａ番号付け方法を使用してＣＤＲを同定することができる。これに関連して、複
数のＣＤＲ番号付けシステム、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ、Ａｂｍ、Ｋａｂａｔ及びＩＭＧ
Ｔを同じ可変領域に対して使用することができる。異なる番号付けシステムによって定義
されるＣＤＲは異なる場合があるが、同じ番号付けシステムで同定されるＣＤＲは抗原エ
ピトープに結合することが可能な効率的な抗原結合性部位を表すことが当業者には理解さ
れよう。ＣＤＲ番号付けシステムに関する記載は、例えば、Ｋａｂａｔ番号付けシステム
については：Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉ
ｔｉｏｎ、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ及びＨｕｍａｎ Ｓｅｒ
ｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ
番号付けシステムについては：Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ら（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ
ｌ．１９６：９０１－９１７；又はＩＭＧＴ番号付けシステムについては：Ｌｅｆｒａｎ
ｃ，Ｍ．－Ｐ．、２０１１（６）、ＩＭＧＴ、ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉ
ｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ Ｃｏｌｄ Ｓｐ
ｒｉｎｇ Ｈａｒｂ Ｐｒｏｔｏｃ．；Ａｂｍ番号付けシステムについては：Ｍａｒｔｉ
ｎ，Ａ．Ｃ．Ｒ．及びＪ．Ａｌｌｅｎ（２００７）“Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ｔ
ｏｏｌｓ ｆｏｒ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ”、Ｓ．Ｄｕｂｅｌ（編
）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｗｅｉ
ｎｈｅｉｍ：Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ、９５－１１８頁に見いだすことができ
る。
本明細書では、「フレームワーク領域」及び「フレームワーク」という用語は互換的に
使用される。本明細書で使用される場合、「フレームワーク領域」、「フレームワーク」
又は「ＦＲ」の残基という用語は、抗体の可変領域内の上で定義されたＣＤＲ残基以外の
アミノ酸残基を指す。
非共有結合性の相互作用を介した１つのＶＨ及び１つのＶＬからなる「Ｆｖ」断片が抗
原結合性部位を含有する最小の抗原結合性断片であると一般に考えられる。しかし、重鎖
の可変領域のみを含有する単一ドメイン抗体（ＶＨＨ、ｓｄＡｂ又はナノボディとしても
公知）も抗原結合能を有し得る。「単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）」は、ＶＨとＶＬをペプチドリ
ンカーによって連結することによって得ることができる。「ジスルフィド安定化Ｆｖ（ｄ
ｓＦｖ）」又は「ジスルフィド安定化単鎖Ｆｖ（ｓｃｄｓＦｖ又はｄｓｓｃＦｖ）」は、
それぞれＦｖ又はｓｃＦｖにジスルフィド結合を導入することによって得ることができる
。一部の実施形態では、例えば、本発明のＣＡＲにおける抗体コンジュゲート、多重特異
性抗体又は抗原結合性断片にはｓｃＦｖ又はｓｃｄｓＦｖが使用されることが好ましい。
本明細書で使用される場合、「Ｆａｂ」は、１つの完全な抗体軽鎖（ＶＬ－ＣＬ）及び
抗体重鎖可変領域及び１つの重鎖定常領域（ＶＨ－ＣＨ１、Ｆｄとしても公知）を含む。
単鎖「Ｆａｂ（ｓｃＦａｂ）」は、「Ｆａｂ」内のＣＬとＣＨ１をペプチドリンカーで連
結することによって得ることができる。「Ｆ（ａｂ’）２」は、基本的には、ヒンジ領域
においてジスルフィド結合によって連結した２つのＦａｂ断片を含む。「Ｆａｂ’」はＦ
（ａｂ’）２の半分であり、Ｆ（ａｂ’）２のヒンジ領域におけるジスルフィド結合を還
元することによって得ることができる。
抗体又は抗原結合性断片は、「一価」、「二価」、「三価」又は「四価」又はそれより
も多価であり得る、すなわち、複数（例えば、１つ、２つ、３つ、又は４つ以上）の抗原
結合性部位を有する。
抗体又は抗原結合性断片が２つ以上（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つ）の
抗原に結合する場合、「多重特異性抗体」、例えば、二重特異性抗体、三重特異性又は四
重特異性抗体と称することもでき、これらは、それぞれ２つ、３つ又は４つの抗原に結合
することが可能な多重特異性抗体を表す。
本明細書で使用される場合、「ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）」は、２つのｓｃＦｖ
を含み、２つの抗原結合性部位を有する（二価）の抗体を指し、各ｓｃＦｖのＶＨとＶＬ
は短いペプチドリンカー（およそ５～１０アミノ酸残基）によって連結しており、したが
って、ＶＨ鎖とＶＬ鎖が対になって（すなわち、第１のｓｃＦｖのＶＨと第２のｓｃＦｖ
のＶＬが対になり、第１のｓｃＦｖのＶＬと第２のｓｃＦｖのＶＨが対になって）抗原結
合性部位を形成している。ダイアボディは二重特異性抗体である。
本明細書で使用される場合、抗体の「抗原結合性断片」は、全長よりは短いが、全長抗
体の可変領域の少なくとも一部分を含み（例えば、１つ若しくは複数のＣＤＲ及び／又は
１つ若しくは複数の抗原結合性部位を含む）、したがって、全長抗体の抗原に特異的に結
合する能力の少なくとも一部分を保持する、全長抗体の一部を指す。抗原結合性断片とし
ては、例えば、全長抗体を酵素処理することによって作製された抗体誘導体、合成により
作製された誘導体、又は組換えによって作製された誘導体を挙げることができる。抗原結
合性断片の例としては、これだけに限定されないが、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、ｓｃｄ
ｓＦｖ、Ｆａｂ、ｓｃＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ダイアボディ、Ｆｄ及びＦｄ
’断片及び他の断片（例えば、修飾を含む断片）が挙げられる。抗原結合性断片は、例え
ば、ジスルフィド結合及び／又はペプチドリンカー及び／又は非共有結合性の相互作用に
よって連結することにより形成された複数のペプチド鎖を含んでもよい。
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、高度に均一な抗体
の集団を指し、ここで、その中に含まれる抗体分子は、微量で存在することがある可能性
のある天然に存在する変異以外は実質的に同一である。モノクローナル抗体は、一般には
、単一のエピトープに特異的に結合する。本発明において有用なモノクローナル抗体は、
例えば、組換えＤＮＡ法を使用したトランスジェニック動物（例えば、トランスジェニッ
クマウス）からの産生、不死化Ｂ細胞（例えば、Ｂ細胞ハイブリドーマ）からの産生、若
しくは細菌細胞、真核細胞若しくは植物細胞からの産生、又は、ファージ抗体ライブラリ
ーからの単離など、当技術分野で公知の任意の方法によって調製することができる。本発
明の抗体又はその抗原結合性断片は、モノクローナル抗体である。一実施形態では、本発
明の抗体又はその抗原結合性断片は、ヒト化モノクローナル抗体である。
「キメラ抗体」は、一部分（例えば、ＣＤＲ、ＦＲ、可変領域、定常領域、又はこれら
の組合せ）が、特定の種に由来する抗体の対応する配列と同一又は相同であり、残りの部
分が、別の種に由来する抗体の対応する配列の同一又は相同である抗体を指す。本明細書
で使用される場合、「キメラ抗体」には、異なる抗体クラス又はサブクラスに属する部分
を含む抗体も包含される。特定の実施形態では、キメラ抗体は、マウス抗体可変領域とヒ
ト抗体定常領域とを有する。
本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、非ヒト抗体配列とヒト抗体配列とを含
む抗体を指す。したがって、ヒト化抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する配列を最小
限に含むキメラ抗体である。非ヒト抗体は、任意の非ヒト種に由来する抗体であってもよ
く、非ヒト種に由来する部分を含む抗体（例えば、キメラ抗体）であってもよい。非ヒト
種としては、例えば、マウス、ラット、ウサギ、アルパカ、又は非ヒト霊長類を挙げるこ
とができる。非ヒト抗体からヒト化抗体を得るための技法は当業者には周知である。ヒト
化抗体は、非ヒト抗体（例えば、マウス抗体又はキメラ抗体）から、例えば、非ヒト抗体
（例えば、マウス抗体）のＣＤＲ配列をヒト抗体フレームワーク領域に移植することによ
って作製することができる。一部の場合では、ヒト化抗体の抗原結合能及び／又は安定性
を維持するために、非ヒト抗体（例えば、マウス抗体）のフレームワーク配列の重要なア
ミノ酸残基をヒト抗体のフレームワーク領域内に保持することができる、すなわち、「復
帰変異」を実施する（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．８１（２１）：６８５１－６８５５；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら（１９８４
）Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６０４－６０８）を参照されたい。
本明細書で使用される場合、アミノ酸配列の「パーセント（％）配列同一性」、「配列
同一性」は、当技術分野において広く受け入れられている定義を有し、配列アラインメン
ト（例えば、手動検査又は周知のアルゴリズムによるもの）によって決定される２つのポ
リペプチド配列間のパーセント同一性を指す。パーセント同一性は、当業者公知の方法を
使用して、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、Ｃｌｕｓｔａｌ Ｏｍｅｇａ、ＦＡＳ
ＴＡソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して決定する
ことができる。
「親和性」又は「結合親和性」は、抗体と抗原の間の非共有結合性の相互作用による結
合の強度を測定するために使用される。「親和性」の大きさは、通常、平衡解離定数ＫＤ
又はＥＣ５０として報告することができる。ＫＤは、平衡会合定数（ｋａ）及び平衡解離
定数（ｋｄ）を測定することによって算出することができる：ＫＤ＝ｋｄ／ｋａ。親和性
は、例えば、バイオフィルム干渉法（例えば、Ｏｃｔｅｔ Ｆｏｒｔｅｂｉｏ検出システ
ムを使用することができる）、ラジオイムノアッセイ、表面プラズモン共鳴、酵素結合免
疫測定法、又はフローサイトメトリーなどの、当技術分野で公知の従来の技法を使用して
決定することができる。
本明細書で使用される場合、抗体と抗原の「特異的結合」とは、抗体と抗原の高親和性
での結合を指す。一般には、特異的に結合している抗体と抗原の間のＫＤ値は、少なくと
も約１０－６～少なくとも約１０－９Ｍ未満、例えば、少なくとも約１０－６Ｍ、少なく
とも約１０－７Ｍ、少なくとも約１０－８Ｍ、少なくとも約１０－９Ｍである。
本明細書で使用される場合、参照アミノ酸配列「由来の（ｆｒｏｍ）」又は「に由来す
る（ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ）」アミノ酸配列は、参照アミノ酸配列と部分的に又は完
全に同一又は相同である。例えば、ヒト免疫グロブリンに由来する重鎖定常領域のアミノ
酸配列は、それが由来する野生型ヒト免疫グロブリンの重鎖定常領域の配列と比較して、
少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくと
も９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％
、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性
を有する。
本明細書で使用される場合、ポリペプチド又はアミノ酸配列の「バリアント」は、それ
が由来するポリペプチド又はアミノ酸配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の変異又は
修飾を有する。アミノ酸変異には、アミノ酸の置換、欠失又は付加が含まれる。ポリペプ
チド又はタンパク質の非必須領域内のアミノ酸を、一般にそのポリペプチド又はタンパク
質生物活性を変更しない適当な保存的アミノ酸で置換することができることが当業者には
理解されよう（例えば、Ｗａｔｓｏｎら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ
ｔｈｅ Ｇｅｎｅ、４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ、１９８７、Ｔｈｅ Ｂｅｎｊａｍｉｎ／Ｃ
ｕｍｍｉｎｇｓ Ｐｕｂ．ｃｏ．、２２４頁を参照されたい）。適切な保存的置換は当業
者には周知である。アミノ酸残基の一般的な保存的置換のいくつかの非限定的な例を下記
の表に列挙する。ある特定の場合では、アミノ酸置換は非保存的置換である。抗体又は抗
体断片の特性を変更するため、例えば、抗体グリコシル化修飾の型を変更するため、鎖間
ジスルフィド結合を形成する能力を変更するため、又は抗体コンジュゲートのための活性
な基をもたらすために、抗体又は抗体断片に対してアミノ酸変異又は修飾をなすことがで
きることが当業者には理解されよう。そのようなアミノ酸変異又は修飾を含む抗体又はそ
の抗原結合性断片も本発明の抗体又はその抗原結合性断片の範囲内に包含される。
Figure 2023166465000002
本明細書で使用される場合、「ポリヌクレオチド」、「核酸」及び「核酸分子」という
用語は、一般にデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）及びリボ核酸（ＲＮＡ）を構成し得る、少な
くとも２つの連結したヌクレオチド又はヌクレオチド誘導体を含むオリゴマー又はポリマ
ーを指す。
本明細書で使用される場合、「単離された」とは、材料（例えば、核酸分子又はポリペ
プチド）が、それが存在する供給源又は環境から分離されていること、すなわち、いかな
る他の構成要素も実質的に含まないことを意味する。
本明細書で使用される場合、「ベクター」は、外因性核酸を宿主細胞に導入するために
使用されるビヒクルであり、ベクターが適当な宿主細胞に導入されてその宿主細胞が形質
転換されると、外因性核酸が増幅又は発現される。ベクターは、一般に、エピソームとし
て留まるが、遺伝子又はその一部がゲノムの染色体に組み込まれるように設計することも
できる。本明細書で使用される場合、ベクターの定義には、プラスミド、直鎖化されたプ
ラスミド、ウイルスベクター、コスミド、ファージベクター、ファージミド、人工染色体
（例えば、酵母人工染色体及び哺乳動物人工染色体）などが包含される。
本明細書で使用される場合、「発現ベクター」は、ＤＮＡを発現させることが可能なベ
クターを指し、ここで、ＤＮＡは、ＤＮＡ発現に影響を及ぼすことが可能な調節配列（例
えば、プロモーター、リボソーム結合性部位）に作動可能に連結している。調節配列には
プロモーター及びターミネーター配列を含めることができ、任意選択で、複製開始点、選
択マーカー、エンハンサー、ポリアデニル化シグナルなどを含めることもできる。発現ベ
クターは、適当な宿主細胞に導入されると、クローニングされたＤＮＡの発現をもたらす
、プラスミド、ファージベクター、組換えウイルス又は他のベクターであり得る。適当な
発現ベクターは当業者には周知であり、真核細胞及び／又は原核細胞において複製可能な
発現ベクター並びにエピソームとして留まる発現ベクター又は宿主細胞のゲノムに組み込
まれる発現ベクターが含まれる。
本明細書で使用される場合、「宿主細胞」とは、ベクターを受け入れる、維持する、複
製する又は増幅するために使用される細胞である。宿主細胞はまた、核酸又はベクターに
よってコードされるポリペプチドを発現させるためにも使用することができる。宿主細胞
は真核細胞のこともあり、原核細胞のこともある。
本明細書で使用される場合、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、疾患／症
状の好転、例えば、疾患／症状を軽減又は排除すること、疾患／症状の発症、増悪及び／
又は悪化を予防する又は遅延させることを指す。したがって、処置には、予防、処置及び
／又は治癒が含まれる。
「有効量」は、疾患の症状の重症度を低減させる、疾患の無症候性期間の頻度及び持続
時間を増大させる、又は疾患への罹患に起因する損傷若しくは能力障害を予防するために
十分な用量を指す。「有効量」は、疾患又は症状を予防する、治癒させる、好転させる、
遅らせる又は部分的に遅らせるために必要な量を指す。例えば、腫瘍の処置に関しては、
本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、又
は医薬組成物の「有効量」は、処置を受けていない対象と比べて、腫瘍細胞成長又は腫瘍
成長を少なくとも約１０％、好ましくは少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも
約３０％、より好ましくは少なくとも約４０％、より好ましくは少なくとも約５０％、よ
り好ましくは少なくとも約６０％、より好ましくは少なくとも約７０％、より好ましくは
少なくとも約８０％阻害するものであることが好ましい。腫瘍成長の阻害の有効性は、当
技術分野における従来の腫瘍の動物モデル、例えば、自然発生腫瘍、誘導された腫瘍、及
び移植された腫瘍に関する動物モデルを使用して評価することができる。或いは、細胞成
長を阻害する能力を、当技術分野で周知のｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを使用して試験する
こともできる。本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェ
クター細胞、又は医薬組成物の有効量は、腫瘍サイズを縮小させる、又は他の点で対象に
おける症状を緩和させる（例えば、転移又は再発を予防及び／又は処置する）ことが可能
なものである。当業者は、例えば、対象の年齢、健康状態、性別、症状の重症度、特定の
組成物又は投与経路などの因子に基づいて、有効量を決定することができる。有効量は、
１回又は複数回の投与で投与することができる。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤」という用語
は、対象及び活性成分に対して薬理学的に及び／又は生理的に適合性の担体及び／又は賦
形剤を指し、当技術分野において周知であり（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａ
ｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．、Ｇｅｎｎａｒｏ ＡＲ編、第１９版、Ｐ
ｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ：Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５
を参照されたい）、それらとして、これだけに限定されないが、ｐＨ調整剤、界面活性物
質、アジュバント、イオン強度増強剤、希釈剤、浸透圧を維持するための作用剤、吸収を
遅延させるための作用剤、保存剤が挙げられる。例えば、ｐＨ調整剤としては、これだけ
に限定されないが、リン酸緩衝液が挙げられる。界面活性物質としては、これだけに限定
されないが、カチオン性、陰イオン性、又は非イオン界面活性物質、例えばＴｗｅｅｎ－
８０などが挙げられる。イオン強度増強剤としては、これだけに限定されないが、塩化ナ
トリウムが挙げられる。保存剤としては、これだけに限定されないが、例えば、パラベン
、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などの種々の抗細菌剤及び抗真菌剤が挙げ
られる。浸透圧を維持するための作用剤としては、これだけに限定されないが、糖、Ｎａ
Ｃｌなどが挙げられる。吸収を遅延させるための作用剤としては、これだけに限定されな
いが、モノステアリン酸塩及びゼラチンが挙げられる。希釈剤としては、これだけに限定
されないが、水、水性緩衝液（例えば、緩衝生理食塩水）、アルコール及びポリオール（
例えば、グリセロール）などが挙げられる。保存剤としては、これだけに限定されないが
、例えば、チメロサール、２－フェノキシエタノール、パラベン、クロロブタノール、フ
ェノール、ソルビン酸などの種々の抗細菌剤及び抗真菌剤が挙げられる。安定化剤は、当
業者に一般に理解される意味を有し、薬物中の活性成分の所望の活性を安定化することが
できるものであり、これだけに限定されないが、グルタミン酸ナトリウム、ゼラチン、Ｓ
ＰＧＡ、糖（例えば、ソルビトール、マンニトール、デンプン、スクロース、ラクトース
、グルカン、又はグルコース）、アミノ酸（例えば、グルタミン酸、グリシン）、タンパ
ク質（例えば、乾燥ホエー、アルブミン又はカゼイン）又はその分解生成物（例えば、ラ
クトアルブミン加水分解産物）などが含まれる。
本明細書で使用される場合、哺乳動物の例としては、これだけに限定されないが、ヒト
、非ヒト霊長類、ラット、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、イヌ、ネコなどが挙げら
れる。本明細書で使用される場合、「対象（ｏｂｊｅｃｔ）」という用語は、ヒトなどの
哺乳動物を指す。一部の実施形態では、対象はヒトである。一部の実施形態では、対象（
ｓｕｂｊｅｃｔ）は、がん患者、ヒト又は動物である。本明細書では、「対象（ｏｂｊｅ
ｃｔ）」及び「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」という用語は、互換的に使用される。
抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性断片
一般的な一態様では、本発明は、ネクチン－４を特異的に認識し、それに結合する抗ネ
クチン－４抗体又はその抗原結合性断片を提供する。
ネクチン－４は、ヒトネクチン－４又は非ヒトネクチン－４の全ての又は部分的なアミ
ノ酸配列を含むタンパク質であり得る。ネクチン－４はヒトネクチン－４であることが好
ましい。ヒトネクチン－４は、例えば、Ｕｎｉｐｒｏｔ識別番号（ＩＤ）：Ｑ９６ＮＹ８
－１によって示されるアミノ酸配列を有し得る。非ヒトネクチン－４は、例えば、非ヒト
霊長類カニクイザルネクチン－４などの哺乳動物ネクチン－４であってもよく、例えばＵ
ｎｉｐｒｏｔ識別番号（ＩＤ）：Ｌ０Ｎ６Ｄ９によって示されるアミノ酸配列を有し得る
。非ヒトネクチン－４はまた、例えば、ラットネクチン－４であってもよく、例えばＵｎ
ｉｐｒｏｔ識別番号（ＩＤ）：Ｄ３ＺＥＴ１によって示されるアミノ酸配列を有し得る。
非ヒトネクチン－４はまた、例えば、マウスネクチン－４であってもよく、例えばＵｎｉ
ｐｒｏｔ識別番号（ＩＤ）：Ｑ８Ｒ００７によって示されるアミノ酸配列を有し得る。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合性断片は、ネクチン－４のＩｇＶドメイン
に特異的に結合することが可能である。一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合性断
片は、ヒトネクチン－４のＩｇＶドメインに特異的に結合することが可能である。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合性断片は、ネクチン－４に特異的に結合し
、それとネクチン－１との相互作用を遮断することが可能である。
一部の実施形態では、抗ネクチン－４抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ（ＣＤＲＨ）：ＣＤＲ
－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ＣＤＲ－Ｈ
１、ＣＤＲ－Ｈ２及びＣＤＲ－Ｈ３は、表１のＣＤＲＨ群から選択される。
Figure 2023166465000003
一部の実施形態では、抗ネクチン－４抗体は、３つの軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲＬ）：ＣＤＲ
－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ＣＤＲ－Ｌ
１、ＣＤＲ－Ｌ２及びＣＤＲ－Ｌ３は、表２のＣＤＲＬ群から選択される。

Figure 2023166465000004
相補性決定領域（ＣＤＲ）
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号４に記載の配
列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する
抗体又はその抗原結合性断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以
下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント
、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、配列番号８に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号
９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号１０に記載の配列を含
むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３又はそ
のバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又
はその抗原結合性断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖
ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配列番号７に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号１１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号１２又は６３に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｈ３又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に
結合する抗体又はその抗原結合性断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義され
る以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリア
ント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、配列番号８に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号１３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号１４に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号１５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する
抗体又はその抗原結合性断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３
つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号１６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配
列番号１７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番号８に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は
、
（ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
ＣＤＲ：配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号
４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１
若しくはそのバリアント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリ
アント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
配列番号９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号１０に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しく
はそのバリアント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント
、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
Ｒ：配列番号１１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号１
２若しくは６３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号６に記載の配列を含む
ＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若し
くはそのバリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアン
ト；又は
（ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
：配列番号１３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号１４
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号１５に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号１６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ
１若しくはそのバリアント、配列番号１７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはその
バリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
を含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
配列番号２１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号２２に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ
－Ｈ３又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結
合する抗体又はその抗原結合性断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義さ
れる以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバ
リアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列
番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号
２７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号２８に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３又
はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗
体又はその抗原結合性断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの
軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配列番
号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番号２６に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号２９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号３０に記載の配
列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ
３又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合す
る抗体又はその抗原結合性断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下
の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント
、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、配列番号２６に記
載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号３１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号３２に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号３３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する
抗体又はその抗原結合性断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３
つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配
列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、配列番号２６に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は
、
（ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
ＣＤＲ：配列番号２１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番
号２２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号２４に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しく
はそのバリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアン
ト；又は
（ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
配列番号２７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号２８に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含
むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１
若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバ
リアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
Ｒ：配列番号２９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３
０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそ
のバリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
：配列番号３１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３２
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号３３に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ
１若しくはそのバリアント、配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはその
バリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
を含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
配列番号１８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号２２に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ
－Ｈ３又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結
合する抗体又はその抗原結合性断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義さ
れる以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバ
リアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列
番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号
３６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号２８に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３又
はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗
体又はその抗原結合性断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの
軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配列番
号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番号２６に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号４４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号３０に記載の配
列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ
３又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合す
る抗体又はその抗原結合性断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下
の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント
、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番号２６
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号５４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３２に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号３３に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｈ３若しくはそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異
的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義さ
れる以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそ
のバリアント、配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
及び配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアントをさらに含む
。
特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は
、
（ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
ＣＤＲ：配列番号１８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番
号２２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号２４に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しく
はそのバリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアン
ト；又は
（ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
配列番号３６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号２８に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列を含
むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１
若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバ
リアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
Ｒ：配列番号４４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３
０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号２３に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－
Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそ
のバリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
又は
（ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
：配列番号５４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号３２
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号３３に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ
１若しくはそのバリアント、配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはその
バリアント、配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
を含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
配列番号３９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号４０に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ
－Ｈ３又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結
合する抗体又はその抗原結合性断片は、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義さ
れる以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバ
リアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列
番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番号
４５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号４６に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３又
はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗
体又はその抗原結合性断片は、Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの
軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配列番
号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番号８に記載の配
列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列
番号４７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号４８又は６４に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含むＣ
ＤＲ－Ｈ３又はそのバリアントを含む他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に
結合する抗体又はその抗原結合性断片は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義され
る以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリ
アント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番
号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
一部の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：配列番
号４９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリアント、配列番号５０に記載の配列
を含むＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、配列番号５１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
又はそのバリアントを含む。他の特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する
抗体又はその抗原結合性断片は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３
つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号５２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、配
列番号５３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、及び配列番号８に記載
の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントを含む。
特定の実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は
、
（ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
ＣＤＲ：配列番号３９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番
号４０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１に記載の
配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号４２に記載の配列を含むＣＤ
Ｒ－Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しく
はそのバリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
；又は
（ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
配列番号４５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号４６に
記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１に記載の配列を含
むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１
若しくはそのバリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバ
リアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
（ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
Ｒ：配列番号４７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号４
８若しくは６４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号４１
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号４２に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ
２若しくはそのバリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバ
リアント；又は
（ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
：配列番号４９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、配列番号５０
に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、配列番号５１に記載の配列を
含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、配列番号５２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ
１若しくはそのバリアント、配列番号５３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはその
バリアント、配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
を含む。
上記のネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片の一部の実施形態
では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８０％、少なくとも８５
％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少な
くとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９
８％、少なくとも９９％、若しくは１００％の配列同一性を有する、又はそれが由来する
配列と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１つ、
２つ若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有し、置換は、保存的置換で
あることが好ましい。
フレームワーク領域（ＦＲ）
一部の実施形態では、ＶＨは、重鎖フレームワーク領域（ＦＲ）をさらに含む。他の実
施形態では、ＶＬは、軽鎖フレームワーク領域（ＦＲ）をさらに含む。重鎖フレームワー
ク領域及び／又は軽鎖フレームワーク領域は、それぞれ独立に、任意の種の免疫グロブリ
ンのフレームワーク領域に由来し得る。重鎖フレームワーク領域及び軽鎖フレームワーク
領域は、それぞれ独立に、ヒト又はマウス免疫グロブリンの重鎖フレームワーク領域及び
軽鎖フレームワーク領域に由来することが好ましい。一実施形態では、重鎖フレームワー
ク領域及び軽鎖フレームワーク領域は、それぞれ独立に、マウス免疫グロブリンに由来す
る重鎖フレームワーク領域及び軽鎖フレームワーク領域、ヒト免疫グロブリンの重鎖フレ
ームワーク領域及び軽鎖フレームワーク領域、又はこれらの組合せに由来するアミノ酸配
列を含む。一実施形態では、重鎖フレームワーク領域及び軽鎖フレームワーク領域は、そ
れぞれ独立に、ヒト生殖細胞系列抗体の重鎖フレームワーク領域及び軽鎖フレームワーク
領域に由来するアミノ酸配列を含む。
ある特定の好ましい実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合性断片のＶＨは、ヒ
ト免疫グロブリンに由来する重鎖フレームワーク領域を含み、／又は、抗体又はその抗原
結合性断片のＶＬは、ヒト免疫グロブリンに由来する軽鎖フレームワーク領域を含む。し
たがって、ある特定の好ましい実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合性断片は、
ヒト化抗体又はその抗原結合性断片である。そのような実施形態では、本発明の抗体又は
その抗原結合性断片の重鎖フレームワーク領域及び／又は軽鎖フレームワーク領域は、１
つ又は複数の非ヒト（例えば、マウス）アミノ酸残基を含むことがあり、例えば、重鎖フ
レームワーク領域及び／又は軽鎖フレームワーク領域は、１つ又は複数のアミノ酸復帰変
異を含むことがあり、これらの復帰変異には対応するマウスアミノ酸残基が存在する。
好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片
は、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さらに別の好まし
い実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は、配列
番号２に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片
は、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアント、及び配列番号２に記載の
配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片
は、配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さらに別の好ま
しい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は、配
列番号５６に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片
は、配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアント、及び配列番号５６に記
載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
さらに別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原
結合性断片は、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さら
に別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、配列番号２０に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
さらに別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原
結合性断片は、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアント、及び配列番
号２０に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
さらに別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原
結合性断片は、配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さら
に別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、配列番号５８に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
さらに別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原
結合性断片は、配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアント、及び配列番
号５８に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さらに別の
好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は
、配列番号３８に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアント、及び配列番号３８
に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さらに別の
好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片は
、配列番号６０に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
別の好ましい実施形態では、ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性
断片は、配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアント、及び配列番号６０
に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合性断片は、
（１）配列番号１に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列番
号２に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
（２）配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
番号２０に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
（３）配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
番号３８に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
（４）配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
番号５６に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
（５）配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
番号５８に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
（６）配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
番号６０に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント
を含む。
上記のある実施形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８
０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少
なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも
９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。或い
は、バリアントは、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失
又は付加（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ又は５つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）
を有する。置換は保存的置換であることが好ましい。
定常領域
一部の実施形態では、抗ネクチン－４抗体は、重鎖定常領域をさらに含む。別の実施形
態では、抗ネクチン－４抗体は、軽鎖定常領域をさらに含む。重鎖定常領域及び軽鎖定常
領域は、それぞれ独立に、任意の種の免疫グロブリンの重鎖定常領域及び軽鎖定常領域に
由来し得る。好ましい実施形態では、重鎖定常領域及び軽鎖定常領域は、それぞれ独立に
、マウス免疫グロブリンの重鎖定常領域若しくはそのバリアント及び軽鎖定常領域若しく
はそのバリアントに由来する。より好ましい実施形態では、重鎖定常領域及び軽鎖定常領
域は、それぞれ独立に、ヒト免疫グロブリンの重鎖定常領域若しくはそのバリアント及び
軽鎖定常領域若しくはそのバリアントに由来する。バリアントは、それが由来する野生型
配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又は付加（例えば、最大２０個、最
大１５個、最大１０個、又は最大５個のアミノ酸の置換、欠失又は付加；例えば、１個、
２個、３個、４個又は５個のアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有する。
重鎖定常領域は、ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、又はこれらの組合せの少なく
とも一部分から選択されるアミノ酸配列を含み得る。一実施形態では、重鎖定常領域は、
ＣＨ１を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、ＣＨ１－ヒンジ領域－ＣＨ２を含む。
一実施形態では、重鎖定常領域は、ＣＨ１－ヒンジ領域－ＣＨ２－ＣＨ３を含む。一部の
実施形態では、重鎖定常領域は、ＣＨ４をさらに含む。重鎖定常領域は、任意の亜型（例
えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ）、任意のクラス（例えば、ＩｇＧ
１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）、又は任意のサブクラス
（例えば、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ）、又はこれらの組合せの免疫グロブリンの重鎖定
常領域に由来し得る。重鎖定常領域はＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、
ＩｇＧ４）重鎖定常領域に由来することが好ましい。好ましい実施形態では、重鎖定常領
域はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に由来する。
軽鎖定常領域は、λ（ラムダ）軽鎖又はκ（カッパ）軽鎖定常領域に由来し得る。好ま
しい実施形態では、軽鎖定常領域はヒトκ軽鎖定常領域である。
特定の実施形態では、重鎖定常領域は、配列番号６１に記載の配列又はそのバリアント
を含む。特定の実施形態では、軽鎖定常領域は、配列番号６２に記載の配列又はそのバリ
アントを含む。これらの実施形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少
なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも
９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、
少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を
有する。或いは、バリアントは、それが由来する配列と比較して最大２０個のアミノ酸の
保存的置換（例えば、最大１５個、最大１０個、又は最大５個のアミノ酸の保存的置換；
例えば、１個、２個、３個、４個又は５個のアミノ酸の保存的置換）を有する。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合性断片は、重鎖及び軽鎖を含み、ここで、
（ａ）重鎖は、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び配列
番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域若しくはそのバリアントを含み、軽鎖は、配
列番号２に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント及び配列番号６２に記載の配
列を有する軽鎖定常領域若しくはそのバリアントを含む；又は
（ｂ）重鎖は、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び配
列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域若しくはそのバリアントを含み、軽鎖は、
配列番号２０に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント及び配列番号６２に記載
の配列を有する軽鎖定常領域若しくはそのバリアントを含む；又は
（ｃ）重鎖は、配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び配
列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域若しくはそのバリアントを含み、軽鎖は、
配列番号３８に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント及び配列番号６２に記載
の配列を有する軽鎖定常領域若しくはそのバリアントを含む；又は
（ｄ）重鎖は、配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び配
列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域若しくはそのバリアントを含み、軽鎖は、
配列番号５６に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント及び配列番号６２に記載
の配列を有する軽鎖定常領域若しくはそのバリアントを含む；又は
（ｅ）重鎖は、配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び配
列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域若しくはそのバリアントを含み、軽鎖は、
配列番号５８に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント及び配列番号６２に記載
の配列を有する軽鎖定常領域若しくはそのバリアントを含む；又は
（ｆ）重鎖は、配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び配
列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域若しくはそのバリアントを含み、軽鎖は、
配列番号６０に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント及び配列番号６２に記載
の配列を有する軽鎖定常領域若しくはそのバリアントを含む。
一実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合性断片は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ（ｄｓＦｖ）、ダイアボディ、
二重特異性抗体及び多重特異性抗体からなる群から選択される。
一部の実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合性断片は、マウス抗体、キメラ抗
体、又はヒト化抗体である。
マウス抗体
一実施形態では、本発明の抗ネクチン－４抗体はマウス抗体であり、ＶＨ及びＶＬを含
み、ここで、ＶＨは上記の重鎖ＣＤＲ及び重鎖フレームワーク領域を含み、ＶＬは上記の
軽鎖ＣＤＲ及び軽鎖フレームワーク領域を含み、重鎖フレームワーク領域及び軽鎖フレー
ムワーク領域は、それぞれ独立に、マウス免疫グロブリンフレームワーク領域に由来する
アミノ酸配列を含む。一実施形態では、本発明の抗ネクチン－４抗体は、マウスハイブリ
ドーマ細胞によって産生されたモノクローナル抗体である。
特定の実施形態では、マウス抗体は、表１の群ａに記載されているＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤ
Ｒ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及びマウス免疫グロブリンフレームワーク領域に由
来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む。好ましい実施形態では、マウ
ス抗体は、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さらに別の
特定の実施形態では、マウス抗体は、表２の群ａに記載されているＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ
－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、及びマウス免疫グロブリンフレームワーク領域に由来
するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域をさらに含む。好ましい実施形態では、
マウス抗体は、配列番号２に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
別の特定の実施形態では、マウス抗体は、表１の群ｂに記載されているＣＤＲ－Ｈ１、
ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及びマウス免疫グロブリンフレームワーク領域
に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む。好ましい実施形態では、
マウス抗体は、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む。さら
に別の特定の実施形態では、マウス抗体は、表２の群ｂに記載されているＣＤＲ－Ｌ１、
ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ及びマウス免疫グロブリンフレームワーク領域に
由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域をさらに含む。好ましい実施形態で
は、マウス抗体は、配列番号２０に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを含む。
さらに別の特定の実施形態では、マウス抗体は、表１の群ｃに記載されているＣＤＲ－
Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及びマウス免疫グロブリンフレームワー
ク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む。好ましい実施形態
では、マウス抗体は、配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ又はそのバリアントを含む
。さらに別の特定の実施形態では、マウス抗体は、表２の群ｃに記載されているＣＤＲＬ
１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、及びマウス免疫グロブリンフレームワーク
領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域をさらに含む。好ましい実施
形態では、マウス抗体は、配列番号３８に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリアントを
含む。
上記のある実施形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８
０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少
なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも
９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。或い
は、バリアントは、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失
又は付加（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ又は５つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）
を有する。置換は保存的置換であることが好ましい。
特定の実施形態では、マウス抗体は、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ及び配列番
号２に記載の配列を有するＶＬを含む。
別の特定の実施形態では、マウス抗体は、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ及び
配列番号２０に記載の配列を有するＶＬを含む。
さらに別の特定の実施形態では、マウス抗体は、配列番号３７に記載の配列を有するＶ
Ｈ及び配列番号３８に記載の配列を有するＶＬを含む。
キメラ抗体
一実施形態では、本発明の抗ネクチン－４抗体はキメラ抗体である。一部の実施形態で
は、キメラ抗体は、上記のマウス抗体の重鎖ＣＤＲ及び／又は軽鎖ＣＤＲを含む。一部の
実施形態では、キメラ抗体は、上記のマウス抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域
を含む。一部の実施形態では、キメラ抗体は、上記のマウス抗体の重鎖可変領域及び軽鎖
可変領域、並びに重鎖定常領域及び／又は軽鎖定常領域を含み、ここで、重鎖定常領域は
、非マウス免疫グロブリンの重鎖定常領域に由来する、及び／又は、軽鎖定常領域は、非
マウス免疫グロブリンの軽鎖定常領域に由来する。好ましい実施形態では、重鎖定常領域
は、ヒト免疫グロブリン重鎖定常領域に由来する、及び／又は、軽鎖定常領域は、ヒト免
疫グロブリン軽鎖定常領域に由来する。好ましい実施形態では、重鎖定常領域はヒト免疫
グロブリン重鎖定常領域に由来し、軽鎖定常領域はヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域に由
来する。
一部の実施形態では、キメラ抗体は、表１の群ａに記載されているマウス抗体のＣＤＲ
－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む。一部の実施形態では、キメラ抗体は、表２
の群ａに記載されているマウス抗体のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３をさら
に含む。
特定の実施形態では、キメラ抗体は、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ又はそのバ
リアントを含む。特定の実施形態では、キメラ抗体は、配列番号２に記載の配列を有する
ＶＬ又はそのバリアントをさらに含む。
別の特定の実施形態では、キメラ抗体は、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ又は
そのバリアントを含む。特定の実施形態では、キメラ抗体は、配列番号２０に記載の配列
を有するＶＬ又はそのバリアントをさらに含む。
さらに別の特定の実施形態では、キメラ抗体は、配列番号３７に記載の配列を有するＶ
Ｈ又はそのバリアントを含む。特定の実施形態では、キメラ抗体は、配列番号３８に記載
の配列を有するＶＬ又はそのバリアントをさらに含む。
上記のある実施形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８
０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少
なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも
９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。或い
は、バリアントは、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失
又は付加（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ又は５つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）
を有する。置換は保存的置換であることが好ましい。
一部の実施形態では、上記のキメラ抗体は、重鎖定常領域及び／又は軽鎖定常領域をさ
らに含む。好ましい実施形態では、重鎖定常領域はヒト免疫グロブリン重鎖定常領域に由
来し、軽鎖定常領域はヒト免疫グロブリン軽鎖定常領域に由来する。一実施形態では、重
鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４重鎖定常領域に由来する
。一実施形態では、重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に由来する。一実施形態
では、軽鎖定常領域は、ヒトλ又はκ軽鎖定常領域に由来する。一実施形態では、軽鎖定
常領域は、ヒトκ軽鎖定常領域に由来する。特定の実施形態では、重鎖定常領域は、配列
番号６１に記載のアミノ酸配列又はそのバリアントを含む。特定の実施形態では、軽鎖定
常領域は、配列番号６２に記載のアミノ酸配列又はそのバリアントを含む。これらの実施
形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８０％、少なくとも
８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、
少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくと
も９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有する。或いは、バリアント
は、それが由来する配列と比較して最大２０個のアミノ酸の保存的置換（例えば、最大１
５個、最大１０個、又は最大５個のアミノ酸の保存的置換；例えば、１個、２個、３個、
４個又は５個のアミノ酸の保存的置換）を有する。
特定の実施形態では、キメラ抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号１に記載
の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖は
、配列番号２に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号６２に記載の配列を有する軽鎖定常
領域を含む。
別の特定の実施形態では、キメラ抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号１９
に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域を含み、
軽鎖は、配列番号２０に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号６２に記載の配列を有する
軽鎖定常領域を含む。
さらに別の特定の実施形態では、キメラ抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番
号３７に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域を
含み、軽鎖は、配列番号３８に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号６２に記載の配列を
有する軽鎖定常領域を含む。
ヒト化抗体
一実施形態では、本発明の抗ネクチン－４抗体はヒト化抗体であり、ＶＨ及びＶＬを含
み、ここで、ＶＨは、上記の重鎖ＣＤＲ及び重鎖フレームワーク領域を含み、ＶＬは、上
記の軽鎖ＣＤＲ及び軽鎖フレームワーク領域を含み、重鎖フレームワーク領域及び軽鎖フ
レームワーク領域は、それぞれ独立に、ヒト免疫グロブリン重鎖フレームワーク領域及び
軽鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む。そのような実施形態では、重鎖
フレームワーク領域及び／又は軽鎖フレームワーク領域は、１つ又は複数の非ヒト（例え
ば、マウス）アミノ酸残基、例えば、重鎖フレームワーク領域を含むことがあり、及び／
又は軽鎖フレームワーク領域は、１つ又は複数のアミノ酸復帰変異を含むことがあり、こ
れらの復帰変異に対応するマウスアミノ酸残基が存在する。ヒト化抗体は、非ヒト抗体（
例えば、マウス又はキメラ抗体）から生成することができる。一実施形態では、ヒト化抗
体を本発明の抗ネクチン－４マウス抗体から本発明の実施例に記載の通り調製する。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、上記のマウス抗体のＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリア
ント、ＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、ＣＤＲ－Ｈ３又はそのバリアントを含む。特定
の実施形態では、ヒト化抗体は、上記のマウス抗体のＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、
ＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、ＣＤＲ－Ｌ３又はそのバリアントをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、上記のマウス抗体のＣＤＲ－Ｈ１又はそのバリア
ント、ＣＤＲ－Ｈ２又はそのバリアント、ＣＤＲ－Ｈ３又はそのバリアントを含むＶＨ、
及び、ヒト免疫グロブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フ
レームワーク領域を含む。さらに別の特定の実施形態では、ヒト化抗体は、上記のマウス
抗体のＣＤＲ－Ｌ１又はそのバリアント、ＣＤＲ－Ｌ２又はそのバリアント、ＣＤＲ－Ｌ
３又はそのバリアントを含むＶＬ、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワーク領域に由
来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域をさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号３に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４に
記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロブリン重鎖フ
レームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む、Ｃｈｏ
ｔｈｉａ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施形態で
は、ヒト化抗体は、配列番号６に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号７に記載のＣＤＲ－Ｌ２
、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワーク領域に
由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシ
ステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号９に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１０
に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロブリン重鎖
フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む、Ａｂ
ｍ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施形態では、ヒ
ト化抗体は、配列番号６に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号７に記載のＣＤＲ－Ｌ２、配列
番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワーク領域に由来す
るアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ａｂｍ番号付けシステムによって
定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号１１に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１
２又は６３に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロ
ブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を
含む、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実
施形態では、ヒト化抗体は、配列番号６に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号７に記載のＣＤ
Ｒ－Ｌ２、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワー
ク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ｋａｂａｔ番号付
けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号１３に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１
４に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号１５に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロブリン
重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む、
ＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施形態で
は、ヒト化抗体は、配列番号１６に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号１７に記載のＣＤＲ－
Ｌ２、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワーク領
域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、ＩＭＧＴ番号付けシス
テムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号５６に記載の配列を有するＶＬ又はその
バリアントを含む。一実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号５５に記載の配列を有する
ＶＨ又はそのバリアントを含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号２１又は１８に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配
列番号２２に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２３に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グ
ロブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域
を含む、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特
定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号２４に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２５に
記載のＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２６に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖
フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ｃｈ
ｏｔｈｉａ番号付けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号２７又は３６に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配
列番号２８に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２３に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グ
ロブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域
を含む、Ａｂｍ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施
形態では、ヒト化抗体は、配列番号２４に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２５に記載のＣ
ＤＲ－Ｌ２、配列番号２６に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレーム
ワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ａｂｍ番号付
けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号２９又は４４に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配
列番号３０に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２３に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グ
ロブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域
を含む、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の
実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号２４に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２５に記載
のＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２６に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレ
ームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ｋａｂａ
ｔ番号付けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号３１又は５４に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配
列番号３２に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３３に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グ
ロブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域
を含む、ＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実
施形態では、ヒト化抗体は、配列番号３４に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号３５に記載の
ＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２６に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレー
ムワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、ＩＭＧＴ番
号付けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号５８に記載の配列を有するＶＬ又はその
バリアントを含む。一実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号５７に記載の配列を有する
ＶＨ又はそのバリアントを含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号３９に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４
０に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号４１に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロブリン
重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む、
Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施
形態では、ヒト化抗体は、配列番号４２に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号４３に記載のＣ
ＤＲ－Ｌ２、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワ
ーク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ｃｈｏｔｈｉａ
番号付けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号４５に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４
６に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号４１に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロブリン
重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む、
Ａｂｍ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施形態では
、ヒト化抗体は、配列番号４２に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号４３に記載のＣＤＲ－Ｌ
２、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワーク領域
に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ａｂｍ番号付けシステム
によって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号４７に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４
８又は６４に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号４１に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グ
ロブリン重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域
を含む、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の
実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号４２に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号４３に記載
のＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレー
ムワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、Ｋａｂａｔ
番号付けシステムによって定義されるＶＬをさらに含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号４９に記載のＣＤＲ－Ｈ１、配列番号５
０に記載のＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５１に記載のＣＤＲ－Ｈ３、及びヒト免疫グロブリン
重鎖フレームワーク領域に由来するアミノ酸配列を含む重鎖フレームワーク領域を含む、
ＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義されるＶＨを含む。さらに別の特定の実施形態で
は、ヒト化抗体は、配列番号５２に記載のＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５３に記載のＣＤＲ－
Ｌ２、配列番号８に記載のＣＤＲ－Ｌ３、及びヒト免疫グロブリン軽鎖フレームワーク領
域に由来するアミノ酸配列を含む軽鎖フレームワーク領域を含む、ＩＭＧＴ番号付けシス
テムによって定義されるＶＬをさらに含む。
一実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号６０に記載の配列を有するＶＬ又はそのバリ
アントを含む。一実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ
又はそのバリアントを含む。
上記のある実施形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８
０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少
なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも
９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。或い
は、バリアントは、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失
又は付加（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ又は５つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）
を有する。置換は保存的置換であることが好ましい。
ある特定の実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合性断片は、重鎖可変領域（Ｖ
Ｈ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ここで、上述のヒト化抗体に関して記載さ
れている重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域と比較して、少なくとも１つのＣＤＲ及び
／又はフレームワーク領域がアミノ酸変異を含み、ここで、アミノ酸変異は、１つ又は複
数のアミノ酸の置換、欠失又は付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、１つ、２つ又
は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加、又はこれらの任意の組合せ）である。置換は保
存的置換であることが好ましい。
一部の実施形態では、抗ネクチン－４ヒト化抗体は、重鎖定常領域をさらに含む。一実
施形態では、重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４重鎖定常
領域に由来する。一実施形態では、重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に由来す
る。一実施形態では、重鎖定常領域は、配列番号６１に記載のアミノ酸配列又はそのバリ
アントを含む。
一部の実施形態では、抗ネクチン－４ヒト化抗体は、軽鎖定常領域をさらに含む。一実
施形態では、軽鎖定常領域は、ヒトλ又はκ軽鎖定常領域に由来する。一実施形態では、
軽鎖定常領域は、ヒトκ軽鎖定常領域に由来する。一実施形態では、軽鎖定常領域は、配
列番号６２に記載のアミノ酸配列又はそのバリアントを含む。
上記のある実施形態では、バリアントは、それが由来する配列と比較して少なくとも８
０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少
なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも
９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。或い
は、バリアントは、それが由来する配列と比較して最大２０個のアミノ酸の保存的置換（
例えば、最大１５個、最大１０個、又は最大５個のアミノ酸の保存的置換；例えば、１個
、２個、３個、４個又は５個のアミノ酸の保存的置換）を有する。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号５５に記
載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖
は、配列番号５６に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号６２に記載の配列を有する軽鎖
定常領域を含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号５７に記
載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖
は、配列番号５８に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号６２に記載の配列を有する軽鎖
定常領域を含む。
特定の実施形態では、ヒト化抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖は、配列番号５９に記
載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖
は、配列番号６０に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号６２に記載の配列を有する軽鎖
定常領域を含む。
本発明の抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性断片は、当技術分野で公知の方法を使
用して調製及び作製することができる。そのような方法は、例えば、ファージディスプレ
イライブラリー、酵母ディスプレイライブラリー、不死化Ｂ細胞（例えば、マウスＢ細胞
ハイブリドーマ細胞又はＥＢＶ不死化Ｂ細胞）から抗体又は抗原結合性断片を調製及び単
離することを含み得る。動物を免疫化する、例えば、抗原又は抗原をコードするＤＮＡを
用いて動物（例えば、マウス）を免疫化するための方法を使用することもでき、免疫化さ
れた動物から抗体を発現するＢ細胞を単離することができる。抗体を発現するＢ細胞を不
死化すること、例えば、ハイブリドーマ又はＥＢＶ不死化Ｂ細胞として調製することが好
ましい。本発明の抗体又はその抗原結合性断片をコードする核酸分子又は発現ベクターを
用いて宿主細胞を形質転換し、次いで、本発明の抗ネクチン－４又はその抗原結合性断片
を宿主細胞から発現させることもできる。一部の実施形態では、本発明の抗ネクチン－４
抗体を、免疫化された動物から、例えば、ヒトネクチン－４タンパク質を用いて免疫化さ
れたマウスから得る。
多重特異性抗体
一態様では、本発明は、本発明の抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性断片、及び少
なくとも１つの他の抗体又はその抗原結合性断片又は抗体類似体を含み、その結果、ネク
チン－４だけでなく少なくとも１つの他の抗原に結合することが可能である、多重特異性
抗体を提供する。
一実施形態では、多重特異性抗体は、二重特異性抗体、三重特異性抗体又は四重特異性
抗体である。一実施形態では、多重特異性抗体は、第１のｓｃＦｖ（又はｓｃｄｓＦｖ）
及び第２のｓｃＦｖ（又はｓｃｄｓＦｖ）を含む二重特異性ダイアボディであり、ここで
、第１のｓｃＦｖ（又はｓｃｄｓＦｖ）は、短いペプチドリンカーによって連結した本発
明のＶＨと他の抗体のＶＬとを含み、第２のｓｃＦｖ（又はｓｃｄｓＦｖ）は、短いペプ
チドリンカーによって連結した本発明のＶＬと他の抗体のＶＨとを含み、他の抗体は、ネ
クチン－４以外の抗原に結合するものであり、短いペプチドリンカーは、５～１０アミノ
酸残基を含む。
一実施形態では、他の抗原は、細胞表面タンパク質、受容体又は受容体サブユニットで
ある。細胞表面タンパク質は、例えば、免疫細胞受容体であり得る。免疫細胞は、例えば
、免疫エフェクター細胞、例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ
（ＮＫＴ）細胞、細胞傷害性Ｔ（ＣＴＬ）細胞などであり得る。好ましい実施形態では、
二重特異性抗体は、ネクチン－４とＰＤ－１の両方に結合し得る。
多重特異性抗体は、多価抗体であり、例えば、二価、三価、四価又はそれよりも多価で
あり得る。
好ましい実施形態では、多重特異性抗体は、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、ｓｃｄｓＦｖ、Ｆａ
ｂ、ｓｃＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２からなる群から選択される抗原結合性断片を
含む。
多重特異性抗体は、抗体重鎖定常領域及び／又は軽鎖定常領域をさらに含んでもよい。
重鎖定常領域は、ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、又はこれらの組合せの少なくと
も一部分から選択されるアミノ酸配列を含んでもよい。重鎖定常領域は、ＣＨ１を有する
ことが好ましい。
目的の抗体又は抗体断片を使用して多重特異性抗体を構築するための方法は当業者には
周知である（例えば、国際特許出願公開第ＷＯ９３／０８８２９号；Ｓｕｒｅｓｈら、（
１９８６）Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１２１：２１０；Ｔｒａｕｎ
ｅｃｋｅｒら、（１９９１）ＥＭＢＯ、１０：３６５５－３６５９を参照されたい）。
多重特異性抗体は、当技術分野で公知の種々の技法を使用して作製及び単離することが
できる。例えば、組換えＤＮＡ技法を使用して、多重特異性抗体をコードする核酸分子を
得ることができ、任意選択で、核酸分子を発現ベクターにクローニングし、次いで、宿主
細胞を核酸分子又は発現ベクターで形質転換し、形質転換された宿主細胞を適切な条件下
で培養して核酸又は発現ベクターを発現させ、最終的に、多重特異性抗体を宿主細胞又は
その培養培地から単離及び精製する。
融合タンパク質
さらに別の態様では、本発明は、本発明の抗体又はその抗原結合性断片、及び追加的な
生物活性ポリペプチドを含む融合タンパク質を提供する。
好ましい実施形態では、追加的な生物活性ポリペプチドは、治療活性、結合活性又は酵
素活性を有するポリペプチド又はタンパク質である。生物活性ポリペプチドの非限定的な
例としては、これだけに限定されないが、タンパク質毒素（例えば、ジフテリア毒素、リ
シン）、酵素（例えば、ウレアーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ）、サイトカインを挙
げることができる。
核酸、ベクター及び宿主細胞
別の態様では、本発明は、本発明の抗ネクチン－４抗体又は抗原結合性断片をコードす
るポリヌクレオチド配列を含む核酸分子を提供する。核酸は、当技術分野で公知の方法を
使用して、例えば、ファージディスプレイライブラリー、酵母ディスプレイライブラリー
、免疫化された動物、不死化細胞（例えば、マウスＢ細胞ハイブリドーマ細胞、ＥＢＶ媒
介性不死化Ｂ細胞）から単離することによって、又は化学合成によって、得ることができ
る。本発明の核酸分子を、発現のために使用する宿主細胞に対してコドン最適化すること
ができる。核酸分子を単離することができる。
さらに別の態様では、本発明は、核酸分子を含むベクターも提供する。一実施形態では
、本発明の核酸分子を組換え核酸として調製する。一実施形態では、本発明の核酸分子を
発現ベクターにクローニングする。発現ベクターは、調節配列及び抗生物質耐性遺伝子な
どの追加的なポリヌクレオチド配列をさらに含んでもよい。本発明の核酸を含む組換え核
酸は、例えば、化学合成、組換えＤＮＡ技法（例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）
技法）などの当技術分野で周知の技法を使用して調製することができる（Ｓａｍｂｒｏｏ
ｋ，Ｊ．、Ｅ．Ｆ．Ｆｒｉｔｓｃｈ、及びＴ．Ｍａｎｉａｔｉｓ．（１９８９）。Ｍｏｌ
ｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ、２ｎｄ ｅ
ｄ．Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒ
ｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．を参照されたい）。発現ベクターは、ポリペプチド又は
タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列も含んでもよく、ここで、ポリペプチド又
はタンパク質は、発現された抗体又は抗原結合性断片の検出及び／又は単離を容易にする
ことができるものである。そのようなポリペプチド又はタンパク質としては、これだけに
限定されないが、アフィニティータグ（例えば、ビオチン、ポリヒスチジンタグ（Ｈｉｓ
６）、又はグルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＨ）タグ）、プロテアーゼ切断部
位を含むポリペプチド、及びレポータータンパク質（例えば、蛍光タンパク質）を挙げる
ことができる。本発明の核酸分子は、１つ又は複数のベクター内に存在し得る。一部の実
施形態では、発現ベクターは、ＤＮＡプラスミド、例えば、細菌細胞、酵母細胞、又は哺
乳動物細胞における発現のためのＤＮＡプラスミドである。他の実施形態では、発現ベク
ターは、ウイルスベクターである。他の実施形態では、発現ベクターは、ファージベクタ
ー又はファージミドベクターである。
本発明は、上記の少なくとも１つの核酸又はベクターを含む宿主細胞も提供する。好ま
しい実施形態では、本発明の宿主細胞を使用して、本発明の抗ネクチン－４抗体又はその
抗原結合性断片を発現させる。宿主細胞の例としては、これだけに限定されないが、原核
細胞（例えば、細菌、例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））、真核細胞（例えば、酵母、昆
虫細胞、哺乳動物細胞）が挙げられる。
細菌（例えば、大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３））は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ及びＦａｂ’
断片などの小さな抗原結合性断片の発現に特に有利である。一部の実施形態では、重鎖可
変領域及び軽鎖可変領域をコードする核酸分子を単一のベクターにクローニングし、ＢＬ
２１（ＤＥ３）に導入する。抗体発現に適した哺乳動物宿主細胞としては、これだけに限
定されないが、骨髄腫細胞、ＨｅＬａ細胞、ＨＥＫ細胞（例えば、ＨＥＫ２９３細胞）、
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、及び抗体発現に適した他の哺乳動物細胞が
挙げられる。
本発明は、本発明の抗ネクチン－４抗体又は抗原結合性断片を宿主細胞において産生さ
せるための方法であって、
（Ｉ）宿主細胞を本明細書に記載の少なくとも１つの核酸又は発現ベクターで形質転換
するステップと、
（ＩＩ）形質転換された宿主細胞を適切な条件下で培養して、核酸又は発現ベクターを
発現させるステップと、
（ＩＩＩ）本発明の抗体又は抗原結合性断片を宿主細胞又はその培養培地から単離及び
精製するステップと
を含む、方法も提供する。
一部の実施形態では、重鎖及び軽鎖をコードするポリヌクレオチド配列を含む単一のベ
クターを使用する。一部の実施形態では、２つのベクターを使用し、ここで、一方は抗体
軽鎖をコードし、他方は抗体重鎖をコードする。一部の実施形態では、宿主細胞は、抗体
又は抗体断片の溶解性、安定性及び／又はフォールディングの増大に役立ち得るパートナ
ープラスミドをさらに含む。抗体を宿主細胞から単離及び精製するための技法は当業者に
は周知である。
抗体コンジュゲート
本発明は、少なくとも１つの治療剤とコンジュゲートした本発明の抗体又はその抗原結
合性断片を含む、抗体コンジュゲートも提供する。抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）が
抗体コンジュゲートの典型的な型であり、ここで、治療剤は、例えば、細胞傷害作用剤で
あってもよい。
一部の好ましい実施形態では、本発明の抗体コンジュゲートは、ネクチン－４陽性標的
細胞を標的とし、標的細胞を追跡する又は死滅させることが可能なものである。一部のよ
り好ましい実施形態では、本発明の抗体コンジュゲートは、ネクチン－４陽性がん細胞を
選択的に死滅させるものである。一部の実施形態では、がん細胞は、胃がん細胞、乳がん
細胞、膀胱がん細胞、肺がん細胞、肝臓がん細胞、結腸がん細胞、直腸がん細胞、頭頸部
がん細胞、及び卵巣がん細胞から選択される。
治療剤は、細胞傷害作用剤、治療用抗体（例えば、追加的な抗原に特異的に結合する抗
体又はその抗原結合性断片）、放射性同位元素、オリゴヌクレオチド及びその類似体（例
えば、干渉ＲＮＡ）、生物学的に活性なペプチド、タンパク質毒素（例えば、ジフテリア
毒素、リシン）並びに酵素（例えば、ウレアーゼ）からなる群から選択することができる
。細胞傷害作用剤とは、細胞の活性又は機能を阻害する若しくは低下させ、及び／又は細
胞を死滅させる物質を指す。細胞傷害作用剤の例としては、これだけに限定されないが、
メイタンシノイド（例えば、マイタンシン）、アウリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）
（例えば、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ、ＭＭＡＤ）、デュオスタチン、クリプトフィシン、ビン
カアルカロイド（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン）、コルヒチン、ドラスタチ
ン、タキサン、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、エンジイン抗生物質、
サイトカラシン、カンプトテシン、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン、ジヒ
ドロキシアントラシンジオン、ドキソルビシン）、細胞傷害性抗生物質（例えば、マイト
マイシン、アクチノマイシン、デュオカルマイシン（例えば、ＣＣ－１０６５）、アウロ
マイシン、デュオマイシン、カリチアマイシン、エンドマイシン、フェノマイシン）、ド
キソルビシン、ダウノルビシン、カリチアマイシン、シスプラチン、臭化エチジウム、ブ
レオマイシン、マイトマイシン、ミトラマイシン、プラジエノライド、ポドフィロトキシ
ン、エトポシド、ミトキサントロン、５－フルオロウラシル、シタラビン、ゲムシタビン
、メルカプトプリン、ペントスタチン、フルダラビン、クラドリビン、ネララビン、カル
ムスチン、ロムスチン、メトトレキサート、メルファラン、テニポシド、グルココルチコ
イドなどを挙げることができる。
放射性同位元素は、例えば、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、１１１Ｉ
ｎ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１５３Ｓｍ、９０Ｙから選択することができ
る。放射性同位元素で標識された抗体は、放射性免疫コンジュゲートと称されることもあ
る。
一実施形態では、治療剤は、抗腫瘍生物活性を有する分子である。抗腫瘍生物活性を有
する分子としては、これだけに限定されないが、細胞傷害作用剤、化学療法剤、放射性同
位元素、免疫チェックポイント阻害剤、腫瘍特異的抗原を標的とする抗体、及び他の抗腫
瘍薬物が挙げられる。好ましい実施形態では、治療剤は細胞傷害作用剤である。さらに別
の好ましい実施形態では、治療剤は放射性同位元素である。特定の実施形態では、治療剤
は、
である。
治療剤と本発明の抗体又は抗原結合性断片を当技術分野で公知の任意の技法を使用して
リンカーを通じてコンジュゲートすることができる。リンカーは、共有結合性コンジュゲ
ーションのための反応性基、例えば、アミン、ヒドロキシルアミン、マレイミド、カルボ
キシル、フェニル、チオール、スルフヒドリル、又はヒドロキシル基を含んでもよい。リ
ンカーは、切断可能であっても切断不可能であってもよい。切断可能なリンカーは、例え
ば、酵素的に切断可能なリンカー（例えば、プロテアーゼ切断部位を含有するペプチド）
、ｐＨ感受性リンカー（例えば、ヒドラゾン－型リンカー）、又は還元可能なリンカー（
例えば、ジスルフィド結合）である。
一実施形態では、リンカーは、アミン、ヒドロキシルアミン、マレイミド、カルボキシ
ル、フェニル、チオール、スルフヒドリル、及びヒドロキシル基からなる群から選択され
る反応性基を含む。一実施形態では、リンカーは化学結合である。一実施形態では、リン
カーは、２～１０アミノ酸からなるアミノ酸又はペプチドを含む。アミノ酸は、天然アミ
ノ酸であってもよく、非天然アミノ酸であってもよい。
好ましい実施形態では、リンカーは、Ｖａｌ、Ｃｉｔ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ、
Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、
Figure 2023166465000006
 （式中、位置１及び２のうちの一方は、リンカーが本発明の抗体又はその抗原結合性断片
に付着する位置を表し、他方は、リンカーが治療剤に付着する位置である）
からなる群から選択される。
一部の実施形態では、治療剤とリンカーをコンジュゲートして中間体を形成した後、本
発明の抗体又は抗原結合性断片とのコンジュゲーションを行う。一部の実施形態では、中
間体を、本発明の抗体又は抗原結合性断片のスルフヒドリル基とチオエーテル結合を形成
することによって連結する。そのような中間体の構造及び調製方法並びにそのような中間
体を使用して抗体コンジュゲートを調製する方法は、例えば、関連性のある内容全体が参
照により本明細書に組み込まれる国際特許出願公開第ＷＯ２０１９／１１４６６６号に記
載されている。
一実施形態では、抗体コンジュゲートは、式（Ｉ）、
Figure 2023166465000007
 （式中、Ａは、本発明の抗体又はその抗原結合性断片であり、Ｌはリンカーであり、Ｌ
は、２～１０アミノ酸からなるアミノ酸又はペプチドを含むことが好ましく、Ｌは、Ｖａ
ｌ、Ｃｉｔ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、

Figure 2023166465000008
 （式中、位置１及び２のうちの一方は、ＬとＡが接続する位置を表し、他方は、ＬとＤが
接続する位置を表す）
から選択されることがさらに好ましく、
Ｄは、治療剤であり、Ｄは、細胞傷害作用剤、治療用抗体、放射性同位元素、オリゴヌ
クレオチド及びその類似体、生物学的に活性なペプチド、タンパク質毒素及び酵素からな
る群から選択されることが好ましく、Ｄは、抗腫瘍生物活性分子であることがより好まし
く、Ｄは、

であることがさらに好ましく、
γは、Ａと連結した（Ｌ－Ｄ）部分の数であり、１から１０までの整数である）
の構造を有する。
特定の実施形態では、（Ｌ－Ｄ）部分は、式（１）の構造を有し、本発明の抗体又はそ
の抗原結合性断片と式（１）の化合物のスルフヒドリル基との間にチオエーテル結合が形
成されることによって連結しており、
Figure 2023166465000010
 本発明の抗体コンジュゲートは、式（２）：
Figure 2023166465000011
 （式中、Ａは本発明の抗体又は抗原結合性断片であり、γは、Ａのスルフヒドリル基と
チオエーテル結合を形成することによってＡと連結する（Ｌ－Ｄ）部分の数であり、１か
ら１０までの整数である）
の構造を有する。特定の実施形態では、Ａは、本発明の抗ヒトネクチン－４ヒト化モノク
ローナル抗体である。
さらに別の態様では、本発明は、本発明の抗体コンジュゲートを含む組成物を提供する
。一実施形態では、組成物中の治療剤と本発明の抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性
断片のモル比（ＤＡＲ値）は、１から１０の間の少数又は整数、例えば、１から８の間の
少数又は整数、例えば、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．１、３．２、３
．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．７９、３．８、３．９、４．０、４．１、
４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、
５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、
６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、６．９５、７．０
、７．０３、７．１、７．１２、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７
．８、７．９又は８．０などである。
ＣＡＲ及びＣＡＲを発現する免疫エフェクター細胞
本発明の抗体又はその抗原結合性断片を使用して、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を構築
することができる。したがって、別の態様では、本発明は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
も提供する。
本明細書で使用される場合、「キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）」という用語は、例えば、
がん細胞の表面上の抗原に特異的に結合する抗原結合性断片によって標的（例えば、がん
細胞の表面に発現される抗原）を特異的に認識し、それに結合し、また、表面にＣＡＲを
発現する細胞（例えば、免疫エフェクター細胞）に標的特異性を付与することができる、
人工的な受容体である。ＣＡＲにより標的が認識されると、ＣＡＲを発現する免疫エフェ
クター細胞の活性化及び／又は増大がもたらされることが好ましい。
一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、ネクチン－４に特異的に結合する本発明の
抗体又はその抗原結合性断片（例えば、ｓｃＦｖ）、膜貫通ドメイン、及び１つ又は複数
の細胞内Ｔ細胞シグナルドメインを含む。そのような実施形態では、本発明は、核酸分子
も提供し、ここで、核酸分子にキメラ抗原受容体をコードするヌクレオチド配列を含める
ことができ、キメラ抗原受容体のヌクレオチド配列は、本発明の抗体又はその抗原結合性
断片（例えば、ＳｃＦｖ）をコードするヌクレオチド配列をさらに含む。ある特定の実施
形態では、本発明の核酸分子は、本発明の抗体の抗原結合性断片（例えば、ＳｃＦｖ）を
含むキメラ抗原受容体をコードする。核酸分子を単離することができる。
さらに別の態様では、本発明は、本発明のＣＡＲを表面に発現するように遺伝子改変さ
れた免疫エフェクター細胞も提供する。免疫エフェクター細胞は、Ｔリンパ球（例えば、
細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ））、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）及びナチュラルキラーＴ
細胞（ＮＫＴ）からなる群から選択されることが好ましい。免疫エフェクター細胞は、ネ
クチン－４陽性疾患細胞（例えば、ネクチン－４陽性がん細胞）を標的とするものであり
、活性化されて、例えば、ネクチン－４陽性がん細胞死を引き起こすエフェクター機能を
開始する。
さらに別の態様では、本発明は、ＣＡＲをコードする核酸分子、核酸分子を含む発現ベ
クター、及びＣＡＲを発現する免疫細胞（例えば、ＣＴＬ）にも関する。
医薬組成物
本発明は、抗体又は抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、組成物、ＣＡＲを発現する
免疫エフェクター細胞、本発明の多重特異性抗体又は融合タンパク質、並びに薬学的に許
容できる担体及び／賦形剤を含む医薬組成物も提供する。
本発明で提供される医薬組成物は、これだけに限定されないが、固形、半固形、液体、
粉末、又は凍結乾燥形態を含めた種々の剤形をとることができる。
剤形に応じて、薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤として、これだけに限定され
ないが、希釈剤、結合剤及び接着剤、滑沢剤、崩壊剤、保存剤、ビヒクル、分散剤、流動
促進剤、甘味剤、コーティング、構造形成賦形剤、保存剤、抗酸化剤（例えば、アスコル
ビン酸、システイン塩酸塩、硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナト
リウム、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル
化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α－トコフェロール、
クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など）
、可溶化剤、ゲル化剤、軟化剤、溶媒（例えば、水、アルコール、酢酸、及びシロップ）
、緩衝液（例えば、リン酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、及び酢酸緩衝液）、界面活性物質
（例えば、非イオン界面活性物質、例えば、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、
ポロキサマー又はポリエチレングリコールなど）、抗細菌剤、抗真菌剤、等張化剤（例え
ば、トレハロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、グルコース
）、吸収遅延剤、キレート剤及び乳化剤を挙げることができる。
医薬組成物は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄又は表皮投与（例えば、注射又は
注入によるもの）に適したものであることが好ましい。抗体又はその抗原結合性断片又は
抗体コンジュゲートを含む組成物に関して、好ましい剤形は、一般に、例えば、注射液、
凍結乾燥粉末であり得る。抗体又はその抗原結合性断片又は抗体コンジュゲートを含む組
成物に関して、適切な担体及び／又は賦形剤は、緩衝液（例えば、クエン酸緩衝液、酢酸
緩衝液、リン酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、ヒスチジン塩緩衝液）、等張化剤（例えば、
トレハロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、グルコース）、
非イオン界面活性物質（例えば、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、ポロキサマ
ー）又はこれらの組合せから選択することができる。
医薬組成物は、一般に、製造及び保管の条件下で滅菌状態及び安定である。所望の量の
活性物質（例えば、抗体又は本発明の抗体コンジュゲート）を適切な溶媒中に混合し、上
記の担体及び／又は賦形剤のうちの１つ又は組合せを添加し、必要に応じて、その後、滅
菌精密濾過を行うことにより、滅菌注射液を調製することができる。一般に、分散は、活
性物質を基本的な分散媒及び上に列挙されている必要な他の成分を含有する滅菌担体及び
／又は賦形剤に組み入れることによって調製される。滅菌注射液を調製するための滅菌粉
末の場合では、好ましい調製方法は、予め滅菌濾過したその溶液を真空乾燥及びフリーズ
ドライ（凍結乾燥）して、任意の所望の追加的な成分と組み合わさった活性成分の粉末を
得ることを含む。
本発明で提供される医薬組成物を、対象に、当技術分野で公知の任意の方法によって、
例えば、全身又は局部投与によって投与することができる。投与経路としては、これだけ
に限定されないが、非経口（例えば、静脈内、腹腔内、皮内、筋肉内、皮下、又は腔内）
、局部、硬膜外、又は粘膜（例えば、鼻腔内、経口、膣内、直腸内、舌下又は局所投与が
挙げられる。投与される厳密な投薬量は、例えば、医薬組成物の代謝特性、処置の持続時
間、特定の化合物の排出速度、処置の目的、投与経路、並びに、患者の年齢、健康、体重
、性別、食事、病歴などの対象の状態、並びに医学の分野で周知の他の因子などの様々な
因子に依存することが当業者には理解されよう。投与方法は、例えば、注射又は注入の場
合がある。
一般的な指針として、本発明の抗体コンジュゲートは、約０．０００１～１００ｍｇ／
ｋｇ、より一般には対象の体重１ｋｇ当たり０．０１～２０ｍｇの範囲の投薬量で投与す
ることができる。例えば、投与される投薬量は、体重１ｋｇ当たり０．３ｍｇ、体重１ｋ
ｇ当たり１ｍｇ、体重１ｋｇ当たり３ｍｇ、体重１ｋｇ当たり５ｍｇ、体重１ｋｇ当たり
１０ｍｇ又は体重１ｋｇ当たり２０ｍｇ、又は体重１ｋｇ当たり１～２０ｍｇの範囲の場
合がある。必要とされる例示的な治療レジメンは、１週間に１回、２週間に１回、３週間
に１回、４週間に１回、１カ月に１回、３カ月に１回、３～６カ月に１回、又は最初の投
薬間隔のわずかな短縮及び後の投薬間隔の延長の場合がある。投与形式は、点滴静注の場
合がある。
ネクチン－４関連疾患
本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、
多重特異性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物、又はそれから調製した医薬を疾患の処
置及び／又は予防のために使用することができる。疾患は、ネクチン－４に関連するもの
である。疾患は、ネクチン－４の異常な発現に関連するものであることが好ましい。「異
常な発現」という用語は、試料中のタンパク質の発現が、正常な状態にある試料（又は標
準試料、例えば、ネクチン－４の異常な発現に関連する疾患に罹患していない対象由来の
試料）と比較して、高すぎる又は低すぎることを指す。
疾患は、ネクチン－４の高発現を特徴とするものであることが好ましい。例えば、疾患
（例えば、膀胱がん）を有する又は疾患（例えば、膀胱がん）を有する疑いがある対象の
組織（例えば、膀胱）ではネクチン－４が高度に発現されるが、一方、疾患を有さない対
象の組織ではネクチン－４は発現されないか又は低レベルで発現される。
疾患は、がんであることが好ましい。がんは、胃がん、肝臓がん、肝細胞癌、膀胱がん
、尿路上皮がん、尿道がん、腎盂がん、尿管がん、肺がん、非小細胞肺がん、乳がん、乳
管がん、トリプルネガティブ乳がん、膵がん、卵巣がん、頭頸部がん、結腸がん、直腸が
ん及び食道がんからなる群から選択されることが好ましい。
がん治療は、例えば、これだけに限定されないが、腫瘍退縮の程度、腫瘍の重量又はサ
イズの変化、増悪時間、生存時間、無増悪生存期間、奏効率、応答の持続時間、生活の質
、タンパク質の発現及び／又は活性などによって評価することができる。
診断及び処置のための使用
本発明の抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性断片又は抗体コンジュゲートを、ネク
チン－４に関連する疾患及び／又は障害を検出、診断又はモニタリングするために、診断
目的で使用することができる。例えば、本発明で提供される抗ネクチン－４抗体又はその
抗原結合性断片又は抗体コンジュゲートを、ｉｎ ｓｉｔｕ、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｅｘ ｖ
ｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏにおける診断アッセイ又はイメージングアッセイに使用する
ことができる。
一部の実施形態では、対象におけるネクチン－４の発現レベルを検出するため、及び／
又はネクチン－４を発現する細胞を追跡するために、本発明の抗体又は抗原結合性断片を
少なくとも１つの標識とコンジュゲートして、標識された抗体を得ることができる。その
ような標識された抗体も、本発明の抗体又は抗原結合性断片の範囲内に包含される。標識
は、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ）、蛍光色素、放射性同位元素、ビオチ
ン及びコロイド金からなる群から選択されることが好ましい。標識を抗体とコンジュゲー
トするための技法は当業者には周知である。
一態様では、本発明は、試料中のネクチン－４の存在を検出する又はネクチン－４の発
現レベルを決定する方法であって、
（ａ）試料に、本発明の抗体又は抗原結合性断片又は標識された抗体を接触させるステ
ップと、
（ｂ）試料中の抗体又は抗原結合性断片とネクチン－４の免疫複合体の形成を検出する
か又はその量を決定して、試料中のネクチン－４の存在を検出する又はネクチン－４の発
現を決定するステップと
を含む、方法を提供する。
本発明は、対象におけるネクチン－４に関連する疾患を診断する方法であって、
（ａ）対象の試料を得るステップと、
（ｂ）本発明の抗体又は抗原結合性断片又は標識された抗体を使用して、試料中のネク
チン－４の発現レベルを検出するステップと、
（ｃ）ネクチン－４の発現レベルと参照タンパク質の発現レベルと比較するステップと
を含み、参照タンパク質の発現レベルと比較したネクチン－４の発現レベルの上昇又は低
下により、ネクチン－４の異常な発現が示される、方法も提供する。
参照タンパク質は、標準試料中のネクチン－４であってもよく、標準試料は、例えば、
ネクチン－４の異常な発現に関連する疾患に罹患していない対象由来の試料であってもよ
い。試料は、細胞、組織、体液などの任意の形態であってもよい。上記の検出は、これだ
けに限定されないが、ウエスタンブロッティング、フローサイトメトリー、免疫組織化学
的アッセイ（ＩＨＣ）、ＥＬＩＳＡアッセイを含めた、当技術分野で公知の技法を使用し
て実施することができる。
本発明は、疾患の処置及び／又は予防における、本発明の抗体又はその抗原結合性断片
、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、多重特異性抗体、融合タンパク質又は医
薬組成物の使用にも関する。
本発明は、疾患の処置及び／又は予防のために使用される医薬の製造における、本発明
の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、多重特異
性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物の使用にも関する。一実施形態では、疾患は、本
明細書に記載のがんである。
本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、
多重特異性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物を、本明細書に記載の治療剤のうちの少
なくとも１つ、又は複数と組み合わせて投与することができる。組合せ投与は限定されな
い。例えば、上記の治療剤を全て同時に投与することもでき、別々に投与することもでき
る。別々に投与する場合（投与レジメンが相互に異なる場合）、中断せずに連続的に投与
することもでき、所定の間隔で投与することもできる。
処置方法
本発明は、それを必要とする対象におけるネクチン－４に関連する疾患を処置する方法
も提供する。一実施形態では、疾患は、本明細書に記載のがんである。
方法は、対象に、本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、組成物
、免疫エフェクター細胞、多重特異性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物を治療有効量
で投与するステップを含む。
ある特定の実施形態では、本発明の方法は、外科手術、放射線療法、化学療法、標的療
法、免疫療法、ホルモン療法、血管新生阻害、及び緩和ケアからなる群から選択される治
療レジメンを施行するステップをさらに含む。
ある特定の実施形態では、本発明の方法は、化学療法剤、放射性同位元素、免疫チェッ
クポイント阻害剤、他の抗原を標的とする抗体、及び他の抗腫瘍薬物からなる群から選択
される１つ又は複数の治療剤を投与するステップをさらに含む。化学療法剤としては、例
えば、代謝拮抗薬、アルキル化剤、細胞傷害作用剤、トポイソメラーゼ阻害剤、微小管阻
害剤を挙げることができる。他の抗腫瘍薬物としては、例えば、血管新生阻害剤、脱アセ
チル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤、ヘッジホッグシグナル伝達経路遮断薬、ｍＴＯＲ阻害剤
、ｐ５３／ｍｄｍ２阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾ
ミブ、カーフィルゾミブ、イキサゾミブ、マリゾミブ、オプロゾミブ）及びチロシンキナ
ーゼ阻害剤（例えば、ＢＴＫ阻害剤）を挙げることができる。化学療法剤の例としては、
これだけに限定されないが、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、ブス
ルファン、クロルメチン、クロラムブシル、ロムスチン、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、Ｃ
ＣＮＵ、シスプラチン（ＤＤＰ）、カルボプラチン（ＣＢＰ）、オキサリプラチン（ＯＸ
Ａ）、メトトレキサート（ＭＴＸ）、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ）、５－フルオロ
ウラシル（５－ＦＵ）、シタラビン、ゲムシタビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、
ビンデシン、カンプトテシン、イリノテカン、トポテカン、ルビテカン、エトポシド、テ
ニポシド、パクリタキセル、タキサン、ドセタキセル、パクリタキセルリポソーム、アク
チノマイシンＤ、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、マイトマイシン、ブレ
オマイシン、ドキソルビシン、エピルビシンが挙げられる。免疫チェックポイント阻害剤
としては、これだけに限定されないが、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ－３
、ＴＩＭ－３又はＶＩＳＴＡに特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片が挙げられ
る。放射性同位元素としては、例えば、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、
１１１Ｉｎ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１５３Ｓｍ、９０Ｙが挙げることが
できる。
一部の実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免
疫エフェクター細胞、多重特異性抗体、融合タンパク質又は医薬組成物を化学療法剤と組
み合わせて使用する。一実施形態では、化学療法剤は、シスプラチン、オキサリプラチン
、ゲムシタビン、シクロホスファミド、５－フルオロウラシル、及びこれらの組合せから
なる群から選択される。他の実施形態では、本発明の抗体コンジュゲートを免疫チェック
ポイント阻害剤と組み合わせて使用する。一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤
は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合性断片、抗ＰＤ－１抗体又はその抗原結合性断片
、及びこれらの組合せからなる群から選択される。さらに他の実施形態では、本発明の抗
体又はその抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、免疫エフェクター細胞、多重特異性抗
体、融合タンパク質又は医薬組成物を放射性同位元素と組み合わせて使用する。
キット
本発明は、発明の抗体又は抗原結合性断片、抗体コンジュゲート、標識された抗体、多
重特異性抗体、融合タンパク質、医薬組成物又は免疫エフェクター細胞、及び使用に関す
る指示を含むキットも提供する。キットは、適切な容器も含んでもよい。ある特定の実施
形態では、キットは、投与用のデバイスをさらに含む。一般には、キットは、キットの内
容物の意図された使用及び／又は使用方法を示すために使用されるラベルも含む。「ラベ
ル」という用語は、キット上若しくはキットに伴う、又は他の方法でキットと共に供給さ
れる任意の書面の又は記録された材料を含むものとする。
有益な効果
特定の態様では、本発明は、抗ネクチン－４抗体又はその抗原結合性断片、特に抗ネク
チン－４ヒト化モノクローナル抗体を提供する。本発明の抗体は、ネクチン－４に対して
高い親和性を有する：実施例において、ＥＬＩＳＡ、バイオフィルム干渉技術及びフロー
サイトメトリーなどの様々な方法を使用して、本発明の抗体のネクチン－４に対する結合
親和性を検出し、結果から、本発明の抗ネクチン－４抗体がｉｎ ｖｉｔｒｏにおける精
製されたネクチン－４及び細胞表面ネクチン－４のどちらに対しても高い親和性を有する
ことが示されている。驚いたことに、ヒト化モノクローナル抗体である３１ＨＺ、５６Ｈ
Ｚ及び７４ＨＺのヒトネクチン－４及びカニクイザルネクチン－４に対する動的親和性は
全て先行技術のエンホルツマブよりも良好であり、これにより、本発明の抗体がｉｎ ｖ
ｉｖｏ結合活性に関して、ネクチン－４に対するより高い親和性を有することが示され、
又、これは、抗体である３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺのエンドサトーシス活性がより
高いことによっても確認される。さらに、本発明の抗体は、ネクチン－４に対して高い特
異性を有する：３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺは全てヒトネクチン－４を特異的に認識
するが、ネクチン－１、ネクチン－２及びネクチン－３は認識しない。さらに、本発明の
抗体は、ネクチン－４とネクチン－１の結合を遮断し、３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺ
のネクチン－４に対する競合的な結合能はエンホルツマブのものと同等である。
別の特定の態様では、本発明は、ネクチン－４陽性細胞を標的とすることができる抗ネ
クチン－４抗体コンジュゲートも提供する。本発明の抗体コンジュゲートは、高い親和性
及び高い特異性でネクチン－４陽性細胞を標的とすることができ、親和性及び特異性が高
いことにより、オフターゲットの毒作用を低減し、副作用を低減することができるので、
がんの処置又はｉｎ ｖｉｖｏ診断に非常に有益である。実施例ではこの点も確認される
。本発明のＡＤＣは、ヒトネクチン－４を内因性に発現するヒト乳管がん細胞、ヒト胃が
ん細胞及びヒト乳がん細胞などの種々の腫瘍細胞株に対して強力な死滅活性を有する。さ
らに、マウス非小細胞肺がん異種移植モデルにおいて、本発明のＡＤＣは有意な腫瘍阻害
活性を示し、又、良好な安全性を有する。
以下の実施例は、本発明を単に例示するものであり、したがって、本発明をいかように
も限定するものと解釈されるべきではない。以下の実施例では、特定の条件を伴わない実
験方法は、従来の方法及び条件に従って、又は製品の指示に従って行われた。
実施例１：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体の調製
１．１ ヒトネクチン－４を過剰発現する細胞株の構築
ヒトネクチン－４抗体の特異性及び機能を検証するために、ヒトネクチン－４の完全な
コード配列（Ｕｎｉｐｒｏｔ ＩＤ：Ｑ９６ＮＹ８－１）（Ｎａｎｊｉｎｇ ＧｅｎＳｃ
ｒｉｐｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．により合成されたもの）をレ
ンチウイルスベクターｐＬＶＸ－ＩＲＥＳ－ｐｕｒｏにクローニングし、文献（Ｍｏｈａ
ｍｍａｄｉ Ｚら、Ｍｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０１５年９月；５７（９）：７９
３－８００）に記載されているレンチウイルスパッケージング系によってウイルスを調製
し、得られたウイルスを使用して、Ａ５４９非小細胞肺がん細胞（ＡＴＣＣ）及びＴ２４
ヒト膀胱移行上皮癌細胞（ＡＴＣＣ）それぞれに感染させ、ピューロマイシンスクリーニ
ング及びモノクローナル選択により、ヒトネクチン－４を過剰発現するモノクローナルＡ
５４９－ネクチン－４安定細胞株及びＴ２４－ネクチン－４安定細胞株を得た。
１．２ ヒトネクチン－４を過剰発現する細胞株の検出
Ａ５４９－ネクチン－４安定細胞株及びＴ２４－ネクチン－４安定細胞株をフローサイ
トメトリー（フローサイトメーター：Ｂｅｃｋｍａｎ、ＣｙｔｏＦｌｅｘ；検出用抗体エ
ンホルツマブ、国際特許出願公開第ＷＯ２０１２／０４７７２４号に記載されている配列
を有する）によって同定し、これらの細胞がヒトネクチン－４を正確に発現していること
が確認された。図１Ａ及び１Ｂに示されている通り、フローサイトメトリー結果から、Ａ
５４９－ネクチン－４及びＴ２４－ネクチン－４がどちらも高い陽性率（ほぼ１００％）
を有し、これにより、Ａ５４９－ネクチン－４及びＴ２４－ネクチン－４がどちらも、後
の実験に使用することができる十分に均一な安定細胞株であることが示された。
１．３ 抗ヒトネクチン－４マウスモノクローナル抗体の調製
野生型マウスをタンパク質による免疫化によって免疫化して、抗ヒトネクチン－４マウ
スモノクローナル抗体を得た。完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）で乳化されたヒト
ネクチン－４タンパク質（Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ、Ｃａｔ：１９７７１－Ｈ０
８Ｈ）を使用して、それぞれ５～６週齢のＢａｌｂ／ｃマウス２匹及びＣ５７マウス２匹
を免疫化した。具体的には、タンパク質５０μｇを使用して皮下一次免疫を行い、次いで
、２週間毎に不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）で乳化されたネクチン－４タンパ
ク質２５μｇを使用して腹腔内追加免疫を行い、追加免疫を３回行った後、ネクチン－４
を内因性に発現する腫瘍細胞Ｔ４７Ｄ（ヒト乳がん細胞の一種）を細胞５×１０６個で使
用して、最終的な腹腔内追加免疫を行い、３～５日後、脾臓細胞を取得して、ハイブリド
ーマ融合を行った。マウス脾臓細胞をＳｐ２／０（ＡＴＣＣ、Ｃａｔ＃ＣＲＬ－１５８１
）マウス骨髄腫細胞株と標準の融合手順を使用してＰＥＧにより融合し、次いで、ＨＡＴ
を使用して、加圧スクリーニングを実施し、１０～１４日後にＥＬＩＳＡスクリーニング
を実施し、約２００の、ネクチン－４タンパク質に結合した陽性クローンを得た。フロー
サイトメトリーによるさらなるスクリーニングを通じて、Ｔ４７Ｄ腫瘍細胞を認識するこ
とができる３つの陽性ハイブリドーマクローンをサブクローニングのために得、最終的に
、限界希釈法によってサブクローニング選別を実施して、単クローンを得、それらの番号
は、それぞれ３１＃、５６＃及び７４＃であった。
１．４ 抗ヒトネクチン－４マウス抗体の親和性検出
候補分子のヒトネクチン－４に対する親和性をＥＬＩＳＡ法によって検出した。ハイブ
リドーマ単クローン３１＃、５６＃及び７４＃を、血清を伴わずに培養して、上清３～１
０ｍＬを得、次いで、プロテインＡ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ，ＧＥ）によって精
製してマウス抗体を得た。
ハイブリドーマ細胞株３１＃、５６＃及び７４＃の培養上清から単離され、精製された
マウスモノクローナル抗体の親和性をＥＬＩＳＡによって決定した。ヒトネクチン－４（
Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ、Ｃａｔ：１９７７１－Ｈ０８Ｈ）を炭酸（ＣＢＳ）緩
衝液で１μｇ／ｍＬまで希釈し、９６ウェルプレートに１００μＬ／ウェルの体積で添加
し、４℃で１６～２０時間置いた。９６ウェルプレート中のＣＢＳ緩衝液をピペット操作
によって廃棄し、プレートをＰＢＳＴ（ｐＨ７．４、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０を含有
するＰＢＳ）緩衝液で１回洗浄し、２％ＰＢＳＴを含有する脱脂粉乳（ブロッキング溶液
）を２００μＬ／ウェルで添加し、ブロッキングのために室温で１時間インキュベートし
た。ブロッキング溶液を除去し、プレートをＰＢＳＴ緩衝液で３回洗浄した。試験する抗
ネクチン－４マウス抗体をＰＢＳＴ／２％脱脂粉乳で適当な濃度まで希釈し、次いで、プ
レートに１００μＬ／ウェルの体積で添加し、室温で１．５時間インキュベートした。反
応系を除去し、プレートをＰＢＳＴで３回洗浄し、ＰＢＳＴ／１％脱脂粉乳で希釈した（
希釈比１：５０００）ＨＲＰ標識されたヤギ抗マウスＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入したもの）を５０μＬ／ウェルで添加し、室温で１時間イ
ンキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した後、ＴＭＢを１００μＬ／ウェル
で添加し、発色のために室温で５～１０分間インキュベートした。０．２Ｍの硫酸を５０
μＬ／ウェルで添加することによって発色を停止させた。マイクロプレートリーダーを使
用して、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）を二波長４５０／６２０ｎｍで検出した。
検出結果が図２及び表３に示されている。３つの抗ヒトネクチン－４マウス抗体の全て
が、ヒトネクチン－４タンパク質に高い親和性で結合することができ、ＥＣ５０は３０～
７０ｐＭにわたった。
Figure 2023166465000012
１．５ 抗ネクチン－４マウスモノクローナル抗体の可変領域の増幅
ハイブリドーマ細胞を細胞約８，０００～１０，０００個まで培養し、次いで、細胞を
溶解させ、第１鎖ｃＤＮＡを、ｃＤＮＡ逆転写キット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓ
ｃｉ．Ｃａｔ＃１８０８０－２００）を使用して合成した。ＶＨ及びＶＫ遺伝子をｃＤＮ
Ａからプライマーを使用してＰＣＲによって増幅し、ＰＣＲ産物をＤＮＡ精製キット（Ｑ
ｉａｇｅｎ、Ｃａｔ＃２８１０４）によって精製し、ＰＵＣ５７ベクターにライゲーショ
ンした。各ライゲーション反応についておよそ５つのクローンを選び取り、配列決定を行
った。配列をＶｅｃｔｏｒ ＮＴＩ １１．５（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉ．
）及びＳｅｑｕｅｎｃｅｒ ５．４．６（Ｇｅｎｅｃｏｄｅｓ）によって解析した。抗ヒ
トネクチン－４マウス抗体の可変領域配列及びＣＤＲ配列をＩＭＧＴ及びａｂＹｓｉｓに
よって得、それを以下の表４に示した。
１．６ 抗ヒトネクチン－４マウス抗体のヒト化
マウス抗体３１＃、５６＃、及び７４＃を、ＣＤＲ移植によってヒト化した。手短に述
べると、ヒト化は、以下のステップを含むものであった：マウスモノクローナル抗体のア
ミノ酸配列をヒト生殖細胞系列抗体のアミノ酸配列とアラインメントして、高い相同性及
びヒト生殖細胞系列フレームワーク配列としてより良好な物理化学特性を有する配列を見
いだした；ＨＬＡ－ＤＲ親和性を分析及び調査し、低親和性を有するヒト生殖細胞系列フ
レームワーク配列を選択した；次いで、マウス抗体の６つのＣＤＲを選択された重鎖及び
軽鎖フレームワーク配列それぞれに移植した。
さらに、コンピュータシミュレーション技術を使用し、及び分子ドッキングを使用して
、可変領域及びその周囲の領域のフレームワークアミノ酸配列を解析し、その空間的な３
次元結合様式を調査した。静電気力、ファンデルワールス力、親水性及び疎水性、及びエ
ントロピー値を算出することにより、ネクチン－４タンパク質と相互作用し、空間的なフ
レームワークを維持することができる、マウス抗体アミノ酸配列内の重要なアミノ酸を解
析し、これらのマウスアミノ酸を移植された抗体において保持した。つまり、マウス抗体
の抗原結合能がヒト化抗体において最大限保持されるように、ヒト化鋳型のＦＲ領域内の
アミノ酸残基に対して一連の復帰変異を実施した。
上記の方法に従って、マウス抗体３１＃、５６＃及び７４＃のＣＤＲに基づくヒト化抗
体を構築し、それらのヒト化抗体を、それぞれ３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺと名付け
た；各抗体の重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域（配列番号６１）であり、各抗体
の軽鎖定常領域はヒトκ軽鎖定常領域（配列番号６２）であった。構築されたヒト化抗体
３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列はそれぞれ３１＃、５６＃及
び７４＃の軽鎖ＣＤＲと同一であった。構築されたヒト化抗体３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７
４ＨＺの重鎖ＣＤＲのアミノ酸配列を表５．１に示す：
Figure 2023166465000014
さらに、ヒト化抗体３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺの可変領域及び定常領域のアミノ
酸配列を表５．２に示す：

Figure 2023166465000015
１．７ 抗ヒトネクチン－４ヒト化抗体の調製
上記の抗ヒトネクチン－４ヒト化抗体の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列をコドン最適化によ
って合成し、プラスミドｐｔｔ５（Ｎａｎｊｉｎｇ ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．に寄託されたもの）にライゲーションした。重鎖及び
軽鎖に対応するプラスミドをＣＨＯ－Ｅ細胞に同時にトランスフェクトし、上清をプロテ
インＡ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ、ＧＥ）によって精製して、抗ヒトネクチン－４
ヒト化抗体を得た。
実施例２：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体の親和性の検出
２．１ 異なる種のネクチン－４タンパク質に対する抗ヒトネクチン－４ヒト化モノク
ローナル抗体の親和性の検出
異なる種のネクチン－４タンパク質に対する抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル
抗体の親和性をＥＬＩＳＡによって検出した。具体的なステップは以下の通りであった：
ヒトネクチン－４又はカニクイザルネクチン－４抗原を、ＣＢＳコーティング溶液（Ｎａ
２ＣＯ３を０．３２ｇ及びＮａＨＣＯ３を０．５９ｇ秤量し、脱イオン水中に溶解させ、
最大２００ｍＬにした）で１μｇ／ｍＬまで希釈し、ＥＬＩＳＡプレート上にウェル当た
り１００μＬでコーティングし、４℃で一晩静置した；翌日、ウェル内の液体を廃棄し、
ＰＢＳ ３００μＬで１回洗浄した；ＰＢＳ（２％ＢＳＡ含有、ＢＯＶＯＧＥＮから購入
、Ｃａｔ番号ＢＳＡＳ １．０）１００μＬを添加し、３７℃で２時間ブロッキングした
；３１ＨＺ、５６ＨＺ、７４ＨＺ及びエンホルツマブ抗体をＰＢＳ（２％ＢＳＡ含有）で
希釈し（１５００ｎｇ／ｍＬから出発し、３倍希釈、１１の濃度点）、１００μＬを取り
、対応するウェルに添加し、３７℃で２時間インキュベートした；ＰＢＳＴ ３００μＬ
で３回洗浄した；ＨＲＰ標識されたヤギ抗ヒト二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎから購入、１０
９－０３５－００）をＰＢＳ（２％ＢＳＡ含有）で１：１００００に希釈し、１００μＬ
を取り、対応するウェルに添加し、３７℃で１時間インキュベートした；ＰＢＳＴ ３０
０μＬで５回洗浄した；ＴＭＢ発色溶液（ＩｎｎｏＲｅａｇｅｎｔｓから購入、ＴＭＢ－
Ｓ－００４）１００μＬを対応するウェルに添加し、室温で５～２０分間にわたって発色
を実施した；停止させるために２ＮのＨ２ＳＯ４ ５０μＬを添加し、ＯＤ４５０ｎｍの
読み取りをマイクロプレートリーダー（ＭＤから購入、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘＭ２）で収
集し、カーブフィッティングのためにＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍにインポートした。
実験結果が図３Ａ～３Ｆ及び表６に示されており、それらの結果から、３１ＨＺのヒト
ネクチン－４タンパク質及びカニクイザルネクチン－４タンパク質に対する親和性がエン
ホルツマブのヒトネクチン－４タンパク質及びカニクイザルネクチン－４タンパク質に対
する親和性よりも良好であったこと；並びに、５６ＨＺ及び７４ＨＺのヒトネクチン－４
タンパク質及びカニクイザルネクチン－４タンパク質に対する親和性がエンホルツマブの
ヒトネクチン－４タンパク質及びカニクイザルネクチン－４タンパク質に対する親和性と
基本的に同等であったことが示される。
Figure 2023166465000016
２．２ 異なる種のネクチン－４タンパク質に対する抗ヒトネクチン－４ヒト化モノク
ローナル抗体の動的親和性の検出
抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体の動的親和性を、オクテットフォルテバ
イオ（Ｏｃｔｅｔ Ｆｏｒｔｅｂｉｏ）（登録商標）を使用して検出した。主要なステッ
プには以下が含まれた：まず、抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体（濃度５μ
ｇ／ｍＬ）をＰｒｏＡセンサーに固定化し、次いで、ヒト又はカニクイザルネクチン－４
（４００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、６．２５
ｎＭ、０ｎＭまで段階希釈したもの）との結合反応に供し、完全な反応によって得られた
固相中の固着した産物をＰＢＳＴ緩衝液中での解離反応に供した。実験の完了後、結果を
、Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ １１．０ソフトウェアを１：１モードで使用してグロー
バルフィッティングを実施することによって解析し、それにより、抗体の抗原に対する親
和定数を得た。
実験結果を表７に示した。３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺのヒトネクチン－４タンパ
ク質及びカニクイザルネクチン－４タンパク質に対する動的親和性はエンホルツマブのヒ
トネクチン－４タンパク質及びカニクイザルネクチン－４タンパク質に対する動的親和性
よりも良好であった。
Figure 2023166465000017
２．３ 腫瘍細胞膜表面上のヒトネクチン－４に対する抗ヒトネクチン－４ヒト化モノ
クローナル抗体の親和性の検出
Ｔ４７Ｄ細胞を使用して、細胞膜表面上のヒトネクチン－４に対する３１ＨＺ及び７４
ＨＺの親和性を検出した。具体的なステップは以下の通りであった：Ｔ４７Ｄ細胞を消化
し、遠心分離によって再懸濁させ、ＰＢＳで２回洗浄した；細胞をＰＢＳ（１％ＢＳＡ含
有）に再懸濁させ、９６ウェルチップボトムプレートに細胞３×１０５個／ウェル、ウェ
ル当たり５０μｌの体積で広げた；試験する抗体５０μＬを、最終濃度１５μｇ／ｍＬか
ら出発して４倍の段階希釈、合計１０の濃度点で各ウェルに添加した；ヒトＩｇＧを陰性
対照として使用した；十分に混合した後、得られた混合物を暗闇中、４℃で１時間にわた
って反応させた；ＰＢＳを用いた洗浄を３回行い、ＦＩＴＣ標識された抗ヒトＦｃ二次抗
体（ブランド：ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、製品番号：４０９３２２）を添加し、暗闇中、４℃
で０．５時間インキュベートした；ＰＢＳを用いた洗浄を３回行い、フローサイトメータ
ー（フローサイトメーターブランド：Ｂｅｃｋｍａｎ、モデル：Ｃｙｔｏｆｌｅｘ）を使
用して検出を行った。
同じ方法を使用して、ＮＣＩ－Ｎ８７細胞（ヒト胃がん細胞の一種、ＡＴＣＣ）膜表面
上のヒトネクチン－４に対する５６ＨＺの親和性を検出した。抗体を３．３３μｇ／ｍＬ
から出発し、３倍希釈、合計１０の濃度点とした。
実験結果が図４Ａ、４Ｂ及び表８に示されており、それらの結果から、３１ＨＺ及び５
６ＨＺの細胞膜表面上のネクチン－４に対する親和性がエンホルツマブの細胞膜表面上の
ネクチン－４に対する親和性と同等であったことが示される。

Figure 2023166465000018
実施例３：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体のエンドサトーシス活性の検出
抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体のエンドサトーシス活性をフローサイト
メトリーによって検出した。具体的なステップは以下の通りであった：Ｔ４７Ｄ、ＭＤＡ
－ＭＢ－４６８（ヒト乳がん細胞の一種、ＡＴＣＣ）又はＡ５４９－ネクチン－４細胞を
トリプシンによって消化し、計数し、細胞をＰＢＳ（１％ＢＳＡ含有）に再懸濁させ、細
胞密度を３×１０６個／ｍＬに調整した；試験する３１ＨＺ、５６ＨＺ、又は７４ＨＺ抗
体を、再懸濁させた細胞１００μＬに最終濃度１０μｇ／ｍＬで添加し、アイソタイプヒ
トＩｇＧを陰性対照として使用し、氷上で１時間インキュベートした；インキュベーショ
ン後に予冷ＰＢＳで３回洗浄した後、細胞を細胞培養培地に再懸濁させ、２つの部分に分
け、一方の部分は３７℃の細胞インキュベーターに入れ、１時間、２時間及び４時間イン
キュベートし（エンドサイトーシス群）、他方の部分は氷上で維持し、１時間、２時間及
び４時間インキュベートした（親和性群）；インキュベーション後、予冷ＰＢＳ用いた洗
浄を３回実施し、細胞をＰＢＳ（１％ＢＳＡ含有）５０μＬに再懸濁させ、抗ヒト蛍光二
次抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を添加し、４℃で３０分間インキュベートした；インキュ
ベーション後、予冷ＰＢＳを用いた洗浄を３回実施し、次いで、細胞における蛍光シグナ
ル（平均蛍光強度（ＭＦＩ）として表される）をフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ
）によって検出し、抗体エンドサイトーシス率を次式に従って算出した：エンドサイトー
シス比（％）＝［１－（３７℃におけるＭＦＩ抗体群－３７℃におけるＭＦＩ対照群）／
（氷上でのＭＦＩ抗体群－氷上でのＭＦＩ対照群）］×１００％。
Ｔ２４－ネクチン－４細胞における５６ＨＺのエンドサトーシス活性を同じ方法によっ
て検出した。
実験結果が図５Ａ～５Ｄに示されており、それらの結果から、３１ＨＺ、５６ＨＺ及び
７４ＨＺのエンドサトーシス活性がエンホルツマブのエンドサトーシス活性よりも良好で
あったことが示される。
実施例４：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体のヒトネクチン－４に対する結
合性ドメインの検出
ヒトネクチン－４は、１つのＩｇＶドメイン及び２つのＩｇＣドメインを含有する。抗
ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体の結合性ドメインを決定するために、ネクチ
ン－４ ＩｇＶドメインを過剰発現するＡ５４９安定細胞株Ａ５４９－ネクチン－４－Ｉ
ｇＶ、及びネクチン－４の２つのＩｇＣドメインを過剰発現するＡ５４９安定細胞株Ａ５
４９－ネクチン－４－ＩｇＣＣを構築し、試験する抗体の結合性ドメインをフローサイト
メトリーによって検出した。具体的なステップは以下の通りであった：Ａ５４９－ネクチ
ン－４－ＩｇＶ細胞及びＡ５４９－ネクチン－４－ＩｇＣＣ細胞を消化し、遠心分離によ
って再懸濁させ、ＰＢＳで２回洗浄した；細胞ＰＢＳ（１％ＢＳＡ含有）に再懸濁させ、
９６ウェルチップボトムプレートに細胞３００．０００個／ウェル、ウェル当たり５０μ
ｌで広げた；試験する抗体５０μＬを最終濃度４０μｇ／ｍＬで各ウェルに添加し、ヒト
ＩｇＧを陰性対照として使用した；十分に混合した後、得られた混合物を暗闇中、４℃で
１時間にわたって反応させた；ＰＢＳを用いた洗浄を３回行い、ＦＩＴＣ標識された抗ヒ
トＦｃ二次抗体（ブランド：ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、製品番号：４０９３２２）を添加し、
暗闇中、４℃で０．５時間インキュベートした；ＰＢＳを用いた洗浄を３回行い、フロー
サイトメーター（フローサイトメーターブランド：Ｂｅｃｋｍａｎ、モデル：Ｃｙｔｏｆ
ｌｅｘ）を使用して検出を行った。
実験結果が図６Ａ及び６Ｂに示されており、それらの結果から、３１ＨＺ、５６ＨＺ、
７４ＨＺ及びエンホルツマブがヒトネクチン－４のＩｇＶドメインにのみに結合し、Ｉｇ
Ｃドメインには結合しなかったことが示される。
実施例５：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体の競合活性の検出
ヒトネクチン－４は、ＩｇＶドメインを通じて別のネクチン－４分子又はネクチン－１
分子と連結する。３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺは全てネクチン－４のＩｇＶドメイン
に結合するので、これら３つの抗体の競合活性を競合ＥＬＩＳＡによって検出した。具体
的なステップは以下の通りであった：ネクチン－４タンパク質を、ＣＢＳコーティング溶
液を用い、ウェル当たり１００μＬ、２μｇ／ｍＬまで希釈し３７℃で２時間インキュベ
ートした；ＰＢＳＴ ３００μＬを用いた洗浄を１回実施し、次いで、ＰＢＳ（２％ＢＳ
Ａ）をウェル当たり１００μＬ添加し、３７℃で２時間のインキュベーションを実施した
；ビオチン標識されたネクチン－１－ｈＦｃをＰＢＳ（２％ＢＳＡ）で２０μｇ／ｍＬま
で希釈した；検出する抗体をＰＢＳ（２％ＢＳＡ）で希釈し、ここで、３１ＨＺ及び７４
ＨＺの希釈は、３．７３μｇ／ｍＬから出発して３倍希釈、９の濃度点とし、５６ＨＺの
希釈は１．２５μｇ／ｍＬから出発して、２倍希釈、１０の濃度点とした；上記の２つの
希釈溶液を等体積で十分に混合し、次いで、対応するウェルに１００μＬ／ウェルで添加
し、室温で２時間のインキュベーションを実施した；ＰＢＳＴ ３００μＬを用いた洗浄
を３回実施した；ＨＲＰ－ストレプトアビジンを、ＰＢＳ（２％ＢＳＡ）を用いて１：１
００００比で希釈し、対応するウェルに１００μＬ／ウェルで添加し、室温で１時間のイ
ンキュベーションを実施した；ＰＢＳＴ ３００μＬを用いた洗浄を５回実施した；ＴＭ
Ｂ １００μＬを対応するウェルに添加し、室温で１０分間にわたって発色を実施し、次
いで、２ＮのＨ２ＳＯ４ ５０μＬを添加することによって終結させ、４５０ｎｍにおけ
る読み取りの収集のためにマイクロプレートリーダーを使用した。
実験結果が図７Ａ及び７Ｂに示されており、それらの結果から、３１ＨＺ、５６ＨＺ及
び７４ＨＺが、ヒトネクチン－４とヒトネクチン－１の結合を競合的に阻害することがで
き、３１ＨＺ、５６ＨＺ及び７４ＨＺの競合ＩＣ５０値がそれぞれ２７．６２ｎｇ／ｍＬ
、２６．９０ｎｇ／ｍＬ、及び２７．２２ｎｇ／ｍＬであり、これらのＩＣ５０値がエン
ホルツマブのＩＣ５０値（２７．１１ｎｇ／ｍＬ）と同等であったことが示される。
実施例６：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体の特異性の検出
ネクチンファミリーには、ネクチン－１、ネクチン－２、ネクチン－３及びネクチン－
４というメンバーが含まれ、これらのメンバーは、共有する配列同一性は約２５％である
が、同様の構造及び機能を有する。本発明の抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗
体がネクチン－４のみを認識し、ネクチン－１、ネクチン－２及びネクチン－３は認識し
ないかどうかを検出するために、試験する抗体の特異性をＥＬＩＳＡによって検出した。
具体的なステップは以下の通りであった：ヒトネクチン－１、ネクチン－２、ネクチン－
３及びネクチン－４抗原をＣＢＳコーティング溶液で１μｇ／ｍＬまで希釈し、ＥＬＩＳ
Ａプレート上にウェル当たり１００μＬでコーティングし、４℃で一晩静置した；翌日、
ウェル内の液体を廃棄し、ＰＢＳ ３００μＬを用いた洗浄を１回実施した；ＰＢＳ（２
％ＢＳＡ含有）１００μＬを添加し、３７℃で２時間にわたってブロッキングを実施した
；３１ＨＺ、５６ＨＺ、７４ＨＺ及びエンホルツマブ抗体をＰＢＳ（２％ＢＳＡ含有）で
希釈し、１００μＬを取り、対応するウェルに添加し、３７℃で２時間インキュベートし
た；ＰＢＳＴ ３００μＬを用いた洗浄を３回実施した；ＨＲＰ標識されたヤギ抗ヒト二
次抗体をＰＢＳ（２％ＢＳＡ含有）を用いて１：１００００の比で希釈し、１００μＬを
取り、対応するウェルに添加し、３７℃で１時間のインキュベーションを実施した；ＰＢ
ＳＴ ３００μＬを用いた洗浄を５回実施した；ＴＭＢ発色溶液１００μＬを対応するウ
ェルに添加し、室温で５～２０分間にわたって発色を実施した；停止させるために２Ｎの
Ｈ２ＳＯ４ ５０μＬを添加し、ＯＤ４５０ｎｍにおける読み取りを収集するためにマイ
クロプレートリーダーを使用し、データをカーブフィッティングのためにＧｒａｐｈＰａ
ｄ Ｐｒｉｓｍにインポートした。
実験結果が図８Ａ、８Ｂ、及び８Ｃに示されており、それらの結果から、３１ＨＺ、５
６ＨＺ及び７４ＨＺの全てがヒトネクチン－４を特異的に認識し、ネクチン－１、ネクチ
ン－２及びネクチン－３は認識しなかったことが示される。
実施例７：抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣの調製
ＴＬ００１と抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体をカップリングすることに
よって抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣを調製した。ここで、ＴＬ００１の構造は、式（１）
：
Figure 2023166465000019
 に示される。
ＴＬ００１の調製方法は、関連性のある内容全体が参照により本明細書に組み込まれる
ＷＯ２０１９／１１４６６６を参照することができる。
抗ヒトネクチン－４抗体コンジュゲート（抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣ）の調製方法は
、以下の通りであった：
（１）カップリング：抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体３０ｍｇを取り、
希釈剤（２０ｍＭのＰＢ＋１０５ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．７）で希釈し、エデト酸ナト
リウム溶液を最終濃度５ｍＭで添加し、十分に混合した；ＴＣＥＰ溶液を添加し（ＴＣＥ
Ｐと抗体のモル比は４．４：１であった）、十分に混合し、室温で３０分間静置した；ジ
メチルスルホキシドに溶解させたＴＬ００１（ＴＬ００１と抗体のモル比は９：１であっ
た）を上記の溶液系添加し、十分に混合し、室温で２時間静置して、カップリングした試
料を得、この試料をそれぞれ３１ＨＺ－ＴＬ００１、５６ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－
ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１と名付けた。抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣを
緩衝液の交換に供し、次いで、一定分量にして４℃で保管した。
（２）検出：
抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣの分子量を以下の条件下でＬＣ－ＭＳによって分析した：
クロマトグラフィー条件：
液体クロマトグラフィーカラム：Ｔｈｅｒｍｏ ＭＡｂＰａｃ ＲＰ ３．０×１００
ｍｍ；
移動相Ａ：０．１％ＦＡ／９８％Ｈ２Ｏ／２％ＡＣＮ；
移動相Ｂ：０．１％ＦＡ／２％Ｈ２Ｏ／９８％ＡＣＮ；
流速：毎分０．２５ｍＬ；試料チャンバー温度：８℃；カラム温度：６０℃；サンプル
サイズ：１μＬ；
Figure 2023166465000020
 切り換え弁：廃棄のために０～３分、ＭＳのために３～２２分、廃棄のために２２～３
０分
質量分析条件：
質量分析計モデル：ＡＢ Ｓｃｉｅｘ Ｔｒｉｐｌｅ ＴＯＦ ５６００＋；
パラメータ：ＧＳ１ ３５；ＧＳ２ ３５；ＣＵＲ ３０；ＴＥＭ ３５０；ＩＳＶＦ
５５００；ＤＰ ２００；ＣＥ １０；ｍ／ｚ ６００－４０００；合計４０までのタ
イムビン。
カップリングした抗ヒト３１ＨＺ－ＴＬ００１の軽鎖及び重鎖の理論分子量及び測定さ
れた分子量（重鎖を主要なグリコフォームＧ０Ｆによって算出した）を以下の表に示す：
Figure 2023166465000021
０～１つの毒素とカップリングした３１ＨＺ－ＴＬ００１の軽鎖（ＬＣ及びＤＡＲ１の
割合はそれぞれ０．１％及び９９．９％であった）、及び０～４つの毒素とカップリング
した重鎖（ＨＣ、ＤＡＲ１、ＤＡＲ２、ＤＡＲ３及びＤＡＲ４の割合はそれぞれ０．０％
、２．０％、１０．２％、８６．１％、１．８％であった）、したがって、毒素と抗体の
薬物－抗体比（ＤＡＲ）は、算出式：ＤＡＲ＝軽鎖ＤＡＲ１×２＋重鎖（ＤＡＲ１×１＋
ＤＡＲ２×２＋ＤＡＲ３×３＋ＤＡＲ４×４）×２に従って、７．７５であると算出され
た。
同じ方法を使用することにより検出された５６ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－ＴＬ００
１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１のＤＡＲ値は、それぞれ７．７１、７．９８及び８．
０１であった。
上記の質量分析の分析結果に従って、抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣの構造は、以下と決
定されるはずである：
（式中、Ａは抗ヒトネクチン－４ヒト化モノクローナル抗体を表し、γはＡのチオール基
とチオエーテル結合を形成することによってＡと連結したＴＬ００１の数を指し、１～１
０の整数である）。
ＶＣ－ＭＭＡＥとエンホルツマブをカップリングすることにより、エンホルツマブ－Ｖ
Ｃ－ＭＭＡＥを調製した。調製及び検出方法は上記の通りであり、抗体とＶＣ－ＭＭＡＥ
のモル比は１：５であった。このエンホルツマブ－ＶＣ－ＭＭＡＥのバッチのＤＡＲ値は
５．０９であった。
実施例８：ヒトネクチン－４の高発現を伴う腫瘍細胞株に対する抗ヒトネクチン－４ Ａ
ＤＣの死滅活性の検出
ヒトネクチン－４の高発現を伴う細胞株に対する３１ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－Ｔ
Ｌ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１の死滅活性を検出するために、Ａ５４９－ネク
チン－４安定細胞株を選択した。具体的な実験ステップは以下の通りであった：Ａ５４９
－ネクチン－４細胞を消化し、細胞を遠心分離によって収集し、ＤＭＥＭ＋４％ＦＢＳ培
地に１００，０００／ｍＬまで再懸濁させ、１００μＬ／ウェルの細胞を９６ウェルプレ
ートに広げた；ＡＤＣ分子を、ＤＭＥＭ基本培地を用い、最終濃度１５０μｇ／ｍＬから
出発して、４倍希釈、１１の濃度点として勾配で希釈し、対応するウェルにウェル当たり
１００μＬで添加し、最終的な血清濃度を２％とした；３７℃、５％ＣＯ２のインキュベ
ーターで７２時間のインキュベーションを実施した；ＣＣＫ８（Ｒｈｉｎｏｇｅｎ）を２
０μＬ／ウェルで添加し、３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーターで０．５～２．５時間
インキュベートし、３０分毎にＯＤ４５０ｎｍの読み取りをマイクロプレートリーダー（
ＭＤ）で得、カーブフィッティングのためにＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍにインポート
した。
実験結果が図９Ａ及び９Ｂに示されており、それらの結果から、３１ＨＺ－ＴＬ００１
、７４ＨＺ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１の全てが、Ａ５４９－ネクチン
－４細胞を有効に死滅させることができ、ＥＣ５０値がそれぞれ１３９０ｎｇ／ｍＬ、１
３６４ｎｇ／ｍＬ及び２０４９ｎｇ／ｍＬであったことが示され、３１ＨＺ－ＴＬ００１
及び７４ＨＺ－ＴＬ００１のヒトネクチン－４の高発現を伴う腫瘍細胞株に対する死滅活
性がエンホルツマブ－ＴＬ００１のヒトネクチン－４の高発現を伴う腫瘍細胞株に対する
死滅活性よりも良好であったことが示された；一方で、ヒトネクチン－４を過剰発現して
いないＡ５４９細胞に対する３１ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－ＴＬ００１及びエンホル
ツマブ－ＴＬ００１の死滅活性ＥＣ５０値は、それぞれ５９８２ｎｇ／ｍＬ、６２５１ｎ
ｇ／ｍＬ及び５６０４ｎｇ／ｍＬであった。全体として、Ａ５４９－ネクチン－４細胞及
びＡ５４９細胞に対する死滅活性に関して、３１ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－ＴＬ００
１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１はネクチン－４特異的である。
ヒトネクチン－４の高発現を伴うＴ２４－ネクチン－４細胞株に対する３１ＨＺ－ＴＬ
００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１の死滅活性を上記と同じ実験方法によって検出した。実
験結果が図９Ｃ及び９Ｄに示されており、それらの結果から、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び
５６ＨＺ－ＴＬ００１がどちらもＴ２４－ネクチン－４細胞を有効に死滅させることがで
き、ＥＣ５０値はそれぞれ１２７７ｎｇ／ｍＬ及び１５６８ｎｇ／ｍＬであったことが示
され、これにより、この２つのＡＤＣの死滅活性が実質的に等価であることが示される；
ヒトネクチン－４を過剰発現していないＴ２４細胞に対する３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５
６ＨＺ－ＴＬ００１の死滅活性ＥＣ５０値はそれぞれ２８８４ｎｇ／ｍＬ及び３６６５ｎ
ｇ／ｍＬであり、これらの死滅活性はＴ２４－ネクチン－４細胞に対するものよりも有意
に弱く、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１のどちらの死滅効果もネクチン
－４特異的であったことが示される。
実施例９：ヒトネクチン－４を内因性に発現する腫瘍細胞株に対する抗ヒトネクチン－４
ＡＤＣの死滅活性の検出
ヒトネクチン－４を内因性に発現する腫瘍細胞株に対する３１ＨＺ－ＴＬ００１、７４
ＨＺ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１の死滅活性を検出するために、Ｔ４７
Ｄ腫瘍細胞株を選択した。具体的な実験ステップは以下の通りであった：Ｔ４７Ｄ細胞を
消化し、細胞を遠心分離によって収集し、１６４０＋４％ＦＢＳ培地に１００，０００／
ｍＬまで再懸濁させ、１００μＬ／ウェルの細胞で９６ウェルプレートに広げた；ＡＤＣ
分子を１６４０基本培地に、最終濃度１５０μｇ／ｍＬから出発して、４倍希釈、１１の
濃度点として勾配で希釈し、対応するウェルにウェル当たり１００μＬで添加し、最終的
な血清濃度を２％とした；３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーターで７２時間のインキュ
ベーションを実施した；ＣＣＫ８（Ｒｈｉｎｏｇｅｎ）を２０μＬ／ウェルで添加し、３
７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで０．５～２．５時間インキュベートし、３０分毎に
ＯＤ４５０ｎｍの読み取りをマイクロプレートリーダー（ＭＤ）で収集し、カーブフィッ
ティングのためにＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍにインポートした。
実験結果が図１０Ａに示されており、その結果から、３１ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ
－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１がＴ４７Ｄ細胞を有効に死滅させることが
でき、ＥＣ５０値がそれぞれ２０６．１ｎｇ／ｍＬ、６１１．３ｎｇ／ｍＬ及び２２９．
２ｎｇ／ｍＬであったことが示され、３１ＨＺ－ＴＬ００１のＴ４７Ｄ細胞に対する死滅
活性がエンホルツマブ－ＴＬ００１のＴ４７Ｄ細胞に対する死滅活性と同等であったこと
が示される。
ヒトネクチン－４を内因性に発現する腫瘍細胞株ＭＤＡ－ＭＢ－４６８に対する３１Ｈ
Ｚ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１の死滅活性を上
記と同じ実験方法によって検出した。実験結果が図１０Ｂに示されており、その結果から
、３１ＨＺ－ＴＬ００１、７４ＨＺ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＴＬ００１がＭＤ
Ａ－ＭＢ－４６８細胞を有効に死滅させることができ、ＥＣ５０値はそれぞれ１０３０ｎ
ｇ／ｍＬ、２２７７ｎｇ／ｍＬ及び１１９０ｎｇ／ｍＬであったことが示され、これによ
り、３１ＨＺ－ＴＬ００１のＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞に対する死滅活性がエンホルツマ
ブ－ＴＬ００１のＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞に対する死滅活性と同等であったことが示さ
れる。
ヒトネクチン－４を内因性に発現する腫瘍細胞株ＮＣＩ－Ｎ８７に対する３１ＨＺ－Ｔ
Ｌ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１の死滅活性を上記と同じ実験方法によって通り検出し
た。実験結果が図１０Ｃに示されており、その結果から、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６
ＨＺ－ＴＬ００１のどちらもＮＣＩ－Ｎ８７細胞を有効に死滅させることができ、ＥＣ５
０値はそれぞれ９３７６ｎｇ／ｍＬ及び１０９３５ｎｇ／ｍＬであったことが示され、こ
れにより、３１ＨＺ－ＴＬ００１と５６ＨＺ－ＴＬ００１の死滅活性が実質的に等しかっ
たことが示される。
結論として、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１のヒトネクチン－４を内
因性に発現する腫瘍細胞株に対する死滅活性は、エンホルツマブ－ＴＬ００１のヒトネク
チン－４を内因性に発現する腫瘍細胞株に対する死滅活性と実質的に等しい。
実施例１０：ＣＤＸモデルにおける抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣのｉｎ ｖｉｖｏ薬力学
的性質
ヒト非小細胞肺がん細胞株ＮＣＩ－Ｈ３２２ＭのＣＤＸモデルを構築することにより、
ＡＤＣ分子の抗腫瘍効果を評価した。具体的なステップは以下の通りであった：ＮＣＩ－
Ｈ３２２Ｍ細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地と一
緒に３７℃及び５％ＣＯ２で培養した。指数関数成長期にある細胞を収集し、ＰＢＳに再
懸濁させ、雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス（Ｂｉｏｃｙｔｏｇｅｎ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｇｅｎ
ｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）に１×１０７個／マウス（ＰＢＳ
０．１ｍＬに懸濁）で皮下接種して、皮下異種移植腫瘍モデルを樹立した。平均腫瘍体
積が７０～１００ｍｍ３に達したら、マウスを腫瘍体積に応じてランダム化し、各群５匹
マウスとした。群分けした日を０日目と記録し、群には、ビヒクル群（通常の生理食塩水
）（陰性対照）、３１ＨＺ－ＴＬ００１群（３ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇ）、５６Ｈ
Ｚ－ＴＬ００１群（３ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇ）、エンホルツマブ－ＴＬ００１群
（１０ｍｇ／ｋｇ）並びにエンホルツマブ－ＶＣ－ＭＭＡＥ群（１０ｍｇ／ｋｇ）を含め
た。全ての試料を週に２回、合計６回の投薬として尾静脈注射によって投与した。
腫瘍の直径を週に２回、投与後にノギスによって測定し、腫瘍体積を次式に従って算出
した：Ｖ＝０．５ａ×ｂ２（式中、ａ及びｂはそれぞれ腫瘍の長さ及び短径を表す）。動
物の死亡を毎日観察し、記録した。
次式を使用して、腫瘍成長阻害率ＴＧＩ（％）を算出し、その腫瘍成長阻害率ＴＧＩ（
％）を使用して腫瘍阻害有効性を評価した：
Figure 2023166465000023
 式中、
ＶＴ－終了：実験の終了時の処置群の平均腫瘍体積；
ＶＴ－開始：投与の開始時の処置群の平均腫瘍体積；
ＶＣ－終了：実験の終了時の陰性対照群の平均腫瘍体積；
ＶＣ－開始：投与の開始時の陰性対照群の平均腫瘍体積
である。
実験結果が表９及び図１１及び１２に示されており、それらの結果から、３１ＨＺ－Ｔ
Ｌ００１、５６ＨＺ－ＴＬ００１、エンホルツマブ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－Ｖ
Ｃ－ＭＭＡＥがＮＣＩ－Ｈ３２２Ｍ異種移植腫瘍モデルにおける腫瘍成長に対する有意な
阻害効果を用量依存的に有したことが示される。６回の投薬後（２１日目）、陰性対照群
と比較して、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでは、３１ＨＺ－ＴＬ００１、５６ＨＺ－ＴＬ
００１、エンホルツマブ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＶＣ－ＭＭＡＥのＴＧＩ値は
それぞれ１５５．７９％、１６３．５６％、１５６．３１％及び１７３．７９％であった
。観察期間中、処置群の全てにおいて著しい体重減少は認められず、これにより、動物の
このＡＤＣに対する忍容性が良好であったことが示される。
Figure 2023166465000024
上記の結果から、３ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルにおける３１ＨＺ－Ｔ
Ｌ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１のＴＧＩ値を考慮して、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５
６ＨＺ－ＴＬ００１のどちらも腫瘍成長を用量依存的に有効に阻害することができたこと
が示される。１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでは、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－Ｔ
Ｌ００１のどちらも、群内の５匹のマウス全ての腫瘍を部分的に退縮させることができ、
エンホルツマブ－ＴＬ００１及びエンホルツマブ－ＶＣ－ＭＭＡＥの有効性は基本的に等
しかった。さらに、３１ＨＺ－ＴＬ００１及び５６ＨＺ－ＴＬ００１の腫瘍担持マウスに
よる忍容性は良好であった。
実施例１１：ＰＤＸモデルにおける抗ヒトネクチン－４ ＡＤＣのｉｎ ｖｉｖｏ薬力学
的性質
ＨｕＰｒｉｍｅ（登録商標）膀胱がん異種移植モデルＢＬ９２００（Ｃｒｏｗｎ Ｂｉ
ｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｔａｉｃａｎｇ）Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ネクチン－４の高発現を伴う、
６３歳の男性患者に由来する）腫瘍担持マウスから腫瘍組織を収集し、直径３×３×３ｍ
ｍの小片に切り、ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス（Ｊｉａｎｇｓｕ Ｊｉｃｕｉ Ｙａｏｋａｎ
ｇ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）の右前側肩甲骨に皮下接種した。
腫瘍担持マウスの平均腫瘍体積が約１５０～２５０ｍｍ３に達したら、マウスを腫瘍サイ
ズに応じた群にランダムに分け、各群７匹のマウスとし、群分けした日を０日目と定義し
た。群を４つとした：ヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体群（ＩｇＧ１ ３ｍｇ／ｋｇ、
陰性対照）、ヒトＩｇＧ１－ＴＬ００１群（ＩｇＧ１－ＴＬ００１と略される、３ｍｇ／
ｋｇ；調製方法については実施例７を参照されたい）、５６ＨＺ－ＴＬ００１について１
ｍｇ／ｋｇ群及び３ｍｇ／ｋｇ群。全ての試料を週に２回、合計６回の投薬として尾静脈
注射によって投与した。投与後、マウスの腫瘍体積及び体重を観察し、定期的に測定した
。測定及び算出方法は実施例１０に記載の通りであった。
実験結果が表１０及び図１３及び１４に示されている。６回の投薬後（２０日目）、３
ｍｇ／ｋｇのヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）陰性対照群と比較して、３ｍｇ／ｋｇの５６Ｈ
Ｚ－ＴＬ００１では、腫瘍成長に対して１０５．５５％（Ｐ＜０．０５）の阻害ＴＧＩが
示され、３ｍｇ／ｋｇの５６ＨＺ－ＴＬ００１の群のマウス４匹において腫瘍の部分的退
縮が観察された；３ｍｇ／ｋｇの５６ＨＺ－ＴＬ００１では、同じ用量のアイソタイプ対
照ＡＤＣ（ｈＩｇＧ１－ＴＬ００１、３ｍｇ／ｋｇ）よりも有意に改善された、腫瘍成長
に対する阻害効果が示された（ｐ＜０．００１）。ｈＩｇＧ１群のマウス１匹が死亡し、
正常な活性を有する他の群では死亡は観察されなかった。投与期間中、各群のマウスの体
重はわずかに減少し、その中でもＩｇＧ１群では効果的な処置の欠如に起因して体重が最
も大きく減少し、これにより、腫瘍担持マウスのＡＤＣに対する忍容性が良好であったこ
とが示される。
上記の結果から、５６ＨＺ－ＴＬ００１がＢＬ９２００膀胱がんＰＤＸ異種移植モデル
の腫瘍成長に対して有意な阻害効果を示したことが示される。さらに、腫瘍担持マウスの
５６ＨＺ－ＴＬ００１に対する忍容性は良好であった。

Figure 2023166465000025
本発明の特定の実施形態が詳細に記載されているが、開示された全ての教示を踏まえて
種々の改変及び変形を詳細に対してなすことができること、並びに、これらの変化が全て
本発明の範囲内に入ることが当業者には理解されよう。本発明の範囲は添付の特許請求の
範囲及び任意のその等価物によって示される。
配列リスト
Figure 2023166465000026
Figure 2023166465000027
Figure 2023166465000028

Claims (30)

  1. ネクチン－４に特異的に結合する抗体又はその抗原結合性断片であって、
    （１ａ）
    Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しくは
    Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （１ｂ）
    Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しくは
    Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （１ｃ）
    Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号１１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１２若しくは６３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しくは
    Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （１ｄ）
    ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号１３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号１５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号１６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （２ａ）
    Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号２１若しくは１８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （２ｂ）
    Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号２７若しくは３６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （２ｃ）
    Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号２９若しくは４４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号３０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （２ｄ）
    ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号３１若しくは５４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号３２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号３３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （３ａ）
    Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号３９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （３ｂ）
    Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号４５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （３ｃ）
    Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号４７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４８若しくは６４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    又は
    （３ｄ）
    ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの重鎖ＣＤＲ：
    配列番号４９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号５０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント；及び／若しく
    は
    ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の３つの軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号５２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号５３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
    を含み、
    バリアントが、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又
    は付加（例えば、１つ、２つ又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有し、置換が
    、保存的置換であることが好ましく、
    抗体又は抗原結合性断片が、ヒト又はマウス免疫グロブリンに由来するフレームワーク
    領域をさらに含むことが好ましく、
    抗体又は抗原結合性断片が、ヒトネクチン－４に結合することが好ましい、
    抗体又はその抗原結合性断片。
  2. （ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
    ＣＤＲ：
    配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
    Ｒ：
    配列番号１１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１２若しくは６３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
    ：
    配列番号１３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号１５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号１６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号１７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
    を含み、
    バリアントが、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又
    は付加（例えば、１つ、２つ又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有し、置換が
    、保存的置換であることが好ましい、
    請求項１に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  3. （ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
    ＣＤＲ：
    配列番号２１若しくは１８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号２７若しくは３６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
    Ｒ：
    配列番号２９若しくは４４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号３０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号２４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号２５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
    ：
    配列番号３１若しくは５４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号３２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号３３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号３４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号３５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号２６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；
    を含み、
    バリアントが、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又
    は付加（例えば、１つ、２つ又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有し、置換が
    、保存的置換であることが好ましい、
    請求項１に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  4. （ａ）Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖
    ＣＤＲ：
    配列番号３９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｂ）Ａｂｍ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ：
    配列番号４５に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４６に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｃ）Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤ
    Ｒ：
    配列番号４７に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４８若しくは６４に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号４１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号４２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号４３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント；又は
    （ｄ）ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って定義される以下の６つの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ
    ：
    配列番号４９に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ１若しくはそのバリアント、
    配列番号５０に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ２若しくはそのバリアント、
    配列番号５１に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｈ３若しくはそのバリアント、
    配列番号５２に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ１若しくはそのバリアント、
    配列番号５３に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ２若しくはそのバリアント、
    配列番号８に記載の配列を含むＣＤＲ－Ｌ３若しくはそのバリアント
    を含み、
    バリアントが、それが由来する配列と比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又
    は付加（例えば、１つ、２つ又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有し、置換が
    、保存的置換であることが好ましい、
    請求項１に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  5. 配列番号１若しくは配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及
    び／若しくは配列番号２若しくは配列番号５６に記載の配列若しくはそのバリアントを有
    するＶＬ；又は
    配列番号１９若しくは配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント
    及び／若しくは配列番号２０若しくは配列番号５８に記載の配列若しくはそのバリアント
    を有するＶＬ；又は
    配列番号３７若しくは配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント
    及び／若しくは配列番号３８若しくは配列番号６０に記載の配列若しくはそのバリアント
    を有するＶＬ
    を含み、
    バリアントが、それが由来する配列と比較して少なくとも８０％、少なくとも８５％、
    少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくと
    も９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％
    、少なくとも９９％若しくは１００％の配列同一性を有する、又はそれが由来する配列と
    比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１つ、２つ、
    ３つ、４つ若しくは５つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有し、置換が、保存的
    置換であることが好ましい、
    請求項１～４のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  6. （１）配列番号１に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列番
    号２に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
    （２）配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
    番号２０に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
    （３）配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
    番号３８に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
    （４）配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
    番号５６に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
    （５）配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
    番号５８に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント；又は
    （６）配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ若しくはそのバリアント及び／又は配列
    番号６０に記載の配列を有するＶＬ若しくはそのバリアント
    を含み、
    バリアントが、それが由来する配列と比較して少なくとも８０％、少なくとも８５％、
    少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくと
    も９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％
    、少なくとも９９％若しくは１００％の配列同一性を有する、又はそれが由来する配列と
    比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１つ、２つ、
    ３つ、４つ若しくは５つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有し、置換が、保存的
    置換であることが好ましい、
    請求項１～５のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  7. マウス抗体、キメラ抗体、又はヒト化抗体である、請求項１～６のいずれか一項に記載
    の抗体又はその抗原結合性断片。
  8. ヒト免疫グロブリン重鎖定常領域若しくはそのバリアント及び軽鎖定常領域若しくはそ
    のバリアントをさらに含み、
    バリアントが、それが由来する野生型配列と比較して、１つ又は複数のアミノ酸の置換
    、欠失又は付加（例えば、最大２０個、最大１５個、最大１０個、又は最大５個のアミノ
    酸の置換、欠失又は付加；例えば、１つ、２つ、３つ、４つ又は５つのアミノ酸の置換、
    欠失又は付加）を有し、
    重鎖定常領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４重鎖定常領域などのＩｇ
    Ｇ重鎖定常領域を有し、軽鎖定常領域が、κ又はλ軽鎖定常領域から選択されることが好
    ましく、
    重鎖定常領域が、ＩｇＧ１重鎖定常領域であることがより好ましく、
    重鎖定常領域が、配列番号６１に記載の配列を有し、軽鎖定常領域が、κ軽鎖定常領域
    である；及び／又は軽鎖定常領域が、配列番号６２に記載の配列を有することが最も好ま
    しい、
    請求項１～７のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  9. 重鎖及び軽鎖を含み、
    （ａ）重鎖が、配列番号１に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列を
    有する重鎖定常領域を含み、軽鎖が、配列番号２に記載の配列を有するＶＬ及び配列番号
    ６２に記載の配列を有する軽鎖定常領域を含む；又は
    （ｂ）重鎖が、配列番号１９に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列
    を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖が、配列番号２０に記載の配列を有するＶＬ及び配列
    番号６２に記載の配列を有する軽鎖定常領域を含む；又は
    （ｃ）重鎖が、配列番号３７に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列
    を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖が、配列番号３８に記載の配列を有するＶＬ及び配列
    番号６２に記載の配列を有する軽鎖定常領域を含む；又は
    （ｄ）重鎖が、配列番号５５に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列
    を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖が、配列番号５６に記載の配列を有するＶＬ及び配列
    番号６２に記載の配列を有する軽鎖定常領域を含む；又は
    （ｅ）重鎖が、配列番号５７に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列
    を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖が、配列番号５８に記載の配列を有するＶＬ及び配列
    番号６２に記載の配列を有する軽鎖定常領域を含む；又は
    （ｆ）重鎖が、配列番号５９に記載の配列を有するＶＨ及び配列番号６１に記載の配列
    を有する重鎖定常領域を含み、軽鎖が、配列番号６０に記載の配列を有するＶＬ及び配列
    番号６２に記載の配列を有する軽鎖定常領域を含む、
    請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  10. ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ（
    ｄｓＦｖ）、ダイアボディ、二重特異性抗体及び多重特異性抗体からなる群から選択され
    る、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  11. ネクチン－４のＩｇＶドメインに結合する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗
    体又はその抗原結合性断片。
  12. 少なくとも１つの標識とコンジュゲートしており、好ましくは、標識が酵素、蛍光色素
    、放射性同位元素、ビオチン及びコロイド金からなる群から選択される、請求項１～１１
    のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片。
  13. 請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片及び少なくとも１
    つの治療剤を含む抗体コンジュゲート。
  14. 治療剤が、細胞傷害作用剤である、請求項１３に記載の抗体コンジュゲート。
  15. 式（Ｉ）、
    Figure 2023166465000029
     （式中、
    Ａは、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片を表し、
    Ｌは、２～１０アミノ酸からなるアミノ酸又はペプチドを含み、Ｌは、Ｖａｌ、Ｃｉｔ
    、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、
    Figure 2023166465000030
     から選択されることがさらに好ましく、位置１及び２のうちの一方は、ＬとＡが接続する
    位置を表し、他方は、ＬとＤが接続する位置を表し、
    Ｄは、細胞傷害作用剤、治療用抗体、放射性同位元素、オリゴヌクレオチド及びその類
    似体、生物学的に活性なペプチド、タンパク質毒素及び酵素からなる群から選択され、Ｄ
    は、抗腫瘍生物活性を有する分子であることが好ましく、Ｄは、
    であることがさらに好ましく、
    γは１～１０の整数である）
    に示される構造を有する、請求項１３又は１４に記載の抗体コンジュゲート。
  16. （Ｌ－Ｄ）部分が、Ａのスルフヒドリル基とチオエーテル結合を形成することによって
    接続した式（１）の構造を有し、
    Figure 2023166465000032
     抗体コンジュゲートが、式（２）の構造：
    （式中、γは、１から１０までの整数であり、Ａは、請求項１～１１のいずれか一項に
    記載の抗体又はその抗原結合性断片を表す）
    を有する、
    請求項１５に記載の抗体コンジュゲート。
  17. 治療剤が、放射性同位元素であり、
    放射性同位元素が、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、１１１Ｉｎ、１７
    ７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１５３Ｓｍ、９０Ｙからなる群から選択されることが
    好ましい、
    請求項１３に記載の抗体コンジュゲート。
  18. 請求項１３～１７のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲートを含む組成物であって、
    組成物中の治療剤と抗体又はその抗原結合性断片のモル比（ＤＡＲ値）が、１から１０の
    間の少数又は整数（例えば、１から８の間の少数又は整数、例えば、１．０、１．５、２
    ．０、２．５、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３
    ．７９、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、
    ４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、
    ５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、
    ６．７、６．８、６．９、６．９５、７．０、７．０３、７．１、７．１２、７．２、７
    ．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９又は８．０など）である、組成
    物。
  19. 請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片、膜貫通ドメイン
    、及び１つ又は複数の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む、キメラ抗原受容体（Ｃ
    ＡＲ）。
  20. 請求項１９に記載のＣＡＲを表面に発現する免疫エフェクター細胞であって、細胞傷害
    性Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される
    ことが好ましい、免疫エフェクター細胞。
  21. 請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片をコードする核酸
    分子。
  22. 請求項２１に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
  23. 請求項２１に記載の核酸分子又は請求項２２に記載の発現ベクターを含む宿主細胞であ
    って、
    真核細胞であることが好ましく、哺乳動物細胞であることがより好ましく、チャイニー
    ズハムスター卵巣細胞であることが最も好ましい、又は、
    原核細胞であることが好ましく、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）である
    ことがより好ましい、宿主細胞。
  24. 請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片、及び少なくとも
    １つの他の抗体又はその抗原結合性断片又は抗体類似体を含み、その結果、ネクチン－４
    及び少なくとも１つの他の抗原に結合することが可能であり、二重特異性又は三重特異性
    又は四重特異性抗体であることが好ましい、多重特異性抗体。
  25. 請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片、及び追加的な生
    物活性ポリペプチドを含む融合タンパク質であって、
    追加的な生物活性ポリペプチドが、治療活性、結合活性又は酵素活性を有するポリペプ
    チド又はタンパク質である、融合タンパク質。
  26. 請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片、請求項１３～１
    ７のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート、請求項１８に記載の組成物、請求項２０
    に記載の免疫エフェクター細胞、請求項２４に記載の多重特異性抗体、又は請求項２５に
    記載の融合タンパク質、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含む、医薬組
    成物。
  27. 医薬の製造における、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性
    断片、請求項１３～１７のいずれか一項に記載の抗体コンジュゲート、請求項１８に記載
    の組成物、請求項２０に記載の免疫エフェクター細胞、請求項２４に記載の多重特異性抗
    体、請求項２５に記載の融合タンパク質又は請求項２６に記載の医薬組成物の使用であっ
    て、医薬が、がんの処置のために使用され、がんが、胃がん、肝臓がん、肝臓細胞癌、膀
    胱がん、尿路上皮がん、尿道がん、腎盂がん、尿管がん、肺がん、非小細胞肺がん、乳が
    ん、乳管がん、トリプルネガティブ乳がん、膵がん、卵巣がん、頭頸部がん、結腸がん、
    直腸がん及び食道がんからなる群から選択されることが好ましい、使用。
  28. 医薬を、抗新生物剤、化学療法剤、放射性同位元素、免疫チェックポイント阻害剤から
    なる群から選択される１つ又は複数の治療剤と組み合わせて使用する、請求項２７に記載
    の使用。
  29. 医薬を、外科手術、放射線療法、化学療法、標的療法、免疫療法、ホルモン療法、血管
    新生阻害、及び緩和ケアからなる群から選択される１つ又は複数の治療レジメンと組み合
    わせて使用する、請求項２７に記載の使用。
  30. 試料中のネクチン－４の存在を検出する又はネクチン－４の発現レベルを決定する方法
    であって、
    （ａ）試料に、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合性断片を
    接触させるステップと、
    （ｂ）試料中の抗体又は抗原結合性断片とネクチン－４の免疫複合体の形成を検出する
    か又はその量を決定して、試料中のネクチン－４の存在を検出する又はネクチン－４の発
    現レベルを決定するステップと
    を含む、方法。
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CN117982672A (zh) * 2022-07-14 2024-05-07 百奥泰生物制药股份有限公司 抗Nectin-4抗体药物偶联物及应用
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CN110392697A (zh) * 2017-03-02 2019-10-29 国家医疗保健研究所 对nectin-4具有特异性的抗体及其用途
KR20200024788A (ko) * 2017-06-05 2020-03-09 어젠시스 인코포레이티드 넥틴-4 결합 단백질 및 이의 사용 방법
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