KR20240021294A - 항-her3 항체, 이를 함유하는 항체-약물 접합체 및 그 용도 - Google Patents

항-her3 항체, 이를 함유하는 항체-약물 접합체 및 그 용도 Download PDF

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시아오옌 쭝
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베이징 시노타우 바이오-파마슈티컬스 테크놀로지 씨오., 엘티디.
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Abstract

본 발명은 항-HER3 항체, 상기 항-HER3 항체를 함유하는 항체-약물 접합체(ADC)를 제공한다. 또한 HER3을 발현하는 암의 치료에 있어서 상기 항체 또는 ADC의 용도를 제공한다.

Description

항-HER3 항체, 이를 함유하는 항체-약물 접합체 및 그 용도
관련 출원의 상호 참조
본 발명은 2021년 6월 15일에 제출된 PCT 국제 출원 PCT/CN2021/099998의 우선권을 주장하는 바, 해당 발명의 전체 내용은 참조로서 본 명세서에 포함된다.
본 발명은 항-HER3 항체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 항-HER3 항체를 함유하는 항체-약물 접합체 및 HER3을 발현하는 암의 치료에 있어서 이들의 용도에 관한 것이다.
HER3은 ERBB 계열의 구성원으로, 세포 증식, 종양 전이 및 약물 내성에 핵심적인 역할을 한다. EGFR 및 HER2를 표적으로 하는 약물은 다양한 암을 완화하는 데 상당한 임상적 이점을 보였지만, 암 치료를 위한 항-HER3 항체를 개발하려는 이전 시도는 반복적으로 실패하였는데, 이는 HER3 및 이와 관련된 경로를 표적으로 삼는 것만으로 종양 성장을 억제하는 데 충분하지 않을 수 있음을 나타낸다. 이 가설과 일치하게, HER3 표적화 ADC인 U3-1402는 유방암 및 NSCLC에 대한 초기 단계 임상 시험에서 유망한 결과를 보여주었다. 이 밖에, HER3 과 HER2를 모두 제어하는 이중특이적 항체는 일부 농축 집단에서 질병 바이오마커를 유의하게 감소시켰다. 최신 임상적 진보는 별도의 부가 메커니즘을 구비할 경우, HER3은 여전히 유망한 종양학 표적임을 나타낸다.
일 양태에서, 본 발명은 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하는 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 여기서 상기 VH는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H2 및 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H3을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 VH는 서열번호 15로 구성된 CDR-H1, 서열번호 17로 구성된 CDR-H2 및 서열번호 19로 구성된 CDR-H3을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 경쇄 가변 영역(VL)을 더 포함하고, 여기서 상기 VL은 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-L1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-L2 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-L3을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 VL은 서열번호 5로 구성된 CDR-L1, 서열번호 7로 구성된 CDR-L2 및 서열번호 9로 구성된 CDR-L3을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 VH는 서열번호 13의 리더 서열이 있거나 없는 서열번호 12의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 VL은 서열번호 3의 리더 서열이 있거나 없는 서열번호 2의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체는 마우스 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 또는 인간 항체이다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체의 중쇄는 IgG1 유형이다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체는 인간화 항체이고, 중쇄는 서열번호 21, 25 또는 27의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체는 인간화 항체이고, 경쇄는 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 HER3은 인간 또는 원숭이 HER3이다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체는 NRG1에 의해 유도된 HER3의 인산화를 차단한다.
일부 실시형태에서, 인간 또는 원숭이 HER3에 결합하는 상기 항-HER3 항체의 EC50은 1 nM 미만이다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체는 HER3에 결합한 후 내재화 활성을 갖는다.
다른 양태에서, 본 발명은 상기 VH 및/또는 상기 VL을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 핵산을 제공한다.
일부 실시형태에서, 상기 분리된 핵산은 서열번호 1, 11, 22, 24, 26 및 28로부터 선택된다.
다른 양태에서, 본 발명은 상기 분리된 핵산을 포함하는 벡터(vector)를 제공한다.
다른 양태에서, 본 발명은 상기 분리된 핵산 또는 상기 벡터를 포함하는 숙주 세포를 제공한다.
다른 양태에서, 본 발명은 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 발현하는 숙주 세포를 제공한다.
다른 양태에서, 본 발명은 화학적 모이어티에 접합된 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 항체 접합체를 제공한다.
일부 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 링커를 통해 상기 화학적 모이어티에 접합된다.
일부 실시형태에서, 상기 링커는 효소 절단이 가능하다.
일부 실시형태에서, 상기 링커는 Val-Cit 모이어티를 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 항체 접합체는 항체-약물 접합체(ADC)이다.
일부 실시형태에서, 상기 화학적 모이어티는 방사성 동위원소, 화학요법제 또는 세포 독성제이다.
일부 실시형태에서, 상기 세포 독성제는 독소이다.
일부 실시형태에서, 상기 독소는 아우리스타틴 E(auristatin E), 아우리스타틴 F(auristatin F), MMAE 및 MMAF로부터 선택된다.
다른 양태에서, 본 발명은 상기 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편 또는 상기 항체 접합체, 및 약학적으로 허용 가능한 담체(carrier)를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
일부 실시형태에서, 상기 약학적 조성물은 하나 이상의 다른 항암제를 더 포함한다.
다른 양태에서, 본 발명은 암 치료용 약물의 제조에 있어서 상기 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편 또는 상기 항체 접합체의 용도를 제공한다.
일부 실시형태에서, 상기 암은 HER3을 발현한다.
일부 실시형태에서, 상기 암은 위암 또는 결장직장암이다.
다른 양태에서, 본 발명은 상기 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 상기 항체 접합체 또는 상기 약학적 조성물의 치료 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 상기 암은 HER3을 발현한다.
일부 실시형태에서, 상기 암은 위암 또는 결장직장암이다.
도 1은 쥐 3F8이 SP2/0-HER3 세포에 특이적으로 결합하는 것을 도시한다.
도 2는 ELISA에 의해 결정된 인간 HER3, HER2 및 EGFR에 대한 쥐 3F8의 결합 친화도를 도시한다.
도 3은 ELISA에 의해 결정된 쥐 3F8이 유사한 효능으로 인간 및 원숭이 HER3을 인식하는 것을 도시한다.
도 4는 쥐 3F8이 NRG1에 의해 유도된 인산화된 HER3을 차단하는 것을 도시한다.
도 5는 쥐 3F8이 표면 HER3 수준이 다른 세포에 의해 빠르게 흡수되는 것을 도시한다.
도 6은 항-HER3 항체가 BT474 피하 이종 이식체 모델에서 종양 성장을 효과적으로 억제하는 것을 도시한다.
도 7은 위 PDX 모델 GAS078의 [89Zr]Zr-ch3F8 이미징을 도시한다.
도 8은 각각 6개의 PDX 모델에서 대표적인 [89Zr]Zr-ch3F8 이미징을 도시한다.
도 9는 ch3F8-MMAE가 ch3F8과 유사한 결합 친화도를 유지함을 도시한다.
도 10은 다양한 세포주에서 ch3F8-MMAE의 세포 독성을 도시한다.
도 11은 ch3F8-MMAE가 위 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제하는 것을 도시한다.
도 12A~12C는 hu3F8이 열, 산 및 반복된 동결-해동(free-thaw) 스트레스 테스트 후에도 결합 친화도를 유지하는 것을 도시한다. 도 12A는 hu3F8의 세 가지 클론을 pH 3.5에서 0, 2, 4 및 6시간 동안 인큐베이션한 후, ELISA 측정을 수행하여 결합 친화도를 측정한 것을 도시한다. 도 12B는 hu3F8의 세 가지 클론을 40℃에서 상이한 일수로 인큐베이션한 후, ELISA 측정을 수행하여 결합 친화도를 측정한 것이다. 도 12C는 hu3F8의 세 가지 클론을 3 또는 5주기 동안 동결 및 해동시킨 후, ELISA 측정을 수행하여 결합 친화도를 측정한 것이다.
도 13A~13B는 hu3F8-MMAE가 용량 의존적으로 종양 성장(도 13A)을 억제하고, 체중에 거의 영향을 미치지 않았음을 도시한다(도 13B).
도 14는 10 mg/kg의 hu3F8-MMAE의 단일 주사(single shot)가 위 PDX 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제하는 것을 도시한다.
도 15는 6 mg/kg의 hu3F8-MMAE가 위 PDX 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제하는 것을 도시한다.
도 16은 hu3F8-MMAE가 결장 직장 PDX 모델 CS226에서 종양 성장을 억제하는 것을 도시한다.
다르게 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 기술 및 과학 용어는 당업자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기술된 것과 유사하거나 등가인 임의의 방법, 장치 및 재료는 모두 본 발명의 실시에 사용될 수 있다. 다음 정의는 본 명세서에 사용된 특정 용어의 이해를 돕기 위해 제공되며 본 발명의 범위를 제한하려는 의도는 아니다.
관사 "일(a)" 및 "하나(an)"는 본 명세서에서 해당 관사의 하나 또는 하나 이상(즉, 적어도 하나)의 문법적 대상을 지칭하기 위해 사용된다. 예를 들어, "요소(an element)"는 하나의 요소 또는 하나 이상의 요소를 나타낸다.
본 명세서에 사용된 용어 "및/또는"은 단독으로 존재하거나 동시에 존재하는 2개의 지정된 특징 또는 구성 요소 각각을 구체적으로 개시하는 것으로 간주해야 한다. 따라서, "A 및/또는 B"와 같은 문구에 사용된 용어 "및/또는"은 "A 및 B", "A 또는 B", "A"(단독) 및 "B"(단독)를 포함하도록 의도된다.
수용체 티로신 단백질 키나제 erbB-3(ERBB3)으로도 알려진 "인간 표시 성장 인자 수용체 3(HER3)"은 EGFR/ERBB 계열 구성원이다. 다른 ERBB 계열 구성원인 HER2 및 EGFR과 달리 HER3 자체에는 키나제 활성이 없다. 따라서, HER3은 이종이량체로서 키나제 활성 구성원인 EGFR 또는 HER2에 결합하여 하류 활성을 유발해야 한다. 천연 리간드 NRG1에 결합한 후, HER3은 형태 변화, 이종이량체화 및 인산화를 거친 다음 신호 전달을 수행하여 MAPK, PI3K/Akt 및 PLCγ를 활성화한다. 아울러, 높은 수준의 HER2가 존재하는 경우, HER3은 리간드에 의존하지 않고 생물학적 활성을 발휘하기도 한다. HER3은 세포 성장 및 증식, 배아 발달 및 종양 발생에 핵심적인 역할을 한다. HER3 녹아웃 마우스는 심각한 발육 장애를 갖고, 배아 13.5일에 치사된다. HER3은 다양한 단백질과 적응증을 표적으로 하는 약물에 대한 내성도 기여한다.
용어 "항체"는 일반적으로 4개의 폴리펩티드 사슬, 2개의 중쇄(H) 및 2개의 경쇄(L)로 구성된 모든 면역글로불린(Ig) 분자 또는 Ig 분자의 필수 에피토프 결합 특성을 유지하는 이의 모든 기능적 단편(항원 결합 단편)을 의미한다. 전장 항체에서 각 중쇄는 중쇄 가변 영역(본 명세서에서는 HCVR 또는 VH로 약칭함)과 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 일반적으로 CH1, CH2 및 CH3 이 세 가지 도메인으로 구성된다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역(본 명세서에서는 LCVR 또는 VL로 약칭함)과 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 CL이라는 하나의 도메인으로 구성된다. VH 및 VL 영역은 상보성 결정 영역(CDR)이라고 하는 초가변 영역으로 더 세분화될 수 있으며, 이 영역은 프레임워크 영역(FR)이라고 하는 보다 보존적인 영역에 분산되어 있다. 각각의 VH 및 VL은 3개의 CDR과 4개의 FR로 구성되며, 아미노 말단부터 카르복실 말단까지 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4의 순서로 배열된다. 따라서, 중쇄의 CDR은 중쇄의 아미노 말단측부터 각각 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3이라고 부르고, 경쇄의 CDR은 경쇄의 아미노 말단측부터 각각 CDR-L1, CDR-L2 및 CDRL3이라고 부른다. 면역글로불린 분자는 임의의 유형(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 클래스(예를 들어, IgG1, lgG2, IgG 3, lgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위 클래스일 수 있다. 넓은 의미에서, 용어 "항체"는 또한 4개의 폴리펩티드 사슬을 가진 면역글로불린 분자에서 유래되지 않은 scFv 또는 sdAb를 의미한다. 용어 "항체"는 또한 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 함유하는 임의의 다중특이적 항체(특히 이중특이적 항체)를 의미한다.
항체 또는 항체의 기능적 단편은 하나 이상의 변형된 아미노산 잔기를 가질 수 있다. 예를 들어, 항체의 중쇄 또는 경쇄는 N-연결 글리코실화, O-연결 글리코실화, N-말단 처리, C-말단 처리, 탈아미드화, 아스파테이트 이성질화, 메티오닌 산화, 메티오닌 잔기 염기의 N-말단 첨가, 프롤린 잔기의 아미드화, N-말단 글루타민 또는 N-말단 글루타메이트의 피로글루탐산으로의 전환, 및 카르복실 말단에서 1개 또는 2개의 아미노산 결실로 이루어진 군로부터 선택된 하나 이상의 변형을 겪는다.
"항원 결합 단편"은 F(ab')2, Fab, Fv, scFv, sdAb 등과 같은 항체의 모이어티이다. 전장 항체의 항원 결합 단편은 전장 항체의 표적화 특이성을 유지한다. 따라서, scFv(단일 사슬 가변 단편)와 같은 재조합 기능성 항체 단편은 mAb 기반 치료 약물의 대안으로 치료 약물을 개발하는 데 사용되어 왔다. scFv단편(~25kDa)은 두 개의 가변 도메인, VH 및 VL로 구성된다. 천연 상태에서, VH 및 VL 도메인은 소수성 상호작용을 통해 비공유적으로 결합되어 해리되는 경향이 있다. 그러나 안정한 단편은 친수성 유연성 링커로 도메인을 연결하여 조작함으로써 scFv를 생성할 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "단일 도메인 항체"(sdAb)는 당업계에서 통상적인 의미를 가지며, 천연적으로 경쇄가 결여되어 있는 낙타과 포유동물에서 발견되는 유형의 항체의 단일 중쇄 가변 도메인을 의미한다. 이러한 단일 도메인 항체는 VHH 또는 "나노바디"라고도 알려져 있다. 단일 도메인 항체의 아미노산 서열 및 구조는 4개의 프레임워크 영역(FR1, FR2, FR3 및 FR4)과 3개의 상보성 결정 영역(CDR1, CDR2 및 CDR3)으로 구성되는 것으로 간주될 수 있다. 따라서, 단일 도메인 항체는 가변 도메인 VH 또는 VL과 유사한 FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4의 일반 구조를 갖는 아미노산 서열로 정의될 수 있다. 기존 항체 또는 다른 항체 단편(예를 들어, scFv)을 사용하는 것과 비교하여, sdAbs를 단일 항원 결합 단백질로 사용하거나 더 큰 단백질이나 폴리펩티드 내의 항원 결합 도메인으로 사용하면 많은 유의한 장점이 있다. sdAb의 장점에는 단일 도메인만으로 높은 친화성과 선택성으로 항원에 결합할 수 있고; sdAb는 변성제 또는 조건(열, pH 및 프로테아제 포함)에 대해 매우 안정적이며; sdAb는 기존 항체가 접근할 수 없는 표적과 에피토프에 접근할 수 있는 장점이 포함된다. 일반적으로, sdAb는 라마(llama)와 같은 낙타과 동물에서 생성되지만, 당업계에 공지된 기술을 사용하여 합성적으로 생성될 수도 있다.
용어 "키메라 항체"는 마우스의 가변 영역(즉, 결합 영역)과 다른 소스 또는 종(예를 들어, 인간)의 불변 영역의 적어도 일부를 포함하는 항체를 의미하며 일반적으로 재조합 DNA 기술에 의해 제조된다. 마우스 가변 영역 및 인간 불변 영역을 포함하는 키메라 항체가 특히 바람직하다. 이러한 마우스/인간 키메라 항체는 일반적으로 마우스 면역글로불린 가변 영역을 코딩하는 DNA 세그먼트 및 인간 면역글로불린 불변 영역을 코딩하는 DNA 세그먼트를 함유하는 발현된 면역글로불린 유전자의 산물이다. 키메라 항체를 생산하는 방법은 현재 당업계에 공지된 통상적인 재조합 DNA 및 유전자 형질감염 기술을 포함한다.
용어 "인간화 항체"는 모체 면역글로불린과 다른 특이성을 갖는 면역글로불린의 CDR을 함유하도록 프레임워크 또는 "상보성 결정 영역"(CDR)이 변형된 항체를 의미한다. 바람직한 실시형태에서, VH 및 VL의 CDR은 인간 항체의 프레임워크 영역에 접목되어 "인간화 항체"가 제조된다. 중쇄 및 경쇄 가변 프레임워크 영역은 동일하거나 다른 인간 항체 서열로부터 유래될 수 있다. 인간 항체 서열은 천연 발생 인간 항체의 서열일 수 있다. 선택적으로, 프레임워크 영역은 추가 돌연변이에 의해 변형될 수 있다. 특히 바람직한 CDR은 상기 기재된 키메라 항체의 항원을 인식하는 대표적인 서열에 대응된다. 바람직하게는, 이러한 인간화 버전은 인간 불변 영역과 키메라이다. 본 명세서에 사용된 용어 "인간화 항체"는 예를 들어 "클래스 전환", 즉 Fc 모이어티의 변경 또는 돌연변이(예를 들어, IgG1에서 IgG4로 및/또는 IgG1/IgG4 돌연변이)에 의해 특히 C1q 결합 및/또는 FcR 결합과 관련하여 본 명세서에 기술된 특성을 생성하도록 불변 영역이 변형된 항체를 포함한다.
본 명세서에 사용된 용어 "인간 항체"는 인간 배선 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 영역 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함하도록 의도된다. 인간 항체는 형질전환 동물(예를 들어, 마우스)에서 생성될 수 있고, 상기 형질전환 동물은 면역화 후, 내인성 면역글로불린 생성 없이 모든 인간 항체 또는 선택적인 부분 인간 항체를 생성할 수 있다. 인간 배선 면역글로불린 유전자 배열을 이러한 배선 돌연변이 마우스에 전달하면 항원 공격 시 인간 항체가 생성된다. 인간 항체는 파지 디스플레이 라이브러리에서도 생성될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "항-HER3 항체"는 인간 HER3 항원에 특이적으로 결합하는 항체를 의미한다. 관심 항원(즉, HER3)에 "특이적으로 결합"하는 항체는 항체가 항원을 발현하는 표적 세포에 사용될 수 있도록 충분한 친화도로 해당 항원에 결합할 수 있는 항체이다. 결합 친화도는 표면 플라즈몬 공명 기술(BIAcore®, GE-Healthcare Uppsala, 스웨덴)과 같은 표준 결합 분석을 사용하여 측정할 수 있다.
펩티드 또는 항체 서열의 경우, 용어 "서열 동일성"은 참조 펩티드 서열의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열의 아미노산 잔기 비율로 정의되며, 서열 동일성을 최대 백분율로 획득하기 위해 서열을 정렬하고 필요시 간격을 도입하며, 서열 동일성의 일부로 보존적 치환을 고려하지 않는다. 아미노산 서열 동일성 백분율을 결정하기 위한 정렬은 당업계의 기술 범위에서 다양한 방식, 예를 들어 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 MEGALIGN™(DNASTAR) 소프트웨어와 같은 공개적으로 획득 가능한 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 달성될 수 있다. 당업자는 비교되는 서열의 전체 길이에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는 데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여 정렬을 측정하기 위한 적절한 매개변수를 결정할 수 있다.
본 발명에 사용되는 항체가 암세포 표면에서 HER3 항원에 결합하는 경우, 용어 "내재화"는 수용체 매개 세포내이입, 미세음세포 작용, 식세포 작용 또는 다른 유사한 세포 흡수 및/또는 수송 경로를 통해 외부 환경으로부터 항체-항원 복합체의 신속한 흡수를 의미한다. 따라서, 일 실시형태에서, 본 발명의 항체의 "내재화"는 원형질막 접힘 및 소포 형성과 관련된 메커니즘을 통해 외부 환경으로부터의 흡수를 포함한다. 본 발명의 항체가 방사성 동위원소, 형광단 또는 세포독소와 같은 화학적 모이어티에 접합될 때, 상기 화학적 모이어티는 본 발명의 항체와 함께 HER3-발현 세포 내로 내재화될 수 있다. 항체가 내재화 활성을 갖는지 여부는 당업자에게 공지된 방법으로 확인할 수 있으며, 또한 예를 들어, 표지 물질에 결합된 항-HER3 항체를 HER3을 발현하는 세포와 접촉시켜 표지 물질(예를 들어, 방사성 동위원소, 형광단 또는 형광 단백질)이 세포에 혼입되는지 확인하거나, 세포 독성 물질이 접합된 항-HER3 항체를 HER3을 발현하는 세포에 접촉시켜 HER3을 발현하는 세포의 사멸이 유도되는지 확인하는 방법으로 확인할 수 있다. 보다 구체적으로, 항-HER 항체의 내재화 활성은 예를 들어 실시예에서 기술된 방법에 의해 측정될 수 있다. 내재화 활성을 갖는 항-HER3 항체는 예를 들어 세포 독성 물질에 접합될 수 있으며, 후술되는 항암제와 같은 약학적 조성물로 사용될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "숙주 세포"는 관심 있는 단백질, 단백질 단편 또는 펩티드를 생성하도록 조작될 수 있는 세포 시스템을 의미한다. 숙주 세포에는 CHO, BHK, NSO, SP2/0, YB2/0과 같은 설치류 동물(래트, 마우스, 기니아 피그 또는 햄스터)로부터 유래된 포유동물 배양 세포와 같은 배양 세포; 또는 인간 조직 또는 하이브리도마 세포, 효모 세포 및 곤충 세포, 및 형질전환 동물 또는 배양 조직에 포함된 세포가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 상기 용어에는 특정 대상 세포뿐만 아니라 그러한 세포의 자손도 포함된다. 특정 변형은 돌연변이 또는 환경 영향으로 인해 자손에서 발생할 수 있으며, 이러한 자손은 모 세포와 다를 수 있지만 여전히 용어 "숙주 세포"의 범위 내에 포함된다.
본 명세서에 사용된 용어 "핵산" 포스포디에스테르 결합에 의해 연결된 뉴클레오티드 단위(리보뉴클레오티드, 데옥시리보뉴클레오티드, 관련 천연 발생 구조 변이체 및 이의 합성 비천연 발생 유사체), 이의 구조적 변이체 및 합성, 비천연 발생 유사체로 구성된 관련 천연 발생 중합체를 의미한다. 따라서, 상기 용어는 뉴클레오티드 및 이들 사이의 연결이 포스포로티오에이트, 포스포라미도에스테르, 메틸포스포네이트, 키랄 메틸포스포네이트, 2-O-메틸리보뉴클레오티드, 펩티드-핵산(PNA)과 같으나 이에 한정되지 않는 비천연 발생 합성 유사체를 포함하는 뉴클레오티드 중합체를 포함한다. 이러한 폴리뉴클레오티드는 예를 들어 자동화된 DNA 합성기를 사용하여 합성될 수 있다. 이해해야 할 것은, 뉴클레오티드 서열이 DNA 서열(즉, A, T, G, C)로 표시되는 경우, 여기에는 "T"가 "U"로 대체된 RNA 서열(즉, A, U, G, C)도 포함된다.
본 명세서에 사용된 용어 "분리된 핵산"은 정제된 상태를 의미하며, 이러한 맥락에서, 핵산에는 단백질, 지질, 탄수화물과 같은 다른 생물학적 분자 또는 세포 잔해 및 성장 배지와 같은 기타 물질이 본질적으로 없음을 의미한다.
최대 효과 농도의 절반으로도 알려진 용어 "EC50"은 FACS 또는 ELISA에 의해 수행된 테스트에서와 같이 최대 효과의 절반을 생성하는 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 농도를 의미한다.
본 명세서에 사용된 용어 "항체 접합체"는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 방사성 동위원소, 화학요법제 및 독소와 같은 다른 화학적 모이어티에 접합되는 것을 의미한다. 일부 실시형태에서, 화학적 모이어티는 동위원소 또는 형광단이므로 접합된 항체는 HER3을 발현하는 세포, 조직 또는 기관(종양 포함)을 표시(생체 내 이미징을 통해)하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 상기 항체 접합체는 항체-약물 접합체(ADC)이다.
용어 "항-HER3 항체-약물 접합체" 및 "항-HER3 ADC"는 본 명세서에서 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, HER3에 특이적으로 결합하고 링커를 통해 세포 독성제(예를 들어, 아우리스타틴)에 접합된 항체를 포함하는 항체-약물 접합체를 의미한다. 일반적으로, 항체(예를 들어, 항-HER3 항체)는 ADC 분자로 변형된 후에도 표적 항원에 대한 결합 친화도와 같은 생물학적 활성을 유지할 수 있다. 용어 "세포 독성제"는 세포 발현 활성, 세포 기능을 억제 또는 방지하고/하거나 세포 파괴를 유발하는 물질을 의미한다. 상기 용어는 방사성 동위원소, 화학요법제 및 독소(예: 박테리아, 진균, 식물 또는 동물 기원의 소분자 독소 또는 효소 활성 독소)를 포함하며 이의 단편 및/또는 변이체를 포함하도록 의도된다. 화학요법제는 당업계에 공지되어 있으며, 안트라사이클린계(예를 들어, 루비도미신(다우노루비신; 에리쓰로마이신), 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신 및 발로루비신), 미톡산트론 및 픽산트론과 같은 안트라센디온계(안트라퀴논계); 백금 기반 시약(예를 들어, 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 테트라플라틴, 피코플라틴, 네다플라틴, 트리플라틴(triplatin) 및 리포플라틴(lipoplatin)); 4-하이드록시타목시펜(아폭시펜) 및 N-데스메틸-4-하이드록시타목시펜(엔독시펜)과 같은 타목시펜 및 그 대사 물질; 파클리탁셀(paclitaxel, taxol), 도세탁셀, 카바지탁셀 및 10-데아세틸바카틴과 같은 탁산; 알킬화제(예를 들어, 메클로레타민(mechlorethamine, HN2), 시클로포스파미드, 이포스파미드, 멜팔란(L-사르콜리신) 및 클로람부실과 같은 질소 머스타드); 에틸렌이민 및 메틸멜라민(예를 들어, 헥사메틸멜라민, 티오테파, 부술판과 같은 알킬 설포네이트, 카르무스틴(BCNU), 로무스틴(CCNLJ), 셀무스틴(메틸-CCN-U) 및 스트렙토조토신(streptozotocin)과 같은 니트로소우레아), 및 다카르바진(DTIC, 디메틸트리아조이미다졸 카르복스아미드)); 항-대사 물질(예: 메토트렉세이트(메토트렉세이트)과 같은 엽산 유사체, 플루오로우라실(5-플루오로우라실; 5-FU), 플루오로우리딘(플루오로데옥시우리딘; FUdR)과 같은 피리미딘 유사체, 아라비노스포린 글리코시드(시타라빈), 퓨린 유사체 및 관련 억제제) 예를 들어 메르캅토퓨린(6-메르캅토퓨린; 6-MP), 티오구아닌(6-티오구아닌; 6-TG) 및 펜토스타틴(2'-데옥시코포니신(2'-deoxycofonnycin))); 천연 생성물(예를 들어, 빈블라스틴(VLB) 및 빈크리스틴과 같은 빈카 알칼로이드, 에토포사이드 및 테니포사이드와 같은 에피포도필로톡신, 닥티노마이신(액티노마이신 D), 렙토마이신, 플리카마이신(미트라마이신) 및 미토마이신(미토마이신 Q)과 같은 항생제; L-아스파라기나제와 같은 효소, 인터페론 알파와 같은 생물학적 반응 변형제, 하이드록시우레아와 같은 치환 요소, 프로카바진(N-메틸히드라진, MIH)과 같은 메틸히드라진 유도체, 미토탄 및 아미노글루테티미드와 같은 부신피질 억제제, 이들의 유사체, 유도체 및 조합이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 세포 독성제의 구현예에는 아우리스타틴(예를 들어, 아우리스타틴 E, 아우리스타틴 F, MMAE 및 MMAF), 클로르테트라사이클린, 메이탄신, 리신, 리신 A 사슬, 콤프레스타틴 스타틴, 돌라스타틴(dolastatin), 독소루비신, 다우노루비신, 파클리탁셀, 시스플라틴, cc1065, 에티듐 브로마이드, 미토마이신, 에토포사이드, 테니포사이드(tenoposide), 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 디하이드록시안트락소디온, 액티노마이신, 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(PE)A, PE40, 아브린, 아브린 A 사슬, 리조톡신 A 사슬, α-사르신(alpha-sarcin), 젤로닌, 미토겔린(mitogellin), 레스트릭토신(retstrictocin), 페노마이신, 에노마이신, 큐리신(curicin), 크로토닌, 칼리케아미신, 비누풀 억제제, 글루코코르티코이드, 기타 화학요법제, 및 방사성 동위원소가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 명세서에 사용된 용어 "아우리스타틴"은 유사 분열 억제제 계열을 의미한다. 아우리스타틴 유도체도 용어 "아우리스타틴"의 정의에 포함된다. 아우리스타틴의 구현예에는 아우리스타틴 E(AE), 모노메틸 아우리스타틴 E(MMAE), 모노메틸 아우리스타틴 F(MMAF) 및 돌라스타틴의 합성 유사체가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 일 실시형태에서, 상기 항-HER3 항체-약물 접합체는 항-HER3 항체-MMAE(예를 들어, ch3F8-MMAE 또는 hu3F8-MMAE)이다. 일부 실시형태에서, 상기 링커항체의 힌지 영역의 Cys 잔기에 접합된다.
용어 "약학적 조성물"은 활성 성분의 생물학적 활성이 효과적이도록 하여 치료 용도로 대상체에게 투여될 수 있는 형태의 제제를 의미한다.
용어 "약학적으로 허용 가능한 담체(carrier)"는 활성 성분(예를 들어, 본 발명의 항체 또는 ADC)의 전달에 적합한 제제 내 임의의 불활성 물질을 의미한다. 담체는 결합제, 코팅제, 붕해제, 충전제 또는 희석제, 보존제(예를 들어, 항산화제, 항균제 또는 항진균제), 감미제, 흡수 지연제, 습윤제, 유화제, 완충제 등일 수 있다. 적합한 약학적으로 허용 가능한 담체의 구현예에는 물, 에탄올, 폴리올(polyol)(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등), 포도당(dextrose), 식물성 오일(예를 들어, 올리브 오일), 식염수, 완충제, 완충 식염수, 및 등장화제, 예를 들어, 당, 폴리알코올(polyalcohol), 소르비톨 및 염화나트륨이 포함된다.
용어 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 유익하거나 원하는 결과를 생성하기에 충분한 활성제의 양을 의미한다. 치료 유효량은 치료할 대상체 및 질병 상태, 대상체의 체중 및 연령, 질병 상태의 중증도, 투여 방식 등 중 하나 이상에 따라 달라질 수 있으며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 구체적인 용량은 따라야 할 투여 요법, 다른 치료제와 병용하여 투여할지 여부, 투여 시간, 영상화할 조직 및 운반할 물리적 전달 시스템 중 하나 이상에 따라 달라질 수 있다.
본 명세서에 사용된 어구 "다른 항암제"는 본 명세서에 개시된 항-HER3 항체 또는 항-HER3 ADC 이외의 항암제를 의미한다. 다른 항암제의 비제한적인 구현예에는 5-플루오로우라실, 하이드록시우레아, 젬시타빈, 메토트렉세이트, 독소루비신, 에토포사이드, 카보플라틴, 시스플라틴, 사이클로포스파미드, 멜팔란, 다카바진, 탁솔(taxol), 캄프토테신, FOLFIRI, FOLFOX, 도세탁셀, 다우노루비신, 파클리탁셀(paclitaxel), 옥살리플라틴 및 이들의 조합; PD-L1, PD-1, CTLA-4, CCR4, OX40에 대한 항체와 같은 생물학적 치료제; 이온화 방사선; 키메라 항원 수용체(CAR) 변형 T세포 또는 NK세포와 같은 세포 치료제가 포함된다.
용어 "암" 및 " 종양"은 본 명세서에서 상호 교환적으로 사용되며, 예를 들어, 폐암, 비소세포폐암(NSCL), 기관지폐포세포폐암, 골암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문암(cancer of the anal region), 위 종양(stomach cancer), 위암(gastric cancer), 결장암, 유방암, 자궁암, 나팔관암, 자궁내막암, 자궁경부암, 질암, 외음부암, 호지킨병, 식도암, 소장암, 내분비계암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연질 조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 방광암, 신장암 또는 요관암, 신세포암, 신우암, 중피종, 간세포암종, 담도암, 중추신경계(CNS) 종양, 척수축 종양, 뇌간 신경교종, 다형성 교모세포종, 성상세포종, 신경초종(schwanoma), 상의세포종, 수모세포종, 수막종, 편평 세포 암종, 뇌하수체 선종, 림프종, 림프구성 백혈병, 임의의 상기 암의 난치성 형태, 또는 하나 이상의 상기 암의 조합을 의미한다. 바람직하게는, 이러한 암은 유방암, 폐암, 두경부암 또는 췌장암이며, 폐암, 두경부암 또는 췌장암이 바람직하다. 바람직하게는, 이러한 암은 HER3 발현 또는 과발현에 의해 특성화되며, 더욱 바람직하게는 HER3 과발현에 의해 특성화된다.
본 명세서에 사용된 용어 "치료하는(treating)" 또는 "치료(treatment)"는 대상체(예를 들어, 포유동물(특히 인간))의 질병 또는 의학적 상태의 치료를 의미하며, 이는 (a) 대상체에게 예방적 치료를 제공하는 등 질병 또는 의학적 병태의 발생을 예방하는 것; (b) 대상체의 질병 또는 의학적 병태를 제거하거나 퇴행시키는 등 질병 또는 의학적 상태를 개선하는 것; (c) 대상체의 질병 또는 의학적 병태의 진행을 늦추거나 예방함으로써 질병 또는 의학적 병태를 억제하는 것; 또는 (d) 대상체의 질병 또는 의학적 병태의 증상을 완화시키는 것을 포함한다.
용어 "대상체"에는 인간 및 인간이 아닌 동물이 포함된다. 비인간 동물에는 포유동물과 같은 모든 척추동물과 비인간 영장류, 양, 개, 소, 닭, 양서류 및 파충류와 같은 비포유동물이 포함된다. 달리 명시하지 않는 한, 용어 "환자" 또는 "대상체"는 본 명세서에서 상호 교환적으로 사용될 수 있다.
본 발명을 추가로 설명하기 전에, 본 발명은 설명된 특정 실시형태에 한정되지 않으며, 이러한 실시형태는 물론 변화할 수 있음을 이해해야 한다. 또한, 본 발명의 범위는 첨부된 청구범위에 의해서만 한정되므로, 본 명세서에 사용된 용어는 단지 특정 실시형태를 설명하기 위한 것일 뿐 한정하려는 의도가 아니라는 것을 이해해야 한다.
수치 범위가 제공되는 경우, 문맥에서 달리 명시하지 않는 한, 해당 범위의 상한과 하한 사이, 정확하게는 하한 단위의 10분의 1까지의 중간값, 및 기타 임의의 지정된 또는 지정 범위 내의 중간값은 모두 본 발명에 포함된다. 이러한 작은 범위의 상한 및 하한은 작은 범위에 독립적으로 포함될 수 있으며 지정된 범위 내에서 임의의 특정 제외사항을 조건으로 본 발명에 포함된다. 지정된 범위가 한계값 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우, 포함된 이러한 한계값 중 하나 또는 둘 모두를 제외하는 범위 역시 발명에 포함된다.
재료 및 방법:
재료: 다음 시약은 Southern Biotech에서 구입하여 지정된 희석도로 사용하였다. 염소 항-마우스 IgG-HRP(1030-05, 1:5000 희석도), 염소 항-인간 IgG-PE(2040-09, 1:1000 희석도), 염소 항-인간 κ IgG-HRP(2061-05, 1:20000 희석도), 염소 항-토끼 IgG-HRP(4030-05, 1:5000 희석도), 스트렙타비딘-FITC(7100-02, 1:500 희석도), 마우스 항-인간 κ-APC(9230-11, 1:500 희석도), 마우스 IgG-APC(0107-11, 0.1 mg/ml). NRG1은 Origene(TP723155)에서 유래되었다. 세포 배지 Roswell Park Memorial Institute(RPMI)1640, Dulbecco's modified eagle's medium(DMEM) 및 소 태아 혈청은 Hyclone에서 유래되었다. 재조합 Patritumab는 자체로 제조하였다. HER3 항체3F8은 하이브리도마 또는 재조합체에서 유래되고 자체로 생산하였다. m3F8은 쥐 3F8을 나타내는 반면, ch3F8 및 hu3F8은 각각 키메라 및 인간화 3F8을 나타낸다.
세포 배양: 연구에 사용된 SP2/0, SP2/0-HER3, SP2/0-HER2, SP2/0-EGFR, NCI-N87, MDA-MB-468, MDA-MB-453, 7901, HT29, MCF-7, SK-BR-3은 ATCC에서 구입하여 권장하는 적절한 배지에 보관하였다. 인간 EGFR, HER2 및 HER3을 안정적으로 발현하는 SP2/0-EGFR, SP2/0-HER2, SP2/0-HER3은 자체로 생산하였다.
항-HER3 하이브리도마의 생성: 1일째에 BALB/c마우스(암컷, 8~10주령)에 인간 HER3을 발현하는 1-2Х106개의 SP2/0-HER3 세포 및 프로인트 완전 보조제를 복강내 주사하였다. 8일째에 동일한 양의 세포를 사용하여 프로인트 불완전 보조제에 대해 추가 면역화를 수행하였다. 14일째부터 3일마다 상기 양의 세포로 마우스를 면역화하고, 이를 3회 반복하였다. 마지막 면역화 3일 후, 비장에서 B 림프구를 분리하고, 불명성 골수종 세포인 NS-1 세포와 융합하여 하이브리도마 세포를 생성하였다.
하이브리도마 세포를 96웰 플레이트에서 연속 희석하여 배양하였다. 상층액을 수집하고, SP2/0 세포 표면에 발현된 HER3을 인식하는 임의의 항체를 유세포 분석법으로 선별하거나, 재조합 HER3을 인식하는 임의의 항체를 ELISA로 선별하였다.
항체 가변 영역의 DNA 클로닝 및 시퀀싱: 간단히 말하면, 하이브리도마에서 추출한 총 RNA를 Trizol(ThermoFisher)을 사용하여 첫 번째 cDNA 가닥으로 역전사시켰다. 5' RACE 키트(Invitrogen, 18374-058)에 대한 지침에 설명된 대로 5' 상보적 DNA(5' RACE)를 신속하게 증폭한 다음, 중첩 PCR을 수행하여 가변 영역을 코딩하는 DNA 서열을 증폭시켰다. PCR 생성물을 pGM-T 벡터(vector)에 클로닝하였다. 양성 클론에 대해 DNA 시퀀싱을 수행하여 상응한 단백질 서열을 추론하였다. 가변 영역의 아미노산을 분석하였다(Kabat 코딩 방안에 따름).
항체 발현: 간단히 말하면, 항체 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 DNA를 발현 벡터인 pCDNA3.1(+)(Invitrogen)에 클로닝하고, 293T 세포에서 발현시켰다. 항체는 단백질 A 또는 G 컬럼(GE)을 사용하여 정제하였다.
인간화: GenScript를 통해 인간화를 수행하였다. 먼저, 인간 IgG1 불변 영역 서열로 쥐 항체 중쇄 불변 영역을 교체하고, 인간 Ig κ불변 영역 서열로 쥐 항체 경쇄 불변 영역을 교체하여 쥐-인간 키메라 항체(ch3F8)를 생성하였다. 그 후 참조문헌(Kuramochi 등)의 절차에 따라 키메라 항체에서 인간화를 수행하였다. 인간 배선 프레임워크로 마우스 프레임워크를 교체하여 인간화 항체를 생성하면서 친화도와 특이성을 유지하는 데 필요한 마우스 프레임워크의 잔기를 남겨 두었다.
인간화 항체를 코딩하는 코돈 최적화 DNA 서열은 GenScript에 의해 합성되었다.
항체 발현 및 정제: 지정된 항체를 보유하고 DNA 서열을 코딩하는 플라스미드로 형질감염된 ExpiCHO-S세포(Catl. #A29133, Gibco)를 ExpiCHO 배지(Catl.# A2910001, Gibco)에서 배양하고 32℃, 5%CO2에서 12일 동안 유지하였다. 4000g로 30min 동안 회전시켜 상층액을 수집하고, 0.22 μm 막을 통해 여과하였다. 제조사 지침에 설명된 대로, 단백질 A(Catl. #17508001, GE)에 결합된 항체를 20 mM 인산나트륨(pH7.0)으로 세척하고, 0.1 M 글리신(pH 3.0)으로 용출시켰다. 용출된 부분을 0.1 M Tris 완충액(pH9.0)으로 중화한 후, 한외여과 원심분리를 통해 PBS 버퍼로 전이(switch)하였다. BCA로 단백질 농도를 측정하였다.
표면 플라스몬 공명(SPR): Biacore T200 을 사용하여 동역학 및 친화도를 측정하였다. 간단히 말하면, 재조합 인간 HER3 항체를 단백질 A 칩(GE, Cat.# 29-1275-55)에 고정시켰다. 농도 범위가 50 nM 내지 0.78125 nM 최종 농도(2배 계열 희석에 의해 생성됨)인 항원을 칩에 통과시켜 친화도 및 동역학을 측정하였다.
FACS: 배양된 세포를 0.25% 트립신-EDTA로 소화한 후, 1500rpm으로 5분간 회전시켰다. 5% PBS 및 0.2% ProClin300을 함유한 PBS의 FACS 용액을 사용하여 세포 침전물을 5Х106개 세포/mL로 재생(regenerate)시켰다. 50 μL의 세포 현탁액과 농도가 1 μg/ml인 1차 항체 100 μL를 얼음 위에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. FACS 용액으로 2회 세척하였다. 침전물을 염소 항-마우스 IgG-PE(1:1000 희석도)를 함유한 100 μL의 FACS 용액으로 재생시키고, 얼음 위에서 어둠 속에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후 세포를 2회 세척하고 200 μL FACS 용액에 재현탁하였다.
Western blot: SDS-PAGE로 분리된 단백질을 니트로셀룰로오스 막으로 전이시켜 Western blot을 수행하였다. 1차 항체는 다음과 같다. 항-HER2(Cell Signaling, Catl#:2165S), 항-HER3(Cell Signaling, Catl#:12708), 항-p-HER3(Cell Signaling, Catl#:4791), 항-β-엑틴(Cell Signaling, Catl#: 4967).
ELISA: 인간 HER2-ex-huFc, 인간 HER3-huFc, 인간 EGFR-his를 96웰 플레이트에서 2 μg/mL, 50 μl/웰로 희석하고, 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 0.5ХPBST로 세척한 후, 100 μL의 차단 버퍼(PBS+3%BSA)를 사용하여 37℃에서 2시간 동안 인큐베이션하고, 0.5ХPBST로 세척하였다. 3F8을 1:3의 비율로 차단 버퍼를 사용하여 연속 희석한 후, 50 μL/웰로 첨가하고, 37℃에서 40~50분간 인큐베이션한 후, 0.5ХPBST로 세척하였다. 염소 항-마우스 IgG-HRP(SouthernBiotech, 1030-05)를 차단 버퍼로 1:20000으로 희석하고, 50 μL/웰을 어둠 속에서 30분간 인큐베이션한 후, 0.5ХPBST로 세척하였다. 검출 전, 각 웰에 1:1로 혼합된 루미놀 버퍼 A+B 50 μL를 첨가하였다.
NRG1을 통한 HER3 인산화의 유도: 세포를 6웰 플레이트에서 배양하여 80% 컨플루언스에 도달했을 때 실험에 사용하였다. 실험 당일, 세포를 PBS로 2회 세척하고, 무혈청 배지에서 6시간 동안 인큐베이션한 후, 10 μg/mL 항체로 밤새 처리하여 HER3 인산화를 유도하고, 세포를 수확하여 Western blot을 수행하기 30분 전에 NRG1을 작업 농도 100ng/mL로 첨가하였다.
세포 독성: 실험 전날, 세포를 96웰 플레이트에 5000/웰로 접종하였다. 3F8-MMAE를 1:3의 희석도로 세포에 첨가하고, 농도당 3개의 샘플을 사용하여 작업 농도를 100nM에서 1pM으로 감소시켰다. 72시간 후, 제조사 지침에 설명된 대로 ATPLite 키트로 세포 독성을 측정하였다.
항체 스트레스 테스트: 5 mg/mL의 정제된 항체를 관행대로 4℃에 보관하고, 40℃에서 7일 및 14일 동안 배양하여 열 안정성 평가에 사용하였으며, pH 3.5 글리신 용액에서 재생하고 2, 4 및 6시간 동안 유지하여 산 안정성 평가에 사용하거나, 4 또는 6주기의 반복 동결-해동 처리를 거쳐 동결-해동 안정성 평가에 사용하였다. SEC-HPLC로 중합도를 측정하고, ELISA로 결합 친화도를 측정하였다.
[ 89 Zr]Zr-항체 표지: 참조 문헌(Zeglis 및 Lewis, 2015)에 표시된 대로 DFO-NCS를 항체와 접합하고 표지하였다. 간단히 말하면, DFO와 항체를 5:1의 몰비로 혼합하고, 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. SEC-HPLC로 DFO-접합 항체를 인큐베이션하였다.
0.8 mCi의 89Zr-옥살레이트 용액과 DFO-접합 항체(0.2 mg/ml)를 HEPES/Na2CO2 버퍼(pH 7.0-7.5)에서 혼합하고, 실온에서 30분간 인큐베이션하였다. TLC로 방사화학적 순도를 평가하였다. [89Zr]Zr-항체의 Rf는 0~0.3이고, 유리된 89Zr의 Rf는 0.6~1.0이다.
PET 이미징: 약 100uCi[89Zr]Zr-항체를 각 동물에게 정맥내 투여하였다. 주사 후 지정된 시간에 소형 동물 PET 이미저를 사용하여 이미징을 수집 및 분석하였다.
3F8-vc-MMAE 및 U3-1402의 제조: ADC의 제조는 CRO에 의해 수행되었다. 간단히 말하면, 항체의 이황화 결합을 TCEP(트리스-2-카르복시에틸포스핀) 및 DTPA(디에틸렌트리아민펜타아세트산) 시약을 사용하여 25℃에서 1~3시간 동안 환원시켰다. MC-VC-MMAE 또는 MC-GGFG-Dxd를 환원된 항체 용액에 적가하고, 부드럽게 교반(agitation)하면서 25℃에서 1~4시간 동안 인큐베이션하였다. 3F8-vc-MMAE의 DAR(약물 대 항체 비율)은 약 3.8이고, U3-1402(Patritumab-GGFG-Dxd)의 DAR은 약 8.0이다. 두 약물 모두 항체의 시스테인 잔기에 접합하였다.
최종 생성물은 한외여과로 정제하였다. 각각 SEC-HPLC 및 HIC-HPLC를 사용하여 순도 및 DAR을 평가하였다.
생체 내 효능 연구: IACUC 지침에 따라 동물을 사육하여 사용하였다. BALC/b 누드 마우스 및 NPG마우스는 각각 Charles River 및 SPF Biotech에서 구입하여 음식과 물을 자유롭게 섭취시키면서 25℃에서 12시간 동안 암/밝기 주기로 사육하였다. 동결 보존된 조직 단편을 피하 이식하여 환자 유래 이종이식(PDX) 모델을 생성하였다. 동물들은 종양 크기가 100~200mm3에 도달했을 때 약물 치료를 시작하였고, 크기가 1000mm3에 도달했을 때 안락사시켰다. 매일 전반적인 건강 상황을 관찰하고, 3일마다 종양 크기와 체중을 기록하였다.
소프트웨어: Olinda, GraphPad Prism 6.0 또는 EXCEL을 사용하여 데이터를 분석하였다.
실시예 1
쥐 3F8을 SP2/0 야생형 세포 또는 HER3, HER2 또는 EGFR을 과발현하는 세포와 함께 인큐베이션하였다. FACS 기계에서 PE-항-쥐 2차 항체를 사용하여 결합 강도를 검출하였다.
결과를 도 1에 나타내었다. 3F8은 SP2/0-HER3 세포에 특이적으로 결합하지만 다른 세포에는 결합하지 않는다.
실시예 2
ELISA로 인간 HER3, HER2 및 EGFR에 대한 쥐 3F8의 결합 친화도를 측정하였다.
결과를 도 2에 나타내었다. 쥐 3F8은 HER3만 인식할 뿐 HER2 또는 EGFR은 인식하지 않는다.
실시예 3
GraphPad Prism 6.0으로 인간 HER3, HER2 및 EGFR에 결합하는 쥐 3F8의 EC50을 분석하였다. 결과를 표 1에 나타내었다. 3F8은 나노몰 이하 범위에서 효과적인 결합 친화도를 나타내었다.
표 1. 인간 HER3, HER2 또는 EGFR에 결합하는 쥐 3F8의 EC50
실시예 4
ELISA로 인간, 원숭이, 래트 및 마우스 HER3에 대한 쥐 3F8의 종 선택성을 측정하였다.
결과를 도 3에 나타내었다. 3F8은 유사한 효능으로 인간 및 원숭이 HER3을 인식하지만 마우스 HER3은 인식하지 않는다.
실시예 5
GraphPad Prism 6.0으로 인간, 원숭이, 래트 및 마우스 HER3에 결합하는 쥐 3F8의 EC50을 분석하였다. 결과를 표 2에 나타내었다. 3F8은 나노몰 이하 범위에서 인간 및 원숭이 HER3에 대해 동등한 결합 친화도를 나타낸다.
표 2. 인간, 원숭이, 래트 또는 마우스 HER3에 결합하는 쥐 3F8의 EC50
실시예 6
쥐 3F8은 NRG1에 의해 유도된 인산화된 HER3을 차단한다. NRG1(HER3 리간드)로 NCI-N87, MDA-MB-468 및 MDA-MB-453을 처리하여 하류 HER3의 인산화를 유도하였다. Western blot으로 NRG1에 의해 유도된 p-HER3에 대한 쥐 3F8의 억제 효과를 결정하였다. 3D4는 HER3에 대한 결합을 위해 NRG1과 경쟁하는 이전에 입증된 항-HER3 항체로, 양성 대조군으로 사용되었다.
결과를 도 4에 나타내었다. 데이터는 3F8이 인산화된 HER3 단백질 수준을 감소시켰지만 전체 HER3 단백질 수준에는 영향을 미치지 않았음을 보여준다. HER2의 Western blot 역시 3F8이 HER2 단백질 수준에 영향을 미치지 않았음을 보여준다.
실시예 7
쥐 3F8은 표면 HER3 수준이 다른 세포에 의해 빠르게 흡수된다. 표면 HER3 수준이 다른 세포를 쥐 3F8과 함께 얼음 위에서 인큐베이션하여 대조군으로 사용하거나, 37℃에서 1시간 또는 4시간 동안 인큐베이션하였다. 얼음 위에서 인큐베이션된 대조군에서 37℃에서 인큐베이션된 세포 표면 신호를 감하여 내재화 분율(fraction)을 결정하였다.
결과를 도 5에 나타내었다. 데이터는 3F8이 세포에 빠르게 내재화됨을 보여준다. 대부분 인큐베이션한 후 1시간 이내에 흡수되었으며, 인큐베이션 시간을 4시간으로 연장하면 세포 내 분획량이 약간 증가하는 바, 이는 3F8의 세포내이입이 빠르고 연속적인 과정임을 나타낸다.
실시예 8
항-HER3 항체는 BT474 피하 이종 이식체 모델에서 종양 성장을 효과적으로 억제한다. 항-HER3 항체 m3F8, m3D4 또는 m3F8+m3D4 조합을 3주 동안 주당 2회((biweekly)씩 25mg/kg으로 정맥내 투여하였다. 3~4일마다 종양 크기를 모니터링하였다.
결과를 도 6에 나타내었다. m3F8과 m3D4는 모두 종양 성장을 유의하게 억제한 반면(일원 분산 분석(one-way) ANOVA, p<0.05), 3F8은 더 나은 효능을 나타내었다. m3F8과 m3D4의 조합은 m3F8 단독과 동일하게 효과적이었다. 3F8과 3D4는 모두 항-HER3 항체이다. m3F8은 쥐 항체를 나타낸다.
실시예 9
[89Zr]Zr-ch3F8을 위 PDX 모델 GAS078의 이미징에 사용하였다. [89Zr]Zr-ch3F8을 위 모델 GAS078에 정맥 주사하였다. 주사 후 4, 24, 48, 72, 96 및 168시간에 이미징을 수집하였다. Olinda로 각 기관의 방사능 흡수를 분석하고, % ID/g(% 주사 용량/조직 그램)으로 나타내었다.
도 7은 GAS078 모델에서 [89Zr]Zr-ch3F8의 대표적인 이미징이다. ch3F8은 키메라 3F8 항체를 나타낸다. 데이터는 종양에서 [89Zr]Zr-ch3F8의 흡수가 시간이 지남에 따라 점차 증가한다는 것을 보여준다. 종양 흡수는 주사 후 96시간 동안 평온한 상태를 유지했고, 이어서 주사 후 168시간 동안 약간 감소하였다.
또한 표 3에 데이터를 나타내었다. 종양 및 심장, 간, 신장, 비장 등 주요 기관에서 [89Zr]Zr-ch3F8의 흡수를 % ID/g(% 주사 용량/조직 그램)을 단위로 평가하였다.
표 3. 종양 및 주요 기관의 방사능 흡수
실시예 10
[89Zr]Zr-ch3F8을 여러 PDX 모델의 이미징에 사용하였다. [89Zr]Zr-ch3F8을 정맥 주사하였다. 주사 후 72시간에 이미징을 수집하였다. 도 8은 6개의 동물 모델에서 이미징된 [89Zr]Zr-ch3F8의 대표적인 이미징을 도시한다. 표 4에는 ELISA로 측정된 종양 조직에서의 HER3 발현 수준 및 주사 후 72시간 동안 주요 기관 및 종양 조직에서의 방사능 흡수가 나열되어 있다. 테스트된 PDX 모델 모두에서 어느 정도의 종양 흡수가 있었다.
표 4. 종양 조직에서의 HER3 발현 수준(ng/mg) 및 주요 기관 및 종양 조직에서의 방사능 흡수(% ID/g)
실시예 11
ch3F8-MMAE는 ch3F8과 유사한 결합 친화도를 유지한다. SP2/0-HER3을 사용하여 FACS로 ch3F8-MMAE와 HER3의 결합 친화도를 측정하였다. 결과(도 9)는 ch3F8-MMAE가 SP2/0-HER3에 대해 ch3F8과 동일한 결합 친화도를 갖는 반면, HER3 음성 SP2/0에는 거의 결합하지 않음을 보여준다.
실시예 12
ch3F8-MMAE의 세포 독성. ATPlite로 여러 세포주에서 ch3F8-MMAE의 세포 독성을 측정하였다. 세포를 5일 동안 상이한 농도의 ch3F8-MMAE로 처리하였다. ATPlite 로 ch3F8-MMAE의 세포 독성을 측정하였다. 데이터(도 10)는 ch3F8-MMAE이 HER3(+) 세포7901, HT-29, MCF-7, N87, MDA-MB-453, SK-BR-3, SP2/0-HER3을 사멸하는 측면에서 매우 강한 세포 독성을 가지고 있으나, HER3(-) 세포 SP2/0-WT에는 거의 영향을 미치지 않음을 보여준다. 표 5에는 도 10에 도시된 바와 같이 각 종양 세포를 사멸하는 세포 독성 IC50이 나열되었다. GraphPad Prism 6.0으로 데이터를 분석하였다.
표 5. 다양한 세포주에 대한 ch3F8-MMAE의 IC50.
실시예 13
ch3F8-MMAE는 위 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제한다. ch3F8-MMAE을 3주 동안 주당 1회씩 3 mg/kg으로 정맥내 투여하고, 3~4일마다 종양 억제 효과를 측정하였으며, 마지막 투여 후 10일 동안 측정을 지속하였다. 항체 3F8은 비히클(vehicle) 대조군으로 식염수를 사용하여 병행되었다. 결과는 도 11에 나타내었다.
실시예 14
인간화 3F8(hu3F8)과 키메라 3F8의 결합 친화도. Biacore로 인간화 3F8의 세 가지 클론 및 키메라 3F8의 결합 동역학을 측정하였다. 세 가지 인간화 3F8 클론(클론 1, 클론 2 및 클론 3)은 상이한 중쇄를 갖지만 동알한 중쇄 CDR 및 동일한 경쇄를 공유한다. 하기에 나열된 것은 세 가지 인간화 3F8 클론의 중쇄, 경쇄의 아미노산 서열 및 이들의 코딩 DNA 서열이다. 달리 명시하지 않는 한, 클론 3은 하기 실시예에서 hu3F8로 사용된다.
표 6에 나열된 모든 데이터는 모두 Biacore T200 평가 소프트웨어 버전 3.1을 사용하여 처리되었다.
표 6. 인간화 3F8(hu3F8) 및 키메라 3F8의 결합 친화도
실시예 15
hu3F8의 세 가지 클론을 pH 3.5에서 0, 2, 4 및 6시간 동안 인큐베이션한 후, ELISA 측정을 수행하여 결합 친화도를 측정하였다. 결과(도 12A)는 산 처리가 결합 친화도에 거의 영향을 미치지 않음을 보여준다.
pH 3.5에서 0, 2, 4 및 6시간 동안 인큐베이션한 후 hu3F8의 세 가지 클론의 EC50. EC50은 ELISA로 측정하였다. 결과(표 7)는 산 처리가 결합 친화도에 거의 영향을 미치지 않음을 보여준다.
표 7. pH 3.5에서 0, 2, 4 및 6시간 동안 인큐베이션한 후 hu3F8의 세 가지 클론의 EC50
hu3F8의 세 가지 클론을 40℃에서 상이한 일수로 인큐베이션한 후, ELISA 측정을 수행하여 결합 친화도를 측정하였다. 키메라 항체를 병행 측정하였다. 결과는 도 12B에 나타내었다.
40℃에서 상이한 일수로 인큐베이션한 후 hu3F8의 세 가지 클론의 EC50. 인간화 3F8 항체의 3개 클론을 생리식염수에서 40℃에서 7일 또는 14일 동안 인큐베이션하고, 상기 열 스트레스 테스트 후 결합 친화도를 ELISA로 측정하였다. 키메라 3F8을 병행 측정하였다. 결과(표 8)는 산 처리가 결합 친화도에 거의 영향을 미치지 않음을 보여준다.
표 8. 40℃에서 상이한 일수로 인큐베이션한 후 hu3F8의 세 가지 클론의 EC50
hu3F8의 세 가지 클론을 3 또는 5주기 동안 동결 및 해동시킨 후, ELISA 측정을 수행하여 결합 친화도를 측정하였다. 키메라 항체를 병행 측정하였다. 결과(도 12C)는 반복된 동결-해동이 결합 친화도에 거의 영향을 미치지 않음을 보여준다.
표 9는 또한 여러 회 동결-해동 스트레스 테스트 후 hu3F8의 세 가지 클론의 EC50을 나타내었다.
표 9. 여러 회 동결-해동 스트레스 테스트 후 hu3F8의 세 가지 클론의 EC50
종합해 보면, 이들 데이터는 hu3F8이 열, 산 및 반복된 자유 해동 스트레스 테스트 후에도 결합 친화도를 유지함을 보여주며, 이는 hu3F8이 양호한 개발 가능성(developability profile)을 가짐을 나타낸다.
실시예 16
스트레스 테스트 후 hu3F8의 세 가지 클론 및 그 대응물(4℃에서 보관)에 대한 응집성 평가. 산 처리, 반복된 동결-해동 및 40℃ 인큐베이션 후 세 가지 hu3F8 항체의 응집성을 SEC-HPLC로 측정하고, 4℃에 보관된 각 항체와 비교하였다. 결과를 표 10에 나타내었다. 모든 클론은 스트레스 테스트 후 95% 이상의 단량체를 유지했는데, 이는 응집 경향이 거의 없음을 나타낸다.
표 10. 스트레스 테스트 후 hu3F8의 세 가지 클론의 응집성 평가 결과
실시예 17
hu3F8의 PTM(변역 후 변형) 분석. P1: hu3F8은 스트레스가 없었고; P2: hu3F8은 40℃에서 2주 동안 스트레스를 받았다. 스트레스가 없거나 40℃에서 2주 동안 스트레스를 받은 hu3F8을 트립신으로 소화한 후, 질량 분석법으로 번역 후 변형에 대해 분석하였다. 데이터(표 11)는 HC:372-393에서 탈아미드화 작용이 약간 증가되었음을 보여준다. 전반적으로 스트레스 전후의 PTM에는 큰 차이가 없어 개발 가능성이 양호함을 나타낸다.
표 11. hu3F8의 PTM 분석 결과
실시예 18
hu3F8-MMAE는 용량 의존적으로 위 PDX 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제한다. hu3F8-MMAE를 4주 동안 주당 1회씩 1, 3 mg/kg으로 정맥내 투여하였다. U3-1402를 10mg/kg으로 병행하였다. 3~4일마다 종양 크기 및 체중을 모니터링하였다. 데이터는 hu3F8-MMAE가 용량 의존적으로 종양 성장을 억제하고(도 13A), 체중에 거의 영향을 미치지 않음을 보여준다(도 13B). 종양 억제 측면에서, 3mg/kg의 hu3F8-MMAE와 10mg/kg의 U3-1402의 작용은 동일하였다.
실시예 19
hu3F8-MMAE의 10 mg/kg 단일 주사는 위 PDX 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제한다. 항-HER3 항체 patritumab을 통해 HER3을 표적으로 삼는 ADC인 U3-1402를 병행하였다. hu3F8-MMAE 및 U3-1402는 모두 10mg/kg으로 1회 투여하고, 3~4일마다 종양 억제 작용을 모니터링하였다. 데이터(도 14)는 GAS078 모델에서, 10mg/kg의 hu3F8-MMAE가 종양 성장 억제 측면에서 10mg/kg의 U3-1402보다 더 효과적임을 보여준다.
실시예 20
6 mg/kg의 hu3F8-MMAE는 위 PDX 모델 GAS078에서 종양 성장을 억제한다. U3-1402는 항-HER3 항체patritumab를 통해 HER3을 표적으로 삼는 ADC이다. hu3F8-MMAE를 3주 동안 주당 1회씩 6 mg/kg으로 정맥내 투여하였다. U3-1402의 항-HER3 항체 부분인 patritumab 은 U3-1402와 병행하여 3주동안 주당 1회씩 10mg/kg으로 투여되었다. 마지막 투여 후 16일인 37일까지 관찰을 계속하였다. 3~4일마다 종양 크기 및 체중을 모니터링하였다. 데이터(도 15)는 약물 투여 동안 hu3F8-MMAE가 종양 성장을 억제하는 효능은 U3-1402와 동일하지만 더 오래 지속됨을 보여준다.
실시예 21
hu3F8-MMAE는 결장 직장 PDX 모델 CS226에서 종양 성장을 억제한다. 세 그룹의 동물을 각각 3주 동안 비히클, 10mg/kg의 U3-1402 및 3mg/kg의 hu3F8-MMAE로 치료하였다. 3일마다 종양 억제 작용을 측정하였다. 비히클 처리군과 비교하여, U3-1402와 hu3F8-MMAE는 모두 종양 성장을 유의하게 억제하였다. 이 밖에, 3mg/kg의 hu3F8은 10mg/kg의 U3-1402보다 열등하지 않았다(도 16).
본 명세서에서는 합리적인 안전 마진(safety margin)을 가지고 시험관 내 및 생체 내에서 종양 세포 성장을 효과적으로 억제하는 새로운 항-HER3 항체 또는 ADC 분자를 보고하였다. HER3 항체, 3F8은 인간 HER3를 과발현하는 SP2/0 세포로 면역화된 마우스 하이브리도마로부터 감별되었다. 3F8은 나노몰 이하의 결합 친화도로 인간 및 원숭이 HER3을 인식하고, 다른 ERBB 계열 구성원에 대해 높은 선택성을 갖는다. 이 밖에, 이상적인 ADC 약물에 필요한 것으로 간주되는 특성인 다양한 수준의 HER3를 가진 세포에 의해 빠르고 효율적으로 흡수된다. PET 이미징 연구에서는 [89Zr]Zr-3F8이 PDX 모델의 종양에 유의하게 축적된 것으로 나타났는데, 이는 3F8이 세포 독성을 보유한 채로 종양 세포에 진입하는 고효율적인 운반체(vehicle)일 수 있음을 나타낸다. 따라서, MMAE-접합 3F8을 생성하고, 종양 억제 효능에 대해 테스트하였다. 시험관 내 평가에서, HER3을 발현하는 종양 세포를 선택적으로 사멸하는 3F8-MMAE의 IC50은 약 1nM(MMAE에 대한 민감도에 의존함)이고, 아울러 HER3 음성 세포에 영향을 미치지 않도록 유지되었다. 효능 연구는 3F8-MMAE가 용량 의존적으로 종양 성장을 억제하고, 체중에 심각한 영향을 미치지 않으며, 관찰 가능한 혈액학적 독성도 없음을 보여준다. 인간화 버전인 3F8, 즉 hu3F8, 및 hu3F8-MMAE는 PDX 모델에서 상기 결합 친화도, 선택성 및 종양 억제 특징을 유지하며, U3-1402와 등가이다. hu3F8은 반복된 동결-해동 처리, 산 배양 및 40℃에 보관된 스트레스 테스트에서 결합 친화도, 응집성 및 번역 후 변형이 거의 변하지 않아 양호한 개발 가능성을 갖는다. 종합해 보면, 3F8 또는 이의 ADC hu3F8-MMAE는 유망한 종양 치료 방식으로, 점점 증가하는 약물 내성 문제와 충족되지 않은 의료 요구에 대한 대안을 제공할 수 있다.
일부 아미노산 서열 및 핵산 서열은 아래에 나열되어 있다. 항체 서열 번호는 Kabat를 기반으로 한다.
쥐 3F8 경쇄 가변 영역:
뉴클레오티드 서열:
ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGCACTTTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAATATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAGGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTGATACGCTTCCTCCCACGTTCGGTGCTGGGACCAAGCTGGAGCTGAAA (SEQ ID NO: 1)
아미노산 서열:
MMSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTFKLLIYYTSILHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGDTLPPTFGAGTKLELK (SEQ ID NO: 2)
쥐 3F8 중쇄 가변 영역:
뉴클레오티드 서열:
ATGAAAGTGTTGAGTCTGTTGTACCTGTTGACAGCCATTCCTGGTATCCTGTCTGATGTACAACTTCAGGAGTCAGGACCTGGCCTCGTGAAACCTTCTCAGTCTCTGTCTCTCACCTGCTCTGTCACTGGCTACTCCATCACCAGTGCTTATTACTGGAACTGGATCCGGCAGTTTCCAGGAGACAAACTGGAATGGATGGGCTACATAAGCTACGACGGTCGCAATAATTTCAACCCATCTCTCAAAAATCGAATCTCCATCACTCGTGACACATCTAAGAACCAGTTTTTCCTGAAGTTGAATTCTGTGACTTCTGGGGACACAGCTACATATTACTGTGCAAGAGATGGGGATTACGACTACTTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA (SEQ ID NO: 11)
아미노산 서열:
MKVLSLLYLLTAIPGILSDVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITSAYYWNWIRQFPGDKLEWMGYISYDGRNNFNPSLKNRISITRDTSKNQFFLKLNSVTSGDTATYYCARDGDYDYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ ID NO: 12)
인간화 3F8 중쇄 아미노산 서열: (클론 3)
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGYSITSAYYWNWIRQPFGKGLEWMGYISYDGRNNFNPSLKNRVSISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTATYYCARDGDYDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 21)
인간화 3F8 중쇄 뉴클레오티드 서열: (클론 3)
ATGGGCTGGTCATGCATTATTCTGTTTCTGGTCGCAACTGCTACAGGCGTGCATAGTCAAGTGCAGCTGCAGGAGAGCGGACCTGGCCTCGTGAAGCCAAGCGAGACACTGTCTCTGACATGTACCGTGTCCGGCTACAGCATCACCTCCGCCTACTACTGGAACTGGATCCGGCAGCCTTTTGGCAAGGGCCTGGAATGGATGGGCTACATCAGCTACGACGGCAGAAACAACTTCAACCCCAGCCTGAAAAATAGAGTGTCCATCTCTCGGGACACCAGCAAGAACCAGTTCAGCCTGAAGCTGAGCAGCGTGACAGCCGCTGATACCGCCACATACTACTGCGCCAGAGACGGAGATTATGACTACTTCGACTACTGGGGCCAGGGCACCACCGTCACCGTGTCTAGCGCCAGCACCAAGGGCCCTTCCGTGTTTCCACTGGCCCCCTCCTCTAAATCCACATCTGGCGGCACCGCCGCCCTGGGCTGTCTGGTGAAGGACTACTTCCCAGAGCCTGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACATCCGGCGTGCACACATTTCCAGCCGTGCTGCAGAGCTCCGGCCTGTACAGCCTGTCTAGCGTGGTGACAGTGCCCTCCTCTAGCCTGGGCACACAGACCTATATCTGCAACGTGAATCACAAGCCAAGCAATACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCCAAGTCCTGTGATAAGACACACACCTGCCCCCCTTGTCCTGCTCCCGAGCTGCTGGGCGGCCCTAGCGTGTTCCTGTTTCCACCCAAGCCTAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACACCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCTCACGAGGATCCTGAGGTGAAGTTCAACTGGTATGTGGATGGCGTGGAGGTGCACAATGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTACAACTCTACATATAGGGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTATAAGTGCAAGGTGTCCAATAAGGCCCTGCCCGCCCCCATCGAGAAGACAATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTCGGGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCTCCATCCAGAGACGAGCTGACAAAGAACCAGGTGTCTCTGACATGTCTGGTGAAGGGCTTCTATCCTAGCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAATGGCCAGCCAGAGAACAATTACAAGACCACACCCCCTGTGCTGGACTCCGATGGCTCCTTCTTTCTGTATTCCAAGCTGACCGTGGATAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGTTCCGTGATGCACGAAGCCCTGCATAATCACTATACTCAGAAATCCCTGTCCCTGTCACCTGGAAAGTGATAA (SEQ ID NO: 22)
인간화 3F8 경쇄 아미노산 서열: (클론 1~3)
MGWSCIILFLVATATGVHSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSILHSGVPSRFSGSGSGTDYTFTISSLQPEDIATYFCQQGDTLPPTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 23)
인간화 3F8 경쇄 뉴클레오티드 서열: (클론 1~3)
ATGGGCTGGTCATGTATTATTCTGTTTCTGGTCGCAACTGCTACAGGGGTCCATAGTGATATTCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGAGCGCCAGCGTGGGCGATAGAGTGACCATCACATGTCGGGCCTCTCAGGACATCAGCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAAAAGCCCGGCAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACTACACCAGCATCCTGCACAGCGGAGTGCCATCTAGATTCAGCGGCTCTGGCAGCGGCACCGACTACACATTTACCATCTCCTCCCTCCAGCCTGAGGACATCGCTACATACTTCTGCCAGCAGGGCGACACCCTGCCTCCTACCTTCGGCGGCGGAACAAAGCTGGAAATCAAGAGGACAGTGGCCGCCCCAAGCGTGTTCATCTTTCCCCCTTCCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGGGAGGCCAAGGTCCAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTGCAGTCTGGCAATAGCCAGGAGTCCGTGACCGAGCAGGACTCTAAGGATAGCACATATTCCCTGTCTAGCACCCTGACACTGAGCAAGGCCGATTACGAGAAGCACAAGGTGTATGCCTGTGAAGTCACCCATCAGGGGCTGTCATCACCCGTCACTAAGTCATTCAATCGCGGAGAATGCTGATAA (SEQ ID NO: 24)
인간화 3F8 중쇄 아미노산 서열: (클론 1)
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGYSITSAYYWNWIRQPPGKGLEWIGYISYDGRNNFNPSLKNRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDGDYDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 25)
인간화 3F8 중쇄 뉴클레오티드 서열: (클론 1)
ATGGGCTGGTCATGCATTATTCTGTTTCTGGTCGCAACTGCTACAGGCGTGCATAGTCAAGTGCAGCTGCAGGAGAGCGGCCCTGGACTGGTGAAGCCTAGCGAGACACTGTCTCTCACCTGTACCGTGTCTGGCTACAGCATCACCTCCGCCTACTACTGGAACTGGATCCGGCAGCCTCCAGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCAGCTACGACGGCAGAAACAACTTCAACCCCAGCCTGAAAAATAGAGTGACCATCTCTGTGGACACCAGCAAGAACCAGTTTAGCCTGAAGCTGAGCAGCGTGACAGCCGCTGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGACGGAGATTATGACTACTTCGACTACTGGGGCCAGGGCACCACAGTCACAGTGTCCAGCGCCAGCACCAAGGGCCCTTCCGTGTTTCCACTGGCCCCCTCCTCTAAATCCACATCTGGCGGCACCGCCGCCCTGGGCTGTCTGGTGAAGGACTACTTCCCAGAGCCTGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACATCCGGCGTGCACACATTTCCAGCCGTGCTGCAGAGCTCCGGCCTGTACAGCCTGTCTAGCGTGGTGACAGTGCCCTCCTCTAGCCTGGGCACACAGACCTATATCTGCAACGTGAATCACAAGCCAAGCAATACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCCAAGTCCTGTGATAAGACACACACCTGCCCCCCTTGTCCTGCTCCCGAGCTGCTGGGCGGCCCTAGCGTGTTCCTGTTTCCACCCAAGCCTAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACACCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCTCACGAGGATCCTGAGGTGAAGTTCAACTGGTATGTGGATGGCGTGGAGGTGCACAATGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTACAACTCTACATATAGGGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTATAAGTGCAAGGTGTCCAATAAGGCCCTGCCCGCCCCCATCGAGAAGACAATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTCGGGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCTCCATCCAGAGACGAGCTGACAAAGAACCAGGTGTCTCTGACATGTCTGGTGAAGGGCTTCTATCCTAGCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAATGGCCAGCCAGAGAACAATTACAAGACCACACCCCCTGTGCTGGACTCCGATGGCTCCTTCTTTCTGTATTCCAAGCTGACCGTGGATAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGTTCCGTGATGCACGAAGCCCTGCATAATCACTATACTCAGAAATCCCTGTCCCTGTCACCTGGAAAGTGATAA (SEQ ID NO: 26)
인간화 3F8 중쇄 아미노산 서열: (클론 2)
MGWSCIILFLVATATGVHSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGYSITSAYYWNWIRQPFGKGLEWMGYISYDGRNNFNPSLKNRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDGDYDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 27)
인간화 3F8 중쇄 뉴클레오티드 서열: (클론 2)
ATGGGCTGGTCATGCATTATTCTGTTTCTGGTCGCAACTGCTACAGGCGTGCATAGTCAAGTGCAGCTGCAGGAGAGCGGCCCCGGCCTGGTGAAGCCTAGCGAGACACTGAGCCTCACCTGTACCGTGTCCGGCTACAGCATCACCAGCGCCTACTACTGGAACTGGATCCGGCAGCCTTTTGGCAAGGGCCTGGAATGGATGGGCTACATCTCCTACGACGGCAGAAACAACTTCAACCCATCTCTGAAAAATAGAGTGACCATCAGCCGGGACACAAGCAAGAACCAGTTCAGCCTGAAGCTGTCTAGCGTGACAGCCGCTGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGACGGAGATTATGACTACTTCGACTACTGGGGACAGGGCACCACCGTGACAGTCAGCTCTGCCAGCACCAAGGGCCCTTCCGTGTTTCCACTGGCCCCCTCCTCTAAATCCACATCTGGCGGCACCGCCGCCCTGGGCTGTCTGGTGAAGGACTACTTCCCAGAGCCTGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACATCCGGCGTGCACACATTTCCAGCCGTGCTGCAGAGCTCCGGCCTGTACAGCCTGTCTAGCGTGGTGACAGTGCCCTCCTCTAGCCTGGGCACACAGACCTATATCTGCAACGTGAATCACAAGCCAAGCAATACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCCAAGTCCTGTGATAAGACACACACCTGCCCCCCTTGTCCTGCTCCCGAGCTGCTGGGCGGCCCTAGCGTGTTCCTGTTTCCACCCAAGCCTAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACACCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCTCACGAGGATCCTGAGGTGAAGTTCAACTGGTATGTGGATGGCGTGGAGGTGCACAATGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTACAACTCTACATATAGGGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTATAAGTGCAAGGTGTCCAATAAGGCCCTGCCCGCCCCCATCGAGAAGACAATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTCGGGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCTCCATCCAGAGACGAGCTGACAAAGAACCAGGTGTCTCTGACATGTCTGGTGAAGGGCTTCTATCCTAGCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAATGGCCAGCCAGAGAACAATTACAAGACCACACCCCCTGTGCTGGACTCCGATGGCTCCTTCTTTCTGTATTCCAAGCTGACCGTGGATAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGTTCCGTGATGCACGAAGCCCTGCATAATCACTATACTCAGAAATCCCTGTCCCTGTCACCTGGAAAGTGATAA (SEQ ID NO: 28)
참조문헌:
Brian M. Zeglis and Jason S. Lewis. The bioconjugation and radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled antibodies. J. Vis. Exp.　2015; (96): 52521.
Kuramochi T et al. Humanization and simultaneous optimization of monoclonal antibody. Methods Mol Biol. 2014; 1060:123-37.
SEQUENCE LISTING <110> BEIJING SINOTAU BIO-PHARMACEUTICALS TECHNOLOGY CO., LTD. <120> ANTI-HER3 ANTIBODY, ANTIBODY DRUG CONJUGATE CONTAINING THE SAME, AND USE THEREOF <130> XTBHER3-PCT2201 <160> 28 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 381 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide acid sequence of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 1 atgatgtcct ctgctcagtt ccttggtctc ctgttgctct gttttcaagg taccagatgt 60 gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc 120 atcagttgca gggcaagtca ggacattagc aattatttaa actggtatca gcagaaacca 180 gatggcactt ttaaactcct gatctactac acatcaatat tacactcagg agtcccatca 240 aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctca ccattagcaa cctggagcaa 300 gaggatattg ccacttactt ttgccaacag ggtgatacgc ttcctcccac gttcggtgct 360 gggaccaagc tggagctgaa a 381 <210> 2 <211> 127 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 2 Met Met Ser Ser Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu 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<211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-L1 of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 5 Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 6 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LFR2 of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 6 Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Phe Lys Leu Leu Ile Tyr 1 5 10 15 <210> 7 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-L2 of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 7 Tyr Thr Ser Ile Leu His Ser 1 5 <210> 8 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LFR3 of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 8 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser 1 5 10 15 Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys 20 25 30 <210> 9 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-L3 of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 9 Gln Gln Gly Asp Thr Leu Pro Pro Thr 1 5 <210> 10 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> LFR4 of Variable region of murine 3F8 light chain <400> 10 Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg 1 5 10 <210> 11 <211> 408 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 11 atgaaagtgt tgagtctgtt gtacctgttg acagccattc ctggtatcct gtctgatgta 60 caacttcagg agtcaggacc tggcctcgtg aaaccttctc agtctctgtc tctcacctgc 120 tctgtcactg gctactccat caccagtgct tattactgga actggatccg gcagtttcca 180 ggagacaaac tggaatggat gggctacata agctacgacg gtcgcaataa tttcaaccca 240 tctctcaaaa atcgaatctc catcactcgt gacacatcta agaaccagtt tttcctgaag 300 ttgaattctg tgacttctgg ggacacagct acatattact gtgcaagaga tggggattac 360 gactactttg actactgggg ccaaggcacc actctcacag tctcctca 408 <210> 12 <211> 136 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 12 Met Lys Val Leu Ser Leu Leu Tyr Leu Leu Thr Ala Ile Pro Gly Ile 1 5 10 15 Leu Ser Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro 20 25 30 Ser Gln Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr 35 40 45 Ser Ala Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asp Lys Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Arg Asn Asn Phe Asn Pro 65 70 75 80 Ser Leu Lys Asn Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln 85 90 95 Phe Phe Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ser Gly Asp Thr Ala Thr Tyr 100 105 110 Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Asp Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 115 120 125 Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 130 135 <210> 13 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Leader of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 13 Met Lys Val Leu Ser Leu Leu Tyr Leu Leu Thr Ala Ile Pro Gly Ile 1 5 10 15 Leu Ser <210> 14 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HFR1 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 14 Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr 20 25 30 <210> 15 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-H1 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 15 Ser Ala Tyr Tyr Trp Asn 1 5 <210> 16 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HFR2 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 16 Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asp Lys Leu Glu Trp Met Gly 1 5 10 <210> 17 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-H2 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 17 Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Arg Asn Asn Phe Asn Pro Ser Leu Lys Asn 1 5 10 15 <210> 18 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HFR3 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 18 Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe Leu Lys 1 5 10 15 Leu Asn Ser Val Thr Ser Gly Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 19 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR-H3 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 19 Asp Gly Asp Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 <210> 20 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HFR4 of Variable region of murine 3F8 heavy chain <400> 20 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 21 <211> 467 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of humanized 3F8-heavy chain of Clone 3 <400> 21 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile 35 40 45 Thr Ser Ala Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Phe Gly Lys Gly 50 55 60 Leu Glu Trp Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Arg Asn Asn Phe Asn 65 70 75 80 Pro Ser Leu Lys Asn Arg Val Ser Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn 85 90 95 Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Asp Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 22 <211> 1407 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide acid sequence of humanized 3F8-heavy chain of Clone 3 <400> 22 atgggctggt catgcattat tctgtttctg gtcgcaactg ctacaggcgt gcatagtcaa 60 gtgcagctgc aggagagcgg acctggcctc gtgaagccaa gcgagacact gtctctgaca 120 tgtaccgtgt ccggctacag catcacctcc gcctactact ggaactggat ccggcagcct 180 tttggcaagg gcctggaatg gatgggctac atcagctacg acggcagaaa caacttcaac 240 cccagcctga aaaatagagt gtccatctct cgggacacca gcaagaacca gttcagcctg 300 aagctgagca gcgtgacagc cgctgatacc gccacatact actgcgccag agacggagat 360 tatgactact tcgactactg gggccagggc accaccgtca ccgtgtctag cgccagcacc 420 aagggccctt ccgtgtttcc actggccccc tcctctaaat ccacatctgg cggcaccgcc 480 gccctgggct gtctggtgaa ggactacttc ccagagcctg tgacagtgtc ctggaactct 540 ggcgccctga catccggcgt gcacacattt ccagccgtgc tgcagagctc cggcctgtac 600 agcctgtcta gcgtggtgac agtgccctcc tctagcctgg gcacacagac ctatatctgc 660 aacgtgaatc acaagccaag caataccaag gtggacaaga aggtggagcc caagtcctgt 720 gataagacac acacctgccc cccttgtcct gctcccgagc tgctgggcgg ccctagcgtg 780 ttcctgtttc cacccaagcc taaggacacc ctgatgatct cccggacacc cgaggtgacc 840 tgcgtggtgg tggacgtgtc tcacgaggat cctgaggtga agttcaactg gtatgtggat 900 ggcgtggagg tgcacaatgc caagaccaag cccagagagg agcagtacaa ctctacatat 960 agggtggtga gcgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtataag 1020 tgcaaggtgt ccaataaggc cctgcccgcc cccatcgaga agacaatcag caaggccaag 1080 ggccagcctc gggagccaca ggtgtacacc ctgcctccat ccagagacga gctgacaaag 1140 aaccaggtgt ctctgacatg tctggtgaag ggcttctatc ctagcgatat cgccgtggag 1200 tgggagtcca atggccagcc agagaacaat tacaagacca caccccctgt gctggactcc 1260 gatggctcct tctttctgta ttccaagctg accgtggata agtctcggtg gcagcagggc 1320 aacgtgttca gctgttccgt gatgcacgaa gccctgcata atcactatac tcagaaatcc 1380 ctgtccctgt cacctggaaa gtgataa 1407 <210> 23 <211> 233 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of humanized 3F8-light chain of Clones 1-3 <400> 23 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala 20 25 30 Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile 35 40 45 Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys 50 55 60 Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Ile Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg 65 70 75 80 Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser 85 90 95 Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asp Thr 100 105 110 Leu Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr 115 120 125 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 130 135 140 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 145 150 155 160 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 165 170 175 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 180 185 190 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 195 200 205 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 210 215 220 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 24 <211> 705 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide acid sequence of humanized 3F8-light chain of Clones 1-3 <400> 24 atgggctggt catgtattat tctgtttctg gtcgcaactg ctacaggggt ccatagtgat 60 attcagatga cccagagccc cagcagcctg agcgccagcg tgggcgatag agtgaccatc 120 acatgtcggg cctctcagga catcagcaac tacctgaact ggtatcagca aaagcccggc 180 aaagccccta agctgctgat ctactacacc agcatcctgc acagcggagt gccatctaga 240 ttcagcggct ctggcagcgg caccgactac acatttacca tctcctccct ccagcctgag 300 gacatcgcta catacttctg ccagcagggc gacaccctgc ctcctacctt cggcggcgga 360 acaaagctgg aaatcaagag gacagtggcc gccccaagcg tgttcatctt tcccccttcc 420 gacgagcagc tgaagtctgg caccgccagc gtggtgtgcc tgctgaacaa cttctaccct 480 cgggaggcca aggtccagtg gaaggtggat aacgccctgc agtctggcaa tagccaggag 540 tccgtgaccg agcaggactc taaggatagc acatattccc tgtctagcac cctgacactg 600 agcaaggccg attacgagaa gcacaaggtg tatgcctgtg aagtcaccca tcaggggctg 660 tcatcacccg tcactaagtc attcaatcgc ggagaatgct gataa 705 <210> 25 <211> 467 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of humanized 3F8-heavy chain of Clone 1 <400> 25 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile 35 40 45 Thr Ser Ala Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly 50 55 60 Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Arg Asn Asn Phe Asn 65 70 75 80 Pro Ser Leu Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn 85 90 95 Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Asp Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 26 <211> 1407 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide acid sequence of humanized 3F8-heavy chain of Clone 1 <400> 26 atgggctggt catgcattat tctgtttctg gtcgcaactg ctacaggcgt gcatagtcaa 60 gtgcagctgc aggagagcgg ccctggactg gtgaagccta gcgagacact gtctctcacc 120 tgtaccgtgt ctggctacag catcacctcc gcctactact ggaactggat ccggcagcct 180 ccaggcaagg gcctggaatg gatcggctac atcagctacg acggcagaaa caacttcaac 240 cccagcctga aaaatagagt gaccatctct gtggacacca gcaagaacca gtttagcctg 300 aagctgagca gcgtgacagc cgctgatacc gccgtgtact actgcgccag agacggagat 360 tatgactact tcgactactg gggccagggc accacagtca cagtgtccag cgccagcacc 420 aagggccctt ccgtgtttcc actggccccc tcctctaaat ccacatctgg cggcaccgcc 480 gccctgggct gtctggtgaa ggactacttc ccagagcctg tgacagtgtc ctggaactct 540 ggcgccctga catccggcgt gcacacattt ccagccgtgc tgcagagctc cggcctgtac 600 agcctgtcta gcgtggtgac agtgccctcc tctagcctgg gcacacagac ctatatctgc 660 aacgtgaatc acaagccaag caataccaag gtggacaaga aggtggagcc caagtcctgt 720 gataagacac acacctgccc cccttgtcct gctcccgagc tgctgggcgg ccctagcgtg 780 ttcctgtttc cacccaagcc taaggacacc ctgatgatct cccggacacc cgaggtgacc 840 tgcgtggtgg tggacgtgtc tcacgaggat cctgaggtga agttcaactg gtatgtggat 900 ggcgtggagg tgcacaatgc caagaccaag cccagagagg agcagtacaa ctctacatat 960 agggtggtga gcgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtataag 1020 tgcaaggtgt ccaataaggc cctgcccgcc cccatcgaga agacaatcag caaggccaag 1080 ggccagcctc gggagccaca ggtgtacacc ctgcctccat ccagagacga gctgacaaag 1140 aaccaggtgt ctctgacatg tctggtgaag ggcttctatc ctagcgatat cgccgtggag 1200 tgggagtcca atggccagcc agagaacaat tacaagacca caccccctgt gctggactcc 1260 gatggctcct tctttctgta ttccaagctg accgtggata agtctcggtg gcagcagggc 1320 aacgtgttca gctgttccgt gatgcacgaa gccctgcata atcactatac tcagaaatcc 1380 ctgtccctgt cacctggaaa gtgataa 1407 <210> 27 <211> 467 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of humanized 3F8-heavy chain of Clone 2 <400> 27 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile 35 40 45 Thr Ser Ala Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Phe Gly Lys Gly 50 55 60 Leu Glu Trp Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Arg Asn Asn Phe Asn 65 70 75 80 Pro Ser Leu Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn 85 90 95 Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Asp Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 28 <211> 1407 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide acid sequence of humanized 3F8-heavy chain of Clone 2 <400> 28 atgggctggt catgcattat tctgtttctg gtcgcaactg ctacaggcgt gcatagtcaa 60 gtgcagctgc aggagagcgg ccccggcctg gtgaagccta gcgagacact gagcctcacc 120 tgtaccgtgt ccggctacag catcaccagc gcctactact ggaactggat ccggcagcct 180 tttggcaagg gcctggaatg gatgggctac atctcctacg acggcagaaa caacttcaac 240 ccatctctga aaaatagagt gaccatcagc cgggacacaa gcaagaacca gttcagcctg 300 aagctgtcta gcgtgacagc cgctgatacc gccgtgtact actgcgccag agacggagat 360 tatgactact tcgactactg gggacagggc accaccgtga cagtcagctc tgccagcacc 420 aagggccctt ccgtgtttcc actggccccc tcctctaaat ccacatctgg cggcaccgcc 480 gccctgggct gtctggtgaa ggactacttc ccagagcctg tgacagtgtc ctggaactct 540 ggcgccctga catccggcgt gcacacattt ccagccgtgc tgcagagctc cggcctgtac 600 agcctgtcta gcgtggtgac agtgccctcc tctagcctgg gcacacagac ctatatctgc 660 aacgtgaatc acaagccaag caataccaag gtggacaaga aggtggagcc caagtcctgt 720 gataagacac acacctgccc cccttgtcct gctcccgagc tgctgggcgg ccctagcgtg 780 ttcctgtttc cacccaagcc taaggacacc ctgatgatct cccggacacc cgaggtgacc 840 tgcgtggtgg tggacgtgtc tcacgaggat cctgaggtga agttcaactg gtatgtggat 900 ggcgtggagg tgcacaatgc caagaccaag cccagagagg agcagtacaa ctctacatat 960 agggtggtga gcgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtataag 1020 tgcaaggtgt ccaataaggc cctgcccgcc cccatcgaga agacaatcag caaggccaag 1080 ggccagcctc gggagccaca ggtgtacacc ctgcctccat ccagagacga gctgacaaag 1140 aaccaggtgt ctctgacatg tctggtgaag ggcttctatc ctagcgatat cgccgtggag 1200 tgggagtcca atggccagcc agagaacaat tacaagacca caccccctgt gctggactcc 1260 gatggctcct tctttctgta ttccaagctg accgtggata agtctcggtg gcagcagggc 1320 aacgtgttca gctgttccgt gatgcacgaa gccctgcata atcactatac tcagaaatcc 1380 ctgtccctgt cacctggaaa gtgataa 1407

Claims (38)

  1. 중쇄 가변 영역(VH)을 포함하는 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서,
    상기 VH는,
    서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H2 및 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H3을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 VH는 서열번호 15로 구성된 CDR-H1, 서열번호 17로 구성된 CDR-H2 및 서열번호 19로 구성된 CDR-H3을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    경쇄 가변 영역(VL)을 더 포함하고, 상기 VL은,
    서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-L1, 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-L2 및 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-L3을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 VL은 서열번호 5로 구성된 CDR-L1, 서열번호 7로 구성된 CDR-L2 및 서열번호 9로 구성된 CDR-L3을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 VH는 서열번호 13의 리더 서열이 있거나 없는 서열번호 12의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 VL은 서열번호 3의 리더 서열이 있거나 없는 서열번호 2의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체는 마우스 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 또는 인간 항체인, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체의 중쇄는 IgG1 유형인, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체는 인간화 항체이고, 중쇄는 서열번호 21, 25 또는 27의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체는 인간화 항체이고, 경쇄는 서열번호 23의 아미노산 서열, 또는 이와 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 HER3은 인간 또는 원숭이 HER3인, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-HER3 항체는 NRG1에 의해 유도된 HER3의 인산화를 차단하는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    인간 또는 원숭이 HER3에 결합하는 상기 항-HER3 항체의 EC50은 1 nM 미만인, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-HER3 항체는 HER3에 결합한 후 내재화 활성을 갖는, 항-HER3 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  15. 분리된 핵산으로서,
    상기 분리된 핵산은 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편의 VH 및/또는 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편의 VL을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는, 분리된 핵산.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 분리된 핵산은 서열번호 1, 11, 22, 24, 26 및 28로부터 선택되는, 분리된 핵산.
  17. 벡터로서,
    상기 벡터는 제15항 또는 제16항에 따른 분리된 핵산을 포함하는, 벡터.
  18. 숙주 세포로서,
    상기 숙주 세포는 제15항 또는 제16항에 따른 분리된 핵산 또는 제17항에 따른 벡터를 포함하는, 숙주 세포.
  19. 숙주 세포로서,
    상기 숙주 세포는 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편을 발현하는, 숙주 세포.
  20. 항체 접합체로서,
    상기 항체 접합체는 화학적 모이어티에 접합된 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편을 포함하는, 항체 접합체.
  21. 제20항에 있어서,
    상기 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편은 링커를 통해 상기 화학적 모이어티에 접합되는, 항체 접합체.
  22. 제20항 또는 제21항에 있어서,
    상기 링커는 효소 절단이 가능한, 항체 접합체.
  23. 제20항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 링커는 Val-Cit 모이어티를 포함하는, 항체 접합체.
  24. 제20항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체 접합체는 항체-약물 접합체(ADC)인, 항체 접합체.
  25. 제20항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 화학적 모이어티는 방사성 동위원소, 화학요법제 또는 세포 독성제인, 항체 접합체.
  26. 제20항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 독성제는 독소인, 항체 접합체.
  27. 제20항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 독소는 아우리스타틴 E, 아우리스타틴 F, MMAE 및 MMAF로부터 선택되는, 항체 접합체.
  28. 약학적 조성물로서,
    상기 약학적 조성물은 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편, 또는 제20항 내지 제27항 중 어느 한 항에 따른 항체 접합체, 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약학적 조성물.
  29. 제28항에 있어서,
    상기 항체 접합체는 하나 이상의 다른 항암제를 더 포함하는, 약학적 조성물.
  30. 암 치료용 약물의 제조에 있어서 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편 또는 제20항 내지 제27항 중 어느 한 항에 따른 항체 접합체의 용도.
  31. 제30항에 있어서,
    상기 암은 HER3을 발현하는, 용도.
  32. 제30 항 또는 제31항에 있어서,
    상기 암은 위암 또는 결장직장암인, 용도.
  33. 암을 치료하기 위한 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편 또는 제20항 내지 제27항 중 어느 한 항에 따른 항체 접합체.
  34. 제33항에 있어서,
    상기 암은 HER3을 발현하는, 암을 치료하기 위한 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편 또는 항체 접합체.
  35. 제33항 또는 제34항에 있어서,
    상기 암은 위암 또는 결장직장암인, 암을 치료하기 위한 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편 또는 항체 접합체.
  36. 대상체의 암 치료 방법으로서,
    제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 항-HER3 항체 또는 항원 결합 단편, 제20항 내지 제27항 중 어느 한 항에 따른 항체 접합체 또는 제28항 또는 제29항에 따른 약학적 조성물의 치료 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  37. 제36항에 있어서,
    상기 암은 HER3을 발현하는, 방법.
  38. 제36항 또는 제37항에 있어서,
    상기 암은 위암 또는 결장직장암인, 방법.
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